Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т
Штамм Gluconobacter oxydans 2Т был выделен из смешанных почвенных популяций бактерий. Культура способна утилизировать 2,4,5-Т как единственный источник углерода и энергии. В периодической культуре G. oxydans утилизировал 81% 2,4,5-Т за 9 дней. Среди метаболитов были выявлены 2,4-дихлорфеноксиуксус...
Gespeichert in:
| Datum: | 2010 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2010
|
| Schriftenreihe: | Фактори експериментальної еволюції організмів |
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/177990 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т / Н.В. Жарикова, В.В. Коробов, Л.Г. Анисимова, Т.Р. Ясаков, Е.Ю. Журенко, Т.В. Маркушева // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2010. — Т. 9. — С. 248-252. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-177990 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1779902025-02-23T18:19:13Z Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т Жарикова, Н.В. Коробов, В.В. Анисимова, Л.Г. Ясаков, Т.Р. Журенко, Е.Ю. Маркушева, Т.В. Біотехнології у медицині та сільському господарстві Штамм Gluconobacter oxydans 2Т был выделен из смешанных почвенных популяций бактерий. Культура способна утилизировать 2,4,5-Т как единственный источник углерода и энергии. В периодической культуре G. oxydans утилизировал 81% 2,4,5-Т за 9 дней. Среди метаболитов были выявлены 2,4-дихлорфеноксиуксусная, 4-хлорфеноксиуксусная и 3-метил-2,6-диоксо-4-гексеновые кислоты. Степень очистки почвы, достигаемая при использовании штамма G. oxydans 2T, составила 66,5% к 48-м суткам. The strain Gluconobacter oxydans 2T has been isolated from a soil mixed bacterial populations. G. oxydans 2T is capable of utilizing 2,4,5-Т as the sole source of carbon and energy. 2,4,5-Т quantity was reduced in a culture medium approximately on 81% by G. oxydans 2T batch culture within 9 days. The strain produced processes of 2,4,5-Т dehalogenation to phenoxyactic acid, which then was transformed to 3-methyl-2,6-dioxo4-hexenoic acid. The culture G. oxydans 2T utilizes 2,4,5-Т in soil. The 2,4,5-Т concentration was reduced approximately on 67% within 48 day. 2010 Article Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т / Н.В. Жарикова, В.В. Коробов, Л.Г. Анисимова, Т.Р. Ясаков, Е.Ю. Журенко, Т.В. Маркушева // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2010. — Т. 9. — С. 248-252. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. 2219-3782 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/177990 ru Фактори експериментальної еволюції організмів application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Біотехнології у медицині та сільському господарстві Біотехнології у медицині та сільському господарстві |
| spellingShingle |
Біотехнології у медицині та сільському господарстві Біотехнології у медицині та сільському господарстві Жарикова, Н.В. Коробов, В.В. Анисимова, Л.Г. Ясаков, Т.Р. Журенко, Е.Ю. Маркушева, Т.В. Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т Фактори експериментальної еволюції організмів |
| description |
Штамм Gluconobacter oxydans 2Т был выделен из смешанных почвенных
популяций бактерий. Культура способна утилизировать 2,4,5-Т как единственный
источник углерода и энергии. В периодической культуре G. oxydans утилизировал 81% 2,4,5-Т за 9 дней. Среди метаболитов были выявлены 2,4-дихлорфеноксиуксусная, 4-хлорфеноксиуксусная и 3-метил-2,6-диоксо-4-гексеновые кислоты. Степень
очистки почвы, достигаемая при использовании штамма G. oxydans 2T, составила
66,5% к 48-м суткам. |
| format |
Article |
| author |
Жарикова, Н.В. Коробов, В.В. Анисимова, Л.Г. Ясаков, Т.Р. Журенко, Е.Ю. Маркушева, Т.В. |
| author_facet |
Жарикова, Н.В. Коробов, В.В. Анисимова, Л.Г. Ясаков, Т.Р. Журенко, Е.Ю. Маркушева, Т.В. |
| author_sort |
Жарикова, Н.В. |
| title |
Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т |
| title_short |
Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т |
| title_full |
Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т |
| title_fullStr |
Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т |
| title_full_unstemmed |
Возможность использования культуры Gluconobacter oxydans 2T в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т |
| title_sort |
