Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях
Изучены морфометрические признаки пяти поколений растений табака, трансформированных с использованием обезоруженного штамма Agrobacterium tumefaciens A699, несущего плазмиду CNL с селективным геном nptII, кодирующим белок неомицинфосфотрансферазу. Вивчено морфометричні ознаки п’яти поколінь рослин т...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Физиология растений и генетика |
|---|---|
| Дата: | 2014 |
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України
2014
|
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/159403 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях / Ю.В. Нурминская, Л.А. Максимова, Т.В. Копытина, А.Г. Еникеев // Физиология растений и генетика. — 2014. — Т. 46, № 2. — С. 158-164. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859913507029385216 |
|---|---|
| author | Нурминская, Ю.В. Максимова, Л.А. Копытина, Т.В. Еникеев, А.Г. |
| author_facet | Нурминская, Ю.В. Максимова, Л.А. Копытина, Т.В. Еникеев, А.Г. |
| citation_txt | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях / Ю.В. Нурминская, Л.А. Максимова, Т.В. Копытина, А.Г. Еникеев // Физиология растений и генетика. — 2014. — Т. 46, № 2. — С. 158-164. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Физиология растений и генетика |
| description | Изучены морфометрические признаки пяти поколений растений табака, трансформированных с использованием обезоруженного штамма Agrobacterium tumefaciens A699, несущего плазмиду CNL с селективным геном nptII, кодирующим белок неомицинфосфотрансферазу.
Вивчено морфометричні ознаки п’яти поколінь рослин тютюну, трансформованих із використанням обеззброєного штаму Agrobacterium tumefaciens А699, що несе плазміду CNL із селективним геном nptII, який кодує білок неоміцинфосфотрансферазу.
Some morphometric characteristics of the development of successive T1—T5 generations of Nicotiana tabacum L. transformed by Agrobacterium tumefaciens strain А699 with gene nptII only were investigated.
|
| first_indexed | 2025-12-07T16:03:40Z |
| format | Article |
| fulltext |
ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ И ГЕНЕТИКА. 2014. Т. 46. № 2
УДК 575.23:62.37.29
АНАЛИЗ УРОВНЯ СТАБИЛЬНОСТИ РАЗВИТИЯ ТРАНСГЕННЫХ
РАСТЕНИЙ ТАБАКА В ПЯТИ ПОКОЛЕНИЯХ
Ю.В. НУРМИНСКАЯ, Л.А. МАКСИМОВА, Т.В. КОПЫТИНА, А.Г. ЕНИКЕЕВ
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Сибирский инсти-
тут физиологии и биохимии растений Сибирского отделения Российской академии
наук»
664033 Иркутск, ул. Лермонтова, 132
Изучены морфометрические признаки пяти поколений растений табака, транс-
формированных с использованием обезоруженного штамма Agrobacterium tumefa-
ciens A699, несущего плазмиду CNL с селективным геном nptII, кодирующим бе-
лок неомицинфосфотрансферазу. Согласно оценке флуктуирующей асимметрии
площади листовой пластинки, уровень стабильности развития трансформиро-
ванных растений превышает таковой у нормальных растений, особенно у Т4,
имевших максимальные показатели роста и развития. Прослеживалась тенден-
ция ослабления обнаруженного эффекта у поколения Т5, у растений этого поко-
ления наблюдали также увеличение числа корреляций между признаками.
Ключевые слова: Nicotiana tabacum L., трансгенез, стабильность развития, флукту-
ирующая асимметрия.
Риски некотролируемого проникновения генетически модифицирован-
ных растений в природные экосистемы поднимают серьезную проблему
оценки уровня стабильности их развития и способности к размножению
в ряду поколений. Потенциальная угроза нарушения экологического
равновесия в естественных популяциях уже становится реальной [14]. В
связи с этим необходимо прогнозирование не только последствий гене-
тического дрейфа чужеродных рекомбинантных молекул, но и подроб-
ное описание популяционных характеристик трансгенных организмов.
