Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки
Пропонується метод отримання препаратів М-вірусу картоплі, який передбачає поєднання освiтлення рослинних екстрактiв тритоном Х-100 з наступним осадженням вiрусу полiетиленглiколем та очищенням шляхом препаративного електрофорезу в 40 %-ному забуференому розчині сахарози на сконструйованому нами при...
Gespeichert in:
| Datum: | 2005 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Ukrainian |
| Veröffentlicht: |
Інститут мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України
2005
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/18590 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки / О.Є. Мамчур, О.О. Дмитрук, Л.П. Коломієць // Сільськогосподарська мікробіологія: Міжвід. темат. наук. зб. — Чернігів, 2005. — Вип. 1-2. — С. 172-178. — Бібліогр.: 12 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-18590 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Мамчур, О.Є. Дмитрук, О.О. Коломієць, Л.П. 2011-04-05T17:07:19Z 2011-04-05T17:07:19Z 2005 Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки / О.Є. Мамчур, О.О. Дмитрук, Л.П. Коломієць // Сільськогосподарська мікробіологія: Міжвід. темат. наук. зб. — Чернігів, 2005. — Вип. 1-2. — С. 172-178. — Бібліогр.: 12 назв. — укр. 1997-3004 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/18590 633.491:576.093 Пропонується метод отримання препаратів М-вірусу картоплі, який передбачає поєднання освiтлення рослинних екстрактiв тритоном Х-100 з наступним осадженням вiрусу полiетиленглiколем та очищенням шляхом препаративного електрофорезу в 40 %-ному забуференому розчині сахарози на сконструйованому нами приладi. Метод забезпечує отримання чистих препаратів з високим виходом вірусу. Результати добре вiдтворюються, що є важливим при виробництві iмунодiагностикумів. Предлагается метод получения препаратов МВК, который предусматрвает осветление растительных экстрактов тритоном Х-100 с последующим осаждением вируса полиэтиленгликолем и препаративный электрофорез в 40 %-ной сахарозе на сконструированном в отделе приборе. Метод обеспечивает получение чистых препаратов с высоким выходом вируса. Результаты хорошо воспроизводятся, что имеет важное значение при производстве иммунодиагностикумов. The method for the purified and concentrated PMV (potato virus M) preparations obtaining has been adapted. Purification of PMV included the plant sap settling by Triton X-100, virus precipitation by polyethilenglicol and preparative electrophoresis at 40 % succharose. The results are replaied well, here it is important for the immunodiagnosticumes production. uk Інститут мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України Вірусологія рослин Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки Метод получения препаратов м-вируса картофеля для производства диагностической сыворотки The method of potato virus m preparations obtaining for diagnosticums production Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки |
| spellingShingle |
Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки Мамчур, О.Є. Дмитрук, О.О. Коломієць, Л.П. Вірусологія рослин |
| title_short |
Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки |
| title_full |
Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки |
| title_fullStr |
Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки |
| title_full_unstemmed |
Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки |
| title_sort |
метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки |
| author |
Мамчур, О.Є. Дмитрук, О.О. Коломієць, Л.П. |
| author_facet |
Мамчур, О.Є. Дмитрук, О.О. Коломієць, Л.П. |
| topic |
Вірусологія рослин |
| topic_facet |
Вірусологія рослин |
| publishDate |
2005 |
| language |
Ukrainian |
| publisher |
Інститут мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Метод получения препаратов м-вируса картофеля для производства диагностической сыворотки The method of potato virus m preparations obtaining for diagnosticums production |
| description |
Пропонується метод отримання препаратів М-вірусу картоплі, який передбачає поєднання освiтлення рослинних екстрактiв тритоном Х-100 з наступним осадженням вiрусу полiетиленглiколем та очищенням шляхом препаративного електрофорезу в 40 %-ному забуференому розчині сахарози на сконструйованому нами приладi. Метод забезпечує отримання чистих препаратів з високим виходом вірусу. Результати добре вiдтворюються, що є важливим при виробництві iмунодiагностикумів.
