Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus
Aim. Creation of glyphosate-resistant canola plants expressing bifunctional hybrid desC::licBM3 gene. In the hybrid gene the sequence of DesC desaturase of cyanobacterium S. vulcanus without plastid targeting was fused with the sequence of thermostable lichenase reporter LicBM3 gene. Methods. Agro...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Вiopolymers and Cell |
|---|---|
| Datum: | 2012 |
| Hauptverfasser: | , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | English |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2012
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156793 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus / L.O. Sakhno, I.M. Gerasymenko, I.K. Komarnitsskii, Y.V. Sheludko, I.V. Goldenkova-Pavlova // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 6. — С. 449-455. — Бібліогр.: 25 назв. — англ., рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156793 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Sakhno, L.O. Gerasymenko, I.M. Komarnitsskii, I.K. Sheludko, Y.V. Goldenkova-Pavlova, I.V. 2019-06-18T20:29:21Z 2019-06-18T20:29:21Z 2012 Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus / L.O. Sakhno, I.M. Gerasymenko, I.K. Komarnitsskii, Y.V. Sheludko, I.V. Goldenkova-Pavlova // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 6. — С. 449-455. — Бібліогр.: 25 назв. — англ., рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000135 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156793 575.827:604.6:582.683.2 Aim. Creation of glyphosate-resistant canola plants expressing bifunctional hybrid desC::licBM3 gene. In the hybrid gene the sequence of DesC desaturase of cyanobacterium S. vulcanus without plastid targeting was fused with the sequence of thermostable lichenase reporter LicBM3 gene. Methods. Agrobacterium tumefaciensmediated transformation, PCR, quantitative and qualitative determination of lichenase activity, genetic analysis. Results. Transgenic canola plants, carring the enolpyruvat shikimat phosphate syntase gene (epsps), conferring on plants resistance to phosphonomethyl glycine herbicides (Roundup), as well as the desC::licBM3 gene, were selected. The presence of transgenes was confimed by multiplex PCR. The epsps gene expression in canola was shown at the transcription level, during in vitro growth and after greenhouse herbicide treatment. Activity of the licBM3 gene product as a part of hybrid protein allowed quantitative and qualiative estimation of the desaturase gene expression. Inheritance of heterologous genes and their expression in the first generation were investigated. Conclusions. Transgenic canola plants were obtained, the presence of trangenes in plant genome was proved and expression of the target genes was detected. Keywords: Brassica napus, desC, epsps, licBM3, lichenase. Цель. Создание растений рапса, устойчивых к глифосату и экспрессирующих бифункциональный гибридный ген desC::licBM3, в котором последовательность десатуразы DesC цианобактерии S. vulcanus без сигнала транспорта в пластиды слита с последовательностью гена репортерного белка термостабильной лихеназы LicB Clostridium thermocellum. Методы. Agrobacterium tumefaciens-опосредованная трансформация, ПЦР, качественное и количественное определение активности термостабильной лихеназы, генетический анализ. Результаты. Получены трансгенные растения рапса, несущие два целевых гена: енолпируватшикиматфосфатсинтазы (epsps), обеспечивающего устойчивость растений к гербицидам на основе фосфонометилглицина, и гена desC::licBM3. Присутствие трансгенов в геноме растений доказано методом мультиплексной ПЦР. Экспрессия гена epsps показана на уровне транскрипции, в условиях in vitro и in vivo (теплицa). Наличие продукта гена licBM3 в составе гибридного белка позволило оценить экспрессию слитого с ним гена десатуразы. Прослежено наследование введенных генов и их экспрессия в первом поколении. Выводы. Получены линии трансгенных растений рапса, подтверждено присутствие трансгенов в геноме растений и доказана экспрессия целевых генов. Ключевые слова: Brassica napus, epsps, desC, licBM3, лихеназа. Мета. Створення стійких до гербіциду Roundup рослин ріпаку, що експресують біфункціональний гібридний ген desC::licBM3, в якому послідовність десатурази DesC ціанобактерії S. vulcanus без сигналу транспорту в пластиди злита з послідовністю гена репортерного білка ліхенази LicBM3 Clostridium thermocellum. Методи. Agrobacterium tumefaciens-опосередкована трансформація, ПЛР, якісне і кількісне визначення активності термостабільної ліхенази, генетичний аналіз. Результати. Отримано трансгенні рослини ріпаку, які несуть два цільових гени: єнолпіруватшикі- матфосфатсинтази (epsps), що забезпечує стійкість рослин до гербіцидів на основі фосфонометилгліцину, і гена desC::licBM3. Присутність трансгенів у геномі рослин підтверджено методом мультиплексної ПЛР. Експресію гена epsps показано на рівні транскрипціі, за