Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала
Представлены биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусных растений персика, абрикоса, сливы, алычи и черешни как комплексный подход, состоящий из 6 блоков-методов. Подано біотехнологічні системи оздоровлення кісточкових плодових культур і одержання...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Фактори експериментальної еволюції організмів |
|---|---|
| Datum: | 2008 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2008
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/178304 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала / О.В. Митрофанова, Н.П. Лесникова-Седошенко, С.Н. Чирков, А.В. Смыков // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2008. — Т. 5. — С. 338-342. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859869775718514688 |
|---|---|
| author | Митрофанова, О.В. Лесникова-Седошенко, Н.П. Чирков, С.Н. Смыков, А.В. |
| author_facet | Митрофанова, О.В. Лесникова-Седошенко, Н.П. Чирков, С.Н. Смыков, А.В. |
| citation_txt | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала / О.В. Митрофанова, Н.П. Лесникова-Седошенко, С.Н. Чирков, А.В. Смыков // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2008. — Т. 5. — С. 338-342. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Фактори експериментальної еволюції організмів |
| description | Представлены биотехнологические системы оздоровления косточковых
плодовых культур и получения безвирусных растений персика, абрикоса, сливы, алычи
и черешни как комплексный подход, состоящий из 6 блоков-методов.
Подано біотехнологічні системи оздоровлення кісточкових плодових культур і
одержання безвірусних рослин персика, абрикоса, сливи, аличі та черешні як
комплексний підхід, що складається з 6 блоків-методів.
Biotechnological systems of stone fruits cleaning up and virus free peach, apricot,
plum, cherry plum and sweet cherry obtaining as a complex approach completed on 6 blocksmethods
have been presented.
|
| first_indexed | 2025-12-07T15:50:03Z |
| format | Article |
| fulltext |
338
2. Экспериментальные методы исследования белков и нуклеиновых кислот(ред.
Проковьев М.А.)//Москва, Издательство МГУ.-1985.-279 с.
3. Валагурова В.Е., Козырицкая В.Е., Иутинская Г.А. Актиномицеты рода
Streptomyces. Описание видов и компьютерная программа их идентификации//
Киев: Наукова думка.-2003.-645 с.
4. Bentley S.D., Chater K.F., Cerdeno-Tarraga A.M. et al. Complete genome sequence
of the model actinomycete Streptomyces coelicolor A3(2) // Nature.-2002.- vol. 417,
№6885.- P. 141-147.
5. Каталог фірми MBI. Fermentas.- 2006-2007.
6. Vara j., Lewandowska-Skarbek M., Wang Y.-G. Cloning of genes governing the
deoxysugar portion of the erythromycin biosynthesis pathway in
Saccharopolyspora erythraea (Streptomyces erythreus) // J. Bacteriology.- 1989.-
vol. 171, №3.-P.5872-5881.
7. Okanishi M., Suzuki K., Umezava H. Formation and reversion of Streptomyces
protoplasts: condition and morphological study // J. General Microbiol. –1989.-vol.80,
№1.-P.389-400.
8. Kieser T. Factors affecting the isolation of CCC DNA from Streptomyces lividans and
Escherichia coli // Plasmid.-1984.-vol.12, №1.- P.19-36.
9. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбук Дж. Молекулярное клонирование. Методы
генетической инженерии – Москва: Мир.- 1984.-450 с.
10. Cortes J., Velasko J., Foster G., Blackaby A.P., Rudd B.A.M., Wilkinson B.
Identification and cloning of a type III polyketide synthase required for diffusible
pigment biosynthesis in Saccharopolyspora erythrea // Mol. Microbiol. - 2002. – vol.
44, №5. - P. 1213-1224.
