Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин
В статье представлены результаты исследования культур мезенхимальних прогениторных клеток, которые культивировали в течение 21 суток на коллагеновой (ККП), агаровой и фибриновой подложках при одинаковых условиях. Обнаружили, что количество колониеобразующих единици качество культуры в течение всег с...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Актуальні проблеми транспортної медицини |
|---|---|
| Дата: | 2010 |
| Автори: | , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Українська |
| Опубліковано: |
Фізико-хімічний інститут ім. О.В. Богатського НАН України
2010
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/23112 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин / О.Л. Холодкова, Д.М. Пихтєєв, А.Л. Щербатюк // Актуальні проблеми транспортної медицини. — 2010. — № 1. — С. 121-130. — Бібліогр.: 24 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859975886826110976 |
|---|---|
| author | Холодкова, О.Л. Пихтєєв, Д.М. Щербатюк, А.Л. |
| author_facet | Холодкова, О.Л. Пихтєєв, Д.М. Щербатюк, А.Л. |
| citation_txt | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин / О.Л. Холодкова, Д.М. Пихтєєв, А.Л. Щербатюк // Актуальні проблеми транспортної медицини. — 2010. — № 1. — С. 121-130. — Бібліогр.: 24 назв. — укр. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Актуальні проблеми транспортної медицини |
| description | В статье представлены результаты исследования культур мезенхимальних прогениторных клеток, которые культивировали в течение 21 суток на коллагеновой (ККП), агаровой и фибриновой подложках при одинаковых условиях. Обнаружили, что количество колониеобразующих единици качество культуры в течение всег срока культивирования на ККП выш,
чем на других исследуемых подлож ках. Методом проточной цитофлуориметрии определили, что во всех культурах в течение культивирования наблюдается снижение количества гранулоцитов и повышение содержания клеток, которые несут антигены CD 11а и CD 34. При этом, в ККП количество гранулоцитов меньше, чем в других культурах, тогда как CD 11а и CD 34 – экспрессирующих клеток больше. Поэтому, наибольшая способность прикреплять клетки и степень диференцировки прогениторных клеток мезенхимального ряда на ККП
выше, чем в культурах, которые выращивали на других подложках.
Results of investigation of the mesenchimal progenitor cells culture grown on the collagen (CCS), agar and fibrin substrates under the same condition during 21 days are
represented in this article. It was revealed that number of colony formed units and degree of the culture quality in CCS was higher than in other investigated cultures during the whole term of cultivation. Decreasing of granulocyte number and increasing of CD 11a and CD 34 expressed cells in all investigated cultures were defined according to the flow cytofluorimetry data. For all that number of granulocytes in CCS was lower then in other cultures, while number of CD 11a and CD 34 expressed cells was higher. In this way capacity to attachment and degree of mesenchimal progenitor cells differentiation in CCS is higher than incultures grown on the others substrates.
|
| first_indexed | 2025-12-07T16:23:33Z |
| format | Article |
| fulltext |
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
121
Экспериментальные исследования The Experimental Researches
Вступ
Останніми роками методи реге�
неративної медицини успішно вико�
ристовуються по всьому світу. Відпо�
відно до сучасних уявлень, фізіологі�
чна регенерація тканин дорослого
організму та їх репарація у випадку
ушкодження здійснюється за безпо�
середньої участі малодиференційова�
них (плюріпотентних) клітин�поперед�
ників та стовбурових клітин. Встанов�
лено, що залежно від мікрооточення
стовбурові клітини здатні долати ге�
мопоетичний (мезенхімальний)
бар’єр, тобто мають високу плас�
тичність у плані дедиференціювання
та трансдиференціювання [1�5]. Ці та
інші спостереження дали поштовх до
розвитку медико�біологічних дослід�
жень, спрямованих на вивчення мож�
ливості використання стовбурових
клітин для терапії багатьох відомих
набутих та спадкових захворювань.
