Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії
Досліджено зміни кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії (ДКМП). Виявлено зростання сумарного вмісту Hsp60 як у лізатах тканини сердець людей, хворих на ДКМП, так і в лізатах тканин сердець мишей із експериментальним захворюванням, подібним до Д...
Saved in:
| Published in: | Біополімери і клітина |
|---|---|
| Date: | 2008 |
| Main Authors: | , , , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2008
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/157686 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії / Л.М. Капустян, О.Т. Рожко, В.І. Бобик, І.В. Крупська, Д.В. Рябенко, Ю.С. Хожаєнко, В.А. Гуртовий, В.С. Усенко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2008. — Т. 24, № 3. — С. 238-245. — Бібліогр.: 20 назв. — укр., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859614096002908160 |
|---|---|
| author | Капустян, Л.М. Рожко, О.Т. Бобик, В.І. Крупська, І.В. Рябенко, Д.В. Хожаєнко, Ю.С. Гуртовий, В.А. Усенко, В.С. Сидорик, Л.Л. |
| author_facet | Капустян, Л.М. Рожко, О.Т. Бобик, В.І. Крупська, І.В. Рябенко, Д.В. Хожаєнко, Ю.С. Гуртовий, В.А. Усенко, В.С. Сидорик, Л.Л. |
| citation_txt | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії / Л.М. Капустян, О.Т. Рожко, В.І. Бобик, І.В. Крупська, Д.В. Рябенко, Ю.С. Хожаєнко, В.А. Гуртовий, В.С. Усенко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2008. — Т. 24, № 3. — С. 238-245. — Бібліогр.: 20 назв. — укр., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Біополімери і клітина |
| description | Досліджено зміни кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії (ДКМП). Виявлено зростання сумарного вмісту Hsp60 як у лізатах тканини сердець людей, хворих на ДКМП, так і в лізатах тканин сердець мишей із експериментальним захворюванням, подібним до ДКМП людини. Вперше встановлено збільшення кількості Hsp60 у мітохондріальній фракції та зниження у цитоплазматичній, що може бути одним із чинників апоптозу кардіоміоцитів при серцевій недостатності, викликаній дією хронічного стресу. За результатами імуногістохімічного аналізу сердець мишей із експериментальною патологією, подібною до ДКМП людини, показано, що підвищення кількісного рівня Hsp60 у тканині серця носить неоднорідний характер: значне зростання відбувається лише в окремих кардіоміоцитах, ймовірно, в тих, де активовані антистресові механізми захисту клітини від дії хронічного стресу.
Досліджено зміни кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії (ДКМП). Виявлено зростання сумарного вмісту Hsp60 як у лізатах тканини сердець людей, хворих на ДКМП, так і в лізатах тканин сердець мишей із експериментальним захворюванням, подібним до ДКМП людини. Вперше встановлено збільшення кількості Hsp60 у мітохондріальній фракції та зниження у цитоплазматичній, що може бути одним із чинників апоптозу кардіоміоцитів при серцевій недостатності, викликаній дією хронічного стресу. За результатами імуногістохімічного аналізу сердець мишей із експериментальною патологією, подібною до ДКМП людини, показано, що підвищення кількісного рівня Hsp60 у тканині серця носить неоднорідний характер: значне зростання відбувається лише в окремих кардіоміоцитах, ймовірно, в тих, де активовані антистресові механізми захисту клітини від дії хронічного стресу.
Исследованы изменения количественного уровня молекулярного шаперона Hsp60 в ткани сердца при дилятационной кардиомиопатии (ДКМП). Выявлено увеличение общего количественного уровня Hsp60 как в лизатах ткани сердец человека, пораженных ДКМП, так и в лизатах ткани сердец мышей с экспериментальным заболеванием, подобным ДКМП человека. Впервые установлено увеличение содержания Hsp60 в митохондриальной и уменьшение в цитоплазматической фракции, что может являться одним из факторов апоптоза кардиомиоцитов при сердечной недостаточности, вызванной хроническим стрессом. Результаты иммуногистохимического анализа сердец мышей с экспериментальной патологией, подобной ДКМП человека, показали, что увеличение количественного уровня Hsp60 в ткани сердца имеет неоднородный характер: значительное возрастание происходит только в отдельных кардиомиоцитах, по всей видимости, тех, в которых активированы антистрессовые механизмы защиты клетки от действия хронического стресса.
|
| first_indexed | 2025-11-28T16:06:36Z |
| format | Article |
| fulltext |
Âèâ÷åííÿ çì³í ê³ëüê³ñíîãî ð³âíÿ ìîëåêóëÿðíîãî
øàïåðîíó Hsp60 ó òêàíèí³ ñåðöÿ ïðè äèëÿòàö³éí³é
êàðä³îì³îïàò³¿
Ë. Ì. Êà ïóñ òÿí, Î. Ò. Ðîæ êî, Â. ². Áî áèê, ². Â. Êðó ïñüêà, Ä. Â. Ðÿ áåí êî1,
Þ. Ñ. Õîæàºíêî2, Â. À. Ãóð òî âèé2, Â. Ñ. Óñåí êî2, Ë. Ë. Ñè äî ðèê
²íñòè òóò ìî ëå êó ëÿð íî¿ á³îëî㳿 i ãå íå òè êè ÍÀÍ Óêðà¿ íè
Âóë. Àêàäåì³êà Çà áî ëîò íî ãî, 150, Êè¿â, 03680, Óêðà¿íà
1 Íàö³îíàëü íèé êàðä³îëîã³÷íèé öåíòð «²íñòè òóò êàðä³îëî㳿 ³ì. Ì. Ä. Ñòðà æåñêà» ÀÌÍ Óêðà¿ íè
Âóë. Íà ðîä íî ãî îïîë ÷åí íÿ, 5, Êè¿â, 03151, Óêðà¿ íà
2Ìîð ôî ëîã³÷íà ëà áî ðà òîð³ÿ «Á²ÎÍÒÅÊ»
Âóë. Êîì ñî ñ îëüñüêà, 52À/88, Äí³ïðî ïåò ðîâñüê, 49000, Óêðà¿ íà
l.m.kapustian@imbg.org.ua
Äîñë³äæå íî çì³íè ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ ìî ëå êó ëÿð íî ãî øà ïå ðî íó Hsp60 ó òêà íèí³ ñåð öÿ ïðè äè ëÿ -
òàö³éí³é êàðä³îì³îïàò³¿ (ÄÊÌÏ). Âè ÿâ ëå íî çðîñ òàí íÿ ñó ìàð íî ãî âì³ñòó Hsp60 ÿê ó ë³çà òàõ òêà íèíè
ñåð äåöü ëþ äåé, õâî ðèõ íà ÄÊÌÏ, òàê ³ â ë³çà òàõ òêà íèí ñåð äåöü ìè øåé ³ç åê ñïå ðè ìåí òàëü íèì çà õâî -
ðþ âàí íÿì, ïîä³áíèì äî ÄÊÌÏ ëþ äè íè. Âïåð øå âñòà íîâ ëå íî çá³ëüøåí íÿ ê³ëüêîñò³ Hsp60 ó ì³òî -
õîíäð³àëüí³é ôðàêö³¿ òà çíè æåí íÿ ó öè òîï ëàç ìà òè÷í³é, ùî ìîæå áóòè îäíèì ³ç ÷èí íèê³â àïîï òî çó
êàðä³îì³îöèò³â ïðè ñåð öåâ³é íå äîñ òàò íîñò³, âèê ëè êàí³é 䳺þ õðîí³÷íî ãî ñòðå ñó. Çà ðå çóëü òà òà ìè
³ìó íîã³ñòîõ³ì³÷íî ãî àíàë³çó ñåð äåöü ìè øåé ³ç åê ñïå ðè ìåí òàëü íîþ ïà òî ëî㳺þ, ïîä³áíîþ äî ÄÊÌÏ
ëþ äè íè, ïî êà çà íî, ùî ï³äâè ùåí íÿ ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ Hsp60 ó òêà íèí³ ñåð öÿ íî ñèòü íå îäíîð³äíèé õà -
ðàê òåð: çíà÷ íå çðîñ òàí íÿ â³äáó âàºòüñÿ ëèøå â îêðå ìèõ êàðä³îì³îöè òàõ, éìîâ³ðíî, â òèõ, äå àê òè âî -
âàí³ àí òèñ òðå ñîâ³ ìå õàí³çìè çà õèñ òó êë³òèíè â³ä 䳿 õðîí³÷íî ãî ñòðå ñó.
Êëþ ÷îâ³ ñëî âà: ìî ëå êó ëÿðí³ øà ïå ðî íè, Hsp60, äè ëÿ òàö³éíà êàðä³îì³îïàò³ÿ, êàðä³îì³îöèò, àïîï òîç.
