Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A
Две тканеспецифические изоформы фактора элонгации трансляции 1А млекопитающих (eEF1A1 и eEF1A2) идентичны на 98 %. Однако некоторые их функции в организме кардинально отличаются, что в отдельных случаях может быть связано с индукцией канцерогенеза. Мы предположили, что незначительная разница в перви...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Біополімери і клітина |
|---|---|
| Дата: | 2007 |
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2007
|
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/157497 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A / А.В. Новосильная, А.А. Тимченко, Е.И. Тиктопуло, И.Н. Сердюк, Б.С. Негруцкий, А.В. Ельская // Біополімери і клітина. — 2007. — Т. 23, № 5. — С. 386-390. — Бібліогр.: 18 назв. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-157497 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Новосильная, А.В. Тимченко, А.А. Тиктопуло, Е.И. Сердюк, И.Н. Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. 2019-06-20T04:14:02Z 2019-06-20T04:14:02Z 2007 Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A / А.В. Новосильная, А.А. Тимченко, Е.И. Тиктопуло, И.Н. Сердюк, Б.С. Негруцкий, А.В. Ельская // Біополімери і клітина. — 2007. — Т. 23, № 5. — С. 386-390. — Бібліогр.: 18 назв. — рос., англ. 0233-7657 http://dx.doi.org/10.7124/bc.000777 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/157497 577.217 Две тканеспецифические изоформы фактора элонгации трансляции 1А млекопитающих (eEF1A1 и eEF1A2) идентичны на 98 %. Однако некоторые их функции в организме кардинально отличаются, что в отдельных случаях может быть связано с индукцией канцерогенеза. Мы предположили, что незначительная разница в первичных последовательностях может, тем не менее, приводить к существенным различиям пространственной структуры изоформ eEF1A. Это, в свою очередь, может влиять на способность той или иной изоформы взаимодействовать с белками-партнерами. В данной работе методами дифференциальной сканирующей микрокалориметрии и кругового дихроизма в областях дальнего и ближнего УФ установлено, что потенциально онкогенная изформа eEF1A2 имеет более компактную пространственную структуру, чем eEF1A1, причем различия проявляются как на уровне как вторичной, так и третичной структуры белков. Дві тканиноспецифічні ізоформи фактора елонгації 1А ссавців (eEF1A1 і eEF1A2) ідентичні на 98 %. Але деякі їхні функції в організмі значно різняться, що в окремих випадках може бути пов’язано з індукцією канцерогенезу. Ми припустили, що незначна різниця у первинних послідовностях може призводити до суттєвих відмінностей у просторовій структурі ізоформ eEF1A. Це, в свою чергу, може впливати на здатність тієї чи іншої ізоформи взаємодіяти з білками-партнерами. В даній роботі методами диференційної сканувальної мікрокалориметрії і кругового дихроїзму на ділянках далекого і ближнього УФ встановлено, що потенційно онкогенна ізоформа eEF1A2 має компактнішу просторову структуру, ніж eEF1A1, причому відмінності проявляються на рівні як вторинної, так і третинної структури білків. Two tissue-specific isoforms of mammalian translation elongation factor 1A, eEF1A1 and eEF1A2, are 98 % similar. However, some of their functions in the organism are different which in some cases could lead to the induction of carcinogenesis. We supposed that slight difference of primary sequences may cause significant differences of spatial structures of eEF1A isoforms affecting, in its turn, the ability of one or another isoform to interact with protein partners. The differential scanning microcalorimetry and circular dichroism in «near» and «far» UV regions were used to determine that potentially oncogenic eEF1A2 isoform possesses a more compact spatial organization than eEF1A1, and the differences are revealed at the levels of both secondary and tertiary structure of proteins. Авторы признательны Фонду фундамен тальных исследований МОН Украины, а так же организациям INTAS и Wellcome Trust за финансовую поддержку. Авторы выражают благодарность Б.