Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам
Резюме. Разработаны модификации методики капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани, которые могут быть использованы как в экспериментальной онкологии, так и в клинической практике для определения в течение 48 ч индивидуальной чувствительности клеток из опухолей или метастазов к противоо...
Збережено в:
| Дата: | 2002 |
|---|---|
| Автор: | |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
2002
|
| Назва видання: | Онкологія |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/26979 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам / Р.В. Ищенко // Онкологія. — 2002. — Т. 4, № 1. — С. 15-17. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-26979 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-269792025-02-09T14:52:08Z Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам Technique of drop/plasma cultivation of tumor tissues for snap analysis of individual susceptibility to chemodrugs Ищенко, Р.В. Оригинальные исследования Резюме. Разработаны модификации методики капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани, которые могут быть использованы как в экспериментальной онкологии, так и в клинической практике для определения в течение 48 ч индивидуальной чувствительности клеток из опухолей или метастазов к противоопухолевым препаратам. Ключевые слова: противоопухолевая химиотерапия, индивидуальная чувствительность, экспресс-определение, методика in vitro. Summary. Several modifications of the drop/plasma method for tumor tissue cultivation have been developed that may be used both in experimental oncology and in clinical practice with the view of assessment within 48 hours of the individual susceptibility of tumor and metastasis cell to anti-tumor agents. Key Words: anti-tumor chemotherapy, individual susceptibility, snap analysis, in vitro assay. 2002 Article Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам / Р.В. Ищенко // Онкологія. — 2002. — Т. 4, № 1. — С. 15-17. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. 1562-1774,0204-3564 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/26979 ru Онкологія application/pdf Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Оригинальные исследования Оригинальные исследования |
| spellingShingle |
Оригинальные исследования Оригинальные исследования Ищенко, Р.В. Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам Онкологія |
| description |
Резюме. Разработаны модификации методики капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани, которые могут быть использованы как в экспериментальной онкологии, так и в клинической практике для определения в течение 48 ч индивидуальной чувствительности клеток из опухолей или метастазов к противоопухолевым препаратам.
Ключевые слова: противоопухолевая химиотерапия, индивидуальная чувствительность, экспресс-определение, методика in vitro. |
| format |
Article |
| author |
Ищенко, Р.В. |
| author_facet |
Ищенко, Р.В. |
| author_sort |
Ищенко, Р.В. |
| title |
Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам |
| title_short |
Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам |
| title_full |
Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам |
| title_fullStr |
Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам |
| title_full_unstemmed |
Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам |
| title_sort |
методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам |
| publisher |
Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького |
| publishDate |
2002 |
| topic_facet |
Оригинальные исследования |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/26979 |
| citation_txt |
Методика капельно-плазменного культивирования опухолевой ткани для экспресс-определения индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам / Р.В. Ищенко // Онкологія. — 2002. — Т. 4, № 1. — С. 15-17. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. |
| series |
Онкологія |
| work_keys_str_mv |
AT iŝenkorv metodikakapelʹnoplazmennogokulʹtivirovaniâopuholevojtkanidlâékspressopredeleniâindividualʹnojčuvstvitelʹnostikhimiopreparatam AT iŝenkorv techniqueofdropplasmacultivationoftumortissuesforsnapanalysisofindividualsusceptibilitytochemodrugs |
| first_indexed |
2025-11-27T01:00:33Z |
| last_indexed |
2025-11-27T01:00:33Z |
| _version_ |
1849903272448491520 |
| fulltext |
ÎÍÊÎËÎÃÈß ! Ò. 4 ! ¹ 1 ! 2002 15
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Ñîãëàñíî ñîâðåìåííûì ïðåäñòàâëåíèÿì, ïðè ëå÷å-
íèè áîëüíûõ ñî çëîêà÷åñòâåííûìè îïóõîëÿìè ïðèìå-
íÿþò õèìèîòåðàïåâòè÷åñêèå ïðåïàðàòû, ðàçëè÷àþùè-
åñÿ ïî ìåõàíèçìó äåéñòâèÿ. Òàêæå èçâåñòíî, ÷òî ó ðàç-
íûõ áîëüíûõ îïóõîëè, ñõîäíûå ïî ãèñòîëîãè÷åñêîìó
ñòðîåíèþ, èìåþò èíäèâèäóàëüíóþ õèìèî÷óâñòâèòåëü-
íîñòü.  ñâÿçè ñ ýòèì ðàçðàáîòàíî äîñòàòî÷íî ìíîãî
ìåòîäèê îïðåäåëåíèÿ õèìèî÷óâñòâèòåëüíîñòè [1�4],
îäíàêî ïðàêòè÷åñêè âñå îíè èñêëþ÷àþò íåïîñðåäñòâåí-
íûé êîíòàêò îïóõîëåâîé òêàíè ñ õèìèîïðåïàðàòîì è
îñíîâûâàþòñÿ íà îïðåäåëåíèè èíäèâèäóàëüíîé ôåð-
ìåíòàòèâíîé àêòèâíîñòè îïóõîëåé [5]. Âåðîÿòíî, ïî-
ýòîìó ðåçóëüòàòû ëàáîðàòîðíûõ òåñòîâ íå âñåãäà ñîîò-
âåòñòâóþò îæèäàåìîìó òåðàïåâòè÷åñêîìó ýôôåêòó [6].
