Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК

Aim. To investigate the transplanted human Wharton’s Jelly MSC survival in rat model of experimental osteoarthritis, and changes in circulating leukocyte populations following MSC injection. Methods. Culturing of MSC in vitro. PCR analysis of DNA from animal tissue. Blood cell count and calculation...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :	Фактори експериментальної еволюції організмів
Дата:	2014
Автори:	Ковальчук, М.В., Гулько, Т.П., Драгулян, М.В., Шувалова, Н.С., Дерябина, Е.Г., Кордюм, В.А.
Формат:	Стаття
Мова:	Russian
Опубліковано:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2014
Теми:	Клітинні, генні та молекулярні біотехнології
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/178258
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК / М.В. Ковальчук, Т.П. Гулько, М.В. Драгулян, Н.С. Шувалова, Е.Г. Дерябина, В.А. Кордюм // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2014. — Т. 15. — С. 76-79. — Бібліогр.: 14 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-178258
record_format	dspace
spelling	Ковальчук, М.В. Гулько, Т.П. Драгулян, М.В. Шувалова, Н.С. Дерябина, Е.Г. Кордюм, В.А. 2021-02-18T12:23:29Z 2021-02-18T12:23:29Z 2014 Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК / М.В. Ковальчук, Т.П. Гулько, М.В. Драгулян, Н.С. Шувалова, Е.Г. Дерябина, В.А. Кордюм // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2014. — Т. 15. — С. 76-79. — Бібліогр.: 14 назв. — рос. 2219-3782 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/178258 57.088 + 616.7:616-018.1”712.4” Aim. To investigate the transplanted human Wharton’s Jelly MSC survival in rat model of experimental osteoarthritis, and changes in circulating leukocyte populations following MSC injection. Methods. Culturing of MSC in vitro. PCR analysis of DNA from animal tissue. Blood cell count and calculation of circulating lymphocyte subpopulations Results. It has been shown by PCR that human alpha-DNA can be detected during one day in the wounded hosts inside injured stifle joint. Blood cell count revealed reliable changes in lymphocyte subpopulations in peripheral blood. Conclusions. Detection of MSC donor DNA was negatively correlated with time from MSC injection to sample collection. MSC transplantation induced transient reliable increases in circulating white blood cells, lymphocytes, and neutrophils in most transplant recipients but not control animals. This study demonstrates that hMSCs are weakly immunogenic in vivo in animal osteoarthritis model. Key words: hMSC, survival, immunogenicity, osteoarthritis model. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Фактори експериментальної еволюції організмів Клітинні, генні та молекулярні біотехнології Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК Changes in circulating leukocyte popylatings following intraarticular injection hMSC in animal osteoarthritis model Article published earlier
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
title	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК
spellingShingle	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК Ковальчук, М.В. Гулько, Т.П. Драгулян, М.В. Шувалова, Н.С. Дерябина, Е.Г. Кордюм, В.А. Клітинні, генні та молекулярні біотехнології
title_short	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК
title_full	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК
title_fullStr	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК
title_full_unstemmed	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК
title_sort	изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения мск
author	Ковальчук, М.В. Гулько, Т.П. Драгулян, М.В. Шувалова, Н.С. Дерябина, Е.Г. Кордюм, В.А.
author_facet	Ковальчук, М.В. Гулько, Т.П. Драгулян, М.В. Шувалова, Н.С. Дерябина, Е.Г. Кордюм, В.А.