Основним джерелом стовбурових
клітин є кістковий мозок, здатний ге�
нерувати попередників клітинних еле�
ментів усіх тканин організму. Так, для
лікування цукрового діабету успішно
використовується трансплантація
культур острівкових кліток підшлунко�
вої залози [6], для лікування різних
форм печінкової недостатності засто�
совується екстракорпоральне підклю�
чення донорських гепатоцитів і спле�
ноцитів [7], також штучно вирощують
поза організмом з подальшою замі�
ною у хворого кровоносних судин,
серцевих клапанів, шкіри, кісток,
хрящів [8�13] і т.д. Відомо багато ек�
спериментальних робіт, в яких кліти�
ни різних фенотипів трансплантували
в зону некрозу міокарду. Показано,
що пересаджені в міокард клітини ут�
ворюють контакти з кардіоміоцитами
хазяїна, стимулюють ангіонеогенез і
переживають після трансплантації до
6 місяців [14�23]. Незважаючи на ба�
гатий досвід сучасних фахівців в об�
ласті клітинних технологій, лишають�
ся нез’ясованими багато питань як
щодо поведінки клітин в організмі
після трансплантації, так і до техно�
логій культивування.
Тому метою нашого дослід�
ження стало кількісно та якісно оці�
нити культури мезенхімальних проге�
ніторних кліти, що їх культивували за
різними методиками.
Матеріали та методи
дослідження
Для постановки культури обра�
ли 6 мишей лінії ICR, віком 6 місяців.
Тваринам під легкою ефірною анесте�
зією проводили дислокацію шийних
хребців та швидко виділяли обидві
стегнові кістки. Їх очищали механічно
від м’яких тканин та поміщали в со�
льовий розчин Хенкса, що не містить
іонів Ca2+ і Mg2+, з кінцевим вмістом
пеніциліну та стрептоміцину сульфа�
УДК: 57.089.2:615.012
ВИКОРИСТАННЯ РІЗНИХ ВИДІВ ПІДЛОЖОК В КУЛЬТИВУВАННІ
МЕЗЕНХІМАЛЬНИХ ПРОГЕНІТОРНИХ КЛІТИН
Холодкова О.Л., Пихтєєв Д.М., Щербатюк А.Л.
Одеський державний медичний університет
Ключові слова: біотехнологія, культивування мезенхімальних прогеніторних
клітин, стовбурові клітини
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
122
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
ту по 20 Од і 5х10�5 г, відповідно.
Кістковий мозок вимивали таким са�
мим розчином, забирали в центри�
фужну пробірку та суспендували за
допомогою шприця з голкою 23G.
Далі проводили кілька циклів центри�
фугування при 2500 об/хв. по 5 хви�
лин. Після цього, осад із клітин цент�
ругували у градієнті «Percoll» із
щільностями 1,065 – 1,073, за допо�
могою чого відсепаровували та відби�
рали шар, що містить лейкоцити. Лей�
коцитарну фракцію промивали у се�
редовищі DMEM, з доданням 10 %
фетальної бичачої сироватки та роз�
саджували на 6 чашок Петрі, на рос�
тову поверхню двох з яких поперед�
ньо було нанесено колагенову
підложку, на поверхню наступних двох
– агарову підложку, та на останні дві �
фібринову. Колагенову підложку готу�
вали із сухожиль хвостів мишей [24].