11. Funa N., Ohhnishi Y., Ebizuka Y., Horinouchi S. Alteration of reaction and substrate
specificity of a bacterial type III polyketide synthase by site-directed mutagenesis //
Biochem. J. - 2002. – vol, 367, №3. - P. 781-789.0
Резюме
За допомогою ПЛР ампліфіковано фрагмент хромосоми Streptomyces coelicolor
A3(2), що містить ген синтезу PKS III. Проведено клонування ампліфікованої ДНК в
човниковому векторі pWHM4 по сайтам HindIII та EcoRI. Базуючись на даних
рестрикційного аналізу плазмідних ДНК трансформантів встановлено, що
молекулярний розмір проклонованого фрагмента ДНК становить 1129 пн.
С помощью ПЦР амплифицировано фрагмент хромосоми хромосоми
Streptomyces coelicolor A3(2), который содержал ген синтеза PKS III. Проведено
клонирование амплифицированной ДНК в челночном векторе pWHM4 в сайтах HindIII
та EcoRI. Основываясь на данных рестриционного анализа плазмидных ДНК
трансформантов, установлено, что молекулярный размер клонированного фрагмента
составляет 1129 пн.
Copies of chromosome Streptomyces coelicolor A3(2) fragment (gene of PKSIII
synthase) were obtained to use PLR. Amplificated DNA was cloned in shuttle vector pWHM4
on sites for HindIII and EcoRI. Restriction analysis of plasmid DNAs of transformantes
demonstrated that molecular sizes of cloning DNA insertions were 1129 b.
МИТРОФАНОВА О.В.1, ЛЕСНИКОВА-СЕДОШЕНКО Н.П.1, ЧИРКОВ С.Н.2,
СМЫКОВ А.В.1
1Никитский ботанический сад – Национальный научный центр УААН,
Украина, 98648, АР Крым, г. Ялта, e-mail: in_vitro@ukr.net
339
2Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, Россия, 119991,
г. Москва, Ленинские горы, МГУ, д. 1, стр. 12, е-mail: s-chirkov@yandex.ru
БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ ОЗДОРОВЛЕНИЯ КОСТОЧКОВЫХ
ПЛОДОВЫХ КУЛЬТУР И ПОЛУЧЕНИЯ БЕЗВИРУСНОГО ПОСАДОЧНОГО
МАТЕРИАЛА
В современном плодоводстве все большее значение приобретают создание и
внедрение в производство сортов косточковых плодовых культур, сочетающих
комплекс хозяйственно ценных признаков с устойчивостью к наиболее
распространенным и вредоносным болезням. Проблемы безвирусного садоводства,
пути их решения находятся в центре внимания практически всех промышленно
развитых стран. В последние годы резко возросли требования к качеству посадочного
материала, и сегодня обмен и реализация на международном рынке осуществляется
только безвирусным растительным материалом. Сравнительное изучение
вредоносности и особенностей распространения вирусных болезней в различных
регионах показывает широкие ареалы поражения косточковых плодовых культур
вирусными болезнями и их приуроченность к экологическим районам [3, 5, 7-9, 11].
Так, в южных регионах Украины, особенно в Крыму, многие возбудители вирусных
инфекций занимают ареалы, совпадающие с ареалами выращивания поражаемых ими
культур и дикорастущих видов растений, а также благоприятными условиями для
массового размножения переносчиков. В настоящее время основной тенденцией
развития плодоводства в Украине является создание безвирусных питомников и
закладка интенсивных садов здоровым посадочным материалом высокоурожайных
сортов. В связи с этим для ускорения селекционного процесса, оздоровления растений
и быстрого размножения ценных безвирусных генотипов косточковых плодовых
культур необходимым является разработка биотехнологических систем.
