Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена
The influence of low-dose irradiation and transplanted Guerin's carcinoma on a level of oxidizing modification of chromatin and postnuclear fraction proteins of spleen lymphocytes is studied in rats in the process of oncogenesis. It is established that the processes of oxidation of the proteins...
Saved in:
| Date: | 2007 |
|---|---|
| Main Authors: | , , |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2007
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1802 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена / Г.П. Копильчук, М.М. Марченко, Г.В. Яковишин // Доп. НАН України. — 2007. — N 4. — С. 173-176. — Бібліогр.: 14 назв. — укp. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859632465291771904 |
|---|---|
| author | Копильчук, Г.П. Марченко, М.М. Яковишин, Г.В. |
| author_facet | Копильчук, Г.П. Марченко, М.М. Яковишин, Г.В. |
| citation_txt | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена / Г.П. Копильчук, М.М. Марченко, Г.В. Яковишин // Доп. НАН України. — 2007. — N 4. — С. 173-176. — Бібліогр.: 14 назв. — укp. |
| collection | DSpace DC |
| description | The influence of low-dose irradiation and transplanted Guerin's carcinoma on a level of oxidizing modification of chromatin and postnuclear fraction proteins of spleen lymphocytes is studied in rats in the process of oncogenesis. It is established that the processes of oxidation of the proteins of nuclei and the postnuclear fraction of spleen lymphocytes in rats have different dependences on the influence of the low-dose x-ray irradiation preliminary to the Guerin's carcinoma transplantation: nuclear proteins are exposed to the strengthened modifying influence.
|
| first_indexed | 2025-12-07T13:12:11Z |
| format | Article |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
4 • 2007
БIОХIМIЯ
УДК 577.112.4+577.346+616-006.6
© 2007
Г.П. Копильчук, М. М. Марченко, Г. В. Яковишин
Окиснювальна модифiкацiя бiлкiв ядра
та постнуклеарної фракцiї лiмфоцитiв селезiнки
попередньо опромiнених щурiв з трансплантованою
карциномою Герена
(Представлено академiком НАН України Д.О. Мельничуком)
The influence of low-dose irradiation and transplanted Guerin’s carcinoma on a level of oxi-
dizing modification of chromatin and postnuclear fraction proteins of spleen lymphocytes is
studied in rats in the process of oncogenesis. It is established that the processes of oxidation of
the proteins of nuclei and the postnuclear fraction of spleen lymphocytes in rats have different
dependences on the influence of the low-dose x-ray irradiation preliminary to the Guerin’s carci-
noma transplantation: nuclear proteins are exposed to the strengthened modifying influence.
Не викликає сумнiвiв, що iонiзуюча радiацiя може стати причиною канцерогенезу [1, 2].
На сучасному етапi все бiльше науковцiв схиляються до думки про те, що немає безпечних
доз радiацiї, i виступають на пiдтримку безпорогової теорiї, згiдно з якою навiть фоно-
вi дози можуть стати причиною деяких форм раку. Виникнення пухлин при тотальному
опромiненнi малими дозами пов’язують з посиленим утворенням життєздатних малiгнiзо-
ваних клiтин внаслiдок збiльшення об’єму опромiнених тканин [3]. У цьому випадку на
особливу увагу заслуговують дослiдження вiддалених променевих ефектiв, у формуван-
нi яких не остання роль належить механiзму окиснювальної модифiкацiї бiлкiв (ОМБ) як
одному з проявiв вiльнорадикальних процесiв, що iнiцiюються iонiзуючою радiацiєю [4, 5].
Прямою мiшенню променевого ураження є селезiнка — вторинний орган iмунної системи,
з яким в основному пов’язане формування гуморальної iмунної вiдповiдi у виглядi продук-
цiї специфiчних iмуноглобулiнiв [6]. Саме порушення в селезiнцi призводять до наслiдкiв,
якi розвиваються як пiзнi прояви радiацiйних ефектiв, серед яких особливе мiсце посiдає
неопластична трансформацiя клiтин [7].