Агарова підложка являла собою 1,5 %
розчин Агар�Агар «DIFCO», приготов�
лений на середовищі DMEM/F12 у
співвідношенні 1:1. Після формуван�
ня колагенової та агарової підложок,
в чашки вливали 15 мл живильного
середовища, а потім вносили клітини,
що їх було отримано із кісткового
мозку мишей. Фібринова піложка яв�
ляла собою плазму крові щурів, яку
готували безпосередньо перед нане�
сенням на ростову поверхню чашки
Петрі. Після формування фібринової
підложки петлею вносили клітини, що
їх було отримано із кісткового мозку
мишей, та, після згортання плазми,
добавляли живильне середовище. Всі
клітини культивували в середовищі
DMEM/F12 у співвідношенні 1:1, з
доданням 10% фетальної бичачої си�
роватки, антибіотиків, вітамінів. Інку�
бували при температурі 37 оС з
вмістом у газовій фазі 5 % СО
2
та 95
% вологості. Через 24 години робили
першу заміну живильного середови�
ща, в склад якого добавили фактор
росту фібробластів. Підраховували
кількість клітин із застосуванням бар�
вника трипанового синього в камері
Ньюбауера. Всього отримали 6,2 х 106
клітин/мл, серед них 1,3 % клітин, що
не сприймали барвник. Умови інкубу�
вання лишались не змінними. На�
ступні заміни середовища на аналог�
Рис. 1. Дані проточної цитофлуориметрії вихідної суспензії клітин кісткового мозку.
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
123
ічне робили кожні 3 доби. На 21&ий
день моношар клітин знімали за до&
помогою трипсину & ЕДТА.
Протягом культивування кожні
три доби культури досліджували під
світловим мікроскопом «Leica DLMS».
З 3 по 9 добу підраховували кількість
колонієутворюючих одиниць (КУО). З
12 по 21 добу для оцінки якості куль&
тури умовно позначали ступінь якості
культури (СЯК), де відмінна ступінь
якості – в культурі практично відсутній
клітинний детрит та неприкріплені
клітини, прикріплені клітини прозорі,
А
Б
Рисунок 2. Дані проточної цитофлуориметрії суспензії клітин ККП.
А) на 9-й день культивування
Б) на 21-й день культивування
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
124
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
розпластані по всій поверхні матрацу,
задовільна ступінь якості 5 в культурі
клітинний детрит та неприкріплені
клітини присутні у невеликій кількості,
прикріплені клітини прозорі, розпла5
стані не по всій поверхні матрацу,
незадовільна ступінь якості 5 в куль5
турі клітинний детрит та неприкріп5
лені клітини присутні у великій
кількості, прикріплених клітин дуже
мало. Також проводили імунофеноти5
пування клітин за допомогою проточ5
ного цитофлуориметру «DAKO» до
культивування та після нього на 95й та
А
Б
Рисунок 3. Дані проточної цитофлуориметрії суспензії клітин.
А) на 9-й день культивування
Б) на 21-й день культивування
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
125
21 день. Кількісно виявляли накопи'
чення клітин гранулоцитарного ряду,
серед яких визначали вміст клітин, що
визначають ступінь диференцировки
прогеніторних клітин мезенхімально'
го ряду – це клітини, що несуть анти'
ген CD 11a, та ті, що експресують
антиген CD 34. Також кількісно оціню'
вали наявність клітинного детриту та
неприкріплених клітин.
Результати дослідження та їх
обговорення
Згідно з даними проточної ци'
А
Б
Рисунок 4. Дані проточної цитофлуориметрії суспензії клітин КФП.
А) на 9-й день культивування
Б) на 21-й день культивування
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
126
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
тофлуориметрії, відразу після виді/
лення клітинні суспензії характеризу/
вались як клітинний коктейль, з
вмістом гранулоцитарної фракції 51,4
%, при цьому вміст клітин, що несуть
антиген CD 11a, склав 77,0 %, а
клітин, що експресують антиген CD
34, – 70,2 % (рис. 1).
При дослідженні культури, що її
культивували на колагеновій підложці
(ККП) виявили, що на 3/ю, 6/у та 9/у
добу від первинної постановки куль/
тури кількість КУО дорівнювала 10,3,
15,4 та 28,6 відповідно. Результати
цитофлуориметричного аналізу куль/
тури клітин на 9/й день показали, що
кількість клітин гранулоцитарного
ряду складала 9,6 %, серед яких вміст
клітин, що несуть антиген CD 11a
склав 89,3 %, а клітин, що експресу/
ють антиген CD 34, – 83,7 %. Кількість
клітинного детриту та неприкріплених
клітин складала 15,6 %. На 12/й день
від первинної постановки культури,
СЯК була оцінена як задовільна, а в
подальші строки – як відмінна. На 21/
й день кількість клітин гранулоцитар/
ного ряду складала 5,3 %, вміст
клітин, що несуть антиген CD 11a, був
96,4 %, а клітин, що експресують ан/
тиген CD 34, – 92,3 % (рис. 2). Клітин/
ний детрит практично не виявлявся.
