Хроматографічне визначення парабенів

Розроблено і валідовано нову методику визначення метил- та пропілпарабенів у сиропах медичного призначення різного складу з використанням методу оберненофазної хроматографії на ціанопропільній нерухомій фазі. Хроматографічне розділення досягнуто із застосуванням суміші 0.1 %-ї ортофосфорної кислоти...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Date:	2013
Main Authors:	Сиротчук, О.А., Дідух, І.Р., Зайцев, В.М., Курас С.Ф.
Format:	Article
Language:	Ukrainian
Published:	Інститут загальної та неорганічної хімії ім. В.І. Вернадського НАН України 2013
Series:	Украинский химический журнал
Subjects:	Аналитическая химия
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/187867
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Хроматографічне визначення парабенів / О.А. Сиротчук, І.Р. Дідух, В.М. Зайцев, С.Ф. Курас // Украинский химический журнал. — 2013. — Т. 79, № 2. — С. 102-107. — Бібліогр.: 15 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-187867
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1878672025-02-23T17:01:10Z Хроматографічне визначення парабенів Хроматографическое определение парабенов HPLC determination of parabens Сиротчук, О.А. Дідух, І.Р. Зайцев, В.М. Курас С.Ф. Аналитическая химия Розроблено і валідовано нову методику визначення метил- та пропілпарабенів у сиропах медичного призначення різного складу з використанням методу оберненофазної хроматографії на ціанопропільній нерухомій фазі. Хроматографічне розділення досягнуто із застосуванням суміші 0.1 %-ї ортофосфорної кислоти у воді і ацетонітрилу як рухомої фази, колонки Discovery Cyano і спектрофотометричної детекції при довжини хвилі 254 нм. Методика дозволяє використовувати в 4—6 разів менше органічного розчинника у рухомій фазі та проводити розділення за 8 хв. При здійсненні валідації перевірено лінійність, збіжність, правильність, специфічність. Методику успішно використано для визначення парабенів у 8 медичних сиропах. Разработана и валидирована новая методика определения метил- и пропилпарабенов в сиропах медицинского назначения разного состава методом обратно-фазовой хроматографии на цианопропильной неподвижной фазе. Хроматографическое разделение достигнуто с применением смеси 0.1 %-й ортофосфорной кислоты в воде и ацетонитрила в качестве подвижной фазы, колонки Discovery Cyano и спектрофотометрической детекции при длине волны 254 нм. Методика позволяет использовать в 4–6 раз меньше органического растворителя в подвижной фазе и проводить разделение за 8 мин. При проведении валидации проверены линейность, пригодность хроматографической системы, сходимость, правильность, специфичность. Метод с успехом использован для определения парабенов в 8 сиропах медицинского назначения. A novel reversed-phase LC method using CN-propyl column has been developed and validated for the analysis of methylparaben and propylparaben in medical syrups of different composition. The chromatographic separation was achieved by HPLC using a mixture of 0.1 % orthophosphoric acid solution in water with acetonitrile as the mobile phase, a Discovery Cyano column and UV detection at 254 nm. The method was validated with respect to linearity, precision, accuracy, specificity. This method permits to use 4—6 times less of organic component in mobile phase and the separation has been carried out in 8 minutes. All the charesteristics examined met the current recommendations for HPLC method validation. The method was successfully used for determining both compounds in 8 medical syrups of different composition. 2013 Article Хроматографічне визначення парабенів / О.А. Сиротчук, І.Р. Дідух, В.М. Зайцев, С.Ф. Курас // Украинский химический журнал. — 2013. — Т. 79, № 2. — С. 102-107. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 0041–6045 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/187867 543.544.5.068.7:615.074 uk Украинский химический журнал application/pdf Інститут загальної та неорганічної хімії ім. В.І. Вернадського НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Ukrainian
topic	Аналитическая химия Аналитическая химия
spellingShingle	Аналитическая химия Аналитическая химия Сиротчук, О.А. Дідух, І.Р. Зайцев, В.М. Курас С.Ф. Хроматографічне визначення парабенів Украинский химический журнал
description	Розроблено і валідовано нову методику визначення метил- та пропілпарабенів у сиропах медичного призначення різного складу з використанням методу оберненофазної хроматографії на ціанопропільній нерухомій фазі. Хроматографічне розділення досягнуто із застосуванням суміші 0.1 %-ї ортофосфорної кислоти у воді і ацетонітрилу як рухомої фази, колонки Discovery Cyano і спектрофотометричної детекції при довжини хвилі 254 нм. Методика дозволяє використовувати в 4—6 разів менше органічного розчинника у рухомій фазі та проводити розділення за 8 хв. При здійсненні валідації перевірено лінійність, збіжність, правильність, специфічність. Методику успішно використано для визначення парабенів у 8 медичних сиропах.
