Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса

В результате Agrobacterium tumefaciens-опосредованной трансформации листовых дисков с использованием генетических конструкций, несущих гены bar и cyp11A1 цитохрома Р450SCC из митохондрий коры надпочечников быка, получено 46 независимых фосфинотрицинустойчивых линий рапса трёх промышленных яровых...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Date:	2009
Main Authors:	Сахно, Л.А., Моргун, Б.В., Кищенко, Е.М., Кучук, Н.В.
Format:	Article
Language:	Russian
Published:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2009
Series:	Фактори експериментальної еволюції організмів
Subjects:	Біотехнології у медицині та сільському господарстві
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/176853
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса / Л.А. Сахно, Б.В. Моргун, Е.М. Кищенко, Н.В. Кучук // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2009. — Т. 7. — С. 196-200. — Бібліогр.: 11 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-176853
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1768532025-02-09T14:23:17Z Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса Сахно, Л.А. Моргун, Б.В. Кищенко, Е.М. Кучук, Н.В. Біотехнології у медицині та сільському господарстві В результате Agrobacterium tumefaciens-опосредованной трансформации листовых дисков с использованием генетических конструкций, несущих гены bar и cyp11A1 цитохрома Р450SCC из митохондрий коры надпочечников быка, получено 46 независимых фосфинотрицинустойчивых линий рапса трёх промышленных яровых сортов и 29 линий табака двух сортов. Интеграция чужеродных генов подтверждена с помощью ПЦР. Показано, что расщепление по введенным генам в первом поколении трансформантов при самоопылении составляет 3:1. Различия в накоплении растворимых белков листьями исходных растений рапса, трансформантов Т0 и Т1, культивируемых в асептических условиях, не являются статитически достоверными. В результаті Agrobacterium tumefaciens-опосередкованої трансформації листових дисків з використанням генетичних конструкцій, що несуть гени bar і cyp11A1 цитохрома Р450SCC з мітохондрій кори надниркових залоз бика, отримано 46 незалежних фосфінотрицинстійких ліній ріпаку трьох промислових ярих сортів і ліній тютюну двох сортів. Інтеграцію чужорідних генів підтверджено за допомогою ПЛР. Показано, що розщеплення по введеним генам в першому поколінні трансформантів за умов самозапилення становить 3:1. Відмінності в накопиченні розчинних білків листям вихідних рослин ріпаку, трансформантів Т0 і Т1, які культивуються в асептичних умовах, не є статистично достовірнимі. Forty six independent РРТ-resistant lines of three Ukrainian commercial rapeseed varieties and twenty nine lines of two Nicotiana tabacum varieties were obtained as a result of Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of leaf disks with gene constructs carrying bar gene and cyp11A1 cytochrome Р450SCC gene from bovine adrenal cortex. Integration of the foreign genes was confirmed by PCR analysis. The self-pollinated first transgenic progeny demonstrated segregation of the introduced genes as 3:1. The difference among parent rapeseed plants, Т0 and Т1 transformants cultivated under aseptic conditions concerning total soluble protein in leaves was not statistically significant. 2009 Article Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса / Л.А. Сахно, Б.В. Моргун, Е.М. Кищенко, Н.В. Кучук // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2009. — Т. 7. — С. 196-200. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. 2219-3782 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/176853 ru Фактори експериментальної еволюції організмів application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Біотехнології у медицині та сільському господарстві Біотехнології у медицині та сільському господарстві
spellingShingle	Біотехнології у медицині та сільському господарстві Біотехнології у медицині та сільському господарстві Сахно, Л.А. Моргун, Б.В. Кищенко, Е.М. Кучук, Н.В. Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса Фактори експериментальної еволюції організмів
description	В результате Agrobacterium tumefaciens-опосредованной трансформации листовых дисков с использованием генетических конструкций, несущих гены bar и cyp11A1 цитохрома Р450SCC из митохондрий коры надпочечников быка, получено 46 независимых фосфинотрицинустойчивых линий рапса трёх промышленных яровых сортов и 29 линий табака двух сортов. Интеграция чужеродных генов подтверждена с помощью ПЦР. Показано, что расщепление по введенным генам в первом поколении трансформантов при самоопылении составляет 3:1. Различия в накоплении растворимых белков листьями исходных растений рапса, трансформантов Т0 и Т1, культивируемых в асептических условиях, не являются статитически достоверными.
