Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз

Исследована модификация изоферментного спектра основных пероксидаз (ПО) при реализации генетических программ де- и дифференциации клеток разных тканей Nicotiana tabacum. Установлено, что большинство изоформ ПО листового и стеблевого эксплантов табака обладают тканеспецифичностью, и это свойство сохр...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів
Date:2009
Main Authors: Кузовкова, А.А., Фоменко, Т.И., Бердичевец, Л.Г.
Format: Article
Language:Russian
Published: Українське товариство генетиків і селекціонерів ім. М.І. Вавилова 2009
Subjects:
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/18899
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз / А.А. Кузовкова, Т.И. Фоменко, Л.Г. Бердичевец // Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів. — 2009. — Т. 7, № 2. — С. 211-217. — Бібліогр.: 6 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-18899
record_format dspace
spelling Кузовкова, А.А.
Фоменко, Т.И.
Бердичевец, Л.Г.
2011-04-11T20:32:55Z
2011-04-11T20:32:55Z
2009
Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз / А.А. Кузовкова, Т.И. Фоменко, Л.Г. Бердичевец // Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів. — 2009. — Т. 7, № 2. — С. 211-217. — Бібліогр.: 6 назв. — рос.
1810-7834
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/18899
582.951.4:581.143.6:577.1
Исследована модификация изоферментного спектра основных пероксидаз (ПО) при реализации генетических программ де- и дифференциации клеток разных тканей Nicotiana tabacum. Установлено, что большинство изоформ ПО листового и стеблевого эксплантов табака обладают тканеспецифичностью, и это свойство сохраняется в первичных дедифференцированных тканях, полученных из данных эксплантов. Процессы морфогенеза в листовом каллусе сопровождаются инициацией экспрессии специфических ПО, не обнаруживаемых в данных условиях в стеблевом каллусе. Выявлены изоформы, общие для процессов дифференциации и дедифференциации клеток, и изоформы – маркеры этих процессов. ПО с Rf 0,14 и 0,21 являются маркерами дедифференциации, а ПО с Rf 0,26; 0,51 и 0,65 – полной дифференциации клеток табака.
Досліджено модифікацію ізоферментного спектра основних пероксидаз (ПО) при реалізації генетичних програм де- і диференціації клітин різних тканин Nіcotіana tabacum. Установлено, що більшість ізоформ ПО листового й стеблового експлантів тютюну є тканиноспецифічними, і ця властивість зберігається в первинних дедиференційованих тканинах, отриманих із даних експлантів. Процеси морфогенезу в листовому калюсі супроводжуються ініціацією експресії специфічних ПО, які не виявляють у даних умовах у стебловому калюсі. Виявлені ізоформи, загальні для процесів диференціації й дедиференціації клітин, і ізоформи - маркери цих процесів. ПО з Rf 0,14 і 0,21 є маркерами дедиференціації, а ПО з Rf 0,26; 0,51 і 0,65 – повної диференціації клітин тютюну.
Modification of isoenzyme spectrum for basic peroxidases (BP) upon realization of cell de- and differentiation genetic programs in various tissues of Nicotiana tabacum has been studied. Most BP isoforms of leaf and stem tobacco explants were found to exhibit tissue specifity and this property is maintained in the primary dedifferentiated rissues, derived from these explants. Morphogenesis events in leaf callus are accompanied by initiation of specific BP expression, not found in stem callus under the same conditions. There were revealed isoforms shared by the processes of cell differentiation and dedifferentiation and isoforms that present markers of these processes. BP with Rf 0,14 and 0,21 appear to be markers of dedifferentiation, while BP with Rf 0,26; 0,51 and 0,65 suggests the complete tobacco cell differentiation.
ru
Українське товариство генетиків і селекціонерів ім. М.І. Вавилова
Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів
Оригінальні статті
Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
Спряженість процесів де- і диференціації клітин Nіcotіana tabacum з модифікацією експресії генів пероксидаз
Contingency of de- and differentiation processes of Nicotiana tabacum cells with modification of peroxidase gene expression
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
spellingShingle Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
Кузовкова, А.А.
Фоменко, Т.И.
Бердичевец, Л.Г.
Оригінальні статті
title_short Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
title_full Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
title_fullStr Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
title_full_unstemmed Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
title_sort сопряженность процессов де- и дифференциации клеток nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз
author Кузовкова, А.А.
Фоменко, Т.И.
Бердичевец, Л.Г.
author_facet Кузовкова, А.А.
Фоменко, Т.И.
Бердичевец, Л.Г.
topic Оригінальні статті
topic_facet Оригінальні статті
publishDate 2009
language Russian
container_title Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів
publisher Українське товариство генетиків і селекціонерів ім. М.І. Вавилова
format Article
title_alt Спряженість процесів де- і диференціації клітин Nіcotіana tabacum з модифікацією експресії генів пероксидаз
Contingency of de- and differentiation processes of Nicotiana tabacum cells with modification of peroxidase gene expression
description Исследована модификация изоферментного спектра основных пероксидаз (ПО) при реализации генетических программ де- и дифференциации клеток разных тканей Nicotiana tabacum. Установлено, что большинство изоформ ПО листового и стеблевого эксплантов табака обладают тканеспецифичностью, и это свойство сохраняется в первичных дедифференцированных тканях, полученных из данных эксплантов. Процессы морфогенеза в листовом каллусе сопровождаются инициацией экспрессии специфических ПО, не обнаруживаемых в данных условиях в стеблевом каллусе. Выявлены изоформы, общие для процессов дифференциации и дедифференциации клеток, и изоформы – маркеры этих процессов. ПО с Rf 0,14 и 0,21 являются маркерами дедифференциации, а ПО с Rf 0,26; 0,51 и 0,65 – полной дифференциации клеток табака. Досліджено модифікацію ізоферментного спектра основних пероксидаз (ПО) при реалізації генетичних програм де- і диференціації клітин різних тканин Nіcotіana tabacum. Установлено, що більшість ізоформ ПО листового й стеблового експлантів тютюну є тканиноспецифічними, і ця властивість зберігається в первинних дедиференційованих тканинах, отриманих із даних експлантів. Процеси морфогенезу в листовому калюсі супроводжуються ініціацією експресії специфічних ПО, які не виявляють у даних умовах у стебловому калюсі. Виявлені ізоформи, загальні для процесів диференціації й дедиференціації клітин, і ізоформи - маркери цих процесів. ПО з Rf 0,14 і 0,21 є маркерами дедиференціації, а ПО з Rf 0,26; 0,51 і 0,65 – повної диференціації клітин тютюну. Modification of isoenzyme spectrum for basic peroxidases (BP) upon realization of cell de- and differentiation genetic programs in various tissues of Nicotiana tabacum has been studied. Most BP isoforms of leaf and stem tobacco explants were found to exhibit tissue specifity and this property is maintained in the primary dedifferentiated rissues, derived from these explants. Morphogenesis events in leaf callus are accompanied by initiation of specific BP expression, not found in stem callus under the same conditions. There were revealed isoforms shared by the processes of cell differentiation and dedifferentiation and isoforms that present markers of these processes. BP with Rf 0,14 and 0,21 appear to be markers of dedifferentiation, while BP with Rf 0,26; 0,51 and 0,65 suggests the complete tobacco cell differentiation.
