Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом

Резюме. Рассмотрены морфологические и иммуногистохимические особенности неопластических клеток при различных вариантах неходжкинских злокачественных лимфом. Определены основные моноклональные антитела, выпускаемые Лабораторией сигнальных каскадов клеток Института экспериментальной патологии, онколог...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :	Онкологія
Дата:	2006
Автори:	Юрченко, О.В., Бердова, А.Г., Скрыма, М.Р., Шлапацкая, Л.Н., Михалап, С.В., Тарасова, Т.А., Алексик, Е.М., Кулик, Г.И., Сидоренко, С.П., Чехун, В.Ф.
Формат:	Стаття
Опубліковано:	Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Институт онкологии АМН Украины, Киев, Украина 2006
Теми:	Оригинальные исследования
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/24445
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом / О.В. Юрченко, А.Г. Бердова, М.Р. Скрыма, Л.Н. Шлапацкая, С.В. Михалап, Т.А. Тарасова, Е.М. Алексик, Г.И. Кулик, С.П. Сидоренко, В.Ф. Чехун// Онкологія. — 2006. — Т. 8, № 1. — С. 23-29. — Бібліогр.: 34 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-24445
record_format	dspace
spelling	Юрченко, О.В. Бердова, А.Г. Скрыма, М.Р. Шлапацкая, Л.Н. Михалап, С.В. Тарасова, Т.А. Алексик, Е.М. Кулик, Г.И. Сидоренко, С.П. Чехун, В.Ф. 2011-07-14T10:43:21Z 2011-07-14T10:43:21Z 2006 Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом / О.В. Юрченко, А.Г. Бердова, М.Р. Скрыма, Л.Н. Шлапацкая, С.В. Михалап, Т.А. Тарасова, Е.М. Алексик, Г.И. Кулик, С.П. Сидоренко, В.Ф. Чехун// Онкологія. — 2006. — Т. 8, № 1. — С. 23-29. — Бібліогр.: 34 назв. — рос. 1562-1774,0204-3564 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/24445 Резюме. Рассмотрены морфологические и иммуногистохимические особенности неопластических клеток при различных вариантах неходжкинских злокачественных лимфом. Определены основные моноклональные антитела, выпускаемые Лабораторией сигнальных каскадов клеток Института экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, необходимые для диагностики неходжкинских злокачественных лимфом в соответствии с классификацией Всемирной организации здравоохранения опухолевых заболеваний кроветворной и лимфоидной ткани. Ключевые слова: неходжкинские злокачественные лимфомы, морфология, иммуногистохимия, моноклональные антитела. Summary. Morphological and immunohistochemical specifics of neoplastic cells in various variants of malignant non-Hodgkin lymphomas are considered. Main monoclonal antibodies are identified (produced by the Laboratory of Signal Cell Cascades of the R.E. Kavetsky Institute of Experimental Pathology, Oncology, and Radiobiology, National Academy of Sciences of Ukraine), which are essential for diagnosing malignant non-Hodgkin lymphomas in accordance with the World Health Organizations classification of malignancies of hematopoietic and lymphoid tissues. Key Words: malignant non-Hodgkin lymphomas, morphology, immunohistochemistry, monoclonal antibodies. Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Институт онкологии АМН Украины, Киев, Украина Онкологія Оригинальные исследования Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом Use of domestic monoclonal antibodies in the diagnostics of malignant non-hodgkin lymphoma Article published earlier
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
title	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом
spellingShingle	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом Юрченко, О.В. Бердова, А.Г. Скрыма, М.Р. Шлапацкая, Л.Н. Михалап, С.В. Тарасова, Т.А. Алексик, Е.М. Кулик, Г.И. Сидоренко, С.П. Чехун, В.Ф. Оригинальные исследования
title_short	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом
title_full	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом
title_fullStr	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом
title_full_unstemmed	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом
title_sort	использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом
author	Юрченко, О.В. Бердова, А.Г. Скрыма, М.Р. Шлапацкая, Л.Н. Михалап, С.В. Тарасова, Т.А. Алексик, Е.М. Кулик, Г.И. Сидоренко, С.П. Чехун, В.Ф.
author_facet	Юрченко, О.В. Бердова, А.Г. Скрыма, М.Р. Шлапацкая, Л.Н. Михалап, С.В. Тарасова, Т.А. Алексик, Е.М. Кулик, Г.И. Сидоренко, С.П. Чехун, В.Ф.
topic	Оригинальные исследования
topic_facet	Оригинальные исследования
publishDate	2006
container_title	Онкологія
publisher	Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Институт онкологии АМН Украины, Киев, Украина
format	Article
title_alt	Use of domestic monoclonal antibodies in the diagnostics of malignant non-hodgkin lymphoma
description	Резюме. Рассмотрены морфологические и иммуногистохимические особенности неопластических клеток при различных вариантах неходжкинских злокачественных лимфом. Определены основные моноклональные антитела, выпускаемые Лабораторией сигнальных каскадов клеток Института экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, необходимые для диагностики неходжкинских злокачественных лимфом в соответствии с классификацией Всемирной организации здравоохранения опухолевых заболеваний кроветворной и лимфоидной ткани. Ключевые слова: неходжкинские злокачественные лимфомы, морфология, иммуногистохимия, моноклональные антитела. Summary. Morphological and immunohistochemical specifics of neoplastic cells in various variants of malignant non-Hodgkin lymphomas are considered. Main monoclonal antibodies are identified (produced by the Laboratory of Signal Cell Cascades of the R.E. Kavetsky Institute of Experimental Pathology, Oncology, and Radiobiology, National Academy of Sciences of Ukraine), which are essential for diagnosing malignant non-Hodgkin lymphomas in accordance with the World Health Organizations classification of malignancies of hematopoietic and lymphoid tissues. Key Words: malignant non-Hodgkin lymphomas, morphology, immunohistochemistry, monoclonal antibodies.