При дослідженні культури, що її
культивували на агаровій підложці
(КАП), виявили, що на 3/ю, 6/у та 9/у
добу від первинної постановки куль/
тури кількість КУО дорівнювала 6,1,
9,15 та 16,8 відповідно. Результати
цитофлуориметричного аналізу на 9/
й день показали, що кількість клітин
гранулоцитарного ряду складала 11,3
%, серед яких вміст клітин, що несуть
антиген CD 11a був 76,4 %, а клітин,
що експресують антиген CD 34, – 75,3
%. Кількість клітинного детриту та
неприкріплених клітин складала 19,7
%. На 12/й / 18/й день від первинної
постановки культури СЯК була оціне/
на як задовільна на, а на 21/й день –
як відмінна. На 21/й день кількість
клітин гранулоцитарного ряду склала
7,1 %, вміст клітин, що несуть анти/
Рис. 5. Динаміка приросту КУО в піддослідних культурах.
0
5
10
15
20
25
30
35
3-й день культивування 6-й день культивування 21-й день культивування
кі
л
ь
кі
ст
ь
К
УО
ККП КАП КФП
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
127
ген CD11a, склав 90,3 %, а клітин, що
експресують антиген CD 34, – 88,4 %
(рис. 3). Клітинний детрит практично
не виявлявся.
При дослідженні культури, що її
культивували на фібриновій підложці
(КФП) виявили, що на 3/ю, 6/у та 9/у
добу від первинної постановки куль/
тури кількість КУО дорівнювала 9,8,
12,7, та 21,7 відповідно. Результати
цитофлуориметричного аналізу куль/
тури клітин на 9/й день показали, що
кількість клітин гранулоцитарного
ряду складала 8,9 %, серед яких вміст
клітин, що несуть антиген CD 11a
склав 87,6 %, а клітин, що експресу/
ють антиген CD 34, – 82,4 %. Кількість
клітинного детриту та неприкріплених
клітин складав 15,4 %. На 12/й / 15/й
день від постановки культури СЯК
була оцінена як задовільна, а на 18/й
– 21/й день – як відмінна. На 21/й
день кількість клітин гранулоцитарно/
го ряду становила 6,2 %, серед яких
вміст клітин, що несуть антиген CD
11a, склав 92,5 %, а клітин, що експ/
ресують антиген CD 34, – 91,2 %
(рис.4). Клітинний детрит практично
не виявлявся.
З отриманих даних видно, що
абсолютна кількість КУО ККП була де/
кілька вищою за КФП, але ця різниця
була недостовірною. Кількість КУО
ККП як на 9/й так і на 21/й день була
достовірно вищою за КАП на 40 %
(рис. 5). Між тим, очевидно, що вид
підложки не впливає на швидкість
поділення клітин, тому що як в ККП
так і в КАП кількість КУО до 6/ї доби
зросла в 1,5 рази, а до 9/ї доби / в 2,8
разів, порівняно з 3/ю добою. Тож,
розвиток культури залежить від по/
чаткової кількості прикріплених
клітин. Таким чином, ККП володіє
найбільш сприятливими властивостя/
ми для прикріплення клітин, порівня/
но з іншими піддослідними культура/
ми. В ККП вже на 15/у добу від поста/
новки культури був відсутній клітин/
ний детрит і культура відповідала всім
ознакам відмінної якості. Тоді як в
КФП ми спостерігали клітинний дет/
рит до 18 доби, а в КАП – до 21 доби.