Âñòóï. Íà ñüî ãîäí³ êàðä³îâàñ êó ëÿðí³ çà õâî ðþ âàí íÿ
º îñíîâ íîþ ïðè ÷è íîþ ñìåð òíîñò³ ó ñâ³ò³. Âòðà òó
ôóíêö³¿ àáî çà ãè áåëü êàðä³îì³îöèò³â ââà æà þòü ãî -
ëîâ íèì ôàê òî ðîì ó ðîç âèò êó ïîä³áíèõ õâî ðîá.
Àïîïòîç êàðä³îì³îöèò³â õà ðàê òåð íèé ÿê äëÿ ãîñ -
òðèõ ñåð öå âèõ çà õâî ðþ âàíü, òàê ³ äëÿ íèç êè
õðîí³÷íèõ, çîê ðå ìà, äè ëÿ òàö³éíî¿ êàðä³îì³îïàò³¿.
³äîìî, ùî ìî ëå êó ëÿðí³ øà ïå ðî íè ÿê êàðä³îïðî -
òåê òîðí³ á³ëêè º îäíèì ³ç êëþ ÷î âèõ ðå ãó ëÿ òîð³â
àïîï òî çó êàðä³îì³îöèò³â [1].
Îñîá ëè âèé ³íòå ðåñ ïðåä ñòàâ ëÿº ìî ëå êó ëÿð íèé
øà ïå ðîí Hsp60, îñíîâ íèì êîì ïàð òìåí òîì
ôóíêö³îíó âàí íÿ ÿêî ãî º ì³òî õîíäð³¿. Ïðî òå, çà ðå -
çóëü òà òà ìè îñòàíí³õ äîñë³äæåíü, ó êàðä³îì³îöè òàõ
äî 30 % âì³ñòó öüî ãî á³ëêà çî ñå ðåä æå íî â öè -
òîïëàçì³ [2]. Äå ÿ êè ìè åê ñïå ðè ìåí òà ìè ïðî äå -
ìîíñòðî âà íî ïî òåíö³éíó àí òè à ïîï òè÷ íó ðîëü öè -
òîï ëàç ìà òè÷ íî ãî Hsp60 êàðä³îì³îöèò³â. Çîê ðå ìà,
íàä å êñïðåñ³ÿ Hsp60 çà õè ùຠêàðä³îì³îöè òè â³ä
àïîï òî çó ï³ñëÿ ³øå쳿 [3]. Ïî êà çà íî, ùî öè òîï ëàç -
ìà òè÷ íèé Hsp60 óòâî ðþº ìàê ðî ìî ëå êó ëÿð íèé êîì -
ïëåêñ ç ïðî à ïîï òè÷ íè ìè á³ëêà ìè Bax òà Bak, áëî -
êó þ ÷è ¿õíþ çäàòí³ñòü âèê ëè êà òè àïîï òîç. Çíè æåí -
íÿ ð³âíÿ Hsp60 ó êàðä³îì³îöè òàõ âíàñë³äîê
238
ISSN 0233-7657. Á³îïîë³ìåðè ³ êë³òèíà. 2008. Ò. 24. ¹ 3
Ó Ë. Ì. ÊÀÏÓÑÒßÍ, Î. Ò. ÐÎÆÊÎ, Â. ². ÁÎÁÈÊ, ². Â. ÊÐÓÏÑÜÊÀ,
Ä. Â. ÐßÁÅÍÊÎ, Þ. Ñ. ÕÎÆÀªÍÊÎ, Â. À. ÃÓÐÒÎÂÈÉ, Â. Ñ. ÓÑÅÍÊÎ,
Ë. Ë.ÑÈÄÎÐÈÊ, 2008
àí òè ñåíñ-ÐÍÊ îá ðîá êè ÷è ã³ïî êñ³¿ ïðè çâî äèòü äî
òðàíñ ëî êàö³¿ á³ëêà Bax äî ì³òî õîíäð³é ³ çà ïóñ êó
àïîï òî çó [4, 5]. Íà äå êñïðåñ³ÿ Hsp60 ó êàðä³îì³îöè -
òàõ çìåí øóº ð³âåíü äîê ñî ðóá³öèí-³íäó êî âà íî ãî
àïîï òî çó çà âäÿ êè ³íã³áó âàí íþ óá³êâ³òè íó âàí íÿ àí -
òè à ïîï òè÷ íî ãî á³ëêà Bcl-XL [6]. Îòæå, öè òîï ëàç ìà -
òè÷ íèé Hsp60 ìî æå ìî äó ëþ âà òè ð³âåíü á³ëê³â ðî -
äè íè Bcl-2 çà ðà õó íîê ïî ñòòðàí ñëÿö³éíèõ ìî -
äèô³êàö³é ³ òèì ñà ìèì ñóï ðå ñó âà òè àê òè âàö³þ
àïîï òè÷ íèõ ñèã íàëü íèõ êàñ êàä³â ó êàðä³îì³îöè òàõ.
Óñ³ ö³ äàí³ äîç âî ëè ëè íàì ïðè ïóñ òè òè, ùî çì³íè
ê³ëüêîñò³ òà/àáî êë³òèí íî¿ ëî êàë³çàö³¿ Hsp60 ìî -
æóòü âïëè âà òè íà ðîç âè òîê òà êî¿ âàæ êî¿ ñåð öå âî¿
ïà òî ëî㳿, ÿê ÄÊÌÏ. Òî ìó âèâ ÷åí íÿ îñîá ëè âîñ òåé
åêñïðåñ³¿ øà ïå ðî íó Hsp60 íå îáõ³äíå íå ëè øå äëÿ
ðî çóì³ííÿ ìî ëå êó ëÿð íèõ ìå õàí³çì³â ðîç âèò êó
ÄÊÌÏ, àëå é äëÿ ìîæ ëè âî ãî ñòâî ðåí íÿ íî âèõ òå ðà -
ïåâ òè÷ íèõ çà ñîá³â.
Ìåòà íà øî ãî äîñë³äæåí íÿ ïî ëÿ ãà ëà ó âèç íà -
÷åíí³ âì³ñòó Hsp60 ó òî òàëü íî ìó ë³çàò³, â öè òîï ëàç -
ìà òè÷í³é òà ì³òî õîíäð³àëüí³é ôðàêö³ÿõ, îò ðè ìà íèõ
ç ì³îêàð äà ëþ äåé, õâî ðèõ íà ÄÊÌÏ, òà ìè øåé ç åê -
ñïå ðè ìåí òàëü íèì ³íäó êî âà íèì çà õâî ðþ âàí íÿì,
ïîä³áíèì äî ÄÊÌÏ ëþäèíè.
Ìà òåð³àëè ³ ìå òî äè. Âè êî ðèñ òà íî çðàç êè
ñåêö³éíî ãî ïà òî ìîð ôî ëîã³÷íî ãî ìà òåð³àëó ç ë³âèõ
øëó íî÷ê³â ï’ÿ òè ñåð äåöü õâî ðèõ, ùî ïî ìåð ëè â³ä
ÄÊÌÏ, òà ï’ÿ òè íîð ìàëü íèõ ñåð äåöü ïðàê òè÷ íî
çäî ðî âèõ ëþ äåé, ÿê³ çà ãè íó ëè â ðåçóëüòàò³
íåùàñíîãî âèïàäêó.
Äëÿ âèâ ÷åí íÿ ð³âíÿ åêñïðåñ³¿ Hsp60 ó äè íàì³ö³
çà õâî ðþ âàí íÿ çà ñòî ñî âà íî ñòâî ðå íó ðàí³øå â
íàø³é ëà áî ðà òî𳿠åê ñïå ðè ìåí òàëü íó ìî äåëü
ì³îçèí-³íäó êî âà íî ãî àâ òî³ìóí íî ãî ïî øêîä æåí íÿ
ì³îêàð äà ìè øåé ë³í³¿ BALB/c, ïîä³áíî ãî äî ÄÊÌÏ
ëþ äè íè. Äàí³ ïðî ðîç ðîá ëå íó ìî äåëü ì³îçèí-³íäó -
êî âà íî ãî ïî øêîä æåí íÿ ì³îêàð äà îïóáë³êî âà íî
ðàí³øå â ðî áî òàõ [7, 8]. Äîñë³äæó âà ëè òàê³ ãðó ïè
òâà ðèí: êîí òðîëü íà (çäî ðîâ³ ìèø³ ë³í³¿ BALB/c) òà
åê ïå ðè ìåí òàëüí³ – ÷å ðåç 1, 2, 4 òà 6 ì³ñÿö³â ï³ñëÿ
³íäóêö³¿ çà õâî ðþ âàí íÿ. Äî êîæ íî¿ ãðó ïè âõî äè ëî
ïî ï’ÿòü òâà ðèí.
Âñþ ðî áî òó ç òâà ðè íà ìè ïðî âå äå íî çã³äíî ç ïðà -
âè ëà ìè Åòè÷ íî ãî êîì³òå òó Óêðà¿ íè. Òâà ðèí äå -
êàï³òó âà ëè ï³ä ëåã êèì åô³ðíèì íà ðêî çîì. Ñåð öå çó -
ïè íÿ ëè ïåð ôó糺þ îõî ëîä æå íèì äî òåìïåðàòóðè
4 îÑ ðîç ÷è íîì ôîñôàòíîãî áóôåðà PBS.
