Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину

Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину

Дослiджено вплив калiксарен-диметиленбiсфосфонової (С-98) та калiксарен-тетраме-тиленбiсфосфонової (С-192) кислот на полiмеризацiю фiбрину. Данi калiксарени специфiчно iнгiбують полiмеризацiю фiбрину в системi фiбриноген+тромбiн, а також полiмеризацiю мономерного фiбрину дезААВВ. Максимальна швидкiс...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :Доповіді НАН України
Дата:2010
Автори: Гриценко, П.Г., Луговськой, Е.В., Кошель, Т.А., Черенок, С.О., Ющенко, О.А., Чернишов, В.І., Кальченко, В.І., Комісаренко, С.В.
Мова:Ukrainian
Опубліковано: Видавничий дім "Академперіодика" НАН України 2010
Теми:
Біохімія
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/19273
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину / П. Г. Гриценко, Е.В. Луговськой, Т.А. Кошель, С.О. Черенок, О.А. Ющенко, В. I. Чернишов, В. I. Кальченко, С.В. Комiсаренко // Доп. НАН України. — 2010. — № 1. — С. 175-179. — Бібліогр.: 12 назв. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-19273
record_format dspace
spelling Гриценко, П.Г.
Луговськой, Е.В.
Кошель, Т.А.
Черенок, С.О.
Ющенко, О.А.
Чернишов, В.І.
Кальченко, В.І.
Комісаренко, С.В.
2011-04-23T17:30:38Z
2011-04-23T17:30:38Z
2010
Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину / П. Г. Гриценко, Е.В. Луговськой, Т.А. Кошель, С.О. Черенок, О.А. Ющенко, В. I. Чернишов, В. I. Кальченко, С.В. Комiсаренко // Доп. НАН України. — 2010. — № 1. — С. 175-179. — Бібліогр.: 12 назв. — укр.
1025-6415
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/19273
577.112:612.115
Дослiджено вплив калiксарен-диметиленбiсфосфонової (С-98) та калiксарен-тетраме-тиленбiсфосфонової (С-192) кислот на полiмеризацiю фiбрину. Данi калiксарени специфiчно iнгiбують полiмеризацiю фiбрину в системi фiбриноген+тромбiн, а також полiмеризацiю мономерного фiбрину дезААВВ. Максимальна швидкiсть полiмеризацiї фiбрину зменшується на 50% при концентрацiї калiксарену С-98 1,3 · 10^−4 моль/л у середовищi полiмеризацiї, а калiксарену С-192 — 0,5 · 10^−6 моль/л. За допомогою електронної мiкроскопiї показано, що калiксарен С-192 iнгiбує першу стадiю полiмеризацiї фiбрину — формування протофiбрил. Було також знайдено, що калiксарен С-192 при концентрацiї 7,0 · 10^−5 моль/л у плазмi кровi здорових донорiв збiльшує у два рази протромбiновий час, а при концентрацiї 1,7·10^−5 моль/л — активований частковий тромбопластиновий час. Отже, показано, що калiксарен-метиленбiсфосфонова кислота С-192 є специфiчним iнгiбiтором полiмеризацiї фiбрину та зсiдання плазми кровi людини. Дана сполука може бути використана для створення нового класу антитромботичних препаратiв.
The effect of calixarene-dimethylenbisphosphonic (C-98) and calixarene-tetramethylenbisphosphonic (C-192) acids on the fibrin polymerization is studied. These calixarenes inhibited specifically the fibrin polymerization in the fibrinogen+ thrombin reaction, as well as monomeric fibrin desAABB polymerization. The maximum rate of fibrin polymerization was decreased by 50% at the calixarene C-98 concentration equal to 1.3 · 10^−4 M in the polymerization medium and the calixarene C-192 concentration equal to 0.5 · 10^−6 M. Experiments with electron microscopy analysis showed that calixarene C-192 inhibited the first stage of the fibrin polymerization — protofibril formation. Calixarene C-192 increased also twice the prothrombin time and the activated partial thromboplastin time in normal human blood plasma at concentrations of 7.0 · 10^−5 M and 1.7 · 10^−5 M, respectively. Thus, calixarene-bisphosphonic acid C-192 is a specific inhibitor of fibrin polymerization and blood plasma coagulation. This compound may be used for the drug design of a new class of antithrombotic agents.
uk
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
Доповіді НАН України
Біохімія
Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
The effect of calixarene-methylenbisphosphonic acids on fibrin polymerization
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
spellingShingle Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
Гриценко, П.Г.