Аналізуючи результати цитофлу/
ориметричного дослідження видно,
що в культурах, що їх вирощували на
всіх досліджуваних підложках з часом
відбувається зниження вмісту грану/
лоцитів. Так, на 9/й день відбуваєть/
ся падіння їх кількості в 5/6 разів по/
рівняно з первинною культурою. Про/
те, кількість клітин, що несуть антиге/
ни CD 11а та CD 34 / зростає. Але,
між піддослідними культурами вияв/
ляється різниця в значеннях кількості
цих клітин. Так, в ККП гранулоцитів
менше ніж в інших культурах, тоді як
CD 11а та CD 34 – позитивних клітин
більше. В КАП напроти, відсоток гра/
нулоцитів більше за інші, а CD 11а та
CD 34 – позитивних клітин менше. Це
говорить про те, що у всіх культурах
відбувається процес диференціюван/
ня прогеніторних клітин мезенхімаль/
ного ряду з різною інтенсивністю. Так,
ККП виявилася найбільш продуктив/
ною культурою, а КАП найменш при/
датною для отримування культури ме/
зенхімальних прогеніторни клітин.
КФП за всіма досліджуваними показ/
никами займає проміжне положення
між ККП та КАП.
Висновки та перспективи
подальших досліджень
Таким чином, виходячи з вище/
наведеного можна зробити наступні
висновки:
1. Культура, що її культивували за
різними методиками, відповідає
вимогам якісної культури, яка
може бути випробувана на твари/
нах з метою корекції різних пато/
логічних станів.
2. За морфологічними дослідження/
ми, в ККП кількість КУО була ви/
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
128
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
щою за інші піддослідні культури
та СЯК була відмінною вже на 15/
й день, тоді як в КФП на 18/й день,
а в КАП / на 21/й.
3. У всіх досліджуваних культурах
протягом культивування спостер/
ігається однакова динаміка – зни/
ження кількості гранулоцитів та
підвищення вмісту клітин що не/
суть антигени CD 11a та CD 34.
4. На всіх досліджуваних строках
кількість гранулоцитів в ККП мен/
ше ніж в інших культурах, тоді як
CD 11а та CD 34 – експресуючих
клітин / більше. В КАП, напроти,
кількість гранулоцитів більше за
інші, а CD 11а та CD 34 – експре/
суючих клітин / менше. КФП за
всіма досліджуваними показника/
ми займає проміжне положення
між ККП та КАП.
5. Колагенова підложка володіє
найбільш сприятливими властиво/
стями для прикріплення клітин.
Література
1. Characterization and expression
analysis of mesenchimal stem cells
from human bone marrow and
adipose tissue / R. H. Lee, B. Kim,
L. Choi [et al.] // Cell Physiology and
Biochemistry. / 2004. / № 4/6, Vol.
14. / P. 311/324.
2. Kassem M. Mesenchymal stem
cells: cell biology and potential use
in therapy / M. Kassem, M.
Kristiansen, B. M. Abdollah // Basic
Clinical Pharmacology and
Toxicology. – 2004. – № 5, Vol. 95.
– P. 209/214.
3. Мезенхимальные стволовые клет/
ки / Г. Т. Сухих, В. Д. Малайцев, И.
М. Богданова, И. В.Дубровина //
Бюллетень экспериментальной
биологии. / 2002. / № 2, Т. 133. /
С. 124/131.
4. Кухарчук О. Л. Стовбурові клітини:
експеримент, теорія, клініка. Емб/
ріональні, мезенхімальні, ней/
ральні і гемопоетичні стовбурові
клітини / О. Л. Кухарчук, В. В. Рад/
ченко, В. М. Сірман // КРС/меди/
цинские технологи. / 2004. – С.
380/431.
5. Culture of human stem cells / R. Ian
Freshney, N. G. Stacey, J. M.
Auerbach // Wiley/Interscience. /
2007. – P. 93/107.
6. Шумаков В. И. Трансплантация
островковых клеток в лечении са/
харного диабета. В кн. Трансплан/
тация фетальных тканей и клеток.
