Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants
Цель. Исследовать влияние нокаута гена pttg-1 на гликом некоторых паренхиматозных органов мышей с применением лектиновой гистохимии. Методы. Углеводные детерминанты DGalNAc, DGlcNAc, NeuNAc выявляли с использованием лектинов сои и завязей пшеницы, меченных пероксидазой хрена, с последующей визуализа...
Saved in:
| Published in: | Вiopolymers and Cell |
|---|---|
| Date: | 2012 |
| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article |
| Language: | English |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156826 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants / O.Yu. Varyvoda, Yu.Z. Filyak, A.D. Lutsyk, R.S. Stoika // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 2. — С. 129-133. — Бібліогр.: 15 назв. — англ., укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156826 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Varyvoda, O.Yu. Filyak, Ye.Z. Lutsyk, A.D. Stoika, R.S. 2019-06-19T06:34:25Z 2019-06-19T06:34:25Z 2012 Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants / O.Yu. Varyvoda, Yu.Z. Filyak, A.D. Lutsyk, R.S. Stoika // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 2. — С. 129-133. — Бібліогр.: 15 назв. — англ., укр. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.00003F https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156826 611-018:547.96-019:575.172.1 Цель. Исследовать влияние нокаута гена pttg-1 на гликом некоторых паренхиматозных органов мышей с применением лектиновой гистохимии. Методы. Углеводные детерминанты DGalNAc, DGlcNAc, NeuNAc выявляли с использованием лектинов сои и завязей пшеницы, меченных пероксидазой хрена, с последующей визуализацией диаминобензидином. Тест-объектами служили семенники и почки мышей линии BL6/C57 с нокаутом гена pttg-1 и мышей дикого типа. Возраст животных обеих групп составлял 1 месяц. Результаты. Нокаут гена pttg-1 сопровождается возрастанием экспонирования углеводных детерминант DGalNAc в составе комплекса Гольджи вторичных сперматоцитов, щеточной каемки почечных трубочек и на люменальной поверхности собирательных протоков. Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что отсуствие гена pttg-1 может приводить к изменениям в процессинге углеводсодержащих биополимеров в организме млекопитающих. Ключевые слова: нокаут гена pttg-1, процессинг гликополимеров, лектиновая гистохимия. Мета. Дослідити вплив нокауту гена pttg-1 на гліком деяких паренхіматозних органів мишей, використавши для цього засоби лектинової гістохімії. Методи. Вуглеводні детермінанти DGalNAc, DGlcNAc і NeuNAc виявляли за допомогою лектинів сої та зародків пшениці, мічених пероксидазою хрону, з наступною візуалізацією діамінобензидином. Тест-об’єктами слугували яєчка та нирки мишей лінії BL6/C57 з нокаутом гена pttg-1 і мишей дикого типу віком 1 місяць. Результати. Нокаут гена pttg-1 супроводжується підвищеним експонуванням вуглеводних детермінант DGalNAc у складі комплексу Гольджі вторинних сперматоцитів, щіточкової облямівки ниркових трубочок та на люменальній поверхні збірних ниркових проток. Висновки. Отримані результати свідчать про те, що відсутність гена pttg-1 може призвести до змін у процесингу вуглеводвмісних біополімерів в організмі ссавців. Ключові слова: нокаут гена pttg-1, процесинг глікополімерів, лектинова гістохімія. Aim. To investigate the influence of pituitary tumor transforming gene (pttg-1) knockout on glycome of parenchimal organs by means of lectin histochemistry. Methods. DGalNAc, DGlcNAc, NeuNAc carbohydrate determinants were labelled with soybean agglutinin (SBA) and wheat germ agglutinin (WGA), conjugated to peroxidase, with subsequent visualization of the lectin-binding sites with diaminobenzidine. The testes and kidneys of murine strain BL6/C57 with the pttg-1 gene knockout (PTTG-KO) were compared to the wild type (PTTG-WT) animals, both groups 1 month of age. Results. Knockout of the pttg-1 gene was accompanied by enhanced exposure of the DGalNAc sugar residues within the Golgi complex of secondary spermatocytes, in a brush border of renal tubules and on the lumenal surface of collecting ducts. Conclusions. This study suggests that knockout of the pttg-1 gene may lead to the changes in carbohydrate processing in mammalian organism. Keywords: knockout of pttg-1 gene, glycoconjugate processing, lectin histochemistry. en Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вiopolymers and Cell Structure and Function of Biopolymers Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants Нокаут гена pttg у мишей супроводжується підвищеним рівнем експонування вуглеводних детермінант DGalNAc Нокаут гена pttg-1 у мышей сопровождается возрастанием уровня экспонирования углеводных детерминант DGalNAc Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants |
| spellingShingle |
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants Varyvoda, O.Yu. Filyak, Ye.Z. Lutsyk, A.D. Stoika, R.S. Structure and Function of Biopolymers |
| title_short |
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants |
| title_full |
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants |
| title_fullStr |
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants |
| title_full_unstemmed |
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants |
| title_sort |
mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of dgalnac carbohydrate determinants |
| author |
Varyvoda, O.Yu. Filyak, Ye.Z. Lutsyk, A.D. Stoika, R.S. |
| author_facet |
Varyvoda, O.Yu. Filyak, Ye.Z. Lutsyk, A.D. Stoika, R.S. |
| topic |
Structure and Function of Biopolymers |
| topic_facet |
Structure and Function of Biopolymers |
| publishDate |
2012 |
| language |
English |
| container_title |
Вiopolymers and Cell |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Нокаут гена pttg у мишей супроводжується підвищеним рівнем експонування вуглеводних детермінант DGalNAc Нокаут гена pttg-1 у мышей сопровождается возрастанием уровня экспонирования углеводных детерминант DGalNAc |
| description |
Цель. Исследовать влияние нокаута гена pttg-1 на гликом некоторых паренхиматозных органов мышей с применением лектиновой гистохимии. Методы. Углеводные детерминанты DGalNAc, DGlcNAc, NeuNAc выявляли с использованием лектинов сои и завязей пшеницы, меченных пероксидазой хрена, с последующей визуализацией диаминобензидином. Тест-объектами служили семенники и почки мышей линии BL6/C57 с нокаутом гена pttg-1 и мышей дикого типа. Возраст животных обеих групп составлял 1 месяц. Результаты. Нокаут гена pttg-1 сопровождается возрастанием экспонирования углеводных детерминант DGalNAc в составе комплекса Гольджи вторичных сперматоцитов, щеточной каемки почечных трубочек и на люменальной поверхности собирательных протоков. Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что отсуствие гена pttg-1 может приводить к изменениям в процессинге углеводсодержащих биополимеров в организме млекопитающих.
