Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60
Описан метод получения рекомбинантного шаперона GroEL (прокариотного гомолога эукариотного шаперона Hsp60), включающий экспрессию белка в клетках Escherichia coli с последующей очисткой белка градиентным высаливанием из лизата клеток-продуцентов, гель-фильтрацией на сефакриле-8300 и ионообменной хро...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Біополімери і клітина |
|---|---|
| Datum: | 2006 |
| Hauptverfasser: | , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2006
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156476 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 / Л.Н. Капустян, Р.Г. Киямова, В.С. Гришкова, А.Г. Терентьев, В.В. Филоненко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 117-120. — Бібліогр.: 20 назв. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862724126222843904 |
|---|---|
| author | Капустян, Л.Н. Киямова, Р.Г. Гришкова, В.С. Терентьев, А.Г. Филоненко, В.В. Сидорик, Л.Л. |
| author_facet | Капустян, Л.Н. Киямова, Р.Г. Гришкова, В.С. Терентьев, А.Г. Филоненко, В.В. Сидорик, Л.Л. |
| citation_txt | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 / Л.Н. Капустян, Р.Г. Киямова, В.С. Гришкова, А.Г. Терентьев, В.В. Филоненко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 117-120. — Бібліогр.: 20 назв. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Біополімери і клітина |
| description | Описан метод получения рекомбинантного шаперона GroEL (прокариотного гомолога эукариотного шаперона Hsp60), включающий экспрессию белка в клетках Escherichia coli с последующей очисткой белка градиентным высаливанием из лизата клеток-продуцентов, гель-фильтрацией на сефакриле-8300 и ионообменной хроматографией на MonoQ HR 5/5. Данный метод позволяет эффективно наработать белок GroEL 95 %-й степени очистки в препаративных количествах. Рекомбинантный белок затем использовали для получения поликлональных анти-GroEL антител и синтеза аффинной колонки. Показан иммунологический перекрест аффинно очищенных поликлональных анти-GroEL антител с представителями семейства Hsp60 в лизатах органов и клеток различных видов млекопитающих — от мыши до человека, что позволяет использовать данные антитела при изучении изменения уровней экспрессии и клеточной локализации Hsp60 в случае аутоиммунных и раковых патологий человека
Описано метод одержання і очищення рекомбінантного шаперону GroEL (прокаріотного гомолога еукаріотного шаперону Hsp60), що включає експресію білка в клітинах Escherichia coli з наступним градієнтним висолюванням з лізату клітин-продуцентів, гель-фільтрацією на сефакрилі-SZQO та іонообмінною хроматографією на MonoQ HR 5/5. Такий метод дозволив ефективно напрацювати білок GroEL у препаративних кількостях, який потім використовували для отримання анmu-GroEL антитіл і синтезу афінної колонки. Показано імуно логічний перехрест афінно очищених поліклональних анти-GroEL антитіл з білком родини Hsp60 у лізатах органів і клітин різних видів ссавців — від миші до людини, що дозволяє використовувати ці антитіла при вивченні змін рівня експресії і клітинної локалізації Hsp60 в разі аутоімунних і ракових патологій людини.
The method of obtaining and purification of recombinant chaperon GroEL (prokaryotic homolog of eukaryotic chaperon Hsp60) including the protein expression in E. coli cells, precipitation with saturated ammonium sulphate from a producent lysate, gel-filtration on Sephacryl-300 column and ion-exchange chromatography on MonoQ HR 5/5 column, is described. The present method allows effective obtaining of the preparative amount of the GroEL protein of 95 % purity. The recombinant protein was used for the anti-GroEL antibodies production and synthesis of the affine column. The immunological cross-reactivity of polyclonal affinepurified anti-GroEL antibodies and members of Hsp60 family from different organs and cells lysates of different mammals, from mouse to human, have been revealed, which allows using these antibodies for research of Hsp60 expression alterations and cell localization at human autoimmune and cancer pathologies.
