Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды
Вперше з проб води та мiдiй Mytilus galloprovincialis Чорного моря iзольовано вiрус мiкроводоростi Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) i визначено дев’ять його штамiв — Dunaliella viridis Virus Solar I-1 (DvVSI-1), DvVSI-2, . . . , DvVSI-9. Вiрус стiйкий до хлороформу, зберiгає iнфекцiйну здатнiс...
Збережено в:
| Дата: | 2009 |
|---|---|
| Автори: | , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2009
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/19014 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды / О.А. Степанова, Д.А. Климчук, В.Н. Новиченко // Доп. НАН України. — 2009. — № 11. — С. 165-168. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-19014 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Степанова, О.А. Климчук, Д.А. Новиченко, В.Н. 2011-04-15T22:27:12Z 2011-04-15T22:27:12Z 2009 Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды / О.А. Степанова, Д.А. Климчук, В.Н. Новиченко // Доп. НАН України. — 2009. — № 11. — С. 165-168. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/19014 578.32:579:582.232:577.1(262.5) Вперше з проб води та мiдiй Mytilus galloprovincialis Чорного моря iзольовано вiрус мiкроводоростi Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) i визначено дев’ять його штамiв — Dunaliella viridis Virus Solar I-1 (DvVSI-1), DvVSI-2, . . . , DvVSI-9. Вiрус стiйкий до хлороформу, зберiгає iнфекцiйну здатнiсть при розбавленнi до 10^−9 (iнфекцiйний титр до 10¹º од./мл). Вiрiони мають форму iкосаедра з дiаметром 50–53 нм. For the first time, virus of algae Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) (9 strains — Dunaliella viridis (DvVSI-1), DvVSI-2, . . . , DvVSI-9) is isolated from Black Sea (samples of marine water and mollusks Mytilus galloprovincialis). Virus is resistant to chloroform and has the infection activity of 10¹º infection units in 1 ml of a virus suspension. Virions are icosahedral about 50–53 nm in diameter. ru Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Біологія Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды First isolation of Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) virus from the Black Sea environment Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды |
| spellingShingle |
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды Степанова, О.А. Климчук, Д.А. Новиченко, В.Н. Біологія |
| title_short |
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды |
| title_full |
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды |
| title_fullStr |
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды |
| title_full_unstemmed |
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды |
| title_sort |
первая изоляция альговируса dunaliella viridis teod. (chlorophyta) из черноморской среды |
| author |
Степанова, О.А. Климчук, Д.А. Новиченко, В.Н. |
| author_facet |
Степанова, О.А. Климчук, Д.А. Новиченко, В.Н. |
| topic |
Біологія |
| topic_facet |
Біологія |
| publishDate |
2009 |
| language |
Russian |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
First isolation of Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) virus from the Black Sea environment |
| description |
Вперше з проб води та мiдiй Mytilus galloprovincialis Чорного моря iзольовано вiрус мiкроводоростi Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) i визначено дев’ять його штамiв — Dunaliella viridis Virus Solar I-1 (DvVSI-1), DvVSI-2, . . . , DvVSI-9. Вiрус стiйкий до хлороформу, зберiгає iнфекцiйну здатнiсть при розбавленнi до 10^−9 (iнфекцiйний титр до 10¹º од./мл). Вiрiони мають форму iкосаедра з дiаметром 50–53 нм.
For the first time, virus of algae Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) (9 strains — Dunaliella viridis (DvVSI-1), DvVSI-2, . . . , DvVSI-9) is isolated from Black Sea (samples of marine water and mollusks Mytilus galloprovincialis). Virus is resistant to chloroform and has the infection activity of 10¹º infection units in 1 ml of a virus suspension. Virions are icosahedral about 50–53 nm in diameter.
|
| issn |
1025-6415 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/19014 |
| citation_txt |
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) из черноморской среды / О.А. Степанова, Д.А. Климчук, В.Н. Новиченко // Доп. НАН України. — 2009. — № 11. — С. 165-168. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT stepanovaoa pervaâizolâciâalʹgovirusadunaliellaviridisteodchlorophytaizčernomorskoisredy AT klimčukda pervaâizolâciâalʹgovirusadunaliellaviridisteodchlorophytaizčernomorskoisredy AT novičenkovn pervaâizolâciâalʹgovirusadunaliellaviridisteodchlorophytaizčernomorskoisredy AT stepanovaoa firstisolationofdunaliellaviridisteodchlorophytavirusfromtheblackseaenvironment AT klimčukda firstisolationofdunaliellaviridisteodchlorophytavirusfromtheblackseaenvironment AT novičenkovn firstisolationofdunaliellaviridisteodchlorophytavirusfromtheblackseaenvironment |
| first_indexed |
2025-11-25T22:15:30Z |
| last_indexed |
2025-11-25T22:15:30Z |
| _version_ |
1850561407967297536 |
| fulltext |
УДК 578.32:579:582.232:577.1(262.5)
© 2009
О.А. Степанова, Д.А. Климчук, В. Н. Новиченко
Первая изоляция альговируса Dunaliella viridis Teod.