Ключевые слова: нокаут гена pttg-1, процессинг гликополимеров, лектиновая гистохимия.
Мета. Дослідити вплив нокауту гена pttg-1 на гліком деяких паренхіматозних органів мишей, використавши для цього засоби лектинової гістохімії. Методи. Вуглеводні детермінанти DGalNAc, DGlcNAc і NeuNAc виявляли за допомогою лектинів сої та зародків пшениці, мічених пероксидазою хрону, з наступною візуалізацією діамінобензидином. Тест-об’єктами слугували яєчка та нирки мишей лінії BL6/C57 з нокаутом гена pttg-1 і мишей дикого типу віком 1 місяць. Результати. Нокаут гена pttg-1 супроводжується підвищеним експонуванням вуглеводних детермінант DGalNAc у складі комплексу Гольджі вторинних сперматоцитів, щіточкової облямівки ниркових трубочок та на люменальній поверхні збірних ниркових проток. Висновки. Отримані результати свідчать про те, що відсутність гена pttg-1 може призвести до змін у процесингу вуглеводвмісних біополімерів в організмі ссавців.
Ключові слова: нокаут гена pttg-1, процесинг глікополімерів, лектинова гістохімія.
Aim. To investigate the influence of pituitary tumor transforming gene (pttg-1) knockout on glycome of parenchimal organs by means of lectin histochemistry. Methods. DGalNAc, DGlcNAc, NeuNAc carbohydrate determinants were labelled with soybean agglutinin (SBA) and wheat germ agglutinin (WGA), conjugated to peroxidase, with subsequent visualization of the lectin-binding sites with diaminobenzidine. The testes and kidneys of murine strain BL6/C57 with the pttg-1 gene knockout (PTTG-KO) were compared to the wild type (PTTG-WT) animals, both groups 1 month of age. Results. Knockout of the pttg-1 gene was accompanied by enhanced exposure of the DGalNAc sugar residues within the Golgi complex of secondary spermatocytes, in a brush border of renal tubules and on the lumenal surface of collecting ducts. Conclusions. This study suggests that knockout of the pttg-1 gene may lead to the changes in carbohydrate processing in mammalian organism.
Keywords: knockout of pttg-1 gene, glycoconjugate processing, lectin histochemistry.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156826 |
| citation_txt |
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants / O.Yu. Varyvoda, Yu.Z. Filyak, A.D. Lutsyk, R.S. Stoika // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 2. — С. 129-133. — Бібліогр.: 15 назв. — англ., укр. |
| work_keys_str_mv |
AT varyvodaoyu micelackingpituitarytumortransforminggeneshowelevatedexposureofdgalnaccarbohydratedeterminants AT filyakyez micelackingpituitarytumortransforminggeneshowelevatedexposureofdgalnaccarbohydratedeterminants AT lutsykad micelackingpituitarytumortransforminggeneshowelevatedexposureofdgalnaccarbohydratedeterminants AT stoikars micelackingpituitarytumortransforminggeneshowelevatedexposureofdgalnaccarbohydratedeterminants AT varyvodaoyu nokautgenapttgumišeisuprovodžuêtʹsâpídviŝenimrívnemeksponuvannâvuglevodnihdetermínantdgalnac AT filyakyez nokautgenapttgumišeisuprovodžuêtʹsâpídviŝenimrívnemeksponuvannâvuglevodnihdetermínantdgalnac AT lutsykad nokautgenapttgumišeisuprovodžuêtʹsâpídviŝenimrívnemeksponuvannâvuglevodnihdetermínantdgalnac AT stoikars nokautgenapttgumišeisuprovodžuêtʹsâpídviŝenimrívnemeksponuvannâvuglevodnihdetermínantdgalnac AT varyvodaoyu nokautgenapttg1umyšeisoprovoždaetsâvozrastaniemurovnâéksponirovaniâuglevodnyhdeterminantdgalnac AT filyakyez nokautgenapttg1umyšeisoprovoždaetsâvozrastaniemurovnâéksponirovaniâuglevodnyhdeterminantdgalnac AT lutsykad nokautgenapttg1umyšeisoprovoždaetsâvozrastaniemurovnâéksponirovaniâuglevodnyhdeterminantdgalnac AT stoikars nokautgenapttg1umyšeisoprovoždaetsâvozrastaniemurovnâéksponirovaniâuglevodnyhdeterminantdgalnac |
| first_indexed |
2025-11-24T20:44:00Z |
| last_indexed |
2025-11-24T20:44:00Z |
| _version_ |
1850493043536297984 |
| fulltext |
UDC 611-018:547.96-019:575.172.1
Но ка ут ге на pttg у ми шей суп ро вод жується
підви ще ним рівнем ек спо ну ван ня вуг ле вод них
де терміна нт DGalNAc
О. Ю. Ва ри во да, Є. З. Філяк1, О. Д. Лу цик, Р. С. Стой ка1
Львівський національ ний ме дич ний універ си тет імені Да ни ла Га лиць ко го
Вул. Пе ка рська, 69, Львів, Украї на, 79010
Інсти тут біології клітини НАН Украї ни
Вул. Дра го ма но ва, 14/16, Львів, Украї на, 79005
lutsyk@meduniv.lviv.ua
Мета. Дослідити вплив но ка у ту гена pttg-1 на гліком де я ких па ренхіма тоз них органів ми шей, ви ко рис -
тав ши для цьо го за со би лек ти но вої гістохімії. Ме то ди. Вуг ле водні де терміна нти DGalNAc, DGlcNAc і
NeuNAc ви яв ля ли за до по мо гою лек тинів сої та за родків пше ниці, міче них пе рок си да зою хро ну, з на ступ -
ною візуалізацією діаміно бен зи ди ном. Тест-об’єкта ми слу гу ва ли яєчка та ни рки ми шей лінії BL6/C57 з
но ка у том гена pttg-1 і ми шей ди ко го типу віком 1 місяць. Ре зуль та ти. Но ка ут гена pttg-1 суп ро вод жу-
ється підви ще ним ек спо ну ван ням вуг ле вод них де термінант DGalNAc у складі ком плек су Гольджі вто -
рин них спер ма то цитів, щіточ ко вої об лямівки ни рко вих тру бо чок та на лю ме нальній по верхні збірних
ни рко вих про ток. Вис нов ки. Отри мані ре зуль та ти свідчать про те, що відсутність гена pttg-1 може
при звес ти до змін у про це син гу вуг ле водвмісних біополімерів в організмі ссавців.
