Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита
В экспериментальной модели аутоиммунного тиреоидита продемонстрирована терапевтическая эффективность нативных и криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП). Рассмотрены преимущества и возможные механизмы лечебного действия препаратов фетоплацентарного комплекса и в частности КФП. В експерим...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Дата: | 2009 |
| Автори: | , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2009
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/30933 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита / Д.П. Гладких, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 3. — С. 349-361. — Бібліогр.: 37 назв. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859683758118010880 |
|---|---|
| author | Гладких, Д.П. Гольцев, А.Н. |
| author_facet | Гладких, Д.П. Гольцев, А.Н. |
| citation_txt | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита / Д.П. Гладких, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 3. — С. 349-361. — Бібліогр.: 37 назв. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии |
| description | В экспериментальной модели аутоиммунного тиреоидита продемонстрирована терапевтическая эффективность нативных
и криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП). Рассмотрены преимущества и возможные механизмы лечебного
действия препаратов фетоплацентарного комплекса и в частности КФП.
В експериментальній моделі аутоімунного тиреоїдиту продемонстрована терапевтична ефективність нативних та кріокон-
сервованих клітин фетальної печінки (КФП). Розглянуті переваги та можливі механізми лікувальної дії препаратів
фетоплацентарного комплексу і зокрема КФП.
In experimental model of autoimmune thyroiditis a therapeutic efficiency of native and cryopreserved fetal liver cells (FLCs) was demonstrated. The advantages and possible mechanisms of therapeutic effect of fetoplacental complex preparations and FLCs, in particular, were envisaged.
|
| first_indexed | 2025-11-30T21:27:41Z |
| format | Article |
| fulltext |
349 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-57-89, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
* To whom correspondence should be addressed: 23,
Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373
5789, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
УДК 361.36.013.014.41:616.441-002-092.4
Д.П. ГЛАДКИХ, А.Н. ГОЛЬЦЕВ*
Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных
клеток фетальной печени в модели экспериментального
аутоиммунного тиреоидита
UDC 361.36.013.014.41:616.441-002-092.4
D.P GLADKIKH, A.N. GOLTSEV*
Estimation of Therapeutic Potential of Fetal Liver Cryopreserved
Cells in Model of Experimental Autoimmune Thyroiditis
В экспериментальной модели аутоиммунного тиреоидита продемонстрирована терапевтическая эффективность нативных
и криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП). Рассмотрены преимущества и возможные механизмы лечебного
действия препаратов фетоплацентарного комплекса и в частности КФП.
Ключевые слова: аутоиммунный тиреоидит, клетки фетальной печени, терапевтический потенциал препаратов
фетоплацентарного комплекса.
В експериментальній моделі аутоімунного тиреоїдиту продемонстрована терапевтична ефективність нативних та кріокон-
сервованих клітин фетальної печінки (КФП). Розглянуті переваги та можливі механізми лікувальної дії препаратів
фетоплацентарного комплексу і зокрема КФП.
Ключові слова: аутоімунний тиреоїдит, клітини фетальної печінки, терапевтичний потенціал препаратів фетоплацентарного
комплексу.
In experimental model of autoimmune thyroiditis a therapeutic efficiency of native and cryopreserved fetal liver cells (FLCs) was
demonstrated. The advantages and possible mechanisms of therapeutic effect of fetoplacental complex preparations and FLCs, in
particular, were envisaged.
Key-words: autoimmune thyroiditis, fetal liver cells, therapeutic potential of fetoplacental complex preparations.
Развитие аутоиммунных заболеваний (АИЗ)
является частой причиной разбалансировки гармо-
ничного взаимодействия систем нейроиммуно-
эндокринного блока (НИЭБ) [2, 32]. Очевидно, что
для коррекции его состояния должны использо-
ваться препараты надклональной системной регу-
ляции. Комплексные исследования разного уровня
показали, что такой активностью обладают продук-
ты фетоплацентарного комплекса (ПФПК) [2, 10,
15, 29, 36]. Целесообразность их применения обос-
нована идентификацией в ПФПК широкого спектра
биологически активных субстанций, включая клет-
ки стволового компартмента, а также различные
медиаторы химической природы [10, 36]. При этом
очевидна необходимость проведения эксперимен-
тальных исследований механизма их лечебного
эффекта. Дальнейшей конкретизации и подтверж-
дения требует тезис о том, что полифункциональ-
ность ПФПК объясняется их способностью в усло-
Autoimmune diseases (AIDs) development is a
frequent cause in misbalancing a harmonic interaction
of neuroimmunoendocrine block (NIEB) systems [2,
32]. It is evident, that the preparations of supraclonal
system regulation should be used for its state correc-
tion. Combined studies of different levels demonstrated
the products of fetoplacental complex (PFPC) to pos-
sess such an activity [2, 10, 15, 29, 36]. The expediency
of their application is substantiated by identifying a wide
range of biologically active substances in PFPC,
including stem compartment cells, as well as different
mediators of chemical origin [10, 36]. At the same
time the need in experimental studies of their thera-
peutic effect mechanism is evident. The statement
about the fact, that the PFPC polyfunctionality is ex-
plained by their capability to respond to the “case
request” under special pathology, needs further speci-
fication and confirmation [10]. Actually, the PFPC cell
component with a powerful regulatory potential imple-
ÊÐÈÎÌÅÄÈÖÈÍÀ,
ÊËÈÍÈ×ÅÑÊÀß È ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÀß
ÒÐÀÍÑÏËÀÍÒÎËÎÃÈß
CRYOMEDICINE,
CLINICAL AND EXPERIMENTAL
TRANSPLANTOLOGY
350 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
виях развития конкретной патологии отвечать на
“запрос ситуации” [10]. Действительно, клеточный
компонент ПФПК, обладая мощным регуляторным
потенциалом, реализует его в зависимости от
конкретного цитокинового профиля организма
реципиента [5, 10]. Следовательно, широкий диапа-
зон активности ПФПК в организме реципиента
будет определяться не только потенциалом каж-
дого компонента донорской гетерогенной клеточ-
ной популяции, но и характером изменения цито-
кинового профиля при какой-либо патологии [5, 6,
29]. В полной мере этот тезис справедлив и в
отношении большинства ПФПК, в частности и фе-
тальной печени (ФП).
В ракурсе рассматриваемой в данной работе
темы особую значимость имеет иммуномоде-
лирующий потенциал клеток ФП (КФП), оценка ко-
торого в различных системах и условиях была
начата более 20 лет назад [5, 6, 31, 34, 36] и продол-
жается до настоящего времени.
Криоконсервирование биологических объек-
тов – обязательный компонент технологического
процесса их применения в клинической практике
[3, 9, 15]. Известно, что криоконсервирование
оказывает многовекторное влияние на биообъект.
Степень такого влияния определяется не только
особенностями и спектром физико-химических
факторов, реализуемых в процессе криоконсер-
вирования, но и исходным состоянием биообъекта
[13]. Например, для КФП важна зависимость крио-
устойчивости от срока гестации [3], стадии диффе-
ренцировки стволовых кроветворных (СКК) и
некроветворных мезенхимальных стволовых кле-
ток (МСК), степени экспрессии мембранных мар-
керов, стадии клеточного цикла и т. д. [9]. Таким
образом, после криоконсервирования не исключена
модификация каждой из этих структурно-функ-
циональных характеристик КФП и, следовательно,
их терапевтический потенциал при лечении раз-
личных форм АИЗ. Однако объективное под-
тверждение (либо несостоятельность) этого тезиса
возможно при адекватном выборе моделей АИЗ
и спектра оцениваемых показателей, характери-
зующих состояние того или иного компонента
НИЭБ.
Цель данной работы – оценка терапевтического
потенциала криоконсервированных КФП в экспе-
риментальной модели аутоиммунного тиреоидита.
Материалы и методы
Эксперименты выполняли на мышах-самках
линии С57Вl/6J 5-месячного возраста массой 20 г,
которые были представлены питомником РАМН
“Столбовая” и содержались в стандартных усло-
виях вивария ИПКиК НАНУ.
ments it depending on a specific cytokine profile of
recipient’s organism [5, 10]. Consequently, a wide range
of PFPC activity in recipient’s organism will be deter-
mined not only by potential of each component of donor
heterogenic cell population, but the character of
cytokine profile change under any pathology as well
[5, 6, 29]. This statement is entirely correct in respect
to the most PFPC, particularly, fetal liver (FL) as well.
Considering aspect of this paper of especial impor-
tance is an immune-modelling potential of FL cells
(FLCs), the estimation of which in different systems
and conditions has started more than 20 years ago [5,
6, 31, 34, 36] and lasted until now.