(Chlorophyta) из черноморской среды
(Представлено членом-корреспондентом НАН Украины А.Ф. Фроловым)
Вперше з проб води та мiдiй Mytilus galloprovincialis Чорного моря iзольовано вiрус мi-
кроводоростi Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) i визначено дев’ять його штамiв —
Dunaliella viridis Virus Solar I-1 (DvVSI-1), DvVSI-2, . . . , DvVSI-9. Вiрус стiйкий до хло-
роформу, зберiгає iнфекцiйну здатнiсть при розбавленнi до 10
−9 (iнфекцiйний титр
до 10
10 од./мл). Вiрiони мають форму iкосаедра з дiаметром 50–53 нм.
В настоящее время установлена, но пока не полностью выяснена роль водных вирусов в эко-
логии не только водоемов, но и биогеоценозов суши [1–3]. На основании данных литературы
и результатов проведенного ранее эксперимента [4] была выдвинута гипотеза о циркуляции
вирусов между сушей и гидросферой, что является фактором их эволюции и приводит к по-
явлению так называемых новых вирусов [5], которые могут представлять биологическую
опасность для живого, в том числе и для человека [6].
Особый интерес среди вирусов гидросферы представляют альговирусы, вызывающие
лизис первичных продуцентов органической материи и кислорода в Мировом океане. Ви-
русоподобные частицы или вирусы обнаружены у 44 таксонов эукариотических водорослей
среди 10 из 14 известных классов (типов) водорослей [7]. Для этих вирусов характерно нали-
чие сходных, общих особенностей, что определяет их принадлежность к одному семейству
Phycodnaeviridae [8]. Представители данного семейства — альговирусы (фикоднавирусы) —
по форме отличаются большими икосаэдрическими частицами до 120–220 нм в диаметре,
их НК обычно представлена двуспиральной ДНК (дсДНК), а размер генома может быть
более 300 kb. Фикоднавирусы обладают сходными литическими циклами и узким кругом
хозяев. В результате проведения молекулярных исследований создано филогенетическое
дерево, отражающее их родственные связи [1]. Наиболее тесная связь отмечена между пред-
ставителями семейства Phycodnaeviridae. Среди других крупных дсДНК-содержащих ви-
русов близкое генетическое сродство выявлено с герпесвирусами, менее выраженная связь
определена с покс- и бакуловирусами, а также с группой арбовирусов африканской ли-
хорадки свиней. Таким образом, альговирусы имеют генетическое родство с патогенными
для человека вирусами. Некоторые сообщения свидетельствуют об изоляции альговирусов,
имеющих различия (размер вириона до 50 нм и меньше, РНК-содержащий геном, размер
генома 23 kb и пр.) с ранее описанными представителями семейства Phycodnaeviridae [1–3,
9]. Несомненно, что не все альговирусы еще изучены и, вероятно, не все они имеют сходные
характеристики.
Мониторинг альговирусов Черного моря на базе Института биологии южных морей
им. А.О. Ковалевского (ИнБЮМ) НАН Украины проводится с 2002 г. В результате выделе-
ны и описаны новые альговирусы, хозяевами которых являются микроводоросли Tetraselmis
viridis и Pheodactilum tricornutum [10–13]. Авторским запатентованным способом [14] аль-
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №11 165
говирус Tetraselmis viridis был изолирован и из моллюсков Норвежского моря [9]. С целью
дальнейшего изучения разнообразия альговирусов, как естественных обитателей черномор-
ской среды, нами впервые проведен поиск вирусов микроводоросли Dunaliella viridis Teod.
(Chlorophyta).