Îòðè ìàí íÿ ñó ìàð íî ãî ë³çà òó ³ç òêà íè íè ñåð öÿ.
Íà âàæ êó ì³îêàð äà ãî ìî ãåí³çó âà ëè ó 20 ìÌ
òðèñ-ÍÑl-áó ôåð³, ðÍ 7,5, 150 ìÌ NaÑl, 1 ìÌ
ÅÄÒÀ, 1 %-é NP-40, 1 %-é äåç îêñè õî ëàò íà òð³þ,
0,1 %-é äî äå öèë ñóëü ôàò íà òð³þ, 0,1 %-é ðîç ÷èí
ñóì³ø³ ³íã³á³òîð³â ïðî òå àç («Sigma», ÑØÀ). Ãî ìî -
ãå íàò öåí òðè ôó ãó âà ëè (10000 g, 20 õâ), íàä îñàä âè -
êî ðèñ òî âó âà ëè ÿê ñó ìàð íèé ë³çàò.
Îòðè ìàí íÿ öè òîï ëàç ìà òè÷ íî¿ òà ì³òî -
õîíäð³àëü íî¿ ñóá ôðàêö³é. Íà âàæ êó ì³îêàðäà ãî ìî -
ãåí³çó âà ëè ó áó ôåð³, ÿêèé ì³ñòèòü 50 ìÌ òðèñ-ÍÑl,
ðÍ 7,5, 5 ìÌ MgÑl2, 250 ìÌ ñà õà ðîçó, 1 ìÌ ÄÒÒ,
0,1 %-é ðîç ÷èí ñóì³ø³ ³íã³á³òîð³â ïðî òå àç
(«Sigma»). ßäðà â³ää³ëÿ ëè öåí òðè ôó ãó âàí íÿì
(1500 g, 20 õâ). ̳òî õîíä𳿠îñàä æó âà ëè öåí òðè ôó -
ãó âàí íÿì íàä îñà äó (10000 g, 20 õâ). Îäåð æà íèé ñó -
ïåðíà òàíò öåí òðè ôó ãó âà ëè ïðè 18500 g ïðî òÿ ãîì
20 õâ. Íà äî ñàä ì³ñòèâ öè òîï ëàç ìà òè÷ íó ôðàêö³þ.
̳òî õîíä𳿠ïðî ìè âà ëè áó ôå ðîì äëÿ ãî ìî ãåí³çàö³¿,
îñàä æó âà ëè öåí òðè ôó ãó âàí íÿì òà äåç³íòåã ðó âà ëè
çà äî ïî ìî ãîþ óëüòðàç âó êó. ×èñ òî òó îò ðè ìà íèõ
ôðàêö³é ïå ðåâ³ðÿ ëè ìå òî äîì ³ìó íîá ëî òèí ãó çà äî -
ïî ìî ãîþ àí òèò³ë ïðî òè á³ëêî âèõ ìàð êåð³â öè òîï -
ëàç ìè (b-òó áóë³í) òà ì³òî õîíäð³é (VDAC – voltage-
dependent anion channel). Íàìè âèêîðèñòàíî
àíòè-VDAC àíòèò³ëà (SC-8828, Santa Cruz) òà àí òè-
b-òóáóë³í (SC-9104, Santa Cruz).
²ìó íîá ëî òèíã. Êîí öåí òðàö³þ á³ëêà âèç íà ÷à ëè
çà ìå òî äîì Áðåä ôîð äà [9]. Á³ëêè ðîçä³ëÿ ëè åëåê òðî -
ôî ðå çîì çà äå íà òó ðó âàëü íèõ óìîâ ó 12 %-ìó ÏÀÀÃ
çà Ëåììë³ [10]. Åëåê òðî ïå ðå íå ñåí íÿ á³ëê³â
çä³éñíþ âà ëè íà ïîë³â³í³ëäèô òî ðèä íó (ÐVDF) ìåì -
áðà íó («Millipore», ÑØÀ). Ñàé òè íå ñïå öèô³÷íî¿
ñî ðáö³¿ áëî êó âà ëè 5 %-ì ðîç ÷è íîì ñó õî ãî çíå æè ðå -
íî ãî ìî ëî êà â áó ôåð³ PBS-T (80 ìM Na2HPO4,
20 ìM NaH2PO4, 100 ìM NaCl, pH 7,5, 0,1 %-é
òâ³í-20) ïðî òÿ ãîì 1 ãîä çà ê³ìíàò íî¿ òåì ïå ðà òó ðè.
ßê ïåð âèíí³ âè êî ðèñ òî âó âà ëè îò ðè ìàí³ íà ìè êðî -
ëÿ÷³ ïîë³êëî íàëüí³ àí òè-GroEL àí òèò³ëà [11]. Ìåì -
áðà íè ³íêó áó âà ëè ç ïåð âèí íè ìè àí òèò³ëà ìè óïðî -
äîâæ 1 ãîä çà ê³ìíàò íî¿ òåì ïå ðà òó ðè, òðè÷³ â³äìè -
âà ëè áó ôå ðîì PBS-T òà ³íêó áó âà ëè ç
êîí ’þ ãî âà íè ìè ç ïå ðîê ñè äà çîþ õðî íó âòî ðèí íè ìè
àí òèò³ëà ìè («Sigma») ïðî òÿ ãîì 1 ãîä çà ê³ìíàò íî¿
239
ÂÈÂ×ÅÍÍß ÇÌ²Í Ê²ËÜʲÑÍÎÃΠвÂÍß ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÃÎ ØÀÏÅÐÎÍÓ HSP60 Ó ÒÊÀÍÈͲ ÑÅÐÖß
òåì ïå ðà òó ðè, ïðî ìè âà ëè 3 ðàçè ³ äå òåê òó âà ëè çà äî -
ïî ìî ãîþ íà áî ðó ECL («Amersham Pharmacia
Biotech», Øâåö³ÿ). Çà ö³ºþ æ ñõå ìîþ çä³éñíþ âà ëè
³ìó íîá ëî òèíã ç âè êî ðèñ òàí íÿì ìè øà ÷èõ ïîë³êëî -
íàëü íèõ àí òèò³ë ïðî òè êîí òðîëü íî ãî á³ëêà GAPDH
(ãë³öå ðàëü äåã³äôîñ ôàò äåã³äðî ãå íà çà), îò ðè ìà íèõ â
íàø³é ëàáîðàòîð³¿.
ʳëüê³ñíèé ð³âåíü á³ëêà îö³íþ âà ëè çà ³íòåí -
ñèâí³ñòþ ñèã íà ëó íà ïë³âö³ çà äî ïî ìî ãîþ êîì ï’þ -
òåð íî¿ ïðî ãðà ìè TotalLab 1.10 ³ ïðåä ñòàâ ëÿ ëè â
óìîâ íèõ îäè íè öÿõ. ʳëüê³ñòü á³ëêà Hsp60 íîð -
ìàë³çó âà ëè â³äíîñ íî âì³ñòó êîí òðîëü íî ãî á³ëêà
GAPDH. Ñòà òèñ òè÷ íèé àíàë³ç äà íèõ çä³éñíþ âà ëè
çà äî ïî ìî ãîþ ïà êå òó ñòà òèñ òè÷ íèõ ïðî ãðàì
STATISTICA 6.0 (Stat-Soft, 2001, ÑØÀ). Äëÿ
ïîð³âíÿí íÿ ïî êàç íèê³â äîñë³äæó âà íèõ ãðóï âè êî -
ðèñ òî âó âà ëè U-êðè òåð³é Ìà íà-³òí³ (Mann-
Whitney U-test). Çíà ÷åí íÿ ð < 0,05 ðîç ãëÿ äà ëè ÿê
êðè òåð³é çíà ÷ó ùîñò³ ð³çíèö³. Íà ðèñ. 1 ðå çóëü òà òè
ïðåä ñòàâ ëå íî ó âèã ëÿä³ Me [25; 75] (Me – ìåä³àíà;
25 è 75 – 1-é òà 3-é êâàð òèë³).
²ìó íîã³ñòîõ³ì³÷í³ äîñë³äæåí íÿ. Ñåð öÿ òâà ðèí
ï³ñëÿ ïåð ôó糿 ô³ç³îëîã³÷íèì ðîç ÷è íîì, ô³êñî âàí³ ó
ðîç ÷èí³ Áó å íà ïðî òÿ ãîì 24 ãîä çà ê³ìíàò íî¿ òåì ïå -
ðà òó ðè, äî çà ëèâ êè â ïà ðàô³í çáåð³ãà ëè â 70 %-ìó
åòà íîë³. Ç ñå ðåä íüî¿ ÷àñ òè íè îðãà íà ïåð ïåí äè êó -
ëÿð íî äî àíà òîì³÷íî¿ îñ³ âèð³çà ëè áëîê çà âòîâ øêè
4–5 ìì. Çð³çè òîâ ùè íîþ 4–5 ìêì îò ðè ìó âà ëè çà äî -
ïî ìî ãîþ ì³êðîòîìó (REICHERT-JUNG Mod.1140/
Autocut).
