Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту
Мета. Дослідити експресію деяких генів, індукованих водним стресом. Методи. Проростки вирощува - ли на агаризованому середовищі при повільно знижуваному водному потенціалі. Для визначення експресії генів використано метод ПЛР у реальному часі. Результати. Виявлено помірне підвищення експресії RD29...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Вiopolymers and Cell |
|---|---|
| Datum: | 2011 |
| 1. Verfasser: | |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Ukrainian |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2011
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156365 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту / Ю.А. Бобровницький // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 1. — С. 59-65. — Бібліогр.: 28 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156365 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Бобровницький, Ю.А. 2019-06-18T12:05:12Z 2019-06-18T12:05:12Z 2011 Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту / Ю.А. Бобровницький // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 1. — С. 59-65. — Бібліогр.: 28 назв. — укр. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000083 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156365 582.736.3 Мета. Дослідити експресію деяких генів, індукованих водним стресом. Методи. Проростки вирощува - ли на агаризованому середовищі при повільно знижуваному водному потенціалі. Для визначення експресії генів використано метод ПЛР у реальному часі. Результати. Виявлено помірне підвищення експресії RD29A і AtP5CS – двох АБК-залежних генів, яке не було таким значним, як в експериментах, де проростки вирощували за гострого водного дефіциту. Рівень експресії AtP5CS корелював з вмістом проліну у проростках A. thaliana. Водночас не відмічено істотного зростання експресії DREB2А, RD17 і ERD1 – трьох АБК-незалежних генів. Висновки. Характер експресії генів за умов, близьких до природних, може відрізнятися від того, що спостерігається при гострому водному стресі. Ключові слова: Arabidopsis thaliana, експресія генів, водний дефіцит, ПЛР у реальному часі, пролін. Aim. In this study we have analyzed the expression of some water stress-inducible genes of Arabidopsis. Methods. A method of growing the A. thaliana seedlings at slowly lowering water potential on an agar-solidified medium was used. Gene expression was analyzed using a method of real-time PCR. Results. We have detected an increased expression of RD29A and AtP5CS, two ABA-dependent genes. At the same time, their expression did not reach the level observed in the experiments where the conditions of acute water stress were imposed. The levels of expression of AtP5CS correlated with the concentration of proline in the seedlings of A. thaliana. However, there was not detected a significant increase in the expression of DREB2А, RD17 and ERD1, three ABA-independent genes. Conclusions. The pattern of gene expression under conditions close to natural ones may differ from that observed under an acute water stress. Keywords: Arabidopsis thaliana, gene expression, water deficit, real-time PCR, proline. Цель. Исследовать экспрессию некоторых генов, индуцируемых водным стрессом. Методы. Проростки выращивали на агаризованной среде при медленно снижающемся водном потенциале. Для определения экспрессии генов использован метод ПЦР в реальном времени. Результаты. Обнаружено умеренное повышение экспрессии RD29A и AtP5CS – двух АБК-зависимых генов, которое не было таким значительным, как в экспериментах, где проростки выращивали при остром водном дефиците. Уровень экспрессии AtP5CS коррелировал с содержанием пролина в проростках A. thaliana. При этом не выявлено существенного возрастания экспрессии DREB2А, RD17 и ERD1 – трех АБК-независимых генов. Выводы. Характер экспрессии генов в условиях, близких к естественным, может отличаться от наблюдаемого при остром водном стрессе. Ключевые слова: Arabidopsis thaliana, експрессия генов, водный дефицит, ПЛР в реальном времени, пролин. uk Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вiopolymers and Cell Genomics, Transcriptomics and Proteomics Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту Еxpression of some water stress-induced genes in the seedlings of Аrabidopsis thaliana grown under conditions of moderate water deficit Экспрессия некоторых генов, индуцируемых водным стрессом, в проростках Аrabidopsis thaliana, выращенных в условиях умеренного водного дефицита Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту |
| spellingShingle |
Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту Бобровницький, Ю.А. Genomics, Transcriptomics and Proteomics |
| title_short |
Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту |
| title_full |
Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту |
| title_fullStr |
Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту |
| title_full_unstemmed |
Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту |
| title_sort |
експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту |
| author |
Бобровницький, Ю.А. |
| author_facet |
Бобровницький, Ю.А. |
| topic |
Genomics, Transcriptomics and Proteomics |
| topic_facet |
Genomics, Transcriptomics and Proteomics |
| publishDate |
2011 |
| language |
Ukrainian |
| container_title |
Вiopolymers and Cell |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Еxpression of some water stress-induced genes in the seedlings of Аrabidopsis thaliana grown under conditions of moderate water deficit Экспрессия некоторых генов, индуцируемых водным стрессом, в проростках Аrabidopsis thaliana, выращенных в условиях умеренного водного дефицита |
| description |
Мета. Дослідити експресію деяких генів, індукованих водним стресом. Методи. Проростки вирощува -
ли на агаризованому середовищі при повільно знижуваному водному потенціалі. Для визначення експресії генів використано метод ПЛР у реальному часі. Результати. Виявлено помірне підвищення
експресії RD29A і AtP5CS – двох АБК-залежних генів, яке не було таким значним, як в експериментах, де
проростки вирощували за гострого водного дефіциту. Рівень експресії AtP5CS корелював з вмістом
проліну у проростках A. thaliana. Водночас не відмічено істотного зростання експресії DREB2А, RD17 і
ERD1 – трьох АБК-незалежних генів. Висновки. Характер експресії генів за умов, близьких до природних, може відрізнятися від того, що спостерігається при гострому водному стресі.
Ключові слова: Arabidopsis thaliana, експресія генів, водний дефіцит, ПЛР у реальному часі, пролін.
Aim. In this study we have analyzed the expression of some water
stress-inducible genes of Arabidopsis. Methods. A method of
growing the A. thaliana seedlings at slowly lowering water
potential on an agar-solidified medium was used. Gene expression
was analyzed using a method of real-time PCR. Results. We have
detected an increased expression of RD29A and AtP5CS, two
ABA-dependent genes. At the same time, their expression did not
reach the level observed in the experiments where the conditions of acute water stress were imposed. The levels of expression of
AtP5CS correlated with the concentration of proline in the
seedlings of A. thaliana. However, there was not detected a
significant increase in the expression of DREB2А, RD17 and ERD1,
three ABA-independent genes. Conclusions. The pattern of gene
expression under conditions close to natural ones may differ from
that observed under an acute water stress.