Изоляцию альговирусов микроводоросли D. viridis проводили авторским способом [14],
изучая пробы морской воды и мантийной жидкости мидий Mytilus galloprovincialis. Иссле-
дуемый материал отбирали ежемесячно с сентября 2008 г. по февраль 2009 г. на взморье
Севастополя (из четырех станций). Всего было исследовано 24 пробы морской воды и 6
проб из мидий. Подробное описание титрования выделенных альговирусов и их накопле-
ния в больших объемах для дальнейших исследований изложено в [10–12, 14].
В качестве индикаторной культуры выбрана музейная культура одноклеточной мор-
ской водоросли D. viridis Teod. Var. Palmelloides (Chlorophyta, Chlorophycea) из коллекции
отдела экологической физиологии водорослей ИнБЮМ НАНУ. Там же получены и куль-
туры микроводорослей Dunaliella salina, Tetraselmis viridis, Clorella vulgaris и Stichococcus
bacillaris, которые были использованы при изучении контакта с выделенными штаммами
альговируса D. viridis для определения их видоспецифичности. Культивирование водоро-
слей проводили согласно соответствующим требованиям [15], используя стабилизирующую
питательную среду Гольдберга.
Чувствительность альговирусов к хлороформу определяли путем добавления 0,2 мл
хлороформа к 2 мл вирусной суспензии и титрования через 1 ч после контакта опытной
и контрольной (с добавлением к 2 мл суспензии 0,2 мл среды Гольдберга) суспензий пу-
тем последовательных разведений до 10−10, что позволяло выявить возможное снижение
инфекционности.
Морфологические характеристики альговируса изучали в трансмиссионном электрон-
ном микроскопе TEM-1230 (“Jeol”, Япония) при ускоряющем напряжении 80 кВ. Образцы
контрастировали водным раствором 1% уранилацетата. Изучали как нативную (без пре-
дварительной обработки) вирусную суспензию, так и после предварительной очистки (5000
об/мин в течение 30 мин) и концентрирования (29000 об/мин в течение 60 мин) с после-
дующей обработкой раствором 2,5% глютаральдегида. Очистку и концентрацию вирусов
осуществляли с использованием центрифужных роторов SW 25.2 и SORVALL AH-629 на
базе Института молекулярной биологии и генетики НАН Украины.
Изолированные из морской воды и черноморских мидий девять штаммов альговируса
D. viridis получили название D. viridis Virus Solar I-1 (DvVSI-1), DvVSI-2, DvVSI-3, DvVSI-4,
DvVSI-5, DvVSI-6, DvVSI-7, DvVSI-8 и DvVSI-9.
При первоначальной изоляции штаммов альговируса D. viridis латентный (инкубацион-
ный) период наблюдался до 3–7 сут. При последующих трех–четырех пассажах латентный
период сокращался и устанавливался в пределах 20 ч. Инфекционный титр для изолиро-
ванных штаммов доходил до 10
8–1010 инфекционных единиц в 1 мл суспензии. Обработка
вирусных суспензий изучаемых штаммов хлороформом не приводила к изменению их ин-
фекционного титра, что указывало на отсутствие суперкапсида. Все штаммы альговируса
D. viridis не проявляли литической активности по отношению к культурам микроводорослей
Dunaliella salina, Tetraselmis viridis, Clorella vulgaris и Stichococcus bacillaris, что свидетель-
ствовало об их узкой видовой специфичности.
При изучении в электронной микроскопии морфологии альговируса D. viridis, прово-
димой на примере штамма DvVSI-2, вирионы наблюдали в виде частиц икосаэдрической
формы с диаметром 50–53 нм (рис. 1).
166 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №11
Рис. 1. Электронно-микроскопическое изображение вирионов DvVSI-2 (нативная вирусная суспензия) аль-
говируса Dunaliella viridis Teod. из черноморской среды
Таким образом, в результате проведенных исследований впервые изолирован новый аль-
говирус микроводоросли Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta), девять штаммов которого
(DvVSI-1, DvVSI-2, DvVSI-3, . . . , DvVSI-9) выделены из объектов черноморской среды
(воды и мидий Mytilus galloprovincialis). При изучении свойств вируса установлен инфе-
кционный титр до 108–1010 инфекционных единиц в 1 мл вирусной суспензии, определена
устойчивость к хлороформу. В электронной микроскопии вирионы имели форму икосаэдра
с диаметром 50–53 нм.