возможность использования культуры gluconobacter oxydans 2t в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-т |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| publishDate |
2010 |
| topic_facet |
Біотехнології у медицині та сільському господарстві |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/177990 |
| citation_txt |
Возможность использования культуры
Gluconobacter oxydans 2T
в области ремедиации почв от гербицида 2,4,5-Т / Н.В. Жарикова, В.В. Коробов, Л.Г. Анисимова, Т.Р. Ясаков, Е.Ю. Журенко, Т.В. Маркушева // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2010. — Т. 9. — С. 248-252. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. |
| series |
Фактори експериментальної еволюції організмів |
| work_keys_str_mv |
AT žarikovanv vozmožnostʹispolʹzovaniâkulʹturygluconobacteroxydans2tvoblastiremediaciipočvotgerbicida245t AT korobovvv vozmožnostʹispolʹzovaniâkulʹturygluconobacteroxydans2tvoblastiremediaciipočvotgerbicida245t AT anisimovalg vozmožnostʹispolʹzovaniâkulʹturygluconobacteroxydans2tvoblastiremediaciipočvotgerbicida245t AT âsakovtr vozmožnostʹispolʹzovaniâkulʹturygluconobacteroxydans2tvoblastiremediaciipočvotgerbicida245t AT žurenkoeû vozmožnostʹispolʹzovaniâkulʹturygluconobacteroxydans2tvoblastiremediaciipočvotgerbicida245t AT markuševatv vozmožnostʹispolʹzovaniâkulʹturygluconobacteroxydans2tvoblastiremediaciipočvotgerbicida245t |
| first_indexed |
2025-11-24T06:47:36Z |
| last_indexed |
2025-11-24T06:47:36Z |
| _version_ |
1849653310808653824 |
| fulltext |
248
ЖАРИКОВА Н.В., КОРОБОВ В.В., АНИСИМОВА Л.Г., ЯСАКОВ Т.Р.,
ЖУРЕНКО Е.Ю., МАРКУШЕВА Т.В.
Учреждение РАН Институт биологии УНЦ РАН,
Россия, 450054, Уфа, ул. Проспект Октября, 61, e-mail: tvmark@anrb.ru
ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КУЛЬТУРЫ
GLUCONOBACTER OXYDANS 2Т
В ОБЛАСТИ РЕМЕДИАЦИИ ПОЧВ ОТ ГЕРБИЦИДА 2,4,5-Т
2,4,5-трихлорфеноксиуксусная кислота (2,4,5-Т) — синтетическое
соединение, используемое в качестве гербицида для борьбы с древесной и
кустарниковой растительностью, обработки газонов, лесных угодий, паст-
бищ. Вместе с тем в ряде работ было показано, что 2,4,5-Т способна оказы-
вать значительный мутагенный и канцерогенный эффект на живые системы
[1]. Отмечено, что 2,4,5-Т является недоступным или малодоступным источ-
ником углерода и энергии для большинства микроорганизмов, что ведет к
накоплению и постепенному распространению этого ксенобиотика по пище-
вым цепям [2]. Анализ работ, касающихся поиска и исследования особен-
ностей деструкторов, показал, что интерес к микроорганизмам-деструкторам
2,4,5-Т связан с возможностью использовать их на практике при создании
биологических технологий очистки почвы от экологически опасных соеди-
нений.
Объектом исследований служил бактериальный штамм, выделенный
из образца почвенных популяций микроорганизмов.
В эксперименте использовали минимальную солевую среду следующего
состава в г/л: NH4Cl — 1; K2HPO4 — 5; MgSO4×7H2O — 0,05; FeSO4×7H2O —
0,005; CuSO4×5H2O — 0,001; ZnSO4 — 0,008; pH — 6,8–7,0. В качестве един-
ственного источника углерода и энергии добавляли 2,4,5-Т до конечной кон-
центрации 100 мг/л.
Определение количества 2,4,5-Т в культуральной жидкости проводили
согласно методам определения микроколичеств 2,4,5-Т с небольшими моди-
фикациями [3].
Для идентификации продуктов катаболизма 2,4,5-Т метилированные
экстракты метаболитов подвергали анализу на хроматомасс-спектрометри-
ческой системе хроматограф HP 5890 с масс-селективным детектором HP
5972A.
В опытах с почвой посевной материал культуры вносили из расчета
105–106 КОЕ на 1 г почвы, содержащей 2,4,5-Т в концентрации 100 мг/кг.
Обработку проводили в течение 48 суток в лабораторных условиях при
естественном суточном колебании температур летнего периода.
Исследуемый штамм был идентифицирован согласно культурально-
морфологическим и физиолого-биохимическим признакам как Glucono-
bacter oxydans [4]. Клетки штамма представляют собой подвижные коккоба-
249
циллы, одиночные и сдвоенные, на МПА колонии беловатые, блестящие,
непрозрачные. Окраска клеток по Граму отрицательная. Аэроб, оптимальный
рост наблюдался в диапазоне температур от +22 °С до +41 °С и значениях
pH, близких к нейтральным — 6,8–7,2. Депонирование штамма G. oxydans
было произведено в ВКПМ под номером В-7170.