topic	Клітинні, генні та молекулярні біотехнології
topic_facet	Клітинні, генні та молекулярні біотехнології
publishDate	2014
language	Russian
container_title	Фактори експериментальної еволюції організмів
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
format	Article
title_alt	Changes in circulating leukocyte popylatings following intraarticular injection hMSC in animal osteoarthritis model
description	Aim. To investigate the transplanted human Wharton’s Jelly MSC survival in rat model of experimental osteoarthritis, and changes in circulating leukocyte populations following MSC injection. Methods. Culturing of MSC in vitro. PCR analysis of DNA from animal tissue. Blood cell count and calculation of circulating lymphocyte subpopulations Results. It has been shown by PCR that human alpha-DNA can be detected during one day in the wounded hosts inside injured stifle joint. Blood cell count revealed reliable changes in lymphocyte subpopulations in peripheral blood. Conclusions. Detection of MSC donor DNA was negatively correlated with time from MSC injection to sample collection. MSC transplantation induced transient reliable increases in circulating white blood cells, lymphocytes, and neutrophils in most transplant recipients but not control animals. This study demonstrates that hMSCs are weakly immunogenic in vivo in animal osteoarthritis model. Key words: hMSC, survival, immunogenicity, osteoarthritis model.
issn	2219-3782
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/178258
citation_txt	Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК / М.В. Ковальчук, Т.П. Гулько, М.В. Драгулян, Н.С. Шувалова, Е.Г. Дерябина, В.А. Кордюм // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2014. — Т. 15. — С. 76-79. — Бібліогр.: 14 назв. — рос.
work_keys_str_mv	AT kovalʹčukmv izmeneniâvpopulâciâhleikocitovperiferičeskoikroviživotnyhsinducirovannymosteoartritomposlevnutrisustavnogovvedeniâmsk AT gulʹkotp izmeneniâvpopulâciâhleikocitovperiferičeskoikroviživotnyhsinducirovannymosteoartritomposlevnutrisustavnogovvedeniâmsk AT dragulânmv izmeneniâvpopulâciâhleikocitovperiferičeskoikroviživotnyhsinducirovannymosteoartritomposlevnutrisustavnogovvedeniâmsk AT šuvalovans izmeneniâvpopulâciâhleikocitovperiferičeskoikroviživotnyhsinducirovannymosteoartritomposlevnutrisustavnogovvedeniâmsk AT derâbinaeg izmeneniâvpopulâciâhleikocitovperiferičeskoikroviživotnyhsinducirovannymosteoartritomposlevnutrisustavnogovvedeniâmsk AT kordûmva izmeneniâvpopulâciâhleikocitovperiferičeskoikroviživotnyhsinducirovannymosteoartritomposlevnutrisustavnogovvedeniâmsk AT kovalʹčukmv changesincirculatingleukocytepopylatingsfollowingintraarticularinjectionhmscinanimalosteoarthritismodel AT gulʹkotp changesincirculatingleukocytepopylatingsfollowingintraarticularinjectionhmscinanimalosteoarthritismodel AT dragulânmv changesincirculatingleukocytepopylatingsfollowingintraarticularinjectionhmscinanimalosteoarthritismodel AT šuvalovans changesincirculatingleukocytepopylatingsfollowingintraarticularinjectionhmscinanimalosteoarthritismodel AT derâbinaeg changesincirculatingleukocytepopylatingsfollowingintraarticularinjectionhmscinanimalosteoarthritismodel AT kordûmva changesincirculatingleukocytepopylatingsfollowingintraarticularinjectionhmscinanimalosteoarthritismodel
first_indexed	2025-11-24T16:27:44Z
last_indexed	2025-11-24T16:27:44Z
_version_	1850484069671895040
