Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка
As a result of experimental ulcerogenesis, there are changes of the lipid and protein compositions in a blood plasma of rats. It is enriched by neutral lipids, and its content of phospholipids varied in different ways. Under stress ulcer, the fraction of proteins with a molecular weight of 23 kDа is...
Збережено в:
| Дата: | 2007 |
|---|---|
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Українська |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2007
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1718 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка / М.Є. Кучеренко, К.О. Дворщенко, В.А. Ковальова, О.C. Дворщенко, О.О. Моргаєнко, Л.І. Остапченко // Доп. НАН України. — 2007. — N 6. — С. 165–169. — Бібліогр.: 11 назв. — укp. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859737938902908928 |
|---|---|
| author | Кучеренко, М.Є. Дворщенко, К.О. Ковальова, В.А. Дворщенко, О.С. Моргаєнко, О.О. Остапченко, Л.І. |
| author_facet | Кучеренко, М.Є. Дворщенко, К.О. Ковальова, В.А. Дворщенко, О.С. Моргаєнко, О.О. Остапченко, Л.І. |
| citation_txt | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка / М.Є. Кучеренко, К.О. Дворщенко, В.А. Ковальова, О.C. Дворщенко, О.О. Моргаєнко, Л.І. Остапченко // Доп. НАН України. — 2007. — N 6. — С. 165–169. — Бібліогр.: 11 назв. — укp. |
| collection | DSpace DC |
| description | As a result of experimental ulcerogenesis, there are changes of the lipid and protein compositions in a blood plasma of rats. It is enriched by neutral lipids, and its content of phospholipids varied in different ways. Under stress ulcer, the fraction of proteins with a molecular weight of 23 kDа is revealed.
|
| first_indexed | 2025-12-01T15:56:09Z |
| format | Article |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
6 • 2007
БIОХIМIЯ
УДК 616.33-002.44:539.1.047
© 2007
Академiк НАН України М. Є. Кучеренко , К. О. Дворщенко,
В.А. Ковальова, О. C. Дворщенко, О. О. Моргаєнко,
Л. I. Остапченко
Лiпiдний та бiлковий склад плазми кровi щурiв за умов
експериментальної виразки шлунка
As a result of experimental ulcerogenesis, there are changes of the lipid and protein compositions
in a blood plasma of rats. It is enriched by neutral lipids, and its content of phospholipids varied
in different ways. Under stress ulcer, the fraction of proteins with a molecular weight of 23 kDа
is revealed.
Одним з актуальних питань сучасної медичної бiохiмiї є вивчення бiохiмiчних особливостей
патогенезу виразкової хвороби шлунка. Сьогоднi необхiдно розглядати виразкову хворобу
з позицiї системних захворювань, оскiльки в цей процес залучаються iншi органи травного
тракту, а також нервова, iмунна та iншi системи органiзму [1].
Розвиток та прогресування даної патологiї обумовленi змiнами у рiзних бiохiмiчних про-
цесах, у тому числi активностi перекисного окиснення лiпiдiв (ПОЛ) та антиоксидантного
захисту (АОЗ), що призводить до порушення структури як клiтинної мембрани, так i iн-
ших внутрiшньоклiтинних органел [2]. Провiдна роль лiпiдiв та бiлкiв у структурi та фi-
зико-хiмiчних властивостях бiомембран є важливим фактором, що впливає на цiлiснiсть
та функцiональну активнiсть окремих тканин i систем. Показники бiлково-лiпiдного обмi-
ну плазми кровi є важливими маркерами функцiонального стану метаболiчних систем ор-
ганiзму, а визначення їх складу та вмiсту може бути важливим дiагностичним та про-
гностичним показником при рiзних патологiчних станах, зокрема при виразковiй хворобi
шлунка.
Численнi дослiдження по вивченню механiзмiв виникнення виразки шлунка до цього
часу носили розрiзнений характер i були направленi майже виключно на уточнення уявлень
про вiдмiнностi мiж видами виразки, а не на пошук патогенетичних механiзмiв, спiльних
для всiх видiв та ступенiв виразки.
Метою даної роботи було дослiдити лiпiдний та бiлковий склад плазми кровi щурiв за
умов рiзних експериментальних виразок (етанолової та стресової).