С. Мельнику за измерения спектров КД. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Біополімери і клітина Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A Характеристика фізичних властивостей двох ізоформ фактора елонгації трансляції eEF1A Characterization of physical properties of two isoforms of translation elongation factor 1A Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A |
| spellingShingle |
Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A Новосильная, А.В. Тимченко, А.А. Тиктопуло, Е.И. Сердюк, И.Н. Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. |
| title_short |
Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A |
| title_full |
Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A |
| title_fullStr |
Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A |
| title_full_unstemmed |
Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A |
| title_sort |
характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eef1a |
| author |
Новосильная, А.В. Тимченко, А.А. Тиктопуло, Е.И. Сердюк, И.Н. Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. |
| author_facet |
Новосильная, А.В. Тимченко, А.А. Тиктопуло, Е.И. Сердюк, И.Н. Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. |
| publishDate |
2007 |
| language |
Russian |
| container_title |
Біополімери і клітина |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Характеристика фізичних властивостей двох ізоформ фактора елонгації трансляції eEF1A Characterization of physical properties of two isoforms of translation elongation factor 1A |
| description |
Две тканеспецифические изоформы фактора элонгации трансляции 1А млекопитающих (eEF1A1 и eEF1A2) идентичны на 98 %. Однако некоторые их функции в организме кардинально отличаются, что в отдельных случаях может быть связано с индукцией канцерогенеза. Мы предположили, что незначительная разница в первичных последовательностях может, тем не менее, приводить к существенным различиям пространственной структуры изоформ eEF1A. Это, в свою очередь, может влиять на способность той или иной изоформы взаимодействовать с белками-партнерами. В данной работе методами дифференциальной сканирующей микрокалориметрии и кругового дихроизма в областях дальнего и ближнего УФ установлено, что потенциально онкогенная изформа eEF1A2 имеет более компактную пространственную структуру, чем eEF1A1, причем различия проявляются как на уровне как вторичной, так и третичной структуры белков.
Дві тканиноспецифічні ізоформи фактора елонгації 1А ссавців (eEF1A1 і eEF1A2) ідентичні на 98 %. Але деякі їхні функції в організмі значно різняться, що в окремих випадках може бути пов’язано з індукцією канцерогенезу. Ми припустили, що незначна різниця у первинних послідовностях може призводити до суттєвих відмінностей у просторовій структурі ізоформ eEF1A. Це, в свою чергу, може впливати на здатність тієї чи іншої ізоформи взаємодіяти з білками-партнерами. В даній роботі методами диференційної сканувальної мікрокалориметрії і кругового дихроїзму на ділянках далекого і ближнього УФ встановлено, що потенційно онкогенна ізоформа eEF1A2 має компактнішу просторову структуру, ніж eEF1A1, причому відмінності проявляються на рівні як вторинної, так і третинної структури білків.
