Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2
Введено в культуру in vitro рослини кількох сортів пшениці м'якої (Triticum aestivum L.) і досліджено їх регенераційну здатність. Відібрано сорти Миронівська 67 і Мірхад з метою перенесення в геном дріжджових (Saccharomyces cerevisiae) генів біосинтезу трегалози (TPS1 і TPS2) задля підвищення ї...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Доповіді НАН України |
|---|---|
| Дата: | 2020 |
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2020
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/170628 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 / А.Ю. Кваско, С.В. Ісаєнков, К.В. Дмитрук, А.І. Ємець // Доповіді Національної академії наук України. — 2020. — № 6. — С. 92-100. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-170628 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Кваско, А.Ю. Ісаєнков, С.В. Дмитрук, К.В. Ємець, А.І. 2020-07-20T14:41:13Z 2020-07-20T14:41:13Z 2020 Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 / А.Ю. Кваско, С.В. Ісаєнков, К.В. Дмитрук, А.І. Ємець // Доповіді Національної академії наук України. — 2020. — № 6. — С. 92-100. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 1025-6415 DOI: doi.org/10.15407/dopovidi2020.06.092 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/170628 57.085.2:577.21 Введено в культуру in vitro рослини кількох сортів пшениці м'якої (Triticum aestivum L.) і досліджено їх регенераційну здатність. Відібрано сорти Миронівська 67 і Мірхад з метою перенесення в геном дріжджових (Saccharomyces cerevisiae) генів біосинтезу трегалози (TPS1 і TPS2) задля підвищення їх посухостійкості. Перенесення генів здійснювали за допомогою Agrobacterium-опосередкованої трансформації, для цього було створено відповідні векторні конструкції pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 із застосуванням технології Gateway-клонування. Як експланти для трансформації використовували незрілі зародки пшениці. В експериментах було використано штами A. tumefaciens GV3101, які несли окремо конструкції pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 з цільовими генами TPS1 та TPS2 відповідно, що знаходились під контролем промотору убіхітину кукурудзи PUbi, і селективним маркерним геном гігроміцин-фосфотрансферази (hpt). Селекцію трансгенних ліній здійснювали на поживних середовищах у присутності гігроміцину. Трансгенну природу отриманих ліній підтверджували за допомогою ПЛР-методу з використанням специфічних праймерів до генів TPS1 та TPS2. Plants of several common wheat varieties (Triticum aestivum L.) were established in in vitro culture, and their ability of plant regeneration was studied. In order to obtain plants with enhanced drought tolerance, varieties Myronivska 67 and Myrkhad were picked up for a further transfer of yeast (Saccharomyces cerevisiae) trehalose biosynthesis genes (TPS1 and TPS2) into their genomes. For this purpose, constructs pBract214-TPS1 and pBract214-TPS2 were created using the Gateway-cloning technique. Both constructs contained TPS1 and TPS2 genes under the control of the constitutive maize ubiquitin promoter (PUbi) and hygromycin-phosphotransferase (hpt) selectable marker gene. Transformation was carried out with the use of two A. tumefaciens strains GV3101 carrying the constructions pBract214-TPS1 and pBract214-TPS2. Wheat immature embryos were used as explants for the transformation. Selection of transgenic lines was carried out on nutrient medium supplemented with 30 mg/L hygromycin (as selective agent). The presence of yeast TPS1 and TPS2 sequences in genomic DNA isolated from transgenic wheat plants was confirmed by the PCR analysis using primers specific to these genes. Введены в культуру in vitro растения нескольких сортов пшеницы (Triticum aestivum L.) и исследован их регенерационный потенциал. Отобраны сорта Мироновская 67 и Мирхад с целью интеграции в их геном