умов in vitro та in vivo (теплиця). Наявність продукту гена licBM3 у складі гібридного білка дозволила оцінити експресію злитого з ним гена десатурази. Простежено успадкування введених генів і їхня експресія в першому поколінні. Висновки. Отримано лінії трансгенних рослин ріпаку, підтверджено присутність трансгенів у геномі рослин і доведено експресію цільових генів. Ключові слова: Brassica napus, epsps, desC, licBM3, ліхеназа. The work was supported with the grant of NAS of Ukraine UkrINTEI No. 0110U 006062, grant of GFFDRFFD F40.4/021 and grant of RFFR No. 11-04-90466Ukr_f_a. en Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вiopolymers and Cell Molecular and Cell Biotechnologies Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus Создание устойчивых к глифосату растений Brassica napus L., экспрессирующих десатуразу DesC цианобактерии Synechococcus vulcanus Створення стійких до гліфосату рослин Brassica napus L., які експресують десатуразу DesC ціанобактерії Synechococcus vulcanus Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus |
| spellingShingle |
Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus Sakhno, L.O. Gerasymenko, I.M. Komarnitsskii, I.K. Sheludko, Y.V. Goldenkova-Pavlova, I.V. Molecular and Cell Biotechnologies |
| title_short |
Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus |
| title_full |
Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus |
| title_fullStr |
Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus |
| title_full_unstemmed |
Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus |
| title_sort |
creation of glyphosate-resistant brassica napus l. plants expressing desc desaturase of cyanobacterium synechococcus vulcanus |
| author |
Sakhno, L.O. Gerasymenko, I.M. Komarnitsskii, I.K. Sheludko, Y.V. Goldenkova-Pavlova, I.V. |
| author_facet |
Sakhno, L.O. Gerasymenko, I.M. Komarnitsskii, I.K. Sheludko, Y.V. Goldenkova-Pavlova, I.V. |
| topic |
Molecular and Cell Biotechnologies |
| topic_facet |
Molecular and Cell Biotechnologies |
| publishDate |
2012 |
| language |
English |
| container_title |
Вiopolymers and Cell |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Создание устойчивых к глифосату растений Brassica napus L., экспрессирующих десатуразу DesC цианобактерии Synechococcus vulcanus Створення стійких до гліфосату рослин Brassica napus L., які експресують десатуразу DesC ціанобактерії Synechococcus vulcanus |
| description |
Aim. Creation of glyphosate-resistant canola plants expressing bifunctional hybrid desC::licBM3 gene. In the
hybrid gene the sequence of DesC desaturase of cyanobacterium S. vulcanus without plastid targeting was fused
with the sequence of thermostable lichenase reporter LicBM3 gene. Methods. Agrobacterium tumefaciensmediated transformation, PCR, quantitative and qualitative determination of lichenase activity, genetic
analysis. Results. Transgenic canola plants, carring the enolpyruvat shikimat phosphate syntase gene (epsps),
conferring on plants resistance to phosphonomethyl glycine herbicides (Roundup), as well as the desC::licBM3
gene, were selected. The presence of transgenes was confimed by multiplex PCR. The epsps gene expression in
canola was shown at the transcription level, during in vitro growth and after greenhouse herbicide treatment.
Activity of the licBM3 gene product as a part of hybrid protein allowed quantitative and qualiative estimation of
the desaturase gene expression. Inheritance of heterologous genes and their expression in the first generation
were investigated. Conclusions. Transgenic canola plants were obtained, the presence of trangenes in plant
genome was proved and expression of the target genes was detected.
Keywords: Brassica napus, desC, epsps, licBM3, lichenase.
Цель. Создание растений рапса, устойчивых к глифосату и экспрессирующих бифункциональный гибридный ген desC::licBM3, в котором последовательность десатуразы DesC цианобактерии S. vulcanus без сигнала транспорта в пластиды слита с последовательностью гена репортерного белка термостабильной лихеназы LicB Clostridium thermocellum. Методы. Agrobacterium tumefaciens-опосредованная трансформация, ПЦР, качественное и количественное определение активности термостабильной лихеназы, генетический анализ. Результаты. Получены трансгенные растения рапса, несущие два целевых гена: енолпируватшикиматфосфатсинтазы (epsps), обеспечивающего устойчивость растений к гербицидам на основе фосфонометилглицина, и гена desC::licBM3. Присутствие трансгенов в геноме растений доказано методом мультиплексной ПЦР. Экспрессия гена epsps показана на уровне транскрипции, в условиях in vitro и in vivo (теплицa). Наличие продукта гена licBM3 в составе гибридного белка позволило оценить экспрессию слитого с ним гена десатуразы. Прослежено наследование введенных генов и их экспрессия в первом поколении. Выводы. Получены линии трансгенных растений рапса, подтверждено присутствие трансгенов в геноме растений и доказана экспрессия целевых генов.
