Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells
Aim. The aim of this work was to express the human LIF gene in mammalian cells and to study the secretion
 of recombinant LIF into culture medium. Methods. Recombinant LIF was detected by Western blot analysis
 and immunoprecipitation in culture medium of CHO-K1, L-M (TK–
 )...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Вiopolymers and Cell |
|---|---|
| Datum: | 2011 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Englisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2011
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156336 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells / S.Yu. Rymar, T.A. Ruban, D.M. Irodov, V.A. Kordium // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 1. — С. 53-58. — Бібліогр.: 29 назв. — англ., рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862707544090214400 |
|---|---|
| author | Rymar, S.Yu. Ruban, T.A. Irodov, D.M. Kordium, V.A. |
| author_facet | Rymar, S.Yu. Ruban, T.A. Irodov, D.M. Kordium, V.A. |
| citation_txt | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells / S.Yu. Rymar, T.A. Ruban, D.M. Irodov, V.A. Kordium // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 1. — С. 53-58. — Бібліогр.: 29 назв. — англ., рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Вiopolymers and Cell |
| description | Aim. The aim of this work was to express the human LIF gene in mammalian cells and to study the secretion
of recombinant LIF into culture medium. Methods. Recombinant LIF was detected by Western blot analysis
and immunoprecipitation in culture medium of CHO-K1, L-M (TK–
) (ins+
), 293Ò cells, transfected with
recombinant plasmids containing human LIF gene. Results. The recombi- nant plasmids. containing human
gene LIF, were constructed. The cells of three (CHO-K1, L-M (TK–
) (ins+
), 293Ò) mammalian lines were
transfected with these plasmids. It was shown that the transfected mammalian cells secreted recombinant
human LIF which was characterized by variable degree of glycosylation including completely glycosylated
form (approximately 68 kD). Ñonclusions. The conditioned medium of developed cell lines can be used as a
sourñe of human recombinant LIF for different purposes, including purification of human recombinant LIF
and as an additional supplement for cell culturing.
Keywords: recombinant LIF, expression, secretion, transfection, cell lines.
Цель работы состояла в получении экспрессии гена LIF человека в генетически модифицированных
клетках млекопитающих и изучении секреции рекомбинантного белка этими клетками в культуральную среду. Методы. Для выявления рекомбинантного LIF в кондиционированной среде, полученной в результате культивирования клеток, трансфецированных рекомбинантными плазмидами,
содержащими ген LIF, использовали Вестерн-блот-анализ и иммунопреципитацию. Результаты.
Сконструированные рекомбинантные плазмиды обеспечивают експрессию и секрецию рекомбинантного LIF человека клетками трех линий (CHO-K1, L-M(TK–
)(ins
+
) и 293Т), трансфецированными этими плазмидами. Степень гликозилирования продуцируемого такими клетками рекомбинантного LIF варьирует, при этом наблюдается секреция полностью гликозилированного LIF (с молекулярной массой около 68 кДа). Выводы. Кондиционированную среду, полученную вследствие культивирования трансфецированных клеток, можно использовать как источник LIF человека для культивирования клеток, нуждающихся в этом ростовом факторе, и для его выделения в чистом виде.
Ключевые слова: рекомбинантный LIF, экспрессия, секреция, трансфекция,клеточные линии
Мета. Мета роботи полягала в одержанні експресії гена LIF
людини в генетично модифікованих клітинах ссавців і вивченні
секреції рекомбінантного білка цими клітинами в культуральне середовище. Методи. Для визначення рекомбінантного LIF
в кондиціонованому середовищі, одержаному в результаті
культивування клітин, трансфекованих рекомбінантними
плазмідами, що містять ген LIF, використовували Вестернблот аналіз та імунопреципітацію. Результати. Сконструйовані рекомбінантні плазміди забезпечують експресію і секрецію рекомбінантного LIF людини клітинами трьох ліній (CHOK1, L-M(TK–
)(ins
+
) і 293Т), трансфекованих цими плазмідами.
Ступінь глікозилювання рекомбінантного LIF, продукованого
такими клітинами, варіює, при цьому спостерігається секреція повністю глікозильованого LIF (з молекулярною масою
близько 68 кДа). Висновки. Кондиціоноване середовище, одержане внаслідок культивування трансфекованих клітин, можна використовувати як джерело LIF людини для культивування клітин, яким потрібен цей ростовий фактор, а також
для його виділення в очищеному стані.
Ключові слова: рекомбінантний LIF, експресія, секреція,
трансфекція, клітинні лінії.
|
| first_indexed | 2025-12-07T17:06:11Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156336 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | English |
| last_indexed | 2025-12-07T17:06:11Z |
| publishDate | 2011 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Rymar, S.Yu. Ruban, T.A. Irodov, D.M. Kordium, V.A. 2019-06-18T11:43:42Z 2019-06-18T11:43:42Z 2011 Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells / S.Yu. Rymar, T.A. Ruban, D.M. Irodov, V.A. Kordium // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 1. — С. 53-58. — Бібліогр.: 29 назв. — англ., рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000082 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156336 571.29 + 57.085.23 Aim. The aim of this work was to express the human LIF gene in mammalian cells and to study the secretion
 of recombinant LIF into culture medium. Methods. Recombinant LIF was detected by Western blot analysis
 and immunoprecipitation in culture medium of CHO-K1, L-M (TK–
 ) (ins+
 ), 293Ò cells, transfected with
 recombinant plasmids containing human LIF gene. Results. The recombi- nant plasmids. containing human
 gene LIF, were constructed. The cells of three (CHO-K1, L-M (TK–
 ) (ins+
 ), 293Ò) mammalian lines were
 transfected with these plasmids. It was shown that the transfected mammalian cells secreted recombinant
 human LIF which was characterized by variable degree of glycosylation including completely glycosylated
 form (approximately 68 kD). Ñonclusions. The conditioned medium of developed cell lines can be used as a
 sourñe of human recombinant LIF for different purposes, including purification of human recombinant LIF
 and as an additional supplement for cell culturing.