Луговськой, Е.В.
Кошель, Т.А.
Черенок, С.О.
Ющенко, О.А.
Чернишов, В.І.
Кальченко, В.І.
Комісаренко, С.В.
Біохімія
title_short Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
title_full Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
title_fullStr Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
title_full_unstemmed Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
title_sort вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину
author Гриценко, П.Г.
Луговськой, Е.В.
Кошель, Т.А.
Черенок, С.О.
Ющенко, О.А.
Чернишов, В.І.
Кальченко, В.І.
Комісаренко, С.В.
author_facet Гриценко, П.Г.
Луговськой, Е.В.
Кошель, Т.А.
Черенок, С.О.
Ющенко, О.А.
Чернишов, В.І.
Кальченко, В.І.
Комісаренко, С.В.
topic Біохімія
topic_facet Біохімія
publishDate 2010
language Ukrainian
container_title Доповіді НАН України
publisher Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
title_alt The effect of calixarene-methylenbisphosphonic acids on fibrin polymerization
description Дослiджено вплив калiксарен-диметиленбiсфосфонової (С-98) та калiксарен-тетраме-тиленбiсфосфонової (С-192) кислот на полiмеризацiю фiбрину. Данi калiксарени специфiчно iнгiбують полiмеризацiю фiбрину в системi фiбриноген+тромбiн, а також полiмеризацiю мономерного фiбрину дезААВВ. Максимальна швидкiсть полiмеризацiї фiбрину зменшується на 50% при концентрацiї калiксарену С-98 1,3 · 10^−4 моль/л у середовищi полiмеризацiї, а калiксарену С-192 — 0,5 · 10^−6 моль/л. За допомогою електронної мiкроскопiї показано, що калiксарен С-192 iнгiбує першу стадiю полiмеризацiї фiбрину — формування протофiбрил. Було також знайдено, що калiксарен С-192 при концентрацiї 7,0 · 10^−5 моль/л у плазмi кровi здорових донорiв збiльшує у два рази протромбiновий час, а при концентрацiї 1,7·10^−5 моль/л — активований частковий тромбопластиновий час. Отже, показано, що калiксарен-метиленбiсфосфонова кислота С-192 є специфiчним iнгiбiтором полiмеризацiї фiбрину та зсiдання плазми кровi людини. Дана сполука може бути використана для створення нового класу антитромботичних препаратiв. The effect of calixarene-dimethylenbisphosphonic (C-98) and calixarene-tetramethylenbisphosphonic (C-192) acids on the fibrin polymerization is studied. These calixarenes inhibited specifically the fibrin polymerization in the fibrinogen+ thrombin reaction, as well as monomeric fibrin desAABB polymerization. The maximum rate of fibrin polymerization was decreased by 50% at the calixarene C-98 concentration equal to 1.3 · 10^−4 M in the polymerization medium and the calixarene C-192 concentration equal to 0.5 · 10^−6 M. Experiments with electron microscopy analysis showed that calixarene C-192 inhibited the first stage of the fibrin polymerization — protofibril formation. Calixarene C-192 increased also twice the prothrombin time and the activated partial thromboplastin time in normal human blood plasma at concentrations of 7.0 · 10^−5 M and 1.7 · 10^−5 M, respectively. Thus, calixarene-bisphosphonic acid C-192 is a specific inhibitor of fibrin polymerization and blood plasma coagulation. This compound may be used for the drug design of a new class of antithrombotic agents.
issn 1025-6415
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/19273
citation_txt Вплив каліксарен-метиленбісфосфонових кислот на полімеризацію фібрину / П. Г. Гриценко, Е.В. Луговськой, Т.А. Кошель, С.О. Черенок, О.А. Ющенко, В. I. Чернишов, В. I. Кальченко, С.В. Комiсаренко // Доп. НАН України. — 2010. — № 1. — С. 175-179. — Бібліогр.: 12 назв. — укр.