Генетическая трансформация способна приводить к разбаланси-
ровке коадаптированных генных комплексов, в связи с чем теоретичес-
ки возможно увеличение популяционной изменчивости у генетически
модифицированных организмов (ГМО) [3]. Одним из чувствительных
параметров, позволяющих выявить дестабилизацию генома еще до того,
как станут заметными внешние признаки неблагополучия в популяции
(например, изменения в числе фенодевиантов), является оценка ста-
бильности развития с помощью измерения флуктуирующей асимметрии
билатеральных структур (ФА) [5]. Возрастание онтогенетического шума,
приводящее к увеличению различия между признаком слева и справа,
свидетельствует об определенном состоянии нестабильности на уровне
генома. По выражению Захарова, стабильность развития дает возмож-
ность «оценить состояние популяции с онтогенетических позиций, оце-
нить нормальность, совершенство процессов развития» [5]. В настоящее
время в мировой литературе очень мало работ, посвященных изучению
стабильности развития трансгенных растений в ряду поколений. Выяс-
© Ю.В. НУРМИНСКАЯ, Л.А. МАКСИМОВА, Т.В. КОПЫТИНА, А.Г. ЕНИКЕЕВ, 2014
158
нение этого вопроса дало бы важную информацию о процессах, проис-
ходящих в популяции трансформантов.
Цель настоящей работы — исследование уровня стабильности раз-
вития пяти семенных поколений растений табака Nicotiana tabacum,
трансформированных с использованием обезоруженного штамма A. tume-
faciens A699.
Методика
Трансгенные растения Nicotiana tabacum L. (сорт Самсун) получали по
стандартным протоколам [1] с использованием штамма А. tumefaciens
A699 с вектором CNL и селективным геном nptII, кодирующим белок
неомицинфосфотрансферазу. Отбор трансгенных линий проводили на
средах с канамицином (100 мг/л). Интеграцию гена nptII у Т0 подтверж-
дали ПЦР-анализом [12].
Семена растений Т0 были фертильными, что дало возможность по-
лучить семенные поколения Т1—Т5. У растений всех поколений наличие
экспрессии гена nptII подтверждали тестом на канамицинустойчивость,
у растений поколений Т1, Т2 его интеграцию подтверждали также с по-
мощью ПЦР-анализа. При постановке вегетационного опыта контроль-
ные растения и растения пяти последовательных поколений трансген-
ных растений (Т1—Т5) выращивали одновременно в климатической
камере Plant Master «CLF Plant Climatics» (Германия): дневная темпера-
тура +25 °С, ночная +15 °С, продолжительность фотопериода — 16 ч.
По завершении вегетационного опыта (145 сут от посева) все лис-
тья, считая с седьмого, фиксировали в фиксаторе Кларка, затем фото-
графировали с масштабированием на стеклянной пластине в проходя-
щем свете. С помощью графического редактора Image Pro Plus (version
4.5.0.29 for Windows Media Cybernetics Inc) измеряли площади левой и
правой сторон листа. Погрешность измерения составляла 2,76 %. Инте-
гральный показатель асимметричности площади листовой пластинки
оценивали по методике [4].
Статистическую обработку результатов выполняли с помощью
программ Excel 2007 (Microsoft Office) и Statistica 6.0. (StatSoft, Inc. 2001).
Проводили описательную статистику (оценивали медиану, 25—75 %
квартили, минимаксные значения). Данные представлены в виде диа-
грамм размаха («ящик—усы») [13]. Степень рассеивания определяли по
величине межквартильного интервала. Достоверность отличий оценива-
ли с помощью теста Уилкоксона (р < 0,05). Наличие связи между при-
знаками находили посредством коэффициента ранговой корреляции
Спирмена rS (р < 0,05) [10].
Результаты и обсуждение
Ранее установлено, что трансгенные растения табака, полученные с ис-
пользованием обезоруженного штамма А699, по сравнению с контроль-
ными растениями развивались более высокими темпами, формировали
большую площадь общей листовой поверхности, зацветали раньше, име-
ли более длинные стебли [12] (рис. 1, а—в). Эффект увеличения длины
стебля и общей площади листьев, достигнув максимума у поколения Т4,
снижался у растений поколения Т5.