fulltext	76 M42 and BAD-1 basic media and modified the vitamins, amino and organic acids media composition. Standard media cannot be used as induction media for Odessa region durum wheat genotypes since the level of induction on that media was low. Embryo formation frequency on modified media was higher. Conclusions. New induction culture media were developed. The induction media composition impacted on the embryo formation frequency. Key words: durum wheat, anther culture in vitro. УДК 57.088 + 616.7:616-018.1”712.4” КОВАЛЬЧУК М.В. 1, ГУЛЬКО Т.П. 1, ДРАГУЛЯН М.В. 1, ШУВАЛОВА Н.С. 2, ДЕРЯБИНА Е.Г. 2, КОРДЮМ В.А. 1, 2 1 Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины, Украина, 03143, г. Киев, ул. Заболотного, 150, e-mail: kovmv@ukr.net 2 ГУ «Институт генетической и регенеративной медицины НАМН Украины», Украина, 04114, г. Киев, ул. Вишгородская, 67 ИЗМЕНЕНИЯ В ПОПУЛЯЦИЯХ ЛЕЙКОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЖИВОТНЫХ С ИНДУЦИРОВАННЫМ ОСТЕОАРТРИТОМ ПОСЛЕ ВНУТРИСУСТАВНОГО ВВЕДЕНИЯ МСК Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) вызывают в последнее время повышенный интерес, поскольку они имеют способность мигрировать в сайты повреждения тканей, могут дифференцироваться в разные типы клеток, имеют иммуномодулирующие свойства, легко выделяются и масштабируются в условиях ex vivo. МСК модулируют иммунные ответы в организме и изменяют течение различных воспалительных заболеваний, поэтому часто терапевтический эффект МСК осуществляется через их иммуннорегуляторные функции [1–3]. Тот факт, что МСК in vitro могут ингибировать пролиферацию как сингенных, так и аллогенных лимфоцитов, а также уходить от иммунного надзора при трансплантациях, дал надежду на то, что МСК можно использовать в клинике как «универсальные» иммун- нопривелегированные доноры биологически активных веществ, игнорируя отличия по главному комплексу гистосовместимости (ГКГ). С другой стороны, исследования на лабораторных животных показали, что аллогенные МСК запускают донор-специфи- ческие иммунные реакции у реципиента [4, 5]. В частности, МСК человека и ряда других млекопитающих, не экспрессируют антигены II класса ГКГ при нормальных физиологических условиях, тогда как индукция их экспрессии определяется при дифференциации клеток [6]. При введении МКС в поврежденные ткани может наблюдаться их дифференциация, что ведет к появлению или усилению экспрессии антигенов І и ІІ классов ГКГ и синтезу донор- специфических алло-антител в сыворотке экспериментальных животных, что способствует удалению клеток из тканей реципиента. Встает вопрос о пересмотре концепции иммунно- привелегированной природы МСК при алло- и ксенотрансплантациях. Этому также способствуют факты лишь кратковременного выживания трансплантированных МСК у иммуннокомпетентного реципиента, а также ряд изменений в субпопуляциях клеток иммунной системы реципиента под действием донорных МСК. Так как МСК обладают противовоспалительными свойствами и принимают участие в репарации тканей, мы исследовали влияние МСК Вартонового студня пуповины человека на процесс восстановления хрящевой ткани при индуцированном остеоартрите у крыс. Остеоартрит – найболее частое ревматическое заболевание, которое характеризуется дегенерацией суставного хряща, в основном, благодаря изменениям в сторону катаболической активности и уменьшении количества хондроцитов. Способность последних восстанавливать матрикс снижается как с возрастом, так и при ряде повреждений [7]. Если происходит восстановление, то часто образуется неполноценный хрящ с пониженным содержанием коллагена второго типа и аггрекана. Показано, что МСК защищают хондроциты от дегенерации, связанной с развитием остеоартрита [8]. Целью нашего исследования было 77 установление времени пребывания МСК в поврежденном суставе (выживаемость донорных МСК на фоне динамики восстановления хрящевой ткани) и выявление изменений в популяциях лейкоцитов в периферической крови реципиента при локальном введении МСК. Материалы и методы Лабораторные животные. В качестве