work_keys_str_mv AT gricenkopg vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT lugovsʹkoiev vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT košelʹta vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT čerenokso vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT ûŝenkooa vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT černišovví vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT kalʹčenkoví vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT komísarenkosv vplivkalíksarenmetilenbísfosfonovihkislotnapolímerizacíûfíbrinu
AT gricenkopg theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
AT lugovsʹkoiev theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
AT košelʹta theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
AT čerenokso theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
AT ûŝenkooa theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
AT černišovví theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
AT kalʹčenkoví theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
AT komísarenkosv theeffectofcalixarenemethylenbisphosphonicacidsonfibrinpolymerization
first_indexed 2025-11-24T05:07:18Z
last_indexed 2025-11-24T05:07:18Z
_version_ 1850842322017714176
fulltext оповiдi НАЦIОНАЛЬНОЇ АКАДЕМIЇ НАУК УКРАЇНИ 1 • 2010 БIОХIМIЯ УДК 577.112:612.115 © 2010 П.Г. Гриценко, член-кореспондент НАН України Е.В. Луговськой, Т.А. Кошель, С. О. Черенок, О. А. Ющенко, В. I. Чернишов, член-кореспондент НАН України В. I. Кальченко, академiк НАН України С. В. Комiсаренко Вплив калiксарен-метиленбiсфосфонових кислот на полiмеризацiю фiбрину Дослiджено вплив калiксарен-диметиленбiсфосфонової (С-98) та калiксарен-тетраме- тиленбiсфосфонової (С-192) кислот на полiмеризацiю фiбрину. Данi калiксарени специфi- чно iнгiбують полiмеризацiю фiбрину в системi фiбриноген+тромбiн, а також полiме- ризацiю мономерного фiбрину дезААВВ. Максимальна швидкiсть полiмеризацiї фiбрину зменшується на 50% при концентрацiї калiксарену С-98 1,3 · 10−4 моль/л у середовищi полiмеризацiї, а калiксарену С-192 — 0,5 · 10 −6 моль/л. За допомогою електронної мi- кроскопiї показано, що калiксарен С-192 iнгiбує першу стадiю полiмеризацiї фiбрину — формування протофiбрил. Було також знайдено, що калiксарен С-192 при концентра- цiї 7,0 · 10−5 моль/л у плазмi кровi здорових донорiв збiльшує у два рази протромбiновий час, а при концентрацiї 1,7 ·10−5 моль/л — активований частковий тромбопластиновий час. Отже, показано, що калiксарен-метиленбiсфосфонова кислота С-192 є специфiчним iнгiбiтором полiмеризацiї фiбрину та зсiдання плазми кровi людини. Дана сполука може бути використана для створення нового класу антитромботичних препаратiв. При активацiї системи зсiдання кровi утворюється фермент тромбiн, який вiдщеплює вiд фiбриногену два фiбринопептиди А та перетворює його в фiбрин дезАА, здатний до спон- танної полiмеризацiї. Полiмеризацiя фiбрину є багатостадiйним процесом, кiнцевим проду- ктом якого є тривимiрна сiтка — каркас будь-якого тромбу. На першiй стадiї мономернi молекули фiбрину взаємодiють за типом “кiнець з серединою” з утворенням протофiбрил. На рiвнi протофiбрил збiльшується швидкiсть вiдщеплення тромбiном фiбринопептидiв В, що призводить до перетворення фiбрину дезАА в фiбрин дезААВВ та збiльшення полi- меризацiйної активностi. Пiсля досягнення критичної довжини протофiбрили асоцiюють латерально, формуючи фiбрили, якi галузяться i утворюють тривимiрну сiтку фiбрину [1]. Полiмеризацiя фiбрину здiйснюється за рахунок функцiонування центрiв полiмеризацiї, якi забезпечують мiжмолекулярнi нековалентнi взаємодiї мономерних молекул або олiгоме- рiв фiбрину. Центр полiмеризацiї складається з амiнокислотних залишкiв, якi розташованi ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2010, №1 175 послiдовно або рознесенi, але зближенi в просторi в одному полiпептидному ланцюзi