Вычислен показатель ФА для листовой пластинки пяти последова-
тельных поколений трансгенного табака (рис. 2). В целом трансгенные
159
АНАЛИЗ УРОВНЯ СТАБИЛЬНОСТИ РАЗВИТИЯ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ
ISSN 2308-7099. Физиология растений и генетика. 2014. Т. 46. № 2
растения поколений Т1—Т4 демонстрировали пониженный показатель
флуктуирующей асимметрии. Следует отметить, что увеличение показа-
телей роста у растений (длины стебля, общей площади листьев) корре-
лировало с уменьшением показателя ФА, что соответствовало снижению
160
Ю.В. НУРМИНСКАЯ, Л.А. МАКСИМОВА, Т.В. КОПЫТИНА, А.Г. ЕНИКЕЕВ
ISSN 2308-7099. Физиология растений и генетика. 2014. Т. 46. № 2
Рис. 1. Общая площадь листовой поверхности на 77-е сутки после посева (а), сроки нача-
ла цветения (б) и длина стебля (в) у нормальных и трансгенных растений табака. Звездоч-
ками обозначены варианты, достоверно отличающиеся от контроля (р < 0,05; n = 6). Ука-
заны минимаксные значения, 25-я и 75-я процентили
а
б
в
уровня онтогенетического шума, и, тем самым, повышению стабильно-
сти развития.
Ранее нами была предложена концепция, рассматривающая
Agrobacterium-опосредованную трансформацию как комплексный стресс-
фактор. Физиологические последствия генетической трансформации в
значительной степени могут быть обусловлены не только экспрессией
целевого гена, но и самим фактом трансформации [2, 15]. Изменчивость
генома при Agrobacterium-опосредованной трансформации может усугуб-
ляться тем, что в растительную клетку будут интегрироваться не только
Т-ДНК, но и регуляторные элементы бактериальной ДНК, которые,
встраиваясь в геном растения, влияют на его стабильность [7].
Поскольку интегрированная Т-ДНК содержала только селектив-
ный ген nptII, можно предположить, что зафиксированные изменения
интенсивности процессов роста и развития, а также стабильности разви-
тия обусловлены непосредственно трансформационным стрессом, а не
синтезом белка неомицинфосфотрансферазы.
Известно, что растения, как правило, реализуют не полностью
свой потенциал, что связано прежде всего с действием неблагоприятных
факторов среды [9]. Можно предположить, что трансформация стимули-
ровала реализацию потенциала продуктивности у четырех поколений
трансформантов.
Данные корреляционного анализа, проведенного по 12 признакам
(в том числе длина стебля, общая площадь листьев, сроки цветения,
длины органов цветка, количество плодов), свидетельствуют, что у рас-
тений пятого поколения число корреляций увеличивается:
Вариант Число корреляций
Контроль 10
Т1 8
Т2 14
Т3 7
Т4 7
Т5 18
Согласно результатам исследования Горбаня, рост числа корреля-
ций между признаками организма может свидетельствовать о действии
161
АНАЛИЗ УРОВНЯ СТАБИЛЬНОСТИ РАЗВИТИЯ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ
ISSN 2308-7099. Физиология растений и генетика. 2014. Т. 46. № 2
Рис. 2. Интегральный показатель асимметричности листовой пластинки у нормальных и
трансгенных растений табака (n = 6)
на него некоего стресс-фактора (внутреннего или внешнего) [11]. По-
скольку условия вегетационного опыта были максимально выровненны-
ми, с достаточной степенью уверенности можно предполагать наличие
именно внутренних причин регистрируемых изменений.
Из приведенных данных следует, что при генетической трансфор-
мации растений табака с использованием обезоруженного агробактери-
ального штамма значительно усиливаются процессы роста и развития,
что сопровождается повышением стабильности развития, оцениваемой
по степени ФА. Наблюдаемые эффекты имеют тенденцию к уменьше-
нию в пятом поколении растений. В этом поколении также повышалась
степень ФА одновременно с увеличением числа корреляций между при-
знаками, что свидетельствует о возможном неблагополучии (физиологи-
ческом напряжении) у них.
Изменения ФА в ряду поколений наблюдалось нами ранее и у трех
поколений растений гороха, трансформированных с помощью агробак-
териального штамма А281. Т-ДНК в данном случае не содержала ни це-
левых, ни маркерных генов. Уровень стабильности развития этих расте-
ний понижался от поколения к поколению одновременно со снижением
всхожести семян [6].