format	Article
author	Сахно, Л.А. Моргун, Б.В. Кищенко, Е.М. Кучук, Н.В.
author_facet	Сахно, Л.А. Моргун, Б.В. Кищенко, Е.М. Кучук, Н.В.
author_sort	Сахно, Л.А.
title	Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса
title_short	Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса
title_full	Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса
title_fullStr	Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса
title_full_unstemmed	Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса
title_sort	наследование введенных генов bar и cyp11a1 цитохрома p450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	2009
topic_facet	Біотехнології у медицині та сільському господарстві
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/176853
citation_txt	Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса / Л.А. Сахно, Б.В. Моргун, Е.М. Кищенко, Н.В. Кучук // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2009. — Т. 7. — С. 196-200. — Бібліогр.: 11 назв. — рос.
series	Фактори експериментальної еволюції організмів
work_keys_str_mv	AT sahnola nasledovanievvedennyhgenovbaricyp11a1citohromap450sccživotnogoproishoždeniâvt1pokoleniitransformirovannyhlinijtabakairapsa AT morgunbv nasledovanievvedennyhgenovbaricyp11a1citohromap450sccživotnogoproishoždeniâvt1pokoleniitransformirovannyhlinijtabakairapsa AT kiŝenkoem nasledovanievvedennyhgenovbaricyp11a1citohromap450sccživotnogoproishoždeniâvt1pokoleniitransformirovannyhlinijtabakairapsa AT kučuknv nasledovanievvedennyhgenovbaricyp11a1citohromap450sccživotnogoproishoždeniâvt1pokoleniitransformirovannyhlinijtabakairapsa
first_indexed	2025-11-26T19:23:09Z
last_indexed	2025-11-26T19:23:09Z
_version_	1849882048357990400
fulltext	196 7. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture // Physiol. Plant. — 1962. — vol. 15, № 3. — P.473-497. 8. Beaujean A., Sangwan R.S., Lecardonnel A., Sangwan-Norreel B.S. Agrobacterium- mediated transformation of three economically important potato cultivars using sliced internodal explants: an efficient protocol of transformation // J. Exp. Bot. — 1998. — vol. 49, № 326. — P.1589-1595. 9. K.H. Lipp João, Brown T.A. Enhanced transformation of tomato co-cultivated with Agrobacterium tumefaciens C58C1Rifr::pGSFR1161 in the presence of acetosyringone // Plant Cell Rep. — 1993. — vol. 12, № 7-8. — P.422-425. 10. Logemann J., Schell J., Willmitzer L. Improved method for the isolation of RNA from plant tissues // Anal. Biochem. — 1987.— vol. 163, № 1. — P.16-20. Резюме Отримано 8 трансгенних ліній картоплі сорту Луговська після Agrobacterium tumefaciens-опосередкованої трансформації штамом, що несе ген bar та ген cyp11A1 цитохрому P450scc кори надниркових залоз бика. 4 із 8 рослин мали аномальну морфологію. Проведений ПЛР-аналіз на гени bar і cyp11A1 підтвердив інтеграцію цих генів в геном всіх отриманих трансформованих ліній. Транскрипція гена cyp11A1 підтверджена ПЛР аналізом зворотних транскриптів. Получено 8 трансгенных линий картофеля сорта Луговськая после Agrobacterium tumefaciens-опосредованной трансформации штаммом, несущим ген bar и ген cyp11A1 цитохрома P450scc из коры надпочечников быка. 4 из 8 растений имели аномальную морфологию. Проведенный ПЦР-анализ на гены bar и cyp11A1 подтвердил интеграцию этих генов в геном всех полученных трансформованных линий. Транскрипция гена cyp11A1 подтверждена ПЦР-анализом обратных транскриптов. Eight PPT-resistant potato lines were obtained after Agrobacterium tumefaciens- mediated transformation with a gene construct carrying bar gene and cyp11A1 gene of cytochrome P450scc from bovine adrenal cortex. Four out of eight plants had abnormal morphology. Integration of foreign genes in genome for all plants was confirmed by PCR analysis. Transcription of cyp11A1 gene was confirmed by RT-PCR analysis. САХНО Л.