мо- лекули. Бiохiмiчними дослiдженнями та рентгеноструктурним аналiзом встановлено, що перша стадiя полiмеризацiї фiбрину — побудова протофiбрил — здiйснюється шляхом мiжмолеку- лярної взаємодiї центру “А” (Аα17Gly-Pro-Arg) у центральному доменi Е фiбрину з компле- ментарним йому центром “а” (γGln329, γAsp330, γHis340 та γAsp364) у периферичному до- менi D [2]. Використовуючи моноклональнi антитiла та синтетичнi пептиди нами показано, що у фрагментi Вβ12–46 фiбрину знаходиться центр полiмеризацiї, який також бере участь у процесi побудови протофiбрил фiбрину [3]. Механiзми латеральної асоцiацiї протофiбрил фiбрину на сьогоднi повнiстю ще не з’ясованi, однак iснують данi, якi свiдчать про те, що цей процес здiйснюється за рахунок мiжмолекулярної взаємодiї доменiв D фiбрину [4]. В останнi роки збiльшується iнтерес до вивчення впливу калiксаренiв на бiохiмiчнi про- цеси. Калiксарени є нанорозмiрними макроциклiчними сполуками, якi отримують цикло- конденсацiєю паразамiщених фенолiв i формальдегiду [5]. Завдяки здатностi утворювати супрамолекулярнi комплекси з бiологiчно важливими молекулами, калiксарени здатнi впли- вати на перебiг бiохiмiчних процесiв i розглядаються як перспективнi молекулярнi платфор- ми для дизайну фiзiологiчно активних сполук, якi можуть знайти практичне застосування в медицинi [6]. Метою нашої роботи було дослiдити вплив калiксарен-фосфонових кислот, здатних утво- рювати супрамолекулярнi коплекси з амiнокислотами та пептидами [7], на полiмеризацiю фiбрину, а також зсiдання плазми кровi людини. Вивчено вплив калiксаренiв С-98 та С-192, якi мiстять вiдповiдно два та чотири залишки метиленбiсфосфонової кислоти, на полiме- ризацiю фiбрину дезААВВ та фiбрину в системi фiбриноген + тромбiн за допомогою тур- бiдиметричного аналiзу. Калiксарен-метиленбiсфосфоновi кислоти синтезували методом, описаним у статтi [8]. Фiбриноген видiляли з плазми кровi людини [9]. Препарат фiбрину дезААВВ у 0,02 моль/л оцтовiй кислотi отримували за ранiше наведеною методикою [10]. Для турбiдиметрично- го аналiзу полiмеризацiї фiбрину дезААВВ у кварцовi кювети (L = 1 см) вносили по 0,975 мл 0,05 моль/л амонiйацетатного буферу pH 7,4 з 0,1 М NaCl та 10−4 М CaCl2, в яко- му був розчинений калiксарен у дослiджуванiй концентрацiї. Кювети витримували 7 хв при 37 ◦С, пiсля чого до їх вмiсту додавали по 0,025 мл 0,4% розчину мономерного фiбрину desAABВ у 0,02 моль/л оцтовiй кислотi. Для дослiдження полiмеризацiї фiбрину в систе- мi фiбриноген + тромбiн у кварцовi кювети (L = 1 см) вносили по 0,975 мл 0,05 моль/л амонiйацетатного буферу pH 7,4 з 0,1 моль/л NaCl та 10 −4 М CaCl2, в якому був роз- чинений фiбриноген (0,0975 мг/мл) та калiксарен у дослiджуваних концентрацiях. Пiсля термостатування кювет при 37 ◦С до них додавали 0,025 мл розчину тромбiну (“Sigma”) з концентрацiєю 7 NIH/мл. Змiни свiтлорозсiювання розчинiв визначали при довжинi хви- лi 350 нм на спектрофотометрi СФ-26 (“ЛОМО”, СРСР) i реєстрували за допомогою само- писця “Pharmacia” (Швецiя). На кривих, якi вiдображали змiни свiтлорозсiювання в часi, визначали такi параметри: τ — лаг-перiод, який вiдповiдає часу утворення протофiбрил; Vmax — максимальна швидкiсть полiмеризацiї фiбрину, що визначається за тангенсом кута нахилу дотичної до початкової найбiльш крутої дiлянки кривої свiтлорозсiювання; ∆h — максимальна мутнiсть розчину, в якому вiдбувалась полiмеризацiя фiбрину. За допомогою турбiдиметричного аналiзу було встановлено, що синтезованi калiксаре- ни рiзною мiрою гальмують полiмеризацiю фiбрину в системi фiбриноген + тромбiн. При концентрацiї калiксарену С-192 0,5 · 10−6 моль/л максимальна швидкiсть полiмеризацiї фi- 176 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2010, №1 Рис. 1. Залежнiсть значення максимальної швидкостi полiмеризацiї фiбрину (а), лаг-перiоду (б ) та кiнцевої мутностi згусткiв (в) вiд молярної концентрацiї