format	Article
author	Сиротчук, О.А. Дідух, І.Р. Зайцев, В.М. Курас С.Ф.
author_facet	Сиротчук, О.А. Дідух, І.Р. Зайцев, В.М. Курас С.Ф.
author_sort	Сиротчук, О.А.
title	Хроматографічне визначення парабенів
title_short	Хроматографічне визначення парабенів
title_full	Хроматографічне визначення парабенів
title_fullStr	Хроматографічне визначення парабенів
title_full_unstemmed	Хроматографічне визначення парабенів
title_sort	хроматографічне визначення парабенів
publisher	Інститут загальної та неорганічної хімії ім. В.І. Вернадського НАН України
publishDate	2013
topic_facet	Аналитическая химия
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/187867
citation_txt	Хроматографічне визначення парабенів / О.А. Сиротчук, І.Р. Дідух, В.М. Зайцев, С.Ф. Курас // Украинский химический журнал. — 2013. — Т. 79, № 2. — С. 102-107. — Бібліогр.: 15 назв. — укр.
series	Украинский химический журнал
work_keys_str_mv	AT sirotčukoa hromatografíčneviznačennâparabenív AT díduhír hromatografíčneviznačennâparabenív AT zajcevvm hromatografíčneviznačennâparabenív AT kurassf hromatografíčneviznačennâparabenív AT sirotčukoa hromatografičeskoeopredelenieparabenov AT díduhír hromatografičeskoeopredelenieparabenov AT zajcevvm hromatografičeskoeopredelenieparabenov AT kurassf hromatografičeskoeopredelenieparabenov AT sirotčukoa hplcdeterminationofparabens AT díduhír hplcdeterminationofparabens AT zajcevvm hplcdeterminationofparabens AT kurassf hplcdeterminationofparabens
first_indexed	2025-11-24T03:01:41Z
last_indexed	2025-11-24T03:01:41Z
_version_	1849639097237241856
fulltext	УДК 543.544.5.068.7:615.074 О.А.Сиротчук, І.Р.Дідух, В.М.Зайцев, С.Ф.Курас ХРОМАТОГРАФІЧНЕ ВИЗНАЧЕННЯ ПАРАБЕНІВ Розроблено і валідовано нову методику визначення метил- та пропілпарабенів у сиропах медичного призначення різного складу з використанням методу оберненофазної хроматографії на ціано- пропільній нерухомій фазі. Хроматографічне розділення досягнуто із застосуванням суміші 0.1 %-ї ортофосфорної кислоти у воді і ацетонітрилу як рухомої фази, колонки Discovery Cyano і спектрофо- тометричної детекції при довжини хвилі 254 нм. Методика дозволяє використовувати в 4—6 разів менше органічного розчинника у рухомій фазі та проводити розділення за 8 хв. При здійсненні ва- лідації перевірено лінійність, збіжність, правильність, специфічність. Методику успішно використано для визначення парабенів у 8 медичних сиропах. ВСТУП. Парабени — ефіри п-гідроксибен- зойної кислоти — знайшли широке застосу- вання в фармацевтичній галузі як консерван- ти. Звичайно парабени використовують у про- дукції з підвищеним вмістом водної фази (си- ропи, креми). Визначення парабенів досить часто прово- дять за допомогою обернено-фазної високоефе- ктивної рідинної хроматографії з спектрофо- тометричним [1], електрохімічним [2] та флюо- рометричним [3] детекторами. В більшості ме- тодик застосовуються хроматографічні колон- ки з нерухомою фазою С18 або С8 [1—7]. За цих умов для аналізу беруть рухомі фази із висо- ким вмістом органічного компонента (ацетоні- трил, метиловий спирт чи їх суміші). Наприк- лад, для хроматографічного розділення пара- бенів на С18 знайшли застосування такі рухомі фази: 0.02 M фосфорна кислота—метанол (59:41) [2], метанол—фосфатний буфер, pH 2.5 (65:35) [3], метанол—ацетонітрил—вода (15:27:58) [5], вода—ацетонітрил (60:40), вода—метанол (40:60 або 50:50) [1, 6]. Як видно, всі вони містять від 40 до 65 % токсичного органічного розчинника. Спроба зменшення кількості органічного мо- дифікатора значно збільшує тривалість аналі- зу [4] або вимагає градієнтного режиму [7]. Час хроматографування за цих умов варіюється від 10 до 30 