²ìó íîã³ñòîõ³ì³÷íå äîñë³äæåí íÿ âì³ñòó àí òè -
ãåí³â âè êî íó âà ëè çã³äíî ³ç ñòàí äàð òíè ìè ïðî òî êî -
ëà ìè [12, 13]. Äëÿ áëî êó âàí íÿ ñàéò³â íå ñïå öèô³÷íî¿
ñî ðáö³¿ âè êî ðèñ òî âó âà ëè á³îò èí-áëî êó âàëü íó ñèñ -
òå ìó («DAKO», ÑØÀ). Ðî áî ÷å ðîç âå äåí íÿ àí -
òè-Hsp60 àí òèò³ë – 1:1000. ̳÷åí³ á³îò è íîì àí -
òèêðî ëÿ÷³ àí òèò³ëà («Sigma») ðîç âî äè ëè 1:400,
Vectastatin ABC Kit («Vector Lab», ÑØÀ) ç ïå ðîê -
ñè äàç íîþ ì³òêîþ âè êî ðèñ òà íî ÿê òðåò³é øàð. Äëÿ
íå ãà òèâ íî ãî êîí òðî ëþ 1 %-é áè ÷à ÷èé ñè ðî âàò êî -
âèé àëü áóì³í («Sigma»), ðîç ÷è íå íèé ó 0,02 Ì ôîñ -
ôàò íî ìó áó ôåð³ (ðÍ 7,2), íà íî ñè ëè çàì³ñòü ñïå -
öèô³÷íèõ àí òèò³ë. Àêòèâí³ñòü ïå ðîê ñè äà çè âè ÿâ ëÿ -
ëè ³íêó áàö³ºþ çð³ç³â ó 0,05 %-ìó ðîç ÷èí³
3',3'-ä³àì³íî áåí çè äèí òåò ðàã³äðîõ ëî ðè äó (Sigma»),
ÿêèé ì³ñòèâ 0,01 % ïå ðîêñèäó âîä íþ.
²íòåí ñèâí³ñòü ³ìó íîã³ñòîõ³ì³÷íî ãî çà áàð âëåí íÿ
âèì³ðþ âà ëè çà äî ïî ìî ãîþ ñâ³òëî âî ãî ì³êðîñ êî ïà
«Axioplan» («Zeiss», ͳìå÷ ÷è íà) ç ³ìåðñ³ºþ òà
îá’ºêòè âîì ́100, îñíà ùå íî ãî ñèñ òå ìîþ â³äå îâ âå -
äåí íÿ çîá ðà æåíü. Ñèñ òå ìà ââåäåííÿ çîá ðà æåíü
ñêëà äàºòüñÿ ç â³äå î êà ìå ðè Sony DXC-151AP ç êîì -
ïî çèò íèì â³äå îâ õî äîì, ïëà òè â³äå îâ õî äó EZ
Capture, êîì ï’þ òå ðà òà ïðî ãðà ìè àíàë³çó çîá ðà -
æåíü «ImagePro» («Media Cybernetic», ÑØÀ). Ó
êîæ íî ìó çðàç êó äîñë³äæó âà ëè ïî 10 ïîë³â çî ðó, îá -
ðà íèõ âè ïàä êî âî, ³ çîá ðà æåí íÿ çáåð³ãà ëè ó âèã ëÿä³
ôàéë³â ôîð ìà òó Tiff. Ïðîñ òî ðî âå êàë³áðó âàí íÿ òà
êàë³áðó âàí íÿ ³íòåí ñèâ íîñò³ çà áàð âëåí íÿ ïðî âî äè -
ëè çã³äíî ç ðå êî ìåí äàö³ÿìè âè ðîá íè êà. Äëÿ âèç íà -
÷åí íÿ îïòè÷ íî¿ ù³ëüíîñò³ ïî çè òèâ íî ãî çà áàð âëåí -
íÿ âè êî ðèñ òî âó âà ëè ñòàí äàð òíó øêà ëó îïòè÷ íî¿
ù³ëüíîñò³, íàä à íó â ïà êåò³ ïðî ãðàì íî ãî çà áåç ïå -
÷åí íÿ. Çà äî ïî ìî ãîþ ³íñòðó ìåí òà ïðî ãðà ìè
ImagePro Count/Size âèç íà ÷à ëè ñå ðåä íþ îïòè÷ íó
ù³ëüí³ñòü ïî çè òèâ íî ãî çà áàð âëåí íÿ òà â³äñî òîê
ïëîù³ çð³çó, ÿêó çà é ìຠïî çè òèâ íå çà áàð âëåí íÿ.
Âì³ñò àí òè ãå íó â òêà íèí³ ðîç ðà õî âó âà ëè ÿê ìíî æè -
íó ñå ðåä íüî¿ îïòè÷ íî¿ ù³ëüíîñò³ ïî çè òèâ íî ãî çà -
áàð âëåí íÿ òà â³äñîò êà ïëîù³ çð³çó ïî çè òèâ íî ãî çà -
áàð âëåí íÿ. Äëÿ îö³íêè ð³çíèö³ ïîêàçíèê³â
âèêîðèñòîâóâàëè t-êðèòåð³é Ñò’þäåíòà. Çíà÷åííÿ
ð < 0,05 ðîçãëÿäàëè ÿê êðèòåð³é çíà÷óùîñò³ ð³çíèö³.
Ðå çóëü òà òè ³ îá ãî âî ðåí íÿ. Äîñë³äæåí íÿ ðîë³
àí òèñ òðå ñî âèõ á³ëê³â ó ðîç âèò êó ñåð öå âî-ñó äèí íèõ
ïà òî ëîã³é ìຠâå ëè êå íà óêî âå òà ïðàê òè÷ íå çíà ÷åí -
íÿ. óïå ðå êñïðåñ³ÿ ìî ëå êó ëÿð íèõ øà ïå ðîí³â º ïî -
òóæ íèì çà ñî áîì öè òîï ðî òåêö³¿, ó òî ìó ÷èñë³ ³ ñåð -
öå âî-ñó äèí íî¿ ñèñ òå ìè. Êàðä³îïðî òåê òîðí³ âëàñ òè -
âîñò³ øà ïå ðîí³â ïî êà çà íî ó íèçö³ äîñë³äæåíü,
ïðî âå äå íèõ íà êóëü òó ðàõ êàðä³îì³îöèò³â, òðàíñ ãåí -
íèõ òâà ðè íàõ òà ³íòàê òíèõ ñåð öÿõ. Àëå á³ëüø³ñòü
ïîä³áíèõ äîñë³äæåíü çä³éñíåí³ çà óìîâ ãîñ òðî ãî
ñòðå ñó, ³ ïðàê òè÷ íî äó æå ìà ëî äà íèõ ïðî îñîá ëè -
âîñò³ åêñïðåñ³¿ øà ïå ðîí³â òà ¿õíüî¿ êë³òèí íî¿ ëî -
êàë³çàö³¿ ïðè õðîí³÷íèõ çà õâî ðþ âàí íÿõ ñåð öå âî-ñó -
äèí íî¿ ñèñ òå ìè, çîê ðå ìà, ïðè ÄÊÌÏ. ÄÊÌÏ – öå
óøêîä æåí íÿ ñåð öå âî ãî ì’ÿ çà íå ç’ÿ ñî âà íî¿
åò³îëî㳿, ÿêå ñóï ðî âîä æóºòüñÿ ðîç øè ðåí íÿì êà ìåð
ñåð öÿ, ïî ðó øåí íÿì éî ãî ñèñ òîë³÷íî¿ ôóíêö³¿ òà
ðîç âèò êîì ñèì ïòîì³â ñåð öå âî¿ íå äîñ òàò íîñò³ [14].
Íåç âà æà þ ÷è íà âñ³ çó ñèë ëÿ ñó÷àñíî¿ ìåäèöèíè,
240
ÊÀÏÓÑÒßÍ Ë. Ì. ÒÀ ²Í.
241
ÂÈÂ×ÅÍÍß ÇÌ²Í Ê²ËÜʲÑÍÎÃΠвÂÍß ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÃÎ ØÀÏÅÐÎÍÓ HSP60 Ó ÒÊÀÍÈͲ ÑÅÐÖß
Ðèñ. 1. Âèç íà ÷åí íÿ ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ Hsp60 ó øëó íî÷ êàõ ñåð äåöü ëþ äè íè, óðà æå íèõ ÄÊÌÏ: à – òî òàëü íèé ë³çàò; á – öè òîï ëàç ìà -
òè÷ íà ôðàêö³ÿ; â – ì³òî õîíäð³àëü íà ôðàêö³ÿ (1–5 – íîð ìàëüí³ ñåð öÿ; 6–10 – ñåð öÿ, óðà æåí³ ÄÊÌÏ); ã – êîí òðîëü ÷èñ òî òè îò ðè ìà íèõ
ñóá êë³òèí íèõ ôðàêö³é (1–3 – öè òîï ëàç ìà òè÷í³ ôðàêö³¿; 4–6 – ì³òî õîíäð³àëüí³ ôðàêö³¿)
ÄÊÌÏ çàëèøàºòüñÿ îäíèì ³ç çàõâîðþâàíü, ÿêå
íàé÷àñò³øå ïðèçâîäèòü äî íåîáõ³äíîñò³
òðàíñïëàíòàö³¿ ñåðöÿ.