issn 1810-7834
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/18899
citation_txt Сопряженность процессов де- и дифференциации клеток Nicotiana tabacum с модификацией экспрессии генов пероксидаз / А.А. Кузовкова, Т.И. Фоменко, Л.Г. Бердичевец // Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів. — 2009. — Т. 7, № 2. — С. 211-217. — Бібліогр.: 6 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT kuzovkovaaa soprâžennostʹprocessovdeidifferenciaciikletoknicotianatabacumsmodifikacieiékspressiigenovperoksidaz
AT fomenkoti soprâžennostʹprocessovdeidifferenciaciikletoknicotianatabacumsmodifikacieiékspressiigenovperoksidaz
AT berdičeveclg soprâžennostʹprocessovdeidifferenciaciikletoknicotianatabacumsmodifikacieiékspressiigenovperoksidaz
AT kuzovkovaaa sprâženístʹprocesívdeídiferencíacííklítinnícotíanatabacumzmodifíkacíêûekspresíígenívperoksidaz
AT fomenkoti sprâženístʹprocesívdeídiferencíacííklítinnícotíanatabacumzmodifíkacíêûekspresíígenívperoksidaz
AT berdičeveclg sprâženístʹprocesívdeídiferencíacííklítinnícotíanatabacumzmodifíkacíêûekspresíígenívperoksidaz
AT kuzovkovaaa contingencyofdeanddifferentiationprocessesofnicotianatabacumcellswithmodificationofperoxidasegeneexpression
AT fomenkoti contingencyofdeanddifferentiationprocessesofnicotianatabacumcellswithmodificationofperoxidasegeneexpression
AT berdičeveclg contingencyofdeanddifferentiationprocessesofnicotianatabacumcellswithmodificationofperoxidasegeneexpression
first_indexed 2025-11-25T23:10:40Z
last_indexed 2025-11-25T23:10:40Z
_version_ 1850579324050079744
fulltext ISSN 1810­7834. ³ñí. Óêð. тоâ­âà ãåíåтèê³â ³ ñåëåêö³оíåð³â. 2009, том 7, № 2 211 © à.à.êóЗîâêîâà (ëåÍåö), ò.è.ÔîìåÍêî, ë.ã. Áåðäè×åâåö, 2009 óäê 582.951.4:581.143.6:577.1 ÑÎпряЖеÍÍÎÑÒь прÎцеÑÑÎв де‑ и диффереÍциАции клеÒÎк NicotiaNa tabacum Ñ ÌÎдификАцией экÑпреÑÑии ГеÍÎв перÎкÑидАÇ à.à.êóЗîâêîâà (ëåÍåö), ò.è.ÔîìåÍêî, ë.ã. Áåðäè×åâåö ãÍó “öåíòðàëьíûé áîòàíè÷åñêèé ñàä ÍàÍ Áåëàðуñè” Áåëàðуñь, 220012, ã. ìèíñê, уë. ñуðãàíîâà, 2â e­mail: cbg@it.org.by Èññëåäоâàíà моäèôèêàöèÿ èçоôåðмåíтíоãо ñïåêтðà оñíоâíыõ ïåðоêñèäàç (ÏÎ) ïðè ðåàëèçàöèè ãåíåтè÷åñêèõ ïðоãðàмм äå­ è äèôôåðåíöèàöèè êëåтоê ðàçíыõ тêàíåé Nicotiana tabacum. Óñтàíоâëåíо, ÷то боëüøèíñтâо èçоôоðм ÏÎ ëèñтоâоãо è ñтåбëå­ âоãо эêñïëàíтоâ тàбàêà обëàäàþт тêàíåñïåöèôè÷íоñтüþ, è это ñâоéñтâо ñоõðàíÿåт­ ñÿ â ïåðâè÷íыõ äåäèôôåðåíöèðоâàííыõ тêàíÿõ, ïоëó÷åííыõ èç äàííыõ эêñïëàíтоâ. Ïðоöåññы моðôоãåíåçà â ëèñтоâом êàëëóñå ñоïðоâоæäàþтñÿ èíèöèàöèåé эêñïðåññèè ñïåöèôè÷åñêèõ ÏÎ, íå обíàðóæèâàåмыõ â äàííыõ óñëоâèÿõ â ñтåбëåâом êàëëóñå. Âыÿâëåíы èçоôоðмы, общèå äëÿ ïðоöåññоâ äèôôåðåíöèàöèè è äåäèôôåðåíöèàöèè êëåтоê, è èçоôоðмы – мàðêåðы этèõ ïðоöåññоâ. ÏÎ ñ Rf 0,14 è 0,21 ÿâëÿþтñÿ мàðêåðà­ мè äåäèôôåðåíöèàöèè, à ÏÎ ñ Rf 0,26; 0,51 è 0,65 – ïоëíоé äèôôåðåíöèàöèè êëåтоê тàбàêà. Êëþ÷åâыå ñëоâà: тàбàê, äèôôåðåíöèðоâàííыå/äåäèôôåðåíöèðоâàííыå тêàíè, ïåðоêñèäàçы. вâåäåíèå. ìîëåêуëÿðíûå ìåõàíèçìû уðîâíÿ è íàïðàâëåííîñòè ãåíîìíîé èçìåí÷èâîñòè ñîìàòè÷åñêèõ êëåòîê ðàñòåíèé åùå íå âûÿñíåíû. ñуùå­ ñòâуåò íåñêîëьêî ïуòåé, ïî êîòîðûì ìîæåò èäòè ðàçâèòèå êëåòêè ïîñëå åå äå­ äèôôåðåíöèðîâêè. Пåðâûé ïуòь – ýòî âòîðè÷íàÿ ðåãåíåðàöèÿ öåëîãî ðàñòå­ íèÿ, âîçìîæíàÿ äèôôåðåíöèðîâêà íà уðîâíå êëåòîê, òêàíåé, îðãàíîâ. âòîðîé ïуòь – ýòî уòðàòà êëåòêîé ñïîñîáíîñòè ê âòîðè÷íîé äèôôåðåíöèðîâêå è ðåãå­ íåðàöèè ðàñòåíèÿ, ñòîéêàÿ äåäèôôåðåíöèðîâêà, ïðèîáðåòåíèå ñïîñîáíîñòè ðàñòè íà ñðåäå áåç ãîðìîíîâ, ò.