Two tissue-specific isoforms of mammalian translation elongation factor 1A, eEF1A1 and eEF1A2, are 98 % similar. However, some of their functions in the organism are different which in some cases could lead to the induction of carcinogenesis. We supposed that slight difference of primary sequences may cause significant differences of spatial structures of eEF1A isoforms affecting, in its turn, the ability of one or another isoform to interact with protein partners. The differential scanning microcalorimetry and circular dichroism in «near» and «far» UV regions were used to determine that potentially oncogenic eEF1A2 isoform possesses a more compact spatial organization than eEF1A1, and the differences are revealed at the levels of both secondary and tertiary structure of proteins.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/157497 |
| citation_txt |
Характеристика физических свойств двух изоформ фактора элонгации трансляции eEF1A / А.В. Новосильная, А.А. Тимченко, Е.И. Тиктопуло, И.Н. Сердюк, Б.С. Негруцкий, А.В. Ельская // Біополімери і клітина. — 2007. — Т. 23, № 5. — С. 386-390. — Бібліогр.: 18 назв. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT novosilʹnaâav harakteristikafizičeskihsvoistvdvuhizoformfaktoraélongaciitranslâciieef1a AT timčenkoaa harakteristikafizičeskihsvoistvdvuhizoformfaktoraélongaciitranslâciieef1a AT tiktopuloei harakteristikafizičeskihsvoistvdvuhizoformfaktoraélongaciitranslâciieef1a AT serdûkin harakteristikafizičeskihsvoistvdvuhizoformfaktoraélongaciitranslâciieef1a AT negruckiibs harakteristikafizičeskihsvoistvdvuhizoformfaktoraélongaciitranslâciieef1a AT elʹskaâav harakteristikafizičeskihsvoistvdvuhizoformfaktoraélongaciitranslâciieef1a AT novosilʹnaâav harakteristikafízičnihvlastivosteidvohízoformfaktoraelongacíítranslâcííeef1a AT timčenkoaa harakteristikafízičnihvlastivosteidvohízoformfaktoraelongacíítranslâcííeef1a AT tiktopuloei harakteristikafízičnihvlastivosteidvohízoformfaktoraelongacíítranslâcííeef1a AT serdûkin harakteristikafízičnihvlastivosteidvohízoformfaktoraelongacíítranslâcííeef1a AT negruckiibs harakteristikafízičnihvlastivosteidvohízoformfaktoraelongacíítranslâcííeef1a AT elʹskaâav harakteristikafízičnihvlastivosteidvohízoformfaktoraelongacíítranslâcííeef1a AT novosilʹnaâav characterizationofphysicalpropertiesoftwoisoformsoftranslationelongationfactor1a AT timčenkoaa characterizationofphysicalpropertiesoftwoisoformsoftranslationelongationfactor1a AT tiktopuloei characterizationofphysicalpropertiesoftwoisoformsoftranslationelongationfactor1a AT serdûkin characterizationofphysicalpropertiesoftwoisoformsoftranslationelongationfactor1a AT negruckiibs characterizationofphysicalpropertiesoftwoisoformsoftranslationelongationfactor1a AT elʹskaâav characterizationofphysicalpropertiesoftwoisoformsoftranslationelongationfactor1a |
| first_indexed |
2025-11-24T16:49:08Z |
| last_indexed |
2025-11-24T16:49:08Z |
| _version_ |
1850487002994049024 |
| fulltext |
Characterization of physical properties of
two isoforms of translation elongation factor 1A
A. V. Novosylna, A. A. Timchenko, E. I .Tiktopulo, I. N. Serdyuk, B. S. Negrutskii,A.
V. El’skaya
Institute of molecular biology and genetics NAS of Ukraine
Academicain Zabolotnog str., 150, Kyiv, 03680 Ukraine
1Institute for protein research RAS
Institutskaya Str, 4, Puschino, 142290, Russia
aleksnova@yahoo.com
Two tissue-specific isoforms of mammalian translation elongation factor 1A, eEF1A1 and eEF1A2, are 98%
similar. However, some of their functions in the organism are different which in some cases could lead to the
induction of carcinogenesis. We supposed that slight difference of primary sequences may cause significant
differences of spatial structures of eEF1A isoforms affecting, in its turn, the ability of one or another isoform
to interact with protein partners. The differential scanning microcalorimetry and circular dichroism in
“near” and “far” UV regions were used to determine that potentially oncogenic eEF1A2 isoform possesses
a more compact spatial organization than eEF1A1, and the differences are revealed at the levels of both
secondary and tertiary structure of proteins.