Cryopreservation of biological objects is an manda-
tory component of technological process of their
application in clinical practice [3, 9, 15]. Cryopreser-
vation is known to cause a multi-vector effects on a
bioobject. The degree of such an effect is determined
not only by the peculiarities and range of physical and
chemical factors, realised during cryopreservation, but
bioobject’s initial state as well [13]. As an example,
for FLCs of importance is the dependency of cryo-
resistance on gestation term [3], differentiation stage
of hemopoietic stem cells (HSCs) and non-hemopoietic
mesenchymal stem cells (MSCs), expression degree
of membrane markers, cell cycle stage etc. [9]. Thus,
after cryopreservation the modification of each of the-
se structural and functional FLCs characteristics and,
consequently, their therapeutic potential, when treating
different AIDs forms, is quite possible. However, an
objective confirmation (or failure) of this statement is
possible under an adequate selection of AIDs models
and the range of estimated indices, characterising the
state of this or that NIEB component.
This research was aimed to assess a therapeutic
potential of cryopreserved FLCs in experimental model
of autoimmune thyroiditis.
Materials and methods
Experiments were carried out in 5 months’ C57Bl/
6J male mice of 20 g, provided the nursery of the
Russian Academy of Medical Sciences “Stolbovaya”
and maintained under the standard conditions of
vivarium of the Institute for Problems of Cryobiology
and Cryomedicine of the National Academy of Scien-
ces of Ukraine.
Animals were immunised with thyroid antigen as a
part of thyroid gland (TG) tissue homogenate, prepared
via a mild mechanical organ destruction in Potter homo-
genizer with adding physiological solution in respect of
1 ml/100 mg, with further filtration through a capron
filter and centrifugation within 5 min at 1,000 rot/min
[37]. The content of total protein was determined in
the obtained supernatant liquid as an immunogenic
substrate using biuret reaction [16].
351 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Животных иммунизировали тиреоидным антиге-
ном в составе гомогената ткани щитовидной желе-
зы (ЩЖ), приготовленного путем мягкой механи-
ческой деструкции органа в гомогенизаторе Пот-
тера с добавлением физиологического раствора из
расчета 1 мл/100 мг, с дальнейшей фильтрацией
через капроновый фильтр и центрифугированием
в течение 5 мин при 1000 об/мин [37]. В полученной
надосадочной жидкости как иммуногенном суб-
страте определяли содержание общего белка при
помощи биуретовой реакции [16].
Аутоиммунный тиреодит (АИТ) индуцировали
введением полученного тиреоидного антигена (1–
1,5 мг/мл по общему белку) с полным адъювантом
Фрейнда в соотношении 1:1 в дозе 0,1 мл/мышь
подкожно в основание хвоста дважды с интерва-
лом 14 суток [26, 37].
Интенсивность образования аутоантител (ААТ)
к ткани щитовидной железы в сыворотке крови
мышей определяли реакцией пассивной гемагглю-
тинации (РПГА) с модифицированными бараньими
эритроцитами [17, 19].
Гормонопродуцирующую активность ЩЖ кос-
венно оценивали по уровню свободного тироксина
(Т4) и свободного трийодтиронина (Т3) в сыворотке
крови животных с помощью иммуноферментного
метода с использованием наборов Тироид-ИФА-
свободный Т4 (“Алкор Био”, Россия) и ИммуноФА-
СвТ3 (“НВО Иммунотех”, Россия).
Для определения иммунного статуса была прове-
дена оценка клеточного звена иммунитета (КЗИ).
Для этого в селезенке мышей опытных и контроль-
ных групп определяли содержание клеток, экс-
прессирующих фенотипические маркеры СD3
(Т-общие лимфоциты), CD4 (Т-хелперы, Тх), CD8
(Т-супрессоры/цитотоксические, Тс), CD19
(В-лимфоциты) методом проточной цитофлуоро-
метрии (FACS Calibur, BD, США) с использова-
нием моноклональных антител фирм Biolegend
(США) и BD (США).
Определяли КЗИ, содержание ААТ и гормонов
ЩЖ на 14, 21, 28 и 35-е сутки после повторной
иммунизации животных
Клетки фетальной печени получали у мышей
линии СВА/Н на 14-е сутки гестации. Выделенные
в стерильных условиях эмбрионы трижды промы-
вали в чашке Петри физиологическим раствором
с канамицином (100 Ед/мл). Выделенную ФП дез-
интегрировали в гомогенизаторе Поттера с добав-
лением среды 199 (Sigma, Германия), содержащей
3% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС) и
2% цитрата натрия (рабочая среда), ресуспенди-
ровали шприцем через иглы уменьшающегося
диаметра и пропускали через многослойный капро-
новый фильтр.
Autoimmune thyroiditis (AIT) was induced by
introducing the procured thyroid antigen (1–1.5 mg/ml
by total protein) with Freund adjuvant in 1:1 ratio in
the dose of 0.1 ml/mouse subcutaneously into the caudal
base twice with 14 days’ interval [26, 37].
The intensity of formation of autoantibodies (AABs)
vs. thyroid gland tissue in murine blood serum was de-
termined with the reaction of passive hemagglutination
(RPHA) with modified sheep erythrocytes [17, 19].
Hormone-producing activity of TG was indirectly
estimated by the level of free thyroxine (T4) and free
triiodothyronine (T3) in animal blood serum with the
immune-enzyme method using the Thyroid-IEA-free
T4 (“Alkor Bio”, Russia) and ImmunoEA-FrT3 kits
(“Immunotek”, Russia).
Cell link of immunity (CLI) was estimated to
determine the immune status. For this purpose in expe-
rimental and control mice spleen we determined the
cell content, expressing phenotypic markers of CD3
(T-total lymphocytes), CD4 (T-helpers, Th), CD8
(T-suppressors/cytotoxic, Ts), CD19 (B-lymphocytes)
using the flow cytometry (FACS Calibur, BD, USA)
with monoclonal antibodies (Biolegend, USA and BD,
USA).
The CLI, AAB and TG hormone content were
determined to the 14th, 21st, 28th and 35th days after
repeated immunisation of animals.
Fetal liver cells (FLCs) were derived in CBA/H
mice to the 14th gestation day. The embryos, isolated
under sterile conditions, were three-fold washed in Petri
dishes using physiological solution with kanamycin (100
Units/ml). The isolated FL was disintegrated in Potter
homogenizer with adding medium 199 (Sigma, Germa-
ny), containing 3% fetal bovine serum (FBS) and 2%
sodium citrate (handling medium), resuspended with
syringe via needles of reducing diameter and passed
through a multilayered capron filter.
Cryopreservative solution was prepared of medium
199, containing 20% dimethyl sulfoxide (DMSO) (v/v),
10% FBS and 2% sodium citrate.
FLCs in 1×106/ml concentration were cryopreser-
ved in 1.8 ml plastic vials (Nunc, Germany) with UOP-6
device (Special Designing and Technical Bureau with
Experimental Unit of the Institute for Problems of
Cryobiology and Cryomedicine of the National Acade-
my of Sciences of Ukraine) by the two-step program
with 1°C/min freezing rate down to –25°C and following
immersion into liquid nitrogen (–196°C) according to
the method [14]. Samples were thawed on water bath
at 40–41°C within 45–50 min under a constant vial
shuttling [14].
DMSO was removed from suspension after thaw-
ing using a single slow adding of an equal volume of
handling medium with following centrifugation (400 g,
10 min). Cell number in the suspension prior to and
352 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Криоконсервирующий раствор был приготовлен
на основе среды 199, содержащей 20% диметил-
сульфоксида (ДМСО) (v/v), 10% ЭТС и 2% цитрата
натрия.
КФП в концентрации 1×106/мл криоконсер-
вировали в пластиковых ампулах Nunc (Германия)
объемом 1,8 мл на установке УОП-6 (СКТБ с ОП
ИПКиК НАН Украины) по двухэтапной программе
со скоростью замораживания 1°С/мин до –25°С
на 1-м этапе и последующим погружением в
жидкий азот (–196°С) в соответствии с методом
[14]. Оттаивание образцов проводили на водяной
бане при температуре 40–41°С в течение 45–50 с
при постоянном шутелировании ампул [14]. Уда-
ление ДМСО из суспензии после отогрева осущест-
вляли путем однократного медленного добавления
равного объема рабочей среды с последующим
центрифугированием (400 g, 10 мин). Количество
клеток в суспензии до и после криоконсервирования
подсчитывали в камере Горяева [16]. Сохранность
КФП определяли методом суправитального
окрашивания трипановым синим [16].
КФП, сохранность которых составляла не
менее 80%, вводили мышам-реципиентам C57Bl/
6J в дозе 5×106/мышь однократно внутривенно
через 7 суток после окончания индукции АИТ. В
качестве контроля использовали клетки взрослой
печени (КВП) той же линии мышей, что и КФП,
введенные в указанной дозе.
Животные были разделены на следующие
группы: 1 – интактные животные (контроль 1)
(n = 10); 2 – животные после индукции АИТ без
лечения (n = 20); 3 – животные после индукции
АИТ и введения нативных КФП (нКФП) (n = 20);
4 – животные после индукции АИТ и введения
криоконсервированных КФП (кКФП) (n = 20); 5 –
животные после индукции АИТ и введения КВП
(контроль 2) (n = 20).
