Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli
Цель. Клонировать ген SPAА – поверхностный антиген Er. rhusiopathiae – в плазмидный вектор и экспрессировать белок SpaА в E. coli. Методы. Расчет и синтез олигонуклеотидных праймеров, полиме -
 разная цепная реакция, клонирование, экспрессия рекомбинантных белков в E. coli, электрофорез в&am...
Saved in:
| Published in: | Вiopolymers and Cell |
|---|---|
| Date: | 2011 |
| Main Authors: | , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2011
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156390 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli / О.Н. Дерябин, Е.Г. Дерябина, П.В. Гильчук // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 4. — С. 310-313. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862556012011061248 |
|---|---|
| author | Дерябин, О.Н. Дерябина, Е.Г. Гильчук, П.В. |
| author_facet | Дерябин, О.Н. Дерябина, Е.Г. Гильчук, П.В. |
| citation_txt | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli / О.Н. Дерябин, Е.Г. Дерябина, П.В. Гильчук // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 4. — С. 310-313. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Вiopolymers and Cell |
| description | Цель. Клонировать ген SPAА – поверхностный антиген Er. rhusiopathiae – в плазмидный вектор и экспрессировать белок SpaА в E. coli. Методы. Расчет и синтез олигонуклеотидных праймеров, полиме -
разная цепная реакция, клонирование, экспрессия рекомбинантных белков в E. coli, электрофорез в
агарозе и полиакриламидном геле. Результаты. Полноразмерный и усеченный ген SPAА Er. rhusiopathiae клонирован в экспрессирующую плазмиду рЕТ24а(+). Экспрессия полного гена не сопровождается наработкой значительного количества рекомбинантного белка, предположительно, вследствие его токсичности для клеток E. coli. Элиминация из полноразмерного гена фрагмента, кодирующего насыщенную пролином область, и домена тандемных повторов, а также получение усеченного варианта гена
приводят к устойчивому синтезу рекомбинантного продукта с ожидаемой молекулярной массой. Выводы. Получена рекомбинантная плазмида, содержащая фрагмент гена SPAА Er. rhusiopathiae, что позволяет выделять в препаративних количествах в E. coli рекомбинантный белок с м. м. 47 кДа.
Ключевые слова: Erysipelothrix rhusiopathiae, ген SPAА, рекомбинантный белок.
Aim. Cloning of Er. rhusiopathiae surface antigen – SPAА gene
into plasmid vector and its expression in E. coli. Methods.
Oligonucleotide primers design and synthesis, polymerase chain
reaction, cloning, recombinant proteins expression in E. coli,
electrophoresis in agarose, PAGE. Results. The full-size and
truncated Er. rhusiopathiae SPAА genes were cloned into
expression plasmid рЕТ24а(+). The expression of full-size gene
didn't result in significant recombinant protein production,
presumably due to its toxicity for E. coli cells. The elimination of
fragment coding for proline-rich region and tandem repeats
domain from full-size gene led to production truncated variant of
recombinant protein with expected molecular mass. Conclusions.
The recombinant plasmid containing fragment of Er. rhusiopathiae
SPAА gene was constructed. It allows obtaining preparative
amount recombinant protein with m. m. 47 kDa in E. coli.
Keywords: Erysipelothrix rhusiopathiae, SPAА gene, recombinant
protein.
Мета. Клонувати ген SPAА – поверхневий антиген Er. rhusiopathiae – у плазмідний вектор та експресувати білок SpaА в E. coli. Методи. Розрахунок і синтез олігонуклеотидних праймерів, полімеразна ланцюгова реакція, клонування, експресія рекомбінантних білків у Е.coli, електрофорез в агарозі та поліакриламідному
гелі. Результати. Повнорозмірний і усічений ген SPAА Er. rhusiopathiae клоновано в експресуючу плазміду рЕТ24а(+). Експресія
повного гена не супроводжується синтезом значної кількості рекомбінантного білка, очевидно, внаслідок його токсичності для
клітин E. coli. Елімінація з повнорозмірного гена фрагмента, що
кодує насичену проліном ділянку, і домену тандемних повторів, а
також одержання усіченого варіанта гена призводять до стабільного синтезу рекомбінантного продукту з очікуваною молекулярною масою. Висновки. Отримано рекомбінантну плазміду, яка містить фрагмент гена SPAА Er. rhusiopathiae, що дозволяє виділяти у препаративних кількостях в E. coli рекомбінантний білок з м. м. 47 кДа.
Ключові слова: Erysipelothrix rhusiopathiae, ген SPAА, рекомбінантний білок
|
| first_indexed | 2025-11-25T22:29:22Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156390 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-25T22:29:22Z |
| publishDate | 2011 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Дерябин, О.Н. Дерябина, Е.Г. Гильчук, П.В. 2019-06-18T12:36:14Z 2019-06-18T12:36:14Z 2011 Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli / О.Н. Дерябин, Е.Г. Дерябина, П.В. Гильчук // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 4. — С. 310-313. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00010D https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156390 619:616.988:616-076 Цель. Клонировать ген SPAА – поверхностный антиген Er. rhusiopathiae – в плазмидный вектор и экспрессировать белок SpaА в E. coli. Методы. Расчет и синтез олигонуклеотидных праймеров, полиме -
 разная цепная реакция, клонирование, экспрессия рекомбинантных белков в E. coli, электрофорез в
 агарозе и полиакриламидном геле. Результаты. Полноразмерный и усеченный ген SPAА Er. rhusiopathiae клонирован в экспрессирующую плазмиду рЕТ24а(+). Экспрессия полного гена не сопровождается наработкой значительного количества рекомбинантного белка, предположительно, вследствие его токсичности для клеток E. coli. Элиминация из полноразмерного гена фрагмента, кодирующего насыщенную пролином область, и домена тандемных повторов, а также получение усеченного варианта гена
 приводят к устойчивому синтезу рекомбинантного продукта с ожидаемой молекулярной массой. Выводы. Получена рекомбинантная плазмида, содержащая фрагмент гена SPAА Er. rhusiopathiae, что позволяет выделять в препаративних количествах в E. coli рекомбинантный белок с м. м. 47 кДа.