Сб. науч. ст. Под ред. В.И. Кула/
кова, Г.Т. Сухих. / В. И. Шумаков,
Н. Н. Скалецкий // Бюллетень эк/
спериментальной биологии и ме/
дицины. / 1998. – Т. 126 (прил. 1).
– С. 109/114.
7. Early clinical experience with a
hybrid bioartificial liver support / A.
A. Demetriou, J. Rozga, L. Fodesta
[et al.] // Journal of
Gastroenterology. – 1995. – Vol. 30
(suppl. 208). – P. 111/117.
8. Transplanted mesenchimal stem
cells are effective for skin
regeneration in acute cutaneous
wounds / H. Sator, K. Kishi, T.
Tanaka [et al.] // Transplantant /
2004. / № 4, Vol. 13. / P. 405/412.
9. Nather A. Scaffolds in bone tissue
engineering / A. Nather // Medical
Journal of Malaysia. / 2004. / Vol.
59, Suppl. B. / P. 37/38.
10. The use of bone marrow stem cells
for bone tissue engineering / M. H.
Ng, B. S. Aminuddin, K. K. Tan [et
al.] // Medical Journal of Malaysia.
/ 2004. / Vol. 59, Suppl. B. / P. 41/
42.
11. Modification of the brain/derived
neurotrophic factor gene: a portal to
transform mesenchymal stem cells
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
129
into advantageous engineering cells
for neuroregeneration and
neuroprotection. / L. X. Zhao, J.
Zhang, F. Cao // Experimental
Neurology. / 2004. / № 2, Vol. 190.
/ P. 396/406.
12. Cartilage/derived morphogenic
protein/1 promotes the
differentiation of mesenchymal stem
cells into chondrocytes / X. Bai, Z.
Xiao, Y. Pan [et al.] // Biochemistry
and Biophysiology Research
Communication. / 2004. / № 2, Vol.
325. / P. 453/460.
13. Stem cell regeneration of the
nucleus pulposus / M. V. Risbud, I.
M. Shapiro, A. R. Vaccaro, T. J.
Albert // Spine Journal. / 2004. / №
6, Vol. 4. / P. 348/353.
14. Smooth Muscle Cell Transplantation
into Myocardial Scar Tissue
Improves Heart Function / R. K. Li,
Z. Q. Jia, R. D. Weisel [et al.] //
Journal of Mollecular and Cell
Cardiology. – 1999. – Vol. 31. – P.
513–522.
15. Myogenic conversion of mammalian
fibroblasts induced by
differentiating muscle cells / G.
Salvatori, L. Lattanzi, M. Coletta [et
al.] // Journal of Cell Science. –
1995. – Vol. 108. – P. 2733/2739.
16. Chiu R. C. Cellular cardiomyoplasty:
myocardial regeneration with
satellite cell implantation. R. C.
Chiu, A. Zibaitis, R. L. Kao //
Annales of Thoracic Surgery. –
1995. – Vol. 60. – P. 12/18.
17. Electromechanical Coupling
between Skeletal and Cardiac
Muscle: Implications for Infarct
Repair / H. Reinecke, G. H.
MacDonald, S. D. Hauschka [et al.]
// Journal of Cell Biology. – 2000. –
Vol. 149. – P. 731–740
18. Autologous Smooth Muscle Cell
Transplantation Improved Heart
Function in Dilated Cardiomyopathy
/ K. J. Yoo, R. K. Li, R. D. Weisel [et
al.] // Annales of Thoracic Surgery.
– 2000. – Vol. 70. – P. 859 –865.
19. Yoon P. D. Myocardial regeneration:
transplanting satellite cells into
damaged myocardium / P. D. Yoon,
R. L. Kao, G. J. Magovern // Jourlal
of Texas Heart Institute. – 1995. –
Vol. 22. – P. 119/125.
20. Chiu R. C. Cellular cardiomyoplasty:
myocardial regeneration with
satellite cell implantation / R. C.