Все выполняемые в работе манипуляции с мы-
шами не противоречат “Общим принципам экспе-
риментов на животных”, одобренным ІІ Нацио-
нальным конгрессом по биоэтике (Киев,2004) и
согласуются с положениями “Европейской Конвен-
ции о защите позвоночных животных, исполь-
зуемых для экспериментальных и других научных
целей” (Страсбург,1985).
Полученные экспериментальные данные ста-
тистически обработаны в электронных таблицах
“Microsoft Excel 2000” с использованием критерия
Стьюдента-Фишера.
Результаты и обсуждение
Аутоиммунный тиреоидит относят к АИЗ,
развитие которых обусловлено срывом естествен-
ной толерантности к собственным антигенам ЩЖ
[1, 26, 27]. Мультифакторность и этиология АИТ
after cryopreservation was calculated in Goryaev’s
chamber [16]. FLCs integrity was determined using
the method of trypane blue supravital staining [16].
FLCs, which integrity made not less, than 80%,
were once intravenously introduced into the C57B1/
6J mice-recipients in the dose of 5×106/mouse 7 days
after finishing the AIT induction. The adult liver cells
(ALCs) of the same murine line as for FLCs, introduced
in the mentioned dose, were used as the control.
The animals were divided into the following groups:
1 – intact animals (control 1) (n = 10); 2 – animals
after AIT induction without treatment (n = 20); 3 –
those after AIT induction and native FLCs (nFLCs)
introduction (n = 20); 4 – those after AIT induction
and cryopreserved FLCs (cFLCs) introduction (n =
20); 5 – those after AIT induction and ALCs introduc-
tion (control 2) (n=20).
All the manipulations with mice, performed in the
research, do not contradict with the “General ethical
principles of experiments in animals”, approved by the
2st National Congress on Bioethics (Kiev, 2004) and
agreed with the statements of the “European Conven-
tion for the Protection of Vertebrate Animals Used
for Experimental and Other Scientific Purposes”
(Strasbourg, 1985).
The obtained experimental data were statistically
processed with “Microsoft Excel 2000” using Student-
Fisher criterion.
Results and discussion
Autoimmune thyroiditis is referred to the AIDs,
which development is stipulated by the failure of natural
tolerance to own TG antigens [1, 26, 27]. The
multifactor nature and etiology of AIT are stipulated
by hereditary, genetic determination, aggravation of
this pathology manifestation under “layering” of
unfavourable factors (stress-inducible factors, different
infectious forms, ionising irradiation, intoxication with
poisons and other toxic substances) [12].
The question is mostly in disorder of hematothyroid
barrier and autoimmune response development to the
“sequestered” native TG antigens [1]. Of note is the
value of modification of native and protein structure
of thyroglobulin (viral infection etc.) with changing the
profile of its immunologic epitopes (“epitope distribu-
tion”) [11]. In spite of this fact, an immunogenic po-
tential of TG proteins, especially, thyroglobulin, is the
base of experimental reproduction of TG autoimmu-
ne genesis pathology [26, 37]. Generally, both correct
methodological approaches of AIT induction and
objective methods for its diagnostics have still remained
actual [18]. Of perspective is, for example, the widen-
ing of the range of the indices, characterising not only
the TG morphofunctional state under AIT, but the status
of systems, participating in its development as well.
Such an approach is admissible to objectify the esti-
353 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
роизведения патологии аутоиммунного генеза ЩЖ
[26, 37]. В общем, корректные методологические
подходы индукции АИТ, как и объективные мето-
ды его диагностики, остаются актуальными [18].
Перспективно, например, расширение спектра
показателей, характеризующих не только морфо-
функциональное состояние ЩЖ при АИТ, но и ста-
туса систем, причастных к его развитию. Такой
подход приемлем и для объективизации оценки
эффективности проводимой терапии ПФПК, а
именно КФП, при данной патологии.
Результаты исследований показали, что имму-
низация мышей субстратом, содержащим тиреоид-
ный антиген, сопровождалась появлением в сыво-
ротке крови всех животных ААТ. На 14-е сутки
после последней иммунизации они определялись в
максимальном титре (разведение сыворотки 1:512)
и оставались на достаточно высоком уровне до
35-х суток (табл. 1). На этом фоне существенно
изменялась гормонопродуцирующая активность
ЩЖ. При этом изменение концентрации тироксина
(Т4) (рис. a) и трийодтиронина (Т3) (рис. б) после
индукции АИТ имело волнообразный характер.
Так, содержание Т4 на 14-е сутки было достоверно
ниже нормы, но уже к 21-м суткам превышало ее
в два раза. К 28-м суткам концентрация Т4 снижа-
лась до уровня нормы и снова достоверно повыша-
лась к 35-м суткам.
Концентрация Т3 в течение 14–28 суток была
достоверно ниже нормы и только к 35-м суткам
приблизилась к ее уровню. Эти данные подтверж-
дают характерное для АИТ нарушение гормоно-
продуцирующей активности ЩЖ [1, 27]. Сущест-
венно, что гиперпродукция Т4 отмечалась на 21 и
35-е сутки, т.е. через 7 суток после наиболее выра-
женного накопления антител (14 и 28-е сутки).
ыппурГ
хынтовиж
spuorglaminA
иктус,иицазинуммиелсопдоиреП
syad,doirepnoitazinummitsoP
41 12 82 53
ТИА
TIA 215:1 652:1-821:1 215:1-652:1 652:1-821:1
ПФKн+ТИА
sCLFn+TIA 46:1-23:1 8:1-4:1 46:1-23:1 46:1-23:1
ПФKк+ТИА
sCLFc+TIA 46:1-23:1 46:1-23:1 821:1-46:1 46:1
ПВK+ТИА
sCLA+TIA 215:1-652:1 652:1-821:1 215:1-652:1 215:1-652:1
Таблица 1. Титры антитиреоидных антител в сыворотке крови
животных с АИТ до и после применения КФП
Table 1. Titers of antithyroid antibodies of animal blood serum with
AIT prior to and after use of FLCs
Примечание: приведено последнее разведение сыворотки, при котором
определяется активность антител.
Note: final serum dilution, whereat antibody activity is determined, has
been shown.
заключаются в наследственной, генети-
ческой детерминированности, аггравации
манифестации данной патологии при “на-
слоении” неблагоприятных факторов
(стрессиндуцибельные факторы, различ-
ные формы инфекции, ионизирующее
излучение, отравление ядами и другими
токсическими веществами) [12].
Преимущественно речь идет о наруше-
нии гематотиреоидного барьера и развитии
аутоиммунной реакции на “секвестриро-
ванные” нативные антигены ЩЖ [1]. Сле-
дует отметить значимость модификации
нативной белковой структуры тиреоглобу-
лина (вирусная инфекция и др.) с измене-
нием профиля иммунологических его эпи-
топов (“эпитопное распространение”) [11].
Несмотря на это, иммуногенный потенциал
белков ЩЖ, особенно тиреоглобулина, ле-
жит в основе экспериментального восп-
mation of the performed PFPC therapy efficiency as
well, namely FLCs, under this pathology.
Our findings demonstrated the mice immunisation
with the substrate, containing thyroid antigen, as
accompanying with AAB appearance in blood serum
of all the animals. To the 14th day after last
immunisation they were detected in the maximum titer
(1:512 serum dilution) and remained at quite a high
level to the 35th day (Table 1). At this background the
TG hormone-producing activity significantly changed.
Herewith a change in thyroxine (T4) (Fig. a) and triiodo-
thyronine (T3) concentrations (Fig. b) after AIT induc-
tion had a wave-like character. Thus, the T4 content
to the 14th day was statistically and significantly lower,
compared to the norm, but even to the 21st day excee-
ded it twice. To the 28th day the T4 concentration
reduced to the norm level and statistically and signi-
ficantly increased once again to the 35th one. These
data confirm a typical for AIT disorder in the TG
hormone-producing activity [1, 27]. Essentially, that the
T4 hyperproduction was noted to the 21st and 35th days,
that is 7 days later the most manifested accumulation
of antibodies (14 and 28 days). It is known that
produced during AIT AABs are not initially cytotoxic,
since they are directed against intercellular antigens
[1]. Moreover the group of these antibodies comprises
thyroid-stimulating AABs (LATS-antibodies), binding
the receptors on thyrocytes and stimulating the pro-
duction of thyroid hormones, that is the most frequent
cause of hyperthyroidism development [18].
It is known that in initiation and maintenance of
AIDs independently on the type of etiological factors
the IS substrates implementing immune inflammatory
reaction within the frames of “physiological corridor”
participate [1, 2, 6, 29], that was confirmed with the
assessment results of T-cell content (Table 2). So, the
б b
а a
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Известно, что вырабатываемые ААТ при АИТ не
являются первоначально цитотоксическими, так
как направлены против внутриклеточных анти-
генов [1]. Более того, в группу этих антител входят
тиреоид-стимулирующие ААТ (LATS-антитела),
которые связываются с рецепторами на тироцитах
и стимулируют выработку тиреоидных гормонов,
что является наиболее частой причиной развития
гипертиреоза [18].