Согласно модели, предложенной Животовским, в случае попада-
ния ГМ-растений в природную популяцию вследствие переопыления
разбалансировка коадаптированных генных комплексов и вызванное ею
увеличение изменчивости признаков могут усилить действие на абори-
генную популяцию стабилизирующего отбора [3].
Явного и значительного увеличения изменчивости трансформан-
тов в наших экспериментах не обнаружено, онтогенетический шум у по-
колений Т1—Т4 был выражен в меньшей степени. Однако вследствие
стимуляции ростовых процессов, вызванной генетической трансформа-
цией, первые несколько поколений трансформированных особей при
благоприятных условиях среды могут оказаться серьезными конкурента-
ми за ресурсы для представителей природной популяции. Вследствие
этого повышается вероятность распространения в геноме аборигенной
популяции чужеродной генетической конструкции с одновременным
вытеснением из нее форм с исходным генотипом.
Результаты выполненных исследований свидетельствуют о том, что
у последующих поколений трансформантов могут возникать признаки
неблагополучия.
Как и любой живой организм, растение можно рассматривать как
неравновесную открытую систему. По мнению Пригожина, флуктуации
в такой системе усиливаются по мере приближения к точке бифуркации,
после прохождения которой система либо переходит в новое устойчивое
состояние, либо разрушается [8].
Таким образом, ГМ-растения в цепочке семенных поколений способ-
ны пройти через ряд неустойчивых состояний, приобретя в итоге новые
свойства и сохранить свое присутствие в экосистеме. Если же преодоление
критического состояния для популяции трансгенных растений окажется не-
возможным и уровень плодовитости не сможет компенсировать действие
стабилизирующего отбора, существование этой популяции в экосистеме
может оказаться под угрозой. Вопрос о том, как эти события отразятся на
состоянии фитоценоза и балансе всей экосистемы, остается открытым.
Следует учитывать, что ответ растения на генетическую трансфор-
мацию зависит от его генотипа, более того, этот ответ неодинаков даже
162
Ю.В. НУРМИНСКАЯ, Л.А. МАКСИМОВА, Т.В. КОПЫТИНА, А.Г. ЕНИКЕЕВ
ISSN 2308-7099. Физиология растений и генетика. 2014. Т. 46. № 2
внутри вида. Каждый случай трансформации — уникален. Хотя получен-
ные данные не дают полной картины о стабильности трансгенных рас-
тений, выявленные изменения в ряду поколений представляют интерес,
поскольку отражают микроэволюционные процессы, происходящие в
данной популяции трансгенных растений, и, таким образом, вносят
вклад в понимание механизмов поддержания стабильности генома при
внедрении чужеродной ДНК и в конечном итоге — поддержания попу-
ляционного гомеостаза.
Исследования проведены с использованием приборов Центра кол-
лективного пользования ИНЦ СО РАН.
1. Дрейпер Дж., Скот Р., Армитидж Ф., Уолдена Р. Генетическая инженерия растений:
Лаб. руководство. — М.: Мир, 1991. — 408 с.
2. Еникеев А.Г., Копытина Т.В., Семенова Л.А. и др. Агробактериальная трансформация как
биотический стрессирующий фактор // Журн. стресс-физиологии и биохимии расте-
ний. — 2008. — 4, № 1. — С. 11—15.
3. Животовский Л.А. Стабилизирующий отбор и приспособленность популяций ГМО //
ГМО — скрытая угроза России. — М.: ОАГБ, ЦЭПР, 2004. — С. 93—104.
4. Захаров В.М., Баранов А.С., Борисов В.И. и др. Здоровье среды: методика оценки. — М.:
Центр экол. политики России, 2000. — 68 с.
5. Захаров В.М. Онтогенез и популяция: оценка стабильности развития в природных по-
пуляциях // Онтогенез. — 2001. — 32, № 6. — С. 404—421.
6. Нурминская Ю.В., Семенова Л.А., Окунь О.В. и др. Изучение степени асимметрии как по-
казателя стрессового статуса трансгенных растений гороха в трех поколениях // Устой-
чивость организмов к неблагоприятным факторам внешней среды. Материалы Всерос.