Ìåòîäèêè ïðÿìîãî îïðåäåëåíèÿ õèìèî÷óâñòâèòåëüíî-
ñòè îïóõîëåé ïðè êóëüòèâèðîâàíèè èõ êëåòîê in vitro
òàêæå èìåþò îïðåäåëåííûå îãðàíè÷åíèÿ. Áîëüøèíñòâî
òàêèõ ìåòîäèê ïðåäóñìàòðèâàåò èñïîëüçîâàíèå ñèíòå-
òè÷åñêèõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä, êîòîðûå ñîçäàþò èñêóññò-
âåííûå óñëîâèÿ, ñóùåñòâåííî îòëè÷àþùèåñÿ îò èñõîä-
íûõ, îïðåäåëÿþùèõ ðîñò îïóõîëè â îðãàíèçìå [3, 4].
Êàïåëüíî-ïëàçìåííûå ìåòîäèêè ïðåäóñìàòðèâà-
þò èñïîëüçîâàíèå ïëàçìû êðîâè ÷åëîâåêà è ñîçäàíèå
ñðåäû, íàèáîëåå áëèçêîé ê èñõîäíîé. Âïåðâûå êàïåëü-
íî-ïëàçìåííûå êóëüòóðû áûëè ïðåäëîæåíû àìåðè-
êàíñêèì ýìáðèîëîãîì Ðîññîì Ãàððèñîíîì (ìåòîä
âèñÿ÷åé êàïëè) â 1907 ã. Ñðåäè ðàçëè÷íûõ ìîäèôèêà-
öèé â íàñòîÿùåå âðåìÿ íàèáîëåå ðàñïðîñòðàíåí ìå-
òîä Ìàêñèìîâà, çàêëþ÷àþùèéñÿ â èñïîëüçîâàíèè ýì-
áðèîíàëüíîãî ýêñòðàêòà, ðàñòâîðà Òèðîäå è ñûâîðîò-
êè êðîâè äîíîðà. Îòíîñèòåëüíûå íåäîñòàòêè äàííîãî
ìåòîäà � èñïîëüçîâàíèå ýìáðèîíàëüíîãî ýêñòðàêòà,
÷òî ÿâëÿåòñÿ ñïîðíûì â ìîðàëüíîì àñïåêòå (Åâðîïåé-
ñêàÿ êîíâåíöèÿ «Î çàïðåòå ïðèìåíåíèÿ ýìáðèîíàëü-
íûõ òêàíåé»), à òàêæå ïëàçìà êðîâè äîíîðà, ñîñòàâ êî-
òîðîé ñóùåñòâåííî îòëè÷àåòñÿ îò ïëàçìû êðîâè áîëü-
íîãî, ÷åì îáóñëîâëåíû íåäîñòàòî÷íûé ïðîöåíò ïåðå-
âèâàåìîñòè (91%, ïî äàííûì àâòîðà ) è ìåäëåííîå ïî-
ÿâëåíèå çîíû ðîñòà.
 ñâÿçè ñ èçëîæåííûì íàìè áûëà ïîñòàâëåíà öåëü
ðàçðàáîòàòü óñêîðåííóþ ìåòîäèêó ïðÿìîãî îïðåäå-
ëåíèÿ èíäèâèäóàëüíîé õèìèî÷óâñòâèòåëüíîñòè â êà-
ïåëüíî-ïëàçìåííûõ êóëüòóðàõ îïóõîëåâîé òêàíè.
Íà ïåðâîì ýòàïå èññëåäîâàíèÿ áûëà ðàçðàáîòàíà
ìåòîäèêà êàïåëüíî-ïëàçìåííîãî êóëüòèâèðîâàíèÿ
îïóõîëåâîé òêàíè ñ èñïîëüçîâàíèåì ïëàçìû êðîâè
áîëüíîãî, ó êîòîðîãî áðàëè îïóõîëü, îïóõîëåâîãî
ýêñòðàêòà èç íåå è ðàñòâîðà Òèðîäå (çàÿâêà íà èçîá-
ðåòåíèå «Ñïîñîá êóëüòèâèðîâàíèÿ îïóõîëåâîé òêà-
íè» îò 06.05.2001 ã. ¹ 2001053089, ïîëîæèò. ðåøåíèå
îò 30.11.2001 ã.), èìåþùàÿ íåñêîëüêî ìîäèôèêàöèé.
Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ îïóõîëåâîãî ýêñòðàêòà ôðàã-
ìåíò îïóõîëè (äèàìåòðîì îêîëî 1ñì) â ñòåðèëüíûõ
óñëîâèÿõ ìåõàíè÷åñêè èçìåëü÷àëè, îòìûâàëè èçîòî-
íè÷åñêèì ðàñòâîðîì íàòðèÿ õëîðèäà, ðàñòèðàëè ñ
êâàðöåâûì ïåñêîì, ñóñïåíäèðîâàëè â 5 ìë ýòîãî ðà-
ñòâîðà è ôèëüòðîâàëè.  ïîëó÷åííûé îïóõîëåâûé ýê-
ñòðàêò äîáàâëÿëè îäèí èç àíòèáèîòèêîâ øèðîêîãî
ñïåêòðà äåéñòâèÿ â îáùåïðèíÿòûõ äîçàõ; õðàíèëè
ïðè òåìïåðàòóðå îò 0 äî �3 °Ñ â òå÷åíèå íå áîëåå 2 ñóò.
Ðàñòâîð Òèðîäå ãîòîâèëè ïî àâòîðñêîé ìåòîäèêå
(NaCI � 8 ã, KCI, CaCI2 � ïî 0,2 ã, MgCI2·6H2O �
0,1 ã, NaH2PO4 � 0,05 ã, NaHCO3 � 1 ã, ãëþêîçà � 1 ã,
Aq. Bidest � 1 ë, ðÍ � 7,35�7,4), ñòåðèëèçîâàëè ôèëü-
òðîâàíèåì. Ïåðåä ïðåìåäèêàöèåé ó áîëüíîãî ïðîâî-
äèëè çàáîð 5 ìë êðîâè èç ïåðèôåðè÷åñêîé âåíû, êî-
òîðóþ çàòåì öåíòðèôóãèðîâàëè è îòáèðàëè ñðåäíþþ
òðåòü ïëàçìû.
Ð.Â. Èùåíêî
Äîíåöêèé ãîñóäàðñòâåííûé
ìåäèöèíñêèé óíèâåðñèòåò
ÌÇ Óêðàèíû, Äîíåöê, Óêðàèíà
Êëþ÷åâûå ñëîâà:
ïðîòèâîîïóõîëåâàÿ
õèìèîòåðàïèÿ, èíäèâèäóàëüíàÿ
÷óâñòâèòåëüíîñòü, ýêñïðåññ-
îïðåäåëåíèå, ìåòîäèêà in vitro.
РАБОТА&РЕКОМЕНДОВАНА&К&ПУБЛИКАЦИИ&ПО&ИТОГАМ
IV РЕСПУБЛИКАНСКОЙ&НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ
КОНФЕРЕНЦИИ&МОЛОДЫХ&ОНКОЛОГОВ&УКРАИНЫ&(КИЕВ, 2001)
МЕТОДИКА
КАПЕЛЬНО-ПЛАЗМЕННОГО
КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
ОПУХОЛЕВОЙ5ТКАНИ
ДЛЯ ЭКСПРЕСС-ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ИНДИВИДУАЛЬНОЙ
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ
К ХИМИОПРЕПАРАТАМ
Ðåçþìå. Ðàçðàáîòàíû ìîäèôèêàöèè ìåòîäèêè êàïåëüíî-ïëàçìåííîãî êóëü-
òèâèðîâàíèÿ îïóõîëåâîé òêàíè, êîòîðûå ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû êàê â ýêñ-
ïåðèìåíòàëüíîé îíêîëîãèè, òàê è â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå äëÿ îïðåäåëåíèÿ â
òå÷åíèå 48 ÷ èíäèâèäóàëüíîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè êëåòîê èç îïóõîëåé èëè ìå-
òàñòàçîâ ê ïðîòèâîîïóõîëåâûì ïðåïàðàòàì.
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
ÎÍÊÎËÎÃÈß ! Ò. 4 ! ¹ 1 ! 200216
Îïóõîëåâóþ òêàíü äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ áðàëè ñ
ïîìîùüþ èãëû äëÿ òðåïàíáèîïñèè. Ïîëó÷åííûå ó÷àñò-
êè îïóõîëè ñòåðèëüíî ðàçðåçàëè íà äèñêè âûñîòîé íå
áîëåå 1 ìì. Ïðèãîòîâëåíèå êóëüòóðû: íà ïðåäâàðèòåëü-
íî îáåçæèðåííîå ñòåðèëüíîå ïîêðîâíîå ñòåêëî ñ ëóí-
êîé ïîñëåäîâàòåëüíî íàíîñèëè ïî îäíîé êàïëå èçî-
òîíè÷åñêîãî ðàñòâîðà, ïî îäíîé êàïëå ïëàçìû êðîâè
áîëüíîãî, ïî îäíîé êàïëå îïóõîëåâîãî ýêñòðàêòà. Ïîñ-
ëåäíèé ðàñïðåäåëÿëè â ëóíêå â âèäå êðóãà äèàìåòðîì
íå áîëåå 15 ìì, ñìåøèâàÿ ñ ïëàçìîé êðîâè òàê, ÷òîáû
îíà ñâåðíóëàñü. Ïîñëå ñâåðòûâàíèÿ ïëàçìû êðîâè íà
íåå íàíîñèëè êóñî÷åê îïóõîëåâîé òêàíè è æèäêóþ ïè-
òàòåëüíóþ ñðåäó (ðàñòâîð Òèðîäå � 50%, ñûâîðîòêà
êðîâè áîëüíîãî � 40%, îïóõîëåâûé ýêñòðàêò � 10%.