Keywords: Arabidopsis thaliana, gene expression, water deficit,
real-time PCR, proline.
Цель. Исследовать экспрессию некоторых генов, индуцируемых водным стрессом. Методы. Проростки выращивали на
агаризованной среде при медленно снижающемся водном потенциале. Для определения экспрессии генов использован метод ПЦР в реальном времени. Результаты. Обнаружено умеренное повышение экспрессии RD29A и AtP5CS – двух АБК-зависимых генов, которое не было таким значительным, как в
экспериментах, где проростки выращивали при остром водном дефиците. Уровень экспрессии AtP5CS коррелировал с содержанием пролина в проростках A. thaliana. При этом не выявлено существенного возрастания экспрессии DREB2А, RD17
и ERD1 – трех АБК-независимых генов. Выводы. Характер экспрессии генов в условиях, близких к естественным, может отличаться от наблюдаемого при остром водном стрессе.
Ключевые слова: Arabidopsis thaliana, експрессия генов, водный дефицит, ПЛР в реальном времени, пролин.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156365 |
| citation_txt |
Експресія деяких генів, індукованих водним стресом, у проростках Аrabidopsis thaliana, вирощуваних за умов помірного водного дефициту / Ю.А. Бобровницький // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 1. — С. 59-65. — Бібліогр.: 28 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT bobrovnicʹkiiûa ekspresíâdeâkihgenívíndukovanihvodnimstresomuprorostkaharabidopsisthalianaviroŝuvanihzaumovpomírnogovodnogodeficitu AT bobrovnicʹkiiûa expressionofsomewaterstressinducedgenesintheseedlingsofarabidopsisthalianagrownunderconditionsofmoderatewaterdeficit AT bobrovnicʹkiiûa ékspressiânekotoryhgenovinduciruemyhvodnymstressomvprorostkaharabidopsisthalianavyraŝennyhvusloviâhumerennogovodnogodeficita |
| first_indexed |
2025-11-26T00:12:37Z |
| last_indexed |
2025-11-26T00:12:37Z |
| _version_ |
1850596405488386048 |
| fulltext |
GENOMICS, PROTEOMICS, TRANSCRIPTOMICS
Експресія де я ких генів, інду кованих вод ним
стре сом, у про рос тках Аrabidopsis thaliana,
ви ро щу ва них за умов помірно го вод но го дефициту
Ю. А. Боб ров ниць кий
Інсти тут бо таніки ім. М. Г. Хо лод но го НАН Украї ни
Вул. Те ре щенківська, 2, Київ, Украї на, 01601
bobrownyzky@hotmail.com
Мета. Дослідити експресію де я ких генів, інду ко ва них вод ним стре сом. Ме то ди. Про рос тки ви ро щу ва -
ли на ага ри зо ва но му се ре до вищі при повільно зни жу ва но му вод но му по тенціалі. Для виз на чен ня екс-
пресії генів ви ко рис та но ме тод ПЛР у ре аль но му часі. Ре зуль та ти. Ви яв ле но помірне підви щен ня
експресії RD29A і AtP5CS – двох АБК-за леж них генів, яке не було та ким знач ним, як в ек спе ри мен тах, де
про рос тки ви ро щу ва ли за гос тро го вод но го дефіциту. Рівень експресії AtP5CS ко ре лював з вмістом
проліну у про рос тках A. thaliana. Вод но час не відмічено істот но го зрос тан ня експресії DREB2А, RD17 і
ERD1 – трьох АБК-не за леж них генів. Вис нов ки. Ха рак тер експресії генів за умов, близь ких до при род -
них, може відрізня ти ся від того, що спос терігається при гос тро му вод но му стресі.
Клю чові сло ва: Arabidopsis thaliana, експресія генів, вод ний дефіцит, ПЛР у ре аль но му часі, пролін.
Вступ. На ріст рос лин знач ною мірою впли ва ють
абіот ичні чин ни ки, се ред них вод ний, со льо вий і
хо ло до вий стре си. Останні є силь ни ми фак то ра ми,
які ліміту ють ріст куль тур них рос лин та їхню про -
дуктивність. Вони вик ли ка ють різно манітні біохі-
мічні та фізіологічні ре акції рос лин, на прав лені на
до сяг нен ня то ле ран тності до стре су. Відповідь рос -
лин на вод ний стрес спри чи няє за крит тя про дихів,
інгібу ван ня рос ту клітин і фо то син те зу та ак ти ва-
цію ди хан ня [1].
Мо ле ку ляр ний ме ханізм ре акції ви щих рос лин
на вод ний стрес виз на ча ють, вив ча ю чи на транс -
крипційно му рівні ге ни, що відповіда ють на вод -
ний стрес [2–5]. Не що дав но роз роб ле на тех но логія
мікро а реїв ста ла ко рис ним інстру мен том для ана-
лізу експресії генів на рівні ге но му [6, 7]. Так, ви ко -
рис то ву ю чи мікро а рей, що вклю чає 7000 зразків
кДНК, іден тифіко ва но 299 генів, які інду ку ють ся
по су хою, 54 ге ни – хо ло до вим і 213 – со льо вим
стре са ми та 245 – аб сци зо вою кис ло тою (АБК) у
Arabidopsis [8]. По над по ло ви на генів, експресія
яких інду кується по су хою, ак ти вується та кож ос-
мо тич ним стре сом і/або об роб кою АБК, що дає під-
ста ву для при пу щен ня що до си нергізму дії за зна че -
них чин ників. На про ти ва гу цьо му ли ше близь ко
10 % генів, експресія яких спри чи няється по су хою,
інду кують і хо ло до вий стрес.