å. ïðåâðàùåíèå â îïуõîëåâуþ. òàêèìè ñâîé­ ñòâàìè ÷àñòî õàðàêòåðèçуþòñÿ ñòàðûå ïåðåñàäî÷íûå êуëьòуðû. òðåòèé ïуòь – ýòî íîðìàëьíûé öèêë ðàçâèòèÿ êàëëуñíîé êëåòêè, çàêàí÷èâàþùèéñÿ åå ñòàðå­ íèåì è îòìèðàíèåì. îäíàêî òàêàÿ äèôôåðåíöèðîâêà íå âåäåò ê ìîðôîãåíåçу, à çàêðåïëÿåò çà íåé ñâîéñòâà ñòàðîé êàëëуñíîé êëåòêè [1,2]. öåëьþ èññëåäîâàíèé ÿâèëîñь èçу÷åíèå ìîëåêуëÿðíûõ ìåõàíèçìîâ ïåðå­ êëþ÷åíèÿ ãåíåòè÷åñêèõ ïðîãðàìì ðàçâèòèÿ ðàñòåíèÿ íà ïðèìåðå òêàíåé òàáà­ êà in vitro, ïðîõîäÿùèõ öèêë ðàçâèòèÿ îò äèôôåðåíöèðîâêè ÷åðåç äëèòåëьíûé ýòàï äåäèôôåðåíöèðîâêè ê íîâîé äèôôåðåíöèðîâêå, ÷òî ñîïðÿæåíî ñ: 1) îñòàíîâêîé ðåàëèçàöèè ðàíåå äåéñòâîâàâøåé ïðîãðàììû äèôôåðåíöèà­ öèè òêàíåé; 2) ïåðåñòðîéêîé íà íîâуþ ïðîãðàììу ðàçâèòèÿ – äåäèôôåðåíöèà­ öèþ êëåòîê (íåîðãàíèçîâàííûé ðîñò êàëëуñà); 3) îñуùåñòâëåíèåì ïðîãðàììû ISSN 1810­7834. ³ñí. Óêð. тоâ­âà ãåíåтèê³â ³ ñåëåêö³оíåð³â. 2009, том 7, № 2212 А.А.Кузовковà (Леíец), Т.И.Фомеíко, Л.Г. Беðдèчевец ïðè òåìïåðàòуðå 22 – 25îñ, îñâåùåííîñ­ òè 3–5 òûñ. ëê. ñâåòîâîé äåíь – 16 ÷. îá­ ðàçîâàíèå ïåðâè÷íîãî êàëëуñà èíäуöè­ ðîâàëè ïåðåíîñîì ëèñòîâûõ è ñòåáëåâûõ ýêñïëàíòîâ íà ñðåäу ìñ, ñîäåðæàùуþ 1 ìã/ë èóê è 0,1 ìã/ã ÁàП, ñ ïîñëåäуþùèì ïàññèðîâàíèåì êàëëуñîâ íà ýòîé æå ñðå­ äå. ìîðôîãåíåç â êàëëуñå èíèöèèðîâàëè è ïîääåðæèâàëè íà ñðåäå ìñ ñ 2 ìã/ë ÁàП è 0,1 ìã/ë èóê. Эêñòðàêöèþ èçîôîðì îñíî­ âíîé Пî âåëè ïî ìåòîäу ñàôîíîâûõ [4] ñ íàøèìè ìîäèôèêàöèÿìè, èñïîëьçуÿ 50 ìì òðèñ­Íñl (ðÍ 7,6) áуôåð ñ 5 ìì àñêîðáà­ òà. ñîäåðæàíèå áåëêà â îáðàçöàõ îïðåäå­ ëÿëè ïî Bredford [5]. â êàæäîì îòäåëьíîì ýêñïåðèìåíòå âñå îáðàçöû уðàâíèâàëèñь ïî áåëêу. Эëåêòðîôîðåòè÷åñêîå ðàçäåëå­ íèå Пî ïðîâîäèëè â 7,5 % Пààãå â íàòèâ­ íîé ùåëî÷íîé ñèñòåìå. àêòèâíîñòь Пî â ãåëå îáíàðуæèâàëè áåíçèäèíîâûì ìåòî­ äîì ñàôîíîâûõ [4] â ìîäèôèêàöèè ×àÿíî­ âîé è õàâêèíà [6], èñïîëьçуÿ íà âñåõ ýòàïàõ 0,1ì àöåòàòíûé áуôåð ðÍ 4,5. óðîâåíь àê­ òèâíîñòè îòäåëьíûõ èçîôîðì Пî îöåíè­ âàëè ñ ïîìîùьþ ïðîãðàììû SigmaGel ïî äàííûì äåíñèòîìåòðèðîâàíèÿ. рåзуëüòàòы è îáñужäåíèå Пîëу÷åííûå ðåçуëьòàòû ïîêàçà­ ëè, ÷òî êëåòêè ëèñòîâîãî è ñòåáëåâîãî ýêñïëàíòîâ, âçÿòûõ ñ 40­äíåâíûõ ðàñòå­ íèé òàáàêà, õàðàêòåðèçуþòñÿ ïðàêòè÷åñ­ êè îäèíàêîâûì íàáîðîì (ñîîòâåòñòâåí­ íî, 13 è 12) èçîôîðì îñíîâíûõ Пî ñ Rf îò 0,02 äî 0,65, ðàçëè÷àþùèõñÿ ïî уðîâíÿì àêòèâíîñòè (ðèñ. 1, à). ñòåáëåâîé ýêñïëàíò íå ýêñïðåññèðуåò èçîôîðìу ñ Rf 0,59 èç ëèñòîâîãî ñïåêòðà, êîòîðàÿ, òàêèì îáðà­ çîì, ìîæåò áûòь ìàðêåðîì ëèñòîâûõ òêà­ íåé òàáàêà. â êëåòêàõ ëèñòà íàèâûñøåé àê­ òèâíîñòьþ îáëàäàþò Пî ñ Rf 0,47 è 0,52, à â êëåòêàõ ñòåáëÿ – ñ Rf 0,45 è 0,50. Íà ñðåäíåì уðîâíå â ëèñòå ýêñïðåññèðуþòñÿ èçîôîðìû ñ Rf 0,11; 0,17; 0,56 è 0,65, òîã­ äà êàê â ñòåáëå îíè ìàëîàêòèâíû. è, íàî­ íåîðãàíèçîâàííîãî ðîñòà è 4) ïåðåõîäîì ê ïðîãðàììå äèôôåðåíöèðîâêè ïðè ñîçäà­ íèè ñîîòâåòñòâуþùèõ уñëîâèé äëÿ ïðî­ õîæäåíèÿ ìîðôîãåíåçà. Пðè ýòîì ïðåêðà­ ùåíèå