Ìè âèâ ÷à ëè çì³íè ê³ëüê³ñíîãî âì³ñòó Hsp60 ìå -
òî äîì ³ìó íîá ëî òèí ãó ÿê ó òî òàëü íî ìó ë³çàò³, òàê ³ â
öè òîï ëàç ìà òè÷í³é òà ì³òî õîíäð³àëüí³é ôðàêö³ÿõ.
Âè ÿâ ëå íî, ùî åêñïðåñ³ÿ á³ëêà Hsp60 ó ñåð öÿõ, óðà -
æå íèõ ÄÊÌÏ, íà îñòàíí³é ñòà䳿 çà õâî ðþ âàí íÿ
çðîñ òຠïðè áëèç íî â 2 ðàçè ó ïîð³âíÿíí³ ç êîí òðî -
ëåì (ðèñ. 1, à). Ïîä³áí³ ðå çóëü òà òè îò ðè ìà íî é
³íøè ìè äîñë³äíè êà ìè. Òàê, àâ òî ðà ìè [15, 16] ïî êà -
çà íî, ùî åêñïðåñ³ÿ Hsp60 ó ñåð öÿõ õâî ðèõ íà
ÄÊÌÏ âè ùà ó 2,5 ðàçó ïîð³âíÿ íî ç íîð ìîþ. Âèâ ÷à -
þ ÷è çì³íè åêñïðåñ³¿ Hsp60 ó äè íàì³ö³ íà åê ñïå ðè -
ìåí òàëüí³é ìî äåë³ çà õâî ðþ âàí íÿ, ïîä³áíî ãî äî
ÄÊÌÏ ëþ äè íè, íà ìè âñòà íîâ ëå íî çðîñ òàí íÿ
ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ Hsp60 ó ñåð öÿõ ìè øåé, ïî ÷è íà þ -
÷è ç äðó ãî ãî ì³ñÿ öÿ ï³ñëÿ ³íäóêö³¿ õâîðîáè (ðèñ. 2,
à). Ðå çóëü òà òè, îäåð æàí³ ìå òî äîì ³ìó íîá ëî òèí ãó,
òà êîæ ï³äòâåð äæå íî äà íè ìè ³ìó íîã³ñòîõ³ì³÷íî ãî
òà ìîð ôî ìåò ðè÷ íî ãî àíàë³çó (ðèñ. 3, òàá ëè öÿ). Çà -
áàð âëåí íÿ êàðä³îì³îöèò³â íà Hsp60 íà çð³çàõ ë³âèõ
øëó íî÷ê³â ì³îêàð äà êîí òðîëü íèõ ìè øåé âèã ëÿ äàº
çíà÷ íî ìåíø ³íòåí ñèâ íèì, í³æ ó ³ìóí³çî âà íèõ òâà -
ðèí (ðèñ. 3, à). Ïðè äîñë³äæåíí³ çì³í åêñïðåñ³¿ òà
êë³òèí íî¿ ëî êàë³çàö³¿ Hsp60 íà çð³çàõ ì³îêàð äà ìî -
äåëü íèõ ÄÊÌÏ-ìè øåé ñïîñ òåð³ãàºòüñÿ çíà÷ íå
ï³äâè ùåí íÿ âì³ñòó Hsp60 â îêðå ìèõ êàðä³îì³îöè -
òàõ ç ïåð øî ãî ì³ñÿ öÿ ï³ñëÿ ³íäóêö³¿ çà õâî ðþ âàí íÿ
(ðèñ. 3, á). Çà áàð âëåí íÿ òà êèõ êë³òèí íî ñèòü ãðà íó -
ëÿð íèé õà ðàê òåð ïîì³ðíî¿, à â äå ÿ êèõ âè ïàä êàõ –
âè ñî êî¿ ³íòåí ñèâ íîñò³. ×å ðåç 2 ì³ñÿö³ êàðòèíà
åêñïðåñ³¿ Hsp60 (ðèñ. 3, â) ïîð³âíÿ íî ç ïåð øèì ì³ñÿ -
öåì íå çì³íè ëàñÿ: ñå ðåä îñíîâ íî¿ ìà ñè ïîì³ðíî çà -
áàð âëå íèõ êë³òèí çóñòð³÷à ëè ñÿ ñèëüí³øå çà áàð -
âëåí³ êàðä³îì³îöè òè. ×å ðåç 4 ì³ñÿö³ ³íòåí ñèâí³ñòü
çà áàð âëåí íÿ íà Hsp60 â îêðå ìèõ êàðä³îì³îöè òàõ
çðîñ òຠ(ðèñ. 3, ã). Ó ïîð³âíÿíí³ ç êîí òðî ëåì çà áàð -
âëåí íÿ íà Hsp60 â ³ìóí³çî âà íèõ òâà ðèí áó ëî ³íòåí -
ñèâí³øèì ïðè áëèç íî ó 2 ðàçè (òàá ëè öÿ). Êð³ì òî ãî,
ðå çóëü òà òè ³ìó íîã³ñòîõ³ì³÷íî ãî àíàë³çó ïî êà çà ëè,
ùî çðîñ òàí íÿ âì³ñòó Hsp60 ïðè ïà òî ëî㳿 â òêà íèí³
ñåð öÿ ìຠíå îäíîð³äíèé õà ðàê òåð: çíà÷ íå ï³äâè -
ùåí íÿ â³äáó âàºòüñÿ ëè øå â îêðå ìèõ êàðä³îì³îöè -
òàõ. Îñòàííº ìî æå ñâ³ä÷èòè ïðî òå, ùî íà ïåâíîìó
åòàï³ ïàòîëî㳿 øê³äëèâîãî âïëèâó çàçíàþòü îêðåì³
êë³òèíè. ijÿ õðîí³÷íîãî ñòðåñó çóìîâëþº
àêòèâàö³þ àíòèñòðåñîâèõ ìåõàí³çì³â çàõèñòó
êë³òèíè, ùî é âèÿâëÿºòüñÿ ó ï³äâèùåíí³ åêñïðåñ³¿
øàïåðîíó.
Îñê³ëüêè Hsp60 ó êë³òèí³ ëî êàë³çóºòüñÿ ãî ëîâ -
íèì ÷è íîì ó ì³òî õîíäð³ÿõ òà öè òîï ëàçì³, íà ìè ïðî -
âå äå íî âèç íà ÷åí íÿ âì³ñòó çà çíà ÷å íî ãî øà ïå ðî íó â
îá îõ öèõ ñóá êë³òèí íèõ ôðàêö³ÿõ. ×èñ òî òó ì³òî -
õîíäð³àëü íî¿ òà öè òîï ëàç ìà òè÷ íî¿ ôðàêö³é ïå -
ðåâ³ðÿ ëè íà íà ÿâí³ñòü/â³äñóòí³ñòü â³äïîâ³äíèõ ñïå -
öèô³÷íèõ ìàð êåð³â (ðèñ. 1, ã).
Ðå çóëü òà òè äîñë³äæåí íÿ ïî êà çà ëè çðîñ òàí íÿ
ê³ëüêîñò³ Hsp60 â ì³òî õîíäð³ÿõ òà çíè æåí íÿ – â öè -
òîï ëàçì³ êàðä³îì³îöèò³â ï³ä ÷àñ ïðî ãðå ñó âàí íÿ ïà -
òî ëî㳿. Öå ïðî äå ìî íñòðî âà íî íà ñåð öÿõ ÿê õâî ðèõ
íà ÄÊÌÏ (ðèñ. 1, á, â), òàê ³ ï³ääîñë³äíèõ òâà ðèí
(ðèñ. 2, á, â). Ìè âè ÿ âè ëè çðîñ òàí íÿ ïðè áëèç íî íà
30 % ð³âíÿ ì³òî õîíäð³àëü íî ãî Hsp60 òà òà êå æ çíè -
æåí íÿ ð³âíÿ öè òîï ëàç ìà òè÷ íî ãî Hsp60 íà îñòàíí³é
ñòà䳿 ÄÊÌÏ ëþ äè íè.