Предлагается метод получения препаратов МВК, который предусматрвает осветление растительных экстрактов тритоном Х-100 с последующим осаждением вируса полиэтиленгликолем и препаративный электрофорез в 40 %-ной сахарозе на сконструированном в отделе приборе. Метод обеспечивает получение чистых препаратов с высоким выходом вируса. Результаты хорошо воспроизводятся, что имеет важное значение при производстве иммунодиагностикумов.
The method for the purified and concentrated PMV (potato virus M) preparations obtaining has been adapted. Purification of PMV included the plant sap settling by Triton X-100, virus precipitation by polyethilenglicol and preparative electrophoresis at 40 % succharose. The results are replaied well, here it is important for the immunodiagnosticumes production.
|
| issn |
1997-3004 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/18590 |
| citation_txt |
Метод отримання препаратів м-вірусу картоплі для виробництва діагностичної сироватки / О.Є. Мамчур, О.О. Дмитрук, Л.П. Коломієць // Сільськогосподарська мікробіологія: Міжвід. темат. наук. зб. — Чернігів, 2005. — Вип. 1-2. — С. 172-178. — Бібліогр.: 12 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT mamčuroê metodotrimannâpreparatívmvírusukartoplídlâvirobnictvadíagnostičnoísirovatki AT dmitrukoo metodotrimannâpreparatívmvírusukartoplídlâvirobnictvadíagnostičnoísirovatki AT kolomíêcʹlp metodotrimannâpreparatívmvírusukartoplídlâvirobnictvadíagnostičnoísirovatki AT mamčuroê metodpolučeniâpreparatovmvirusakartofelâdlâproizvodstvadiagnostičeskoisyvorotki AT dmitrukoo metodpolučeniâpreparatovmvirusakartofelâdlâproizvodstvadiagnostičeskoisyvorotki AT kolomíêcʹlp metodpolučeniâpreparatovmvirusakartofelâdlâproizvodstvadiagnostičeskoisyvorotki AT mamčuroê themethodofpotatovirusmpreparationsobtainingfordiagnosticumsproduction AT dmitrukoo themethodofpotatovirusmpreparationsobtainingfordiagnosticumsproduction AT kolomíêcʹlp themethodofpotatovirusmpreparationsobtainingfordiagnosticumsproduction |
| first_indexed |
2025-11-25T16:29:54Z |
| last_indexed |
2025-11-25T16:29:54Z |
| _version_ |
1850518122845437952 |
| fulltext |
172 173
УДК 633.491:576.093
МЕТОД ОТРИМАННЯ ПРЕПАРАТІВ М-ВІРУСУ КАРТОПЛІ ДЛЯ
ВИРОБНИЦТВА ДІАГНОСТИЧНОЇ СИРОВАТКИ
Мамчур О.Є., Дмитрук О.О., Коломієць Л.П.
Інститут сiльськогосподарської мiкробiологiї УААН
вул. Шевченка, 97, м. Чернігів, Україна , 14027
Пропонується метод отримання препаратів М-вірусу картоплі, який пе-
редбачає поєднання освiтлення рослинних екстрактiв тритоном Х-100 з
наступним осадженням вiрусу полiетиленглiколем та очищенням шляхом
препаративного електрофорезу в 40 %-ному забуференому розчині саха-
рози на сконструйованому нами приладi. Метод забезпечує отримання
чистих препаратів з високим виходом вірусу. Результати добре вiдтво-
рюються, що є важливим при виробництві iмунодiагностикумів.
Ключові слова: М-вірус картоплі, чисті препарати вірусу, методи, пре-
паративний електрофорез.
М-вірус картоплі (МВК) є одним з найбільш розповсюджених патогенів
картоплі в усіх зонах вирощування культури. На Поліссі України спри-
чинювані ним втрати врожаю становлять в середньому 40,8 % [1]. МВК
превалює у посівах в моноінфекції чи в комплексі з іншими мозаїчними
вірусами (64 % обстежених зразків) при ступені ураженості сортозразка
5-100 % [2]. Контроль насіннєвого матеріалу показує, що у відкритий
грунт висаджується здоровий пробірковий матеріал, який у процесі
подальшого розмноження зазнає реінфекції: ураженість клонового
матеріалу становить 13-57 % залежно від імунологічних характеристик
сорту, досягаючи 100 % на окремих сортах.