Аналізом експресії генів, які ре а гу ють на вод -
ний, со льо вий та хо ло до вий стре си, показано на яв-
ність кількох ре гу ля тор них сис тем, відповідальних
за стрес-інду ко ва ну ген ну експресію. Час ти на генів
є АБК-за леж ни ми, тоді як реш та – АБК-не за лежни -
ми [2, 5, 9–11], що вка зує на існування ком плек сних
ре гу ля тор них ме ханізмів між сприй нят тям сиг на лу
59
ISSN 0233-7657. Biopolymers and Cell. 2011. Vol. 27. N 1. P. 59–65
Institute of Molecular Biology and Genetics NAS of Ukraine, 2011
про абіот ич ний стрес та експресією генів [9–12]. На
цей час іден тифіко ва но два основ них еле мен ти у
промо то рах стрес-інду ко ва них генів: еле мент від-
повіді на АБК – ABRE (abscisic acid responsive ele-
ment) та еле мент відповіді на зне вод нен ня – DRE
(dehydration responsive element).
Про дук ти стрес-інду ко ва них генів та кож мож -
на розділити на дві гру пи: білки, які без по се ред ньо
за хи ща ють від дії абіот ич них стресів, та білки, що
ре гу лю ють експресію генів і про ве ден ня сиг на лу у
відповідь на стрес [2, 3, 5, 10]. До пер шої гру пи на -
ле жать білки вод них ка налів, білки де ток си кації,
білки пізньо го ембріоге не зу та ша пе ро ни, клю чові
фер мен ти син те зу осмолітів, та ких як пролін і цук -
ри, та ін. Друга гру па вклю чає транс крипційні фак -
то ри (DREB2, AREB, MYC, MYB), про теїнкінази
та фосфатази, а також ферменти біосинтезу АБК.
На сьо годні не до кінця з’я со ва ним ли шається
питан ня сто сов но то го, які ге ни інду ку ють ся вод -
ним дефіци том за умов, близь ких до при род них,
оскільки у пе ре важній більшості ви падків експре-
сійний аналіз про во ди ли на рос ли нах Arabidopsis,
ви ро ще них за гос тро го вод но го стре су, який є ду же
спро ще ною імітацією при род ної по су хи. Ця про -
бле ма на бу ває ак ту аль ності у зв’яз ку із зрос тан ням
кількості транс ген них куль тур них рос лин.
Ме та да ної ро бо ти по ля га ла у виз на ченні екс-
пресії генів за умов про лон го ва но го вод но го стре су
ме то дом ПЛР у ре аль но му часі (Real Time PCR),
який у по над 100 разів чут ливіший за мікро а рей
[13]. Пе релік досліджу ва них генів та їхні ха рак те -
рис ти ки на ве де но у таб лиці.
DREB2A на ле жить до підро ди ни DREBА-2 ро -
ди ни транс крипційних фак торів (ТФ) ERF/AP2.
DREB2A ко дує ТФ, що спе цифічно зв’я зується з
шістьма нук ле о ти да ми (A/GCCGAC) ко ро во го мо -
тиву DRE [14]. Він функціонує пе ре важ но в АБК-
неза леж но му шля ху експресії генів, інду ко ва ної
вод ним дефіци том, оскільки, згідно з літе ра тур ни -
ми да ни ми, експресія DREB2A суттєво ак ти вується
вод ним і со льо вим стре са ми, але не об роб кою АБК.
При пус ка ють, що DREB2A при цьо му сти му лює
інші ге ни, відповідальні за то ле рантність до водно -
го стре су [15]. RD17 ко дує білок пізньо го ембріоге -
не зу гру пи 2 (дегідрин), містить у своєму про мо то-
рі мо тив DRE і ре гу люється, та ким чи ном, DREB2A
[16]. RD29A ко дує білок, подібний до білків пізньо -
го ембріоге не зу [17]. Про мо тор цьо го ге на містить
два основ них cis-діючих еле мен ти (ABRE та DRE),
які бе руть участь у стрес-інду ко ваній експресії ге-
нів [18, 19]. AtP5CS ко дує ∆-1-піролідин-5-кар бо-
кси лат син та зу – білок, який лімітує швидкість ре -
акції у про цесі біосин те зу проліну [20]. Йо го екс-
пресія та кож інду кується АБК і осмо тич ним стре -
сом [21]. ERD1 є ре гу ля тор ною суб оди ни цею ATФ-
за леж ної про те а зи Clp (білок теп ло во го шо ку гру пи
2) [22]. Про те а за Clp фор мує ком плек си у хло ро-
плас тах, які, ймовірно, при четні до дег ра дації біл-
60
БОБ РОВ НИЦЬ КИЙ Ю. А.
Ло кус Ге н «Пря мий» прай мер» «Зво рот ний» прай мер» Функція
At5g05410 DREB2A cga gtt tga aca taa cta ttg g ttg agg ctt tgt agc gga tc Тра нскрипційний фак тор. АБК-
не за леж ний
At1g20440 RD17 gaa caa gcc tag tgt cat cga ggt agt gga aac tgg tac atc Білок LEA гру пи 2 (дегідрин). Інду -
кується DREB2A, АБК-не за леж ний
At5g52310 RD29A gtt act gat ccc acc aaa gaa g gtc cat tcc agt ttc agt ctt c Білок, подібний до білків LEA гру пи 2.
Інду кується DREB2A та АБК
At2g39800 ATP5CS gat ttg gac ttg gtg cag agg tat gag tac taa gca gag agg a Клю чо вий фер мент біосин те зу проліну.
АБК-за леж ний
At5g51070 ERD1 ctt tct cta tca gca cga aac g ttt ttt cca cca ggt cca gaa c ATФ-за леж на про те а за Clp, БТШ гру пи
2. DREB2A та АБК-не за леж ний
At3g62250 Ubq5 aac cct tga ggt tga atc atc c
cga gtc ctt ctt tct ggt aaa cgt Убіквітин 5
At4g20890 Tub9 gta cct tga agc ttg cta atc cta gtt ctg gac gtt cat cat ctg ttc Ту булін 9
Характеристика генів, досліджуваних у ро боті
ків з де фек та ми тре тин ної струк ту ри [23]. ERD1 є
еле мен том од но го з міно ри тар них АБК-не за леж-
них шляхів, що ре гу лю ють відповідь рос лин на зне -
вод нен ня [1]. Та ким чи ном, з п’я ти досліджу ва них
генів один (AtP5CS) ви я вив ся АБК-за леж ним, два
(RD17 і ERD1) – АБК-не за лежними, при чо му ERD1
є еле ментом окре мо го АБК-не за леж но го шля ху пе -
ре дачі сиг на лу при вод но му стресі; ще один
(DREB2A) є транс крипційним фак то ром і, на решті,
останній (RD29A) ре гу люється АБК та DREB2A од -
но час но.