issn	1562-1774,0204-3564
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/24445
citation_txt	Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом / О.В. Юрченко, А.Г. Бердова, М.Р. Скрыма, Л.Н. Шлапацкая, С.В. Михалап, Т.А. Тарасова, Е.М. Алексик, Г.И. Кулик, С.П. Сидоренко, В.Ф. Чехун// Онкологія. — 2006. — Т. 8, № 1. — С. 23-29. — Бібліогр.: 34 назв. — рос.
work_keys_str_mv	AT ûrčenkoov ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT berdovaag ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT skrymamr ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT šlapackaâln ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT mihalapsv ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT tarasovata ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT aleksikem ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT kulikgi ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT sidorenkosp ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT čehunvf ispolʹzovaniemonoklonalʹnyhantitelotečestvennogoproizvodstvavdiagnostikenehodžkinskihzlokačestvennyhlimfom AT ûrčenkoov useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT berdovaag useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT skrymamr useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT šlapackaâln useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT mihalapsv useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT tarasovata useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT aleksikem useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT kulikgi useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT sidorenkosp useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma AT čehunvf useofdomesticmonoclonalantibodiesinthediagnosticsofmalignantnonhodgkinlymphoma
first_indexed	2025-11-25T20:39:05Z
last_indexed	2025-11-25T20:39:05Z
_version_	1850527548799188992
fulltext	ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 23О Н К О Л О Г И Я • Т. 8 • № 1 • 2 0 0 6 ВВЕДЕНИЕ Основные критерии, на которых базируется классификация ВОЗ опухолевых заболеваний кро- ветворной и лимфоидной ткани, — микроскопи- ческая структура опухоли и морфологические осо- бенности составляющих ее опухолевых клеток, им- мунофенотипический и генотипический профиль опухолевого клона лимфоидных клеток, клиничес- кая картина и стадия заболевания. Степень значи- мости каждого из этих критериев различна для от- дельных нозологических форм опухоли [1–3]. Уточ- нение гистогенеза неходжкинских злокачественных лимфом (НЗЛ), важное для выбора адекватных ме- тодов лечения, возможно с помощью гистологичес- ких, иммуногистохимических и молекулярно-гене- тических диагностических методов исследования [4]. Иммунофенотипирование патологических кле- ток с помощью моноклональных антител (МкАТ) необходимо не только для дифференциальной диа- гностики лимфом из малых клеток — хроническо- го лимфолейкоза/лимфомы из малых лимфоци- тов, фолликулярной лимфомы, мальтомы (MALT — mucosa associated lymphoid tumor) — и реактивных процессов, но и для дифференциации крупнокле- точных лимфом и метастазов рака в лимфатических узлах [5]. При некоторых формах НЗЛ наиболее су- щественными являются клинические особеннос- ти, как, например, при экстранодальной В-клеточ- ной лимфоме маргинальной зоны MALT-типа или при медиастинальной крупноклеточной В-клеточ- ной лимфоме [6–8]. Исследование иммуногистохимических марке- ров на современном этапе развития онкологии яв- ляется необходимым не только для классификации опухолей лимфоидной природы, но и для прогно- зирования ответа опухоли на проводимую терапию и выбора оптимальных схем лечения. В Институте экспериментальной патологии, он- кологии и радиобиологии (ИЭПОР) им. Р.Е. Ка- вецкого НАН Украины создана панель МкАТ для фенотипирования лимфоидных клеток больных с различными формами НЗЛ, их диагностики в соот- ветствии с классификацией ВОЗ опухолевых забо- леваний кроветворной и лимфоидной ткани. Цель работы — отбор диагностической пане- ли МкАТ отечественного производства для фено- типирования опухолей лимфоидной системы в со- ответствии с классификацией ВОЗ. В дальнейшем мы планируем создать прогностическую панель МкАТ на основании установления коррелятивных связей между клиническими особенностями болез- ни и иммунофенотипическими признаками злока- чественных клеток у больных с различными фор- мами НЗЛ. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ На первом этапе исследования проведен сравни- тельный анализ специфичности МкАТ, полученных в Лаборатории сигнальных каскадов клеток ИЭПОР им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, и аналогичных МкАТ, выпускаемых фирмой «Dako Cytomation» (Дания). Протестированы срезы миндалин и реак- тивных лимфатических узлов, установлена идентич- ность специфичности анализируемых МкАТ. Затем выполнено иммуногистохимическое ис- следование неопластических клеток опухолей у больных НЗЛ. Материалом исследования служили биоптаты лимфатических узлов и операционный ма- ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРОИЗВОДСТВА В ДИАГНОСТИКЕ НЕХОДЖКИНСКИХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ЛИМФОМ Резюме. Рассмотрены морфологические и иммуногистохимические особен- ности неопластических клеток при различных вариантах неходжкинских злокачественных лимфом. Определены основные моноклональные антитела, выпускаемые Лабораторией сигнальных каскадов клеток Института экс- периментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, необходимые для диагностики неходжкинских злокачествен- ных лимфом в соответствии с классификацией Всемирной организации здра- воохранения опухолевых заболеваний кроветворной и лимфоидной ткани. О.В. Юрченко А.Г. Бердова М.Р. Скрыма Л.Н. Шлапацкая С.В. Михалап Т.А. Тарасова Е.М. Алексик Г.И. Кулик С.П. Сидоренко В.Ф. Чехун Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины Институт онкологии АМН Украины, Киев, Украина Ключевые слова: неходжкинские злокачественные лимфомы, морфология, иммуногистохимия, моноклональные антитела. ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 24 О Н К О Л О Г И Я • Т. 8 • № 1 • 2 0 0 6 териал 50 больных, находившихся на лечении в от- делении системных опухолевых заболеваний Инс- титута онкологии АМН Украины и в Киевской го- родской онкологической больнице. Для морфологического исследования исполь- зовали ткани, залитые в парафин, с последующим изучением гистологических срезов, окрашенных гематоксилин-эозином. Иммунофенотипический профиль злокачественных клеток определяли на криостатных и парафиновых срезах с использова- нием РАР-метода, а также системы визуализации EnVision («Dako Cytomation», Дания) с помощью панели МкАТ по общепринятой методике [9]. Иммуногистохимическое исследование НЗЛ проводили в следующем порядке. На первом этапе в зависимости от результатов морфологического ис- следования выбирали панель МкАТ, включающую минимальный набор реагентов для установления наличия опухолевого процесса или реактивных из- менений в лимфатическом узле. Для этого, как пра- вило, исследовали экспрессию легких κ- и λ-цепей иммуноглобулинов (Ig). При подтверждении опухо- левого процесса у больного определяли клеточную природу новообразования, используя МкАТ против В- и Т-клеточных дифференцировочных антигенов. После этого подбирали панель МкАТ для дифферен- циальной диагностики НЗЛ в соответствии с класси- фикацией ВОЗ опухолевых заболеваний кроветвор- ной и лимфоидной ткани. В случае когда при мор- фологическом исследовании субстрат опухоли был представлен крупными анаплазированными клетка- ми, уже на первом этапе исследования целесообраз- ным представлялось применение МкАТ против ци- токератинов и общего лейкоцитарного антигена. И лишь при отсутствии всех указанных маркеров необ- ходимо применение МкАТ против антигенов, кото- рые экспрессируются на других тканях, с целью ус- тановления гисто- и цитогенеза опухоли. Для иммунофенотипирования использовали па- нель МкАТ, которая включала антитела, реагирую- щие с антигенами CD3, CD4, CD5, CD7, CD8, CD10, CD20, CD22, CD38, CD45, CD54, CD95, CD150, лег- кими κ- и λ-цепями Ig, HLA-DR и ИПO-38. Все МкАТ получены in vivo, очищены с помощью аф- финной хроматографии, в каждом случае проведено спектрометрическое определение содержания бел- ка. Анти-CD19, CD23, анти-IgM МкАТ были лю- безно предоставлены Е. Clark (США), а анти-CD30 и -Bcl-2 — фирмой «Dako Cytomation» (Дания). Ко- нечная концентрация МкАТ для иммуногистохими- ческого исследования составила 20 мкг/мл. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Лимфома из малых лимфоцитов (ЛМЛ). На долю ЛМЛ приходится 6,7% случаев НЗЛ [10]. Заболева- ние выявляют преимущественно у пациентов в воз- расте старше 50 лет (в среднем — 65 лет). Увеличенные лимфатические узлы у всех 15 ис- следованных больных имели стертую архитектони- ку тканевого рисунка с псевдофолликулами, пред- ставлеными светлыми участками, содержащими клетки более крупного размера, чем в темных об- ластях пораженных лимфатических узлов. Иногда отмечали вовлечение в опухолевый процесс интер- фолликулярных зон. Преобладающий клеточный профиль — малые лимфоциты небольшого размера с круглыми ядрами, содержащими конденсирован- ный хроматин, и небольшими ободками цитоплаз- мы. В некоторых случаях наблюдали полиморфизм ядер, клетки с инвагинацией ядерной мембраны, что создавало трудности в установлении диагноза, так как подобную морфологию имеют клетки при лимфоме из клеток мантийной зоны. Все