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №6 165
Матерiали та методи дослiджень. У дослiдах використовували щурiв лiнiї Вiстар
вагою 180–230 г, яких утримували на стандартному рацiонi вiварiю. Етанолова модель ви-
разки шлунка викликалась пероральним введенням 80% етилового спирту загальноприйня-
тим методом [3]. Для моделювання виразки шлунка у тварин, що є наближеною за етiо-
логiєю та патогенезом до виразки шлунка людини, використовували модифiковану мето-
дику “iмобiлiзацiйного стресу” [4]. Для цього щурiв розмiщували у металевих перфорова-
них патронах з прозорим дном. Патрони розташовували у клiтцi з щурами, необмеженими
у своїх рухах. Через 24 год щурiв виймали з патронiв та декапiтували. Середнiй пока-
зник уражень шлунка в кожному експериментi розраховували за методикою роботи [5].
Забiр кровi проводили при декапiтацiї тварин у пробiрки, що мiстили гепарин. Плазму
одержували центрифугуванням кровi при 3000 об/хв протягом 15 хв. Лiпiди екстрагували
хлороформ-метанольною сумiшшю (2 : 1 за об’ємом) за допомогою модифiкованого ме-
тоду [6]. Для запобiгання окиснення лiпiдiв у розчинники додавали антиоксидант iонол.
Промитi й очищенi вiд водорозчинних компонентiв лiпiднi екстракти зразкiв випарювали
в атмосферi азоту, а потiм розчиняли в 1 мл сумiшi хлороформ : метанол (1 : 1). Для ви-
вчення якiсного i кiлькiсного складу нейтральних та полярних лiпiдiв застосовували метод
тонкошарової хроматографiї. Роздiлення лiпiдiв проводили на пластинках “Silica gel 60”
(Merk, Germany). Пластини попередньо активували протягом 30 хв при 110 ◦С. Рухома
фаза для подiлу нейтральних лiпiдiв мiстила гексан, дiетиловий ефiр, мурашину кислоту
у спiввiдношеннi 80 : 20 : 2, для фосфолiпiдiв мiстила хлороформ, метанол, воду в спiввiд-
ношеннi 50 : 25 : 4. Перед хроматографуванням пластини насичували парами розчинника
протягом 5 хв. Хроматографiю проводили в склянiй камерi. Потiм пластину висушували,
обробляли сiрчаною кислотою, пiсля цього пластину витримували 30 хв на повiтрi, потiм
помiщали в термостат на 4 хв при 140 ◦С до потемнiння лiпiдних фракцiй. Для кiлькiсно-
го визначення лiпiдних фракцiй проводили сканування пластин на денситометрi “Camag”
(Швейцарiя). Iдентифiкацiю iндивiдуальних лiпiдiв здiйснювали за допомогою вiдповiдних
стадартiв.
Якiсний аналiз бiлкового складу клiтин слизової оболонки шлунка проводили за допо-
могою ДСН-електрофорезу у 10%-му полiакриламiдному гелi за методом Леммлi [7]. Для
оцiнки результатiв електрофорезу використовували програму TotalLab 1.0.
Усi показники розраховували на 1 мг бiлка клiтин слизової оболонки шлунка. Концент-
рацiю бiлка визначали за методом Лоурi.
Статистичну обробку результатiв проводили з використанням t-критерiю Ст’юдента.
Вiрогiдною вважали рiзницю мiж порiвнювальними показниками при p < 0,05.
Результати та їх обговорення. Активацiя фiзико-хiмiчних процесiв ПОЛ, яка спосте-
рiгається при виразковiй хворобi у лiпiдних структурах мембран клiтин слизової оболонки
шлунка, безпосередньо впливає i на стан вбудованих у мембрани бiлкiв, що також пору-
шує фундаментальнi функцiї мембранного комплексу (проникнiсть, активний транспорт,
поляризацiю, дiю ферментiв). У безпосередньому зв’язку з активацiєю вiльнорадикальної
пероксидацiї (ВРП) розвивається i процес ендогенного фосфолiпазного гiдролiзу з вiдокрем-
ленням та видаленням з лiпiдного бiшару мембран окиснених (внаслiдок ПОЛ) фрагментiв
молекул фосфолiпiдiв вiльних жирних кислот та переведенням їх з гiдрофобного у гiдро-
фiльний стан [8]. У подальшому вони вимиваються у кров та екскретуються.
Згiдно з отриманими результатами по дослiдженню лiпiдного складу плазми кровi щурiв
за умов виразки, значним змiнам пiддається як вмiст нейтральних лiпiдiв, так i фосфолi-
пiдiв.