Известно, что в инициации и поддержании АИЗ
независимо от вида этиологических факторов при-
нимают участие субстраты иммунной системы
(ИС), которые реализуют иммуновоспалительную
реакцию в рамках “физиологического коридора” [1,
2, 6, 29], что было подтверждено результатами
оценки содержания клеток Т-ряда (табл. 2). Так,
содержание общих Т-лимфоцитов (СD3+) снижа-
лось уже с 14-х суток, а на 21 и 35-е сутки оно
было в 2 раза ниже нормы. Снижение концентрации
общих Т-лимфоцитов (СD3+) подтверждает дис-
функциональное состояние ИС и является харак-
терным признаком манифестации многих видов
АИЗ [5, 6, 32]. После индукции АИТ было отмече-
но также перераспределение субпопуляций регуля-
торных Т-хелперов (СD4+) и Т-супрессоров/цито-
токсических (СD8+) лимфоцитов. На протяжении
всего срока наблюдения отмечалось более выра-
женное, чем в норме, превалирование содержания
Т-хелперов (СD4+) над Т-супрессорами (СD8+). В
результате иммунорегуляторный индекс (ИРИ),
отражающий соотношение Тх и Тс (СD4+/CD8+)
весь период наблюдения, существенно превышал
контроль 1. При этом важно, что, несмотря на нор-
мализацию к 35-м суткам уровня Т-хелперов, кон-
центрация Т-супрессоров оставалась достоверно
ниже контроля 1. Факт развития многих АИЗ на
фоне нарушения гармоничного соотношения этих
двух регуляторных субпопуляций Т-клеток яв-
ляется общепризнанным и для него характерно ли-
бо преобладание (по сравнению с контролем 1)
Т-хелперов (СD4+), либо снижение субпопуляции
Т-супрессоров (СD8+) [1, 12, 29].
Другой особенностью дисфункционального сос-
тояния ИС мышей с АИТ явилось существенное
изменение содержания СD19+ клеток (В-лимфоци-
тов). Их концентрация весь период наблюдения за
исключением 14-х суток достоверно превышала
норму. Возможно, что повышение содержания пула
этих клеток в периферическом русле связано с
инфильтрацией ЩЖ В-лимфоцитами, наблюдаемой
при определенных формах тиреоидитов, например
хроническом лимфоцитарном тиреоидите Хаши-
мото [18].
Очевидно, что при индукции выбранным спо-
собом АИТ в организме развивается дисрегуля-
торное состояние иммунной системы и ее компо-
content of total T-lymphocytes (CD3+) reduced even
to the 14th day, and to the 21 and 35th days it was
twice lower than the norm. The reduction of concen-
tration of total T-lymphocytes (CD3+) confirm the
dysfunctional state of IS and is the characteristic sign
0
1
2
3
4
5
6
7
8
14 21 28 35
Содержание Т4 (а) и Т3 (б) в сыворотке крови животных
с АИТ до и после применения КФП: – интактные
животные; – АИТ; – АИТ + нКФП; – АИТ +
кКФП; – АИТ + КВП; * – различия достоверны в
сравнении с данными для интактных животных (p < 0,05);
# – при сравнении криоконсервированного материала с
нативным на соответствующие сутки (p < 0,05); + – в
сравнении с данными для животных с АИТ на соответ-
ствующие сутки (p < 0,05).
Content of T4 (a) and T3 (b) in animal blood serum with AIT
prior to and after use of FLCs: – intact animals; –
AIT; – AIT + nFLC; – AIT + cFLC; – AIT + ALC;
* – differences are statistically significant comparing with
intact animals (p < 0.05); # – when comparing cryopreserved
cells with native ones to corresponding day (p < 0.05); + –
when comparing with data for animals with AIT to corre-
sponding day (p < 0.05).
Период после иммунизации, сут
Post immunization period, days
С
од
ер
жа
ни
е
T 3,
пм
ол
ь/
л
T 3 c
on
te
nt
, p
m
ol
/l
Период после иммунизации, сут
Post immunization period, days
С
од
ер
жа
ни
е
T 4,
пм
ол
ь/
л
T 4 c
on
te
nt
, p
m
ol
/l
0
20
40
60
80
100
120
14 21 28 35
*+
*+
*
*
*
*#
*+
*+
*
*
+
*+
#
*
*+
354
355 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
нентов. Прежде всего, речь идет о разбалансиров-
ке регуляторных субпопуляций Т-клеток и на этом
фоне выраженном формировании аутоантител к
антигенам ЩЖ с возможной их кооперацией с
В-лимфоцитами и агрессии в отношении ЩЖ.
Интегрированным ответом органа-мишени является
нарушение его гормонопродуцирующей функции. В
условиях теснейшего взаимодействия систем
НИЭБ создается “порочный” круг дисрегулятор-
ного его состояния, что определяет необходимость
лечения АИТ терапевтическими средствами с
полифункциональной (надсистемной) активностью.
of manifestation of many AIDs types [5, 6, 32]. After
AIT induction there was noted also the redistribution
of subpopulations of regulatory T-helpers (CD4+) and
T-suppressors/cytotoxic (CD8+) lymphocytes. During
the whole observation term there was found more
manifested versus the norm, predominance of the con-
tent of T-helpers (CD4+) over T-suppressors (CD8+).
As a result the immune regulatory index (IRI) reflecting
the ratio of Th and Ts (CD4+/CD8+) during the whole
observation period significantly exceeded the control
1. Herewith it is important that in spite of normalization
to the 35th day in the level of T-helpers, the concen-
Таблица 2. Иммунный статус животных с АИТ до и после применения КФП
Table 2. Immune status of animals with AIT prior to and after use of FLCs
Примечания: 1 – различия достоверны в сравнении с данными для интактных животных (p < 0,05); 2 – при сравнении
криоконсервированного материала с нативным на соответствующие сутки (p < 0,05); 3 – в сравнении с данными для животных
с АИТ на соответствующие сутки (p < 0,05).
Notes: 1 – differences are statistically significant comparing with intact animals (p < 0.05); 2 – when comparing cryopreserved cells
with native ones for corresponding day (p < 0.05); 3 – when comparing with data for animals with AIT for corresponding day (p < 0.05).
елсопдоиреП
тус,иицазинумми
noitazinummitsoP
syad,mret
аппурГ
хынтовиж
puorglaminA
%,котелкеинажредоС
%,tnetnoclleC )8DC/4DC(ИРИ
)8DC/4DC(IRI
3DС + 4DС + 8DС + 91DС +
ьлортнокйынткатнИ
lortnoctcatnI 3,0±9,82 5,1±2,81 1,0±6,21 2,4±6,25 1,0±4,1
41
ТИА
TIA 0,2±5,52 8,0±8,11
1 4,0±6,5 1 5,3±7,94 1,0±1,2 1
ПФKн+ТИА
CLFn+TIA 1,3±7,34
3,1 3,0±6,03 3,1 1,1±0,51 3 9,5±7,37 3,1 2,0±30,2 1
ПФKк+ТИА
CLFc+TIA 1,1±5,31
3,2,1 9,1±4,32 3 1,0±9,9 3,1 5,2±8,53 3,2,1 2,0±2,2 1
ПВK+ТИА
CLA+TIA 2,2±5,72 9,0±3,11
1 7,0±2,8 1 1,4±6,15 1,0±4,1 2
12
ТИА
TIA 1,1±2,31
1 5,1±7,81 8,0±7,9 1 7,6±5,47 1 2,0±9,1 1
ПФKн+ТИА
CLFn+TIA 3,2±1,92
3 2,0±1,22 0,1±0,31 2,5±4,47 1 1,0±7,1
ПФKк+ТИА
CLFc+TIA 5,2±2,13
3,1 4,1±8,71 1,0±1,01 6,4±3,75 3,2 1,0±8,1
ПВK+ТИА
CLA+TIA 9,1±2,42
3,1 6,1±6,91 7,0±5,8 1 8,5±5,27 3,1 2,0±1,2 1
82
ТИА
TIA 3,2±2,92 9,1±9,32 60,1±3,31 4,6±5,97
1 1,0±8,1
ПФKн+ТИА
CLFn+TIA 1,3±1,93
3,1 9,1±3,12 1,1±45,31 6,3±4,54 3 1,0±6,1
ПФKк+ТИА
CLFc+TIA 3,2±0,92 1,2±2,62
3,1 0,2±8,42 3,2,1 9,4±3,16 3,2 1,0±10,1 3,2
ПВK+ТИА
CLA+TIA 4,0±9,43
3,1 9,1±2,32 0,1±6,11 1,5±3,37 1 2,0±0,2 1
53
ТИА
TIA 2,1±8,31
1 4,1±7,81 8,0±7,9 0,6±5,47 1 1,0±9,1
ПФKн+ТИА
CLFn+TIA 6,2±9,23
3,1 5,1±4,81 9,0±5,11 4,2±7,33 3,1 1,0±6,1 1
ПФKк+ТИА
CLFc+TIA 1,2±5,43
3,1 0,2±5,42 3,1 2,1±9,41 3 7,3±6,54 3,2 1,0±6,1 3
ПВK+ТИА
CLA+TIA 9,2±5,63
3,1 9,1±3,32 9,0±6,11 4,3±2,84 3 2,0±1,2 1
356 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Полученные результаты показали, что КФП
обладают такого рода активностью. После приме-
нения криоконсервированных КФП была отмечена
ингибиция аутоиммунной агрессии в отношении
ЩЖ, что выражалось в снижении продукции ААТ
на протяжении всего срока наблюдения (табл. 1).