 Keywords: recombinant LIF, expression, secretion, transfection, cell lines. Цель работы состояла в получении экспрессии гена LIF человека в генетически модифицированных
 клетках млекопитающих и изучении секреции рекомбинантного белка этими клетками в культуральную среду. Методы. Для выявления рекомбинантного LIF в кондиционированной среде, полученной в результате культивирования клеток, трансфецированных рекомбинантными плазмидами,
 содержащими ген LIF, использовали Вестерн-блот-анализ и иммунопреципитацию. Результаты.
 Сконструированные рекомбинантные плазмиды обеспечивают експрессию и секрецию рекомбинантного LIF человека клетками трех линий (CHO-K1, L-M(TK–
 )(ins
 +
 ) и 293Т), трансфецированными этими плазмидами. Степень гликозилирования продуцируемого такими клетками рекомбинантного LIF варьирует, при этом наблюдается секреция полностью гликозилированного LIF (с молекулярной массой около 68 кДа). Выводы. Кондиционированную среду, полученную вследствие культивирования трансфецированных клеток, можно использовать как источник LIF человека для культивирования клеток, нуждающихся в этом ростовом факторе, и для его выделения в чистом виде.
 Ключевые слова: рекомбинантный LIF, экспрессия, секреция, трансфекция,клеточные линии Мета. Мета роботи полягала в одержанні експресії гена LIF
 людини в генетично модифікованих клітинах ссавців і вивченні
 секреції рекомбінантного білка цими клітинами в культуральне середовище. Методи. Для визначення рекомбінантного LIF
 в кондиціонованому середовищі, одержаному в результаті
 культивування клітин, трансфекованих рекомбінантними
 плазмідами, що містять ген LIF, використовували Вестернблот аналіз та імунопреципітацію. Результати. Сконструйовані рекомбінантні плазміди забезпечують експресію і секрецію рекомбінантного LIF людини клітинами трьох ліній (CHOK1, L-M(TK–
 )(ins
 +
 ) і 293Т), трансфекованих цими плазмідами.
 Ступінь глікозилювання рекомбінантного LIF, продукованого
 такими клітинами, варіює, при цьому спостерігається секреція повністю глікозильованого LIF (з молекулярною масою
 близько 68 кДа). Висновки. Кондиціоноване середовище, одержане внаслідок культивування трансфекованих клітин, можна використовувати як джерело LIF людини для культивування клітин, яким потрібен цей ростовий фактор, а також
 для його виділення в очищеному стані.
 Ключові слова: рекомбінантний LIF, експресія, секреція,
 трансфекція, клітинні лінії. The authors thank E.K. Toporova for kindly provided L-M (TK–) (ins+) cell line. en Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вiopolymers and Cell Molecular and Cell Biotechnologies Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells Экспрессия и секреция рекомбинантного белка LIF человека генетически модифицированными клетками млекопитающих Експресія і секреція рекомбінантного білка LIF людини генетично модифікованими клітинами ссавців Article published earlier |
| spellingShingle | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells Rymar, S.Yu. Ruban, T.A. Irodov, D.M. Kordium, V.A. Molecular and Cell Biotechnologies |
| title | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells |
| title_alt | Экспрессия и секреция рекомбинантного белка LIF человека генетически модифицированными клетками млекопитающих Експресія і секреція рекомбінантного білка LIF людини генетично модифікованими клітинами ссавців |
| title_full | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells |
| title_fullStr | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells |
| title_full_unstemmed | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells |
| title_short | Expression and secretion of human recombinant LIF by genetically modified mammalian cells |
| title_sort | expression and secretion of human recombinant lif by genetically modified mammalian cells |
| topic | Molecular and Cell Biotechnologies |
| topic_facet | Molecular and Cell Biotechnologies |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156336 |
| work_keys_str_mv | AT rymarsyu expressionandsecretionofhumanrecombinantlifbygeneticallymodifiedmammaliancells AT rubanta expressionandsecretionofhumanrecombinantlifbygeneticallymodifiedmammaliancells AT irodovdm expressionandsecretionofhumanrecombinantlifbygeneticallymodifiedmammaliancells AT kordiumva expressionandsecretionofhumanrecombinantlifbygeneticallymodifiedmammaliancells AT rymarsyu ékspressiâisekreciârekombinantnogobelkalifčelovekagenetičeskimodificirovannymikletkamimlekopitaûŝih AT rubanta ékspressiâisekreciârekombinantnogobelkalifčelovekagenetičeskimodificirovannymikletkamimlekopitaûŝih AT irodovdm ékspressiâisekreciârekombinantnogobelkalifčelovekagenetičeskimodificirovannymikletkamimlekopitaûŝih AT kordiumva ékspressiâisekreciârekombinantnogobelkalifčelovekagenetičeskimodificirovannymikletkamimlekopitaûŝih AT rymarsyu ekspresíâísekrecíârekombínantnogobílkaliflûdinigenetičnomodifíkovanimiklítinamissavcív AT rubanta ekspresíâísekrecíârekombínantnogobílkaliflûdinigenetičnomodifíkovanimiklítinamissavcív AT irodovdm ekspresíâísekrecíârekombínantnogobílkaliflûdinigenetičnomodifíkovanimiklítinamissavcív AT kordiumva ekspresíâísekrecíârekombínantnogobílkaliflûdinigenetičnomodifíkovanimiklítinamissavcív |