калiксарену С-192 брину зменшувалась на 50% (IC50) (рис. 1). За даної концентрацiї калiксарену його мо- лярне спiввiдношення до фiбриногену становить близько 1,7 до 1,0, що свiдчить про ви- соку специфiчнiсть iнгiбування полiмеризацiї фiбрину. Для калiксарену С-98 IC50 дорiв- нює 1,3 · 10−4 моль/л. Для порiвняння: IC50 для вiдомого iнгiбiтора полiмеризацiї фiбрину пептиду Gly-Pro-Arg-Pro (який iмiтує центр полiмеризацiї “А”) у наших експериментах до- рiвнює 0,5 · 10 −4 моль/л. За даними iнших авторiв, IC50 для пептиду Gly-Pro-Arg-Pro до- рiвнює 0,85 · 10−4 моль/л [11]. Калiксарен С-192 гальмував також i полiмеризацiю фiбрину дезААВВ з IC50 = 1,0 · 10−6 моль/л. Це дозволяє зробити висновок про те, що цей калiкса- рен гальмує зсiдання фiбриногену не за рахунок iнгiбування активного центру тромбiну або його зв’язування з фiбриногеном, а за рахунок гальмування процесу полiмеризацiї фiбрину. В присутностi калiксарену С-192 у середовищi полiмеризацiї фiбрину значно збiльшувався лаг-перiод τ i зменшувалася максимальна мутнiсть фiбринового згустку. За допомогою трансмiсiйної електронної мiкроскопiї, яку проводили на мiкроскопi H-600 (“Hitachi”, Japan) при збiльшеннi 50000, нами було встановлено, що калiксарен С-192 iнгi- бує першу стадiю полiмеризацiї фiбрину — побудову протофiбрил з мономерних молекул. Можна припустити, що даний калiксарен гальмує процес формування протофiбрил фiбрину шляхом блокування центру полiмеризацiї “А”. Останнiй утворений трьома NH2-кiнцевими амiнокислотними залишками — Аα17 Gly-Pro-Arg, якi мають сумарний позитивний заряд. Анiон калiксарен-метиленбiсфосфонової кислоти С-192, iмовiрно, зв’язується з амiнокисло- тною послiдовнiстю Gly-Pro-Arg за рахунок електростатичних та гiдрофобних взаємодiй. Ми плануємо дослiдити комплексоутворення мiж калiксареном С-192 та синтетичним пе- птидом Gly-Pro-Arg-Pro, який iмiтує центр полiмеризацiї “А”. Було дослiджено також вплив калiксарену С-192 на зсiдання плазми кровi людини за допомогою коагулометра СТ 2410 (“Solar”, Бiлорусь). У цих дослiдах використовували ре- активи “НПО Ренам”, Росiя: контрольна плазма кровi з нормальним рiвнем системи гемо- стазу; “Ренампластин” — стандартизований за мiжнародним iндексом чутливостi реагент для визначення ПЧ (протромбiновий час), який характеризує активацiю зовнiшнього шля- ху системи зсiдання кровi; АЧТЧ-тест (активований частковий тромбопластиновий час) — для визначення АЧТЧ, який характеризує активацiю внутрiшнього шляху системи зсiдан- ня кровi. Протромбiнове вiдношення (ПВ) розраховували за формулою: ПВ = ПЧд/ПЧк, ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2010, №1 177 Рис. 2. Залежнiсть ПВ вiд концентрацiї калiксарену С-192 у ПЧ-тестi (а) та АЧТЧ-тестi (б ) де ПЧд — протромбiновий час в плазмi кровi, що дослiджується, ПЧк — протромбiновий час в контрольнiй плазмi. Було знайдено, що додавання калiксарену С-192 до контрольної плазми кровi призводило до збiльшення як ПЧ, так i АЧТЧ. Концентрацiя калiксарену, при якiй ПВ збiльшувалося вдвiчi у протромбiновому тестi, дорiвнювало 7,0 · 10−5 моль/л, у АЧТЧ тестi — 1,7 ·10−5 моль/л (рис. 2). Збiльшення ПЧ у двох рiзних тестах пiд впливом калiксарену С-192, iмовiрно, вiдбувається за рахунок гальмування полiмеризацiї фiбрину, який утворюється з фiбриногену пiсля активацiї системи зсiдання кровi. На сьогоднi не описана жодна низькомолекулярна сполука непептидної природи з такою великою iнгiбiторною активнiстю, яку виявляє калiксарен С-192 на полiмеризацiю фiбрину. Однак iншими авторами видiлено пептиднi фрагменти фiбриногену людини, якi специфiчно iнгiбують полiмеризацiю фiбрину. Наприклад, фрагменти фiбрину Вβ15–42 (Mr = 3039 Да) та γ373–410 (Mr = 4300 Да) гальмують полiмеризацiю фiбрину дезААВВ з IC50, що дорiв- нюють 22,5 · 10 −6 та 0,22 · 10 −6 моль/л вiдповiдно [11, 12]. Таким чином, показано, що калiксарен-метиленбiсфосфонова кислота С-192 є специ- фiчним iнгiбiтором полiмеризацiї фiбрину та зсiдання плазми кровi людини i може бути використана для створення нового класу антитромботичних препаратiв. 