îäíîé è ðåàëèçàöèÿ äðуãîé ïðî­ ãðàìì ðàçâèòèÿ ðàñòèòåëьíûõ òêàíåé, êàê èçâåñòíî, ñîïðîâîæäàåòñÿ èçìåíåíèåì ýêñïðåññèè ÿäåðíûõ ãåíîâ è ïëàçìîãåíîâ ðàñòåíèé. Íàøå âíèìàíèå уäåëÿëîñь ñå­ ìåéñòâу ãåíîâ Пî, ýêñïðåññèÿ êîòîðûõ, êàê уñòàíîâëåíî, êîíòðîëèðуåòñÿ ôàêòîðà­ ìè ðàçâèòèÿ [3]. îöåíêу ýêñïðåññèè ãåíîâ Пî ïðîâîäèëè ïî àêòèâíîñòè èõ áåëêîâî­ ãî ïðîäуêòà, àíàëèçèðуÿ èçîôåðìåíòíûå ñïåêòðû. èñïîëьçîâàíèå ëèñòîâûõ è ñòåáëåâûõ ýêñïëàíòîâ äàëî âîçìîæíîñòь âûÿâèòь îñîáåííîñòè ýêñïðåññèè ãåíîâ in vitro â çàâèñèìîñòè îò òèïà ýêñïëàíòà. Ìàòåðèàëы è ìåòîäы Íàìè èññëåäîâàëèñь èçîôåðìåíòíûå ñïåêòðû îñíîâíûõ Пî èç îáùåé ôðàêöèè ëåãêîðàñòâîðèìûõ áåëêîâ ëèñòîâîé è ñòå­ áëåâîé òêàíè Nicotiana tabacum ðàçíîé ñòåïåíè äèôôåðåíöèðîâàííîñòè: 1) ëèñ­ òîâîé è ñòåáëåâîé ýêñïëàíòû (ïîëíîñòьþ äèôôåðåíöèðîâàííûå òêàíè), ïîëу÷åííûå èç in vitro ðàñòåíèé; 2) ïåðâè÷íûé êàë­ ëуñ (äåäèôôåðåíöèðîâàííàÿ òêàíь ñ î÷àãàìè äèôôåðåíöèðîâàííîé òêàíè), ïîëу÷åííûé èç ëèñòîâîãî è ñòåáëåâî­ ãî ýêñïëàíòîâ íà ñðåäå äëÿ êàëëуñîãåíå­ çà; 3) äëèòåëьíîêуëьòèâèðуåìûé êàëëуñ (äê– ïîëíîñòьþ äåäèôôåðåíöèðîâàííàÿ òêàíь), ïîëу÷åííûé â õîäå ìíîãîêðàòíûõ ïàññàæåé (40, 52 è 58 ïàññàæåé) ïåðâè÷­ íîãî êàëëуñà è 4) äê, ïàññèðуåìûé íà ìîðôîãåííуþ ñðåäу (2 ïàññàæà) (äåäèô­ ôåðåíöèðîâàííàÿ òêàíь ñ î÷àãàìè ðåäèô­ ôåðåíöèðîâàííîé òêàíè ðàçíîé ñòåïåíè âûðàæåííîñòè). äëÿ àíàëèçà èñïîëьçîâàëè ëèñòьÿ è ñòåáëè 40­äíåâíûõ ðàñòåíèé òàáàêà, âûðàùåííûõ â êîëáàõ â ñòåðèëьíûõ уñëî­ âèÿõ íà 1/2 ñðåäå ìуðàñèãå – ñêуãà (ìñ) ISSN 1810­7834. ³ñí. Óêð. тоâ­âà ãåíåтèê³â ³ ñåëåêö³оíåð³â. 2009, том 7, № 2 213 Сопðяжеííоñòü пðоцеññов де- è дèффеðеíцèàцèè кëеòок Nicotiana tabacum ñ... êëåòîê òàáàêà. äàííûå êàëëуñû ïðîÿâ­ ëÿþò ãëàâíûå îòëè÷èòåëьíûå ÷åðòû ñâî­ èõ “ðîäèòåëьñêèõ” äèôôåðåíöèðîâàííûõ êëåòîê. îäíàêî ïðè ýòîì èç ñïåêòðà Пî ëèñòîâîé òêàíè òàáàêà íèâåëèðîâàëèñь 4 èçîôîðìû, à èç ñïåêòðà ñòåáëåâîé – 6. Пîêàçàíî, ÷òî ýêñïðåññèÿ Пî ñ Rf 0,26 è 0,51 õàðàêòåðíà òîëьêî äëÿ ïîëíîñ­ òьþ äèôôåðåíöèðîâàííûõ òêàíåé ëèñòà è ñòåáëÿ, à уðîâåíь àêòèâíîñòè èçîôîðìû ñ Rf 0,65 ñíèçèëñÿ â ïåðâè÷íûõ êàëëуñàõ ïî ñðàâíåíèþ ñ ëèñòîâûì è ñòåáëåâûì ýêñïëàíòàìè. Эòî ïîçâîëÿåò ñ÷èòàòь Пî ñ Rf 0,26; 0,51 è 0,65 îñîáåííîñòьþ ïî­ ëíîñòьþ äèôôåðåíöèðîâàííûõ òêàíåé òà­ áàêà. â òî æå âðåìÿ â ëèñòîâîì ýêñïëàíòå èíèöèàöèÿ êàëëуñîãåíåçà èíäуöèðîâà­ ëà àêòèâíîñòь íîâîé èçîôîðìû ñ Rf 0,21, ÷åãî íå íàáëþäàëîñь äëÿ ïåðâè÷íîãî êàë­ ëуñà èç ñòåáëåâîãî ýêñïëàíòà. îäíà­ êî ñëåäуåò уêàçàòь, ÷òî äàííàÿ Пî ñòàëà áîðîò, â ñòåáëåâîì ýêñïëàíòå Пî ñ Rf 0,02 è 0,61 èìåþò ñðåäíþþ àêòèâíîñòь, à â ëèñ­ òîâîì – îíè îòíîñÿòñÿ ê ìèíîðíûì ôðàêöè­ ÿì. âñå ýòî ïîçâîëÿåò ñ÷èòàòь ýêñïðåññèþ âûøåîïèñàííûõ èçîôîðì òêàíåñïåöè­ ôè÷íîé. òîëьêî èçîôîðìû ñ Rf 0,26 è 0,51 èìåþò îäèíàêîâûé уðîâåíь àêòèâíîñòè êàê â ëèñòå, òàê è â ñòåáëå òàáàêà. äàííûå èçîôåðìåíòíûå ñïåêòðû ëèñòîâîãî è ñòå­ áëåâîãî ýêñïëàíòîâ, ïðåäñòàâëåííûå ïî­ ëíîñòьþ äèôôåðåíöèðîâàííûìè òêàíÿ­ ìè òàáàêà, èñïîëьçîâàëèñь íàìè äàëåå â êà÷åñòâå ýòàëîíîâ, ñ êîòîðûìè ñðàâíèâà­ ëèñь ñïåêòðû Пî èç òêàíåé òàáàêà äðуãèõ ñòåïåíåé äèôôåðåíöèðîâàííîñòè. êàê ïîêàçàëè ðåçуëьòàòû èññëåäîâàíèé àêòèâíîñòè îñíîâíûõ Пî â ïåðâè÷íûõ êàë­ ëуñàõ, ïîëу÷åííûõ èç