Ма теріали і ме то ди. Пе ред посівом насіння
A. thaliana (еко тип Columbia) сте рилізу ва ли про тя -
гом 15 хв у 5 %-му роз чині гіпо хло ри ту на трію,
тричі про ми ва ли сте риль ною дис тиль о ва ною во -
дою і змішу ва ли з 1 %-ю ага ро зою для зруч ності
висіву. Стан дартні (12 × 12 см) плас ти кові чаш ки
Петрі по пе ред ньо за пов ню ва ли ага ри зо ва ним (1 %)
се ре до ви щем Му расіге і Ску га (MS) з до да ванням
4,5 % цук ро зи, pH 5,7. Насіння висіва ли на по верх-
ню жи виль но го се ре до ви ща і вит ри му ва ли упро -
довж 2 діб за тем пе ра ту ри 4 °С для більш рівномір-
ної схо жості.
Про рос тки рос ли за тем пе ра ту ри 22 °С при від-
носній во ло гості повітря 50 % і 16-год світло во му
дні. Рівень освітлен ня ста но вив 80 мкмоль квантів ×
× м–2⋅ с–1. Про рос тки ви ро щу ва ли упро довж 6 діб до
по я ви доб ре сфор мо ва них сім’я доль них листків. У
под аль шо му їх пе ре сад жу ва ли на жи виль не се ре до -
ви ще МS, яке місти ло ком по нен ти у кон цен трації,
зни женій до однієї чверті від нор ми (0,25 × MS). У
ньо му бу ла відсут ня са ха ро за для змен шен ня осмо -
тич но го тис ку. Рівень рН се ре до ви ща ста но вив 5,7.
Для імітації умов вод но го стре су чаш ки за кри ва ли
спеціаль ною це ло фа но вою плівкою, про ник ною
для во дя ної па ри. Се ре до ви ще (80 мл) за ли ва ли в
кож ну чаш ку Петрі під не ве ли ким виз на че ним ку -
том, що спри я ло йо го на прав ле но му ви си хан ню
звер ху до ни зу. Кон трольні рос ли ни пе ре сад жу ва ли
на чаш ки з іден тич ним се ре до ви щем, про те їх за -
кри ва ли стан дар тни ми плас ти ко ви ми криш ка ми,
що вик лю ча ло ви си хан ня суб стра ту. На цьо му се -
ре до вищі про рос тки зрос та ли про тя гом 5 діб. Цей
термін об ра но з тієї при чи ни, що на 6-ту до бу про -
рос тки, ви ро щу вані за умов вод но го дефіци ту, ги -
нуть внаслідок ви си хан ня суб стра ту.
РНК виділя ли згідно з ме то ди кою ви роб ни ка
TRI REAGENT («Sigma», ФРН). Для досліду бра ли
рос ли ни без по се ред ньо пе ред пе ре сад кою, а нада-
лі – кожні 24 год. Розмір про би відповідав об’єму
однієї чаш ки (20 рос лин су мар ною ма сою 20–50 мг
за леж но від віку). Вимірю ван ня здійсню ва ли в
трьох біологічних і аналітич них по втор нос тях. Для
кон тро лю якості РНК відра зу після її виділен ня
про во ди ли елек тро фо рез. Пе ред син те зом кДНК
для ви да лен ня слідів ге ном ної ДНК виділе ну РНК
оброб ля ли ДНКа зою І («Fermentas», Лит ва). кДНК
от ри му ва ли з РНК за до по мо гою ре акції зво рот ної
транс крипції з ви ко рис тан ням зво рот ної транс -
крип та зи M-MLV («Fermentas»). Далі її роз бав ля ли
во дою у співвідно шенні 1:10.
ПЛР у ре аль но му часі про во ди ли на ПЛР-амплі-
фіка торі Real-Time PCR IQ-Cycler («BioRad»,
США). В кож ну мікроп робірку вно си ли го то ву су-
міш для ПЛР Maxima Sybr Green Real Time PCR 2 ×
× Master Mix («Fermentas») (0,5 мл/мл), яка містить
бу фер для ПЛР, MgCl2, суміш дез окси нук ле о тидів,
Taq-ДНК-поліме ра зу, а та кож «пря мий» і «зво рот -
ний» прай ме ри і про бу кДНК (0,05 мл/мл). Кінце ва
кон цен трація прай мерів у го то во му роз чині ста но -
вила 5 пМ; ре акційний об’єм – 20 мкл. Інтен сив-
ність флу о рес ценції вимірю ва ли за тем пе ра ту ри
77–79 °C, кри ву плав лен ня – у діапа зоні 50–94 °C з
інтер ва лом 0,5 °C. Час за трим ки дорівню вав 10 с.
Одер жані ре зуль та ти аналізу ва ли за до по мо гою
програм но го за без пе чен ня при ла ду.
Для ПЛР у ре аль но му часі ви ко рис то ву ва ли спе -
цифічні прай мери дов жи ною 19–22 нук ле о тидів,
сконстру йо вані на основі ба зи да них TAIR (www.
arabidopsis.org). Послідов ності пар прай мерів на ве де -
но в таб лиці. Про би нор малізу ва ли з ви ко ристанням
генів убіквіти ну 5 (Ubq5) і ту буліну 9 (Tub9), рівень
експресії яких за ли шається не змінним за різних умов
виро щу ван ня. Прай ме ри для цих генів та кож на ве де -
но в таб лиці.
Для досліду з виз на чен ня кон цен трації проліну
рос ли ни бра ли без по се ред ньо пе ред пе ре сад кою, а
надалі – кожні 24 год. Розмір про би відповідав
об’єму однієї чаш ки (20 рос лин су мар ною ма сою
20–50 мг за леж но від віку). Вимірю ван ня здійсню -
ва ли в п’я ти біологічних та трьох аналітич них по-
втор нос тях. Кон цен трацію проліну виз на ча ли за
61
ЕКСПРЕСІЯ ДЕ Я КИХ ГЕНІВ, ІНДУ КОВАНИХ ВОД НИМ СТРЕ СОМ, У ПРО РОС ТКАХ А. thaliana
ме то ди кою, за сно ва ною на нінгідри новій ре акції
[24].