1. Ryan E.A., Mockros L. F., Weisel J.W., Lorand L. Structural origins of fibrin clot rheology // Biophys. J. – 1999. – 77. – P. 2813–2826. 2. Everse S. J., Spraggon G., Veerapandin L. et al. Crystal structure of fragment double-D from human fibrin with two different bound ligands // Biochemistry. – 1998. – 37, No 24. – P. 8637–8642. 3. Lugovskoy E.V., Gritsenko P.G., Kapustianenko L.G. et al. Functional role of Bbeta-chain N-terminal fragment in the fibrin polymerization process // FEBS J. – 2007. – 274, No 17. – P. 4540–4549. 4. Yang Z., Mochalkin I., Doolittle R. F. A model of fibrin formation based on crystal structures of fibrinogen and fibrin fragments complexed with synthetic peptides // PNAS of USA. – 2000. – 97. – P. 14156–14161. 5. Gutsche C.D. Calixarenes Revisited. – Cambridge: The Royal Society of Chemistry, 1998. – 233 p. 6. Кальченко В. I., Родiк Р. В., Бойко В. I. Калiксарени. Перспективи медико-бiологiчного застосуван- ня // Журн. орган. та фармацевт. хiмiї. – 2005. – 3. – С. 13–29. 7. Zielenkiewicz W., Marcinowicz A., Cherenok S. et al. Phosphorylated calixarenes as receptors of L-amino acids and dipeptides: calorimetric determination of Gibbs energy, enthalpy and entropy of complexation // Supramolec. Chem. – 2006. – 18. – P. 167–176. 8. Vovk A. I., Kalchenko V. I., Cherenok S. A. et al. Calix[4]arene methylenebisphosphonic acids as calf intesti- ne alkaline phosphatase inhibitors // Org. Biomol. Chem. – 2004. – 2. – P. 3162–3166. 9. Varetskaya T.V. Microheterogeneity of fibrinogen. Cryofibrinogen // Укр. бiохiм. журн. – 1960. – 32. – С. 13–24. 178 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2010, №1 10. Belitser V.A., Varetskaja T.V., Malneva G.V. Fibrinogen-fibrin interaction // Biochim. Biophys. Acta. – 1968. – 154. – P. 376–380. 11. Pandya B.V., Gabriel J. L., O’Brien J., Budzynski A. Z. Polymerization site in the beta chain of fibrin: mapping of the B beta 1–55 sequence // Biochemistry. – 1991. – 30, No 1. – P. 162–168. 12. Olexa S.A., Budzynski A. Z. Localization of a fibrin polymerization site // J. Biol. Chem. – 1981. – 256, No 7. – P. 3544–3549. Надiйшло до редакцiї 14.04.2009Iнститут бiохiмiї iм. О.В. Палладiна НАН України, Київ P.G. Gritsenko, Corresponding Member of the NAS of Ukraine E. V. Lugovskoy, T.A. Koshel, S.O. Cherenok, O.A. Yuschenko, V. I. Chernishov, Corresponding Member of the NAS of Ukraine V. I. Kalchenko, Academician of the NAS of Ukraine S.V. Komisarenko The effect of calixarene-methylenbisphosphonic acids on fibrin polymerization The effect of calixarene-dimethylenbisphosphonic (C-98) and calixarene-tetramethylenbisphosphonic (C-192) acids on the fibrin polymerization is studied. These calixarenes inhibited specifically the fibrin polymerization in the fibrinogen+ thrombin reaction, as well as monomeric fibrin desAABB polymerization. The maximum rate of fibrin polymerization was decreased by 50% at the calixarene C-98 concentration equal to 1.3 · 10−4 M in the polymerization medium and the calixarene C-192 concentration equal to 0.5 · 10 −6 M. Experiments with electron microscopy analysis showed that calixarene C-192 inhibited the first stage of the fibrin polymerization — protofibril formation. Cali- xarene C-192 increased also twice the prothrombin time and the activated partial thromboplastin time in normal human blood plasma at concentrations of 7.0 · 10−5 M and 1.7 · 10−5 M, respecti- vely. Thus, calixarene-bisphosphonic acid C-192 is a specific inhibitor of fibrin polymerization and blood plasma coagulation. This compound may be used for the drug design of a new class of anti- thrombotic agents. ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2010, №1 179

Схожі ресурси