При этом даже на 35-е сутки их титр у животных
опытных групп был в 4 раза ниже, чем у животных,
не подвергавшихся лечению. В сравнительном
аспекте представляет интерес тот факт, что на 21-
и 28-е сутки ингибиция продукции ААТ нативными
КФП была выше, чем криоконсервированными.
Полученные результаты соответствуют данным
[29]. В экспериментальной модели аутоиммунной
гемолитической анемии (АИГА) авторы продемон-
стрировали способность введенных КФП ингиби-
ровать продукцию аутоантител против эритроцитов.
При этом криоконсервированные КФП в меньшей
степени, чем нативные, ингибировали продукцию
ААТ, что может быть связано с изменением после
криоконсервирования как компонентного состава
КФП , так и функционального статуса клеток-про-
дуцентов иммунотропных медиаторов.
Действительно, иммуносупрессивный эффект
КФП может проявляться в отношении различных
иммунокомпетентных клеток (ИКК) реципиента,
но, прежде всего, регуляторных субпопуляций Т-
лимфоцитов. Представленные в табл. 2 данные
подтверждают выраженную коррекцию состояния
популяций и субпопуляций Т-клеток после примене-
ния КФП.
Судя по ИРИ, корригирующий эффект нативных
КФП в отношении субпопуляции СD8+-супрессоров
начал проявляться с 21-х суток. Такой эффект
криоконсервированных КФП был максимальным
в более поздние сроки. Характеру выраженности
активации супрессорной субпопуляции Т-клеток
была четко соподчинена и динамика снижения
гиперпродукции В-лимфоцитов (СD19+). Норма-
лизация этого показателя после введения нативных
КФП была отмечена на 28-е сутки эксперимента,
тогда как после применения криоконсервированных
КФП только на 35-е сутки.
Восстановление баланса ИКК после примене-
ния КФП в итоге отражалось и на характере изме-
нения функционального статуса ЩЖ. Однако гор-
монопродуцирующая функция ЩЖ после введения
КФП имела некоторые особенности. Так, уровень
Т4 на 14-е сутки после введения КФП повышался
в 1,5–2 раза относительно контроля 1 и группы
животных с АИТ, не подвергавшихся лечению. На
21 и 28-е сутки еще сохранялась повышенная
продукция гормона по сравнению с интактной груп-
пой, но уже намечалась четкая тенденция проявле-
ния лечебного эффекта в виде снижения концентра-
ции гормона по сравнению с группой животных,
tration of T-suppressors remained significantly lower
than the control 1. The fact of development of many
AIDs on the background of disorder of harmonic ratio
of these two regulatory subpopulations of T-cells is
well known and it is characteristic for it either pre-
dominance (versus the control 1) of T-helpers (CD4+)
or reduction of T-suppressor subpopulation (CD8+) [1,
12, 29].
Other feature of dysfunctional state of IS of mice
with AIT is significant change in the content of CD19+
cells (B-lymphocytes). Their concentration within the
whole observation period excluding the 14th day
statistically and significantly exceeded the norm. The
rise in the pool content for these cells in peripheral
channel is likely related to infiltration of thyroid gland
with B-lymphocytes, observed under certain forms of
thyroidites, for instance at chronic lymphocyte Hashi-
moto’s thyroiditis [18].
It is evident that during induction of AIT with the
chosen way in an organism there is developed dysre-
gulatory state of immune system and its components.
First of all, the matter is in misbalancing of regulatory
T-cell subpopulations and on this background the
manifested formation of autoantibodies to antigens of
TG with possible their cooperation with B-lymphocytes
and aggression in respect of TG. The integrated re-
sponse of target organ is the impairment of its hormone
producing function. Under the tightest interaction of
NIEB systems the “vicious circle” of its dysregulatory
state is created, that determines the need in treatment
of AIT with therapeutic means with polyfunctional
(supersystem) activity.
The findings have shown that FLCs possess such
an activity. After application of cryopreserved FLCs
there was found the inhibition of autoimmune
aggression in respect of TG, that manifested in the
reduction of AABs production during the whole
observation term (Table 1). Herewith even to the 35th
day their titre in animals of experimental groups was 4
times lower than in non-treated ones. In comparative
aspect of interest is the fact that to the 21st and 28th
days the inhibition of AABs production with native
FLCs was higher versus the cryopreserved ones. The
obtained results correspond to the data [29]. In
experimental model of autoimmune hemolytical
anaemia (AIGA) the authors reported about the ability
of introduced FLCs to inhibit the production of
autoantibodies against the erythrocytes. Herewith the
cryopreserved FLCs in less extent than native ones
inhibited the production of AABs, that may be related
both to the post-cryopreservation composition chan-
ge in FLCs and functional status of immune tropic
mediators producing cells.
Actually immune suppressive effect of FLCs may
be manifested in respect of different immune com-
petent cells (ICCs) of a recipient, but first of all regu-
357 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
которых не лечили. Корригирующий эффект КФП
в отношении Т3 был отмечен несколько раньше.
Так, на 21-е сутки его уровень был даже несколько
выше контрольных показателей. В дальнейшем
концентрация Т3 изменялась волнообразно, что, ви-
димо, определялось характером изменения функ-
ционального статуса ЩЖ при патологии и сте-
пенью влияния каждой из форм КФП.
Интегральная оценка полученных результатов
дает основание считать, что выбранная экспери-
ментальная модель АИТ является адекватной для
оценки терапевтического потенциала КФП при этой
патологии. В этих условиях возможна аттестация
патогенетически значимых изменений состояния
систем, которые, собственно, и характеризуют раз-
витие данной патологии: развитие дисрегуляторно-
го состояния пула Т-клеток и его регуляторных
субпопуляций, а также гиперэкспансия В-лимфоци-
тов, продукция в этих условиях ААТ к антигену
ЩЖ и изменение гормонопродуцирующей актив-
ности ЩЖ.
Используя представленные методологические
и методические подходы, можно корректно оценить
способность КФП проявлять корригирующий эф-
фект в отношении каждого из оцененных элемен-
тов общей патогенетической цепи развития АИТ
и, прежде всего, иммунного статуса реципиента.
Иммуномодулирующий потенциал КФП был
продемонстрирован нами ранее в других модель-
ных системах [5, 6, 29]. Наибольший интерес
представляет способность КФП при лечении АИЗ
активировать супрессорное звено иммунитета вы-
рабатываемыми в ней иммунотропными медиа-
торами [6]. К таковым можно отнести альфафето-
протеин (АФП), который индуцирует продукцию
ТРФ-β и активацию клеток супрессоров [34].
К иммуномодулирующему потенциалу ФП
имеют непосредственное отношение МСК [33]. В
системе in vivo они обеспечивают пролонгацию
сроков приживления гистонесовместимых органов
[25], а при сотрансплантации с аллогенным кост-
ным мозгом (КМ) минимизируют степень проявле-
ния иммунного конфликта в виде болезни “трансп-
лантат против хозяина” [4, 7]. Показано, что их
иммуносупрессивный эффект в отношении как кле-
ток индукторов, так и эффекторов, например при
развитии АИГА, реализуется даже при малой кон-
центрации в общем пуле КФП [29]. Индукторами
их иммуносупрессивной активности при многих
АИЗ являются воспалительные медиаторы
(ФНО-α, ИЛ-2, γ-ИФ и др.) [2, 8, 23, 36].
Важным компонентом аппликации клеточной и
тканевой терапии в клинической практике являются
криобиологические технологии. Результаты мно-
гих работ показали, что криоконсервирование – не
только метод длительного хранения биологических
latory subpopulations o T-lymphocytes. The presented
in Table 2 data confirm the manifested correction of
the state of populations and subpopulations of T-cells
after application of FLCs.
Judging on IRI the correcting effect of native FLCs
in respect of subpopulation of CD8+ suppressors
started to be manifested from the 21st day. Such an
effect of cryopreserved FLCs was maximal at later
terms. The manifestation character of activation of
suppressor subpopulation of T-cells was distinctly co-
subjected and the dynamics of the reduction of hyper-
production of B-lymphocytes (CD19+). Normalization
of this index after introduction of native FLCs was
noted to the 28th day of the experiment meanwhile
after application of cryopreserved FLCs only to the
25th days.