ëèñòîâîãî è ñòåáëå­ âîãî ýêñïëàíòîâ (ðèñ. 1, á), òêàíåñïåöèôè÷­ íîñòь ýêñïðåññèè èçîôîðì Пî ñîõðàíÿåò­ ñÿ è ïðè èíèöèàöèè äåäèôôåðåíöèàöèè à б â рèñ. 1. èçîôåðìåíòíûå ñïåêòðû îñíîâíûõ Пî ýêñïëàíòîâ è êàëëуñíûõ (ïåðâè÷íûõ è äëèòåëьíîêуëьòèâèðуåìûõ) òêàíåé Nicotiana tabacum: à – ýêñïëàíòû, á – ïåðâè÷íàÿ êàëëуñíàÿ òêàíь, â – äëèòåëьíîïàññèðуåìàÿ êàëëуñíàÿ òêàíь. ë – ëèñòîâîé êàëëуñ, ñ – ñòåáëåâîé êàëëуñ, Rf – îòíîñèòåëьíàÿ ýëåêòðîôîðåòè÷åñêàÿ ïîäâèæíîñòь áåëêîâ ISSN 1810­7834. ³ñí. Óêð. тоâ­âà ãåíåтèê³â ³ ñåëåêö³оíåð³â. 2009, том 7, № 2214 А.А.Кузовковà (Леíец), Т.И.Фомеíко, Л.Г. Беðдèчевец òêàíÿì ëèñòà è ñòåáëÿ òàáàêà, õîòÿ åå ýêñïðåññèÿ ñ уâåëè÷åíèåì êîëè÷åñòâà ïàññàæåé íåñêîëьêî уìåíьøàåòñÿ. Пîêà­ çàíà îáðàòíàÿ çàâèñèìîñòь ìåæäу êîëè÷å­ ñòâîì èçîôîðì îñíîâíîé Пî â ïåðâè÷íûõ è äëèòåëьíîêуëьòèâèðуåìûõ êàëëуñàõ ðàç­ íîé ïðèðîäû. Пðè ïåðåõîäå ëèñòîâûõ è ñòåáëåâûõ òêàíåé òàáàêà îò ïðîãðàììû ïðîäîëæè­ òåëьíîãî íåîðãàíèçîâàííîãî ðîñòà êëåòîê ê ïðîãðàììå ðåäèôôåðåíöèðîâêè (÷åðåç 2 íåäåëè êуëьòèâèðîâàíèÿ êàëëуñà â òåì­ íîòå íà ìîðôîãåííîé ñðåäå) ïðîäîëæàë­ ñÿ áûñòðûé ïðèðîñò ìàññû êàëëуñà áåç ïðîÿâëåíèÿ ìîðôîðãåíåçà. îäíàêî äëÿ ëèñòîâûõ è ñòåáëåâûõ êàëëуñîâ âñåõ ïàñ­ ñàæåé (ðèñ. 2, à) ïîêàçàíà ìîäèôèêàöèÿ ýêñïðåññèè 5 èçîôîðì Пî ñ Rf îò 0,02 äî 0,21, ÷òî îòðàæàåò ïåðåêëþ÷åíèå íà íî­ âуþ ãåíåòè÷åñêуþ ïðîãðàììу ðàçâèòèÿ. ýêñïðåññèðîâàòьñÿ â ñòåáëåâîì êàëëуñå ïðè åãî ìíîãîêðàòíûõ ïàññàæàõ íà ñðåäу äëÿ ïîääåðæàíèÿ êàëëуñîãåíåçà. Эòî ïî­ çâîëÿåò åé ïðåòåíäîâàòь íà ðîëь ìîëåêу­ ëÿðíîãî ìàðêåðà êàëëуñîãåíåçà â òàáàêå. Пîñëå ìíîãîêðàòíîãî ïàññèðîâàíèÿ êàëëуñíîé òêàíè òàáàêà íà ñðåäу äëÿ ïîä­ äåðæàíèÿ êàëëуñîãåíåçà (40, 52 è 58 ïàñ­ ñàæåé) íàìè áûëà ïîëу÷åíà уíèêàëьíàÿ ìîäåëьíàÿ òêàíь (äê), â êîòîðîé ðåàëèçу­ åòñÿ òîëьêî ãåíåòè÷åñêàÿ ïðîãðàììà ôуíê­ öèîíèðîâàíèÿ äåäèôôåðåíöèðîâàííûõ êëåòîê. Áëàãîäàðÿ ýòîé ìîäåëьíîé òêà­ íè âûÿâëåíî (ðèñ. 1, â), ÷òî èñòèííûì ìàðêåðîì ïðîöåññîâ äåäèôôåðåíöèà­ öèè êëåòîê òàáàêà ìîæåò ñëуæèòь òîëь­ êî èçîôîðìà Пî ñ Rf 0,14, ïîñêîëьêу îíà ïðèñуùà èñêëþ÷èòåëьíî “÷èñòûì” äëèòåëьíîêуëьòèâèðуåìûì êàëëуñíûì à б рèñ. 2. èçîôåðìåíòíûå ñïåêòðû îñíîâíûõ Пî äëèòåëьíîêуëьòèâèðуåìûõ òêàíåé Nicotiana tabacum, ïàññèðуåìûõ íà ìîðôîãåííуþ ñðåäу (ïàññàæ №1): à – 2 íåäåëè êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå (ïàññàæ № 1), á – 4 íå­ äåëè êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå (ïàññàæ № 1). ë – ëèñòîâîé êàëëуñ, ñ – ñòåáëåâîé êàëëуñ, Rf – îòíî­ ñèòåëьíàÿ ýëåêòðîôîðåòè÷åñêàÿ ïîäâèæíîñòь áåëêîâ ISSN 1810­7834. ³ñí. Óêð. тоâ­âà ãåíåтèê³â ³ ñåëåêö³оíåð³â. 2009, том 7, № 2 215 Сопðяжеííоñòü пðоцеññов де- è дèффеðеíцèàцèè кëеòок Nicotiana tabacum ñ... çà, ò.å. ÷åðåç 4 íåäåëè êуëьòèâèðîâàíèÿ äëèòåëьíîïàññèðуåìîãî êàëëуñà òàáàêà íà ìîðôîãåííîé ñðåäå â êëåòêàõ ïðåâàëè­ ðуåò ðåàëèçàöèÿ ãåíåòè÷åñêîé ïðîãðàììû äèôôåðåíöèàöèè. ñëåäуåò уêàçàòь, ÷òî, â öåëîì, â êëåòêàõ ëèñòîâûõ è ñòåáëåâûõ êàëëуñîâ âñåõ âîçðàñòîâ íà äàííîì ýòàïå ìîðôîãåíåçà ýêñïðåññèðуåòñÿ ìåíь­ øåå êîëè÷åñòâî èçîôîðì Пî, ÷åì íà ïðåäûäуùåé ñòàäèè. èíòåðåñíà èçîôîð­ ìà ñ Rf 0,50, îáíàðуæåííàÿ â ëèñòîâîì êàëëуñå 58­ãî ïàññàæà — íàèáîëåå ñòà­ ðîì èç èññëåäуåìûõ. êàê ïîêàçàëè