Исследование динамики роста штамма G. oxydans 2T в условиях исполь-
зования им 2,4,5-Т в качестве единственного источника углерода и энергии
в периодической культуре показало, что существенное изменение значений
оптической плотности (ОD590) клеточной суспензии G. oxydans 2T наблюда-
лось уже в течение первых суток культивирования (рис. 1).
Далее значение ОD590 продолжало возрастать и его снижение наблюда-
лось только после 5-х суток культивирования. Анализ динамики изменения
концентрации 2,4,5-Т в культуральной жидкости штамма G. oxydans 2T
позволяет констатировать, что в течение 5 суток происходило заметное
уменьшение концентрации 2,4,5-Т примерно до 58,25%. К седьмым суткам
она снижалась до 19,04%.
С целью выявления этапов метаболизма 2,4,5-Т G. oxydans исследован
характер промежуточных продуктов превращения ксенобиотика,
обнаруживаемых в среде культивирования штамма в условиях
периодической культуры. Среди метаболитов были выявлены продукты
неполного дегалогенирования молекул 2,4,5-Т, в частности, 2,4-
дихлорфеноксиуксусная и 4-хлорфеноксиуксусная кислоты.
Кроме этого, было отмечено присутствие феноксиуксусной и 3-метил-
2,6-диоксо-4-гексеновой кислот. Анализ природы интермедиатов ката-
болизма 2,4,5-Т G. oxydans позволяет заключить, что штамм осуществлял
0
20
40
60
80
100
120
0 2 4 6 8 10 12
t, сутки
С
, м
г/
л
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
O
D
5
90
, О
Е
Содержание 2,4,5-Т Оптическая плотность культуры
Рис. 1. Зависимость значений оптической плотности клеточной суспензии OD590
и концентрации 2,4,5-Т от времени инкубации штамма Gluconobacter oxydans
IBRB-2Т в периодической культуре
250
реакции дехлорирования молекул 2,4,5-Т с последующим их расщеплением
до 3-метил-2,6-диоксо-4-гексеновой кислоты (схема 1).
Исследована динамика изменения концентрации 2,4,5-Т от времени
инкубации штамма G. oxydans 2T в почве, содержащей 2,4,5-Т (табл. 1,
рис. 2).
Степень очистки почвы, достигаемая при использовании штамма
G. oxydans 2T, составляла соответственно: 27,4% на 21-е сутки культиви-
рования, 31,9% на 30-е сутки и около 66,5% к 48-м суткам. Существенное
изменение содержания 2,4,5-Т наблюдалось после 10–14 дней обработки
(рис. 2).
Ранее было отмечено, что представители рода Gluconobacter встре-
чаются в садовой почве, на цветах, фруктах, медоносных пчелах, в сидре,
вине, южноафриканском пиве банту, пальмовом соке. Обнаружено, что
G. oxydans трансформирует микотоксин патулин в менее токсичное соеди-
нение — аскладиол [5]. В то же время, конверсия производных аромати-
Таблица 1
Результаты анализа содержания 2,4,5-Т в почве
Время обработки почвы, сут.
Характеристика почвы
1 5 10 14 21 30 48
Содержание 2,4,5-Т в почве, мг/г 100 95,0 87,6 85,0 72,6 68,1 33,5
Степень очистки к контролю, % 0 5,0 12,4 15,0 27,4 31,9 66,5
IIII II
Cl
Cl
OCH2- COOH
Cl
Cl
OCH2- COOH
Cl Cl
OCH2- COOH
IV
V
· ··
CH3
COOH
COH
O
OCH2⎯COOH
Схема 1. Метаболизма 2,4,5-Т штамма Gluconobacter oxydans 2T. Условные
обозначения: I — 2,4,5-Т; II — 2,4-Д; III — 4-хлорфеноксиуксусная кислота; IV —
феноксиуксусная кислота; V — 3-метил-2,6-диоксо-4-гексеновая кислота
251
ческого ряда, содержащих галогены, для представителей рода Gluconobacter
ранее не была обнаружена.
Таким образом, можно сделать следующие выводы: культура G. oxydans
способна использовать 2,4,5-Т в качестве единственного источника углерода
и энергии, при этом она осуществляет совокупность процессов дегалогени-
рования молекул 2,4,5-Т с последующим образованием 3-метил-2,6-диоксо-
4-гексеновой кислоты. Штамм G. oxydans 2T осуществляет конверсию 2,4,5-Т
в водной среде и почве. Приведенные данные показали, что применение штам-
ма G. oxydans 2Т является перспективным для очистки почвы от 2,4,5-Т.