Ñòåêëÿííîé ïàëî÷êîé ïî êðàÿì ëóíêè íàíîñèëè äâå
êàïëè âàçåëèíà òàê, ÷òîáû îíè áûëè ïîêðûòû âïîñëåä-
ñòâèè ïîêðîâíûì ñòåêëîì. Çàòåì íàêëàäûâàëè ïîêðîâ-
íîå ñòåêëî òàê, ÷òîáû êóëüòóðà íàõîäèëàñü â åãî öåíò-
ðå. Äëÿ ñîçäàíèÿ ãåðìåòè÷íîñòè êðàÿ ñòåêëà çàëèâàëè
ðàñïëàâëåííûì ïàðàôèíîì. Íåäîñòàòêàìè òàêîé ìå-
òîäèêè ÿâëÿþòñÿ êîðîòêèé ñðîê êóëüòèâèðîâàíèÿ (50�
90 ÷), íåâîçìîæíîñòü îêðàøèâàíèÿ îïóõîëåâîé òêàíè,
òàê êàê ïðè ñíÿòèè ïîêðîâíîãî ñòåêëà ðàçðóøàåòñÿ çîíà
ðîñòà. Åäèíñòâåííûì ìåòîäîì îöåíêè ÿâëÿåòñÿ òåì-
íîïîëüíàÿ ìèêðîñêîïèÿ.
Ó÷èòûâàÿ ýòî, áûëà ðàçðàáîòàíà ìîäèôèêàöèÿ, îñ-
íîâíûå îòëè÷èÿ êîòîðîé îò îïèñàíîé âûøå ìåòîäè-
êè çàêëþ÷àþòñÿ â âîçìîæíîñòè áîëåå äëèòåëüíîãî
êóëüòèâèðîâàíèÿ îïóõîëåâîé òêàíè çà ñ÷åò ÷àñòè÷íîé
ñìåíû ïèòàòåëüíîé ñðåäû è ñîõðàíåíèÿ ãàçîîáìåíà â
êóëüòóðå.  ëóíêó ïðåäìåòíîãî ëóíî÷íîãî ñòåêëà âíî-
ñèëè êîëüöî èç ïèùåâîé ïëàñòìàññû, ñìî÷åííîå â ñòå-
ðèëüíîì âàçåëèíîâîì ìàñëå. Êîëüöî äîëæíî èìåòü
ñëåäóþùèå ïàðàìåòðû: äèàìåòð � ìåíüøå äèàìåòðà
ëóíêè, âûñîòà � íå áîëåå 1/3 äèàìåòðà. Êóëüòóðó ãî-
òîâèëè òàê æå, êàê è â ïåðâîì ñëó÷àå, îäíàêî ïîñëå
âíåñåíèÿ ïîñëåäíåãî èíãðåäèåíòà ïîâåðõ êóëüòóðû
ïèïåòêîé ñ áîëüøèì ñå÷åíèåì íàíîñèëè êðóïíóþ
êàïëþ ñòåðèëüíîãî âàçåëèíîâîãî ìàñëà. Êóëüòèâèðî-
âàíèå ïðîèçâîäèëè ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ (æåëàòåëü-
íî îáîãàòèòü àòìîñôåðó óâëàæíåííûì Î2). Âàçåëèíî-
âîå ìàñëî âûïîëíÿåò ðîëü áàêòåðèàëüíîãî ôèëüòðà è
ïîçâîëÿåò ñîõðàíÿòü ãàçîîáìåí â êóëüòóðå. Ñ ïîìîùüþ
ñòåðèëüíîé òîíêîé èãëû ìîæíî àñïèðèðîâàòü ïèòà-
òåëüíóþ ñðåäó èç êóëüòóðû è ââåñòè ñâåæóþ, ñ ñîõðà-
íåíèåì ãåðìåòè÷íîñòè êóëüòóðû. Äàííàÿ ìîäèôèêà-
öèÿ ïîçâîëÿåò ïîñëå ïðèöåëüíîé àñïèðàöèè âàçåëè-
íîâîãî ìàñëà è ïèòàòåëüíîé ñðåäû ïðîèçâîäèòü
ãèñòîëîãè÷åñêîå îêðàøèâàíèå êóëüòèâèðóåìûõ òêà-
íåé è ìèêðîñêîïèþ â îáû÷íîì ðåæèìå.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ èíäèâèäóàëüíîé õèìèî÷óâñòâè-
òåëüíîñòè (çàÿâêà íà èçîáðåòåíèå «Ñïîñîá îïðåäå-
ëåíèÿ èíäèâèäóàëüíîé õèìèî÷óâñòâèòåëüíîñòè îïó-
õîëåé» ¹ 2001053088 îò 06.05.2001 ã., ïîëîæèò. ðåøå-
íèå îò 30.11.2001 ã.) â êóëüòóðû ïåðåä ãåðìåòèçàöèåé
âíîñèëè ìèêðîêàïëþ èññëåäóåìîãî õèìèîïðåïàðà-
òà. ×òîáû ñîçäàòü íàèáîëåå áëèçêèå ê èñõîäíûì óñëî-
âèÿ âçàèìîäåéñòâèÿ îïóõîëåâîé òêàíè ñ õèìèîïðå-
ïàðàòîì, ïîñëåäíèé ìîæíî êîíúþãèðîâàòü ñ áåëêàìè
ïëàçìû êðîâè. Ñ ýòîé öåëüþ â ñâåæåîòöåíòðèôóãè-
ðîâàííóþ ïëàçìó êðîâè âíîñèëè ðàñòâîð õèìèîïðå-