Материалы и методы
Исследования проводились с 1999 по 2007 гг. в отделе биотехнологии и биохимии
растений Никитского ботанического сада – Национального научного центра. В качестве
объектов использовали сорта и гибридные формы персика (Prunus persica (L.) Batch),
абрикоса (Prunus armeniaca L.), сливы (Prunus domestica L.), алычи (Prunus cerasifera
Ehrh.) и черешни (Prunus avium L.). В работе применяли как общепринятые, так и
разработанные нами методы [1, 2, 4, 6, 12]. Тестирование на вирусы исходного и
ретестирование оздоровленного посадочного материала выполняли с использованием
растений-индикаторов, серологическими методами: двойной диффузии в агар-геле,
иммуноферментного анализа (DAS ELISA-test). Для идентификации вируса шарки
применяли систему «Пиротест» [10]. При выявлении вирусов в сортообразцах
пораженных деревьев исследуемых культур использовали травянистые: Chenopodium
quinoa Willd., Ch. foetidum Schrad., Cucumis sativus L. ‘Delikatess’, Gomphrena globosa L.,
Nicotiana clevelandii Gray, N. glutinosa L. и древесные растения-индикаторы Prunus
serrulata Lindl. ‘Shirofugen’. Материалом для инокулюма служили лепестки цветков,
вегетативные почки и листья. Для повышения эффективности механической передачи
вирусной инфекции инокулюм готовили в 0,1 М фосфатном буфере Серенсена рН 7,0; в
0,01 М буфере Трис-HCl рН 8,5 и в 0,1 М боратном буфере рН 8,0. При тестировании на
древесных индикаторах (Prunus serrulata ‘Schirofugen’ и др.) применяли
массированную инокуляцию (почками с испытуемого образца). Оздоровление
растительного материала от вирусной инфекции проводилось с использованием
культуры органов и тканей в сочетании с термотерапией или хемотерапией in vitro. При
изучении особенностей морфогенеза органов и тканей исследуемых культур и
получении безвирусных регенерантов в качестве первичных эксплантов были
вегетативные почки, меристематические ткани, верхушки активно растущих побегов,
340
которые культивировали на модифицированных питательных средах МС [14], B5 [13],
QL [15]. Стерилизацию эксплантов проводили по разработанной нами методике [6].
Результаты и обсуждение
Разработка биотехнологических систем оздоровления растений и получения
безвирусного посадочного материала косточковых плодовых культур обусловлена,
прежде всего, массовым распространением вирусных инфекций. Обследовано более
1500 сортов и селекционных форм персика, абрикоса, черешни, сливы, алычи в
промышленных, коллекционных и селекционных насаждениях на поражаемость
вирусными болезнями. Сравнительный анализ внешних признаков проявления
вирусных инфекций позволил на разных культурах выявить сходные симптомы. Такие
признаки, как бороздчатость древесины, задержка в развитии генеративных органов и
вегетативных почек, мелкоплодность и розеточность листьев, усыхание скелетных
ветвей отмечено на деревьях сортов персика Ветеран, Сочный, Янги, Пушистый
Ранний, Турист, Redgold; черешни – Рубиновая Ранняя, Дилемма, Приусадебная. На
плодах отдельных деревьях персика, абрикоса, сливы, алычи и черешни были отмечены
ярко-малиновые, красные и оранжево-желтые пятна и кольца, на листьях –
хлоротические пятна, кольца и дуги. У сорта абрикоса Маркулешти и сорта персика
Золотая Москва симптомы проявлялись на косточках в виде колец и язв. Достоверность
выявленного состава вирусов на исследуемых культурах подтверждена тестированием
на растениях-индикаторах и серологическими методами. Наиболее надежным методом
тестирования образцов на вирус шарки сливы оказалась система «Пиротест». В
результате проведенных исследований определено 16 возбудителей вирусных
болезней: ACLSV (абрикос, черешня), ArMV (персик, абрикос, черешня), ASPV, CLRV,
RpRSV, TNV (персик, черешня), CMV (черешня, слива), CRLV, SLRSV, TBRV
(черешня), PBV, TBSV, PRMV (персик), PDV, PNRSV, PPV (персик, абрикос, черешня,
слива, алыча). Среди обнаруженных вирусов наиболее вредоносными являются
PNRSV, PDV и PPV, у которых передача инфекции возможна пыльцой, семенами,
насекомыми-переносчиками, окулировкой и прививкой.