экспериментальных животных использовались крысы линии Wistar, самцы, вес 180–200 г. Животные содержались в стандартных условиях (температура 21–23 °С, влажность 30–70 %, 12 часовой период освещения, корм и вода – ad libitum). Выделение МСК. МСК были получены из матрикса (Вартонового студня) пупочного канатика человека методом эксплантов. МСК культивировали до 2-го пассажа, в среде DMEM с низким содержанием глюкозы (РАА, Австрия), с добавлением бензилпеницилина (100 ед/мл среды), стрептомицина (100 мкг/мл среды), 2 mM L-глютамина (Sigma-Aldrich, США), FGF2 (2,5 нг/мл среды («Рефиброл», Интерфармбиотек, Украина) и 10 % эмбриональной телячьей сыворотки (РАА), в пластиковых флаконах для культивирования (75 см2) (РАА, Австрия). На каждом пассаже клетки подсчитывали и анализировали экспрессию поверхностных маркерных белков CD90, CD73 и CD105, с помощью антител, меченных флуоресцентными метками, на проточном цитофлуориметре FACSAria [9]. Процент клеток, несущих маркерный белок на 2-м пассаже, во всех опытах был выше 89 %. Получение модели остеоартрита у крыс. Животным (в возрасте 1,5 мес.) внутрисуставно вводили 0,1 мл йодуксусной кислоты (3 мг йодуксусной кислоты в 50 мкл 0,9 % NaCl) [10]. На 7-е сутки животным с индуцированным остеоартрозом проводили инъекцию 1,5 х 106 МСК человека в 50 мкл ФБР. Выделение ДНК. Тотальную ДНК из внутрисуставных смывов и МСК выделяли по Гринбергу [11]. ДНК из внутрисуставных соскобов выделяли по Брейну и соавт. [12]. Концентрацию и качество ДНК определяли на спектрофотометре NanoDrop ND-1000 (NanoDrop Technologies, Berlin, Germany). Полимеразная цепная реакция. Детекцию клеток, содержащих ДНК человека у крыс, проводили с помощью праймеров, амплифицирующих альфа-сателлитную ДНК человека, расположенную в участках центромерного хроматина всех хромосом человека [13]. Полимеразную цепную реакцию проводили в 0,5 мл-микропробирках на приборе ТП4 – ПЦР01 «Терцик» («ДНК-технология», РФ) по следующей программе: денатурация при 95˚С – 30с, отжиг при 60˚С – 30с и элонгация при 72˚С – 30с. Реакционная смесь объемом 20 мкл содержала: 10х ПЦР буфер, 0,2 мМ нуклеотидтрифосфаты, (каждого dNTP), 3 мМ хлорид магния, Taq-полимеразу «Fermentas» (Литва), ДНК и праймеры к альфа-ДНК человека («Синпол», Россия): Для ПЦР использовали следующие олигонуклеотиды: Cr17_1a f(5’-GGG ATA ATT TCA GCT GAC TAA ACA G-3’) 15..39 Cr17_2b r(5’TTC CGT TTA GTT AGG TGC AGT TAT C-3’) 867..891 [13]. Размер ампликона составляет 867 bp. Разделение продуктов амплификации проводили в 1,2 % агарозе в ТАЕ с последующей визуализацией в ультрафиолетовом освещении с использованием бромистого этидия. В качестве маркеров длины фрагментов продуктов ПЦР использован маркер GeneRulerTM 50 п. н. («Fermentas», Lithuania). Результаты и обсуждение Развитие экспериментального остеоартрита у крыс путем инъекции в коленный сустав йодоуксусной кислоты сопровождалось как разрушением хрящевой поверхности сустава, так и воспалительными процессами в окружающих тканях. После введения МСК проводили детекцию ксеногенного материала с использованием метода ПЦР. Вследствие многокопийности альфа-сателлитной последовательности метод обладает высокой чувствительностью. Для изучения выживаемости донорных МСК и динамики тканевых изменений в месте их введения (поврежденном коленном суставе) через 0,5, 2, 24 часа и 7 суток получали смывы и соскобы с хрящевой поверхности сустава, которые использовали для выделения ДНК, служащей матрицей для ПЦР (рис. 1). Как видно из результатов ПЦР, альфа- ДНК человека выявляется в полости сустава по крайней мере на протяжении суток. Через 7 суток альфа-ДНК МСК в реакции амплификации не выявлялась при чувствительности метода в наших опытах 1 клетка донора на 10000 клеток реципиента. 