IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса

The comparative analysis of amplification product spectra, which were obtained with the use of PawS5, PawS6 and PawS11, the end fragments of retrotransposon-like elements of family R173, as primers in 14 rice varieties, was carried out. The data on the expressive differentiation between rice varieti...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2007
Автори: Глазко, В.И., Цветков, И.А., Иванов, А.Н.
Формат: Стаття
Мова:Українська
Опубліковано: Видавничий дім "Академперіодика" НАН України 2007
Теми:
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1769
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса / В.И. Глазко, И.А. Цветков, А.Н. Иванов // Доп. НАН України. — 2007. — N 7. — С. 153–159. — Бібліогр.: 15 назв. — укp.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
_version_ 1859658416501293056
author Глазко, В.И.
Цветков, И.А.
Иванов, А.Н.
author_facet Глазко, В.И.
Цветков, И.А.
Иванов, А.Н.
citation_txt IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса / В.И. Глазко, И.А. Цветков, А.Н. Иванов // Доп. НАН України. — 2007. — N 7. — С. 153–159. — Бібліогр.: 15 назв. — укp.
collection DSpace DC
description The comparative analysis of amplification product spectra, which were obtained with the use of PawS5, PawS6 and PawS11, the end fragments of retrotransposon-like elements of family R173, as primers in 14 rice varieties, was carried out. The data on the expressive differentiation between rice varieties by the combination of amplification products with different lengths of DNA fragments were obtained. The possibility to use these fragments for the genetic identification of rice varieties is demonstrated.
first_indexed 2025-11-30T09:56:30Z
format Article
fulltext оповiдi НАЦIОНАЛЬНОЇ АКАДЕМIЇ НАУК УКРАЇНИ 7 • 2007 БIОЛОГIЯ УДК 575 © 2007 В.И. Глазко, И. А. Цветков, А.Н. Иванов IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса (Представлено академиком НАН Украины Д. М. Гродзинским) The comparative analysis of amplification product spectra, which were obtained with the use of PawS5, PawS6 and PawS11, the end fragments of retrotransposon-like elements of family R173, as primers in 14 rice varieties, was carried out. The data on the expressive differentiation between rice varieties by the combination of amplification products with different lengths of DNA fragments were obtained. The possibility to use these fragments for the genetic identification of rice varieties is demonstrated. Одной из актуальных проблем в селекции культурных растений является подбор молеку- лярно-генетических маркеров для создания генетического паспорта, выяснения генеалоги- ческих взаимоотношений между сортами, а также маркирования главных генов хозяйствен- но ценных признаков. К настоящему времени сменился целый ряд поколений различных типов молекулярно-генетических маркеров, начиная от моногенных “сигналий” А.С. Сереб- ровского [1], полиморфизма запасных белков [2], ферментов [3], мини- и микросателлитных локусов [4, 5], фрагментов ДНК, фланкированных инвертированными повторами [6–8], а в последние годы — и метод выявления мононуклеотидного полиморфизма (Single-nucleoti- de Polymorphisms, SNP) (см. [9]). Каждый из этих методов имеет свои достоинства и сло- жности, и они, в общем, дополняют друг друга. В то же время одним из наиболее часто встречающихся недостатков таких методов, как правило, является отсутствие достаточно обоснованной информации о возможной биологической значимости наблюдаемого полимор- физма и межсортовых отличий. В этом отношении особый интерес представляет новый вариант молекулярно-генетических маркеров, основанный на изучении фрагментов ДНК, фланкированных участком фланга ретротранспозона и его инвертированным повтором, либо участком микросателлитного локуса (IRAP и REMAP) [10, 11], именно потому, что в данном случае хотя бы очевидна роль транспозирующихся элементов в различных геном- ных реорганизациях. Это особенно важно при поиске молекулярно-генетических маркеров для самоопыляющихся сортов культурных растений. Для того чтобы оценить эффективность применения оценок полиморфизма IRAP мар- керов (Inter-Retrotransposon Amplified Polymorphism — полиморфизм фрагментов ДНК, фланкированных инвертированными терминальными участками ретротранспозона) для ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №7 153 сортовой идентификации, нами выполнен сравнительный анализ спектров таких маркеров у 14 сортов риса при использовании в качестве праймеров (затравок) фрагментов ретро- транспозон-подобных элементов одного и того же семейства R173 [12, 13]. Это семейство исходно было описано у ржи (Secale cereale). Показано, что оно включает в себя около 15 тыс. индивидуальных копий на диплоидный геном, рассеяных по всем семи хромосомам; размер индивидуальных элементов его представителей варьирует от 3 до 6 тыс. пар ну- клеотидов (т. п. н.) и две области, фланкирующие R173 элементы, несут высокую степень гомологии с флангами одного из ретротранспозонов пшеницы [13]. На базе флангов эле- ментов семейства R173 получен набор молекулярно-генетических маркеров, удобных для работы с геномом ржи [12]. Оказалось также, что созданная система праймеров успешно по- зволяет дифференцировать близкородственные дикие и культурные виды растений, сорта картофеля и подсолнечника [14]. Материалы и методы. В анализ были включены 14 сортов риса, которые отличались по продолжительности вегетационного периода: раннеспелые сорта — Дальневосточный, Изумруд, Новатор, Садко, Спринт, Фонтан, Факел; среднеспелые — Виола, Лиман, При- морский, Рапан, Янтарь, позднеспелые — Лидер, Снежинка. Препараты ДНК готовили с помощью набора реагентов “Silika” (ООО “Компания Би- оком”, Москва). Для этого трехдневные проростки отделяли от зерновки и, объединив их по 10 шт., гомогенизировали в лизирующем буфере из комплекта набора. ПЦР смесь использовали готовую на основе “сухого ядра” (ООО “Компания Биоком”), праймеры прибавляли в количестве 20 пкмоль на реакцию. Длина праймеров составля- ла 18 н., температуры отжига варьировали от 50 до 56 ◦С. Дизайн праймеров осуществ- лен [12, 13] для амплификации межинсерционных фрагментов ДНК, фланкированных ин- вертированными повторами ретроэлементов PawS5, PawS6 и PawS11. Эти праймеры успе- шно применялись для генотипирования растений (напр., [14]). Продукты ПЦР разделяли путем электрофореза в 1,5%-м агарозном геле с трис-боратным буфером, окрашивали бро- мистым этидием, визуализировали в ультрафиолетовом свете с помощью гельдокументи- рующей системы “Vitran”. Результаты исследований и их обсуждение. Суммарный спектр продуктов ампли- фикации участков ДНК, фланкированных инвертированным повтором PawS5, полученный на ДНК разных сортов риса, включал 13 основных фрагментов длиной от 1000 до 200 пар оснований (п. о.), которые отчетливо воспроизводились при повторных амплификациях (рис. 1, 2). При таких повторных амплификациях внутрисортовые отличия не обнаруже- ны. В то же время наблюдались выраженные межсортовые отличия: количество продуктов амплификации (ампликонов) варьировало от 5 (сорта Садко, Фонтан, Янтарь) до 9 (сорта Дальневосточный, Факел, Снежинка). В спектрах ампликонов почти всех исследованных сортов регулярно присутствовали два фрагмента с длинами в районе 500–450 п. о. (табл. 1). В общем, в продуктах амплификации преобладали относительно короткие фрагменты длиной в 400–200 п. о. (42 ампликона) по сравнению с более длинными в 1000–700 п. о. (23 ампликона). Каждый сорт имел уникальное сочетание ампликонов; наиболее сходными по такому сочетанию оказались сорта Приморский и Янтарь; они отличались только по