В процессе разработки систем оздоровления растений использовали различные
биотехнологические приемы: культуру органов и тканей, термо- и хемотерапию in vitro,
микроразмножение in vitro с последующим ретестированием на вирусы полученных
регенерантов. В опытах участвовали сорта: персика – Ветеран, Золотая Москва,
Молодежный, Санхейвен, Эрли Ред; абрикоса – Детский, Дионис, Крымский Амур,
Маркулешти, Салют; сливы – Ренклод Альтана, Стенлей, Verity, алычи – Вилора,
Оленька, Сестричка, Субхи Ранняя, черешни – Бигарро Бурлат, Валерий Чкалов,
Крупноплодная, Мелитопольская Черная. Определены оптимальные сроки отбора и
введения в культуру in vitro первичных эксплантов с учетом особенностей развития
генотипа. Лучшим сроком отбора вегетативных почек и меристематических тканей был
февраль-март, активно растущих верхушек побегов – май-июнь. В опытах по
освобождению растений от вирусов применяли хемотерапию. Первичные экспланты
косточковых плодовых культур вводили на питательные среды, содержащие различные
концентрации ингибиторов вирусов: 85-150 мг/л HEO-DHT и 1, 5, 10, 20 мг/л виразола
(рибавирина). Повышение концентрации вироцидов вызывало фитотоксическое
действие, проявляющееся в угнетении роста и развития микропобегов, а также в
отмирании апикальной части микропобегов.
На этапе индукции развития безвирусных микропобегов были определены
оптимальные питательные среды и концентрации регуляторов роста для каждого
исследуемого генотипа. Установлено, что активное развитие микропобегов изучаемых
сортов персика Золотая Москва, Бархатистый, сливы сортов Стенлей, Verity и алычи
сорта Оленька происходило на модифицированной питательной среде В5, дополненной
БАП в концентрации 2,22-4,40 мкМ, ИМК – 0,49-2,46 мкМ, ГК3– 0,29-2,89 мкМ; сортов
абрикоса Детский, Маркулешти – на модифицированной среде QL, дополненной 2,22-
341
6,60 мкМ БАП, 0,54-2,69 мкМ НУК, 0,29 мкМ ГК3. Первичные экспланты сортов
черешни, участвующие в эксперименте, на этапе введения в условия in vitro проявляли
низкие способности к морфогенезу. Поэтому нами испытано более 10 составов
питательных сред и их модификаций. Лучшей питательной средой оказалась среда МС,
содержащая 4,40 мкМ БАП, 0,49-1,23 мкМ ИМК, 1,44 мкМ ГК3, 0,5-1,5 мкМ тиамина.
При изучении морфогенетических потенций органов и тканей сортов персика,
абрикоса, сливы, алычи и черешни на этапе собственно микроразмножения количество
образовавшихся адвентивных почек и микропобегов увеличивалось после 5-6 пассажа.
Коэффициент размножения микропобегов в среднем составил у сортов сливы 1:17,
персика и черешни – 1:5, абрикоса – 1:8, алычи – 1:20. Микропобеги персика, абрикоса,
сливы и алычи, достигшие длины 2-3 см, успешно укоренялись на питательной среде
МС, содержащей ½ макро- и микросолей по прописи МС и ИМК в концентрации 0,98-
9,80 мкМ. Как показали опыты, индуцировать ризогенез микропобегов черешни
значительно сложнее, чем у других косточковых плодовых культур. Корнеобразование
микропобегов черешни происходило на среде МС с 2,46-14,7 мкМ ИМК.
Продолжительность этапа ризогенеза длилась от 20 до 50 сут и зависела от генотипа. В
процессе исследований установлено, что для оздоровления от вирусных инфекций
сортов персика, абрикоса, сливы, алычи и черешни целесообразно использовать
регенеранты, так как микропобеги не выдерживают необходимого режима
термотерапии (37±1º С) и могут погибнуть. В результате проведенной терапии in vitro
(хемо- и термотерапия) были получены безвирусные растения 20 сортов косточковых
плодовых культур. Терапия в условиях in vitro по сравнению с традиционной терапией
более надежна и эффективна и позволяет в 5-6 раз сократить сроки получения
безвирусных растений. Полученные регенеранты адаптировали к условиям in vivo и
спустя 2-3 месяца ретестировали на вирусы с последующей сертификацией.