78 1 2 3 4 5 6 7 Рис. 1. Результаты ПЦР на наличие альфа- ДНК человека в образцах из полостей поврежденных суставов крыс после введения МСК матрикса пуповины человека через разные промежутки времени. 1 – смыв из сустава после введения физиологического раствора (контроль) 30 мин; 2 – смыв после 30 мин; 3 – хрящевая поверхность сустава после 30 мин; 4 – маркер молекулярного веса 100 bp DNA Ladder (Fermentas); 5 – ДНК МСК; 6 – смыв после 24 часов; 7 – смыв после 7 суток Исходя из непродолжительности существования ксеногенных клеток в пораженном суставе, можно предположить, что последние элиминировались иммунной системой животного. Для того, чтобы оценить иммуногенность МСК пуповины в экспериментальных животных, мы определяли ответ иммунной системы по изменению пулов клеток белой крови. Анализировались образцы периферической крови, собранные в день введения МСК, и на 7, 14, 21 день после внутрисуставной инъекции МСК. Оценивались следующие группы животных: 1) интактные животные + МСК; 2) животные с индуцированным остеоартритом + МСК; 3) животные с индуцированным остеоартритом + ФБР (рис 2). Полученные результаты показали однозначное узнавание МСК клетками иммунной системы реципиента, о чем свидетельствует увеличение пула нейтрофилов в периферической крови, что было отмечено и в других работах [14]. Наблюдалось достоверное увеличение лимфоцитов в группе интактных животных после введения МСК (рис. 2). В обеих группах животных с индуцированным остеоартритом не обнаруживалось существенных количественных изменений после введения МСК, что могло быть связано с первичной воспалительной реакцией иммунной системы животных на «собственно» повреждение тканей при внутрисуставной инъекции. Выводы По результатам ПЦР, ДНК человека, введенная с трансплантированными МСК, выявлялась в течение первых суток после инъекции. После введения МКС отмечались достоверные изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови модельных животных, что свидетельствует об иммуногенности МСК человека для животных с индуцированным остеоартритом. 5 8 11 14 17 20 23 26 29 32 35 МСК ОА + МСК ОА + 0,9 NaCl С ег ме нт оя де рн ы е н ей тр оф ил ы, % 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 Л им фо ци ты , % МСK ОА + МСК ОА + 0,9 NaCl А Б точка введения МСК; 7 день после введения МСК; 14 день после введения МСК; 21 день после введения МСК. Рис. 2. А – количество нейтрофилов (%) в периферической крови трех групп животных в день введения МСК и через 7, 14 и 21 дней после инъекции. (p < 0,05). Б – количество лимфоцитов (%) в периферической крови трех групп животных в день введения МСК и через 7, 14 и 21 день после инъекции (p < 0,05) 79 Литература 1. English K. Mechanisms of mesenchymal stromal cell immunomodulation // Immunol. Cell Biol. – 2013. – 91. – P. 19–26. 2. Le Blanc K, Ringden O. Immunobiology of human mesenchymal stem cells and future use in hematopoietic stem cell transplantation // Biol. Blood Marrow Transplant. – 2005. – 11. – P. 321–334. 3. Lindolfo da Silva Meirelles, Aparecida Maria Fontes, Dimas Tadeu Covas, Arnold I. Caplan Mechanisms involved in the therapeutic properties of mesenchymal stem cells // Cytokine Growth Factor Rev. – 2009. – 20. – P. 419– 427. 4. Schu S., Nosov M., Lisa O’Flynn L., Shaw G., Treacy O., Barry F., Murphy M., O’Brien T., Ritter T. Immunogenicity of allogeneic mesenchymal stem cells // J. Cel. Mol. Med. – 2012. – 16, N 9. – P. 2094–2103. 5. Nauta A.J., Westerhuis G., Kruisselbrink A.B., Lurvink E.G., Willemze R., Fibbe W.E. Donor-derived mesenchymal stem cells are immunogenic in an allogeneic host and stimulate donor graft rejection in a nonmyeloablative setting // Blood. – 2006. – 108. – P. 2114–2120. 