Ïðè åê ñïå ðè ìåí òàëü íî ìó çà õâî ðþ âàíí³ ìè -
øåé, ïîä³áíî ìó äî ÄÊÌÏ ëþ äè íè, ö³ çì³íè ìà þòü
ùå äðà ìà òè÷í³øèé õà ðàê òåð – íà øîñ òèé ì³ñÿöü
õâî ðî áè ð³âåíü ì³òî õîíäð³àëü íî ãî Hsp60 çðîñ òàº, à
öè òîï ëàç ìà òè÷ íî ãî – çíè æóºòüñÿ ó 2 ðàçè. Ö³ äàí³ º
ñâ³ä÷åí íÿì òî ãî, ùî íà 6-é ì³ñÿöü ï³ñëÿ ³íäóêö³¿ çà -
õâî ðþ âàí íÿ ïà òî ëîã³÷í³ çì³íè â³äáó âà þòü ñÿ ó çíà÷ -
íî á³ëüø³é ê³ëüêîñò³ êàðä³îì³îöèò³â, ùî âêà çóº íà
ïðî ãðå ñó âàí íÿ òà ïî øè ðåí íÿ ïà òî ëîã³÷íî ãî ïðî öå -
ñó â ì³îêàðä³ òâà ðèí. Çðîñ òàí íÿ ê³ëüêîñò³ ì³òî -
õîíäð³àëü íî ãî Hsp60 ìî æå áó òè àäàï òèâ íîþ
â³äïîâ³ääþ íà ïðî ãðå ñó âàí íÿ ³íäó êî âà íî¿ ïà òî -
ëî㳿. Ó òîé æå ÷àñ â³äî ìî, ùî ïðè ñåð öåâ³é íå äîñ -
òàò íîñò³ ê³ëüê³ñòü ì³òî õîíäð³é çðîñ òàº, àëå âî íè
ìåíø³ çà ðîçì³ðîì [17]. Òîìó íå ìîæíà âèê ëþ ÷è òè
242
ÊÀÏÓÑÒßÍ Ë. Ì. ÒÀ ²Í.
Ãðóïà 1 ì³ñÿöü 2 ì³ñÿö³ 4 ì³ñÿö³
Êîíòðîëü
(n = 50)
0,04±0,027 0,03±0,03 0,04±0,014
ÄÊÌÏ
(n = 50)
0,04±0,001 0,08±0,006* 0,09±0,005*
Ìîð ôî ìåò ðè÷ íèé àíàë³ç ð³âíÿ Hsp60 ó ë³âèõ øëó íî÷ êàõ
ñåð äåöü ìî äåëü íèõ ìè øåé
M ± m, óì. îä., *çíà ÷ó ùà ð³çíè öÿ ó ïîð³âíÿíí³ ç êîí òðî ëåì,
ð < 0,05.
éìîâ³ðíîñò³ ùå îäí³º¿ ïðè ÷èíè çá³ëüøåí íÿ
ê³ëüêîñò³ Hsp60 â ì³òîõîíäð³ÿõ, ÿêà ìî æå ïî ëÿ ãà òè
â äèñ ôóíêö³¿ îñòàíí³õ.
Ö³êà âèì º ôàêò çìåí øåí íÿ âì³ñòó öè òîï ëàç ìà -
òè÷ íî ãî Hsp60 ïðè ÄÊÌÏ. Ðàí³øå ïî êà çà íî, ùî
ïàä³ííÿ ð³âíÿ Hsp60 â öè òîï ëàçì³ íå îíà òàëü íèõ
êàðä³îì³îöèò³â ìî æå ïðè çâî äè òè äî çà ïóñ êó àïîï -
òî çó [5]. Çíè æåí íÿ ð³âíÿ öè òîï ëàç ìà òè÷ íî ãî Hsp60
ó êàðä³îì³îöè òàõ â³äáó âàºòüñÿ ïðè ä³àáå òè÷í³é
êàðä³îì³îïàò³¿, ïðè öüî ìó çìåí øóºòüñÿ ê³ëüê³ñòü
243
ÂÈÂ×ÅÍÍß ÇÌ²Í Ê²ËÜʲÑÍÎÃΠвÂÍß ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÃÎ ØÀÏÅÐÎÍÓ HSP60 Ó ÒÊÀÍÈͲ ÑÅÐÖß
Ðèñ. 2. Âèç íà ÷åí íÿ ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ Hsp60 ó øëó íî÷ êàõ ñåð äåöü ìè øåé ï³ä ÷àñ ðîç âèò êó åê ñïå ðè ìåí òàëü íî ãî çà õâî ðþ âàí íÿ,
ïîä³áíî ãî äî ÄÊÌÏ ëþ äè íè: à – òî òàëü íèé ë³çàò; á – öè òîï ëàç ìà òè÷ íà ôðàêö³ÿ; â – ì³òî õîíäð³àëü íà ôðàêö³ÿ (1 – êîí òðîëü; 2 –
1 ì³ñÿöü; 3 – 2 ì³ñÿö³; 4 – 4 ì³ñÿö³; 5 – 6 ì³ñÿö³â ï³ñëÿ ³íäóêö³¿ çà õâî ðþ âàí íÿ)
IGF-1-ðå öåï òîð³â, ùî ïðè çâî äèòü äî ïàä³ííÿ ³íòåí -
ñèâ íîñò³ IGF-1-ñèã íàë³íãó [18, 19]. Îñòàííº íå ãà -
òèâ íî âïëè âຠíà âè æè âàí íÿ êàðä³îì³îöèò³â. Âñòà -
íîâ ëå íî, ùî Hsp60 ñóï ðå ñóº óá³êâè òè íó âàí íÿ
IGF-1-ðå öåï òî ðà, ìî äó ëþ þ ÷è òèì ñà ìèì IGF-1-
ñèã íàë³íã ó êàðä³îì³îöè òàõ. Çðîá ëå íî ïðè ïó ùåí íÿ,
ùî ïðè ä³àáå òè÷í³é êàðä³îì³îïàò³¿ çíè æåí íÿ âì³ñòó
Hsp60 òà ïîä àëü øå çìåí øåí íÿ ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ
IGF-1-ðå öåï òî ðà âíàñë³äîê éî ãî ïî ñè ëå íî¿ äåã ðà -
äàö³¿ º îñíîâ íè ìè ìå õàí³çìà ìè ðîç âèò êó ä³àáå òè÷ -
íî¿ êàðä³îì³îïàò³¿.
Îñòàíí³ìè äîñë³äæåí íÿ ìè ïîêàçàíî, ùî Hsp60
ìî æå òðàíñ ïîð òó âà òè ñÿ ³ç êàðä³îì³îöè òà íà çîâí³
åê çî ñîì íèì øëÿ õîì ³, òà êèì ÷è íîì, ïî òðàï ëÿ òè ó
ì³æêë³òèí íèé ïðî ñò³ð [20]. Êð³ì òî ãî, âèç íà ÷å íî,
ùî ï³ä ÷àñ äå ÿ êèõ ñòðåñ³â, çîê ðå ìà ã³ïî êñ³¿, Hsp60 ç
öè òîï ëàç ìè êàðä³îì³îöèò³â åê ñïîð òóºòüñÿ íà ïëàç -
ìà òè÷ íó ìåì áðà íó. ×åðåç öå éî ãî ð³âåíü â öè -
òîïëàçì³ çíè æóºòüñÿ, ùî â ñâîþ ÷åð ãó ñïðè ÷èíÿº
çà ïóñê àïîï òî çó [3, 4]. Çà ðà õó íîê ÿêèõ ñà ìå ïðî -
öåñ³â â³äáó âàºòüñÿ çìåí øåí íÿ ê³ëüê³ñíî ãî âì³ñòó
öè òîï ëàç ìà òè÷ íî ãî Hsp60 ïðè ÄÊÌÏ, íà ñüî ãîäí³
íåâ³äîìî. Ç’ÿñóâàííÿ öüîãî ïèòàííÿ º ìåòîþ íàøèõ
ïîäàëüøèõ äîñë³äæåíü.
Âèñ íîâ êè. Îòðè ìàí³ íà ìè ðå çóëü òà òè ñâ³ä÷àòü
ïðî çðîñ òàí íÿ ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ ìî ëå êó ëÿð íî ãî
øà ïå ðî íó Hsp60 ó òêà íèí³ ñåð öÿ â ðàç³ ÄÊÌÏ, ïðè
öüî ìó â³äì³÷å íî çá³ëüøåí íÿ ê³ëüêîñò³ Hsp60 ó
ì³òî õîíäð³ÿõ òà çíè æåí íÿ ó öè òîï ëàçì³
êàðä³îì³îöèò³â. Ðå çóëü òà òè ³ìó íîã³ñòîõ³ì³÷íî ãî
àíàë³çó ñåð äåöü ìè øåé ç åê ñïå ðè ìåí òàëü íîþ ïà òî -
ëî㳺þ, ïîä³áíîþ äî ÄÊÌÏ ëþ äè íè, ïî êà çà ëè, ùî
ï³äâè ùåí íÿ ê³ëüê³ñíî ãî ð³âíÿ Hsp60 ó òêà íèí³ ñåð -
öÿ ìຠíå îäíîð³äíèé õà ðàê òåð: çíà÷ íå çðîñ òàí íÿ
â³äáó âàºòüñÿ ëè øå â îêðå ìèõ êàðä³îì³îöè òàõ,
éìîâ³ðíî, â òèõ, äå àí òèñ òðå ñîâ³ ìå õàí³çìè çà õèñ òó
êë³òè íè â³ä 䳿 õðîí³÷íî ãî ñòðå ñó º àê òè âî âà íè ìè.