при- сутствию у сорта Приморский фрагмента длиной около 1000 п. о., не выявленного у сорта Янтарь (см. табл. 1). Эти фрагменты маркируют последовательности ДНК, расположенные между участком, комплементарным праймеру, и его инвертированным вариантом. Можно ожидать, что их длина указывает на взаимное расположение копий ретротранспозонпо- добного элемента, локализованных в альтернативных цепях ДНК. Судя по полученным 154 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2007, №7 Рис. 1. Спектр продуктов амплификации, полученный с использованием в качестве праймера последова- тельности PawS5: 1 — маркер молекулярной массы Gene Ruler 1 kb DNA Ladder (фрагменты 250, 500, 750, 1000, 2000 и более п. н.); 2 — сорт Виола; 3 — Дальневосточный; 4 — Изумруд; 5 — Лидер; 6 — Лиман; 7 — Новатор; 8 — Приморский; 9 — Рапан; 10 — Садко; 11 — Спринт; 12 — Снежинка; 13 — Факел; 14 — Фонтан; 15 — Янтарь; 16 — отрицательный контроль Рис. 2. Спектр продуктов амплификации (повтор образцов), полученный с использованием в качестве прай- мера последовательности PawS5: 1 — маркер молекулярной массы Gene Ruler 1 kb DNA Ladder (фрагменты 250, 500, 750, 1000, 2000 и более п. н.); 2 — сорт Янтарь; 3 — Дальневосточный; 4 — Фонтан; 5 — Лидер; 6 — Лиман; 7 — Приморский данным, расстояние между такими копиями достаточно короткое — от 1000 до 200 п. о., преимущественно в районе 500–200 п. о., что позволяет предполагать кластерную орга- низацию таких повторов в геноме риса. Интересно отметить, что использование того же праймера PawS5 в исследованиях разных такснов растений позволило получить сходную с рисом картину распределения длин продуктов амплификации у сортов картофеля, но не у подсолнечника, у которых большинство полученных ампликонов оказалось длиннее 1000 п. о. [14]. Сортовое разнообразие продуктов амплификации свитетельствует о том, что инсерции — делеции таких фрагментов достаточно активно происходят в рассмотренных сортах риса. Высокая скорость эволюции генома риса, связанная с транспозирующими элементами, достаточно подробно описана в литературе [15]. Показано, что скорость делеций и инсерций транспозирующихся элементов у риса в два раза выше, чем средний уровень синонимичных замен по структурным генам. Повышенная мобильность членов семейства R173 обнаружена по внутрисортовой изменчивости их присутствия/отсутствия у сорта ржи в связи с продол- жительностью хранения семян. ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №7 155 Рис. 3. Спектр продуктов амплификации, полученный с использованием в качестве праймеров последова- тельностей PawS6 и PawS11: 1 — маркер молекулярной массы Gene Ruler 1 kb DNA Ladder (фрагменты 250, 500, 750, 1000, 2000 и более п. н.); 2 — сорт Виола; 3 — Дальневосточный; 4 — Изумруд; 5 — Лидер; 6 — Лиман; 7 — Новатор; 8 — Приморский; 9 — Рапан; 10 — Садко; 11 — Спринт; 12 — Снежинка; 13 — Факел; 14 — Фонтан; 15 — Янтарь; 16 — отрицательный контроль По-видимому, именно высокая скорость эволюции транспозирующихся последователь- ностей в геноме риса и повышенная мобильность членов семейства R173 и объясняют уни- кальность сочетания продуктов амплификации фрагментов ДНК, фланкированных инвер- тированным повтором PawS5 для каждого из 14 исследованных сортов риса. Выполнен также сравнительный анализ у тех же сортов риса спектров продуктов ам- плификации, полученный при использовании в качестве праймеров пары PawS6 и PawS11, маркирующих расстояние между инсерциями в альтернативных цепях ДНК двух разных членов семейства R173 (рис. 3, 4; табл. 2). Количество четко выявляемых продуктов ам- Таблица 1. Длины основных продуктов амплификации, выявленных у сортов риса при использовании в ка- честве праймера последовательности PawS5 Сорта Длина ампликонов, п. о. Кол-во ампликонов1000 950 850 750 700 600 500 450 400 350 300 250 200 Раннеспелые Дальневосточный + — — + + — + + + + + + — 9 Изумруд + — — + — — + + — + — + + 7 Новатор + — + — — — + + — + + + + 8 Садко + — — — + — — + — + + — — 5 Спринт — — — — + — + + + + + — — 6 Факел — — — + + — + + + + + + + 9 Фонтан + + — — — — + + — + — — — 5 Суммарно 49 ампликонов; в среднем 7 ампликонов на сорт Среднеспелые Виола — — — + — + + + — + + — — 6 Лиман — — — — + + + + + + — + — 7 Приморский + — + — — — + + — + — + — 6 Рапан — — — — — + + + — + + + — 6 Янтарь — — + — — — + + — + — + — 5 Суммарно 30 ампликонов; в среднем 6 ампликонов на сорт Позднеспелые Лидер + — — — + — + + + + — + — 7 Снежинка + — — + — — + + + + + + + 9 Суммарно 16 ампликонов; в среднем 8 ампликонов на сорт Суммарно 23 ампликона Суммарно 42 ампликона длиной в 1000–700 п. о. длиной в 400–200 п. о. 156 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2007, №7 Рис. 4. Спектр продуктов амплификации (повтор образцов), полученный с использованием в качестве прай- меров последовательностей PawS6 и PawS11: 1 — маркер молекулярной массы Gene Ruler 1 kb DNA Ladder (фрагменты 250, 500, 750, 1000, 2000 и более п. н.); 2 — сорт Янтарь; 3 — Дальневосточный; 4 — Фонтан; 5 — Лидер; 6 — Лиман; 7 — Приморский плификации в этой системе оказалось существенно меньше (7), а длина их заметно больше (от 1900 до 400 п. о.), чем в случае использования в качестве праймера одной последователь- ности PawS5. У одного сорта, Спринт, продуктов амплификации в этой системе получить не удалось, у пяти сортов выявлены 1–2 ампликона, у остальных — от 3 до 6 ампликонов. В то же время повторные амплификации разных образцов одних и тех же сортов свидетель- ствовали об отсутствии внутрисортовой изменчивости по спектрам ампликонов (см. рис. 3, 4). Каждый сорт и по этим ампликонам имел уникальный, сортоспецифичный спектр, по- Таблица 2. Длины продуктов амплификации, выявленных у сортов риса при использовании в качестве праймеров последовательностей PawS6 + PawS11 Сорта Длина ампликонов, п. о. Кол-во ампликонов1900 1000 950 900 650 600 400 Раннеспелые Дальневосточный + + — + — + + 5 Изумруд + — — — — — — 1 Новатор + — — — — + — 2 Садко + — — — — — — 1 Спринт — — — — — — — 0 Факел — — — — — — + 1 Фонтан + + + + + + — 6 Суммарно 16 ампликонов; в среднем 2,3 ампликона на сорт Среднеспелые Виола + + — — — — — 2 Лиман + — + + — + + 5 Приморский + — + + + — — 4 Рапан + — — — + + — 3 Янтарь + + — — + — — 3 Суммарно 17 ампликонов; в среднем 3,4 ампликона на сорт Позднеспелые Лидер + + — + + + — 5 Снежинка + + + + — — + 5 Суммарно 10 ампликонов; в среднем 5 ампликонов на сорт ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №7 157 зволяющий отличать один сорт от другого по присутствию/отсутствию отдельных фраг- ментов ДНК. То есть и распределение сайтов инсерции этих двух элементов семейства R173 свидетельствует о выраженной межсортовой изменчивости. По спектрам продуктов амплификации, полученным с использованием как одного прай- мера PawS5, так и двух — PawS6 и PawS11, не удалось обнаружить выраженных отличий между группами сортов, отличающихся по продолжительности вегетационного периода (см. табл. 1, 2). Можно ожидать, что сортовая специфика спектров ампликонов, их относительно по- вышенное или пониженное количество по сравнению с другими сортами, может, в опреде- ленной степени, отражать потенциальную генетическую стабильность сорта, поскольку она тесно ассоциирована с актами инсерций/делеций элементов семейства R173. В этой связи интересно отметить, что по суммарному количеству выявленных ампликонов (см. табл. 1, 2) наибольшее их количество наблюдается у сортов Дальневосточный и Снежинка (сорт Дальневосточный относительно недавно интродуцирован в Краснодарский край). Однако этот вопрос, очевидно, нуждается в дальнейших исследованиях. Выполненные исследования свидетельствуют о высокой, сортоспецифичной изменчи- вости сайтов