The recovery of the balance of ICC after appli-
cation of FLCs finally affected also the character of
the change in TG functional state. However hormone-
producing function of TG after introduction of FLCs
had some peculiarities. So, the level of T4 to the 14th
day after FLCs injection increased in 1.5–2.0 times in
respect of the control 1 and group of animals with AIT,
not subjected to treatment. To the 21st and 28th days
the increased production of hormones has still kept if
compared to the intact group, but already there has
appeared the distinct tendency of manifesting the
therapeutic effect as the reduction of hormone concen-
tration versus the group of non-treated animals. Correc-
ting effect of FLCs in respect of T3 was revealed a
little bit earlier. So, to the 21st day its level there was
even slightly higher than the control indices. Later the
concentration of T3 altered wave-like that was
probably determined changes of functional status of
TG at pathology and the effect degree of each FLCs
forms.
Integral estimation of the findings enables to believe
that the chosen experimental model of AIT is adequate
to assess the therapeutic potential of FLCs at this
pathology. Under these conditions there is possible the
attestation of pathogenetically valuable alterations of
the state of systems, mainly characterizing the
development of this pathology: the development of
dysregulatory state of T-cell pool and its regulatory
subpopulations, as well as hyperexpansion of B-
lymphocytes, the production of AABs under these
conditions to the antigen of TG and the change in
hormone-producing activity of TG.
Using the presented approaches one may correctly
estimate the ability of FLCs to manifest the correcting
effect in respect of each from the elements of total
pathogenetical chain of AIT development and first of
all, of a recipient’s immune status.
Immune modulating potential of FLCs was demon-
strated by us previously in other model systems [5, 6,
29]. The highest interest is paid to the ability of FLCs
358 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
объектов, но и фактор изменения внутреннего со-
стояния (intrinsic state) биообъекта [28]. В связи с
этим особый интерес представляет исследование
возможных изменений после криоконсервирования
состояния биообъектов, относящихся к субстра-
там клеточной и тканевой терапии, и, следователь-
но, лечебного эффекта. Например, нелетальные
повреждения кроветворных предшественников
криоконсервированного КМ отрицательно влияют
на темпы восстановления гемопоэза в организме
реципиента [2, 21]. В то же время установленный
факт снижения иммуногенных характеристик раз-
личных тканей, например тканей кожи, поджелудоч-
ной железы, является положительным моментом
в обеспечении их приживляемости и пролонгации
сроков функционирования [22–24, 35]. В отношении
криоконсервированного костного мозга такого рода
изменения способствуют минимизации степени
проявления его иммунореактивности [4, 7, 8].
Вполне возможно, что после криоконсервирования
состояние наиболее значимых субпопуляций КФП
с иммуномоделирующими характеристиками
(стволовые кроветворные клетки; мезенхи-
мальные стволовые клетки; гепатобласты; оваль-
ные клетки, клетки, трансформированные из эпи-
телиальных в мезенхимальные и т. д.) также изме-
няется [30]. Можно считать, что после криокон-
сервирования изменяется не только компонентный
состав КФП, но и спектр продуцируемых ими ре-
гуляторных медиаторов. Физико-химические фак-
торы криоконсервирования, являясь стрессинду-
цибельными факторами, действительно играют
роль триггера нарушений метаболизма и экспрес-
сии генов как в клетках млекопитающих-гиберна-
торов [20], так и тех, у которых такая холодовая
“адаптивность” эволюционно не развилась. Уста-
новлена, например, экспрессия в криоконсер-
вированных фибробластах млекопитающих транс-
криптов, ответственных за наработку васкулярного
эндотелиального ростового фактора (vascular endo-
thelial growth factor – VEGF) и тромбоцит-продуци-
руемого (platelet-derived growth factor – PDGF)
фактора. Холодовая гипоксия и отогрев индуциро-
вали позитивную регуляцию экспрессии мРНК
ICAM-молекулами в культивируемой линии взрос-
лой печени [20]. В [9] показано, что при заморажи-
вании-отогреве нейтрофилов увеличивалась экс-
прессия LFA-1 – структур, которая сопровождалась
усилением их адгезии к сосудистому эпителию. С
этими данными совпадают результаты работы [17],
в которой демонстрируется усиление после крио-
консервирования экспрессии интегринов на КФП.
Разные изменения могут иметь место в КФП с
наработкой такого протеинового профиля, который
и обусловливает ту феноменологию их поведения,
которая манифестируется у животных с АИТ.
during treatment of AIDs to activate the suppressor
immunity link with produced in it immune tropic
mediators [6]. Alpha fetoprotein (AFP), inducing the
production of TGF-β and activation of cell suppressors
may be referred to those [34].
MSCs have a direct relation to immune modulating
potential of foetal liver [33]. They provide the
prolongation of the terms of histoincompatible organs
in vivo [25] and during co-transplantation with
allogeneic bone marrow (BM) minimize the manifes-
tation degree of immune conflict as the graft-versus-
host disease [4, 7]. It has been shown that their immune
suppressive effect in respect of both cells-inducers and
the effectors, for example during the development of
AIHA are implemented even under low concentration
in total pool of FLCs [29]. Their immune suppressive
activity inducing agents under many AIDS are
inflammatory mediators (TNF-α, IL-2, γ-IF etc.) [2,
8, 23, 36].
Cryobiological techniques are the important com-
ponent of application of cell and tissue therapy in clinical
practice. The results of numerous researches have
shown that cryopreservation is not only the method of
long-term storage of biological objects, but also the
factor of the change in biological object intrinsic state
[28]. In this connection of a special interest is the study
of the problem of possible post-cryopreservation chan-
ges in biological objects referring to the substrates of
cell and tissue therapy and consequently of therapeutic
effect. For example, non-lethal damages of hemato-
poietic precursors of cryopreserved BM negatively
affect the recovery rates of hemopoiesis in a recipient’s
organism [2, 21]. At the same time the established
fact of reduction of immunogenic characteristics of
different tissues, for instance of skin, pancreas, is a
positive moment in providing their grafting and
prolongation of functioning terms [22–24, 35]. In
respect of cryopreserved bone marrow these changes
contribute to minimization of the manifestation rate of
its immune reactivity [4, 7, 8]. It is quite real that after
cryopreservation the state of the most valuable sub-
populations of FLCs with immune modelling charac-
teristics (HSCs, MSCs, hepatoblasts, OCs, EMT-cells
etc.) also changes [30]. One may consider that after
cryopreservation not only composition of FLCs, but
also the spectrum of produced by them regulatory
mediators change. Physical and chemical cryopreser-
vation factors being stress-inducible actually play the
role of trigger of disorders of metabolism and gene
expression both in cells of hibernating mammals [20]
and in those which evolutionally did not develop such
a cold “adaptivity”. For example it has been established
the expression in cryopreserved mammalian fibroblasts
of the transcripts, responsible for the accumulation of
vascular endothelial growth factor (VEGF) and
platelet-derived growth factor (PDGF). Cold hypoxia
359 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Очевидно, что КФП обладают корригирующим
потенциалом в отношении базовых систем “бодиго-
меостаза” при лечении АИТ и сохраняют его после
криоконсервирования.
Выводы
Двукратное введение тиреоидного антигена,
приготовленного из ткани гомологичной щито-
видной железы с полным адъювантом Фрейнда
приводит к появлению основных признаков АИТ,
что свидетельствует об адекватности использо-
ванной в работе модели данной патологии для
аттестации адекватности лечебного действия
КФП.
Показано, что КФП при внутривенном введении
мышам с АИТ проявляет лечебный эффект, кото-
рый манифестируется снижением титра аутоанти-
тел, нормализацией продукции гормонов Т3 и Т4, а
также показателей иммунного статуса животных.
Эффективность криоконсервированных КФП су-
щественно не отличается от нативных, хотя крио-
консервирование придает КФП новые иммунологи-
ческие свойства.
and thawing induced positive regulation of mRNA
expression of ICAM molecules in adult liver cultured
line [20]. The paper [9] reported that during freeze-
thawing of neutrophils there was increased the
expression of LFA-1 structures, accompanied with
strengthening of their adhesion to vascular epithelium.
The research results [17], wherein there is demon-
strated the strengthening of integrin expression on
FLCs after cryopreservation, coincide with these data.
Similar changes or of other character may take place
in FLCs with accumulation of this protein profile,
stipulating that phenomenology of their behaviour,
manifesting in the animals with AIT. In general, it is
evident that FLCs has a correcting potential in respect
of base systems of “body homeostasis” when treating
AIT and preserve this property after cryopreservation.
Conclusions
Two-fold injection of thyroid antigen derived from
the tissue of homologous thyroid gland with a complete
Freund adjuvant leads to the appearance of main signs
of AIT, that testifies to an adequacy of the used in the
research model of this pathology for attestation of the
efficiency of therapeutic effect of FLCs.