Клю чові сло ва: но ка ут гена pttg-1, про це синг гліко полімерів, лек ти но ва гістохімія.
Вступ. Онко ген pttg-1 (pituitary tumor transforming
gene) упер ше ви яв ле но в пух лин них кліти нах гіпо-
фіза щура в 1997 р. [1]. У 1999 році його опи са но у
лю ди ни [2]. Нині зрос тан ня експресії цьо го гена і
рівня про дукції ко до ва но го ним білка се ку ри ну вва-
жа ють однією з на й дос товірніших ознак роз вит ку
аде ном гіпофіза лю ди ни і ссавців [3]. Окрім того,
вста нов ле но, що підви ще на експресія білка PTTG
ха рак тер на для пух лин іншої ло калізації – щи то по-
дібної за ло зи, мо лоч ної за ло зи і пря мої киш ки [4].
Для по глиб лен ня уяв лень сто сов но фізіологіч-
ної ролі ге на pttg-1 в організмі ви ве де но лінію ми -
шей з відсутністю (но ка у том) цьо го ге на [5]. При
збе ре женій фер тиль ності такі миші (pttg-KO) ха -
рак те ри зу ють ся гіпер плазією ти му са у поєднанні з
гіпоплазією се лезінки та яєчок, а та кож тром бо ци то-
пенією [5]. Де що пізніше з’я ви ли ся дані що до при -
гнічен ня у них про цесів ерит ро по е зу [6]. З ви ко ри-
стан ням про те ом ної техніки іден тифіко ва но 18 біл-
ків, експресія яких змінюється в лімфо ци тах ми шей
з но ка у том ге на pttg-1, що вка зує на по шкод жен ня
клю чо вих ла нок імун но го за хис ту [3]. По ка за но та -
кож, що но ка ут ге на спри чи няє по ру шен ня спер ма -
то ге не зуу ми шей [2].
Досліджен ня ме ханізму дії ко до ва но го ге ном
pttg-1 білка се ку ри ну ви я ви ло здатність остан ньо го
пе ре шкод жа ти пе ре дчас но му роз ход жен ню сест-
ри нських хро ма тид в ана фазі міто зу че рез інгібу -
ван ня ак тив ності се па ра зи, а та кож відігра ва ти пев -
ну роль у за без пе ченні стабільності хро мо сом [2,
5]. Вва жа ють, що за вдя ки цим влас ти вос тям се ку -
рин бе ре участь у ре гу ляції клітин но го цик лу, ре па -
рації ДНК та апоп тозі [3].
Відо мо, що вуг ле во ди, які вхо дять до скла ду глі-
коп ро теїнів клітин ної по верхні, мо жуть ви ко ну ва -
ти не ли ше струк тур ну, але й сиг наль ну функції.
129
ISSN 0233–7657. Biopolymers and Cell. 2012. Vol. 28. N 2. P. 129–133
Institute of Molecular Biology and Genetics, NAS of Ukraine, 2012
130
ВА РИ ВО ДА О. Ю., ФІЛЯК Є. З., ЛУЦИК О. Д., СТОЙКА Р. С.
Во ни, зок ре ма, є важ ли ви ми для міжклітин них взає-
модій, а та кож при розпізна ванні пев них типів клі-
тин (на прик лад, апоп тич них) іму но ком пе тентни-
ми кліти на ми, які здійсню ють кліренс в організмі.
Анатомічне вив чен ня ми шей із но ка у том ге на pttg-
1 ви я ви ло суттєво змен ше ну ма су се лезінки і збіль-
ше ну ма су ти му су, що доз во ляє при пус ти ти ау то-
імун ний стан у цих тва рин. Де які по каз ни ки подіб-
но го ста ну виз на чені на ми в іншо му дослідженні [7].
Крім то го, на ми вста нов ле но, що на по верхні клітин,
які всту пи ли на шлях апоп то зу, відбу вається десіа-
лу ван ня гліко кон ’ю гатів мем бран ни ми не й рамініда-
за ми, яке при зво дить до зрос тан ня рівня ек спо ну -
ван ня га лак то зиль них і ма но зиль них за лишків [8].
Відо мо, що мем бранні ве зи ку ли, які фор му ють ся на
по верхні апоп тич них клітин, мо жуть по хо ди ти з
плаз ма тич ної мем бра ни або з ен доп лаз ма тич но го ре-
ти ку лу му, при чо му са ме останнім при та ман на біль-
ша іму но генність і во ни кра ще розпізна ють ся мак -
ро фа га ми [9].
До цьо го ча су особ ли вості гліко му по верхні клі-
тин різних тка нин і органів ми шей із но ка у том ге на
pttg-1 не вив ча ли. Вра хо ву ю чи вик ла де не ви ще, ми
вва жа ли за доцільне пе ревіри ти, чи не кри ють ся в
мож ли вих змінах гліко му при чи ни пев них роз ладів,
які ма ють місце у тва рин із но ка у том ге на pttg-1,
по при збе ре жен ня у них реп ро дук тив ної функції.
Раніше по ка за но, що рівень експресії ге на pttg-1 є
суттєво підви ще ним у кліти нах чо ловічої реп ро дук-
тив ної сис те ми [1, 2].