инсерции элементов семейства R173 в геноме риса. Использование в качестве праймера последовательности PawS5 позволяет получать относительно простые, хорошо во- спроизводимые спектры продуктов амплификации, удобные для их применения при сорто- вой идентификации исследованных сортов риса. Использование в качестве праймеров двух последовательностей — PawS6 и PawS11, относительно менее эффективно в связи с мень- шим количеством продуктов амплификации в спектрах и возможностью их отсутствия у от- дельных сортов. Тем не менее и в этом случае выявляется сортоспецифичность спектров ампликонов у исследованных сортов риса. В общем, эта система оказывается достаточно удобной для исследований молекулярно-генетической дифференциации между сортами ри- са и использованием полученных данных в прикладных и теоретических исследованиях. 1. Серебровский А.С. Селекция животных и растений. – Москва: Колос, 1969. – 295 с. 2. Конарев А. В. Белки растений как генетические маркеры. – Москва: Наука, 1983. – 365 с. 3. Nevo E. Genetic variation in natural populations: patterns and theory // Theor. Pop. Biol. – 1987. – 13, No 1. – P. 121–177. 4. Jeffreys A. J., Wilson V., Thein S. L. Individual-specific “fingerprints” of human DNA // Nature (Lon- don). – 1985. – 316. – P. 76–79. 5. Caetano-Anolles G. MAAP: a versatile and universal tool for genome analysis // Plant Mol. Biol. – 1994. – 25. – P. 1011–1026. 6. Zietkiewicz E., Rafalski A., Labuda D. Genome fingerprinting by sequence repeat (SSR) – anchored polymerase chain reaction amplification // Genomics. – 1994. – 20. – P. 176–183. 7. Vos P., Hogers R., Bleeker M. et al. ALFP: a new technoque for DNA fingerprint // Nucl. Acids. Res. – 1995. – 23. – P. 4407–4414. 8. Khiestkina E.K., Huang X.Q., Quenum F. J.-B. et al. Genetic diversity in cultivated plants – loss or stability? // Theor. and Appl. Genet. – 2004. – 108. – P. 1466–1472. 9. Monna L., Ohta R., Masuda H. et al. Genome-wide Searching of Single-nucleotide Polymorphisms among Eight Distantly and Closely Related Rice Cultivars (Oryza sativa L.) and a Wild Accession (Oryza rufipogon Griff.) // DNA Res. – 2006. – 13. – P. 43–51. 10. Flavell A. J., Knox M.R., Pearce S. R., Ellis T.H.N. Retrotransposon-based insertion polymorphisms (RBIP) for high throughput marker analysis // Plant J. – 1998. – 16. – P. 643–650. 11. Kalendar R., Grob T., Regina M. et al. IRAP and REMAP: Two new retrotransposon-based DNA fin- gerprinting techniques // Theor. and Appl. Genet. – 1999. – 98. – P. 704–711. 12. Rogowsky P.M., Shepherd K.W., Langridge P. Polymerase chain reaction based mapping of rye involving repeated DNA sequences // Genome. – 1992. – 35, No 4. – P. 621–626. 158 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2007, №7 13. Rogowsky P.M., Liu J. Y., Manning S. et al. Structural heterogeneity in the R173 family of rye-specific repetitive DNA sequences // Plant Mol. Biol. – 1992. – 20, No 1. – P. 95–102. 14. Зайцев В. С., Хавкин Э.Е. Идентификация генотипов растений с помощью ПЦР-анализа рассеянных повторяющихся последовательностей R173 // Докл. РАСХН. – 2001. – № 2. – С. 3–5. 15. Ma J., Bennetzen J. L. Rapid recent growth and divergence of rice nuclear genomes // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. – 2004. – 101, No 34. – P. 12404–12410. Поступило в редакцию 30.11.2006ВНИИРиса, Краснодар Московский государственный университет биотехнологий УДК 582.26/.28:546.221.1(262.5) © 2007 Академик НАН Украины Ю.П. Зайцев, академик НАН Украины Г. Г. Поликарпов, член-корреспондент НАН Украины В. Н. Егоров, Б. Г. Александров, О. П. Гаркуша, Н. И. Копытина, А.В. Курилов, Д. А. Нестерова, Л.М. Нидзвецкая, С.Е. Никонова, И. Г. Поликарпов, В.Н. Поповичев, Е. М. Руснак, Н.