ïàðàòà, öåíòðèôóãèðîâàëè ñìåñü (200�300 îá/ìèí) â
òå÷åíèå 1 ìèí. Çàòåì ïîñëå ðó÷íîãî âñòðÿõèâàíèÿ
êîíúþãàò âíîñèëè â êóëüòóðó. Îñîáîå âíèìàíèå ñëå-
äóåò óäåëÿòü ïðàâèëüíîìó ïîäáîðó êîíöåíòðàöèé õè-
ìèîïðåïàðàòà, ó÷èòûâàÿ ìàññó êóëüòèâèðóåìîé òêà-
íè. Ïî íàøèì äàííûì, íàèáîëåå öåëåñîîáðàçíî èñ-
ïîëüçîâàòü ñëåäóþùèå äîçû (1 ìã â 0,01 ìë ðàñòâîðà):
äîêñîðóáèöèí � 4,4·10-4, öèêëîôîñôàìèä � 4,4·10-3,
ôëóîðîóðàöèë � 3,6·10-3 , âèíêðèñòèí � 8,7·10-6,
ìåòîòðåêñàò � 2,9·10-4, èôîñôàìèä � 3,6·10-2, ïàêëè-
òàêñåë � 1,5·10-3, ýïèðóáèöèí � 1,5·10-3, äîöåòàêñåë �
7,3·10-4, ðàññ÷èòàííûå íà êóñî÷êè îïóõîëåâîé òêàíè,
ïîëó÷åííûå ñ ïîìîùüþ òðåïàí-èãëû (äèàìåòð �
1,5 ìì, âûñîòà � 1 ìì, ïëîùàäü ïîâåðõíîñòè îïóõî-
ëåâîãî ìàòåðèàëà � 7,3·10-6 ì2).
Ìîäèôèêàöèÿ, ñ ïîìîùüþ êîòîðîé ìîæíî îïðå-
äåëèòü èíâàçèâíûé è ìåòàñòàòè÷åñêèé ïîòåíöèàë
êëåòîê îïóõîëè, ïðåäóñìàòðèâàåò èñïîëüçîâàíèå
òðèïñèíèçèðîâàííîãî ìàòåðèàëà. Ïðîòîòèïîì ÿâè-
ëàñü ìåòîäèêà ïîëó÷åíèÿ êëîíîâ ïî ìåòîäó Wildy è
Stoker. Òðèïñèíèçàöèþ îïóõîëåâîé òêàíè ïðîèçâî-
äèëè îäíèì èç îáùåèçâåñòíûõ ñïîñîáîâ (öåëåñî-
îáðàçíåå èñïîëüçîâàòü ñìåñü òðèïñèíà è ïàíêðåà-
òèíà). Ïðåäâàðèòåëüíî â ëóíêàõ âûðàùèâàëè (ïîä
âàçåëèíîâûì ìàñëîì) ìîíîñëîé ôèáðîáëàñòîâ,
ïðèìåíÿÿ âìåñòî ïëàçìû êðîâè êîììåð÷åñêèå ñðå-
äû äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ êëåòîê ñîåäèíèòåëüíîé
òêàíè. Ñ ïîìîùüþ ïðèöåëüíîé àñïèðàöèè ïîä êîí-
òðîëåì ñâåòîâîãî ìèêðîñêîïà ïîâåðõ ñëîÿ ôèáðî-
áëàñòîâ âíîñèëè (èñïîëüçóÿ êàïèëëÿðû äèàìåòðîì
50 ìê) äî 5 îïóõîëåâûõ êëåòîê. Ñëåäóþùèì ýòàïîì
ÿâëÿëîñü âíåñåíèå â êóëüòóðû 0,001 ìë ðàñòâîðà õè-
ìèîïðåïàðàòà (ðàñ÷åò íà ïîâåðõíîñòü ôèáðîáëàñ-
òîâ), â êîíòðîëüíûå êóëüòóðû � àíàëîãè÷íîãî îáúå-
ìà èçîòîíè÷åñêîãî ðàñòâîðà. Îöåíêó ðåçóëüòàòîâ
ïðîèçâîäèëè ïî ñïîñîáíîñòè êëåòîê ê êëîíîîáðà-
çîâàíèþ ïîä äåéñòâèåì õèìèîïðåïàðàòà: îïðåäåëÿ-
ëè ñòåïåíü èíâàçèè ìàòðè÷íîé êóëüòóðû ôèáðî-
áëàñòîâ, «ýòàæíîñòü» îïóõîëåâîé êóëüòóðû (êîëè÷å-
ñòâî ðÿäîâ îïóõîëåâûõ êëåòîê, ñâèäåòåëüñòâóþùèõ
î ñòåïåíè ðåäóêöèè êîíòàêòíîãî òîðìîæåíèÿ), ïðè
íåïðîäîëæèòåëüíîì ñðîêå êóëüòèâèðîâàíèÿ ó÷èòû-
âàëè êîëè÷åñòâî âíîâü îáðàçîâàííûõ îïóõîëåâûõ
êëåòîê. Îñîáûé èíòåðåñ ïðåäñòàâëÿåò ôîðìèðîâà-
íèå ìåæêëåòî÷íûõ êîíòàêòîâ îïóõîëåâîé êëåòêè è
ìàòðè÷íîé êóëüòóðû ïîä âëèÿíèåì õèìèîïðåïàðà-
òà. Ïðè èçó÷åíèè åãî âëèÿíèÿ íà ìåòàñòàçèðîâàíèå
îïóõîëè öåëåñîîáðàçíî â êà÷åñòâå ìàòðè÷íîãî ñëîÿ
èñïîëüçîâàòü êóëüòóðó ýíäîòåëèîöèòîâ.