При аналізі відібраного в полі матеріалу виявляється латентна ін-
фекція в 20-70 % зразків, що вказує на необхідність використання імуноло-
гічних методів діагностики вірусу для отримання об’єктивної інформації
щодо якості матеріалу в насінницькій, селекційній роботі, ефективності
захисних заходів, при вивченні циркуляції вірусу в природних умовах.
Біологічні особливості МВК дають можливість виявляти його у
вегетуючих рослинах методом крапельної аглютинації [3] при чутливості
методу 1-100 мкг/мл, а також методом імуноферментного аналiзу.
Контроль фітопатогенних вірусів потребує методичного забезпе-
чення. Пошук нових методичних пiдходiв при розробці і виробництві
засобів діагностики з урахуванням особливостей патогенів спрямований
на створення ефективних діагностикумів фiтопатогенних вiрусiв.
172 173
У представленій роботі ми ставили за мету розробити метод
отримання чистих препаратів МВК для виробництва діагностичної
антисироватки.
Матерiали i методи. В роботі використовували колекційний штам
М-вiрусу картоплi [4] вiддiлу фiтовiрусологiї та бiотехнологiї Інституту
с.-г. мікробіології УААН.
МВК накопичували на рослинах томатів сорту Перемога, якi виро-
щували в умовах вегетацiйної камери при 20 оС i фотоперiодi 16 годин.
Заражали рослини в фазі 3-4 справжніх листків методом механічної іно-
куляції з попереднім опудрюванням карборундом. Строк максимальної
концентрації вірусу в рослинах томату – 21-25 днів після інокуляції.
При розробці методу очищення використовували відомі методики
[5-8] та прилад для препаративного електрофорезу [9,10], сконструйова-
ний в нашому інституті.
Контроль етапів отримання чистих препаратів проводили з вико-
ристанням реакцiї крапельної аглютинацiї [3] та електронної мікроскопії
нативних препаратів, контрастованих 2%-ним розчином фосфорно-воль-
фрамової кислоти, рН 6,0. Дослiджували препарати за допомогою елек-
троного мiкроскопа Tesla-540 при iнструментальному збiльшеннi 22-30
тис.
Спектри поглинання УФ-свiтла препаратами МВК реєстрували на
однопроменевому спектрофотометрi СФ-46.
Результати та їх обговорення. Для виділення препарату МВК
листя томатiв вiдбирали на 21-25-й день пiсля зараження.
Проводили iнфiльтрацiю в 0,3 М трис-глiциновому буферному роз-
чині, рН 8,3 з додаванням 0,1 %-ного 2-меркаптоетанолу (МЕ) та 0,01М
ЕДТА протягом 12 годин за температури +4 оС.
Попередня iнфiльтрацiя рослинного матерiалу сприяла підвищен-
ню ефективності екстракцiї вiрусу, блокуючи дiю ферментiв рослинного
соку.
Після інфільтрації листя подрібнювали на вальцевому пресi ПВЛ-1
в присутностi 0,3 М трис-глiцинового буфера, рН 8,3 у спiввiдношеннi
1:2. Отриманий гомогенат віджимали через капронове сито. Екстракт в
трис-глiциновому буферному розчинi мiстив менше пігменту, нiж при
використаннi фосфатного чи цитратного буферних розчинів, що значно
полiпшувало наступні етапи очистки.
Освiтлювали екстракт шляхом центрифугування за 15 000 об/хв
протягом 20 хв. До надосадової рiдини додавали краплями 20 %-ний
розчин тритон Х-100 до кiнцевої концентрацiї 0,5 % та iнкубували
174 175
30 хв., не застосовуючи на цьому етапi органiчних розчинникiв, якi рiз-
ко знижують вихiд вiрусу [11, 12]. Додавання тритон-Х100 зумовлює
розчинення клiтинних мембран i хлоропластiв перед осадженням
полiетиленгликолем (ПЕГ).