It has been shown that FLCs at intravenous injec-
tion to mice with AIT render the therapeutic effect,
manifesting in the reduction of the titre of AABs,
normalizing the production of hormones T3 and T4 as
well as the indices of immune status of animals. The
effectiveness of cryopreserved FLCs does not signi-
ficantly differ from native ones, though cryopreser-
vation assigns to the FLCs new immune modulating
characteristics.
Литература
Андросова Д.С., Баракат М.Ю., Пругло Ю.В. Патоморфо-
логический и иммунологический анализ аутоиммунных
процессов в щитовидной железе // БЭБиМ.– 2007.– Т. 143,
№6.– С. 704–708.
Гольцев А.Н. Возможные причины развития аутоиммун-
ной патологии и поиск путей её лечения // Пробл. мед.
науки і освіти.– 2000.– №1.– С. 22–37.
Гольцев А.Н., Дубрава Т.Г., Останкова Л.В. и др. Особен-
ности влияния криоконсервирования на функциональ-
ный потенциал стволовых кроветворных клеток фе-
тальной печени разных сроков гестации // Пробл. крио-
биологии.– 2009.– Т. 19, №2.– С. 186–199.
Гольцев А.Н., Дубрава Т.Г., Козлова Ю.А. и др. Влияние
различных режимов криоконсервирования на сохран-
ность стволовых кроветворных клеток костного мозга
животных с аутоиммунными заболеваниями. Часть 2.
Оценка in vivo функционального статуса кроветворных
предшественников криоконсервированного костного
мозга // Пробл. криобиологии.– 2007.– Т. 17, №2.– С. 126–
140.
Гольцев А.Н., Останкова Л.В., Луценко Е.Д. и др. Ответ
лимфогемопоэтической системы организма на введение
продуктов фетоплацентарного комплекса // Пробл.
криобиологии.– 2000.– №2.– С. 15–30.
Гольцев А.Н., Рассоха И.В., Луценко Е.Д. и др. Межклеточ-
ные взаимодействия в иммунокомпетентной сфере при
ревматоидном артрите после применения гемопоэтичес-
ких клеток эмбриональной печени // Пробл. криобио-
логии.– 2003.– №3.– С. 45–53.
Гольцев А.Н., Цуцаева А.А. Особенности течения
“вторичной болезни” у реципиентов с трансплантатом
криоконсервированного костного мозга // Криобиология
и криомедицина.– 1984.– №5.– С. 60–65.
Гольцев А.Н., Цуцаева А.А., Останкова Л.В. и др. Исполь-
зование экзогенной ДНК с целью ускорения репаратив-
ных процессов в деконсервированных миелокарио-
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
References
Androsova D.S., Barakat M.Yu., Pruglo Yu.V. Pathomorpho-
logic and immunologic analysis of autoimmunological
processes in thyroid gland // Bull. Experim. Biol. Med.– 2007.–
Vol. 143, N6.– P. 704–708.
Goltsev A.N. Possible causes of autoimmune pathology and
search of its treatment methods// Problemy Med. Nauki i
Obrazovaniya.– 2000.– N1.– P. 22–37.
Goltsev A.N., Dubrava T.G., Ostankova L.V. et.al. Peculiarities
of cryopreservation effect on functional potential of fetal
liver hemopoietic stem cells of various gestation terms //
Problems of Cryobiology.– 2009.– Vol. 19, N2.– P. 186–199.
Goltsev A.N., Dubrava T.G., Kozlova Yu.A. et. al. Effect of
different cryopreservation regimens on bone marrow
hemopoietic stem cells integrity in animals with autoimmune
diseases. Part 2. In vivo estimation of functional status of
cryopreserved bone marrow hemopoietic progenitors//
Problems of Cryobiology.– 2007.– Vol. 17, N2.– P. 126–140.
Goltsev A.N., Ostankova L.V., Lutsenko E.D. et.al. Response
of the lymphohemopoietic system of the organism to the
injection of the products of the fetoplacental complex//
Problems of Cryobiology.– 2000.– N2.– P. 15–30.
Goltsev A.N., Rassokha I.V., Lutsenko E.D. et.al. Intercellular
interactions in immunocompetent sphere at rheumatoid arthritis
following the application of hematopoietic embryonic liver
cells// Problems of Cryobiology.– 2003.– N3.– P. 45–53.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
360 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
цитах, имплантированных облученным реципиентам //
Криобиология и криомедицина.– 1977.– №3.– С. 59–62.
Гольцев А.Н., Ямпольская Е.Е., Дубрава Т.Г. Идентифи-
кация фенотипических характеристик и оценка влияния
различных режимов криоконсервирования на функцио-
нальный потенциал клеток фетальной печени // Вісник
ХНУ ім. В.Н. Каразіна. Серія: біологія.– 2006.– №748.–
С. 121–127.
Грищенко В.И., Гольцев А.Н. Трансплантация продуктов
эмбриофетоплацентарного комплекса. От понимания
механизма действия к повышению эффективности
применения // Пробл. криобиологии.– 2002.– № 1.– С. 54–
85.
Йегер Л. Клиническая иммунология и аллергология.– М.:
Медицина, 1990.– Т. 3.– 529 с.
Каминский А.В. Хронический аутоиммунный тиреоидит
(этиология, патогенез, радиационные аспекты) // Ук-
раїнський медичний часопис.– 1999.– №1.– С. 16–21.
Козлова Ю.А., Гольцев А.Н., Останков М.В. Влияние изо-
лированных физико-химических факторов криоконсерви-
рования на клетки костного мозга с различным исходным
структурно-функциональным статусом // Пробл.
криобиологии.– 2003.– №4.– С. 3–11.
Криоконсервирование клеточных суспензий / Под. ред.
Цуцаевой А.А.– К.: Наук. думка, 1983.– 240 с.
Малова Н.Г., Караченцев Ю.И., Божко Т.С., Комарова И.В.
Перспективы применения криоконсервированных пре-
паратов эмбриофетоплацентарного комплекса при
тиреоидной патологии // Пробл. ендокринної патології.–
2006.– №3.– С. 63–68.
Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования.
Справочник. – М.: Медицина, 1987. – 368 с.
Николаев А.И., Артемова Е.П. Дальнейшие исследо-
вания агрессивности антитиреоидных антител (экспери-
ментальное исследование) // Пробл. эндокринологии.–
1968.– №2.– С. 82–85.
Петунина Н.А. Клиника, диагностика и лечение аутоим-
мунного тиреоидита // Пробл. эндокринологии.– 2002.–
Т.48, №6.– С. 16–21.
Справочник по клиническим лабораторным методам
исследования / Под ред. Е.А. Костенко.– М.: Медицина,
1968.– 437 с.
Фуллер Б., Грин К., Грищенко В.И. Охлаждение, криокон-
сервирование и экспрессия генов в клетках млекопи-
тающих // Пробл. криобиологии.– 2004.– №3.– С. 58–71.
Цуцаева А.А., Гольцев А.Н. “Хоминг” и пролиферация
кроветворных клеток (КОЕС) криоконсервированного
костного мозга в селезенке и костном мозге реципиен-
тов // Криобиология.– 1987.– №4.– С. 9–15.
Цуцаева А.А., Гольцев А.Н., Микулинский Ю.Е., Остан-
кова Л.В. Иммунологические свойства деконсервиро-
ванных миелокариоцитов и влияние некоторых биологи-
чески активных веществ на течение репаративных
процессов в них // Криобиология и криомедицина.– 1979.–
№5.– С. 57–69.
Цуцаева А.А., Лобасенко Н.П., Маркова В.М. Сравнитель-
ное изучение активности нативной и деконсервирован-
ной антимакрофагальной и антилимфоцитарной сыворо-
ток // Криобиология и криомедицина.– 1975.– №1.– С. 70–
74.
Цуцаева А.А., Попов Н.Н. Влияние трансплантации алло-
генных криоконсервированных лимфоидных клеток на
выживаемость облученных животных // Криобиология
и криомедицина.– 1980.– №7.– С. 63–66.
Bartholomew A., Sturgeon C., Siatskas M. et al. Mesenchymal
stem cells suppress lymphocyte proliferation in vitro and
prolong skin graft survival in vitro // Exp. Hematol.– 2002.–
Vol. 30, N1.– P. 42–48.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
Goltsev A.N., Tsutsayeva A.A. Peculiarities in the “Secondary
Disease” course in recipients with cryopreserved bone
marrow graft // Kriobiologiya i Kriomedicina.– 1984.– N5.–
P. 60–65.
Goltsev A.N., Tsutsayeva A.A., Ostankova L.V. et. al. Utilization
of exogenous DNA aimed at accelerating reparative
processes in deconserved myelocaryocytes implanted to
irradiated recipients// Kriobiologiya i Kriomedicina.– 1977.–
N3.– P. 59–62.
Goltsev A.N., Yampol’skaya E.E., Dubrava T.G. Identification
of phenotypic characteristics and evaluation of effect of
different cryopreservation regimens on functional potential
of fetal liver cells // Bull of V.N. Karazin Kharkov National
University. Part: Biology.– 2006.– N748.– P. 121–127.