А., МОРГУН Б.В., КИЩЕНКО Е.М., КУЧУК Н.В. Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины Украина, 03680, Киев, ул. Академика Заболотного, 148, е-mail: sakhno2007@ukr.net НАСЛЕДОВАНИЕ ВВЕДЕННЫХ ГЕНОВ BAR И CYP11A1 ЦИТОХРОМА Р450SCC ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ В Т1 ПОКОЛЕНИИ ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ ЛИНИЙ ТАБАКА И РАПСА В последние годы возрастает интерес к введению различных генов цитохрома Р450 животного происхождения в геном растений. Это связано с возможностью получения растений с новыми ценными характеристиками: устойчивостью к гербицидам и способностью к ремидиации почв и воздуха за счёт экспрессии генов, участвующих у млекопитающих в метаболизме ксенобиотиков (cyp1A1, cyp2В6, cyp2С19, cyp2Е1) [1,2,3], а также ускорению темпов роста благодаря синтезу не присущих растительным тканям биологически-активных молекул (cyp11A1) [4]. Растения риса [1] способны расти на почвах, содержащих атразин и метолахлор, и накапливать их, очищая почву. Картофель с активным геном cyp1A1, полученным из печени крысы, демонстрирует устойчивость к гербицидам хлортолурону и метабензтиазурону [2]. Тополя, экспрессирующие ген cyp2Е1 цитохрома Р450 из печени кролика, способны поглощать такие ядовитые вещества, как трихлорэтилен, 197 винилхлорид, четырёххлористый углерод, хлороформ и бензен [3], благотворно влияя на состояние почв и воздуха. В экспериментах с табаком было показано, что трансгенные растения, в ядро которых был интегрирован ген cyp11А1 цитохрома Р450SCC животного происхождения, опережают контрольные в среднем на две недели по темпам роста и развития [4]. Наблюдаемый фенотипический эффект авторы объясняют влиянием новых биологически-активных стероидных веществ, не характерных для растений дикого типа. Сокращение периода вегетации и возможность более раннего сбора урожая, в том числе рапса и табака, важны для сельхозпроизводителей. Целью данной работы было получение растений табака и рапса, несущих в ядерном геноме ген cyp11A1 цитохрома Р450SCC из митохондрий коры надпочечников быка, и анализ наследования в первом поколении трансформантов. Материалы и методы Растительный материал. В качестве исходного материала использовали поддерживаемые в условиях in vitro растения ярового рапса (Brassica napus L. var. oleifera DC.) следующих промышленных сортов: Калиновский и Мария селекции Национального аграрного университета УААН, Магнат (селекция РУП «Научно- практического центра НАН Беларуси по земледелию»), а также растения табака Nicotiana tabacum сортов Wisconsin и Petite Havana. Agrobacterium tumefaciens-опосредованная трансформация рапса и табака. Трансформацию рапса проводили согласно методике, разработанной нами ранее [5], регенерацию трансгенных растений табака получали по общепринятой методике [6]. Селекцию растений проводили в присутствии в средах фосфинотрицина (РРТ, 5 мг/л). Плазмиды и бактериальный штамм. В качестве донора гена cyp11A1 цитохрома Р450SCC из митохондрий коры надпочечников быка использовалась плазмида pGBP450f, полученная из Института генетики и цитологии НАН Беларуси. Бинарный вектор pICH5290 служил реципиентом гена cyp11A1 и основой для двух генетических конструкций - pCB092 и рСВ093. Использовались компетентные клетки Escherichia coli штамма XL-1 Blue (Stratagene), а трансформация осуществлялись общепринятым химическим методом [7]. Для работы с растительными тканями использовался Agrobacterium tumefaciens штамм GV3101. Рис. Схематическая карта генетических конструкций pCB092 (вверху) и рСВ093 (внизу). Експрессирующие кассеты указаны с промоторами (P) и терминаторами (T) Анализ полученных растительных линий с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для подтверждения введения генов bar и cyp11А1 анализировали тотальную ДНК регенерированных растений с помощью реакций амплификации с праймерами 5'-GGA ATT CAT GAG CGG AGA ATT AAG GGA GT-3' и 5'-CAG ATC TCG GTG ACG GGC AGG AC-3', с которыми синтезируется фрагмент размером 910 пн (bar), и 5’-GCC ACA TCG AGA ACT TCC AGA AG-3’ и 5’-CTG GTG TGG AAC ATC TTG TAG ACG-3’, дающие фрагмент размером 502 пн (cyp11А1) [4]. Для проверки отсутствия агробактериальной ДНК в полученных растительных линиях проводили ПЦР с праймерами на virD1. Для амплификации фрагмента этого гена длиной 432 пн использовали праймеры virD1-1, 5’-ATG TCG CAA GGC AGT AAG CCC A-3’ и virD1- 198 2, 5’-GGA GTC TTT CAG CAT GGA GCA A-3’ [8]. Для реакции брали 200 нг геномной ДНК каждого образца, по 0,5 мкМ каждого из праймеров, 0,2 мкМ смеси четырёх дезоксинуклеотидтрифосфатов, 1 единицу Taq полимеразы в однократном реакционном буфере. Общий объем смеси составлял 20 мкл. Программа амплификации была следующей: денатурация 94 ºС, 4 мин; 35 циклов — 56 ºС 1 мин; 72 ºС, 20 сек; 94 ºС, 30 сек; заключительный цикл — 10 мин при 72 ºС. Определение количества растворимого белка в листьях рапса. Для анализа количества белка в листьях растений рапса, поддерживаемых в асептической культуре, применяли микрометод Бредфорда [9]. Для экстракции белков использовали тройной объем 100 мМ Tris-Cl буфера (pH 8,0), содержащего 5 мМ Na2EDTA, 100 мМ NaCl, 10 мМ β-меркаптоэтанола и 2,5 % поливинилпирролидона. Анализ проводили на спектрофотометре BioPhotometer (Eppendorf) v.1.35. Статистическая обработка результатов проводилась оценкой разности средних (t-критерий Стьюдента) при сравнении количеств белка и определением критерия χ2 при расщеплении в Т1 поколении трансформантов согласно [10]. Результаты и обсуждение В ходе экспериментов по трансформации листовых дисков с использованием двух генетических конструкций получено 46 независимых фосфинотрицинустойчивых линий рапса трёх промышленных яровых сортов (6 линий, вектор рСВ092, с использованием сорта Калиновский, 7 и 11 линий, вектор рСВ093, с использованием сортов Мария и Магнат, соответственно) и 29 линий табака двух сортов (9 и 11 линий, вектор рСВ092, с использованием сортов Wisconsin и Petite Havana, соответственно, и 8 линий, вектор рСВ093, с использованием сорта Petite Havana). Интеграция целевого гена cyp11A1 и селективного гена bar показана с помощью ПЦР для 24-х из 28-ми проанализированных линий рапса и всех линий табака. С помощью реакции амплификации с праймерами на ген virD1 показано отсутствие бактериального заражения полученных трансформантов. Трансгенные растения табака были высажены в почву в условиях теплицы. Оказалось, что при самоопылении семена завязываются у всех растений, полученных в результате экспериментов с вектором рСВ093, и только у двух из 10, регенерировавших и образовавших цветки в опытах с использованием вектора рСВ092. При опылении трансформанта рСВ092/А6 пыльцой растения дикого типа семена завязались. Возможно, нарушение пыльцеобразования связано с особенностями конструкции (взаиморасположение генов в Т-ДНК, рис.). Растения пяти линий рапса также были перенесены в грунт в условиях теплицы. В результате самоопыления получены жизнеспособные семена. Проростки анализировались in vitro на устойчивость к фосфинотрицину (табл.). У отобранных линий поколения Т1, растущих в присутствии 10 мг/л РРТ in vitro, при анализе с помощью ПЦР показано наличие введенных генов bar и cyp11А1. Табл. Характеристика Т1 поколения трансформантов рапса (сорт