хв. Відомі методики визначення метил- та пропілпарабенів у косметичній продукції із застосуванням хроматографічного розділення на ціанопропільній колонці [8, 9]. Наприклад, ме- тодика [8] передбачає використання градієнт- ного елюювання аналітів метанолом у діапазоні від 40 до 80 %. Відомим є і метод ізократичного елюювання метилпарабену з ціанопропільної ко- лонки [9], проте в цьому випадку потрібна рухо- ма фаза на основі суміші ацетонітрилу та тет- рагідрофурану з добавкою 0.1 % трифтороцтової кислоти [9]. Отже, відомі методики хроматографічного визначення парабенів не є екобезпечними та ек- спресними. Метою даного дослідження є роз- робка безградієнтної методики одночасного виз- начення парабенів у сиропах різного складу ме- тодом рідинної хроматографії, яка б характери- зувалася суттєвим зниженням використання ток- сичного органічного розчинника та одночасним підвищенням експресності розділення. З цією ме- тою досліджено можливість застосування хро- матографічної колонки з ціанопропілсилільною нерухомою фазою. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА ЧАСТИНА. Викорис- товували високоефективну хроматографічну сис- тему Hewlett Packard 1100, обладнану чотирьох- канальним градієнтним насосом, автосамплером та термостатом автосамплера, термостатом ко- лонок та діодно-матричним детектором. Хрома- тограми записано і оброблено за допомогою про- грамного пакету Chemstation (A.08.03). Застосовували стандартні речовини метил- та пропілпарабенів виробництва SJZ Chem. Co.Ltd, Китай, ацетонітрил (HPLC grade) — Sigma-Aldrich, ортофосфорну кислоту 85 % (p.a.) — Merck, Німеччина. Деіонізовану воду доо- чищували за допомогою системи мембранної фільтрації Milli-Q (Millipore, США). Умови хроматографування були наступни- © О.А.Сиротчук, І.Р.Дідух, В.М .Зайцев, С.Ф .Курас , 2013 Аналитическая химия 102 ISSN 0041-6045. УКР. ХИМ . ЖУРН . 2013. Т. 79, № 2 ми. Нерухома фаза — колонка Discovery Cyano 250x4.6 з розміром часток 5 мкм (виробник Su- pelco), рухома фаза — суміш водного розчину фосфорної кислоти, концетрація якої змінюва- лася в діапазоні 0—0.1 %, та ацетонітрилу (спів- відношення компонентів у ході розробки ме- тодики змінювали від 80:20 до 92:8). Швидкість потоку — 1.3 мл/хв, довжина хвилі детектуван- ня — 254 нм, об’єм інжекції — 10 мкл, термо- статування колонки — за 30 оС. Об’єктами хроматографічного розділення бу- ли медичні сиропи: кофанол (Наброс фарма, Індія); інстаріл (Аглоумед лтд, Індія); колдакт бронхо (Ранбаксі лабораторіз лімітед, Індія); цитал (Індоко ремедіз лімітед, Індія); флюколд сироп (Наброс фарма, Індія); алмагель (Бал- канфарма-троян АТ, Болгарія); хофітол(Лабо- раторія Роза-Фітофарма, Франція); кофекс (Дже- ном біотек, Індія). Оскільки обидва парабени не є водорозчин- ними сполуками, для приготування стандарт- них розчинів їх спочатку було розчинено в не- великій кількості органічного розчинника , до- ведено до мітки водою, а далі розбавлено до потрібної концентрації водою. Такий підхід дозволяє зменшити використання органічного розчинника на стадії приготування розчинів для хроматографічного розділення. Для приготування вихідного розчину пара- бенів зважили 80 мг метилпарабену і 20 мг про- пілпарабену в мірній колбі об’ємом 50 мл. До- дали для розчинення 10 мл ацетонітрилу і дове- ли до мітки водою. Стандартний розчин парабенів для хрома- тографічного розділення готували наступним чином: 2.0 мл вихідного розчину парабенів пере- несли в мірну колбу 50 мл і довели до мітки во- дою. Концентрація метилпарабену — 64, про- пілпарабену — 16 мкг/мл. З метою дослідження лінійності приготу- вали 7 вихідних розчинів парабенів так, як опи- сано