Ре зуль та ти і об го во рен ня. До цьо го ча су в різ-
них досліджен нях ви ко рис то ву ва ли мо делі імітації
вод но го стре су, які де що відрізня ють ся від опи са -
ної на ми. Зок ре ма, вод ний стрес у за зна че них ви ще
ро бо тах вив ча ли на рос ли нах віком три тижні, ви -
ро ще них на ага ри зо ва но му се ре до вищі. Далі ці рос -
ли ни вий ма ли з ага ру і ви су шу ва ли в плас ти ко вих
чаш ках при розсіяно му світлі за тем пе ра тури
22 °C. При цьо му три валість досліду ста но ви ла
всьо го 24 год. На наш по гляд, пе ре саджування рос -
лин A. thaliana у три тиж не во му віці, ко ли во ни ма -
ють дос тат ньо роз га лу же ну ко ре не ву сис те му, є са-
ме по собі до сить трав му ючим. По даль ше пе ре бу -
ван ня рос лин з відкри тою ко ре не вою сис те мою
при зво дить до їхньо го швид ко го ви си хан ня та за ги -
белі, внаслідок чо го тривалість досліду не пе ре ви -
щу ва ла однієї до би. Че рез це ми за про по ну ва ли но -
вий ме тод імітації вод но го стре су (див. «Ма теріали
і ме то ди»), за яко го ви су шу ван ня се ре до ви ща від-
бу вається в про цесі рос ту рос лин на ага ри зо ва но му
се ре до вищі про тя гом 5 діб, тоб то у спосіб, більш
на бли же ний до при род но го.
Як вид но з да них, на ве де них на рис. 1, віднос на
(дослід/контроль) експресія ге на RD29A більша за
одини цю (рівень експресії за умов стре су є ви щим,
ніж у кон тролі) про тя гом усьо го ек спе ри мен ту, за
ви нят ком 1-го дня. Почи на ю чи з 2-го дня експре-
сія посту по во зрос тає, ся га ю чи мак си маль них зна-
чень (> 10) на 4-й день. На 5-й день, ко ли інтенсив-
ність вод но го стре су бу ла мак си маль ною, експре-
сія RD29A зни зи ла ся до 2,48. Отри мані дані, оче -
вид но, свідчать про важ ливість білка RD29A при
віднос но помірних зна чен нях вод но го дефіциту.
RD29A є доб ре вив че ним ге ном, експресія яко го
зрос тає під впли вом гос тро го вод но го стре су вже
че рез 1 год після йо го по чат ку [25]. При цьо му її
рівень мо же ся га ти ду же ви со ких зна чень порівня -
но з кон тро лем. Так, у досліді ав торів ро бо ти [16],
про ве де но му та кож на A. thaliana, експресія RD29A
підви щу ва ла ся при близ но в 100 разів після 5 год дії
гос тро го вод но го стре су. В іншо му ек спе ри менті
[8] з виз на чен ня експресії RD29A збільшен ня ви я -
ви ло ся помірнішим – у 29 разів. Нап рикінці вка за -
но го досліду експресія зни жу ва ла ся, що бу ло від-
міче но і в на шо му ек спе ри менті. За га лом, порівню -
ю чи зна чен ня рівнів експресії, об ра хо вані на ми при
іміту ванні умов про лон го ва но го вод но го стре су, з
літе ра тур ни ми да ни ми, вар то за зна чи ти, що хо ча в
на шо му досліді рівень експресії і підви щується
знач но, він все ж не до ся гає тих ве ли чин, які ха рак -
терні для дослідів, де іміту ють умо ви гос тро го вод -
но го дефіци ту.
Іншим АБК-за леж ним ге ном, об ра ним для до-
сліджен ня експресії, став AtP5CS, що ко дує клю -
човий фер мент біосин те зу проліну, ∆-1-піролідин-
5-кар бок си лат син та зу. Як вид но з рис. 1, віднос на
експресія цьо го ге на пе ре ви щує оди ни цю про тя гом
усьо го ек спе ри мен ту. Щоп рав да, на 1-й і 2-й дні
зна чен ня експресії за умов стре су ли ше не знач но
пе ре ви щують кон трольні по каз ни ки. Експресія по -
чи нає зрос та ти на 3-й день і ся гає на й ви щих зна -
чень на 4-й і 5-й дні (6,52 та 5,47 відповідно).
На ми ви ко на но дослід з вимірю ван ня вмісту
проліну у про рос тках, ви ро щу ва них за умов вод но -
го стре су, та в кон тролі (рис. 2). У перші 2 дні після
пе ре сад ки кон цен трація проліну за умов стре су іс-
тотно не пе ре ви щує кон троль них зна чень. На 3-й
день во на зрос тає і на 4-й стає у 3,56 разу ви щою,
ніж у кон тролі. На 5-й день кон цен трація проліну
за ли шається при близ но на рівні 4-го дня.
Ко ре ляція експресії AtP5CS та вмісту проліну за
умов вод но го дефіци ту підтвер джує дані про клю -
чо ву роль ∆-1-піролідин-5-кар бок си лат син та зи в
ре акції біосин те зу проліну [26]. Порівню ю чи наші
дані що до експресії AtP5CS та вмісту проліну з
літе ра тур ни ми [21, 26], вар то за зна чи ти, що біль-
62
БОБ РОВ НИЦЬ КИЙ Ю. А.
0
2
4
6
8
10
12
0 1 2 3 4 Дні
1
2
3
4
5
Рис. 1. Віднос на експресія генів RD29A (1), AtP5CS (2),
DREB2A (3), RD17 (4) і ERD1 (5) у про рос тках, ви ро щу ва них за
умов помірно го вод но го стре су
шість літе ра тур них дже рел за свідчу ють суттєвіші
відмінності між стре сом та кон тро лем за ци ми дво -
ма по каз ни ка ми. Так, у ро боті [26] кон цен трація
проліну збільшу ва ла ся при близ но в 30 разів і при -
близ но у стільки ж разів зрос та ла експресія AtP5CS.