L. M. Kapustian, O. T. Rozhko, V. I. Bobyk, I. V. Kroupska,
D. V. Riabenko, Yu. S. Khozhaenko, V. A. Gurtovyy, V. S. Usenko,
L. L. Sidorik
Changes in the content of molecular chaperone Hsp60 in heart
tissue at dilated cardiomyopathy
Summary
The changes of Hsp60 content in heart tissue at dilated
cardiomyopathy (DCM) were investigated. An increase in Hsp60
level was observed in human hearts affected by DCM as well as in
the hearts of mice with disease model similar to human DCM. We
observed the increase in Hsp60 level in mitochondria and decrease
in cytoplasmic fraction, which could be one of the reasons for
apoptotic responce in cardiomyocytes at heart failure associated
with chronic stress. The results of immunohystochemical analysis of
mice hearts with the model human-like pathology demonstrate
heterogeneity in chaperone levels. A considerable increase in
Hsp60 staining was observed only in some cardiomyocytes,
possibly in those with activated antistress mechanisms of cell
defense against chronic stress.
Keywords: molecular chaperone, Hsp60, dilated
cardiomyopathy, cardiomyocytes, apoptosis.
Ë. Ì. Êà ïóñ òÿí, Î. Ò. Ðîæ êî, Â. È. Áî áûê, È. Â. Êðóï ñêàÿ,
Ä. Â. Ðÿ áåí êî, Þ. Ñ. Õî æà åí êî, Â. À. Ãóð òî âûé, Â. Ñ. Óñåí êî,
Ë. Ë. Ñè äî ðèê
Èçó ÷å íèå èçìåíåíèé êî ëè ÷åñ òâåí íî ãî óðîâ íÿ ìî ëå êó ëÿð íî ãî
øà ïå ðîíà Hsp60 â òêàíè ñåðäöà ïðè äè ëÿ òà öè îí íîé
êàð äè î ìè î ïà òèè
Ðå çþ ìå
Èñ ñëå äî âà íû èç ìå íå íèÿ êî ëè ÷åñ òâåí íî ãî óðîâ íÿ ìî ëå êó ëÿð íî -
ãî øà ïå ðî íà Hsp60 â òêà íè ñåð äöà ïðè äè ëÿ òà öè îí íîé êàð äè î -
ìè î ïà òèè (ÄÊÌÏ). Âû ÿâ ëå íî óâå ëè ÷å íèå îá ùå ãî
êî ëè ÷åñ òâåí íî ãî óðîâ íÿ Hsp60 êàê â ëè çà òàõ òêà íè ñåð äåö ÷å -
ëî âå êà, ïî ðàæåí íûõ ÄÊÌÏ, òàê è â ëè çà òàõ òêà íè ñåð äåö ìû -
øåé ñ ýêñ ïå ðè ìåí òàëü íûì çà áî ëå âà íè åì, ïî äî áíûì ÄÊÌÏ
÷å ëî âå êà. Âïåð âûå óñòà íîâ ëå íî óâå ëè ÷å íèå ñî äåð æà íèÿ Hsp60
â ìè òî õîí äðè àëü íîé è óìåíü øå íèå â öè òîï ëàç ìà òè ÷åñ êîé
ôðàê öèè, ÷òî ìî æåò ÿâ ëÿòü ñÿ îäíèì èç ôàê òî ðîâ àïîï òî çà
êàð äè î ìè î öè òîâ ïðè ñåð äå÷ íîé íå äîñ òà òî÷ íîñ òè, âû çâàí íîé
õðî íè ÷åñ êèì ñòðåñ ñîì. Ðå çóëü òà òû èì ìó íî ãèñ òî õè ìè ÷åñ êî ãî
àíà ëè çà ñåð äåö ìû øåé ñ ýêñ ïå ðè ìåí òàëü íîé ïà òî ëî ãè åé, ïî äî -
áíîé ÄÊÌÏ ÷å ëî âå êà, ïî êà çà ëè, ÷òî óâå ëè ÷å íèå êî ëè ÷åñ òâåí -
íî ãî óðîâ íÿ Hsp60 â òêà íè ñåð äöà èìå åò íå îäíî ðîä íûé
õà ðàê òåð: çíà ÷è òåëü íîå âîçðàñòàíèå ïðîèñõîäèò òîëüêî â
îòäåëüíûõ êàðäèîìèîöèòàõ, ïî âñåé âè äè ìîñ òè, òåõ, â
êîòîðûõ àêòèâèðîâàíû àíòèñòðåññîâûå ìåõàíèçìû çàùèòû
êëåòêè îò äåéñòâèÿ õðîíè÷åñêîãî ñòðåññà.
Êëþ ÷å âûå ñëî âà: ìî ëå êó ëÿðíûå øà ïå ðîíû, Hsp60, äè ëÿ òà -
öè îí íàÿ êàð äè î ìè î ïà òèÿ, êàð äè î ìèî öèòû, àïîï òîç.
ÏÅÐÅË²Ê Ë²ÒÅÐÀÒÓÐÈ
1. Reeve J. L. V., Duffy A. M., O’Brien T., Samali A. Don’t loose
heart – therapeutic value of apoptosis prevention in the
treatment of cardiovascular disease // J. Cell. Mol. Med.–
2005.–9, N 3 .–P. 609–622.
2. Gupta S., Knowlton A. A. Hsp60, Bax, apoptosis and the heart
// J. Cell. Mol. Med .–2005.–9, N 1.–P. 51–58.
3. Lin K. M., Lin B., Lian I. Y., Mestril R., Scheffler I. E.,
Dillmann W. H. Combined and individual mitochondrial
Hsp60 and Hsp10 expression in cardiac myocytes protects
mitochondrial function and prevents apoptotic cell deaths
induced by simulated ischemia-reoxygenation //
Circulation.–2001.–103.–P. 1787–1792.
4. Gupta S., Knowlton A. A. Cytosolic heat shock protein 60,
hypoxia, and apoptosis // Circulation.–2002.–106.–P. 2727–
2733.
244
ÊÀÏÓÑÒßÍ Ë. Ì. ÒÀ ²Í.
5. Kirchhoff S. R., Gupta S., Knowlton A. A. Cytosolic heat
shock protein 60, apoptosis, and myocardial injury //
Circulation.–2002.–105.–P. 2899–2904.
6. Shan Y. X., Liu T. J., Su H. F., Samsamshariat A., Mestril R.,
Wang P. H. Hsp10 and Hsp60 modulate Bcl-2 family and
mitochondria apoptosis signaling induced by doxorubicin in
cardiac muscle cells // J. Mol. Cell. Cardiol.–2003.–35.–
P. 1135–1143.
7. Áî áèê Â. ²., Ðÿ áåí êî Ä. Â., Ñåð㳺íêî Î. Â., Òðóí³íà ². Â.,
Ôå äîð êî âà Î. Ì., Ìî ðî çî âà Ë. Ì., Ñè äî ðèê Ë. Ë. Ðîç ðîá êà
åê ñïå ðè ìåí òàëü íî¿ ìî äåë³ àâòî³ìóí íî ãî ì³îçèí-³íäó êî -
âà íî ãî ïî øêîä æåí íÿ ì³îêàð äà // Á³îïîë³ìåðè ³
êë³òèíà.–2007.–23, ¹ 2.–Ñ. 115–122.
8. Ðÿ áåí êî Ä. Â., Ñè äî ðèê Ë. Ë., Áî áûê Â. È., Ñåð ãè åí êî Î.
Â., Ôå äîð êî âà Î. Ì., Òðó íè íà È. Â., Ìà öó êà Ã. Õ. Ìîð ôî -
ëî ãè ÷åñ êèå îñî áåí íîñ òè àó òî èì ìóí íî ãî ïî âðåæ äå íèÿ
ìè î êàð äà, îá óñëîâ ëåí íî ãî ðàç ëè÷ íû ìè ìè î êàð äè àëü íû -
ìè àí òè ãå íà ìè ÷å ëî âå êà: ñðàâ íè òåëü íîå ýêñ ïå ðè ìåí òàëü -
íîå èñ ñëå äî âà íèå // Óêð. påâ ìà òîë. æóðí.–2000.–¹ 2.–
Ñ. 55–60.
9. Bradford M. A rapid and sensitive method for quantitation of
microgram quantities of protein utilizing the principle of
protein binding // Anal. Biochem.–1976.–46.–P. 193–200.
10. Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the
assembly of bacteriophage T4 // Nature.–1970.–227.–P. 680–
685.