166 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2007, №6
Рис. 1. Денситограма бiлкiв: а — стандарти (бичачий сироватковий альбумiн, яєчний альбумiн, лiзоцим);
б, в, г — плазма кровi (б — контроль, в — етанолова виразка, г — стресова виразка)
Iстотнi змiни вмiсту нейтральних лiпiдiв в плазмi кровi щурiв вiдзначенi за умов ета-
нолової виразки: вмiст холестеролу зростає на 25%, триацилглiцеролiв — на 82% вiдносно
контролю (табл. 1). Також пiдвищується вмiст жирних кислот — на 63% вiдносно конт-
рольних тварин. При стресовiй моделi виразки в плазмi кровi щурiв збiльшується рiвень
триацилгiцеролiв та жирних кислот на 171 й 50% вiдповiдно.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №6 167
Таблиця 1. Вмiст нейтральних лiпiдiв в плазмi кровi щурiв за умов експериментальної виразки шлунка
(M ±m; n = 10)
Групи тварин
Холестерол, мкг/мг
бiлка
Триацилглiцерол,
мкг/мг бiлка
Жирнi кислоти,%
вiдносно контролю
Контроль 14,8± 1,2 1,7± 0,2 100
Етанолова модель (18,5± 0,7)∗ (3,1± 0,5)∗ 163,2∗
Стресова модель 13,8± 0,4 (4,6± 0,3)∗ 149,9∗
∗
p < 0,05 рiзницi достовiрнi вiдносно контролю.
Таблиця 2. Вмiст фосфолiпiдiв в плазмi кровi щурiв за умов експериментальної виразки шлунка (M ±m;
n = 10)
Групи тварин ЛФХ, мкг/мг бiлка ФI, мкг/мг бiлка ФХ, мкг/мг бiлка ФЕА, мкг/мг бiлка
Контроль 1,0± 0,2 29,4± 2,3 61,2± 4,9 7,9 ± 1,6
Етанолова модель (2,7± 0,2)∗ (50,0± 4,6)∗ (106,8 ± 10,2)∗ (12,5 ± 1,2)∗
Стресова модель 1,1± 0,1 (24,2± 2,1)∗ (76,1± 6,8)∗ (5,7± 0,9)∗
∗
p < 0,05 рiзницi достовiрнi вiдносно контролю.
За умов етанолової виразки при дослiдженнi фосфолiпiдного складу плазми кровi щурiв
встановленi значнi змiни вмiсту головних фосфолiпiдiв (табл. 2): пiдвищення вмiсту лiзо-
фосфатидилхолiну (ЛФХ) на 170%; фосфатидилiнозитолу (ФI), фосфатидилхолiну (ФХ) —
на 70% та фосфатидилетаноламiну (ФЕА) — на 58% вiдносно контролю. При стресовiй
виразцi шлунка зростає рiвень ФХ — на 24%, при цьому вмiст ФI та ФЕА знижується на 18
й 28% вiдповiдно.
Виявлене пiдвищення вмiсту нейтральних та полярних лiпiдiв у плазмi кровi щурiв за
умов етанолової моделi виразки, можливо, обумовлено прискоренням метаболiчних проце-
сiв, необхiднiстю репарацiї мембран та активацiєю ПОЛ [9].
При дослiдженнi загального бiлкового складу плазми кровi щурiв, якi пiддавались дiї
iмобiлiзацiйного стресу, було виявлено групу бiлкiв з вiдносною молекулярною масою 23 кДа
(рис. 1).
Згiдно з лiтературними даними вiдомо, що бiлки з молекулярною масою вiд 8 до 27 кДа
належать до родини малих стресових бiлкiв [10]. Вiдомо, що MSP23 є макрофагальним стре-
совим бiлком, який володiє антиоксидантною активнiстю. Цей бiлок залучається у клiтин-
ну вiдповiдь на окисний стрес та контролює клiтинну пролiферацiю та диференцiацiю [11].
Ймовiрно, наявнiсть цих бiлкiв у кровi вказує на включення не специфiчного, а загаль-
ного механiзму трансдукцiї сигналу / вiдповiдi за умов розвитку стресової виразки (при
цьому при етаноловiй моделi виразки такi бiлки не виявлялися). Таким чином, можли-
во, розвиток стресової виразки супроводжується активацiєю загальних стрес-реакцiй, що
вiдображається на змiнi бiлкового складу плазми кровi. Вiдсутнiсть подiбних бiлкiв при
розвитку етанолової виразки вказує на наявнiсть iншого механiзму вiдповiдi органiзму на
дiю такого ульцерогенного фактора як етиловий спирт.
Таким чином, ульцерогенез охоплює не лише змiни у травнiй системi, а й у регуля-
торних механiзмах органiзму, а змiни у складi кровi можуть бути використанi як маркери
захворювань та застосовуватися у дiагностичних цiлях.
1. Филипов Ю.А., Шмигель З.Н., Петречук Л.Н., Скирда И.Ю. Уровень распространенности и заболе-
ваемости болезнями органов пищеварения у городских жителей // Гастроэнтерол. – 1999. – Вып. 28. –
С. 7–9.