 êóëüòóðå, ïðèãîòîâëåííîé ïî îäíîé èç îïèñàí-
íûõ ìåòîäèê, óæå ÷åðåç íåñêîëüêî ÷àñîâ îïðåäåëÿë-
ñÿ ðîñò, à ê êîíöó 1-õ ñóòîê ñôîðìèðîâàëàñü çîíà
ðîñòà. Ïðè îïðåäåëåíèè èíäèâèäóàëüíîé õèìèî-
÷óâñòâèòåëüíîñòè ïðîâîäèëè ñðàâíåíèå ñ êîíò-
ðîëüíûìè êóëüòóðàìè ïî ìàêñèìàëüíîìó ðàññòîÿ-
íèþ ïåðåìåùåíèÿ (ÌÐÏ) îòäåëüíûõ îïóõîëåâûõ
êëåòîê, ñðåäíåé øèðèíå çîíû ðîñòà (ÑØÇÐ), ðÿä-
íîñòè è ïîëÿðíîñòè êëåòîê, ñîîòâåòñòâèþ ìîðôî-
ëîãèè êóëüòèâèðóåìûõ êëåòîê.
 îíêîëîãè÷åñêîé ïðàêòèêå íå âñåãäà åñòü âîç-
ìîæíîñòü èñïîëüçîâàòü ïîñëåîïåðàöèîííûé ìàòå-
ÎÍÊÎËÎÃÈß ! Ò. 4 ! ¹ 1 ! 2002 17
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
ðèàë, îäíàêî ñ ïîìîùüþ òðåïàíîáèîïñèè ìîæíî
ïîëó÷èòü îïóõîëåâóþ òêàíü è ó íåîïåðàáåëüíûõ
áîëüíûõ. Äëÿ ïîâûøåíèÿ äîñòîâåðíîñòè ðåçóëüòà-
òîâ áèîïñèéíûé ìàòåðèàë ñëåäóåò áðàòü èç ðàçëè÷-
íûõ ó÷àñòêîâ îïóõîëè è îòäåëüíî � èç ìåòàñòàçîâ.
Êóëüòèâèðîâàíèå áèîïñèéíîãî ìàòåðèàëà ïðîèçâî-
äèëè áåç èñïîëüçîâàíèÿ îïóõîëåâîãî ýêñòðàêòà, â
ýòîì ñëó÷àå ïðèìåíÿëè êîíäåíñèðîâàííûå ïèòà-
òåëüíûå ñðåäû è íåñïåöèôè÷åñêèå áèîãåííûå ñòè-
ìóëÿòîðû (íàïðèìåð, ôîëèåâóþ êèñëîòó).