11. Êà ïóñ òÿí Ë. Í., Êè ÿ ìî âà Ð. Ã., Ãðèø êî âà Â. Ñ., Òå -
ðåíòüºâ À. Ã., Ôè ëî íåí êî Â. Â., Ñè äî ðèê Ë. Ë. Ïî ëó ÷å íèå
ðå êîì áè íàí òíî ãî øà ïå ðî íà GroEL è åãî èì ìó íî ëî ãè ÷åñ -
êàÿ êðîññ-ðå àê òèâ íîñòü ñ Hsp60 // Á³îïîë³ìåðè ³ êë³òèíà.–
2006.–22, ¹ 2 .–Ñ. 117–121.
12. Immunocytochemical methods and protocols / Ed. C. L.
Javois.–New York: HumanapPress, 1999.–233 p.
13. Mize R. R. Quantitative image analysis for
immunocytochemistry and in situ hybridization // Neurosci.
Meth. J.–1994.–54 .–P. 219–237.
14. Maron B. J., Towbin J. A., Thiene G., Antzelevitch C.,
Corrado D., Arnett D., Moss A. J., Seidman C. E., Young J.
Contemporary definitions and classification of the
cardiomyopathies. an american heart association scientific
statement from the council on clinical cardiology, heart
failure and transplantation committee; quality of care and
outcomes research and functional genomics and translational
biology interdisciplinary working groups; and council on
epidemyology and prevention // Circulation.–2006.–113.–
P. 1807–1816.
15. Knowlton A. A., Kapadia S., Torre-Amione G., Durand J. B.,
Bies R., Young J., Mann D. L. Differential expression of heat
shock proteins in normal and failing human hearts // J. Mol.
Cell. Cardiol.–1998.–30.–P. 811–818.
16. Latif N., Taylor P. M., Khan M. A., Yakoub M. H., Dunn M. J.
The expression of heat shock protein 60 in patients with
dilated cardiomyopathy // Basic Res. Cardiol.–1999.–94.–
P. 112–119.
17. Sabbah H. N., Sharov V., Riddle J. M., Kono T., Lesch M.,
Goldstein S. Mitochondrial abnormalities in myocardium of
dogs with chronic heart failure // J. Mol. Cell. Cardiol.–
1992.–24.–P. 1333–1347.
18. Shan Y., Yang T. L., Mestril R., Wang P. H. Hsp10 and Hsp60
supress ubiquitination of insulin-like growth factor-1
receptor and augment insulin-like growth factor-1 receptor
signaling in cardiac muscle // J. Biochem. Chem.–2003.–278,
N 14.–P. 45492–45498.
19. Lai H. C., Liu T. J., Ting C. T., Yang J. Y., Huang L., Wallas
D., Kaiser P., Wang P. H. Regulation of IGF-1 receptor
signaling in diabetic cardiac muscle: dysregulation of
cytosolic and mitochondria Hsp60 // Amer. J. Physiol.
Endocrinol. Metab.–2007.–292.–P. E292–E297.
20. Gupta S., Knowlton A. A. Hsp60 trafficking in adult cardiac
myocytes: role of the exosomal pathway // Amer. J. Heart
Circ. Physiol.–2007.–292.–P. H3052–H3056.
ÓÄÊ 616.127-007.64:612.07
Íàä³éøëà äî ðå äàêö³¿ 14.01.08
245
ÂÈÂ×ÅÍÍß ÇÌ²Í Ê²ËÜʲÑÍÎÃΠвÂÍß ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÃÎ ØÀÏÅÐÎÍÓ HSP60 Ó ÒÊÀÍÈͲ ÑÅÐÖß
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-157686 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-11-28T16:06:36Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Капустян, Л.М. Рожко, О.Т. Бобик, В.І. Крупська, І.В. Рябенко, Д.В. Хожаєнко, Ю.С. Гуртовий, В.А. Усенко, В.С. Сидорик, Л.Л. 2019-06-20T18:34:36Z 2019-06-20T18:34:36Z 2008 Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії / Л.М. Капустян, О.Т. Рожко, В.І. Бобик, І.В. Крупська, Д.В. Рябенко, Ю.С. Хожаєнко, В.А. Гуртовий, В.С. Усенко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2008. — Т. 24, № 3. — С. 238-245. — Бібліогр.: 20 назв. — укр., англ. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0007A6 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/157686 616.127-007.64:612.07 Досліджено зміни кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії (ДКМП). Виявлено зростання сумарного вмісту Hsp60 як у лізатах тканини сердець людей, хворих на ДКМП, так і в лізатах тканин сердець мишей із експериментальним захворюванням, подібним до ДКМП людини. Вперше встановлено збільшення кількості Hsp60 у мітохондріальній фракції та зниження у цитоплазматичній, що може бути одним із чинників апоптозу кардіоміоцитів при серцевій недостатності, викликаній дією хронічного стресу. За результатами імуногістохімічного аналізу сердець мишей із експериментальною патологією, подібною до ДКМП людини, показано, що підвищення кількісного рівня Hsp60 у тканині серця носить неоднорідний характер: значне зростання відбувається лише в окремих кардіоміоцитах, ймовірно, в тих, де активовані антистресові механізми захисту клітини від дії хронічного стресу. Досліджено зміни кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії (ДКМП). Виявлено зростання сумарного вмісту Hsp60 як у лізатах тканини сердець людей, хворих на ДКМП, так і в лізатах тканин сердець мишей із експериментальним захворюванням, подібним до ДКМП людини. Вперше встановлено збільшення кількості Hsp60 у мітохондріальній фракції та зниження у цитоплазматичній, що може бути одним із чинників апоптозу кардіоміоцитів при серцевій недостатності, викликаній дією хронічного стресу. За результатами імуногістохімічного аналізу сердець мишей із експериментальною патологією, подібною до ДКМП людини, показано, що підвищення кількісного рівня Hsp60 у тканині серця носить неоднорідний характер: значне зростання відбувається лише в окремих кардіоміоцитах, ймовірно, в тих, де активовані антистресові механізми захисту клітини від дії хронічного стресу. Исследованы изменения количественного уровня молекулярного шаперона Hsp60 в ткани сердца при дилятационной кардиомиопатии (ДКМП). Выявлено увеличение общего количественного уровня Hsp60 как в лизатах ткани сердец человека, пораженных ДКМП, так и в лизатах ткани сердец мышей с экспериментальным заболеванием, подобным ДКМП человека. Впервые установлено увеличение содержания Hsp60 в митохондриальной и уменьшение в цитоплазматической фракции, что может являться одним из факторов апоптоза кардиомиоцитов при сердечной недостаточности, вызванной хроническим стрессом. Результаты иммуногистохимического анализа сердец мышей с экспериментальной патологией, подобной ДКМП человека, показали, что увеличение количественного уровня Hsp60 в ткани сердца имеет неоднородный характер: значительное возрастание происходит только в отдельных кардиомиоцитах, по всей видимости, тех, в которых активированы антистрессовые механизмы защиты клетки от действия хронического стресса. uk Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Біополімери і клітина Біомедицина Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії Изучение изменений количественного уровня молекулярного шаперона Hsp60 в ткани сердца при дилятационной кардиомиопатии Changes in the content of molecular chaperone Hsp60 in heart tissue at dilated cardiomyopathy Article published earlier |
| spellingShingle | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії Капустян, Л.М. Рожко, О.Т. Бобик, В.І. Крупська, І.В. Рябенко, Д.В. Хожаєнко, Ю.С. Гуртовий, В.А. Усенко, В.С. Сидорик, Л.Л. Біомедицина |
| title | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії |
| title_alt | Изучение изменений количественного уровня молекулярного шаперона Hsp60 в ткани сердца при дилятационной кардиомиопатии Changes in the content of molecular chaperone Hsp60 in heart tissue at dilated cardiomyopathy |
| title_full | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії |
| title_fullStr | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії |
| title_full_unstemmed | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії |
| title_short | Вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону Hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії |
| title_sort | вивчення змін кількісного рівня молекулярного шаперону hsp60 у тканині серця при дилятаційній кардіоміопатії |
| topic | Біомедицина |
| topic_facet | Біомедицина |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/157686 |
| work_keys_str_mv | AT kapustânlm vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT rožkoot vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT bobikví vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT krupsʹkaív vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT râbenkodv vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT hožaênkoûs vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT gurtoviiva vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT usenkovs vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT sidorikll vivčennâzmínkílʹkísnogorívnâmolekulârnogošaperonuhsp60utkaninísercâpridilâtacíiníikardíomíopatíí AT kapustânlm izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT rožkoot izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT bobikví izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT krupsʹkaív izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT râbenkodv izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT hožaênkoûs izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT gurtoviiva izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT usenkovs izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT sidorikll izučenieizmeneniikoličestvennogourovnâmolekulârnogošaperonahsp60vtkaniserdcapridilâtacionnoikardiomiopatii AT kapustânlm changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT rožkoot changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT bobikví changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT krupsʹkaív changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT râbenkodv changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT hožaênkoûs changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT gurtoviiva changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT usenkovs changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy AT sidorikll changesinthecontentofmolecularchaperonehsp60inhearttissueatdilatedcardiomyopathy |