1. Ecology of marine viruses (Banyuls-sur-mer, 19–22 March, 2003). – Monaco, 2003. – 94 p.
2. Raven A. J. Aquatic viruses: the emerging story // J. Mar. Biol. Assoc. U.K. – 2006. – 86. – P. 449–451.
3. Aquatic virus workshop (July 6–11, 2008. – The University of British Columbia Vancouver, B. C., Canada). –
Vancouver, 2008. – 65 p.
4. Степанова О.А. Адаптация бактериофагов Xanthomonas axanopodis к микроводоросли Platymonas
viridis in vitro // Вiсн. Одес. нац. ун-ту. – 2004. – 9, вып. 5. – С. 128–132.
5. Бойко А.Л., Степанова О.А. Обмен вирусами суши и гидросферы – возможный путь их эволюции //
Микроорганизмы в экосистемах озер, рек, водохранилищ: Материалы II Байкальского микробиол.
симп. с междунар. участием, Иркутск, 10–15 сент. 2007 г. – Иркутск, 2007. – С. 27.
6. Бойко А.Л., Степанова О.А. Вирусы в Черном море и вопросы биобезопасности // Тези V Мiжнар.
конф. “Бiоресурси та вiруси”, Київ, 10–13 вересня 2007 p. – Київ: Фiтосоцiоцентр, 2007. – С. 166.
7. Van Etten J. L., Lane L. C., Meints R.H. Viruses and virus-like particles of eukariotic algae // Microbiol.
rev. – 1991. – 55, No 4. – P. 586–620.
8. Castberg T. Algal viruses: Characteristics and ecological effects. – Bergen: Univ. of Bergen, 2001. – 204 p.
9. Степанова О.А., Heldal M., Sandaa R.A., Bratbak G. Первая изоляция вируса Tetraselmis viridis Virus
(TvV-N1) из Норвежского моря // Тези V Мiжнар. конф. “Бiоресурси та вiруси”, Київ, 10–13 вересня
2007 p. – Київ: Фiтосоцiоцентр, 2007. – С. 193.
10. Степанова О.А., Бойко А.Л., Гордиенко А.И. и др. Характеристика вируса Tetraselmis viridis Norris
(Chlorophyta, Prasinophycea) // Доп. НАН України. – 2005. – № 1. – С. 158–162.
11. Степанова О.А., Бойко А.Л., Шевченко Т.П., Полищук В.П. Вирусы Tetraselmis viridis (Choro-
phyta), изолированные из Черного моря // Вiсн. Одес. нац. ун-ту. – 2005. – 10, вып. 7. – С. 349–355.
12. Степанова О.А. Экология аллохтонных и автохтонных вирусов Черного моря. – Севастополь: Мир,
2004. – 308 с.
13. Зубик Ю.А., Шевченко Т.П., Степанова О.А., Полiщук В.П. Деякi вiдомостi по екологiї и бiологi-
чних властивостях чорноморських альговiрусiв Phaeodactylum tricornutum // Тези V Мiжнар. конф.
“Бiоресурси та вiруси”, Київ, 10–13 вересня 2007 p. – Київ: Фiтосоцiоцентр, 2007. – С. 174.
14. Пат. 65864A Україна, MKВ 7 C12 N 1/12. Спосiб iзоляцiї альговiрусiв одноклiтинних водоростей,
наприклад Platymonas viridis Rouch (Chlorophita) / О.А. Степанова. – № 2003065499; Заявл. 13.06.03;
Опубл. 15.04.04, Бюл. № 4 // Пром. власнiсть. – 2004. – № 4. – С. 1–4.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №11 167
15. Культивирование коллекционных штаммов водорослей. Межвуз. сб. / Под ред. Б.В. Громова. –
Ленинград, 1983. – 153 с.
Поступило в редакцию 17.04.2009Институт биологии южных морей
им. А.О. Ковалевского НАН Украины, Севастополь
Институт ботаники им. Н. Г. Холодного
НАН Украины, Киев
O.A. Stepanova, D.A. Klimchuk, V.N. Novichenko
First isolation of Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) virus from the
Black Sea environment
For the first time, virus of algae Dunaliella viridis Teod. (Chlorophyta) (9 strains — Dunaliella
viridis (DvVSI-1), DvVSI-2, . . . , DvVSI-9) is isolated from Black Sea (samples of marine water and
mollusks Mytilus galloprovincialis). Virus is resistant to chloroform and has the infection activity
of 1010 infection units in 1 ml of a virus suspension. Virions are icosahedral about 50–53 nm in
diameter.
168 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №11
|