опухолевые клетки при данном типе лимфомы экспрессировали пан-В-клеточные маркеры — СD20 (рис. 1а на с. 29), СD22; СD3+-клетки преимущест- венно присутствовали в незначительном количестве, за исключением одного больного. Большинство кле- ток при ЛМЛ экспрессировали поверхностные Ig, как правило, IgD и/или IgM [11]. Опухолевые клетки у всех исследованных нами больных были CD5+ (рис. 1б на с. 29). Отмечали наличие СD23-антигена и отсутствие экспрессии СD10-антигена. МкАТ ИПО-38, кото- рые выявляют ядерный антиген пролиферирующих клеток, реагировали, как правило, с небольшим ко- личеством клеток. Следует отметить, что в опухоле- вых клетках у всех исследованных нами больных при ЛМЛ отмечали экспрессию антиапоптотического бел- ка Вcl-2. Экспрессии активационного антигена Т-и В- лимфоцитов CD150, а также Fas-антигена не выявле- но. По всей видимости, присутствие большого коли- чества опухолевых Вcl-2+-клеток с заблокированным механизмом апоптоза, низкий пролиферативный ин- декс опухолевых клеток и отсутствие экспрессии Fas- антигена способствуют индолентному течению забо- левания у больных при ЛМЛ. Отсутствие экспрессии молекул адгезии, выявляемых МкАТ ICAM1 (CD54), у 6 больных коррелировало с вовлечением в опухоле- вый процесс костного мозга, что не отмечается у па- циентов, неопластические клетки которых экспрес- сируют ICAM1. Предшественником ЛМЛ является рециркулиру- ющая CD5+ CD23+ IgM+ IgD+ наивная В-клетка, ко- торую выявляют в периферической крови, первич- ных фолликулах, а также в зоне мантии первичных фолликулов [12]. Фенотип злокачественных клеток при ЛМЛ: SIg+; CD5+; CD10-; CD19+; CD20+; CD22+; CD23+; CD45+; CD54-/+;CD95-; CD150-; ИПО-38+ — в единичных злокачественных клетках. Лимфома из клеток мантийной зоны — высоко- агрессивное заболевание, составляет 3–10% случаев НЗЛ. Данная патология развивается у больных сред- него и пожилого возраста [13]. Обычно у всех паци- ентов отмечается гиперэкспрессия циклина D1, ко- торый является белком, обеспечивающим продви- жение клетки из G1- в S-фазу клеточного цикла [14]. Лимфома из клеток мантийной зоны (у 2 больных) ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 25О Н К О Л О Г И Я • Т. 8 • № 1 • 2 0 0 6 представляет собой опухолевый пролиферат из кле- ток первичных фолликулов или мантийной зоны. Лимфоидные инфильтраты имеют диффузный ха- рактер роста, часто формируют разрастания клеток мантии вокруг реактивных зародышевых центров. Опухолевые клетки небольшого размера с узким ободком цитоплазмы имеют ядра с разнообразны- ми инвагинациями мембраны и умеренно конден- сированным хроматином, ядрышки не визуализи- руются. Среди клеток опухоли выявляют единичные эпителиоидные клетки и гистиоциты. Стенки кро- веносных сосудов часто гиалинизированы. При иммуногистохимическом исследовании установлено, что большинство клеток экспресси- руют СD20-, СD5-антигены, но не экспрессируют CD10-антиген. Количество СD3+-Т-лимфоцитов было незначительным (рис. 2а на с. 29), не выявле- но экспрессии антигена CD150, CD95 и CD54. В от- личие от ЛМЛ, не выявлена экспрессия СD23-анти- гена. Пролиферативный потенциал лимфомы яв- ляется высоким, большинство неопластических клеток реагирует с МкАТ ИПО-38 (рис. 2б на с. 29). Экспрессия СD150 слабо выражена и определяет- ся не на всех клетках опухоли. Предшественником лимфомы из клеток ман- тийной зоны является активированный В-лимфо- цит, стимулированный к реакции зародышевого центра [15]. Фенотип злокачественных клеток при лимфоме из клеток мантийной зоны: циклин D1+; SIg+; CD5+; CD10-; CD19+; CD20+; CD22+; CD23-; CD45+; CD54-; CD95-; CD150 +; ИПО-38+ — экспрессирован в боль- шинстве злокачественных клеток. Лимфоплазмоцитарная лимфома, или иммуноци- тома, — редкая форма опухоли; составляет пример- но 1% в структуре НЗЛ [16]. Нами проведено мор- фологическое и иммуногистохимическое исследо- вание лимфоплазмоцитарной лимфомы у 4 больных. Опухоль состоит из малых лимфоцитов, имеющих признаки дифференцировки в сторону плазматичес- ких клеток. В опухолевом клоне отсутствуют клет- ки с более низким уровнем дифференцировки, что является важным, так как часть клеток многих опу- холей В-клеточной природы, включая хронический лимфолейкоз, лимфому из клеток мантийной зоны, маргинальной зоны и фолликулярную лимфому, мо- гут дифференцироваться в сторону плазматических клеток [17]. При лимфоплазмоцитарной лимфоме выявляли тельца Русселя, содержащие включения Ig, а также тучные клетки в значительном количест- ве. Морфологическая диагностика, как правило, не вызывала затруднений, диагноз может быть уста- новлен при морфологическом исследовании сре- зов, окрашенных гематоксилин-эозином. Экспрес- сия опухолевыми клетками одного типа легких це- пей Ig подтверждает