дрожжевых (Saccharomyces cerevisiae) генов биосинтеза трегалозы (TPS1 и TPS2) для повышения их устойчивости к засухе. Перенос генов осуществляли с помощью Agrobacterium-опосредованной трансформации, для этого были созданы соответствующие векторные конструкции pBract214-TPS1 и pBract214- TPS2 с помощью технологии Gateway-клонирования. В качестве эксплантов для трансформации использовали незрелые зародыши пшеницы. В экспериментах использовали штаммы A. tumefaciens GV3101, которые несли отдельно конструкции pBract214-TPS1 и pBract214-TPS2 с целевыми генами TPS1 и TPS2 соответственно, находящимися под контролем промотора убихитина кукурузы PUbi, и селективным маркерным геном гигромицин-фосфотрансферазы (hpt). Селекцию трансгенных растений осуществляли на питательных средах в присутствии гигромицина. Трансгенную природу пол ученых линий подтверждали с помощью ПЦР-метода с использованием специфических праймеров к генами TPS1 и TPS2. Роботу виконано за фінансової підтримки проєкту “Створення посухостійких ліній рослин за допомогою надекспресії дріжджових генів біосинтезу трегалози” цільової комплексної міждисциплінарної програми наукових досліджень НАН України “Молекулярні та клітинні біотехнології для потреб медицини, промисловості та сільського господарства” (2015—2019 рр.) (номер державної реєстрації — 0115U005022). uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Доповіді НАН України Біологія Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 The obtaining of wheat plants with yeast genes of trehalose biosynthesis TPS1 and TPS2 Создание растений пшеницы с дрожжевыми генами биосинтеза трегалозы TPS1 и TPS2 Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 |
| spellingShingle |
Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 Кваско, А.Ю. Ісаєнков, С.В. Дмитрук, К.В. Ємець, А.І. Біологія |
| title_short |
Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 |
| title_full |
Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 |
| title_fullStr |
Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 |
| title_full_unstemmed |
Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 |
| title_sort |
створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози tps1 і tps2 |
| author |
Кваско, А.Ю. Ісаєнков, С.В. Дмитрук, К.В. Ємець, А.І. |
| author_facet |
Кваско, А.Ю. Ісаєнков, С.В. Дмитрук, К.В. Ємець, А.І. |
| topic |
Біологія |
| topic_facet |
Біологія |
| publishDate |
2020 |
| language |
Ukrainian |
| container_title |
Доповіді НАН України |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
The obtaining of wheat plants with yeast genes of trehalose biosynthesis TPS1 and TPS2 Создание растений пшеницы с дрожжевыми генами биосинтеза трегалозы TPS1 и TPS2 |
| description |
Введено в культуру in vitro рослини кількох сортів пшениці м'якої (Triticum aestivum L.) і досліджено їх регенераційну здатність. Відібрано сорти Миронівська 67 і Мірхад з метою перенесення в геном дріжджових (Saccharomyces cerevisiae) генів біосинтезу трегалози (TPS1 і TPS2) задля підвищення їх посухостійкості. Перенесення генів здійснювали за допомогою Agrobacterium-опосередкованої трансформації, для
цього було створено відповідні векторні конструкції pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 із застосуванням
технології Gateway-клонування. Як експланти для трансформації використовували незрілі зародки пшениці. В експериментах було використано штами A. tumefaciens GV3101, які несли окремо конструкції
pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 з цільовими генами TPS1 та TPS2 відповідно, що знаходились під контролем промотору убіхітину кукурудзи PUbi, і селективним маркерним геном гігроміцин-фосфотрансферази (hpt). Селекцію трансгенних ліній здійснювали на поживних середовищах у присутності гігроміцину.
Трансгенну природу отриманих ліній підтверджували за допомогою ПЛР-методу з використанням специфічних праймерів до генів TPS1 та TPS2.