вище. Для кожного з розчинів здійснили відповідне розведення, щоб отримати каліб- рувальні розчини 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160 % від концентрації 64 мкг/мл для метилпара- бену та 16 мкг/мл для пропілпарабену. Сиропи медичного призначення є глюкоз- но-цукровими водними розчинами, тому вони легко розчиняються у воді. Для приготування розчинів зразків сиропів відповідну наважку кожного сиропу розчинили в воді, щоб концен- трація метилпарабену в розчині була 64, а про- пілпарабену — 16 мкг/мл. Якщо співвідношен- ня парабенів у сиропі відрізнялося від їх спів- відношення в стандартному розчині (4:1), то го- тували два незалежних зразка з концентрація- ми парабенів такими, як в стандартному розчині. Етапи валідації визначали, виходячи з того, що для фармацевтичних препаратів основні ва- лідаційні характеристики встановлені Держав- ною фармакопеєю України [10]. Їх застосування на практиці було статистично обгрунтовано та де- тально проілюстровано на конкретних прикла- дах у ряді наукових робіт [11—13]. Як видно із вищевказаних джерел, специфічність, придат- ність хроматографічної системи, лінійність та діапазон використання, збіжність, правильність є обов’язковими для перевірки в ході валідації методики. Саме ці параметри були перевірені при валідації хроматографічної методики. Також по- казано придатність хроматографічної системи у відповідності до вимог, які є в літературі [10, 15]. ОБГОВОРЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ. Для розро- бки методики застосовували колонку з ціано- пропільною фазою на силікагелі, з метильним ендкепінгом Discovery Cyano 250x4.6 мм, 5 мкм (загрузка вуглецю 4.5 %). Ця фаза є менш гід- рофобною у порівнянні з октадецилсилільною або октилсилільною фазою. Як правило, слаб- ше утримування аналіту на ціанопропільній фа- зі вимагає більш слабкої рухомої фази (в даному випадку це фаза з меншою кількістю органіч- ного компоненту). За рахунок зменшення кіль- кості органічного компоненту в рухомій фазі та додаткових механізмів утримування (окрім гід- рофобної взаємодії, відбуваються π−π- та по- лярна взаємодії) селективність є альтернатив- ною щодо С8 та С18 [14]. В якості органічного компоненту рухомої фази використовувався аце- тонітрил, а в якості модифікатора водного ком- поненту — ортофосфорна кислота. В ході роз- робки методики було перевірено вплив концен- трації ортофосфорної кислоти в рухомій фазі на ефективність хроматографічного розділення. Кон- центрація фосфорної кислоти у рухомій фазі змінювалася від 0 до 0.1 %. Подальше збіль- шення концентрації фосфорної кислоти є неба- жаним внаслідок можливого руйнування неру- хомої фази. Для піку метилпарабену виявлено такі значення ефективності хроматографічної ISSN 0041-6045. УКР. ХИМ . ЖУРН . 2013. Т. 79, № 2 103 колонки (формула, за якою розрахована дана величина має вигляд: N = 5.54(tR/W 1/2) 2, де tR — час утримування, а W 1/2 — половина ши- рини піку) в залежності від зміни концентрації фосфорної кислоти (табл. 1). При зміні концен- трації ортофосфорної кислоти в даному діапа- зоні кількість теоретичних тарілок для піку ме- тилпарабену збільшилася майже вдвічі. Для піку пропілпарабену спостерігається така ж законо- мірність, а значення близькі до аналогічних для метилпарабену. Також було досліджено хроматографічне розділення парабенів з компонентами матриці на прикладі одного із сиропів, де розділення було критичним, в залежності від зміни спів- відношення у рухомій фазі (0.1 %-й водний розчин фосфорної кислоти—ацетонітрил). На рис. 1, а показано зміни в якості хромато- графічного розділення при використанні 20, 15 та 10 % органічного