Chiu, A. Zibaitis, R. L. Kao //
Annales of Thoracic Surgery. –
1995. – Vol. 60. – P. 12/18.
21. Autologous transplantation of bone
marrow cell inproves damaged heart
function / S. Tomita, R. K. Li, R. D.
Weisel [et al.] // Circulation. – 1999.
– Vol. 100 (suppl II). – P. II/247/II/
256.
22. In Vivo Survival and Function of
Transplanted Rat Cardiomyocytes /
R. K. Li, D. A. G. Mickle, R. D. Weisel
[et al.] // Circulation Research. –
1996. – Vol. 78. – P. 283/288
23. Transplantation of Progenitor Cells
and Regeneration Enhancement in
Acute Myocardial Infarction / B.
Assmus, V. Schachinger, C. Teupe
[et al.] // Circulation. – 2002. – Vol.
106. – P. 3009/3017.
24. Пол Джон. Культура клеток и тка/
ни / Джон Пол // под редакцией Л.
М. Якобсон. Изд. Медгиз. – 1963.
– 346 с.
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ № 1 (19), 2010 г.
130
ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE #1 (19), 2010
Резюме
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РАЗНЫХ ВИДОВ
ПОДЛОЖЕК В КУЛЬТИВИРОВАНИИ
МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ
ПРОГЕНИТОРНЫХ КЛЕТОК
Холодкова O.Л., Пихтеев Д.М,
Щербатюк а.Л.
В статье представлены результа/
ты исследования культур мезенхи/
мальних прогениторных клеток, кото/
рые культивировали в течение 21 су/
ток на коллагеновой (ККП), агаровой
и фибриновой подложках при одина/
ковых условиях. Обнаружили, что ко/
личество колониеобразующих единиц
и качество культуры в течение всего
срока культивирования на ККП выш,
чем на других исследуемых подлож/
ках. Методом проточной цитофлуори/
метрии определили, что во всех куль/
турах в течение культивирования на/
блюдается снижение количества гра/
нулоцитов и повышение содержания
клеток, которые несут антигены CD
11а и CD 34. При этом, в ККП количе/
ство гранулоцитов меньше, чем в
других культурах, тогда как CD 11а и
CD 34 – экспрессирующих клеток
больше. Поэтому, наибольшая спо/
собность прикреплять клетки и сте/
пень диференцировки прогениторных
клеток мезенхимального ряда на ККП
выше, чем в культурах, которые выра/
щивали на других подложках.
Впервые поступила в редакцию 18.03.2010 г.
Рекомендована к печати на заседании
редакционной коллегии после рецензирования
Summary
DIFFERENT KINDS OF SUBSTRATE
USAGE FOR THE MESENCHIMAL
PROGENITOR CELLS CULTIVATION
Kholodkova H.L., Pykhtyeyev D.M.,
Shcherbatyuk A.L.
Results of investigation of the
mesenchimal progenitor cells culture
grown on the collagen (CCS), agar and
fibrin substrates under the same
condition during 21 days are
represented in this article. It was
revealed that number of colony formed
units and degree of the culture quality
in CCS was higher than in other
investigated cultures during the whole
term of cultivation. Decreasing of
granulocyte number and increasing of
CD 11a and CD 34/expressed cells in all
investigated cultures were defined
according to the flow cytofluorimetry
data. For all that number of
granulocytes in CCS was lower then in
other cultures, while number of CD 11a
and CD 34 / expressed cells was higher.