Литература
1. Grant W.F. The Genotoxic effects of 2,4,5-T Mutation Research, 1979. V.65.
№2.— P. 83-119.
2.Маркушева Т.В., Журенко Е.Ю., Кусова И.В. Бактерии-деструкторы фенола
и его хлорированных производных: поиск и применение.— Уфа: Гилем, 2002.—
108 с.
3.Методы определения микроколичеств пестицидов / Под ред. М.А. Клисен-
ко.— М.: Медицина, 1984.— 256 с.
4.Определитель бактерий Берджи / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита
и др. 9-е изд. В 2-х т.— М: Мир, 1997.— 799 с.
5. Ricelli A., Baruzzi F., Solfrizzo M., Morea M., Fanizzi F.P. Biotransformation of pa-
tulin by Gluconobacter oxydans // Appl. Environ. Microbiol. 2007.— V.73.— P. 785–792.
Резюме
Штамм Gluconobacter oxydans 2Т был выделен из смешанных почвенных
популяций бактерий. Культура способна утилизировать 2,4,5-Т как единственный
источник углерода и энергии. В периодической культуре G. oxydans утилизировал
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 5 10 14 21 30 48 50
время, сутки
Рис. 2. Содержание 2,4,5-Т в почве в процессе очистки с использованием штамма
Gluconobacter oxydans 2Т
252
81% 2,4,5-Т за 9 дней. Среди метаболитов были выявлены 2,4-дихлорфеноксиуксус-
ная, 4-хлорфеноксиуксусная и 3-метил-2,6-диоксо-4-гексеновые кислоты. Степень
очистки почвы, достигаемая при использовании штамма G. oxydans 2T, составила
66,5% к 48-м суткам.
The strain Gluconobacter oxydans 2T has been isolated from a soil mixed bacterial
populations. G. oxydans 2T is capable of utilizing 2,4,5-Т as the sole source of carbon
and energy. 2,4,5-Т quantity was reduced in a culture medium approximately on 81% by
G. oxydans 2T batch culture within 9 days. The strain produced processes of 2,4,5-Т
dehalogenation to phenoxyactic acid, which then was transformed to 3-methyl-2,6-dioxo-
4-hexenoic acid. The culture G. oxydans 2T utilizes 2,4,5-Т in soil. The 2,4,5-Т concen-
tration was reduced approximately on 67% within 48 day.
ИВАНОВА Н.Н., МИТРОФАНОВА И.В., МИТРОФАНОВА О.В.
Никитский ботанический сад - Национальный научный центр, Украина, 98648,
АР Крым, г. Ялта, пгт. Никита, e-mail: in_vitro@ ukr.net
БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЕМЫ КЛОНАЛЬНОГО
МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ПЕРСПЕКТИВНЫХ СОРТОВ
BEGONIA RIGER ELATIOR
Род бегония (Begonia L.) относится к семейству бегониевых (Begonia-
ceae C.A. Agardh.) и насчитывает около 1000 видов и разновидностей. Рас-
тения бегонии обладают большим разнообразием форм окрасок листьев и
цветков, а также обильным и продолжительным цветением. Основной спо-
соб вегетативного размножения — черенкование. Для этих целей исполь-
зуют побеги, листья и его фрагменты. В цветоводстве в настоящее время
получили распространение около 130 видов и около 2000 гибридов [1].
Исходя из биологических особенностей и использования, формы и сорта
бегонии делят на две группы: красивоцветущие и декоративно лиственные.
Бегония элатиор (Begonia x elatior, B. hiemalis), относящаяся к красивоцве-
тущим бегониям — гибридная форма, которая получена в результате скрещи-
вания B. tuberhybrida и B. socotrana. В Германии были созданы крупно-
цветковые мелколистные сорта, получившие название раса элатиор-Ригера
или Begonia riger elatior.
О возможности клонального микроразмножения Begonia х elatior с ис-
пользованием различных эксплантов, таких как верхушки побегов, сегменты
цветоножки, ткани цветоноса и цветков, сегменты чашелистиков, лепестков,
черешков, стеблевых отрезков описано в ряде публикаций [2–7]. Однако
отсутствие универсальной питательной среды, обеспечивающей регене-
рацию разных сортов, создает определенные трудности при разработке
способов клонального микроразмножения данной культуры.
Целью настоящего исследования было изучение особенностей регене-
рации растений пяти сортов B. riger elatior в условиях in vitro для разработки
|