 Ключевые слова: Erysipelothrix rhusiopathiae, ген SPAА, рекомбинантный белок. Aim. Cloning of Er. rhusiopathiae surface antigen – SPAА gene
 into plasmid vector and its expression in E. coli. Methods.
 Oligonucleotide primers design and synthesis, polymerase chain
 reaction, cloning, recombinant proteins expression in E. coli,
 electrophoresis in agarose, PAGE. Results. The full-size and
 truncated Er. rhusiopathiae SPAА genes were cloned into
 expression plasmid рЕТ24а(+). The expression of full-size gene
 didn't result in significant recombinant protein production,
 presumably due to its toxicity for E. coli cells. The elimination of
 fragment coding for proline-rich region and tandem repeats
 domain from full-size gene led to production truncated variant of
 recombinant protein with expected molecular mass. Conclusions.
 The recombinant plasmid containing fragment of Er. rhusiopathiae
 SPAА gene was constructed. It allows obtaining preparative
 amount recombinant protein with m. m. 47 kDa in E. coli.
 Keywords: Erysipelothrix rhusiopathiae, SPAА gene, recombinant
 protein. Мета. Клонувати ген SPAА – поверхневий антиген Er. rhusiopathiae – у плазмідний вектор та експресувати білок SpaА в E. coli. Методи. Розрахунок і синтез олігонуклеотидних праймерів, полімеразна ланцюгова реакція, клонування, експресія рекомбінантних білків у Е.coli, електрофорез в агарозі та поліакриламідному
 гелі. Результати. Повнорозмірний і усічений ген SPAА Er. rhusiopathiae клоновано в експресуючу плазміду рЕТ24а(+). Експресія
 повного гена не супроводжується синтезом значної кількості рекомбінантного білка, очевидно, внаслідок його токсичності для
 клітин E. coli. Елімінація з повнорозмірного гена фрагмента, що
 кодує насичену проліном ділянку, і домену тандемних повторів, а
 також одержання усіченого варіанта гена призводять до стабільного синтезу рекомбінантного продукту з очікуваною молекулярною масою. Висновки. Отримано рекомбінантну плазміду, яка містить фрагмент гена SPAА Er. rhusiopathiae, що дозволяє виділяти у препаративних кількостях в E. coli рекомбінантний білок з м. м. 47 кДа.
 Ключові слова: Erysipelothrix rhusiopathiae, ген SPAА, рекомбінантний білок ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вiopolymers and Cell Short Communications Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli Cloning and expression of Erysipelothrix rhusiopathiae SPAА gene in Escherichia coli Клонування та експресія гена SPAА Erysipelothrix rhusiopathiae в Escherichia coli Article published earlier |
| spellingShingle | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli Дерябин, О.Н. Дерябина, Е.Г. Гильчук, П.В. Short Communications |
| title | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli |
| title_alt | Cloning and expression of Erysipelothrix rhusiopathiae SPAА gene in Escherichia coli Клонування та експресія гена SPAА Erysipelothrix rhusiopathiae в Escherichia coli |
| title_full | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli |
| title_fullStr | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli |
| title_full_unstemmed | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli |
| title_short | Клонирование и экспрессия гена SPAА Еrysipelothrix rhusiopathiae в Еscherichia coli |
| title_sort | клонирование и экспрессия гена spaа еrysipelothrix rhusiopathiae в еscherichia coli |
| topic | Short Communications |
| topic_facet | Short Communications |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156390 |
| work_keys_str_mv | AT derâbinon klonirovanieiékspressiâgenaspaaerysipelothrixrhusiopathiaevescherichiacoli AT derâbinaeg klonirovanieiékspressiâgenaspaaerysipelothrixrhusiopathiaevescherichiacoli AT gilʹčukpv klonirovanieiékspressiâgenaspaaerysipelothrixrhusiopathiaevescherichiacoli AT derâbinon cloningandexpressionoferysipelothrixrhusiopathiaespaageneinescherichiacoli AT derâbinaeg cloningandexpressionoferysipelothrixrhusiopathiaespaageneinescherichiacoli AT gilʹčukpv cloningandexpressionoferysipelothrixrhusiopathiaespaageneinescherichiacoli AT derâbinon klonuvannâtaekspresíâgenaspaaerysipelothrixrhusiopathiaevescherichiacoli AT derâbinaeg klonuvannâtaekspresíâgenaspaaerysipelothrixrhusiopathiaevescherichiacoli AT gilʹčukpv klonuvannâtaekspresíâgenaspaaerysipelothrixrhusiopathiaevescherichiacoli |