Ключевые слова: Brassica napus, epsps, desC, licBM3, лихеназа.
Мета. Створення стійких до гербіциду Roundup рослин ріпаку, що експресують біфункціональний гібридний ген desC::licBM3, в якому послідовність десатурази DesC ціанобактерії S. vulcanus без сигналу транспорту в пластиди злита з послідовністю гена репортерного білка ліхенази LicBM3 Clostridium thermocellum. Методи. Agrobacterium tumefaciens-опосередкована трансформація, ПЛР, якісне і кількісне визначення активності термостабільної ліхенази, генетичний аналіз. Результати. Отримано трансгенні рослини ріпаку, які несуть два цільових гени: єнолпіруватшикі- матфосфатсинтази (epsps), що забезпечує стійкість рослин до гербіцидів на основі фосфонометилгліцину, і гена desC::licBM3. Присутність трансгенів у геномі рослин підтверджено методом мультиплексної ПЛР. Експресію гена epsps показано на рівні транскрипціі, за умов in vitro та in vivo (теплиця). Наявність продукту гена licBM3 у складі гібридного білка дозволила оцінити експресію злитого з ним гена десатурази. Простежено успадкування введених генів і їхня експресія в першому поколінні. Висновки. Отримано лінії трансгенних рослин ріпаку, підтверджено присутність трансгенів у геномі рослин і доведено експресію цільових генів.
Ключові слова: Brassica napus, epsps, desC, licBM3, ліхеназа.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156793 |
| citation_txt |
Creation of glyphosate-resistant Brassica napus L. plants expressing DesC desaturase of cyanobacterium Synechococcus vulcanus / L.O. Sakhno, I.M. Gerasymenko, I.K. Komarnitsskii, Y.V. Sheludko, I.V. Goldenkova-Pavlova // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 6. — С. 449-455. — Бібліогр.: 25 назв. — англ., рос. |
| work_keys_str_mv |
AT sakhnolo creationofglyphosateresistantbrassicanapuslplantsexpressingdescdesaturaseofcyanobacteriumsynechococcusvulcanus AT gerasymenkoim creationofglyphosateresistantbrassicanapuslplantsexpressingdescdesaturaseofcyanobacteriumsynechococcusvulcanus AT komarnitsskiiik creationofglyphosateresistantbrassicanapuslplantsexpressingdescdesaturaseofcyanobacteriumsynechococcusvulcanus AT sheludkoyv creationofglyphosateresistantbrassicanapuslplantsexpressingdescdesaturaseofcyanobacteriumsynechococcusvulcanus AT goldenkovapavlovaiv creationofglyphosateresistantbrassicanapuslplantsexpressingdescdesaturaseofcyanobacteriumsynechococcusvulcanus AT sakhnolo sozdanieustoičivyhkglifosaturasteniibrassicanapuslékspressiruûŝihdesaturazudesccianobakteriisynechococcusvulcanus AT gerasymenkoim sozdanieustoičivyhkglifosaturasteniibrassicanapuslékspressiruûŝihdesaturazudesccianobakteriisynechococcusvulcanus AT komarnitsskiiik sozdanieustoičivyhkglifosaturasteniibrassicanapuslékspressiruûŝihdesaturazudesccianobakteriisynechococcusvulcanus AT sheludkoyv sozdanieustoičivyhkglifosaturasteniibrassicanapuslékspressiruûŝihdesaturazudesccianobakteriisynechococcusvulcanus AT goldenkovapavlovaiv sozdanieustoičivyhkglifosaturasteniibrassicanapuslékspressiruûŝihdesaturazudesccianobakteriisynechococcusvulcanus AT sakhnolo stvorennâstíikihdoglífosaturoslinbrassicanapuslâkíekspresuûtʹdesaturazudesccíanobakteríísynechococcusvulcanus AT gerasymenkoim stvorennâstíikihdoglífosaturoslinbrassicanapuslâkíekspresuûtʹdesaturazudesccíanobakteríísynechococcusvulcanus AT komarnitsskiiik stvorennâstíikihdoglífosaturoslinbrassicanapuslâkíekspresuûtʹdesaturazudesccíanobakteríísynechococcusvulcanus AT sheludkoyv stvorennâstíikihdoglífosaturoslinbrassicanapuslâkíekspresuûtʹdesaturazudesccíanobakteríísynechococcusvulcanus AT goldenkovapavlovaiv stvorennâstíikihdoglífosaturoslinbrassicanapuslâkíekspresuûtʹdesaturazudesccíanobakteríísynechococcusvulcanus |
| first_indexed |
2025-12-07T20:37:27Z |
| last_indexed |
2025-12-07T20:37:27Z |
| _version_ |
1850883280984866816 |