Таким образом, проведенные исследования показали необходимость в
комплексном подходе при разработке биотехнологических систем оздоровления
косточковых плодовых культур. Предлагаемые нами биотехнологические системы
освобождают растения от вирусов и позволяют массово размножить безвирусный
посадочный материал персика, абрикоса, сливы, алычи и черешни. Системы включают
в себя 6 блоков-методов: тестирование исходных растений на вирусы (определение
состава вирусов и их локализации); термо- или хемотерапию в условиях in vitro;
культивирование органов и тканей и получение регенерантов; адаптацию пробирочных
растений in vivo; ретестирование; сертификацию посадочного материала.
Литература
1. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. –
М.: Наука, 1964. – 272 с.
2. Гнутова Р.В. Иммунологические исследования в фитовирусологии. – М.: Наука,
1985. – 184 с.
3. Вердеревская Т.Д., Маринеску В.Г. Вирусные и микоплазменные заболевания
плодовых культур и винограда. – Кишинев: Штиинца, 1985. – 311 с.
4. Калинин Ф.Л., Кушнир Г.П., Сарнацкая В.В. Технология микроклонального
размножения растений. – Киев: Наукова думка, 1992. – 232 с.
5. Лукичева Л.А., Митрофанова О.В., Лесникова-Седошенко Н.П. Оздоровление вишни
(Prunus cerasus L.) и сливы (Prunus domestica L.) от вирусов с использованием
биотехнологических приемов // Биохимические и биотехнологические исследования
многолетних декоративных, косточковых плодовых и эфиромасличных культур. Сб.
науч. трудов / Никит. ботан. сад. – 2007. – Т. 127. – С. 27-34.
6. Митрофанова О.В., Митрофанова И.В., Смыков А.В., Лесникова Н.П. Методы
биотехнологии в селекции и размножении субтропических и косточковых плодовых
культур // Интенсификация селекции плодовых культур. Сб. науч. трудов / Никит.
ботан. сад. – 1999. – Т. 118. – С. 189-199.
342
7. Митрофанова О.В., Митрофанова И.В., Ежов В.Н., Лесникова-Седошенко Н.П.,
Лукичева Л.А., Смыков А.В., Сенин В.В., Литвинова Т.В. Изучение вирусов и вирусных
болезней косточковых плодовых культур на юге Украины и особенности оздоровления
растений in vitro // Бюл. Никит. ботан. сада. – 2005. – Вып. 91. – С. 111-120.
8. Митрофанова О.В., Михайлов А.П., Чехов А.В. Биотехнологические аспекты
освобождения от вирусов и клонального микроразмножения некоторых экономически
важных многолетних культур // Биотехнологические исследования садовых и других
ценных многолетних культур. Сб. науч. трудов / Никит. ботан. сад. – 1997. – Т. 119. – С.
7-34.
9. Митрофанова О.В., Славгородская-Курпиева Л.Е., Митрофанова И.В., Лукичева Л.А.
Диагностика вирусных болезней и биотехнологические приемы получения
безвирусного посадочного материала косточковых плодовых культур. – Ялта:
Крымпресс, 2000. – 46 с.
10. Чирков С.Н., Приходько Ю.Н. Пиротест – новый метод диагностики вируса шарки
сливы // Промышленное производство оздоровленного посадочного материала
плодовых, ягодных и цветочно-декоративных культур: Материалы междунар. научно-
практической конф. – Москва, 2001. – С. 71-72.
11. Шевченко Т.П., Поліщук В.П., Бойко А.Л. Віруси рослин: штамове різноманіття. –
Київ: Фітосоціоцентр, 2002. – 78 с.
12. Clark M.F., Adams A.N. Characteristics of the microplate method of enzyme-linked
immunosorbent assay (ELISA) for the detection of plant viruses // J. Gen. Virol. – 1977. –
V. 34, N 3. – P. 475-483.
13. Gamborg O.L., Eveleigh D.E. Culture methods and deletion of glucanases in cultures of
wheat and barley // Can. J. Biochem. – 1968. – Vol. 46, N 5. – P. 417-421.
14. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco
tissue cultures // Physiol. Plant. – 1962. – Vol. 15, N 3. – P. 473-497.
15. Quoirin M., Lepoivre P. Etude de milieux adaptes aux cultures in vitro de Prunus // Acta
Hort. – 1977. – Vol. 78. – P. 437-442.
Резюме
Представлены биотехнологические системы оздоровления косточковых
плодовых культур и получения безвирусных растений персика, абрикоса, сливы, алычи
и черешни как комплексный подход, состоящий из 6 блоков-методов.
Подано біотехнологічні системи оздоровлення кісточкових плодових культур і
одержання безвірусних рослин персика, абрикоса, сливи, аличі та черешні як
комплексний підхід, що складається з 6 блоків-методів.
Biotechnological systems of stone fruits cleaning up and virus free peach, apricot,
plum, cherry plum and sweet cherry obtaining as a complex approach completed on 6 blocks-
methods have been presented.
НАМ И.Я., ЗАЯКИН В.В.
Брянский государственный университет им. акад. И.Г. Петровского,
Россия, 241036, Брянск, ул. Бежицкая, 14
e-mail: iya_nam@online.debryansk.ru
СОЗДАНИЕ НОВЫХ ФОРМ РЕМОНТАНТНОЙ МАЛИНЫ МЕТОДАМИ
БИОТЕХНОЛОГИИ
Создание и оценка новых сортов культурных растений, характеризующихся
высокой продуктивностью и устойчивостью к болезням, вредителям и стрессорным
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-178304 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 2219-3782 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T15:50:03Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Митрофанова, О.В. Лесникова-Седошенко, Н.П. Чирков, С.Н. Смыков, А.В. 2021-02-18T14:17:00Z 2021-02-18T14:17:00Z 2008 Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала / О.В. Митрофанова, Н.П. Лесникова-Седошенко, С.Н. Чирков, А.В. Смыков // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2008. — Т. 5. — С. 338-342. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. 2219-3782 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/178304 Представлены биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусных растений персика, абрикоса, сливы, алычи и черешни как комплексный подход, состоящий из 6 блоков-методов. Подано біотехнологічні системи оздоровлення кісточкових плодових культур і одержання безвірусних рослин персика, абрикоса, сливи, аличі та черешні як комплексний підхід, що складається з 6 блоків-методів. Biotechnological systems of stone fruits cleaning up and virus free peach, apricot, plum, cherry plum and sweet cherry obtaining as a complex approach completed on 6 blocksmethods have been presented. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Фактори експериментальної еволюції організмів Біотехнології в медицині і сільському господарстві Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала Article published earlier |
| spellingShingle | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала Митрофанова, О.В. Лесникова-Седошенко, Н.П. Чирков, С.Н. Смыков, А.В. Біотехнології в медицині і сільському господарстві |
| title | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала |
| title_full | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала |
| title_fullStr | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала |
| title_full_unstemmed | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала |
| title_short | Биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала |
| title_sort | биотехнологические системы оздоровления косточковых плодовых культур и получения безвирусного посадочного материала |
| topic | Біотехнології в медицині і сільському господарстві |
| topic_facet | Біотехнології в медицині і сільському господарстві |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/178304 |
| work_keys_str_mv | AT mitrofanovaov biotehnologičeskiesistemyozdorovleniâkostočkovyhplodovyhkulʹturipolučeniâbezvirusnogoposadočnogomateriala AT lesnikovasedošenkonp biotehnologičeskiesistemyozdorovleniâkostočkovyhplodovyhkulʹturipolučeniâbezvirusnogoposadočnogomateriala AT čirkovsn biotehnologičeskiesistemyozdorovleniâkostočkovyhplodovyhkulʹturipolučeniâbezvirusnogoposadočnogomateriala AT smykovav biotehnologičeskiesistemyozdorovleniâkostočkovyhplodovyhkulʹturipolučeniâbezvirusnogoposadočnogomateriala |