Метою проведеного дослiдження було вивчити вплив малих доз радiацiї та трансплан-
тованої карциноми Герена на рiвень окиснювальної модифiкацiї бiлкiв хроматину i пост-
нуклеарної фракцiї лiмфоцитiв селезiнки щурiв у процесi онкогенезу, що розвивається на
фонi попереднього фракцiонованого рентгенiвського опромiнення.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №4 173
Дослiдження проводили на самках бiлих безпородних щурiв масою 110–130 г. Пiддослiд-
нi тварини були подiленi на групи: I — опромiненi тварини (Р); II — тварини з транспланто-
ваною карциномою Герена (Пх); III — тварини, яким по закiнченнi 7-добового опромiнення
трансплантували карциному Герена шляхом пiдшкiрного введення в область стегна 30%
суспензiї пухлинних клiтин у фiзiологiчному розчинi (Р + Пх); контрольну групу склада-
ли iнтактнi щури. Опромiнення проводили протягом 7 дiб у денний час щодобово в до-
зi 36,12 · 10
−4 Кл/кг (13 сГр) на рентгенiвськiй дiагностичнiй установцi 12П6 (“Lachema”,
Чехiя) при потужностi дози 2,58·10−4 Кл/кг (0,93 сГр/с), напрузi 80 кВ, силi струму 40 мА,
фiльтри 0,5 мм Cu, фокусна вiдстань 40 см. Тварин опромiнювали групами при вiльному
утриманнi в клiтцi. Щури знаходились на стандартному рацiонi вiварiю та мали вiльний
доступ до води.
Евтаназiю тварин проводили пiд легким ефiрним наркозом на 1-шу, 7-му, 14-ту та 21-шу
доби пiсля припинення опромiнення, що для пухлиноносiїв вiдповiдають латентнiй (7-ма
доба), логарифмiчнiй (14-та доба) та стацiонарнiй (21-ша доба) стадiї онкогенезу.
Лiмфоцити селезiнки одержували центрифугуванням клiтинної суспензiї на градiєнтi
Ficcol-Pague (густина 1,077) за методом [8].
Хроматин видiляли за методом [9]. Гiстони екстрагували 0,25 н. Н2SO4, фракцiю ла-
бiльнозв’язаних iз хроматином негiстонових бiлкiв — 0,35 М NaCl [10].
Рiвень карбонiлювання бiлкiв оцiнювали за кiлькiстю похiдних 2,4-динiтрофенiлгiдра-
зону, якi утворюються при взаємодiї окиснених амiнокислотних залишкiв бiлкiв з 2,4-динi-
трофенiлгiдразином i виражали в нмоль карбонiльних бiлкових похiдних на мг загального
бiлка [11]. Вмiст бiлка визначали за методом [12]. Статистичну обробку результатiв прово-
дили з використанням t-критерiю Стьюдента.
За даними вивчення окиснення протеїнiв у ядрi та постнуклеарнiй фракцiї лiмфоцитiв
селезiнки, в групi iнтактних тварин рiвень цього процесу найвищий у гiстонах, де дослiд-
жуваний показник бiльший, нiж у постнуклеарних та негiстонових бiлках у 3,5 та 4,4 раза
вiдповiдно (рис. 1). Встановлений факт, очевидно, пов’язаний з тим, що окисненню шля-
хом утворення карбонiльних похiдних пiдлягають в першу чергу лiзиновi та аргiнiновi за-
лишки [7, 13, 14].
Вплив радiацiї на процеси ОМБ найбiльш виражений у пост’ядернiй фракцiї, де рiвень
модифiкованих продуктiв вже на 1-шу добу пiсля опромiнення зростає у 5,7 раза порiв-
няно з контролем (див. рис. 1, а), у той час як у негiстонових бiлках та гiстонах вмiст
карбонiльних похiдних переважає контрольнi значення лише в 2,7 та 3,6 раза вiдповiдно
(див. рис. 1, б, в).
У мiру вiддалення вiд термiну опромiнення вiдбувається зниження рiвня окиснюваль-
ної модифiкацiї усiх дослiджуваних протеїнiв. В ядерних бiлках кожнi 7 експериментальних
дiб дослiджуваний показник плавно знижується приблизно у 1,2–1,5 раза (див. рис. 1, б, в).
У постнуклеарнiй фракцiї на кiнцевих етапах експерименту (21-ша доба) зниження пока-
зника вiдбувається iнтенсивнiше i досягає 2,5 раза (див. рис. 1, а).
Отже, на фонi загального посилення вiльнорадикального пошкодження всiх дослiджу-
ваних бiлкiв при опромiненнi найчутливiшими до впливу радiацiї виявились протеїни пост-
нуклеарної фракцiї. У мiру вiддалення вiд термiну опромiнення спостерiгається згасання
ефекту i рiвень ОМБ знижується, повертаючись до контрольних значень, лише в гiстонах
залишається пiдвищеним в 1,7 раза порiвняно з контролем.