Ме та цієї ро бо ти – ви ко рис та ти ме то ди лек ти но-
вої гістохімії для вив чен ня впли ву дефіци ту ге на pttg-
1 на гліком де я ких па ренхіма тоз них органів ми шей.
Ма теріали і ме то ди. Тва ри ни. Ми шей з но ка у -
том ге на pttg-1 от ри ма но з На у ко во-дослідно го ін-
сти ту ту при Ме дич но му центрі Си на йський Кедр
(США) у рам ках уго ди про на уко ву співпра цю. Но -
ка ут ге на змо дель о ва но у ми шей лінії BL6/C57. На-
явність/відсутність ге на pttg-1 іден тифіку ва ли ме то-
дом поліме раз ної лан цю го вої ре акції (ПЛР) з ви ко -
рис тан ням прай мерів, спе цифічних до по слідов но-
сті ге на pttg-1 і до встав ки («інсер ту»), яку вбу до-
вува ли в ге ном миші замість сен со вої ділян ки ге на
pttg-1.
Зраз ки тка нин. Досліджу ва ли мор фо-гістохі-
мічні ха рак те рис ти ки печінки, ни рки, яєчок та ле -
гень п’я ти ми шей з но ка у том ге на pttg-1 (pttg-КО) і
п’я ти ми шей ди ко го ти пу (pttg-WT) віком 1 місяць,
яких утри му ва ли за умов віварію Інсти ту ту біоло-
гії кліти ни НАН Украї ни (Львів). Усі ро бо ти з тва -
ри на ми про во ди ли з дот ри ман ням основ них по ло -
жень Кон венції Ра ди Євро пи про охо ро ну хре бет -
них тва рин, які ви ко рис то ву ють ся в ек спе ри мен тах
та інших на уко вих цілях від 18.03.1986 р., Ди рек ти -
ви МОЗ Украї ни № 281 від 01.11.2000 р.
Ми шей підда ва ли ев та назії че рез пе ре до зу ван-
ня діети ло во го ефіру. Гісто логічний ма теріал фіксу-
вали в 4 %-му роз чині не й траль но го фор маліну, зне-
водню ва ли, ущільню ва ли та за ли ва ли в па рап ласт
за стан дар тною ме то ди кою. Для вив чен ня за галь -
ної мор фо логії зрізи тов щи ною 7 мкм за бар влю ва -
ли ге ма ток силіном та ео зи ном.
Лек ти но ва гістохімія. Для вив чен ня вуг ле вод-
них де терміна нт яєчок та ни рки – органів, мор фо ло-
гічні ха рак те рис ти ки яких на йбільше зміню ва ли ся
у порівнянні з кон тро лем, ви ко рис та но лек ти ни сої
(SBA, спе цифічний до DGalNAc – N-аце тил-D-га -
лак то заміну) і за родків пше ниці (WGA, спе цифіч-
ний до за лишків DGlcNAc – N-аце тил-D-глю ко за-
міну і NeuNAc – N-аце тил-не й раміно вої (сіало вої)
кис ло ти) [10, 11]. Лек ти ни очи ще но і кон ’ю го вано з
пе рок си да зою хро ну д-ром фарм. на ук В. О. Анто -
ню ком (Ла бо ра торія «Лек ти но тест», Украї на).
Депа рафіно вані зрізи інку бу ва ли про тя гом 45 хв
за кімнат ної тем пе ра ту ри з лек тин-пе рок си даз ним
кон ’ю га том (кон цен трація 10–25 мкг/мл) у за бу фе -
ре но му фізіологічно му роз чині (рН 7,4). Ло каліза-
цію ре цеп торів лек тинів візу алізу ва ли 0,05 %-м роз-
чи ном діаміно бен зи ди ну тет рагідрох ло ри ду («Sig-
ma», США) за при сут ності 0,015 % Н2О2. Де тальні-
ше ви ко рис та ний ме тод лек ти но вої гістохімії, а та -
кож ме то ди кон тро лю спе цифічності гістохімічних
ре акцій опи са но в мо ног рафії [11].
Вив чен ня і фо тог ра фу ван ня пре па ратів здійсню-
ва ли на мікрос копі Carl Zeiss (КМ 470600-9901), до-
уком плек то ва но му циф ро вим фо то о ку ля ром CCD
Delta Optical (Pro-MicroScan 5822 2M Pixels).
Ре зуль та ти і об го во рен ня. При аналізі гісто ло-
гічних пре па ратів, за бар вле них ге ма ток силіном та
ео зи ном, ви яв ле но такі зміни:
Ле гені. Мак рос копічно: вкриті се роз ною об олон-
кою, ро же во го коль о ру, пра ва і ліва ле гені поділені
на три і дві час тки відповідно. Мікрос копічно: па-
ренхіма орга на скла дається з аль ве ол та аль ве о ляр -
них ходів, аль ве о ли розділені між со бою міжаль вео-
ляр ни ми пе ре тин ка ми, не знач но збільше ни ми вна-
слідок впли ву на рко зу. Істот них мор фо логічних від-
міннос тей між ле ге ня ми ми шей дослідної (pttg-KO)
і кон троль ної (pttg-WT) груп не ви яв ле но.
Печінка. Мак рос копічно: три кут них об рисів, ко-
рич не во го коль о ру, елас тич на, без па то логічних ут-
ворів, вкри та спо луч нот ка нин ною об олон кою. Мік-
рос копічно: па ренхіма орга на скла дається з час то-
чок, ци топ лаз ма ге па то цитів од норідна. Чітко візуа-
лізу ють ся печінкові тріади (міжчас точ кові ар терія,
ве на та жов чна про то ка). Ста тис тич но мор фо ло-
гічних відміннос тей між пре па ра та ми печінки ми -
шей дослідної і кон троль ної груп не знай де но.
Яєчка. Мак рос копічно: парні орга ни, елас тич ної
консис тенції, вкриті спо луч нот ка нин ною кап су лою.