Keywords: translation elongation factor eEF1A1, protein biosynthesis, differential scanning
microcalorimetry, circular dichroism
Introduction. eEF1A is believed to be a
multifunctional protein, the canonical functions of
which are to promote efficient binding of
aminoacyl-tRNA to 80S ribosome and to provide
correct codon-anticodon interaction in ribosomal A site
[1]. Two tissue-specific isoforms of eEF1A have been
identified, namely, eEF1A2, expressed only in neural
and muscular tissues, and eEF1A1, discovered in all
the other tissues [2, 3]. The reason of two isoforms
presence is not yet understood. The appearance of
eEF1A2 in non-specific tissue has been found to relate
to the induction of carcinogenesis [4-8]. It remains
unknown in what way eEF1A2, 98% similar to
eEF1A1, which is specific for this kind of tissue, may
be related to the formation of tumours in the latter. We
supposed that even slight aminoacid substitutions in
eEF1A2 are capable of causing some divergence in
spatial structures of this protein globule, which may
result in the modification of its known functions and
appearance of some new ones. To check our
assumption we have performed the comparative
analysis of molecular dynamics of both isoforms, and
found out the possibility of differences in the
secondary structure and dynamics of these protein
globules [9, 10]. Current work presents experimental
data on the comparison of eEF1A1 and eEF1A2 using
differential scanning microcalorimetry and circular
dichroism (CD) in “near” and “far” UV regions.
Materials and Methods. Isolation and
characterization of eEF1A. eEF1A1 was isolated from
386
ISSN 0233-7657. Biopolymers and cell. 2007. vol. 23. ISS 5. Translated from Ukrainian.
Ó A. V. NOVOSYLNA, A. A. TIMCHENKO, E. I .TIKTOPULO, I. N. SERDYUK, B. S.
NEGRUTSKII,A. V. EL’SKAYA, 2007
rabbit liver using the combination of ion-exchange
chromatography and gel-filtration, as described in [11],
with slight modifications.
eEF1A2 was isolated from rabbit muscles using the
same scheme, but for the first stage of purification –
chromatography on Sephacril S-400, which did not
effect the preparation purity.
The activity of eEF1A was determined in the
reaction of GDP/[3H]GDP exchange [12].
Differential scanning microcalorimetry.
Calorimetric measurements were conducted in
precision scanning microcalorimeter SCAL-1 (SCAL
Co. Ltd., Pushchino, Russia) in glass cells (0.3 ml) with
the rate of 1.0 Ê per 1 min under excessive pressure of
two atmospheres [13]. The dialysis of all protein
samples against corresponding buffer was conducted
before measurements. Concentrations of proteins used
were in the range of 2.3-2.5 mg/ml. Thermodynamic
analysis of the profile of the excess of heat capacity was
carried out according to [14].
CD in “far” and “near” UV regions. The
secondary structure of proteins was investigated by CD
spectroscopy using spectropolarimeter JASCO-600
(Japan) at wavelengths of 190-250 nm (“far” UV range)
and 250-310 nm (“near” UV range). Molar ellipticity
was calculated using the following equation:
[q] = [q]exp Ìres/(LC),
where Ñ – concentration of protein (mg/ml), L –
optical path length of cuvette (mm), [q]exp – measured
ellipticity (degrees) and Ìres – mean molecular mass of
peptide residue (Da), calculated from its aminoacid
sequence. Measurement of “far” UV was carried out in
0.1 mm cuvette, and measurement of near CD was
conducted in 1 mm cuvette. Concentration of proteins
was 1 mg/ml.
Results and Discussion. Differential scanning
microcalorimetry. Differential scanning
microcalorimetry allows obtaining and comparing
thermodynamic parameters, characteristic for
heat-induced conformational changes of proteins [14,
15].
Computer analysis of molecular dynamics of
eEF1A isoforms testified to the possibility of
conformational changes in eEF1A1 molecule due to
interdomain interactions, while eEF1A2 is specific for
a more closed conformation [9, 10]. Therefore, one can
expect the comparison of the thermodynamic
parameters of the two isoforms of eEF1A to be
informative to reveal the difference in thermal stability
and enthalpy of denaturation. Since the stability of
protein molecule is associated with its structure, the
analysis of thermodynamic characteristics of the
isoforms may evidence either to structural similarity or
difference in their structures, and characterize relative
compactness of these proteins.