Ïðåäëîæåííûå ìåòîäèêè èñïîëüçîâàëè â êëèíè-
÷åñêîé ïðàêòèêå â Äîíåöêîì îáëàñòíîì ïðîòèâîîïó-
õîëåâîì öåíòðå íà áàçå 2-ãî õèðóðãè÷åñêîãî îòäåëå-
íèÿ.  òå÷åíèå 2000�2001 ãã. èññëåäîâàëè îïåðàöè-
îííûå ïðåïàðàòû è ìàòåðèàëû òðåïàíîáèîïñèé,
ïîëó÷åííûå ó 27 áîëüíûõ ðàêîì ìîëî÷íîé æåëåçû:
Ò1N0M0 � 1, Ò2N0M0 � 6, Ò3N0M0 � 3, Ò2N1M0 �
9, Ò2N2M0 � 4, Ò3N1M0 � 4 áîëüíûõ. Ó âñåõ áîëü-
íûõ ïåðåä ïðîâåäåíèåì ñèñòåìíîé èëè ðåãèîíàðíîé
õèìèîòåðàïèè îïðåäåëÿëëè èíäèâèäóàëüíóþ õèìè-
î÷óâñòâèòåëüíîñòü îïóõîëè. Âñåãî áûëî ïðèãîòîâëå-
íî îêîëî 300 òêàíåâûõ êóëüòóð, â êîòîðûõ îïðåäåëÿ-
ëè õèìèî÷óâñòâèòåëüíîñòü. Äàííûå ñðàâíèòåëüíîé
õàðàêòåðèñòèêè äåéñòâèÿ èññëåäîâàííûõ õèìèîïðå-
ïàðàòîâ íà ïîêàçàòåëè êëåòî÷íîãî ðîñòà â êóëüòóðàõ
ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå. Ýòî åùå ðàç ïîäòâåðäèëî
óòâåðæäåíèå îá èíäèâèäóàëüíîé õèìèî÷óâñòâèòåëü-
íîñòè, òàê êàê íè â îäíîì ñëó÷àå íå áûëî ïîëó÷åíî
àáñîëþòíî èäåíòè÷íûõ ðåçóëüòàòîâ. Òåì íå ìåíåå
ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ê íåêîòîðûì ïðåïàðàòàì (äî-
öåòàêñåë, ôëóîðîóðàöèë) íàáëþäàëàñü áîëåå âûñîêàÿ
÷óâñòâèòåëüíîñòü: 88,8 è 55,6% ñîîòâåòñòâåííî, â òî
âðåìÿ êàê ê äðóãèì õèìèîïðåïàðàòàì ÷óâñòâèòåëü-
íîñòü îïóõîëåâîé òêàíè áûëà íèçêîé (âèíêðèñòèí �
7,4%, èôîñôàìèä � 3,7%). Èíòåðåñíûì ÿâëÿåòñÿ
ôàêò, ÷òî ê êàæäîìó èç èññëåäóåìûõ õèìèîïðåïàðà-
òîâ áûëî ÷óâñòâèòåëüíî õîòÿ áû íåáîëüøîå êîëè÷å-
ñòâî îïóõîëåé. Ýòî ïîäòâåðæäàåò ïðåäñòàâëåíèÿ, îò-
âåðãàþùèå âîçìîæíîñòü ðåçèñòåíòíîñòè îïóõîëè
îäíîâðåìåííî êî âñåì õèìèîïðåïàðàòàì.
Ïîñëå ïîëó÷åíèÿ äàííûõ îá èíäèâèäóàëüíîé õè-
ìèî÷óâñòâèòåëüíîñòè äëÿ êàæäîé áîëüíîé èíäèâè-
äóàëèçèðîâàííî ðàçðàáàòûâàëè ñõåìó è ðåæèì ïðî-
âåäåíèÿ õèìèîòåðàïèè. Âñåì áîëüíûì ïðîâîäèëè
ðàäèêàëüíîå õèðóðãè÷åñêîå âìåøàòåëüñòâî.  íàñòî-
ÿùåå âðåìÿ âñå îíè æèâû, îäíàêî ó 1 (3,7%) áîëüíîé
îòìå÷åíî ïðîãðåññèðîâàíèå îñíîâíîãî çàáîëåâàíèÿ.
Âñå îñòàëüíûå ïàöèåíòêè ïðîõîäÿò êîíòðîëüíûå îá-
ñëåäîâàíèÿ êàæäûå 3 ìåñ. Îöåíêà êîððåëÿöèè ðå-
çóëüòàòîâ, ïîëó÷åííûõ ïðè îïðåäåëåíèè õèìèî÷óâ-
ñòâèòåëüíîñòè, ñ äàííûìè êëèíè÷åñêèõ èññëåäîâà-
íèé ñòàíåò âîçìîæíà ïî èñòå÷åíèè óñòàíîâëåííûõ
ñðîêîâ êëèíè÷åñêèõ íàáëþäåíèé (3�5-ëåòíÿÿ âûæè-
âàåìîñòü). Òåì íå ìåíåå, ïîëó÷åííûå ïðåäâàðèòåëü-
íûå ðåçóëüòàòû è ïîçâîëÿþò ðåêîìåíäîâàòü ïðåä-
ñòàâëåííûå ìåòîäèêè îïðåäåëåíèÿ èíäèâèäóàëüíîé
õèìèî÷óâñòâèòåëüíîñòè äëÿ äàëüíåéøèõ êëèíè÷åñ-
êèõ èññëåäîâàíèé.
БЛАГОДАРНОСТЬ
Àâòîð âûðàæàåò èñêðåííþþ ïðèçíàòåëüíîñòü
ñâîèì íàó÷íûì ðóêîâîäèòåëÿì � ÷ë.-êîð. ÀÌÍ
Óêðàèíû, çàâ. êàôåäðîé îíêîëîãèè ÄîíÃÌÓ, ïðîô.
Ã.Â. Áîíäàðþ è çàâåäóþùåìó II õèðóðãè÷åñêèì îòä.