Мікрос копічно: па ренхіма поділе на спо луч нот ка -
нин ни ми пе ре тин ка ми (сеп та ми) на час точ ки, чітко
візу алізу ють ся ото чені ба заль ною мем бра ною зви -
висті сім’яні ка нальці, по пе ри мет ру яких роз та шо -
вані ге мо капіля ри з про шар ка ми спо луч ної тка ни -
ни, де ло калізу ють ся кліти ни Лейдіга. Внутрішній
вміст зви вис тих сім’я них ка нальців скла да ють дві
по пу ляції клітин: сус тен то ци ти (кліти ни Сер толі) і
спер ма то генні кліти ни (рис. 1, а, див. вклей ку).
У зви вис тих сім’я них ка наль цях ми шей дослід-
ної гру пи (pttg-KO) виз на че но по шкод жен ня струк-
тури і то пог рафії сус тен то цитів, змен шен ня по пу ля-
ції спер ма то ген них клітин, руй ну ван ня син цитіаль-
них ком плексів між ни ми (рис. 1, б, див. вклей ку),
що свідчить про по ру шен ня про цесів спер ма то ге -
не зу. Отри мані на ми ре зуль та ти до пов ню ють дані
інших ав торів [5], що за до ку мен ту ва ли гіпо плазію
яєчок у ми шей з но ка у том ге на pttg-1 та мож ливі по -
ру шен ня спер ма то ге не зу.
Нир ки. Мак рос копічно: парні, бо бо подібної фор-
ми, вкриті фіброз ною кап су лою. Мікрос копічно: ві-
зуалізується кірко ва і моз ко ва ре чо ви ни, кірко ва ре-
чови на у виг ляді ни рко вих стовпів Бер те на розді-
ляє моз ко ву ре чо ви ну на ни ркові піраміди. Па ренхі-
ма ни рки утво ре на ни рко ви ми тільця ми, зви вис ти-
ми і пря ми ми ни рко ви ми тру боч ка ми, збірни ми про-
тока ми. Нир ко ве тільце сфор мо ва не су дин ним клу -
бочком і кап су лою не фро на (Шум ля нсько го-Боуме-
на) (рис. 2, а, див. вклей ку). У ни рках тва рин групи
pttg-KO ви явле но ущільнен ня гемо капілярів су дин -
но го клу боч ка ни рко во го тільця та збільшен ня се чо -
во го про стору кап су ли не фро на (рис. 2, б, див. вклей-
ку), що мо же свідчи ти про поси лен ня про цесів ульт-
рафільтрації пер вин ної сечі.
Та ким чи ном, з ви ко рис тан ням за галь но мор фо -
логічних ме тодів у ле ге нях і печінці од номісяч них
ми шей з но ка у том ге на pttg-1 спе цифічних змін не
ви яв ле но. У яєчках дослідних тва рин іден тифіко ва -
но мо дифікації у складі зви вис тих сім’я них ка наль-
ців, які про яв ля ли ся в по ру шенні струк ту ри і то по-
графії сустен то цитів, змен шенні по пу ляції спер ма -
то ген них клітин та руй ну ванні син цитіаль них комп-
лексів між ни ми. У ни рках відсутність ге на pttg-1 по-
єдну ва ла ся з ущільнен ням ге мо капілярів су дин них
клу бочків та збільшен ням се чо во го про сто ру нир-
ко вих тілець.
Резуль та ти лек ти но вої гістохімії. Гліко поліме -
ри яєчок та ни рок – органів, які ви я ви ли ся на й чут -
ливіши ми до но ка у ту ге на pttg-1, дослідже но з ви -
ко рис тан ням лек тинів сої (SBA) і за родків пше ниці
(WGA).
Яєчка. У зви вис тих сім’я них ка наль цях ми шей
кон троль ної гру пи ре цеп то ри лек ти ну сої скон цент-
ровані го лов ним чи ном в зоні ком плек су Гольджі
вто рин них спер ма тоцитів на тлі прак тич но по вної
аре ак тив ності клітин Сер толі, інших суб по пу ляцій
спер ма то ген них, а та кож міоїдних клітин (рис. 1, в;
рис. 3, а, див. вклей ку). Вірогідно, що ви яв ле на се -
лек тивність зв’я зу ван ня лек ти ну сої є віддзер ка лен-
ням ак тив но го про це син гу гліко полімерів (приєд-
нання за лишків DGalNAc) у про цесі фор му ван ня ак-
росом них сис тем спер ма то зоїдів. У тва рин з но кау-
том гена pttg-1 SBA-ре ак тивність зо ни Гольджі вто-
рин них спер ма то цитів зберігається (рис. 1, г, див.
вклей ку); при цьо му на си ченість лек тин-по зи тив ни-
ми кліти на ми окре мих зви вис тих сім’я них ка наль-
ців пе ре ви щує кон трольні по каз ни ки; відміче но яви -
ща дез організації син цитіаль них ком плексів спер ма -
то ген них клітин.
Ре цеп то ри лек ти ну WGA у тва рин кон троль ної
гру пи ви яв ле но у складі ци топ лаз ма тич них гліко -
кон ’ю гатів спер ма то гоній, плаз мо ле ми спер ма то -
ген них клітин різно го сту пе ня зрілості, хвос то вих
діля нок спер ма то зоїдів (рис. 1, д, див. вклей ку). У
131
НО КА УТ ГЕ НА pttg У МИ ШЕЙ СУП РО ВОД ЖУЄТЬСЯ ПІДВИ ЩЕ НИМ РІВНЕМ ЕКСПО НУ ВАН НЯ DGalNAc
ми шей з но ка у том ге на pttg-1 по си ле не кон ту ру -
ван ня плаз мо ле ми спер ма то ген них клітин, на бли -
же них до про світу зви вис тих сім’я них ка нальців,
поєднується з ре дукцією ре ак тив ності спер ма то го-
ній (рис. 1, е, див. вклей ку), що свідчить про по си -
лен ня про цесів гліко зи лю ван ня на останніх стадіях
спер ма то ге не зу.
З ура ху ван ням вуг ле вод ної спе цифічності лек -
тинів сої і за родків пше ниці мож на ствер джу ва ти,
що відсутність ге на pttg-1 суп ро вод жується підви ще-
ним ек спо ну ван ням у струк тур них ком по нен тах яє-
чок вуг ле вод них де терміна нт DGalNAc і DGlcNAc.