А. Стокозов, Н. Г. Теплинская, Л. М. Теренько Средоточие останков оксибионтов и банк живых спор высших грибов и диатомовых в донных отложениях сероводородной батиали Черного моря For the first time, the cultures of aerobic species of fungi and diatoms from spores collected in bottom sediments in the anaerobic hydrogen sulphide zone of the Black Sea at depths from 800 to 2100 m are obtained. После открытия сероводорода в толще Черного моря в 1890 г. стало ясно, что оксибионты в ней обитать не могут [1–5]. И действительно, за все время научных исследований предста- вителями разных стран (в течение 135 лет) ни в одной экспедиции не было фактов сбора жизнеспособных организмов-оксибионтов из аноксической глубоководной зоны Черного мо- ря [6]. Вместе с тем учение об анабиозе стало научной основой для поисков живых существ, способных впадать в состояние аноксибиоза [7] и пребывать в нем в различных экстремаль- ных условиях [8, 9]. В.И. Вернадский обращал внимание на то, что “наблюдается латентная жизнь спор, которая сосредоточена и в морских илах и осадках. . . ” [10, с. 156]. Учитывая оба вышеизложенных научных обобщения, можно было ожидать, во-первых, подтверждения отсутствия живых эукариот и, во-вторых, обнаружения их жизнеспособных спор и цист в глубоководных осадках, в пелоконтуре, батиали Черного моря, если эти по- коящиеся стадии благополучно достигают его дна. Выяснению этих вопросов посвящена настоящая работа. В отличие от ситуации с аноксическими условиями на дне мелководного (15–20 м) эсту- ария реки, где длительно сохраняются покоящиеся яйца зоопланктона [9], ситуация для по- коящихся стадий низших растений и беспозвоночных животных на глубинах в 1000–2000 м Черного моря должна считаться экстремальной. Степень ее экстремальности определяется ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №7 159
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1769
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn 1025-6415
language Ukrainian
last_indexed 2025-11-30T09:56:30Z
publishDate 2007
publisher Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
record_format dspace
spelling Глазко, В.И.
Цветков, И.А.
Иванов, А.Н.
2008-09-02T17:17:29Z
2008-09-02T17:17:29Z
2007
IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса / В.И. Глазко, И.А. Цветков, А.Н. Иванов // Доп. НАН України. — 2007. — N 7. — С. 153–159. — Бібліогр.: 15 назв. — укp.
1025-6415
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1769
575
The comparative analysis of amplification product spectra, which were obtained with the use of PawS5, PawS6 and PawS11, the end fragments of retrotransposon-like elements of family R173, as primers in 14 rice varieties, was carried out. The data on the expressive differentiation between rice varieties by the combination of amplification products with different lengths of DNA fragments were obtained. The possibility to use these fragments for the genetic identification of rice varieties is demonstrated.
uk
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
Біологія
IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса
Article
published earlier
spellingShingle IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса
Глазко, В.И.
Цветков, И.А.
Иванов, А.Н.
Біологія
title IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса
title_full IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса
title_fullStr IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса
title_full_unstemmed IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса
title_short IRAP маркеры в оценках дифференциации сортов риса
title_sort irap маркеры в оценках дифференциации сортов риса
topic Біологія
topic_facet Біологія
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1769
work_keys_str_mv AT glazkovi irapmarkeryvocenkahdifferenciaciisortovrisa
AT cvetkovia irapmarkeryvocenkahdifferenciaciisortovrisa
AT ivanovan irapmarkeryvocenkahdifferenciaciisortovrisa