Мен ше підви щен ня цих двох по каз ників (кон цент-
рації проліну та експресії AtP5CS) у на шо му до-
сліді мож на по яс ни ти помірніши ми умо ва ми стре -
су. Ви со кий рівень ко ре ляції між ци ми дво ма по -
каз ни ка ми (ко ефіцієнт ко ре ляції ста но вить 0,93) є
одним із свідчень на ко ристь то го фак ту, що
AtP5CS є клю чо вим фер мен том син те зу проліну.
Як відо мо, 40 генів (~11 % від усіх стрес-ін-
дуко ва них генів) різно манітних ТФ іден тифіко ва -
но як такі, експресія яких інду кується по су хою, хо -
ло до вим або осмо тич ним стре сом. Се ред цих ТФ,
зокре ма, виявлено шість, що на ле жать до підроди -
ни DREB [8].
У на шо му ек спе ри менті виз на че но експресію од -
но го ТФ з цієї гру пи, а са ме – DREB2А. Як вид но з
рис. 1, істот них змін експресії DREB2А про тя гом до-
сліду не спос теріга ли. Зна чен ня віднос ної експресії
бу ли близь ки ми до оди ниці з не знач ни ми відхи лен -
ня ми у той чи інший бік.
Більшість літе ра тур них да них свідчить про зро-
стан ня експресії DREB2А при вод но му та осмо тич -
но му стре сах. Так, при гос тро му вод но му дефіциті
вста нов ле но підви щен ня експресії DREB2A у 8–13
разів порівня но з кон тро лем. При цьо му відміче но
ха рак тер ну ди наміку: експресія різко зрос тає че рез
2 год після впли ву, а потім по чи нає спа да ти [8]. В
іншо му дослідженні, де та кож іміту ва ли умо ви го-
стро го вод но го дефіци ту, спос теріга ли подібну ди -
наміку експресії DREB2A [15]. У разі про лон го ва -
но го вод но го стре су (у цьо му досліді рос ли ни ві-
ком 3 тижні не по ли ва ли про тя гом 2 тижнів) та кож
зафіксо ва но знач не зрос тан ня експресії DREB2A
[14]. Вод но час відомі й інші дані, які свідчать про
відсутність зрос тан ня експресії DREB2A при вод -
но му дефіциті. Так, у ро боті [1] по ка за но, що він
експре сується і за нор маль них умов рос ту, а при
осмо тич но му стресі ак ти вується внаслідок по ст-
трансляційної мо дифікації. Неп ря мим підтверд-
женням цьо го є і відсутність фе но ти по вих змін у ін-
серційно го му тан та за DREB2A T-ДНК при вод но -
му стресі [14]. При чи ною відсут ності істот них змін
в експресії DREB2A в на шо му досліді мог ла бу ти,
зок ре ма, над лиш ковість членів ро ди ни DREB2. По -
шук у базі да них ге но му Arabidopsis ви я вив при -
наймні сім го мо логів DREB2A, хо ча ав то ри й при -
пус ка ють, що DREB2A та DREB2B є го лов ни ми ТФ
[27, 28]. Іншою при чи ною, як уже за зна ча ло ся,
мог ла бу ти швид коп линність зрос тан ня експресії
DREB2A при гос тро му стресі: во на до ся га ла мак си -
му му че рез 2 год після по чат ку впли ву, а далі по -
сту по во спа да ла [8]. Та ким чи ном, ймовірно при -
пус ти ти, що в на шо му ви пад ку тим ча со ве зрос тан -
ня експресії не зафіксо ва не, оскільки вимірю ван ня
про во ди ли з інтер ва лом у 24 год. Ще однією при чи -
ною мог ла ста ти ре гу ляція ак тив ності DREB2A на
по сттрансляційно му рівні, а не ли ше на рівні екс-
пресії. Про це свідчать чис ленні дані, зок ре ма [15].
З літе ра ту ри відо мо, що 14 генів є без по се ред-
німи міше ня ми DREB2A. Дев ’ять з них ко ду ють
білки пізньо го ембріоге не зу, які за хи ща ють мак ро -
мо ле ку ли, такі як фер мен ти і ліпіди, від дегідра та-
ції. Всі ці ге ни містять по слідов нос ти DRE в своїх
про мо то рах [8, 28].
RD17 є одним із генів – міше ней для DREB2A,
еле мен том АБК-не за леж но го шля ху. Як вип ли ває з
да них рис. 1, суттєвих змін в експресії RD17 про тя -
гом ек спе ри мен ту не відміче но. В ціло му рівень
експресії ви я вив ся ви щим за кон троль ний, окрім
2-го дня, про те зрос тан ня експресії при стресі по-
рівня но з кон тро лем не бу ло більшим, ніж у 2 рази.
Зістав ля ю чи наші дані що до впли ву умов гос тро го
вод но го дефіци ту з літе ра тур ни ми, ба чи мо більші
відмінності між стре сом і кон тро лем в останніх.
Так, у досліді ав торів ро бо ти [8] віднос на експресія
RD17 до ся га ла зна чень по над 15, хоч і за зна ва ла
63
ЕКСПРЕСІЯ ДЕ Я КИХ ГЕНІВ, ІНДУ КОВАНИХ ВОД НИМ СТРЕ СОМ, У ПРО РОС ТКАХ А. thaliana
0
40
80
120
0 1 2 3 4 Дні
1 2
Рис. 2. Вміст проліну у про рос тках, ви ро щу ва них за умов по-
мірно го вод но го стре су: 1 – кон троль; 2 – дослід
знач них ко ли вань про тя гом ек спе ри мен ту. Та ким
чи ном, мож на зро би ти вис но вок про відсутність
не обхідності у підви щенні експресії RD17 за умов
про лон го ва но го вод но го стре су.
І, на решті, ре зуль та ти вив чен ня експресії ERD1,
який є еле мен том окре мо го АБК-не за леж но го шля -
ху пе ре дачі сиг на лу при вод но му стресі [1], де мон-
стру ють, що зрос тан ня експресії цьо го ге на при
вод но му стресі відсутнє (рис. 1). Нав па ки, ни жчу
експресію ERD1 спос теріга ли при вод но му стресі
по ряв ня но з кон тро лем про тя гом усьо го ек спе ри -
мен ту, за ви нят ком 2-го дня. На підставі одер жа них
да них мож на при пус ти ти, що роль да но го білка не є
суттєвою при про лон го ва но му вод но му стресі на
відміну від гос тро го дефіци ту, ко ли має місце зро-
стання експресії ERD1 до 7 разів [8].