Вплив пухлини на ОМБ у лiмфоцитах селезiнки не є таким односпрямованим, як вплив
радiацiї. Якщо латентна фаза росту пухлини характеризується посиленням процесiв утво-
174 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2007, №4
Рис. 1. Вмiст карбонiльних похiдних у фракцiї пост’ядерних (а), гiстонових (б ) та негiстонових (в) бiлкiв
лiмфоцитiв селезiнки щурiв з трансплантованою карциномою Герена
рення карбонiльних похiдних у всiх дослiджуваних групах бiлкiв (особливо в гiстонах, де
даний показник перевищує контрольнi значення в 4,1 раза), то про наступнi етапи онко-
генезу цього сказати не можна. Так, у логарифмiчну фазу росту пухлини тенденцiя до
посилення дослiджуваних процесiв продовжується у фракцiї пост’ядерних та негiстонових
бiлкiв, а рiвень модифiкацiї гiстонiв у цей перiод знижується в 1,4 раза. На термiнальному
етапi розвитку злоякiсного новоутворення (21-ша доба) рiвень вiльнорадикального пошкод-
ження ядерних бiлкiв знижується в середньому в 1,3 раза, у той час як у постнуклеарнiй
фракцiї дослiджуваний показник у стiльки ж разiв зростає.
Отже, за окремої дiї пошкоджуючих чинникiв вiдбувається посилення окиснювальної
модифiкацiї усiх бiлкiв лiмфоцитiв селезiнки в перiод з 1-ї до 14-ї доби порiвняно з групою
iнтактних тварин. На термiнальних етапах експерименту рентгенiвське опромiнення i кар-
цинома Герена виявляють рiзноспрямований характер дiї. Вiдбувається згасання ефекту
радiацiйного впливу у фракцiї пост’ядерних та негiстонових бiлкiв, i лише рiвень модифi-
кацiї гiстонiв залишається пiдвищеним порiвняно з контролем. Дiя карциноми Герена в цей
перiод є жорсткiшою, що виявляється в посиленому накопиченнi карбонiльних похiдних
усiх дослiджуваних бiлкiв лiмфоцитiв у групi пухлиноносiїв (див. рис. 1).
Фракцiоноване рентгенiвське опромiнення, що передує трансплантацiї карциноми Гере-
на, посилює процеси ОМБ на рiзних етапах онкогенезу. Пiдвищення в 1,3–1,6 раза вмiс-
ту модифiкованих продуктiв негiстонових бiлкiв за даних умов спостерiгається впродовж
усього експериментального перiоду (див. рис. 1, в). Гiстоновi бiлки посилено модифiкують-
ся, починаючи з логарифмiчної фази росту пухлини (див. рис. 1, б ). Щодо пост’ядерної
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2007, №4 175
фракцiї, то вплив попереднього опромiнення на процес онкогенезу виражається лише на
термiнальних етапах i виявляється в пiдвищеннi ОМБ в 1,3 раза (див. рис. 1, а).
Отже, ядернi бiлки лiмфоцитiв селезiнки попередньо опромiнених пухлиноносiїв актив-
нiше реагують на дiю iонiзуючої радiацiї шляхом посилення окиснювальної модифiкацiї,
починаючи з раннiх етапiв онкогенезу.
1. Готлиб В.Я., Пелевина И.И., Конопля Е.Ф. и др. Некоторые аспекты биологического действия
малых доз ионизирующей радиации // Радиобиология. – 1991. – 31, вып. 3. – С. 318–325.
2. Zhao Y.L., Piao C.Q., Hall E. J. et al. Mechanisms of Radiation-Induced Neoplastic Transformation of
Human Bronchial Epithelial Cells // Radiat. Res. – 2001. – 155. – P. 230–234.
3. Вайнберг М.Ш. Радиация и опухоль. – Москва: Знание, 1985. – 64 с.
4. Дубинина Е. Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей
при состояниях окислительного стресса // Вопр. мед. химии. – 2001. – 47, № 6. – С. 561–581.
5. Дубинина Е. Е., Шугалей И.В. Окислительная модификация белков // Успехи соврем. биологии. –
1993. – 113, вып. 1. – С. 71–79.