Tem per a ture dependences of the ex ces sive par tial
heat ca pac ity are pre sented in Fig. 1. Al most two-fold
dif fer ence of de na tur ation heat of two isoforms is ob -
served. For eEF1A1 DHto tal is 580.0 Kj\mol, while for
eEF1A2 DHto tal is 910.0 Kj/mol. Com par i son of the
melt ing curves also shows that melt ing of the eEF1A1
mol e cule starts ear lier than that of eEF1A2. The max -
ima of tran si tion are 55.5°C for eEF1A1 and 62.7°C for
eEF1A2. Half-width tem per a ture of the tran si tion (DT)
equals 11.0°Ñ for eEF1A1, and 8.1°Ñ for eEF1A2.
Thus, eEF1A isoforms pos sess dif fer ent spa tial struc -
ture. Sig nif i cant in crease in enthalpy of de na tur ation
387
CHARACTERIZATION OF PHYSICAL PROPERTIES
Fig.1 Temperature dependence of excessive heat capacity for
eEF1A in 30 mM tris-HCl, pH 7.5, containing 20% glycerol, 6 mM
â-mercaptoethanol, 1 mM MgCl, and 150 mM KCl:1 – melting
curve of eEF1A1; 2 – melting curve of eEF1A2
l
o
m(/Jk
×
)
K
and de crease in half-width tran si tion at eEF1A2 melt -
ing tes tify to a more com pact con for ma tion of eEF1A2,
which has been ear lier as sumed us ing the data of mo -
lec u lar dy nam ics [9, 10].
“Near” UV CD. CD spectrum in near UV region
(250-350 nm), presenting signals of such
chromophores as aromatic amino acids and disulphide
bonds, may provide useful information about the
tertiary structure of a protein.
Signals in 250-270 nm region are specific for
phenylalanine residues, 270-290 nm region – for
tyrosine, and the ones in 280-300 nm region are
inherent to tryptophan. Disulphide bonds provide weak
signals along the entire near UV spectrum [16, 17].
Taking into account that both eEF1A1 and eEF1A2
are 98% similar, have the same positions in the primary
structures, and contain almost equal amount of
aromatic amino acids (there is only one substitution of
Phe for Ser in eEF1A2; overall amount of amino acids
in eEF1A1 (eEF1A2) is Trp – 5(5), Tyr – 12(12), Phe
–14(13)), the mentioned method could be useful to test
the identity or difference of tertiary structures of the
isoforms.
Near UV CD spec tra of eEF1A1 and eEF1A2 are
shown in Fig.2. The dif fer ence in CD sig nals was ob -
served in the en tire spec trum of near UV re gion. We
could not ex clude the fact that al ter ations in the Phe-spe -
cific re gion of CD spec trum might re sult par tially from
the dif fer ence in 393rd po si tion of pri mary struc tures of
the isoforms (Phe393 in eEF1A1 or Ser393 sub sti tu tion
in eEF1A2). How ever, the dif fer ence in the rest of the
spec trum is the di rect con se quence of changes in the ter -
tiary struc ture of these pro teins. There fore, the data of
near UV CD tes tify in fa vour of ev i dent dif fer ences in
ter tiary struc tures of the isoforms.
“Far” UV CD. It proved to be im por tant to de ter -
mine whether lo cal dif fer ences of spa tial struc tures of
eEF1A isoforms are ac com pa nied by changes in the sec -
ond ary struc ture of these pro teins. The lat ter can be in -
ves ti gated us ing CD spec tros copy in far UV re gion
(190-250 nm). Pep tide bonds be come chromo phores at
these wave lengths, and sig nal ap pears if the bonds are in
reg u larly folded sur round ing. The spe cific form and size
of CD spec trum are mainly con di tioned by a-he li cal
struc tures in pro tein mol e cule [18].