äàëь­ íåéøèå èññëåäîâàíèÿ, â ëèñòîâîì êàëëу­ ñå 52­ãî ïàññàæà îíà âïåðâûå íà÷èíàåò ýêñïðåññèðîâàòьñÿ òîëьêî ÷åðåç 6 íåäåëь êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå (ðèñ. 3, à), à â êàëëуñå òàáàêà 40­ãî ïàñ­ ñàæà — ÷åðåç 14 íåäåëь (ðèñ. 3, á). âèäè­ ìî, âðåìÿ íà÷àëà ýêñïðåññèè èçîôîðìû Пî ñ Rf 0,50 îïðåäåëÿåòñÿ âîçðàñòîì äåäèôôåðåíöèðîâàííûõ êëåòîê, è äàííàÿ Пî ñâÿçàíà ñ ïðåîäîëåíèåì êëåòêîé ïðî­ â уñëîâèÿõ èíèöèàöèè ìîðôîãåíåçà â ëèñòîâîì äëèòåëьíîïàññèðуåìîì êàë­ ëуñå ïðîèçîøëî ñуùåñòâåííîå уâåëè­ ÷åíèå àêòèâíîñòè èçîôîðìû ñ Rf 0,11, âûñîêèé уðîâåíь êîòîðîé ñîõðàíÿåòñÿ â òå÷åíèå âñåãî ñðîêà êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå, ÷òî ïîçâîëÿåò ñ÷è­ òàòь åå ìàðêåðîì èíèöèàöèè è ðàçâèòèÿ ìîðôîãåííûõ ïðîöåññîâ â òàáàêå. Пîäîá­ íîãî ñâîéñòâà Пî ñ Rf 0,11 â ñòåáëåâûõ òêàíÿõ òàáàêà îáíàðуæåíî íå áûëî. â òå÷åíèå ñëåäуþùèõ 2­õ íåäåëь êуëь­ òèâèðîâàíèÿ (â öåëîì — 4 íåäåëè) íà ìîðôîãåííîé ñðåäå ïîÿâèëèñь ïåðâûå âèçуàëьíûå ïðèçíàêè èíèöèàöèè ìîð­ ôîãåíåçà â ëèñòîâîì êàëëуñå â âèäå î÷à­ ãîâ уïëîòíåíèÿ êëåòîê ëèøь â 40­ì è 52­ì ïàññàæàõ, à òðàíñôîðìàöèÿ ñïåêòðà Пî ïðîèñõîäèëà â êàëëуñàõ ëþáîãî ïðîèñ­ õîæäåíèÿ è âîçðàñòà (ðèñ. 2, á). òàê, èç èçîôåðìåíòíûõ ñïåêòðîâ ëèñòîâûõ è ñòåáëåâûõ êàëëуñîâ òàáàêà èñ÷åçàåò Пî ñ Rf 0,14 — ôåðìåíò­ìàðêåð êàëëуñîãåíå­ à б рèñ. 3. èçîôåðìåíòíûå ñïåêòðû îñíîâíûõ Пî äëèòåëьíîêуëьòèâèðуåìûõ òêàíåé Nicotiana tabacum, ïàññèðуåìûõ íà ìîðôîãåííуþ ñðåäу (ïàññàæ №2): à – 6 íåäåëь êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå (ïàññàæ № 2), á – 14 íåäåëь êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå (ïàññàæ № 3). ë – ëèñòîâîé êàëëуñ, ñ – ñòåáëåâîé êàëëуñ, Rf – îòíîñèòåëьíàÿ ýëåêòðîôîðåòè÷åñêàÿ ïîäâèæíîñòь áåëêîâ ISSN 1810­7834. ³ñí. Óêð. тоâ­âà ãåíåтèê³â ³ ñåëåêö³оíåð³â. 2009, том 7, № 2216 А.А.Кузовковà (Леíец), Т.И.Фомеíко, Л.Г. Беðдèчевец ýòîì (ðèñ. 3, á), èçîôåðìåíòíûå ñïåêòðû Пî äàííûõ êàëëуñîâ, êðîìå ñòåáëåâîãî 58­ãî ïàññàæà, îáëàäàëè øèðîêèì íàáî­ ðîì èçîôîðì, ñâîéñòâåííûõ ëèñòîâîìу è ñòåáëåâîìу ýêñïëàíòàì, ñîîòâåòñòâåííî, ÷òî ãîâîðèò î âîçðàñòàíèè уðîâíÿ äèô­ ôåðåíöèðîâàííîñòè êëåòîê. â öåëîì, õà­ ðàêòåðèçуÿ ìîðôîãåíåç â äê ðàçíîãî ïðî­ èñõîæäåíèÿ, ìîæíî îòìåòèòь îáùèå òåí­ äåíöèè èçìåíåíèÿ ýêñïðåññèè îòäåëьíûõ èçîôîðì Пî ïðè ðàçâèòèè ìîðôîãåííûõ ïðîöåññîâ â ëèñòîâîé è ñòåáëåâîé êàëëуñ­ íîé òêàíè òàáàêà. выâîäы òàêèì îáðàçîì, уñòàíîâëåíî, ÷òî 1) áîëьøèíñòâî èçîôîðì îñíîâíûõ Пî â äèôôåðåíöèðîâàííûõ êëåòêàõ ëèñòîâî­ ãî è ñòåáëåâîãî ýêñïëàíòîâ òàáàêà îáëà­ äàþò òêàíåñïåöèôè÷íîñòьþ, è ýòî ñâîé­ ñòâî ñîõðàíÿåòñÿ у îòäåëьíûõ èçîôîðì â ïåðâè÷íûõ äåäèôôåðåíöèðîâàííûõ òêà­ íÿõ, ïîëу÷åííûõ èç äàííûõ ýêñïëàíòîâ; 2) ñуùåñòâуþò èçîôîðìû, îáùèå äëÿ ïðîöåññîâ äèôôåðåíöèàöèè è äåäèô­ ôåðåíöèàöèè êëåòîê, è èçîôîðìû – ìàðêåðû ýòèõ ïðîöåññîâ: à) Пî ñ Rf 0,14 è 0,21 – ìàðêåðíûå ôåðìåíòû äåäèô­ ôåðåíöèàöèè êëåòîê òàáàêà; á) â ñòå­ áëåâîì äëèòåëьíîïàññèðуåìîì êàëëу­ ñå âðåìÿ íà÷àëà ýêñïðåññèè èçîôîðìû Пî ñ Rf 0,50 íå îïðåäåëÿåòñÿ âîçðàñòîì äåäèôôåðåíöèðîâàííûõ êëåòîê, è äàí­ íàÿ Пî íå ñâÿçàíà ñ ïðåîäîëåíèåì êëåò­ êîé ïðîöåññîâ ñòàðåíèÿ, êàê ýòî ïîêàçà­ íî äëÿ ëèñòîâîãî êàëëуñà; â) Пî ñ Rf 0,11 