6. Лупырь В.М., Торяник И.И. Клеточная популяция селезенки (рентгеновское и постлучевое лазерное
облучение) // Укр. мед. альманах. – 1998. – № 2. – С. 141–142.
7. Кiрпенко Т.О., Кондрiчин I.М., Остапченко Л. I., Кучеренко М.Е. Вплив iонiзувальної радiацiї
на регуляцiю рецепторних тирозинових протеїнкiназ iз лiмфоцитiв селезiнки щура // Укр. радiол.
журн. – 2001. – № 9. – С. 303–305.
8. Boyum A. Separation of leucocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. – 1968. –
21, Suppl. 97. – P. 28–30.
9. Уманский С.Р., Ковалев Ю.К., Пипер Е. Г. Взаимодействие негистоновых белков хроматина с гомо-
логичной и гетерологичной ДНК // Молекуляр. биология. – 1975. – 9, № 5. – С. 683–690.
10. Техника биохимического исследования субклеточных структур и биополимеров растительной клет-
ки / Под. ред. А.С. Вечера. – Минск: Наука и техника, 1986. – 197 с.
11. Дубинина Е.Е., Бурмистров С.О., Ходов Д.А., Поротов И. Г. Окислительная модификация белков
сыворотки крови человека, метод ее определения // Вопр. мед. химии. – 1995. – 41, № 1. – С. 24–26.
12. Lowry O.H., Rosebrough N. J., Farr A. L., Randall R. J. Protein measurement with the Folin phenol
reagent // J. Biol. Сhem. – 1951. – 193. – P. 265–275.
13. Дубiнiна О.Ю. Окиснювальний стрес i окиснювальна модифiкацiя бiлкiв // Мед. хiмiя. – 2001. – 3,
№ 2. – С. 5–11.
14. Stadtman E.R., Oliver C.N. Metal-catalyzed oxidation of proteins. Physiological consequences // J. Biol.
Сhem. – 1995. – 266, No 4. – P. 2005–2008.
Надiйшло до редакцiї 27.10.2006Чернiвецький нацiональний унiверситет
iм. Юрiя Федьковича
176 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2007, №4
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1802 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 1025-6415 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-07T13:12:11Z |
| publishDate | 2007 |
| publisher | Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Копильчук, Г.П. Марченко, М.М. Яковишин, Г.В. 2008-09-02T17:36:24Z 2008-09-02T17:36:24Z 2007 Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена / Г.П. Копильчук, М.М. Марченко, Г.В. Яковишин // Доп. НАН України. — 2007. — N 4. — С. 173-176. — Бібліогр.: 14 назв. — укp. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1802 577.112.4+577.346+616-006.6 The influence of low-dose irradiation and transplanted Guerin's carcinoma on a level of oxidizing modification of chromatin and postnuclear fraction proteins of spleen lymphocytes is studied in rats in the process of oncogenesis. It is established that the processes of oxidation of the proteins of nuclei and the postnuclear fraction of spleen lymphocytes in rats have different dependences on the influence of the low-dose x-ray irradiation preliminary to the Guerin's carcinoma transplantation: nuclear proteins are exposed to the strengthened modifying influence. uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Біохімія Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена Article published earlier |
| spellingShingle | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена Копильчук, Г.П. Марченко, М.М. Яковишин, Г.В. Біохімія |
| title | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена |
| title_full | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена |
| title_fullStr | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена |
| title_full_unstemmed | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена |
| title_short | Окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою Герена |
| title_sort | окиснювальна модифікація білків ядра та постнуклеарної фракції лімфоцитів селезінки попередньо опромінених щурів з трансплантованою карциномою герена |
| topic | Біохімія |
| topic_facet | Біохімія |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/1802 |
| work_keys_str_mv | AT kopilʹčukgp okisnûvalʹnamodifíkacíâbílkívâdratapostnuklearnoífrakcíílímfocitívselezínkipoperednʹoopromínenihŝurívztransplantovanoûkarcinomoûgerena AT marčenkomm okisnûvalʹnamodifíkacíâbílkívâdratapostnuklearnoífrakcíílímfocitívselezínkipoperednʹoopromínenihŝurívztransplantovanoûkarcinomoûgerena AT âkovišingv okisnûvalʹnamodifíkacíâbílkívâdratapostnuklearnoífrakcíílímfocitívselezínkipoperednʹoopromínenihŝurívztransplantovanoûkarcinomoûgerena |