компоненту в рухомій фазі. Зокрема, на хроматограмі 1 та 2 можна побачити, що за цих умов повне розділення ком- понентів сиропу не відбувається, а на хромато- грамі 3 всі піки відділені один від одного. Отже, зменшення кількості органічного компоненту до 10 % дозволило відділити обидва парабени від компонентів матриці. Щоб довести стійкість даного розділення до зміни у співвідношенні між компонентами рухомої фази, зразок було ін- жектовано ще у дві системи з вмістом органі- чного компоненту 8 та 12 %. Як видно з рис. 1, б, якість хроматографічного розділення є стійкою до такої зміни. Отже, при розробці методики оп- тимальні результати хроматографічного розді- лення були отримані при використанні рухомої фази 0.1 %-ва фосфорна кислота—ацетонітрил у співвідношенні 90:10. Перед початком процедури валідації треба впевнитися, що система і методика здатні дава- ти прийнятні та відтворювані результати. Так, з боку відтворюваності площі піків система має забезпечувати значення RSD (відносне стандар- тне відхилення) не більше, ніж 1.0 % [15]. Симе- трія піку має знаходитися в межах 0.8—1.5 [10], Т а б л и ц я 1 Залежність кількості теоретичних тарілок для піку метилпарабену при збільшенні концентрації орто- фосфорної кислоти від 0 до 0.1 % у рухомій фазі (вміст ацетонітрилу у рухомій фазі — 10 %) Концентрація H3PO4 , % Кількість теоретичних тарілок 0 9621 0.0125 10243 0.0250 12792 0.05 14276 0.075 16531 0.10 17110 Рис. 1. Хроматограми: а — 0.1 % ортофосфорна кис- лота : ацетонітрил 90:10 (1), 85:15 (2), 80:20 (3); б — 92:8 (1), 90:10 (2), 88:12 (3). а б Аналитическая химия 104 ISSN 0041-6045. УКР. ХИМ . ЖУРН . 2013. Т. 79, № 2 а ефективність хроматографічної колонки по- винна становити не менше 2000 теоретичних тарілок [15]. Відповідність хроматографічної си- стеми вказаним вище критеріям визначалася шляхом шестикратного інжектування стандар- тного розчину з концентрацією від теоретичної 100 %. RSD площ піків метилпарабену шести інжекцій — 0.15 %, а для пропілпарабену — 0.24 %. Симетрія для піків метил- та пропілпарабе- нів — 1.33 та 1.21, а ефективність хроматогра- фічної колонки — 17130 та 17000 відповідно. Специфічність перевірялася шляхом інжек- ції в хроматографічну систему розчинів плаце- бо сиропів (плацебо були приготовані з тих ре- човин, які у кожному з сиропів можуть заважати визначенню внаслідок оптичного поглинання при довжині хвилі детекції, табл. 2). У плацебо відповідного сиропу входили речовини, напро- ти яких є позначка „+”, 4-гідроксибензойна ки- слота (продукт деградації парабенів) з концен- трацією 60 мкг/мл, а також цукор в кількості, що дає 20 %-ву концентрацію в розчині, при- значеному для хроматографічного розділення. Усього було приготовано сім плацебо різного складу, оскільки плацебо для сиропів 1 та 4 ма- ють однаковий склад. Перекривань піків плаце- бо і речовин, що визначалися, не виявлено. При використанні технічних можливостей діодно- матричного детектора виявлено, що спектри в піках парабенів на хроматограмі розчину стан- дартних речовин ідентичні спектрам у піках, які відповідають парабенам на хроматограмах зра- зків сиропів. Лінійність залежності площі піку для метил- парабену від його концентрації перевірялася в діапазоні 25.6–102.4, а для пропілпарабену — 6.4 –25.6 мкг/мл. Для перевірки лінійності та діапа- зону застосування було приготовано 7 розчинів, що містили парабени в діапазоні концентрацій 40–160 % (з кроком 20 %), і для кожного розчи- ну отримано по 3 хроматограми. За загальними Т а б л и ц я 2 Наявність у сиропах речовин, які дають аналітич- ний сигнал в умовах визначення Складник сиропу Номер зразка сиропу * 1 2 3 4 5 6 7 8 