Мож ли во, озна че ний фе но мен є одним із чин ників за -
до ку мен то ва но го [5] фе но ме ну збе ре жен ня фер тиль -
ності тва рин дослідної гру пи на тлі гіпо плазії яєчок,
оскільки, за да ни ми [13], са ме за лиш кам DGalNAc і
DGlcNAc на ле жить провідна роль у про це сах за плід-
не ння ми шей.
Нир ка. У ми шей кон троль ної гру пи ре цеп то ри
лекти ну SBA ло калізо вані ви нят ко во у складі гліко-
полімерів лю ме наль ної по верхні збірних ни рко вих
про ток (рис. 2, в, див. вклей ку). Но ка ут ге на pttg-1
суп ро вод жується по си ле ним кон ту ру ван ням про -
світу озна че них про ток, а та кож по я вою слаб ко ви -
ра же ної ре ак тив ності щіточ ко вої об лямівки про -
кси маль них трубо чок (рис. 2, г, див. вклей ку), що
мо же свідчи ти про підви ще не ек спо ну ван ня в нир-
ко вих струк ту рах за лишків DGalNAc.
Ре цеп то ри лек ти ну WGA у ми шей кон троль ної
гру пи ви яв ле но на лю ме нальній по верхні збірних
ни рко вих про ток, фільтраційній мем брані ни рко -
вих тілець і мен шою мірою – у складі щіточ ко вої об -
лямівки про кси маль них і дис таль них тру бо чок (рис.
2, д; рис. 3, б, див. вклей ку). При но ка уті ге на pttg-1
істот них змін ре ак тив ності ни рко вих струк тур з
лек ти ном WGA не поміче но (рис. 2, е, див. вклей ку).
Внаслідок про ве де них досліджень ви яв ле но збіль-
шений рівень ек спону ван ня вуг ле вод них де терміна нт
DGalNAc у складі ком плек су Гольджі вто рин них
спер ма то цитів і щіточ ко вої об лямівки ни рко вих тру-
бо чок ми шей із но ка у том ге на pttg-1 (рис. 1, г; рис.
2, г, див. вклей ку). Зви чай но, вра хо ву ю чи єди ну ві-
дому на сьо годні функцію про дук ту цьо го ге на, а са-
ме – участь у ре гу ляції роз ход жен ня сес три нських
хро ма тид під час міто зу [12], склад но ствер джу ва -
ти, що за зна чені ви ще зміни вуг ле водних де термі-
на нт мо жуть бу ти пря мим на слідком дефіци ту ге на
pttg-1. Імовірніше, що тут має місце опосе ред ко ва-
ний ме ханізм, який по ля гає в дії про дуктів інших ге-
нів, здат них зміню ва ти свою експресію че рез но ка ут
ге на pttg-1. Оче вид но, де тальніші відповіді на ці пи -
тан ня мо же да ти по глиб ле ний аналіз ре зуль татів
про те о му, який ми досліди ли для лімфо цитів ми шей
ди ко го ти пу і ми шей із но ка у том ге на pttg-1 [3].
Зростан ня вмісту в тка ни нах вуг ле вод них де тер-
міна нт DGalNAc ха рак тер но як для не зрілих (емб-
ріональ них) струк тур, так і для ба гать ох форм па то -
логії [11, 14, 15]. Отри мані на ми ре зуль та ти до пов-
нюють ці спос те ре жен ня. Суб терміна льна ло каліза-
ція за лишків DGalNAc у складі оліго са ха рид них
лан цюгів О-гліканів, ха рак тер них для струк тур них
ком по нентів яєчка і ни рки ми шей ди ко го ти пу (func-
tional glycomics database: www.functionalglycomics.
org), доз во ляє зро би ти при пу щен ня що до не за вер -
шеності кінце вих етапів гліко зи лю ван ня біополіме-
рів у ми шей з но ка у том ге на pttg-1.
Вис нов ки. Про ве дені досліджен ня по гли бю -
ють існу ючі уяв лен ня сто сов но фізіологічної ролі
ге на pttg-1, зок ре ма, вка зу ють на зміну про це син гу
вуг ле водвмісних біополімерів в організмі за відсут -
ності цьо го ге на. Ра зом з тим, за ли шається відкри-
тим пи тан ня віднос но міжклітин них сиг наль них шля-
хів та ек зо ген них чин ників, під дією яких підви щу-
ється ак тивність ге на pttg-1 і, як на слідок, ство рю-
ють ся пе ре ду мо ви для зло якісної транс фор мації.
Отри мані дані доз во ля ють ре ко мен ду ва ти лек -
тин сої як се лек тив ний мар кер ком плек су Гольджі
(визріва ю чих ак ро сом них сис тем) вто рин них спер -
ма то цитів і гліко полімерів лю ме наль ної по верхні
збірних ни рко вих тру бо чок, лек тин за родків пше -
ниці – як мар кер фільтраційної мем бра ни ни рко вих
тілець миші.
Зап ла но вано роз ши рен ня пе реліку ви ко рис та них
лек тинів і, відповідно, спек тра досліджу ва них вуг-
левод них де терміна нт для от ри ман ня по вніших уяв-
лень що до ха рак те ру пе ре бу до ви вуг ле водвмісних
біополімерів, спри чи не них дефіци том ге на pttg-1.
Автори вис лов лю ють под я ку д-ру Ш. Мел ме-
ду (Ме дич ний центр Си на йський Кедр, США) за до-
по мо гу в одер жанні ми шей із но ка у том ге на pttg-1;
Олені Ка нюці та Сергію Афанасьєву – за до по мо гу
в ро боті з ла бо ра тор ни ми тва ри на ми.
132
ВА РИ ВО ДА О. Ю., ФІЛЯК Є. З., ЛУЦИК О. Д., СТОЙКА Р. С.