Вис нов ки. Отже, як свідчать про ве дені ек спе -
ри мен ти, рос ли ни A. thaliana плас тич но ре а гу ють
на зни жен ня во ло гості рос то во го суб стра ту. Це під-
твер джується, зок ре ма, підви щен ням експресії
АБК-за леж них генів RD29A та AtP5CS. Вод но час
зна чен ня експресії цих генів не до ся га ють рівня,
ха рак тер но го для умов гос тро го вод но го дефіци ту.
При цьо му рівень експресії AtP5CS ко ре лює з от ри -
ма ни ми да ни ми про рівень проліну в про рос тках
A. thaliana, що є до дат ко вим свідчен ням клю чової
ролі фер менту ∆-1-піролідин-5-кар бок си лат син та -
зи в син тезі проліну. Що сто сується DREB2А, RD17
та ERD1 – генів, не за леж них від АБК, – то істот но го
підви щен ня експресії за умов стре су порівня но з
контро лем не виз на че но.
J. A. Bobrownyzky
Еxpression of some water stress-induced genes in the seedlings
of Аrabidopsis thaliana grown under conditions of moderate
water deficit
M. G. Kholodny Institute of Botany NAS of Ukraine
2, Tereshchenkivska Str., Kyiv, Ukraine, 01601
Summary
Aim. In this study we have analyzed the expression of some water
stress-inducible genes of Arabidopsis. Methods. A method of
growing the A. thaliana seedlings at slowly lowering water
potential on an agar-solidified medium was used. Gene expression
was analyzed using a method of real-time PCR. Results. We have
detected an increased expression of RD29A and AtP5CS, two
ABA-dependent genes. At the same time, their expression did not
reach the level observed in the experiments where the conditions of
acute water stress were imposed. The levels of expression of
AtP5CS correlated with the concentration of proline in the
seedlings of A. thaliana. However, there was not detected a
significant increase in the expression of DREB2А, RD17 and ERD1,
three ABA-independent genes. Conclusions. The pattern of gene
expression under conditions close to natural ones may differ from
that observed under an acute water stress.
Keywords: Arabidopsis thaliana, gene expression, water deficit,
real-time PCR, proline.
Ю. A. Боб ров ниц кий
Экспрес сия не ко то рых ге нов, ин ду ци ру е мых вод ным стрес сом,
в про рос тках Аrabidopsis thaliana, вы ра щен ных в усло ви ях
уме рен но го вод но го де фи ци та
Ре зю ме
Цель. Иссле до вать экс прес сию не ко то рых ге нов, ин ду ци ру е -
мых вод ным стрес сом. Ме то ды. Про рос тки вы ра щи ва ли на
агари зо ван ной сре де при мед лен но сни жа ю щем ся вод ном по -
тенци а ле. Для опре де ле ния экс прес сии ге нов ис поль зо ван ме -
тод ПЦР в ре аль ном вре ме ни. Ре зуль та ты. Обна ру же но уме-
ренное по вы ше ние экс прес сии RD29A и AtP5CS – двух АБК-за -
ви си мых ге нов, ко то рое не было та ким зна чи тель ным, как в
экс пе ри мен тах, где про рос тки вы ра щи ва ли при остром вод -
ном де фи ците. Уро вень экс прес сии AtP5CS кор ре лировал с со-
держа ни ем про ли на в про рос тках A. thaliana. При этом не вы-
яв ле но су щес твен но го воз рас та ния экс прес сии DREB2А, RD17
и ERD1 – трех АБК-не за ви си мых ге нов. Вы во ды. Ха рак тер экс -
прес сии ге нов в усло ви ях, близ ких к ес тес твен ным, мо жет от -
ли чать ся от на блю да е мо го при остром вод ном стрес се.
Клю че вые сло ва: Arabidopsis thaliana, експрес сия ге нов, вод -
ный де фи цит, ПЛР в ре аль ном вре ме ни, про лин.
СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ
1. Shinozaki K., Yamaguchi-Shinozaki K. Gene networks invol-
ved in drought stress response and tolerance // J. Exp. Bot.–
2007.–58, N 2.–P. 221–227.
2. Bray E. A. Plant responses to water deficit // Trends Plant
Sci.–1997.–2, N 2.–P. 48–54.
3. Hasegawa P. M., Bressan R. A., Zhu J. K., Bohnert H. J. Plant
cellular and molecular responses to high salinity // Annu.
Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol.–2000.–51.–P. 463–499.
4. Ingram J., Bartels D. The molecular basis of dehydration to-
lerance in plants // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol.
Biol.–1996.–47.–P. 377–403.
5. Thomashow M. F. Plant cold acclimation: freezing tolerance
genes and regulatory mechanisms // Annu. Rev. Plant Physi-
ol. Plant Mol. Biol.–1999.–50.–P. 571–599.
6. Eisen M. B., Brown P. O. DNA arrays for analysis of gene
expression // Meth. Enzymol.–1999.–303.–P. 179–205.
7. Schena M., Shalon D., Davis R. W., Brown P. O. Quantitative
monitoring of gene expression patterns with a complementa-
ry DNA microarray // Science.–1995.–270, N 5235.–P. 467–
470.
8. Seki M., Narusaka M., Ishida J., Nanjo T., Fujita M., Oono Y.,
Kamiya A., Nakajima M., Enju A., Sakurai T., Satou M.,
Akiyama K., Taji T., Yamaguchi-Shinozaki K., Carninci P.,
Kawai J., Hayashizaki Y., Shinozaki K. Monitoring the exp-
ression profiles of 7000 Arabidopsis genes under drought,
64
БОБ РОВ НИЦЬ КИЙ Ю. А.
cold and high-salinity stresses using a full-length cDNA mic-
roarray // Plant J.–2002.–31, N 3.–P. 279–292.
9. Shinozaki K., Yamaguchi-Shinozaki K. Molecular responses
to drought and cold stress // Curr. Opin. Biotechnol.–1996.–
7, N 2.–P. 161–167.