2. Дегтярева И.И., Харченко Н.В. Язвенная болезнь. – Київ: Здоров’я, 1995. – 334 с.
168 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2007, №6
3. Mosnier P., Rayssiguier Y., Motta C. et al. Effect of ethanol on rat gastric surfactant: a fluorescence
polarization study // Gastroenterology. – 1993. – 104. – P. 179–184.
4. Гройсман С.Д., Каревина Т. Г. О влиянии атропина на стрессорные поражения слизистой оболочки
желудка у крыс // Библ. указ. ВИНИТИ. Деп. рук. № 452/79–1979. – № 12. – С. 131.
5. Доклiнiчнi дослiдження лiкарських засобiв: Методичнi рекомендацiї // Пiд ред. О.В. Стефанова. –
Київ: Авiцена, 2001. – 528 с.
6. Kates M. Techniques of lipidology. Isolation, analysis and identification of lipids. – Amsterdam: Elsevier,
1986. – 464 p.
7. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 //
Nature. – 1970. – 227. – P. 680–685.
8. Коротько Г. Г., Фаустов Л.А. Функциональные и морфологические аспекты язвенной болезни. –
Краснодар: Кубаньпечать, 2002. – 156 с.
9. Kwiecien S., Brzozowski T., Konturek S. J. Effects of reactive oxygen species action on gastric mucosa in
various models of mucosal injury // J. Physiol. Pharmacol. – 2002. – 53(1). – P. 39–50.
10. Alliva R., Tomasetti M., Andera L. et al. Coenzyme Q blocks biochemical, but not receptor-mediated
apoptosis by increasing mitochondrial antioxidant protection // FEBS Lett. – 2001. – 503. – P. 46–50.
11. Wen Sh. – T., Etten R.A. The PFG gene product? the stress-induced protein with antioxidant properties
is the Abl SH3-binding protein and a physiological inhibitor of c-Abl tyrosine kinase activity // Genes
Devel. – 1997. – 11. – P. 2456–2467.
Надiйшло до редакцiї 31.10.2006Київський нацiональний унiверситет
iм. Тараса Шевченка
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №6 169
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1718 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 1025-6415 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-01T15:56:09Z |
| publishDate | 2007 |
| publisher | Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Кучеренко, М.Є. Дворщенко, К.О. Ковальова, В.А. Дворщенко, О.С. Моргаєнко, О.О. Остапченко, Л.І. 2008-09-02T16:53:46Z 2008-09-02T16:53:46Z 2007 Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка / М.Є. Кучеренко, К.О. Дворщенко, В.А. Ковальова, О.C. Дворщенко, О.О. Моргаєнко, Л.І. Остапченко // Доп. НАН України. — 2007. — N 6. — С. 165–169. — Бібліогр.: 11 назв. — укp. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1718 616.33-002.44:539.1.047 As a result of experimental ulcerogenesis, there are changes of the lipid and protein compositions in a blood plasma of rats. It is enriched by neutral lipids, and its content of phospholipids varied in different ways. Under stress ulcer, the fraction of proteins with a molecular weight of 23 kDа is revealed. uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Біохімія Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка Article published earlier |
| spellingShingle | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка Кучеренко, М.Є. Дворщенко, К.О. Ковальова, В.А. Дворщенко, О.С. Моргаєнко, О.О. Остапченко, Л.І. Біохімія |
| title | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка |
| title_full | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка |
| title_fullStr | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка |
| title_full_unstemmed | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка |
| title_short | Ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка |
| title_sort | ліпідний та білковий склад плазми крові щурів за умов експериментальної виразки шлунка |
| topic | Біохімія |
| topic_facet | Біохімія |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1718 |
| work_keys_str_mv | AT kučerenkomê lípídniitabílkoviiskladplazmikrovíŝurívzaumoveksperimentalʹnoívirazkišlunka AT dvorŝenkoko lípídniitabílkoviiskladplazmikrovíŝurívzaumoveksperimentalʹnoívirazkišlunka AT kovalʹovava lípídniitabílkoviiskladplazmikrovíŝurívzaumoveksperimentalʹnoívirazkišlunka AT dvorŝenkoos lípídniitabílkoviiskladplazmikrovíŝurívzaumoveksperimentalʹnoívirazkišlunka AT morgaênkooo lípídniitabílkoviiskladplazmikrovíŝurívzaumoveksperimentalʹnoívirazkišlunka AT ostapčenkolí lípídniitabílkoviiskladplazmikrovíŝurívzaumoveksperimentalʹnoívirazkišlunka |