O. Yu. Varyvoda, Yu. Z. Filyak1, A. D. Lutsyk, R. S. Stoika1
Mice lacking pituitary tumor transforming gene show
elevated exposure of DGalNAc carbohydrate determinants
Danylo Halytsky Lviv National Medical University
69, Pekarska str., Lviv, Ukraine, 79010
1Institute of Cell Biology, NAS of Ukraine
14/16, Drahomanov Str., Lviv, Ukraine, 79005
Summary
Aim. To investigate the influence of pituitary tumor transforming gene
(pttg-1) knockout on glycome of parenchimal organs by means of lectin
histochemistry. Methods. DGalNAc, DGlcNAc, NeuNAc carbohydrate
determinants were labelled with soybean agglutinin (SBA) and wheat
germ agglutinin (WGA), conjugated to peroxidase, with subsequent
visualization of the lectin-binding sites with diaminobenzidine. The
testes and kidneys of murine strain BL6/C57 with the pttg-1 gene
knockout (PTTG-KO) were compared to the wild type (PTTG-WT)
animals, both groups 1 month of age. Results. Knockout of the pttg-1
gene was accompanied by enhanced exposure of the DGalNAc sugar
residues within the Golgi complex of secondary spermatocytes, in a
brush border of renal tubules and on the lumenal surface of collecting
ducts. Conclusions. This study suggests that knockout of the pttg-1 gene
may lead to the changes in carbohydrate processing in mammalian
organism.
Keywords: knockout of pttg-1 gene, glycoconjugate processing,
lectin histochemistry.
О. Ю. Ва ри во да, Е. З. Фи ляк, А. Д. Лу цик, Р. С. Стой ка
Но ка ут гена pttg-1 у мы шей со про вож да ет ся воз рас та ни ем
уров ня экс по ни ро ва ния угле вод ных де тер ми нант DGalNAc
Ре зю ме
Цель. Иссле до вать вли я ние но ка у та гена pttg-1 на гли ком не ко то-
рых па рен хи ма тоз ных орга нов мы шей с при ме не ни ем лек ти но вой
гис то хи мии. Ме то ды. Угле вод ные де тер ми нан ты DGalNAc,
DGlcNAc, NeuNAc вы яв ля ли с ис поль зо ва ни ем лек ти нов сои и за -
вя зей пше ни цы, ме чен ных пе рок си да зой хре на, с по сле ду ю щей ви -
зу а ли за ци ей ди а ми но бен зи ди ном. Тест-об ъ ек та ми слу жи ли се-
мен ни ки и по чки мы шей ли нии BL6/C57 с но ка у том гена pttg-1 и
мы шей ди ко го типа. Воз раст жи вот ных об е их групп со став лял 1
ме сяц. Ре зуль та ты. Но ка ут гена pttg-1 со про вож да ет ся воз рас -
та ни ем экс по ни ро ва ния угле вод ных де тер ми нант DGalNAc в со -
ста ве ком плек са Го льджи вто рич ных спер ма то ци тов, ще точ-
ной ка ем ки по чеч ных тру бо чек и на лю ме наль ной по вер хнос ти со -
би ра тель ных про то ков. Вы во ды. По лу чен ные ре зуль та ты сви де -
т ельству ют о том, что от сус твие гена pttg-1 мо жет при во-
дить к из ме не ни ям в про цес син ге угле вод со дер жа щих би о по ли ме -
ров в орга низ ме мле ко пи та ю щих.
Клю че вые сло ва: но ка ут гена pttg-1, про цес синг гли ко по ли ме -
ров, лек ти но вая гис то хи мия.
REFERENCES
1. Pei L., Melmed S. Isolation and characterization of a pituitary
tumor-transforming gene (PTTG) // Mol. Endocrinol.–1997.–
11, N 4.–P. 433–441.
2. Zhang X., Horwitz G. A., Prezant T. R., Valentini A., Nakashima
M., Bronstein M. D., Melmed S. Structure, expression, and func-
tion of human pituitary tumor-transforming gene (PTTG) // Mol.
Endocrinol.–1999.–13, N 1.–P. 156–166.
3. Filyak Yu. Z., Filyak O. S., Sushelnytskiy S. I., Stoika R. S. Pro-
teomics of Т-lymphocytes from mice lacking pttg gene // Rep. of
the Nat. Acad. of Sci. of Ukraine.–2007.–N 5.–P. 173–179.
4. Tfelt-Hansen J., Kanuparthi D., Chattopadhyay N. The emer-
ging role of pituitary tumor transforming gene in tumorigenesis
// Clin. Med. Res.–2006.–4, N 2.–P. 130–137.
5. Wang Z., Yu R., Melmed S. Mice lacking pituitary tumor trans-
forming gene show testicular and splenic hypoplasia, thymic hy-
perplasia, thrombocytopenia, aberrant cell cycle progression,
and premature centromere division // Mol. Endocrinol.–2001.–
15, N 11.–P. 1870–1879.
6. Kanyuka O., Filyak Yu., Sybirna N. Erythrone functional state in
mice with the knockout of PTTG gene // Visnyk of Lviv Univ.,
Ser. Biology.–2011.–N 56.–P. 22–27.
7. Afanasiev S. V., Filyak Yu. Z., Stoika R. S. Influence of pttg-1
gene knockout on autoimmunity development in mice // Stud.
Biol.–2011.–5, N 2.–P. 29–36.
8. Bilyy R., Nemesh L., Antonyuk V., Kit Y., Valchuk I., Havryluk A.,
Chopyak V., Stoika R. Apoptosis-related changes in plasma mem-
brane glycoconjugates of peripheral blood lymphocytes in rheu-
matoid arthritis // Autoimmunity.–2009.–42, N 4.–P. 334–336.
9. Bilyy R. O., Shkandina T., Tomin A., Munoz L. E., Franz S.,
Antonyuk V., Kit Y. Y., Zirngibl M., Furnrohr B. G., Janko C.,
Lauber K., Schiller M., Schett G., Stoika R.S., Herrmann M.
Macrophages discriminate glycosylation patterns of apoptotic
cell-derived microparticles // J. Biol. Chem.–2012.–287, N 1.–
P.496–503.
10. Antonyuk V. O. Lectins and their resources.–Lviv: Kvart, 2005.–
554 p.
11. Lutsyk A. D., Panasiuk E. M., Lutsyk M. D. Lectins in histoche-
mistry.–Lviv: Vyshcha shkola, 1989.–144 p.
12. Zou H., McGarry T. J., Bernal T., Kirschner M. W. Identifi-
cation of a vertebrate sister chromatid separation inhibitor invol-
ved in transformation and tumorigenesis // Science.–1999.–285,
N 5426.–P. 418–422.