10. Shinozaki K., Yamaguchi-Shinozaki K. Gene expression and
signal transduction in water-stress response // Plant Physiol.–
1997.–115, N 2.–P. 327–334.
11. Shinozaki K., Yamaguchi-Shinozaki K. Molecular responses
to dehydration and low temperature: differences and cross-
talk between two stress signaling pathways // Curr. Opin.
Plant Biol.–2000.–3, N 3.–P. 217–223.
12. Zhu J. K. Cell signaling under salt, water and cold stresses //
Curr. Opin. Plant Biol.–2001.–4, N 5.–P. 401–406.
13. Horak C. E., Snyder M. Global analysis of gene expression in
yeast // Funct. Integr. Genomics.–2002.–2, N 4–5.–P. 171–
180.
14. Sakuma Y., Liu Q., Dubouzet J. G., Abe H., Shinozaki K., Ya-
maguchi-Shinozaki K. DNA-binding specificity of the ERF/
AP2 domain of Arabidopsis DREBs, transcription factor in-
volved in dehydration- and cold-inducible gene expression //
Biochem. Biophys. Res. Communs.–2002.–290, N 3.–
P. 998–1009.
15. Liu Q., Kasuga M., Sakuma Y., Abe H., Miura S., Yamagu-
chi-Shinozaki K., Shinozaki K. Two transcription factors,
DREB1 and DREB2, with an EREBP/AP2 DNA binding do-
main, separate two cellular signal transduction pathways in
drought- and low temperature-responsive gene expression,
respectively, in Arabidopsis // Plant Cell.–1998.–10, N 8.–
P. 1391–1406.
16. Sakuma Y., Maruyama K., Qin F., Osakabe Y., Shinozaki K.,
Yamaguchi-Shinozaki K. Dual function of an Arabidopsis
transcription factor DREB2A in water-stress-responsive and
heat-stress-responsive gene expression // Proc. Natl Acad.
Sci. USA.–2006.–103, N 49.–P. 18822–18827.
17. Kasuga M., Liu Q., Miura S., Yamaguchi-Shinozaki K., Shi-
nozaki K. Improving plant drought, salt and freezing toleran-
ce by gene transfer of a single stress-inducible transcription
factor // Nat. Biotechnol.–1999.–17, N 3.–P. 287–291.
18. Yamaguchi-Shinozaki K., Shinozaki K. A novel cis-acting
element in an Arabidopsis gene is involved in responsiveness
to drought, low-temperature, or high-salt stress // Plant Cell.–
1994.–6, N 2.–P. 251–264.
19. Yamaguchi-Shinozaki K., Shinozaki K. Organization of cis-
acting regulatory elements in osmotic- and cold-stress-res-
ponsive promoters // Trends Plant Sci.–2005.–10.–N 2.–
P. 88–94.
20. Zhou G.-A., Chang R.-Zh., Qiu L.-J. Overexpression of soy-
bean ubiquitin-conjugating enzyme gene GmUBC2 confers
enhanced drought and salt tolerance through modulating
abiotic stress-responsive gene expression in Arabidopsis //
Plant Mol. Biol.–2010.–72, N 4–5.–P. 357–367.
21. Kishor P. B. K., Hong Z., Miao C. H., Hu Ch.-A.A., Verma D.
P. S. Overexpression of ∆-pyrroline-5-carboxylate syntheta-
se increases proline production and confers osmotolerance in
transgenic plants // Plant Physiol.–1995.–108, N 4.–P. 1387–
1394.
22. Simpson S. D., Nakashima K., Narusaka Y., Seki M., Shino-
zaki K., Yamaguchi-Shinozaki K. Two different novel cis-
acting elements of erd1, a clpA homologous Arabidopsis ge-
ne function in induction by dehydration stress and dark-in-
duced senescence // Plant J.–2003.–33, N 2.–P. 259–270.
23. Peltier J.-B., Ytteberg J., Liberles D. A., Roepstorff P., van
Wijk K. J. Identification of a 350-kDa CIpP protease complex
with 10 different Clp isoforms in chloroplasts of Arabidopsis
thaliana // J. Biol. Chem.–2001.–276, N 19.–P. 16318–
16327.
24. Bates S. L., Waldren R. P., Teare I. D. Rapid determination of
free proline for water-stress studies // Plant and Soil.–1973.–
39, N 1.–P. 205–207.
25. Kim J.-M., To T. K., Ishida J., Morosawa T., Kawashima M.,
Matsui A., Toyoda T., Kimura H., Shinozaki K., Seki M. Al-
terations of lysine modifications on the histone H3 N-tail un-
der drought stress conditions in Arabidopsis thaliana // Plant
Cell Physiol.–2008.–49, N 10.–P. 1580–1588.
26. Yoshiba Y., Kiyosue T., Katagiri T., Ueda H., Mizoguchi T.,
Yamaguchi-Shinozaki K., Wada K., Harada Y., Shinozaki K.
Correlation between the induction of a gene for ∆1-pyrroli-
ne-5-carboxylate synthetase and the accumulation of proline
in Arabidopsis thaliana under osmotic stress // Plant J.–
1995.–7, N 5.–P. 751–760.
27. Nakashima K., Shinwari Z. K., Sakuma Y,, Seki M,, Miura S,,
Shinozaki K,, Yamaguchi-Shinozaki K. Organization and exp-
ression of two Arabidopsis DREB2 genes encoding DRE-bin-
ding proteins involved in dehydration- and high-salinity-
responsive gene expression // Plant Mol. Biol.–2000.–42,
N 4.–P. 657–665.
28. Sakuma Y., Maruyama K., Osakabe Y., Qin F., Seki M., Shi-
nozaki K., Yamaguchi-Shinozaki K. Functional analysis of an
Arabidopsis transcription factor, DREB2A, involved in dro-
ught-responsive gene expression // Plant Cell.–2006.–18,
N 5.–P. 1292–1309.
UDK 582.736.3
Received 30.07.10
65
ЕКСПРЕСІЯ ДЕ Я КИХ ГЕНІВ, ІНДУ КОВАНИХ ВОД НИМ СТРЕ СОМ, У ПРО РОС ТКАХ А. thaliana
|