Мария, вектор рСВ093) Количество растений Линия Масса 1000 семян, г Всхожесть in vitro, % РРТ+ РРТ- Расщепление χ2 Bn12/93/1 3,213 99 73 26 3:1 0,12 Bn12/93/2 3,118 96 73 23 3:1 0,13 Bn12/93/11 3,209 94 72 22 3:1 0,13 Bn12/93/12 3,188 98 72 26 3:1 0,12 Bn12/93/14 3,257 90 68 22 3:1 0,01 Bn12 (контроль) 3,249 96 - 96 - - 199 При определении количества растворимых белков в листьях исходных растений рапса, трансформантов Т0 и Т1, культивируемых в асептических условиях, оказалось, что различия не являются статистически достоверными (результаты не представлены). В публикации [11] сообщалось, что уровень белка в листьях трансформированных растений табака, несущих ген cyp11А1 и полученных в результате ПЭГ-опосредованной трансформации протопластов, значительно увеличивался. Возможно, расхождения в наших результатах связаны с особенностями использованных растительных культур, способах введения ДНК в растения и/или особенностями экспрессии введенного целевого гена. Выводы. С использованием сконструированных нами генетических конструкций, несущих гены bar и cyp11A1 цитохрома Р450SCC из митохондрий коры надпочечников быка, в результате A.tumefaciens-опосредованной трансформации листовых дисков получено 46 независимых РРТ устойчивых линий рапса трёх промышленных яровых сортов и 29 линий табака двух сортов. Показано, что введенные гены наследуются, и расщепление в первом поколении трансформантов B.napus при самоопылении близко к 3:1. Различия в накоплении растворимых белков листьями исходных растений рапса, трансформантов Т0 и Т1, культивируемых в асептических условиях, не являются статистически достоверными. Литература 1. Kawahigashi H., Hirose S., et al. Transgenic rice plants expressing human P450 genes involved in xenobiotic metabolism for phytoremediation // J. Mol. Microbiol. Biotechnol. – 2008. - V. 15, N.2-3. – P. 212 – 219. 2. Yamada T.,Ohashi Y., et al. Inducible cross-tolerance to herbicides in transgenic potato plants with the cyp1A1 gene // Theor.Appl. Genet. – 2002. – V. 104. – P. 308 – 314. 3. Doty S.L., James C.A., et al. Enchanced phytoremediation of volatile environmental pollutants with transgenic trees// PNAS.- 2007. – V.104, N. 43. – P.16816 – 16821. 4. С.Г. Спивак, И.Н. Бердичевец, Н.А. Картель. Трансгенные растения табака, экспрессирующие ген CYP11A1 цитохрома P450SCC животного происхождения // Фактори експериментальної еволюції організмів. – К., 2006. – С.639-644. 5. Спосіб отримання трансформованих рослин ріпаку методом агробактеріальної трансформації /Гочева Є.А., Сахно Л.А. Кучук М.В. // Патент України на корисну модель № 39205. – Публ. 10.02.2009, бюл. № 3. 6. Horsch R.B., Fraley R.T., et al. Inheritance of functional foreign genes in plants // Science. - 1984. – V. 223. – P. 496–498. 7. Sambrook J. Molecular Cloning: A Laboratory Manual / Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. - Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2nd ed., 1989.- 1500 p. 8. Lipp Joаo K.H. Enhanced transformation of tomato co-cultivated with Agrobacterium tumefaciens C58 C1 Rifr::pGSFR1161 in the presence of acetosyringone // Plant Cell Rep. - 1993. - V. 12. - P. 422-425. 9. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal.Biochem. – 1976. – V.72, N 2. – P.248 – 254. 10. Лакин Г.Ф. Биометрия // М.: Высш.школа. – 1990. – 352 с. 11. С.Г. Спивак, Морозова Е.В. и др. Влияние экспрессии гена CYP11A1 цитохрома Р450SCC животного происхождения на гормональный статус и фенотип растений табака Nicotiana tabacum L.