Far UV CD spec tra of eEF1A1 and eEF1A2 are
shown in Fig.3. The in crease in the mo lar el lip tici ty
peak at 210 nm was ob served for eEF1A2 as com pared
to eEF1A1. Since this wave length is spe cific for a-he li -
cal struc tures, the in cre ment of CD sig nal ev i dences to
par tial loss of a-he li cal struc tures in the sec ond ary
struc ture of eEF1A2. These data cor re late with the re -
sults of our mo lec u lar dy nam ics sim u la tion on par tial
un wind ing of a-he lix Lys36-Glu48 of eEF1A2 [9, 10].
388
NOVOSYLNA A. V. ET AL.
Fig.2 CD spectra of
eEF1A isoforms in near
UV region: 1 –
eEF1A1; 2 – eEF1A2
Wave lengths, nm
[q
]
×
0
1
3-
eer
ge
d(
×
mc
2
×
l
o
m
d
1-
)
There fore, the com par a tive anal y sis of spa tial struc -
tures of two tis sue-spe cific eEF1A isoforms, us ing bio -
phys i cal meth ods, has been car ried out for the first time.
One of the isoforms is in volved in ovar ian can cer and
can cer of lungs in hu mans [4, 5, 7, 8]. The struc ture of
eEF1A2 has been shown as more com pact and char ac -
ter ized by par tial un wind ing of a-he lix Lys36-Glu48.
Some dif fer ences have been also discovered in the ter -
tiary struc tures of pro tein isoforms. These specificities
of spa tial or ga ni za tion may re sult in the ex po sure of
func tional sites in eEF1A2, ca pa ble of bind ing sig nal
mol e cules, which may serve as one of the reasons for
oncogenicity of this isoform.
Current work is among the first studies, proving
that 98% similar isoforms of homologous proteins may
have different spatial conformations. Thus, not only the
changes in the primary structure, revealed e.g. in the
appearance of new domains, or in elimination or
appearance of new sites of post-translational
modifications, but also the changes in their spatial
conformation are important for the functional
divergence of the protein isoforms. These data will
allow extending the direction of searching for multiple
families of various isoproteins.
The authors are grateful to the Fund of fundamental
researches of the Ministry of Science and Education of
Ukraine, INTAS and Wellcome Trust for their financial
support. The authors are also grateful to B. S. Melnyk
for the measurements of CD spectra.
Î. Â. Íî âî ñèëü íà, O. O. Òèì ÷åí êî, ª. ². Òèê òî ïó ëî,
². M. Ñåð äþê, Á. Ñ. Íåã ðóöü êèé, Ã. Â. ªëüñüêà
Õà ðàê òå ðèñ òè êà ô³çè÷ íèõ âëàñ òè âîñ òåé äâîõ ³çî ôîðì ôàê òî ðà
åëîí ãàö³¿ òðàíñ ëÿö³¿ eEF1A
Ðå çþ ìå
Äâ³ òêà íè íîñ ïå öèô³÷í³ ³çî ôîð ìè ôàê òî ðà åëîí ãàö³¿ 1À ññàâö³â
(eEF1A1 ³ eEF1A2) ³äåí òè÷í³ íà 98 %. Àëå äåÿê³ ¿õí³ ôóíêö³¿ â
îðãàí³çì³ çíà÷ íî ð³çíÿòü ñÿ, ùî â îêðå ìèõ âè ïàä êàõ ìîæå áóòè