науч. конф., 24—29 авг. 2009. — Иркутск: НЦ РВХ ВСНЦ РАМН, 2009. — С. 418—420.
7. Пермякова Н.В., Шумный В.К., Дейнеко Е.В. Агробактериальная трансформация расте-
ний: перенос фрагментов векторной ДНК в растительный геном // Генетика. — 2009. —
45, № 3. — С. 305—317.
8. Пригожин И., Стенгерс И. Порядок из хаоса: Новый диалог с природой. — М.: Про-
гресс, 1986. — 432 с.
9. Boyer J.S. Plant productivity and environment // Science. — 1982. — 218. — P. 443—448.
10. Glantz S.A. Primer of biostatistics. — New York: McGraw-Hill Professional, 1999. — 89 p.
11. Gorban A.N., Smirnova E.V., Tyukina T.A. General laws of adaptation to environmental fac-
tors: from ecological stress to financial crisis // Math. Model. Nat. Phenom. — 2009. — 4,
N 6. — P. 1—53.
12. Maximova L.A., Nurminskaya J.V., Kopytina T.V., Enikeev A.G. Agrobacterium-mediated
transformation of Nicotiana tabacum by disarmed strain At 699 resulted in considerable raising
of growth and development of transgenic plants // J. Stress Physiol. and Biochem. — 2012. —
8, N 1. — P. 138—148.
13. McGill R., Tukey J.W., Larsen W.A. Variations of box plots // Amer. Statistician. — 1978. —
32, N 1. — P. 12—16.
14. Wegier A., Pineyro-Nelson A., Alarcon J. et al. Recent long-distance transgene flow into wild
populations conforms to historical patterns of gene flow in cotton (Gossypium hirsutum) at its
centre of origin // Mol. Ecol. — 2011. — 20, N 19. — P. 4182—4194.
15. Zhivotovsky L.A. Environmental stress and evolution: A theoretical study // Environmental
Stress, Adaptation, and Evolution / R. Bijlsma and V. Loeschcke (eds.). — Basel: Birkhaeuser
Verlag, 1997. — P. 241—254.
Получено 24.05.2013
АНАЛIЗ РIВНЯ СТАБIЛЬНОСТI РОЗВИТКУ ТРАНСГЕННИХ РОСЛИН ТЮТЮНУ В
П’ЯТИ ПОКОЛIННЯХ
Ю.В. Нурмінська, Л.А. Максимова, Т.В. Копитіна, А.Г. Єнікеєв
Федеральна державна бюджетна установа науки «Сибірський інститут фізіології і біохімії
рослин Сибірського відділення Російської академії наук», Iркутськ
Вивчено морфометричні ознаки п’яти поколінь рослин тютюну, трансформованих із вико-
ристанням обеззброєного штаму Agrobacterium tumefaciens А699, що несе плазміду CNL із
163
АНАЛИЗ УРОВНЯ СТАБИЛЬНОСТИ РАЗВИТИЯ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ
ISSN 2308-7099. Физиология растений и генетика. 2014. Т. 46. № 2
селективним геном nptII, який кодує білок неоміцинфосфотрансферазу. Згідно з оцінкою
флуктуаційної асиметрії площі листкової пластинки, рівень стабільності розвитку транс-
формованих рослин вищий, ніж у нормальних рослин, особливо в Т4, що мали макси-
мальні показники росту і розвитку. Простежувалась тенденція ослаблення виявленого
ефекту в покоління Т5, у рослин цього покоління спостерігали також збільшення числа ко-
реляцій між ознаками.
THE DEVELOPMENTAL STABILITY OF FIVE SUCCESSIVE GENERATIONS OF
TRANSGENIC TOBACCO PLANTS
Y.V. Nurminskaya, L.A. Maximova, T.V. Kopytina, A.G. Enikeev
Siberian Institute of Plant Physiology and Biochemistry, Siberian Branch of Russian Academy
of Sciences
132 Lermontov St., Irkutsk, 664033, Russia
Some morphometric characteristics of the development of successive T1—T5 generations of
Nicotiana tabacum L. transformed by Agrobacterium tumefaciens strain А699 with gene nptII only
were investigated. First T-generations demonstrated increasing of developmental stability but then
tended to decrease: this effect was less expressed for generation T5 plants. The generation T4 plants
had maximal rate of developmental stability, simultaneously they had maximal values of morpho-
metric parameters. We observed the increasing of the correlations number among traits of the gen-
eration T5 plants.