ÿâëÿåòñÿ ìàðêåðîì èíèöèàöèè è ðàçâè­ òèÿ ìîðôîãåííûõ ïðîöåññîâ òîëьêî â ëèñ­ òîâîé òêàíè òàáàêà; ã) ýêñïðåññèÿ Пî ñ Rf 0,26; 0,51 è 0,65 – ýòî îñîáåííîñòь ïî­ ëíîñòьþ äèôôåðåíöèðîâàííûõ òêàíåé êàê ëèñòà, òàê è ñòåáëÿ òàáàêà; ä) èçîôîðìû îñíîâíûõ Пî ñ Rf 0,02; 0,17; 0,45; 0,47; 0,52 è 0,61 íå èìåþò ÷åòêîé ôуíêöèè è ÿðêî âûðàæåííîãî у÷àñòèÿ â ðåàëèçàöèè êàêîé­ òî îäíîé ïðîãðàììû ðàçâèòèÿ êëåòîê òà­ áàêà; 3) ñуùåñòâуåò îáðàòíàÿ çàâèñèìîñòь ìåæäу êîëè÷åñòâîì èçîôîðì îñíîâíûõ Пî â ïåðâè÷íûõ è äê ðàçíîé ïðèðîäû; 4) ìîð­ öåññîâ ñòàðåíèÿ è íåîáõîäèìà äëÿ âêëþ­ ÷åíèÿ êàêèõ­òî íà÷àëьíûõ ìåõàíèçìîâ þâåíèëèçàöèè êëåòîê, õîòÿ ïîäîáíîå íå õàðàêòåðíî äëÿ ñòåáëÿ. Пîñëå 4 íåäåëь êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå (ïàññàæ 1) êàëëуñû òàáàêà ïåðåíîñèëè íà ñâåæуþ ñðåäу (ïàñ­ ñàæ 2) äëÿ äàëьíåéøåãî ðàçâèòèÿ ìîð­ ôîãåíåçà. ×åðåç 6 íåäåëь êуëьòèâèðîâà­ íèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå (ïàññàæ 2) â òåìíîòå ëèñòîâûå êàëëуñû òàáàêà 40­ãî è 52­ãî ïàññàæåé è ñòåáëåâîé êàëëуñ 40­ãî ïàññàæà ïåðâûìè èíèöèèðîâàëè àäâåí­ òèâíîå ïîáåãîîáðàçîâàíèå. ëèñòîâîé è ñòåáëåâîé êàëëуñû 58­ãî ïàññàæà âñå åùå íå ïðîÿâëÿëè âèäèìûõ ïðèçíàêîâ ìîð­ ôîãåíåçà, äëÿ íèõ ïî­ïðåæíåìу áûëà õà­ ðàêòåðíà ðûõëàÿ ñòðуêòуðà, ñâîéñòâåííàÿ êàëëуñу, êуëьòèâèðуåìîìу íà êàëëуñîãåí­ íîé ñðåäå. Пðè ýòîì àäâåíòèâíîå ïîáå­ ãîîáðàçîâàíèå â ëèñòîâûõ êàëëуñàõ 40– ãî è 52–ãî ïàññàæåé êîððåëèðîâàëî ñ èí­ äуêöèåé ýêñïðåññèè Пî ñ Rf 0,59 (ðèñ. 3, à), êîòîðуþ, òàêèì îáðàçîì, ìîæíî ñ÷è­ òàòь ìàðêåðîì äàííîãî ýòàïà ìîðôîãå­ íåçà â ëèñòîâîì êàëëуñå, íî íå â ñòåáëå­ âîì. ëèñòîâîé êàëëуñ 58­ãî ïàññàæà ÷å­ ðåç 6 íåäåëь êуëьòèâèðîâàíèÿ â òåìíîòå íà ìîðôîãåííîé ñðåäå õàðàêòåðèçîâàëñÿ èçîôåðìåíòíûì ñïåêòðîì Пî, ïîõîæèì íà òàêîâîé â ëèñòîâîì êàëëуñå 40­ãî ïàññàæà ÷åðåç 4 íåäåëè êуëьòèâèðîâàíèÿ â òåìíîòå íà ìîðôîãåííîé ñðåäå. âèäèìî, ëèñòîâîé êàëëуñ 58­ãî ïàññàæà â ñèëу ñâîåé ñòàðî­ ñòè îòñòàåò ïî ñðîêàì ðàçâèòèÿ îò ëèñòî­ âîãî êàëëуñà 40­ãî ïàññàæà. ñòåáëåâîé æå êàëëуñ 58­ãî ïàññàæà íà ýòîì ñðîêå êуëь­ òèâèðîâàíèÿ ïðîÿâëÿë àêòèâíîñòь òîëьêî 4 èçîôîðì Пî. ×åðåç 4 íåäåëè êуëьòèâèðîâàíèÿ 2­ãî ïàññàæà íà ìîðôîãåííîé ñðåäå â òåìíîòå (â öåëîì – 10 íåäåëь) äëÿ уñêîðåíèÿ ìîð­ ôîãåíåçà äëèòåëьíîïàññèðуåìûå êàëëуñû òàáàêà ñíîâà ïåðåíåñëè íà ñâåæуþ ñðå­ äу (ïàññàæ 3) è äàëåå ýêñïîíèðîâàëè íà ñâåòу åùå 4 íåäåëè (â öåëîì – 14 íåäåëь êуëьòèâèðîâàíèÿ íà ìîðôîãåííîé ñðåäå). â èòîãå, ëèñòîâûå êàëëуñû âñåõ ïàññà­ æåé îáðàçîâàëè àäâåíòèâíûå ïîáåãè. Пðè ISSN 1810­7834. ³ñí. Óêð. тоâ­âà ãåíåтèê³â ³ ñåëåêö³оíåð³â. 2009, том 7, № 2 217 Сопðяжеííоñòü пðоцеññов де- è дèффеðеíцèàцèè кëеòок Nicotiana tabacum ñ... äîñë³äæåíî ìîäèô³êàö³þ ³çîôåðìåíòíîãî ñïåêòðà îñíîâíèõ ïåðîêñèäàç (Пî) ïðè ðåàë³­ çàö³¿ ãåíåòè÷íèõ ïðîãðàì äå­ ³ äèôåðåíö³àö³¿ êë³òèí ð³çíèõ òêàíèí N³cot³ana tabacum. óñòà­ íîâëåíî, ùî á³ëьø³ñòь ³çîôîðì Пî ëèñòîâîãî é ñòåáëîâîãî åêñïëàíò³â òþòþíу º òêàíèíîñïå­ öèô³÷íèìè, ³ öÿ âëàñòèâ³ñòь çáåð³ãàºòьñÿ â ïåð­ âèííèõ äåäèôåðåíö³éîâàíèõ òêàíèíàõ, îòðèìà­ íèõ ³ç äàíèõ åêñïëàíò³â. Пðîöåñè ìîðôîãåíåçу â ëèñòîâîìу êàëþñ³ ñуïðîâîäæуþòьñÿ ³í³ö³àö³­ ºþ åêñïðåñ³¿ ñïåöèô³÷íèõ Пî, ÿê³ íå âèÿâëÿþòь у äàíèõ уìîâàõ у ñòåáëîâîìу