ïî â’ÿ çà íî ç ³íäóêö³ºþ êàí öå ðî ãå íå çó. Ìè ïðè ïóñ òè ëè, ùî íå -
çíà÷ íà ð³çíè öÿ ó ïåð âèí íèõ ïîñë³äîâ íîñ òÿõ ìîæå ïðè çâî äè òè
äî ñóòòºâèõ â³äì³ííîñ òåé ó ïðî ñòî ðîâ³é ñòðóê òóð³ ³çî ôîðì
eEF1A. Öå, â ñâîþ ÷åð ãó, ìîæå âïëè âà òè íà çäàòí³ñòü ò³º¿ ÷è
³íøî¿ ³çî ôîð ìè âçàºìîä³ÿòè ç á³ëêà ìè-ïàð òíå ðà ìè.  äàí³é ðî -
áîò³ ìå òî äà ìè äè ôå ðåíö³éíî¿ ñêà íó âàëü íî¿ ì³êðî êà ëîðè -
ìåò𳿠³ êðó ãî âî ãî äèõ ðî¿ çìó íà ä³ëÿí êàõ äà ëå êî ãî ³ áëèæ íüî ãî
ÓÔ âñòà íîâ ëå íî, ùî ïî òåíö³éíî îíêî ãåí íà ³çî ôîð ìà eEF1A2
ìຠêîì ïàêòí³øó ïðî ñòî ðî âó ñòðóê òó ðó, í³æ eEF1A1, ïðè ÷î -
ìó â³äì³ííîñò³ ïðî ÿâ ëÿ þòü ñÿ íà ð³âí³ ÿê âòî ðèí íî¿, òàê ³ òðå -
òèí íî¿ ñòðóê òó ðè á³ëê³â.
Êëþ ÷îâ³ ñëî âà: ôàê òîð åëîí ãàö³¿ òðàíñ ëÿö³¿ eEF1A, á³îñèí -
òåç á³ëêà, äèô ôå ðåíö³éíà ñêà íó âàëü íà ì³êðî êà ëî ðè ìåòð³ÿ,
êðó ãî âèé äèõ ðî¿çì.
REFERENCES
1. Negrutskii B. S., Deutscher M. P. Channeling of
aminoacyl-tRNA for protein synthesis in vivo // Proc. Nat.
Acad. Sci. USA.–1991.–88.–Ð. 4991–4995.
2. Knudsen S. M., Frydenberg J., Clark B. F. C., Leffers H.
Tissue-dependent variation in the expression of elongation
factor-1 alpha isoforms: isolation and characterisation of a
cDNA encoding a novel variant of human elongation-factor 1
alpha // Eur. J. Biochem.–1993.–215.–Ð. 549–554.
3. Lee S., Wolfraim L. A., Wang E. Differential expression of S1
and elongation factor-1 alpha during rat development // J.
Biol. Chem.–1993.–268.–P. 24453–24459.
4. Lee J. M. The role of protein elongation factor eEF1A2 in
ovarian cancer // Reprod. Biol. Endocrinol.–2003.–1.–P. 69.
5. Anand N., Murthy S., Amann G., Wernick M., Porter L. A.,
Cukier I. H., Collins C., Gray J. W., Diebold J., Demetrick D.
J., Lee J. M. Protein elongation factor EEF1A2 is a putative
oncogene in ovarian cancer // Nat. Genet.–2002.–31.–
P. 301–305.
6. Tomlinson V. A., Newbery H. J., Wray N. R., Jackson J.,
Larionov A., Ìiller W. R., Dixon J. M., Abbott C. M.
Translation elongation factor eEF1A2 is a potential
oncoprotein that is overexpressed in two-thirds of breast
tumours // BMC Cancer.–2005.–5.–P. 113.
7. Zhu H., Lam D. C., Han K. C., Tin V. P., Suen W. S., Wang E.,
Lam W. K., Cai W. W., Chung L. P., Wong M. P. High
resolution analysis of genomic aberrations by metaphase and
array comparative genomic hybridization identifies
candidate tumour genes in lung cancer cell lines // Cancer
Lett.–2007.–245.–Ð. 303–314.
8. Li R., Wang H., Bekele B. N., Yin Z., Caraway N. P., Katz R. L.,
Stass S. A., Jiang F. Identification of putative oncogenes in
lung adenocarcinoma by a comprehensive functional
genomic approach // Oncogene.–2006.–25.–Ð. 2628–2635.