|
| first_indexed | 2025-12-07T18:45:21Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156476 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T18:45:21Z |
| publishDate | 2006 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Капустян, Л.Н. Киямова, Р.Г. Гришкова, В.С. Терентьев, А.Г. Филоненко, В.В. Сидорик, Л.Л. 2019-06-18T14:33:29Z 2019-06-18T14:33:29Z 2006 Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 / Л.Н. Капустян, Р.Г. Киямова, В.С. Гришкова, А.Г. Терентьев, В.В. Филоненко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 117-120. — Бібліогр.: 20 назв. — рос., англ. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000724 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156476 577.21 Описан метод получения рекомбинантного шаперона GroEL (прокариотного гомолога эукариотного шаперона Hsp60), включающий экспрессию белка в клетках Escherichia coli с последующей очисткой белка градиентным высаливанием из лизата клеток-продуцентов, гель-фильтрацией на сефакриле-8300 и ионообменной хроматографией на MonoQ HR 5/5. Данный метод позволяет эффективно наработать белок GroEL 95 %-й степени очистки в препаративных количествах. Рекомбинантный белок затем использовали для получения поликлональных анти-GroEL антител и синтеза аффинной колонки. Показан иммунологический перекрест аффинно очищенных поликлональных анти-GroEL антител с представителями семейства Hsp60 в лизатах органов и клеток различных видов млекопитающих — от мыши до человека, что позволяет использовать данные антитела при изучении изменения уровней экспрессии и клеточной локализации Hsp60 в случае аутоиммунных и раковых патологий человека Описано метод одержання і очищення рекомбінантного шаперону GroEL (прокаріотного гомолога еукаріотного шаперону Hsp60), що включає експресію білка в клітинах Escherichia coli з наступним градієнтним висолюванням з лізату клітин-продуцентів, гель-фільтрацією на сефакрилі-SZQO та іонообмінною хроматографією на MonoQ HR 5/5. Такий метод дозволив ефективно напрацювати білок GroEL у препаративних кількостях, який потім використовували для отримання анmu-GroEL антитіл і синтезу афінної колонки. Показано імуно логічний перехрест афінно очищених поліклональних анти-GroEL антитіл з білком родини Hsp60 у лізатах органів і клітин різних видів ссавців — від миші до людини, що дозволяє використовувати ці антитіла при вивченні змін рівня експресії і клітинної локалізації Hsp60 в разі аутоімунних і ракових патологій людини. The method of obtaining and purification of recombinant chaperon GroEL (prokaryotic homolog of eukaryotic chaperon Hsp60) including the protein expression in E. coli cells, precipitation with saturated ammonium sulphate from a producent lysate, gel-filtration on Sephacryl-300 column and ion-exchange chromatography on MonoQ HR 5/5 column, is described. The present method allows effective obtaining of the preparative amount of the GroEL protein of 95 % purity. The recombinant protein was used for the anti-GroEL antibodies production and synthesis of the affine column. The immunological cross-reactivity of polyclonal affinepurified anti-GroEL antibodies and members of Hsp60 family from different organs and cells lysates of different mammals, from mouse to human, have been revealed, which allows using these antibodies for research of Hsp60 expression alterations and cell localization at human autoimmune and cancer pathologies. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Біополімери і клітина Структура та функції біополімерів Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 Одержання рекомбінантного шаперону GroEL і його имунологічна крос-реактивність з Hsp60 Obtaining recombinant chaperon CroEL and its immunological cross-reactivity with Hsp60 Article published earlier |
| spellingShingle | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 Капустян, Л.Н. Киямова, Р.Г. Гришкова, В.С. Терентьев, А.Г. Филоненко, В.В. Сидорик, Л.Л. Структура та функції біополімерів |
| title | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 |
| title_alt | Одержання рекомбінантного шаперону GroEL і його имунологічна крос-реактивність з Hsp60 Obtaining recombinant chaperon CroEL and its immunological cross-reactivity with Hsp60 |
| title_full | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 |
| title_fullStr | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 |
| title_full_unstemmed | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 |
| title_short | Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 |
| title_sort | получение рекомбинантного шаперона groel и его иммунологическая кросс-реактивность с hsp60 |
| topic | Структура та функції біополімерів |
| topic_facet | Структура та функції біополімерів |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156476 |
| work_keys_str_mv | AT kapustânln polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60 AT kiâmovarg polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60 AT griškovavs polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60 AT terentʹevag polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60 AT filonenkovv polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60 AT sidorikll polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60 AT kapustânln oderžannârekombínantnogošaperonugroelíiogoimunologíčnakrosreaktivnístʹzhsp60 AT kiâmovarg oderžannârekombínantnogošaperonugroelíiogoimunologíčnakrosreaktivnístʹzhsp60 AT griškovavs oderžannârekombínantnogošaperonugroelíiogoimunologíčnakrosreaktivnístʹzhsp60 AT terentʹevag oderžannârekombínantnogošaperonugroelíiogoimunologíčnakrosreaktivnístʹzhsp60 AT filonenkovv oderžannârekombínantnogošaperonugroelíiogoimunologíčnakrosreaktivnístʹzhsp60 AT sidorikll oderžannârekombínantnogošaperonugroelíiogoimunologíčnakrosreaktivnístʹzhsp60 AT kapustânln obtainingrecombinantchaperoncroelanditsimmunologicalcrossreactivitywithhsp60 AT kiâmovarg obtainingrecombinantchaperoncroelanditsimmunologicalcrossreactivitywithhsp60 AT griškovavs obtainingrecombinantchaperoncroelanditsimmunologicalcrossreactivitywithhsp60 AT terentʹevag obtainingrecombinantchaperoncroelanditsimmunologicalcrossreactivitywithhsp60 AT filonenkovv obtainingrecombinantchaperoncroelanditsimmunologicalcrossreactivitywithhsp60 AT sidorikll obtainingrecombinantchaperoncroelanditsimmunologicalcrossreactivitywithhsp60 |