êàëþñ³. âèÿâëåí³ ³çîôîðìè, çàãàëьí³ äëÿ ïðîöåñ³â äèôåðåíö³àö³¿ é äåäèôåðåíö³àö³¿ êë³òèí, ³ ³çîôîðìè – ìàðêå­ ðè öèõ ïðîöåñ³â. Пî ç Rf 0,14 ³ 0,21 º ìàðêåðà­ ìè äåäèôåðåíö³àö³¿, à Пî ç Rf 0,26; 0,51 ³ 0,65 – ïîâíî¿ äèôåðåíö³àö³¿ êë³òèí òþòþíу. Êëþ÷оâ³ ñëоâà: òþòþí, äèôåðåíö³éîâàí³ / äåäè­ ôåðåíö³éîâàí³ òêàíèíè, ïåðîêñèäàçè. CONTINGENCY OF DE­ AND DIFFERENTIA­ TION PROCESSES OF NICOTIANA TABACuM CELLS WITH MODIFICATION OF PEROXIDASE GENE EXPRESSION A.A. Kuzovkova (Lenets), T.I. Fomenko, L.G. Berdichevets GSI “Central botanical gardens of NAS of Belarus”, Belarus, 220012, Minsk, Surganov str., 2V e­mail: cbg@it.org.by Modification of isoenzyme spectrum for basic peroxidases (BP) upon realization of cell de­ and differentiation genetic programs in various tissues of Nicotiana tabacum has been studied. Most BP isoforms of leaf and stem tobacco explants were found to exhibit tissue specifity and this property is maintained in the primary dedifferentiated rissues, derived from these explants. Morphogenesis events in leaf callus are accompanied by initiation of specific BP expression, not found in stem callus under the same conditions. There were revealed isoforms shared by the processes of cell differentiation and dedifferentiation and isoforms that present markers of these processes. BP with Rf 0,14 and 0,21 appear to be markers of dedifferentiation, while BP with Rf 0,26; 0,51 and 0,65 suggests the complete tobacco cell differentiation. Key words: tobacco, differentiation / dedifferentiation tissues, peroxidases. ôîãåííàÿ àêòèâíîñòь äê íàïðÿìуþ çàâè­ ñèò îò âîçðàñòà êàëëуñà: ÷åì áîëьøå ïàñ­ ñàæåé êàëëуñà áûëî ïðîâåäåíî, òåì ïîçæå äåäèôôåðåíöèðîâàííûå êëåòêè äèôôå­ ðåíöèðîâàëèñь. Ñпèñîê ëèòåðàòуðы 1. Êóíàõ Â.À. ãåíîìíàÿ èçìåí÷èâîñòь ñîìà­ òè÷åñêèõ êëåòîê ðàñòåíèé // Áèîïîëèìåðû è êëåòêà. – 1997. – ò.13, №5. – ñ. 362–371. 2. Ìоèñååâà Í.À. ìîëåêуëÿðíûå è êëåòî÷íûå ìåõàíèçìû ìîðôîãåíåçà â êуëьòуðå êëåòîê ðàñòåíèé // Áèîëîãèÿ êуëьòèâèðуåìûõ êëå­ òîê è áèîòåõíîëîãèÿ ðàñòåíèé. – ì.: Íàуêà, 1991. – ñ. 166–186. 3. Õàâêèí Ý.Å., Зàбðоäèíà Ì.Â. Íàñëåäуåìûå èçìåíåíèÿ â ñïåêòðàõ ïåðîêñèäàç è ýñòåðàç у ñîìàêëîíîâ êуêуðуçû // Ôèçèîëîãèÿ ðàñ­ òåíèé. – 1994. – ò.41, âûï. 6. – ñ. 859–867. 4. Ñàôоíоâ Â.È., Ñàôоíоâà Ì.Ï. èññëåäîâà­ íèå áåëêîâ è ôåðìåíòîâ ðàñòåíèé ìåòî­ äîì ýëåêòðîôîðåçà â ïîëèàêðèëàìèäíîì ãåëå // Áèîõèìè÷åñêèå ìåòîäû â ôèçèîëî­ ãèè ðàñòåíèé. – ì.: Íàуêà, 1971. – ñ.113– 119. 5. Bredford M.M. A rapid sensitive method for the action of microgram guantities of protein utilizing the principle of protein –dye binding // Anal. Biochem. – 1976. –Vol.72. – P. 248–254. 6. Чàÿíоâà Ñ.Ñ., Õàâêèí Ý.Å. èñïîëьçîâàíèå íåéòðàëьíîãî ïîëèàêðèëàìèäíîãî ãåëÿ äëÿ èçîôåðìåíòíîãî àíàëèçà ïåðîêñèäàç è ýñòåðàç // Ôèçèîëîãèÿ ðàñòåíèé. – 1990. – ò. 37. – ñ. 1037–1039. Ïðåäñтàâëåíà Â.À. Êóíàõом Ïоñтóïèëà 6.05.2009 ñПðЯЖåÍІñòü ПðîöåñІâ äå­ І äèÔåðåÍöІàöІЇ êëІòèÍ N²COT²ANA TABACuM З ìîäèÔІêàöІЄÞ åêñПðåñІЇ ãåÍІâ ПåðîêñèäàЗ À.À. Êóçоâêоâà (Ëåíåö), Ò.È. Ôомåíêо, Ë.Ã. Áåðäè÷åâåö ãÍó “öåíòðàëьíèé áîòàí³÷íèé ñàä ÍàÍ Á³ëîðуñ³”, Á³ëîðуñь, 220012, ì. ì³íñьê, âуë. ñуðãàíîâà, 2â e­mail: cbg@³t.org.by