Plants of several common wheat varieties (Triticum aestivum L.) were established in in vitro culture, and their
ability of plant regeneration was studied. In order to obtain plants with enhanced drought tolerance, varieties
Myronivska 67 and Myrkhad were picked up for a further transfer of yeast (Saccharomyces cerevisiae) trehalose
biosynthesis genes (TPS1 and TPS2) into their genomes. For this purpose, constructs pBract214-TPS1
and pBract214-TPS2 were created using the Gateway-cloning technique. Both constructs contained TPS1 and
TPS2 genes under the control of the constitutive maize ubiquitin promoter (PUbi) and hygromycin-phosphotransferase
(hpt) selectable marker gene. Transformation was carried out with the use of two A. tumefaciens
strains GV3101 carrying the constructions pBract214-TPS1 and pBract214-TPS2. Wheat immature embryos
were used as explants for the transformation. Selection of transgenic lines was carried out on nutrient medium
supplemented with 30 mg/L hygromycin (as selective agent). The presence of yeast TPS1 and TPS2 sequences in
genomic DNA isolated from transgenic wheat plants was confirmed by the PCR analysis using primers specific to
these genes.
Введены в культуру in vitro растения нескольких сортов пшеницы (Triticum aestivum L.) и исследован их
регенерационный потенциал. Отобраны сорта Мироновская 67 и Мирхад с целью интеграции в их геном
дрожжевых (Saccharomyces cerevisiae) генов биосинтеза трегалозы (TPS1 и TPS2) для повышения их устойчивости к засухе. Перенос генов осуществляли с помощью Agrobacterium-опосредованной трансформации, для этого были созданы соответствующие векторные конструкции pBract214-TPS1 и pBract214-
TPS2 с помощью технологии Gateway-клонирования. В качестве эксплантов для трансформации использовали незрелые зародыши пшеницы. В экспериментах использовали штаммы A. tumefaciens GV3101,
которые несли отдельно конструкции pBract214-TPS1 и pBract214-TPS2 с целевыми генами TPS1 и TPS2
соответственно, находящимися под контролем промотора убихитина кукурузы PUbi, и селективным маркерным геном гигромицин-фосфотрансферазы (hpt). Селекцию трансгенных растений осуществляли на питательных средах в присутствии гигромицина. Трансгенную природу пол ученых линий подтверждали с помощью ПЦР-метода с использованием специфических праймеров к генами TPS1 и TPS2.
|
| issn |
1025-6415 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/170628 |
| citation_txt |
Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2 / А.Ю. Кваско, С.В. Ісаєнков, К.В. Дмитрук, А.І. Ємець // Доповіді Національної академії наук України. — 2020. — № 6. — С. 92-100. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT kvaskoaû stvorennâroslinpšenicízdríždžovimigenamibíosintezutregalozitps1ítps2 AT ísaênkovsv stvorennâroslinpšenicízdríždžovimigenamibíosintezutregalozitps1ítps2 AT dmitrukkv stvorennâroslinpšenicízdríždžovimigenamibíosintezutregalozitps1ítps2 AT êmecʹaí stvorennâroslinpšenicízdríždžovimigenamibíosintezutregalozitps1ítps2 AT kvaskoaû theobtainingofwheatplantswithyeastgenesoftrehalosebiosynthesistps1andtps2 AT ísaênkovsv theobtainingofwheatplantswithyeastgenesoftrehalosebiosynthesistps1andtps2 AT dmitrukkv theobtainingofwheatplantswithyeastgenesoftrehalosebiosynthesistps1andtps2 AT êmecʹaí theobtainingofwheatplantswithyeastgenesoftrehalosebiosynthesistps1andtps2 AT kvaskoaû sozdanierasteniipšenicysdrožževymigenamibiosintezatregalozytps1itps2 AT ísaênkovsv sozdanierasteniipšenicysdrožževymigenamibiosintezatregalozytps1itps2 AT dmitrukkv sozdanierasteniipšenicysdrožževymigenamibiosintezatregalozytps1itps2 AT êmecʹaí sozdanierasteniipšenicysdrožževymigenamibiosintezatregalozytps1itps2 |
| first_indexed |
2025-11-27T11:42:40Z |
| last_indexed |
2025-11-27T11:42:40Z |
| _version_ |
1850852302261321728 |