13. Habibi-Rezaei M., Hosseinipanah S. M., Fazel A. R. Lectin bin-
ding characteristics of murine zona pellucid during folliculo-
genesis: the importance of N-acetyl sugar derivates // J. Sci.
Univ. of Tehran.–2008.–33, N 4.–P. 25–31.
14. Amabarova N. O. Rearrangement of rat kidney sialoglycans du-
ring postnatal morphogenesis and in streptozotocin-induced dia-
betic nephropathy // Acta Med. Leopoliensia.–2009.–15, N 2.–
P. 35–45.
15. Sogomonian E. A., Lutsyk A. D. Peculiarities of histological struc-
ture and lectin histochemistry of rat ovary in hypo- and hyper-
thyroidism // Svit Medytsyny i Biolohiyi.–2009.–2, N 2.–
P. 116–124.
Received 10.01.12
133
НО КА УТ ГЕ НА pttg У МИ ШЕЙ СУП РО ВОД ЖУЄТЬСЯ ПІДВИ ЩЕ НИМ РІВНЕМ ЕКСПО НУ ВАН НЯ DGalNAc
ISSN 0233-7657. Biopolymers and Cell. 2012. Vol 28. N 2
Figures to article by Varyvoda O. Yu. et al.
à á
â ã
ä å
Ðèñ. 1. Ïîð³âíÿëüíà ì³êðîìîðôîëîã³ÿ çâèâèñòèõ ñ³ì’ÿíèõ êàíàëü-
ö³â ìèøåé äèêîãî òèïó (à, â, ä) òà ìèøåé ç íîêàóòîì ãåíà pttg-1 (á,
ã, å). Ñïîñòåð³ãàþòüñÿ äåç³íòåãðàö³ÿ ñòðóêòóðè, çìåíøåííÿ
ù³ëüíîñò³ ñïåðìàòîãåííèõ êë³òèí ó ñ³ì’ÿíèõ êàíàëüöÿõ ìèøåé
pttg-ÊÎ (á) ó ïîð³âíÿíí³ ç òâàðèíàìè êîíòðîëüíî¿ ãðóïè (à); âè-
á³ðêîâà ðåàêòèâí³ñòü ëåêòèíó SBA ³ç çîíîþ êîìïëåêñó Ãîëüäæ³
âòîðèííèõ ñïåðìàòîöèò³â êîíòðîëüíèõ (â) ³ íîêàóòíèõ (ã) ìèøåé
ó ïîºäíàíí³ ³ç çðîñòàííÿì íàñè÷åíîñò³ ñ³ì’ÿíèõ êàíàëüö³â îñòàí-
í³õ SBA-ïîçèòèâíèìè êë³òèíàìè; ï³äâèùåíå êîíòóðóâàííÿ ïëàç-
ìîëåìè àäëþìåíàëüíîãî øàðó ñïåðìàòîãåííèõ êë³òèí ìèøåé
êîíòðîëüíî¿ (ä) ³ äîñë³äíî¿ (å) ãðóï ïðè îáðîáö³ ëåêòèíîì WGA.
Çàáàðâëåííÿ ãåìàòîêñèë³í-åîçèíîì (à, á), ëåêòèíàìè ñî¿ (â, ã) ³ çà-
ðîäê³â ïøåíèö³ (ä, å). Îá’ºêòèâ 10 �, ìàñøòàáíèé â³äð³çîê 50 ìêì
à á
Ðèñ. 3. Çîíà êîìïëåêñó Ãîëüäæ³ (ïîä-
âîºíà á³îìåìáðàíà) âòîðèííèõ ñïåðìà-
òîöèò³â ìèøåé êîíòðîëüíî¿ ãðóïè, âè-
ÿâëåíà ç âèêîðèñòàííÿì ëåêòèíó ñî¿ (à)
òà âèá³ðêîâå ìàðêóâàííÿ ô³ëüòðàö³é-
íî¿ ìåìáðàíè íèðêîâîãî ò³ëüöÿ, ù³òî÷-
êîâî¿ îáëÿì³âêè íèðêîâèõ òðóáî÷îê ëåê-
òèíîì çàðîäê³â ïøåíèö³ (á). Îá’ºêòèâ
100 � , ìàñøòàáíèé â³äð³çîê 10 ìêì
à á
â ã
ä å
Ðèñ. 2. ʳðêîâà ðå÷îâèíà íèðêè ìèøåé äèêîãî òèïó (à, â, ä) ³ ìè-
øåé ç íîêàóòîì ãåíà pttg-1 (á, ã, å). ³äçíà÷åíî çá³ëüøåííÿ ñå÷îâî-
ãî ïðîñòîðó, êîìïàêòèçàö³ÿ êëóáî÷ê³â íèðêîâèõ ò³ëåöü ìèøåé
pttg-ÊÎ (á) ó ïîð³âíÿíí³ ç êîíòðîëåì (à); ï³äâèùåíå åêñïîíóâàííÿ
ðåöåïòîð³â ëåêòèíó SBA íà ëþìåíàëüí³é ïîâåðõí³ çá³ðíèõ íèðêî-
âèõ ïðîòîê, ó ñêëàä³ ù³òî÷êîâî¿ îáëÿì³âêè íîêàóòíèõ ìèøåé (ã)
ïîð³âíÿíî ç êîíòðîëåì (â); ðåàêòèâí³ñòü ô³ëüòðàö³éíî¿ ìåìáðàíè
íèðêîâèõ ò³ëåöü, ù³òî÷êîâî¿ îáëÿì³âêè ïðîêñèìàëüíèõ òðóáî÷îê
ç ëåêòèíîì WGA ìèøåé êîíòðîëüíî¿ (ä) ³ äîñë³äíî¿ ãðóïè (å). Çà-
áàðâëåííÿ ãåìàòîêñèë³í-åîçèíîì (à, á), ëåêòèíàìè ñî¿ (â, ã) ³ çà-
ðîäê³â ïøåíèö³ (ä, å). Îá’ºêòèâ 10 �, ìàñøòàáíèé â³äð³çîê 50 ìêì
|