моноклональность процесса и свидетельствует о том, что плазмоцитоидные и плазматические клетки являются опухолевыми, со- ставляя злокачественный клон лимфомы. Для опу- холевых клеток характерно отсутствие экспрессии CD5- и CD10-, CD95- и CD150-антигенов, экспрес- сия В-клеточных маркеров CD19, CD20, CD22, но в части случаев выявлены молекулы адгезии CD54. Количество CD3+-Т-лимфоцитов невелико. Про- лиферативный индекс лимфоплазмоцитарных лим- фом низкий. Клеточный аналог — В-лимфоцит, развиваю- щийся вне зародышевых центров лимфоидных фол- ликулов, стимулированный после встречи с антиге- ном к дифференцировке в лимфоплазмоцитарную клетку, секретирующую IgM. Фенотип злокачественных клеток при лимфо плазмоцитарной лимфоме: SIg+; CD5-; CD10-; CD19+; CD20+; CD22+; CD23+; CD45+; CD54+/-; CD95-; CD150-; ИПО-38+ — в небольшом количестве зло- качественных клеток. Фолликулярная лимфома. Фолликулярная лимфома относится к числу наиболее частых опухолевых забо- леваний лимфоидной ткани, составляет 35% в струк- туре НЗЛ. Выявляется преимущественно у взрослых, как правило, при установлении диагноза опухолевый процесс уже достаточно распространенный. Иссле- дованы опухоли 5 больных с фолликулярным типом роста, однако выявлены также участки диффузного роста. Неопластические фолликулы имели нечеткие контуры, в них часто отсутствовала зона мантии, они плотно прилегали друг к другу, стирая нодули пора- женного лимфатического узла. Опухолевые фоллику- лы при данной лимфоме чаще имеют примерно оди- наковую форму и размеры, чем отличаются от реак- тивных фолликулов при гиперпластических процессах [18]. Еще одним важным морфологическим призна- ком фолликулярных лимфом является большее коли- чество фолликулярных структур на единицу площади гистологического среза, чем при гиперпластических состояниях. В наших наблюдениях фолликулярные лимфомы содержали 2 типа клеток: центроциты и центробласты или нерасщепленные клетки зароды- шевых центров. Клетки в составе неопластических фолликулов экспрессировали Bcl-2 (рис. 3а на с. 29). Этот белок не выявляется в В-клетках центров фолли- кулов в норме и при реактивной гиперплазии, а рас- полагается на клетках вокруг вторичных фолликулов (рис. 3б на с. 29) [19]. Злокачественные клетки при фолликулярной лимфоме экспрессировали поверхностные Ig одно- го класса (чаще IgM, чем IgG), основные В-клеточ- ные антигены (CD19, CD20, CD22) и антиген CD10. Экспрессия антигена CD23 варьировала от случая к случаю, кроме того, патологические клетки всех исследованных нами больных были CD5-. Клеточ- ный аналог при фолликулярной лимфоме — клетки зародышевых центров фолликулов — центробласты и центроциты. Фенотип злокачественных клеток при фоллику лярной лимфоме: SIg+; CD5-; CD10+; CD19+; CD20+; CD22+; CD23-/+; CD45+; CD54+/-; CD95-; CD150-; ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 26 О Н К О Л О Г И Я • Т. 8 • № 1 • 2 0 0 6 ИПО-38+ — экспрессируется в незначительном ко- личестве злокачественных клеток. Диффузная Вклеточная крупноклеточная лим фома (ДВКЛ). Наиболее многочисленную группу составили больные с ДВКЛ (19 пациентов). Хотя в классификации ВОЗ опухолевых заболеваний кро- ветворной и лимфоидной ткани этот тип лимфо- мы выделен в самостоятельную клинико-морфоло- гическую нозологию, следует отметить гетероген- ность данных лимфом. Объединение их является искусственным, на сегодняшний день четкие мор- фологические и клинические критерии, позволяю- щие выделить отдельные формы и варианты ДВКЛ еще четко не определены [20]. ДВКЛ характеризуются диффузной пролифера- цией крупных трансформированных лимфоидных клеток, размер ядер которых превышает размеры ядер гистиоцитов. Характерно диффузное частич- ное интерфолликулярное и реже синусоидальное поражение лимфатического узла. Часто выявляют лимфоидную инфильтрацию перинодальных тка- ней и сосудов. Следует отметить вариабельность микроскопи- ческого строения ДВКЛ. За редким исключени- ем, по иммунофенотипическим и генотипическим параметрам удается выделить отдельные вариан- ты этой группы лимфом, и поэтому в клинической практике используют термин ДКВЛ или же приме- няют названия ее морфологических вариантов: цен- тробластная, иммунобластная лимфома, лимфома, богатая Т-лимфоцитами, анапластическая лимфо- ма. К числу редко выявляемых морфологических вариантов ДКВЛ относят лимфому из светлых кле- ток, из перстневидных клеток, лимфому с фибрил- лярным матриксом [21]. Иммуногистохимическое исследование злока- чественных клеток при данных новообразованиях позволяет определить В-клеточную природу при всех установленных нами морфологических вариан- тах, поскольку большинство неопластических кле- ток экспрессируют антигены CD20 и CD22 (рис. 4а на с. 29). У большинства больных СD3+-клетки