Первинне концентрування вiрусу проводили шляхом додавання до
екстракту 20 %-ного розчину полiетиленглiколю (м.в. 40000) та NaCl до
кiнцевої концентрацiї 8 % та 1,5 %, вiдповiдно. Витримували 1 годину при
температурі +4 оС. Преципiтат вiддiляли центрифугуванням за 6000 об/хв
протягом 20 хв.
Пiсля центрифугування при 6000 об/хв в надосадковiй рiдинi
вiрус серологiчно не виявлявся. Для повної екстракцiї вiрусу необхiдно
було проводити декiлька послiдовних ресуспендувань осаду 0,01 М
трис-глiциновим буфером, рН 8,3, кожен раз освiтлюючи екстракт
низькошвидкісним центрифугуванням. На цьому етапі загальний об’єм
отриманого препарату вірусу не перевищував 1/10 вiд початкового об’єму
рослинного екстракту.
Пiсля осадження ПЕГ екстракція МВК із преципiтата, який
мiстить значну кiлькiсть бiлкiв рослини-хазяїна, ускладнена. Це потребує
застосування ряду циклів екстракції вірусу із осадів та контролю на
кожному етапi для уникнення значної втрати вiрусу. Екстракція МВК
з осадів проходить більш ефективно, якщо для гомогенiзацiї рослинної
тканини використовувати трис-глiциновий буфер, а не фосфатний чи
цитратний. При використаннi трис-глiцинового буфера основна кiлькiсть
вiрусу екстрагується при перших двох етапах ресуспендування.
Остаточне очищення препарату МВК здійснювали за допомогою
приладу для препаративного електрофорезу із застосуванням 40%-ної
сахарозної подушки.
При проведенi препаративного електрофорезу МВК необхiдно
було пiдiбрати оптимальнi умови для очищення вірусу: рН та iонну силу
буферних розчинiв, температурний режим, напругу електричного поля,
тривалiсть, концентрацiю сахарозної подушки, кiлькiсть антигену, який
можна роздiлити [12].
Сконцентрований осадженням ПЕГ препарат вірусу нашаровували
на 40%-у сахарозну подушку висотою 10 см та діаметром 1,5 см, яка була
сформована в електрофоретичнiй колонцi.
Електрофорез вели в лужнiй системi буферiв за температури 16-
20 оС, сили струму 8-10 мА та напрузi 380-400 в протягом 3 годин.
При відпрацюванні цього етапу отримання препарату МВК
виявили, що електрофорез в 40 % сахарозi є ефективним прийомом для
174 175
концентрування МВК та очищення його вiд рослинних компонентiв.
В роботi ми використовували 0,01М трис-глiциновий буфер, рН 8,3,
який найбiльше пiдходить як для екстракцiї МВК, так i для електрофорезу.
Виходили з того, що буферний розчин, який використовується при
електрофорезi, повинен мати низьку iонну силу (0,005-0,02), що дозволяє
застосовувати високi градiєнти напруги вздовж колонки при мiнiмальному
утвореннi тепла. Крім того, мають бути пiдібрані такі значення рН
буферних розчинiв, щоб рiзниця в зарядах мiж компонентами сумiшi, яка
роздiляється, була максимальною [7, 12].
Напругу поля належить пiдтримувати настiльки високою, наскiльки
можливо за умов мінімального утворення та розсiювання тепла. При
розробці нашого методу мiнiмальний нагрiв i конвекцiю спостерiгали
при силi струму 8-10 мА та напрузi 380-400 в.
Важливим фактором при препаративному електрофорезi в 40%-ній
сахарозi є температура: якщо охолодження недостатнє, то це призводить
до нерівномiрного розподiлу фракцiй.
Експериментальним шляхом визначали тривалiсть електрофорезу
препарату МВК. Пiсля 1; 2; 3 годин електрофорезу зразки проби та саха-
розної подушки перевiряли методами серологiї та електронної мікроскопії
на наявнiсть антигену. Встановлено, що пiсля трьох годин електрофорезу
вiрус повнiстю осiдав на поверхнi пробки ПААГ.