// Гуминовые кислоты и фитогормоны в растениеводстве. – Киев. – 2007. – С.72 -73. Резюме В результате Agrobacterium tumefaciens-опосредованной трансформации листовых дисков с использованием генетических конструкций, несущих гены bar и cyp11A1 цитохрома Р450SCC из митохондрий коры надпочечников быка, получено 46 независимых фосфинотрицинустойчивых линий рапса трёх промышленных яровых 200 сортов и 29 линий табака двух сортов. Интеграция чужеродных генов подтверждена с помощью ПЦР. Показано, что расщепление по введенным генам в первом поколении трансформантов при самоопылении составляет 3:1. Различия в накоплении растворимых белков листьями исходных растений рапса, трансформантов Т0 и Т1, культивируемых в асептических условиях, не являются статитически достоверными. В результаті Agrobacterium tumefaciens-опосередкованої трансформації листових дисків з використанням генетичних конструкцій, що несуть гени bar і cyp11A1 цитохрома Р450SCC з мітохондрій кори надниркових залоз бика, отримано 46 незалежних фосфінотрицинстійких ліній ріпаку трьох промислових ярих сортів і ліній тютюну двох сортів. Інтеграцію чужорідних генів підтверджено за допомогою ПЛР. Показано, що розщеплення по введеним генам в першому поколінні трансформантів за умов самозапилення становить 3:1. Відмінності в накопиченні розчинних білків листям вихідних рослин ріпаку, трансформантів Т0 і Т1, які культивуються в асептичних умовах, не є статистично достовірнимі. Forty six independent РРТ-resistant lines of three Ukrainian commercial rapeseed varieties and twenty nine lines of two Nicotiana tabacum varieties were obtained as a result of Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of leaf disks with gene constructs carrying bar gene and cyp11A1 cytochrome Р450SCC gene from bovine adrenal cortex. Integration of the foreign genes was confirmed by PCR analysis. The self-pollinated first transgenic progeny demonstrated segregation of the introduced genes as 3:1. The difference among parent rapeseed plants, Т0 and Т1 transformants cultivated under aseptic conditions concerning total soluble protein in leaves was not statistically significant. СЕРГЕЕВА Л.Е.,1 ПОРЕЦКАЯ Е.И.,1 ГАМАЛЕЙ В.И.2 1Институт физиологии растений и генетики НАН Украины, Украина, 03022, Киев, ул. Васильковская 31/17, e-mail: e.poretskaya@gmail.com 2Институт земледелия УААН, Украина, 08162, Киевская обл., п.г.т. Чабаны, ул. Машиностроительная, 2Б ОСМОРЕГУЛЯЦИЯ У СОЛЕУСТОЙЧИВЫХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ ТАБАКА, ОТОБРАННЫХ НА СЕЛЕКТИВНЫХ СРЕДАХ, СОДЕРЖАЩИХ ИОНЫ БАРИЯ Растущее с годами число публикаций, посвященных различным аспектам солевого стресса и солеустойчивости, подтверждает постулат о фундаментальности и сложности поставленной проблемы. Выявление физиологических корреляционных взаимосвязей, расшифровка генетических механизмов устойчивости, однако, не увеличили количества полученных растительных форм, которые бы демонстрировали выдающиеся показатели солеустойчивости. Не упростились и сами методы их получения. Очевидна потребность поиска новых гипотез, подходов, методов. Явление солеустойчивости достоверно связывают с поддержанием баланса катионов калия и натрия. Также было установлено, что ионы тяжелых металлов, воздействуя на мембранные системы переноса ионов калия, препятствуют его выведению из клетки [10,18]. В связи с вышеизложенным была высказана идея и разработан способ получения солеустойчивых клеточных линий растений с использованием селективных сред, содержащих ионы тяжелого металла бария [5]. Отобранные таким образом клеточные клоны табака оказались устойчивыми не только к селектирующему стрессору, но и к 20 г/л солей морской воды либо сульфата натрия.

Наследование введенных генов bar и cyp11A1 цитохрома P450scc животного происхождения в т1 поколении трансформированных линий табака и рапса

Institution

Similar Items