опре- деляли в небольшом количестве, они диффузно рас- полагались среди патологических клеток, за исклю- чением 3 больных, в опухолях которых преоблада- ли Т-лимфоциты (от 60 до 80%). Эти опухоли были квалифицированы как ДВКЛ, богатые Т-лимфоци- тами [22, 23]. Наличие в опухолях крупных клеток, которые содержат лишь одну легкую цепь Ig (κ или λ), дало возможность установить этим больным диа- гноз ДВКЛ, богатой Т-лимфоцитами. Большинство злокачественных клеток у всех исследованных экс- прессировали антиген, ассоциированный с проли- ферацией, определяемый МкАТ ИПО-38. Также от- мечали экспрессию CD95-антигена. Злокачествен- ные клетки CD10+ выявлены в нескольких случаях. Лишь у одного больного с иммунобластным вариан- том ДВКЛ были обнаружены CD5+-клетки. Следует обратить особое внимание на анаплас- тический вариант ДКВЛ (у 3 больных), при котором морфологическая картина характеризовалась пре- имущественно диффузным характером роста опухо- ли (лишь в одном случае были частично сохранены лимфоидные фолликулы). Инвазия капсулы отсут- ствовала, выявляли инвазию клеток опухоли в лим- фатические синусы. Отмечали выраженный поли- морфизм опухолевых клеток с признаками атипии. Форма и размеры клеток были разными, преобла- дали ядра неправильной формы, довольно часто дву- и многоядерные. Выявлена экспрессия акти- вационных антигенов CD30 и CD150, а пролифера- тивный потенциал опухолевых клеток был наибо- лее высоким среди таковых при разных вариантах ДВКЛ (рис. 4б на с. 29). ДКВЛ перстневидного типа, лимфомы из свет- лых клеток с фибриллярным матриксом, а также анапластическая лимфома требуют дифференци- альной диагностики с метастазами рака [24]. В та- ких случаях необходимо применять МкАТ к общему лейкоцитарному антигену СD45 и цитокератинам. Генный профиль клеток ДКВЛ при анализе экс- прессии генов с помощью микрочипов свидетель- ствует о том, что это заболевание включает, по мень- шей мере, три подгруппы образований, которые про- исходят из клеток, находящихся на разных стадиях дифференцировки. Эти подгруппы имеют различные механизмы злокачественной трансформации, что свидетельствует об их различном цитогенезе [25]. Первая подгруппа включает так называемые гер- минативные лимфомы, возникшие из клеток за- родышевых центров, в клетках которых произош- ла гипермутация генов Ig и отмечается экспрес- сия Bcl-2. Вторая подгруппа включает лимфомы, кото- рые развились из антиген-активированной клет- ки вне зародышевого центра, на таких патологи- ческих клетках определяются активационные ан- тигены. По всей видимости, именно к этой группе следует отнести лимфомы анапластического типа, которые экспрессируют антигены, выявляемые анти-CD30 и CD150 МкАТ, что соответствует экс- прессии CD150 на их нормальных аналогах [26]. Следует отметить, что общая выживаемость больных с анапластическим вариантом В-клеточной лимфо- мы намного меньше средней. Третья подгруппа является столь неоднородной, что требует проведения дальнейших исследований. Фенотип злокачественных клеток при ДКВЛ: CD5+/-; CD10+/-; CD19+; CD20+; CD22+; CD45+; CD54+/-; CD95+; CD150-; ИПО-38+ — в вариабель- ном количестве клеток. Фенотип злокачественных клеток при анапластическом варианте ДКВЛ: CD5+/-; CD10+/-; CD19+; CD20+/-; CD22+/-; CD30+; CD45+; CD54+/-; CD95+; CD150+; ИПО-38+ — в вариабель- ном количестве злокачественных клеток. Тклеточная лимфома, более никак не охаракте ризованная. Периферические Т-клеточные лимфо- ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 27О Н К О Л О Г И Я • Т. 8 • № 1 • 2 0 0 6 мы характеризуются агрессивным клиническим те- чением и плохим прогнозом, однако их биологи- ческие особенности не изучены подробно в связи с нечастым распространением, а также отсутствием специфических молекулярно-генетических особен- ностей [27]. Термином Т-клеточная лимфома, бо- лее никак не охарактеризованная, обозначают лим- фоидные новообразования, не имеющие признаков других Т-клеточных лимфом. Данные микроскопического анализа Т-клеточ- ной лимфомы, более никак не охарактеризованной (у 3 больных), свидетельствуют, что рисунок лимфа- тического узла стерт и замещен полями атипичных опухолевых клеток различного размера, часто с ядра- ми неправильной формы с инвагинациями. Доволь- но часто отмечается инфильтрация эозинофилами, плазматическими клетками и гистиоцитами. Все клетки экспрессируют CD45-антиген, боль- шинство клеток являются CD3+ (рис. 5а на с. 29), среди которых преобладают CD8+-лимфоциты. Наблюдается лишь незначительное количество CD20+-клеток (рис. 5б на с. 29). В пролиферативном цикле находятся 40–50% опухолевых клеток. Фенотип злокачественных клеток при Тклеточ ной лимфоме, более никак не охарактеризованной: CD45+; CD19-; CD20-; CD22 -; CD3+; CD7+; CD4+/-; CD8+/-; CD95+/-; CD150+; ИПО-38+ — в вариабель- ном количестве злокачественных клеток. Анапластическая СD30+крупноклеточная лим фома — СD30+-лимфома Т- или ноль-клеточная. Во многих случаях эта лимфома ранее интерпре- тировалась как злокачественный гистиоцитоз, бо- лезнь Ходжкина с лимфоидным истощением, ати- пичный гистиоцитоз. У 2 из обследованных нами больных установлен диагноз анапластическая лим- фома ноль-клеточного типа. Неопластические клет- ки были большего размера, чем при СD30+-лим- фоме Т-клеточного типа, часто с причудливыми многолопастными ядрами, придающими сходство с клетками Березовского—Штернберга. В ткани опухоли выявляли реактивные изменения, пред- ставленные лимфоцитами, плазматическими клет- ками, гистиоцитами, эозинофилами, но в меньшем количестве, чем при лимфогранулематозе. Все опу- холевые клетки экспрессировали активационный антиген СD30. Т-клеточные маркеры не выявле- ны, а количество СD20+-клеток, представленных малыми лимфоцитами и образовывающих неболь- шие скопления, было невелико. Все клетки в сре- зах у исследованных больных экспрессировали еще один активационный антиген, который определял- ся анти-СD150 МкАТ. Фенотип злокачественных клеток при анапласти ческой СD30+крупноклеточной лимфоме нолькле точного типа: СD45-; CD3-; CD7-; СD20-; СD22-; СD30+; CD95+; СD150+; ИПО-38 — в большинстве злокачественных клеток. ВЫВОДЫ На основании морфологического и иммуногис- тохимического анализа НЗЛ у обследованных паци- ентов выделены основные формы и варианты забо- левания в соответствии с классификацией ВОЗ опу- холевых заболеваний кроветворной и лимфоидной ткани. В каждом случае обязательным условием яв- ляется сопоставление результатов морфологическо- го и иммуногистохимического исследования с кли- ническими данными. Панель МкАТ, производимых в Лаборатории сигнальных каскадов клеток ИЭПОР им. Р.Е. Ка- вецкого НАН Украины, является достаточной для установления диагноза НЗЛ в соответствии с клас- сификацией ВОЗ опухолевых заболеваний крове- творной и лимфоидной ткани. Для ЛМЛ прогностическое значение имеет уста- новление пролиферативного потенциала опухоли, повышение которого свидетельствует о резистент- ности больных к лечению. Определение экспрес- сии молекул адгезии CD54 способствует установ- лению распространенности опухолевого процесса с вовлечением костного мозга. Особо важным явля- ется исследование экспрессии антигена CD150 для выделения среди ДВКЛ варианта с фенотипом акти- вированных В-клеток, что требует подбора спе- циальных терапевтических схем лечения в связи с агрессивным характером клинического течения анапластических ДКВЛ. Таким образом, проведение уточняющей диа- гностики НЗЛ с определением указанных выше мар- керов для прогнозирования течения заболевания и ответа на противоопухолевую терапию у пациентов с лимфомами способствует выбору адекватной так- тики лечения в каждом конкретном случае. ЛИТЕРАТУРА 1. Harris NL, Jaffe ES, Stein H, et al. A revised Europe- an-American classification of lymphoid neoplasms: a proposal from the International Lymphoma Study Group. Blood 1994; 84: 1361–92. 2. Harris NL, Jaffe ES, Diebold J, et al. World Health Organi- zation classification of neoplastic diseases of the of the hematopoe- tic and lymphoid tissue: report of the Clinical Advistory Commit- tee Meeting. Airlie House, Virginia, November 1997. J Clin On- col, 1999; 17: 3835–49. 3. Diebold J. The WHO classification of malignant lympho- mas. Exp Oncol 2001; 23: 101. 4. Глузман ДФ, Абраменко ИВ, Скляренко ЛМ, Надгор ная ВА. Лабораторная диагностика онкогематологических заболеваний. К: МОРИОН, 1998, 336 с. 5. Anon HP. A clinical evaluation of the International lym- phoma Study Group classification of non-Hodgkin’s lympho- ma. The Non-Hodgkin’s lymphoma classification Project. Blood 1997; 89: 3909–18. 6. Nakamuta S, Aoyagi K, Furuse M, et al. B-cell monoclona- lity precedes the developmant of gastric MALT lymphoma in He- lictobacter pilori-associated chronic gastrits. Am J Pathol 1998; 152:1271–79. 7. Логінський ВЄ, Лебедь ГБ. Сучасні принципи діагнос- тики пухлин із зрілих лімфоїдних клітин. Лаб діагностика 2003; (3): 48–54. ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 28 О Н К О Л О Г И Я • Т. 8 • № 1 • 2 0 0 6 8. Berger F, Felman P, Thieblemont C, et al. MALT marginal zone B-cell lymphomas: a discription of clinical presentation and outcome in 124 patients. Blood 2000; 95: 1950–56. 9. Lykanova NY, Yurchehko OV, Kuliк GI, et al. Expression of p53 and bcl-2 proteins in epitelial ovarian carcinoma with different grade of differentiation. Experim Oncology 2000; 22: 91–3. 10. Голенков АК, Абдул Латиф Шахер, Митерев ГЮ. Им- мунологический фенотип и клиническое течение неходжкин- ских лимфом. Гематол и трансфузиол 1998; 43: 41–4. 