Comparison of different systems for purification of recombinant proteins produced by transient expression in plants

• Published in: Фактори експериментальної еволюції організмів
• Date: 2008
• Main Authors: Lypova, N.M., Sindarovska, Y.R., Gerasymenko, I.M., Sheludko, Y.V., Bannikova, M.A., Kuchuk, N.V.
• Format: Article
• Language: English
• Published: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2008
• Subjects: Біотехнології в медицині і сільському господарстві
• Online Access: https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/178358
• Journal Title: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Cite this: Comparison of different systems for purification of recombinant proteins produced by transient expression in plants / N.M. Lypova, Y.R. Sindarovska, I.M. Gerasymenko, Y.V. Sheludko, M.A. Bannikova, N.V. Kuchuk // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2008. — Т. 5. — С. 397-400. — Бібліогр.: 10 назв. — англ.

Three different approaches for purification of transiently expressed recombinant proteins from plants using GFP as a reporter have been successfully applied. The purification scheme including ammonium sulfate precipitation and anion-exchange chromatography was compared with two tag-based protocols applying metal affinity chromatography with a 6xHis tag and intein mediated purification with a chitin-binding affinity tag. Три різних підходи для очищення рекомбінантних білків, отриманих методом транзієнтної експресії в рослинах, було успішно застосовано з використанням GFP як репортера. Схему очищення, яка включала преципітацію сульфатом амонію і аніонообмінну хроматографію, порівнювали з протоколами тегового очищення з використанням 6xHis-тега та хітин-інтеін-опосередкованого очищення. Три различных подхода для очистки рекомбинантных белков, полученных методом транзиентной экспрессии в растениях, были успешно применены с использованием GFP как репортера. Схему очистки, включающую преципитацию сульфатом аммония и анионообменную хроматографию, сравнивали с протоколами теговой очистки с использованием 6xHis-тега и хитин-интеин-опосредованной очистки.