Key words: Nicotiana tabacum L., transgenesis, developmental stability, fluctuating asymmetry.
164
Ю.В. НУРМИНСКАЯ, Л.А. МАКСИМОВА, Т.В. КОПЫТИНА, А.Г. ЕНИКЕЕВ
ISSN 2308-7099. Физиология растений и генетика. 2014. Т. 46. № 2
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-159403 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 2308-7099 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T16:03:40Z |
| publishDate | 2014 |
| publisher | Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Нурминская, Ю.В. Максимова, Л.А. Копытина, Т.В. Еникеев, А.Г. 2019-10-02T19:42:09Z 2019-10-02T19:42:09Z 2014 Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях / Ю.В. Нурминская, Л.А. Максимова, Т.В. Копытина, А.Г. Еникеев // Физиология растений и генетика. — 2014. — Т. 46, № 2. — С. 158-164. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. 2308-7099 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/159403 575.23:62.37.29 Изучены морфометрические признаки пяти поколений растений табака, трансформированных с использованием обезоруженного штамма Agrobacterium tumefaciens A699, несущего плазмиду CNL с селективным геном nptII, кодирующим белок неомицинфосфотрансферазу. Вивчено морфометричні ознаки п’яти поколінь рослин тютюну, трансформованих із використанням обеззброєного штаму Agrobacterium tumefaciens А699, що несе плазміду CNL із селективним геном nptII, який кодує білок неоміцинфосфотрансферазу. Some morphometric characteristics of the development of successive T1—T5 generations of Nicotiana tabacum L. transformed by Agrobacterium tumefaciens strain А699 with gene nptII only were investigated. ru Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України Физиология растений и генетика Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях Аналіз рівня стабільності розвитку трансгенних рослин тютюну в п'яти поколіннях The developmental stability of five successive generations of transgenic tobacco plants Article published earlier |
| spellingShingle | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях Нурминская, Ю.В. Максимова, Л.А. Копытина, Т.В. Еникеев, А.Г. |
| title | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях |
| title_alt | Аналіз рівня стабільності розвитку трансгенних рослин тютюну в п'яти поколіннях The developmental stability of five successive generations of transgenic tobacco plants |
| title_full | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях |
| title_fullStr | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях |
| title_full_unstemmed | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях |
| title_short | Анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях |
| title_sort | анализ уровня стабильности развития трансгенных растений табака в пяти поколениях |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/159403 |
| work_keys_str_mv | AT nurminskaâûv analizurovnâstabilʹnostirazvitiâtransgennyhrasteniitabakavpâtipokoleniâh AT maksimovala analizurovnâstabilʹnostirazvitiâtransgennyhrasteniitabakavpâtipokoleniâh AT kopytinatv analizurovnâstabilʹnostirazvitiâtransgennyhrasteniitabakavpâtipokoleniâh AT enikeevag analizurovnâstabilʹnostirazvitiâtransgennyhrasteniitabakavpâtipokoleniâh AT nurminskaâûv analízrívnâstabílʹnostírozvitkutransgennihroslintûtûnuvpâtipokolínnâh AT maksimovala analízrívnâstabílʹnostírozvitkutransgennihroslintûtûnuvpâtipokolínnâh AT kopytinatv analízrívnâstabílʹnostírozvitkutransgennihroslintûtûnuvpâtipokolínnâh AT enikeevag analízrívnâstabílʹnostírozvitkutransgennihroslintûtûnuvpâtipokolínnâh AT nurminskaâûv thedevelopmentalstabilityoffivesuccessivegenerationsoftransgenictobaccoplants AT maksimovala thedevelopmentalstabilityoffivesuccessivegenerationsoftransgenictobaccoplants AT kopytinatv thedevelopmentalstabilityoffivesuccessivegenerationsoftransgenictobaccoplants AT enikeevag thedevelopmentalstabilityoffivesuccessivegenerationsoftransgenictobaccoplants |