Бромгексин – + – – – – – – Фенілефрін – + + – – – – – Натрію бензоат + – + + + – – + Хлорфеніраміну малеат – – – – + – – + Гуайфенезин – – + – – – – – Екстракт артишоку – – – – – – + – Сальбутамол – + – – – – – – Парацетамол – – – – + – – – Аброксол – – + – – – – – Кодеїн – – – – – – – + * 1 – Кофанол, 2 – інстаріл, 3 – колдакт бронхо, 4 – цитал, 5 – флюколд сироп, 6 – алмагель, 7 – хофітол, 8 – кофекс; „+” — речовина використовувалася в приго- туванні плацебо, „–” — не використовувалася. Рис. 2. Залежність площі піків метилпарабену (a) та пропілпарабену (б) від їх концентрації в розчині. Ко- ефіцієнт лінійної кореляції R дорівнює 0.99985 (а) і 0.99992 (б). б а ISSN 0041-6045. УКР. ХИМ . ЖУРН . 2013. Т. 79, № 2 105 вимогами коефіцієнт лінійної кореляції R має бути більшим, ніж 0.999 [15]. Коефіцієнт ліній- ної кореляції для метилпарабену R=0.99985, а для пропілпарабену R=0.99992. Рівняння пря- мої, отримане для метилпарабену, має вигляд: y = –24.8 + 55.8x , a для пропілпарабену y = –7.2 + 47.2x . Межі кількісного визначення (QL) для метилпарабену та пропілпарабену, розраховані теоретично, становлять відповідно 4.9 та 0.9 мкг/мл, а межі детектування (DL) — 1.6 та 0.3 мкг/мл. Вказані межі розраховані згідно з формулами [15]: QL = 10SD/S , DL = 3.3SD/S , де SD — стандартне відхилення значень y-inter- cept; S — нахил калібрувальної кривої. Графіки залежності значень площі аналіти- чного сигналу від концентрації в розчині відпо- відного аналіту наведені на рис. 2. Збіжність виражає ступінь близькості (або розкиду) результатів для серії вимірів, викона- них за даною методикою на різних пробах од- ного і того ж самого однорідного зразка. Кри- терій прийнятності для повторюваності такий: RSD результатів кількісного визначення має бу- ти меншим, ніж 2.0 % [15]. Для визначення при- датності методу було проаналізовано 6 проб од- ного і того ж модельного зразка, що містив 100 % від теоретичного значення вмісту парабенів у діапазоні робочих концентрацій. Найбільше зна- чення RSD для аналізованих сиропів — 1.4 %. Правильність — це близькість отриманих ре- зультатів до істинних. Критерій прийнятності значень правильності 100 ± 2 % [15]. Правиль- ність перевірено на модельних зразках для трьох рівнів: 80, 100, 120 % від номінальної концентрації парабенів у стандартному розчи- ні. Співвідношення введено/знайдено для дос- ліджуваних сиропів знаходилося в діапазоні від 99.6 до 101.1 %. Для дослідження стабільності розчинів при- готовані розчини стандарту і зразку з теоретич- ною концентрацією 100 % інжектувалися в хро- матографічну систему одразу після приготуван- ня та через кожні 6 год протягом однієї доби. RSD площ п’яти інжекцій не перевищило 0.3 % для обох речовин, що визначалися, а це означає, що розчини стандарту і зразку є стабільними протягом 24 год (RSD площ піків метилпара- бену шести послідовних інжекцій — 0.15 %, а для пропілпарабену — 0.24 %). За розробленою методикою було визначе- но кількісний вміст парабенів у досліджуваних сиропах. Результати представлені в табл. 3. ВИСНОВКИ. Розроблена методика кількіс- ного визначення парабенів у лікарських сиро- пах підтверджена тестами на специфічність, лі- нійність, правильність, збіжність. Методика дає змогу проводити визначення парабенів у при- сутності багатокомпонентної матриці і викори- стовує в 4–6 раз менше органічного компонен- ту в рухомій фазі та при пробопідготовці, що робить її екобезпечною. Процедура пробопід- готовки не потребує екстракції, що дозволяє лег- ко і зручно визначати обидва парабени і засто- совувати методику для контролю вмісту зазна- чених консервантів у сиропах медичного приз- начення. РЕЗЮМЕ. Разработана