11. Ben Ezra J, Burke JS, Swartz WG, et al. Small lympho- cytic lymphoma: a clinicopathologic analysis of 268 cases. Blood 1989; 73: 579–87. 12. CaligarisCappio F. B-chronic lymphocytic leukemia: a malignancy of anti-self B-cells. Blood 1996; 87: 2615–20. 13. Bosch C, LopezGullermo A, Campo E, et al. Mantle cell lymphoma: presenting features, response to therapy, and prognos- tic factors. Cancer 1998; 82: 567–75. 14. Тахаев ЗВ, Пробатова НА, Тупицын НН, Шолохова ЕН. Лимфома из клеток мантии. Архив патол 2000; 2: 38–42. 15. Абраменко ИВ. Клетки-мишени при развитии злока- чественных лимфопролиферативных заболеваний: феноти- пическая и молекулярно-генетическая характеристика. Укр мед часопис 1998; 3: 15–9. 16. Warnke RA. Morphological, immunological and genetic feature of B CLL/SLL and immunocytoma. Clinical Implica- tion of the REAL Classification. Springer-Verlag, London, 1999: 5.1–5.5. 17. Jaffe ES, Harris NL, Stein H, et al. World Health Organi- zation Classification of Tumours. Pathology and Genetics of Tu- mours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. Lyon: IARS Press 2001. 351 p. 18. Криволапов ЮА, Белянин ВЛ. Морфологические раз- личия фолликулярных лимфом и фолликулярной гиперпла- зии лимфатических узлов. Арх патол 2003; 65 (1):, 17–21. 19. Utz JL, Swerdlow SH. Distinction of follicular hyperplasia from follicular lymphoma in B5-fixed tissue: comparision of MT2 and bcl-2 antibodies. Hum Pathol 1993; 24: 1155. 20. Warnke RA. Morphological, immunological and genetic feature of diffuse large B cell lymphomas. In: Human Lymphoma. Clinical Implication of the REAL Claassification. Springer-Ver- lag, London, 1999: 231–6. 21. Новик АА. Классификация злокачественных лимфом. Санкт-Петербург: ЭЛБИ, 2000. 126 с. 22. Павловская АИ, Ковригина АМ, Шолохова ЕН и др. О дифференциальной диагностике В-клеточной лимфомы, богатой Т-клетками, и периферических Т-клеточных лим- фом. Арх патол 2000; (4): 8–11. 23. Fraga M, SanchezVerde, Forteza J, et al. T-cell/histiocyte rich B-cell lymphoma is a disseminated aggressive neoplasm: dif- ferential diagnosis from Hodgkin’s lymphoma. Histopathol 2002; 41 (3): 216–29. 24. Chan JKC. Tumors of the lymphreticular system. In: Dia- gnostic Histopathology of tumors, 2nd ed. London etc: Churchill Livingstone 2000. 1099 р. 25. Shaffer AL, Rosenwald A, Staudt LM. Lymphoid malig- nancies: the dark side of B-cell differentiation. Nat Rev Immu- nol 2002; 2: 920–32. 26. Yurchenko OV, Shlapatska LM, Skryma MR, et al. Immunochistochemical studies of CD150 expression in some human tumors. Exp Oncol 200; 25 (3): 186–90. 27. Pescarmona E, Pignoloni P, Puopolo M, et al. p53 over- expression identifies a subset of nodal peripheral T-cell lympho- mas with a distinctive biological profile and poor clinical outcome. J Pathol 2001; 195: 361–6. USE OF DOMESTIC MONOCLONAL ANTIBODIES IN THE DIAGNOSTICS OF MALIGNANT NON-HODGKIN LYMPHOMA O.V. Yurchenko, A.G. Berdova, M.R. Skryma, L.N. Shlapatskaya, S.V. Mikhalap, T.A. Tarasova, E.M. Aleksik, G.I. Kulik, S.P. Sidorenko, V.F. Chekhun Summary. Morphological and immunohistochemical specifics of neoplastic cells in various variants of ma- lignant non-Hodgkin lymphomas are considered. Main monoclonal antibodies are identified (produced by the Laboratory of Signal Cell Cascades of the R.E. Kavetsky Institute of Experimental Pathology, Oncology, and Ra- diobiology, National Academy of Sciences of Ukraine), which are essential for diagnosing malignant non-Hodg- kin lymphomas in accordance with the World Health Organizations classification of malignancies of hema- topoietic and lymphoid tissues. Key Words: malignant non-Hodgkin lymphomas, morphology, immunohistochemistry, monoclonal antibodies. Адрес для переписки: Юрченко О.В. 03022, Киев, ул. Васильковская, 45 Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 29О Н К О Л О Г И Я • Т. 8 • № 1 • 2 0 0 6 Рис. 1. Экспрессия CD20- (а) и CD5-антигена (б) опухолевыми клетками при ЛМЛ (х 200) а б Рис. 2. Экспрессия CD3-антигена (а) и ИПО-38 (б) опухолевыми клетками при лимфоме из клеток мантийной зоны (х 200) а б Рис. 3. Экспрессия Bcl-2 опухолевыми клетками при фолликулярной лимфоме (а) и реактивными клетками при фолликулярной гиперплазии лимфатического узла (б) (х 100) а б Рис. 4. Экспрессия CD20-антигена (х 200) (а) и ИПО-38 (х 400) (б) опухолевыми клетками при ДВКЛ а б Рис. 5. Экспрессия CD3- (а) и CD20-антигена (б) опухолевыми клетками при Т-клеточной лимфоме, более никак не охарактеризованной (х 200) (рис. 1–5 — к статье О.В. Юрченко и соавт., с. 23) а б

Использование моноклональных антител отечественного производства в диагностике неходжкинских злокачественных лимфом

Репозитарії

Схожі ресурси