ÄÎÏÖ, êàíä.ìåä.íàóê, È.Å. Ñåäàêîâó çà ïîìîùü
ïðè ðàçðàáîòêå è êëèíè÷åñêîé àïðîáàöèè ïðåäñòàâ-
ëåííûõ ìåòîäèê, à òàêæå ïðîô. Í.Ô. Ãàìàëåå
(ÈÝÏÎÐ èì. Ð.Å. Êàâåöêîãî ÍÀÍ Óêðàèíû) çà ñó-
ùåñòâåííûå çàìå÷àíèÿ è êîððåêöèþ ìåòîäèê.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ïîòåáíÿ ÃÏ, Øóìèëèíà ÂÂ, Ëèñîâåíêî ÃÑ è äð. Òåñòè-
ðîâàíèå in vitro ÷óâñòâèòåëüíîñòè îïóõîëåâûõ êëåòîê ê õèìèî-
ïðåïàðàòàì. Óêð õ³ì³îòåðàïåâò æóðí 2000; 2: 26�9.
2. Äîáðûíèí ßÂ. Ïðîáëåìû îòáîðà ïðîòèâîîïóõîëåâûõ
âåùåñòâ â òêàíåâûõ è êëåòî÷íûõ êóëüòóðàõ. Ýêñïåðèì îíêîë
1985; 7 (2): 9�15.
3. Êóçíåöîâà ÍÍ, Íóðèäæàíÿíö ÑÑ, Ïàí ÇÏ, Ìóõàìåäõàíî-
âà ÔÑ. Êëåòî÷íàÿ òåñò-ñèñòåìà äëÿ ïðåäâàðèòåëüíîãî îòáîðà
ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ. Âîïð îíêîë 1981; 27 (12): 36�9.
4. Äîáðûíèí ßÂ, Íèêîëàåâà ÒÃ, Èâàíîâà ÒÏ. Êëåòî÷íàÿ
òåñò-ñèñòåìà â îòáîðå áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ ñ ïðåä-
ïîëàãàåìûì ïðîòèâîîïóõîëåâûì äåéñòâèåì. Â: Àêòóàëüíûå
ïðîáëåìû ýêñïåðèìåíòàëüíîé õèìèîòåðàïèè îïóõîëåé. ×åð-
íîãîëîâêà, 1980; 2: 18�20.
5. Çàòóëà ÄÃ, Ðåçíèê ÑÐ. Ìèêðîìîäèôèêàöèÿ ìåòîäà
îïðåäåëåíèÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòè äåãèäðîãåíàç îïóõîëåé ÷åëî-
âåêà ê àíòèáëàñòîìíûì àíòèáèîòèêàì è õèìèîïðåïàðàòàì.
Ìèêðîáèîë æóðí 1971; 4: 520�2.
6. Fojo AT. Drug Resistance Cancer Therapy. Boston, 1989: 27�36.
TECHNIQUE5OF5DROP/PLASMA
CULTIVATION5OF5TUMOR5TISSUES
FOR SNAP5ANALYSIS5OF5INDIVIDUAL
SUSCEPTIBILITY5TO5CHEMODRUGS
R.V. Ischenko
Summary. Several modifications of the drop/plasma
method for tumor tissue cultivation have been developed
that may be used both in experimental oncology and in
clinical practice with the view of assessment within
48 hours of the individual susceptibility of tumor and
metastasis cell to anti-tumor agents.
Key Words: anti-tumor chemotherapy, individual
susceptibility, snap analysis, in vitro assay.
Àäðåñ äëÿ ïåðåïèñêè:
Èùåíêî Ð.Â.
83092, Äîíåöê, óë. 230-é ñòðåëêîâîé äèâèçèè, 3, êâ. 10.
Òàáëèöà
Ñðàâíèòåëüíàÿ õàðàêòåðèñòèêà äåéñòâèÿ õèìèîïðåïàðàòîâ
íà ïîêàçàòåëè êëåòî÷íîãî ðîñòà â êóëüòóðàõ îïóõîëåâîé òêàíè
Ïðåïàðàò Êîëè-
÷åñòâî
áîëüíûõ
ÌÐÏ1
(ìêì)
ÑØÇÐ1
(ìêì)
Ðÿäíîñòü
êëåòîê â
êóëüòóðå1
Õèìèî÷óâ-
ñòâèòåëü-
íîñòü (%)
Äîêñîðóáèöèí 18 1300 ± 270 540 ± 40 > 12 16,6
Öèêëîôîñôàìèä 23 870 ± 210 420 ± 25 > 10 26,0
Ôëóîðîóðàöèë 27 650 ± 170 380 ± 35 > 8 55,6
Âèíêðèñòèí 27 1850 ± 185 980 ± 60 > 16 7,4
Ìåòîòðåêñàò 25 1350 ± 220 610 ± 45 > 13 16,0
Èôîñôàìèä 14 1900 ± 190 1050 ± 50 > 18 3,7
Ïàêëèòàêñåë 14 900 ± 230 400 ± 30 > 9 28,6
Ýïèðóáèöèí 18 1580 ± 205 870 ± 50 > 15 11,1
Äîöåòàêñåë 27 400 ± 170 260 ± 35 > 4 88,8
1 Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ 24-÷àñîâûõ êóëüòóð.
|