In this way capacity to attachment and
degree of mesenchimal progenitor cells
differentiation in CCS is higher than in
cultures grown on the others substrates.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-23112 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 1818-9385 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-07T16:23:33Z |
| publishDate | 2010 |
| publisher | Фізико-хімічний інститут ім. О.В. Богатського НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Холодкова, О.Л. Пихтєєв, Д.М. Щербатюк, А.Л. 2011-07-02T19:26:10Z 2011-07-02T19:26:10Z 2010 Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин / О.Л. Холодкова, Д.М. Пихтєєв, А.Л. Щербатюк // Актуальні проблеми транспортної медицини. — 2010. — № 1. — С. 121-130. — Бібліогр.: 24 назв. — укр. 1818-9385 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/23112 57.089.2:615.012 В статье представлены результаты исследования культур мезенхимальних прогениторных клеток, которые культивировали в течение 21 суток на коллагеновой (ККП), агаровой и фибриновой подложках при одинаковых условиях. Обнаружили, что количество колониеобразующих единици качество культуры в течение всег срока культивирования на ККП выш, чем на других исследуемых подлож ках. Методом проточной цитофлуориметрии определили, что во всех культурах в течение культивирования наблюдается снижение количества гранулоцитов и повышение содержания клеток, которые несут антигены CD 11а и CD 34. При этом, в ККП количество гранулоцитов меньше, чем в других культурах, тогда как CD 11а и CD 34 – экспрессирующих клеток больше. Поэтому, наибольшая способность прикреплять клетки и степень диференцировки прогениторных клеток мезенхимального ряда на ККП выше, чем в культурах, которые выращивали на других подложках. Results of investigation of the mesenchimal progenitor cells culture grown on the collagen (CCS), agar and fibrin substrates under the same condition during 21 days are represented in this article. It was revealed that number of colony formed units and degree of the culture quality in CCS was higher than in other investigated cultures during the whole term of cultivation. Decreasing of granulocyte number and increasing of CD 11a and CD 34 expressed cells in all investigated cultures were defined according to the flow cytofluorimetry data. For all that number of granulocytes in CCS was lower then in other cultures, while number of CD 11a and CD 34 expressed cells was higher. In this way capacity to attachment and degree of mesenchimal progenitor cells differentiation in CCS is higher than incultures grown on the others substrates. uk Фізико-хімічний інститут ім. О.В. Богатського НАН України Актуальні проблеми транспортної медицини Экспериментальные исследования Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин Использование разных видов подложек в культивировании мезенхимальных прогениторных клеток Different kinds of substrate usage for the mesenchimal progenitor cells cultivation Article published earlier |
| spellingShingle | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин Холодкова, О.Л. Пихтєєв, Д.М. Щербатюк, А.Л. Экспериментальные исследования |
| title | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин |
| title_alt | Использование разных видов подложек в культивировании мезенхимальных прогениторных клеток Different kinds of substrate usage for the mesenchimal progenitor cells cultivation |
| title_full | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин |
| title_fullStr | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин |
| title_full_unstemmed | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин |
| title_short | Використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин |
| title_sort | використання різних видів підложок в культивуванні мезенхімальних прогеніторних клітин |
| topic | Экспериментальные исследования |
| topic_facet | Экспериментальные исследования |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/23112 |
| work_keys_str_mv | AT holodkovaol vikoristannâríznihvidívpídložokvkulʹtivuvannímezenhímalʹnihprogenítornihklítin AT pihtêêvdm vikoristannâríznihvidívpídložokvkulʹtivuvannímezenhímalʹnihprogenítornihklítin AT ŝerbatûkal vikoristannâríznihvidívpídložokvkulʹtivuvannímezenhímalʹnihprogenítornihklítin AT holodkovaol ispolʹzovanieraznyhvidovpodložekvkulʹtivirovaniimezenhimalʹnyhprogenitornyhkletok AT pihtêêvdm ispolʹzovanieraznyhvidovpodložekvkulʹtivirovaniimezenhimalʹnyhprogenitornyhkletok AT ŝerbatûkal ispolʹzovanieraznyhvidovpodložekvkulʹtivirovaniimezenhimalʹnyhprogenitornyhkletok AT holodkovaol differentkindsofsubstrateusageforthemesenchimalprogenitorcellscultivation AT pihtêêvdm differentkindsofsubstrateusageforthemesenchimalprogenitorcellscultivation AT ŝerbatûkal differentkindsofsubstrateusageforthemesenchimalprogenitorcellscultivation |