и валидирована новая методика определения метил- и пропилпарабенов в сиропах медицинского назначения разного состава методом обратно-фазовой хроматографии на циано- пропильной неподвижной фазе. Хроматографичес- кое разделение достигнуто с применением смеси 0.1 %-й ортофосфорной кислоты в воде и ацетонитри- ла в качестве подвижной фазы, колонки Discovery Cyano и спектрофотометрической детекции при дли- не волны 254 нм. Методика позволяет использовать в 4–6 раз меньше органического растворителя в под- вижной фазе и проводить разделение за 8 мин. При проведении валидации проверены линейность, при- годность хроматографической системы, сходимость, Т а б л и ц я 3 Результати аналізу досліджуваних сиропів Сироп Кількісний вміст, мг/5 мл Метилпарабен Пропілпарабен Хофітол 5.1 2.6 Цитал 4.8 0.5 Флюколд сироп 6.3 0.4 Інстаріл 6.7 1.8 Кофанол 2.7 0.4 Кофекс 6.3 1.7 Колдакт 8.9 1.0 Алмагель 10.0 1.3 П р и м і т к а. Усі досліджувані сиропи відповідають специфікації виробника. Аналитическая химия 106 ISSN 0041-6045. УКР. ХИМ . ЖУРН . 2013. Т. 79, № 2 правильность, специфичность. Метод с успехом испо- льзован для определения парабенов в 8 сиропах ме- дицинского назначения. SUMMARY. A novel reversed-phase LC method using CN-propyl column has been developed and validated for the analysis of methylparaben and propylparaben in medical syrups of different composition. The chromato- graphic separation was achieved by HPLC using a mixture of 0.1 % orthophosphoric acid solution in water with ace- tonitrile as the mobile phase, a Discovery Cyano column and UV detection at 254 nm. The method was validated with respect to linearity, precision, accuracy, specificity. This method permits to use 4—6 times less of organic component in mobile phase and the separation has been carried out in 8 minutes. All the charesteristics examined met the current recommendations for HPLC method validation. The method was successfully used for determining both compounds in 8 medical syrups of different composition. ЛІТЕРАТУРА 1. Seong Ho Kang, Hasuck Kim // J. Pharm. Biomed Andl. -1997. -15, № 9–10. -P. 1359—1364. 2. Qunlin Z hang, M ei L ian, L ijuan L iu, Hua Cui // Anal. Chim. Acta. -2005. -537, № 1–2. -P. 31—39. 3. Hajkova R ., Solich P . // Ibid. -2002. -467, № 1–2. -P. 91—96. 4. Kreuz D.M ., Howard A .L ., Ip D . // J. Pharm. Biomed Andl. -1999. -19, № 5. -P. 725—735. 5. Hajkova R ., Solich P . // Ibid. -2003. -32, № 4–5. -P. 921—927. 6. Ali M .Sh., Chaudhary R .S ., Takieddin M .A . // Drug Development and Industrial Pharmacy. -1999. -25, № 10. -P. 1143—1147. 7. Kokolets M .X ., Kafkala S ., Tsiaganis M . // J. Pharm. Biomed Andl. -2005. -38, № 4. -P. 763—767. 8. Sottofattori E., Anzaldi M ., Balbi A ., Tonello G . // Ibid. -1998. -18, № 1–2. -P. 213—217. 9. M a M ., Lee T ., Kwong E. // J. Pharm. Sci. -2002. -91, № 7. -P. 1715—1723. 10. Державна фармакопея України. Доп. 3. -Харків, 2009. -С. 37. 11. Гризодуб А .И ., Леоньтьев Д.А ., Денисенко Н .В., Подпружников Ю.В. // Фармаком. -2004. -№ 3. -C. 3—17. 12. Гризодуб А .И ., Леоньтьев Д.А ., Доценко Т .Н ., Заго- рий В.А // Там же. -2005. -№ 2–3. -C. 78—94. 13. Гризодуб А .И . // Там же. -2006. -№ 4. -С. 35—44. 14. M archand D.H., Croes K., Dolan J.W ., Snyder L .R . // J. Chromatogr. A. -2005. -1062. -P. 57—64. 15. Shabir G.A . // Ibid. -2003. -987. -P. 57—66. Київський національний університет Надійшла 03.09.2012 ім. Тараса Шевченка ДП Центральна лабораторія з аналізу якості лікарських засобів і медичної продукції, Київ ISSN 0041-6045. УКР. ХИМ . ЖУРН . 2013. Т. 79, № 2 107

Хроматографічне визначення парабенів

Institution

Similar Items