9. Êàí³áî ëîöü êèé Ä., Íî âî ñèëü íà Î., Íåã ðóöü êèé Á., ̳ðîø -
íè ÷åí êî Ì., ªëüñüêà Ã. Âèâ ÷åí íÿ êîí ôîð ìàö³éíî¿ ðóõ ëè -
389
CHARACTERIZATION OF PHYSICAL PROPERTIES
Fig.3 CD spectra of eEF1A isoforms in far UV region: 1 – eEF1A1;
2 – eEF1A2
Wave lengths, nm
[q
]
×
0
1
3-
eer
ge
d(
×
mc
2
×
l
o
m
d
1-
)
âîñò³ ³çî ôîð ìè eEF1A2 ôàê òî ðà åëîí ãàö³¿ òðàíñ ëÿö³¿ 1À
ëþ äè íè // ³ñí. íàö. óí-òó ³ìåí³ Òà ðà ñà Øåâ ÷åí êà. Ñåð.
á³îëîã³ÿ.–2007.–Âèï. 49–50.–Ñ. 12–15.
10. Êà íè áî ëîö êèé Ä. Ñ., Íî âî ñèëü íàÿ À. Â., Íåã ðóö êèé Á. Ñ.,
Åëüñêàÿ À. Â. Êîí ôîð ìà öè îí íàÿ ïîä âèæ íîñòü ôàê òî ðà
ýëîí ãà öèè òðàíñ ëÿ öèè eEF1A1 ÷å ëî âå êà // Á³îïîë³ìåðè ³
êë³òèíà.–2007.–23, ¹ 4.–Ñ. 307–317.
11. Shalak V. F., Budkevich T. V., Negrutskii B. S., El’skaya A. V.
A fast and effective method for purification of elongation
factor 1À from rabbit liver // Ukr. Biokhim. Zh.–1997.–
69.–P. 104–109.
12. Carvalho M. D., Carvalho J. F., Merrick W. C. Biological
characterization of various forms of elongation factor 1 from
rabbit reticulocytes // Arch. Biochem. and Biophys.–
1984.–234.–P. 603–611.
13. Senin A. A., Potekhin S. A., Tiktopulo E. I., Filomonov V. V.
Differential Scanning Microcalorimeter SCAL-1 // J. Therm.
Anal. Calorimetry.–2000.–62.–P. 153–160.
14. Privalov P. L., Potekhin S. A. Scanning microcalorimetry in
studying temperature-induced changes in proteins // Meth.
Enzymol.–1986.–131.–P. 4–51.
15. Sturtevant J. M. Heat capacity and entropy changes in
processes involving proteins // Proc. Nat. Acad. Sci.
USA.–1977.–74.–P. 2236–2240.
16. Gething M.-J., Davidson R. E. Chorismate mutase/prephenate
dehydratase from Escherichia coli K12. Effect of
phenylalanine, NaCl and pH on the protein conformation //
Eur. J. Biochem.–1978.–86.–P. 159–164.
17. Plunkett G., Clarence A. Ryan reduction and
carboxamidomethylation of the single disulfide bond of
proteinase inhibitor I from potato tubers. Effects on stability,
immunological properties, and inhibitory activities // J. Biol.
Chem. 1980.–255.–Ð. 2752–2775.
18. Òè íî êî È., Çà ó ýð Ê., Âýíã Ä., Ïàã ëè ñè Ä. Ôè çè ÷åñ êàÿ õè -
ìèÿ. Ïðèí öè ïû è ïðè ìå íå íèå â áè î ëî ãè ÷åñ êèõ íà óêàõ //
Òåõ íîñ ôå ðà.–2005.–Ð. 584–587.
UDC 577.217
Received 21.05.07
390
CHARACTERIZATION OF PHYSICAL PROPERTIES
|