6. Huang X.P., Sun Z., Miyagi Y., McDonald Kinkaid H., Zhang L., Weisel R.D., Li R.K. Differentiation of allogeneic mesenchymal stem cells induces immunogenicity and limits their long-term benefits for myocardial repair // Circulation. – 2010. – 122. – P. 2419–2429. 7. Loeser R.F., Goldring S.R., Scanzello C.R., Goldring M.B. Osteoarthritis: a disease of the joint as an organ // Arthritis Rheum. – 2012. – 64. – P. 1697–1707. 8. Ter Huurne M., Schelbergen R., Blattes R., Blom A., de Munter W., Grevers L.C., Jeanson J., Noel D., Casteilla L., Jorgensen C., van den Berg W., van Lent P.L. Antiinflammatory and chondroprotective effects of intraarticular injection of adipose-derived stem cells in experimental osteoarthritis // Arthritis Rheum. – 2012. – 64. – P. 3604– 3613. 9. Dominici M., Le Blanc K., Mueller I., Slaper-Cortenbach I., Marini F., Krause D., Deans R., Keating A., Prockop D., Horwitz E. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement // Cytotherapy. – 2006. – 8. – P. 315–317. 10. Bendele A.M. Animal models of osteoarthritis // Musculoskel Neuron Interact. – 2001. – 1, N 4. – Р. 325–329. 11. Grimberg J., Nawoschik S., Belluscio L., McKee R., Turck A., Eisenberg A. A simple and efficient non-organic procedure for the isolation of genomic DNA from blood // Nucleic Acids Res. – 1989. – 17. – P. 8390. 12. Biase F.H., Franco M.M., Goulart L.R., Antunes R.C. Protocol for extraction of genomic DNA from swine solid tissues // Genet. Mol. Biol. – 2002. – 25. – N 3–4. – P. 313–315. 13. Becker M., Nitsche A., Neumann C., Aumann J., Junghahn I., Fichtner I. Sensitive PCR method for the detection and real-time quantification of human cells in xenotransplantation systems // Br. J. Cancer. – 2002. – 87, N 11. – P. 1328–1335. 14. Samoa I.A., Dufour J., Lanclos C., Brunt J., Phinney D.G. Cell-dose-dependent increases in circulating levels of immune effector cells in rhesus macaques following intracranial injection of allogeneic MSCs // Exp. Hematol. – 2010. – 38, N 10. – P. 957–967. KOVALCHUK M.V. 1, GYLKO T.P. 1, DRAGULJAN M.V. 1, SHUVALOVA N.S. 2, DERYABINA O.G. 2, KORDUM V.A. 1, 2 1 Institute of Molecular Biology and Genetics National Academy of Sciences of Ukraine, Ukraine, 03143, Kiev, Zabolotnogo str., 150, e-mail:kovmv@ukr.net 2 State Institute “Institute of Genetic and Regenerative Medicine NAMS Ukraine”, Ukraine, 04114, Kiev, Vyshgorodska str., 67 CHANGES IN CIRCULATING LEUKOCYTE POPYLATINGS FOLLOWING INTRAARTICULAR INJECTION hMSC IN ANIMAL OSTEOARTHRITIS MODEL Aim. To investigate the transplanted human Wharton’s Jelly MSC survival in rat model of experimental osteoarthritis, and changes in circulating leukocyte populations following MSC injection. Methods. Culturing of MSC in vitro. PCR analysis of DNA from animal tissue. Blood cell count and calculation of circulating lymphocyte subpopulations Results. It has been shown by PCR that human alpha-DNA can be detected during one day in the wounded hosts inside injured stifle joint. Blood cell count revealed reliable changes in lymphocyte subpopulations in peripheral blood. Conclusions. Detection of MSC donor DNA was negatively correlated with time from MSC injection to sample collection. MSC transplantation induced transient reliable increases in circulating white blood cells, lymphocytes, and neutrophils in most transplant recipients but not control animals. This study demonstrates that hMSCs are weakly immunogenic in vivo in animal osteoarthritis model. Key words: hMSC, survival, immunogenicity, osteoarthritis model.

Изменения в популяциях лейкоцитов периферической крови животных с индуцированным остеоартритом после внутрисуставного введения МСК

Репозитарії

Схожі ресурси