Вiзуальне спостереження за перебігом електрофорезу показало, що
через 30 хвилин пiсля включення струму вiд зони проби починають вiддi-
лятися пластiвчастi утворення, якi осiдають на пробцi ПААГ, формуючи
ледве помiтний шар. Вірогідно, це є агрегати МВК, якi утворилися пiсля
осадження ПЕГ і можуть містити залишки клітинного дебрису. При засто-
суванні диференцiйного центрифугування сконцентрованого ПЕГ препа-
рату вiруси, які перебувають в агрегованому станi, неминуче втрачаються
[5], внаслідок чого знижується загальний вихід вірусу. За розробленою
нами методикою, агрегати МВК зберiгаються саме завдяки вiдсутностi
промiжних циклiв диференцiйного центрифугування.
Електрофоретична рухомiсть агрегатiв у 40 %-ній сахарозi за
створених нами умов є вищою за рухомiсть одиничних часток вiрусу;
можливо, швидкiсть мiграцiї агрегатiв вiрусу збiльшується за рахунок
сили тяжiння.
Пiсля проходження сахарозної подушки частки вiрусу та агрегати
утворюють шар на поверхнi пробки 10 %-ного ПААГ, яка непроникна для
МВК. Тому, залишаючись на поверхнi гелю, антиген додатково пiддається
електродiалiзу, завдяки чому вiдокремлюються низькомолекулярнi
176 177
домiшки рослинного походження. Крiм того, пiд час електродiалiзу
збiльшується розчиннiсть агрегатiв вірусу. МВК переходить у фiзрозчин
у вигляді препарату достатньо високого ступеня чистоти.
Пiсля закiнчення електрофорезу препарат вiрусу змивали
фiзiологiчним розчином з поверхнi пробки 10 %-ного полiакрiламiдного
гелю, яка вiддiляє робочий об’єм вiд нижнього електродного буфера.
Верхній шар гелевої пробки діставали з електрофоретичної колонки,
розтирали у фiзрозчинi, витримували 12 годин при температурі 4 оС та
центрифугували із швидкістю 15000 об/хв. Надосадову рiдину аналiзували
на присутнiсть вiрусу, об’єднували із змивом з поверхнi ПААГ. Отриманий
препарат використовували для проведення електронномiкроскопiчних та
спектрофотометричних дослiджень та як антиген для iмунiзацiї кролiв.
Частина вiрусу неминуче адсорбується на поверхнi ПААГ,
утворюючи нерозчиннi комплекси за рахунок гiдрофобних та ковалентних
зв’язкiв, але наявність ПААГ в антигенi може слугувати ад’ювантом при
iмунiзацiї тварин, що пiдвищує титр антисироваток (8).
Препарати МВК, отриманi за розробленим нами методом, як
показало електронномiкроскопiчне дослідження, мiстили типовi для
даного вiрусу одиничнi частки, а також агрегати вiріонів з переважанням
агрегатів вірусу. Це, на наш погляд, пояснюється вiдсутнiстю циклiв
диференцiйного центрифугування, коли бiльшiсть агрегатiв вiрусу
втрачається.
Очищенi препарати М-вiрусу картоплi характеризувалися типовим
для карлавiрусiв спектром поглинання УФ-свiтла з мiнiмумом поглинання
при 247 нм та максимумом – при 270 нм. Вихід вірусу становив 500 мг/кг
листя.
Таким чином, поєднання освiтлення рослинних екстрактiв
три-тоном Х-100 з наступним осадженням вiрусу за допомогою
полiетиленглiколю та очищення з використанням препаративного
електрофорезом в 40 %-ному розчині сахарози дало можливість отримати
чистi препарати МВК. При цьому ми змогли скоротити необхідні
об’єми вирощування рослин-накопичувачів вiрусiв та вiдмовитися
вiд використання ультрацентрифуг для очищення вiрусного антигену.
Препарати МВК, отримані за розробленим нами методом, характери-
зуються високим ступенем чистоти та підвищеним виходом вiрусу, що
робить метод придатним для виготовлення антигену МВК та отримання
специфiчних антисироваток. Результати добре вiдтворюються, що є
важливим при виробництві iмунодiагностикумів.
176 177
1. Ситченко І.Р., Марков І.Л. Шкідливість і поширення вірусу М
на картоплі в Поліській зоні УРСР // Картоплярство. – 1980. – Вип. 11.
– С. 78-80.
2. Коломієць Л.П. Фітосанітарний стан агроекосистем як фактор
продуктивності сільськогосподарського виробництва // Лідер України.
– 2005. – No 12. – C. 124-126.
3. Дунин М.С., Попова Н.М. Капельный метод анализа в растение-
водстве. – М.: Сельхозгиз.- 1973.-45с.
4. Пат. 20194 Україна, МПК5 C 12 N 7/00, A 01 No 63/00. Штам
М-вiрусу картоплi для виробництва дiагностичної сироватки / Коломієць
Л.П., Козар Ф.Ю., Лебiдь Л.М., Погорiлько М.Я. // Заявл. 29.07.88; Опубл.
25.12.97, Бюл. – No 6
5. Новиков В.К., Атабеков И.Г., Агур М.О. и др. Метод получения
препарата Y-вируса картофеля и приготовление диагностических антисы-
вороток // Сельськохозяйственная биология. – 1982. – 17, No 5. – С. 706-
711.
6. Van Regenmortel M.H.V. Purification of plant virus by zone electrop-
horesis // Virologi. – 1964. – No 23. – P. 495-503.
7. Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых
кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. – М. : Наука, 1981.
– 274 с.
8. Мамчур О.Є., Дмитрук О.О., Волкова І.В., Зарицький М.М.
Препаративний електрофорез ВСЛК в градiєнтi концентрацiї сахарози //
Бюл. ІСГМ УААН. – 2000. – No 7. – С. 47.
9. Пат. 64377А Україна, МПК7 C 12 N 7/00. Пристрiй для
препаративного електрофорезу в гранульованому середовищi / О.Є.
Мамчур, О.О. Дмитрук, М.М. Зарицький // Заявл. 22.05.2003; Опубл.
16.02.2004, Бюл. – No 2.
10. Prol E., Ahrens E., Richter J. Ein Beitrag zur Differenzierung von
Isolaten des Kartoffel-virus M // Arch. Phytopathol. U Pflanzenschutz.- Berlin,
1978. – Vol. 14, No 4. – P. 209-217.
11. Tavantris S.M. Physiochemical properties of potato virus M //
Virology.- 1984.-133.-P.427-430.
12. Электрофорез в разделении биологических макромолекул: Пер.
с англ./ Под ред. В.И. Розенгарта. – М.: Мир, 1982. – 448 с.
178 179
УДК 633.491:576.093
МЕТОД ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ М-ВИРУСА КАРТОФЕЛЯ
ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ
Мамчур А.Е., Дмитрук О.А., Коломиец Л.П.
Інститут сельскохозяйственной микробиологии УААН, г. Чернигов
Предлагается метод получения препаратов МВК, который предусмат-
рвает осветление растительных экстрактов тритоном Х-100 с по-
следующим осаждением вируса полиэтиленгликолем и препаративный
электрофорез в 40 %-ной сахарозе на сконструированном в отделе при-
боре. Метод обеспечивает получение чистых препаратов с высоким вы-
ходом вируса. Результаты хорошо воспроизводятся, что имеет важное
значение при производстве иммунодиагностикумов.
Ключевые слова: М-вирус картофеля, чистые препараты вируса, мето-
ды, препаративный электрофорез.
THE METHOD OF POTATO VIRUS M PREPARATIONS
OBTAINING FOR DIAGNOSTICUMS PRODUCTION
Mamchur A.E., Dmitruk О.A., Kolomietz L.P.
Institute of Agricultural Microbiology, UAAS, Chernihiv
The method for the purified and concentrated PMV (potato virus M) prepara-
tions obtaining has been adapted. Purification of PMV included the plant sap
settling by Triton X-100, virus precipitation by polyethilenglicol and prepara-
tive electrophoresis at 40 % succharose. The results are replaied well, here it is
important for the immunodiagnosticumes production.
Key words: potato virus M, purified virus preparation, methods, preparative
electrophoresis.
|