Grischenko V.I., Goltsev A.N. Transplantation of the products
of embryofetoplacental complex. From understanding of
mechanism of the effect to increasing the efficiency of
application // Problems of Cryobiology.– 2002.– N1.– P. 54–
85.
Yeger L. Clinic immunology and allergology.– Moscow:
Meditsina, 1990.– Vol. 3.– 529 p.
Kaminskiy A.V. Chronic autommune thyroiditis (etiology,
pathogenesis, radioactive aspects) // Ukrainskiy Medychnyy
chasopys.– 1999.– N1.– P. 16–21.
Kozlova Yu.A., Goltsev A.N., Ostankov M.V. Influence of
certain physical and chemical factors of cryopreservation
on bone marrow cells with various initial structural and
functional status // Problems of Cryobiology.– 2003.– N4.–
P. 3–11.
Cryopreservation of cell suspensions / Ed. by A.A. Tsu-
tsayeva.– Kiev: Naukova dumka, 1983.– 240 p.
Malova N.G., Karachentsev Yu.I., Bozhko T.S., Komarova I.V.
Perspectives of use of embryofetoplacental complex cryopre-
served preparations at thyroid pathology// Problemy
Endokrinnoy Patologii.– 2006.– N3.– P. 63–68.
Men’shikov V.V. Laboratory methods of investigations. Ma-
nual.– Moscow: Medicine, 1987.– 368 p.
Nikolaev A.I., Artemova E.P. Further studies of antithyroid
antibodies’ aggression (experimental research)// Problemy
endokrinologii.- 1968.- N2.- P. 82-85.
Petunina N.A. Clinic, diagnostic and treatment of autoimmune
thyroiditis // Problemy Endokrinologii.– 2002.– Vol. 48, N6.–
P. 16–21.
Manual of clinical laboratory research methods / Ed. by
E.A. Kostenko.– Moscow: Medicine, 1968.– 437 p.
Fuller B., Green C., Grischenko V.I. Cooling, cryopreser-
vation and gene expression in mammalian cells // Problems of
Cryobiology.– 2004.– N3.– P. 58–71.
Tsutsaeva A.A., Goltsev A.N. Homing and proliferation of
haemopoietic cells (CFUs) of cryopreserved bone marrow in
recipient spleen and bone marrow// Kriobiologiya.– 1987.–
N4.– P. 9–15.
Tsutsaeva A.A., Goltsev A.N., Mikulinskiy Yu.E., Ostankova L.V.
The immunological capacity of thawed myelocaryocytes and
the effect of certain biologically active substances on their
recovery// Kriobiologiya i Kriomeditsina.– 1979.– N5.– P. 57–
69.
Tsutsaeva A.A., Lobasenko N.P., Markova V.M. Comparative
study of activity of native and frozen-thawed antimacrophage
and antilymphocyte sera // Kriobiologiya i Kriomeditsina.–
1975.– N1.– P. 70–74.
Tsutsaeva A.A., Popov N.N. Effect of transplantation of allo-
genic cryopreserved lymphoid cells on survival of irradiated
animals// Kriobiologiya i Kriomedicina.– 1980.– N7.– P. 63–66.
Bartholomew A., Sturgeon C., Siatskas M. et al. Mesenchymal
stem cells suppress lymphocyte proliferation in vitro and
prolong skin graft survival in vitro // Exp. Hematol.– 2002.–
Vol. 30, N1.– P. 42–48.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
361 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Chen K., Wei Y., Sharp G.C., Braley-Mullen H. Induction of
experimental autoimmune thyroiditis in IL-12-/- mice // J.
Immunol.– 2001.– Vol. 167, N3.– P. 1720–1727.
Fistfalen M.E., De Groot Z.J. Molecular Endocrinology. Basic
Concepts and Clinical Correlation / Ed. B.D. Weintraub.– New
York, 1995.– P. 319–370.
Goltsev A.N., Babenko N.N., Dubrava T.G. et al. Modification
of the state of bone marrow hematopoietic cells after
cryopreservation // International Journal of Refrigeration.–
2006.– Vol. 29, N3.– Р. 358–367.
Goltsev A.N., Grischenko V.I., Sirous M.A. et al. Cryopreser-
vation: an optimizing factor for therapeutic potential of feto-
placental complex products // Biopreservation and
Biobanking.– 2009.– Vol. 7, N1.– P. 29–38.
Kvanstrom M., Jenmalm M.C., Ekerfelt C. Effect of cryo-
preservation on expression of Th1 and Th2 cytokines in blood
mononuclear cells from patients with different cytokine
profiles, analysed with three common assays: an overall
decrease of interleukin-4 // Cryobiology.– 2004.– Vol. 49, N2.–
P. 157–168.
Morrison S., Hemmati H., Wandyez A., Weissmon I. The
purification characterization of fetal liver hematopoietic stem
cells // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.– 1995.– Vol. 92, N22.–
P. 10302–10306.
Parish N.M., Cooke A. Mechanisms of autoimmune thyroid
disease // Drug Discovery Today: Disease Mechanisms.–
2004.– Vol. 1, N3.– P. 337–344.
Ringden O., Uzunel M., Rasmusson I. et al. Mesenchymal
stem cells for treatment of therapy-resistant graft-versus-
host disease // Transplantation.– 2006.– Vol. 81, N10.–
P. 1390–1397.
Sanchez А., Pagan R., Alvarez A.M. et al. Transforming
growth factor-β (TGF-β) and EGF promote cord-like structures
that indicate terminal differentiation of fetal hepatocytes in
primary culture// Exp. Cell Res.– 1998.– Vol. 242, N1.– P. 27–
37.
Taylor M.J., Duffy T.J., Hunt C.J. et al. Transplantation and in
vitro perfusion of rat islets of Langerhans after slow cooling
and warming in the presence of either glycerol or dimethil
sulfoxide // Cryobiology.– 1983.– Vol. 2, N2.– P. 185–204.
Tyndall A., Passwerg J., Gratwohl A. Haemopoietic stem cell
transplantation in the treatment of severe autoimmune
diseases 2000 // Ann. Rheum. Dis.– 2001.– Vol. 60, N7.–
Р. 702–707.
Witebsky E., Rose N.R., Terplan K., Rain J.R. Chronic
thyroiditis and autoimmunization // J.A.M.A.– 1957.– Vol.164,
N13.– P. 1439–1447.
Поступила 19.05.2009
Рецензент Е.А. Гордиенко
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
Chen K., Wei Y., Sharp G.C., Braley-Mullen H. Induction of
experimental autoimmune thyroiditis in IL-12-/- mice // J.
Immunol.– 2001.– Vol. 167, N3.– P. 1720–1727.
Fistfalen M.E., De Groot Z.J. Molecular Endocrinology. Basic
Concepts and Clinical Correlation / Ed. B.D. Weintraub.– New
York, 1995.– P. 319–370.
Goltsev A.N., Babenko N.N., Dubrava T.G. et al. Modification
of the state of bone marrow hematopoietic cells after
cryopreservation // International Journal of Refrigeration.–
2006.– Vol. 29, N3.– Р. 358–367.
Goltsev A.N., Grischenko V.I., Sirous M.A. et al. Cryopreser-
vation: an optimizing factor for therapeutic potential of feto-
placental complex products // Biopreservation and
Biobanking.– 2009.– Vol. 7, N1.– P. 29–38.
Kvanstrom M., Jenmalm M.C., Ekerfelt C. Effect of cryo-
preservation on expression of Th1 and Th2 cytokines in blood
mononuclear cells from patients with different cytokine
profiles, analysed with three common assays: an overall
decrease of interleukin-4 // Cryobiology.– 2004.– Vol. 49, N2.–
P. 157–168.
Morrison S., Hemmati H., Wandyez A., Weissmon I. The
purification characterization of fetal liver hematopoietic stem
cells // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.– 1995.– Vol. 92, N22.–
P. 10302–10306.
Parish N.M., Cooke A. Mechanisms of autoimmune thyroid
disease // Drug Discovery Today: Disease Mechanisms.–
2004.– Vol. 1, N3.– P. 337–344.
Ringden O., Uzunel M., Rasmusson I. et al. Mesenchymal
stem cells for treatment of therapy-resistant graft-versus-
host disease // Transplantation.– 2006.– Vol. 81, N10.–
P. 1390–1397.
Sanchez А., Pagan R., Alvarez A.M. et al. Transforming
growth factor-β (TGF-β) and EGF promote cord-like structures
that indicate terminal differentiation of fetal hepatocytes in
primary culture// Exp. Cell Res.– 1998.– Vol. 242, N1.– P. 27–
37.
Taylor M.J., Duffy T.J., Hunt C.J. et al. Transplantation and in
vitro perfusion of rat islets of Langerhans after slow cooling
and warming in the presence of either glycerol or dimethil
sulfoxide // Cryobiology.– 1983.– Vol. 2, N2.– P. 185–204.
Tyndall A., Passwerg J., Gratwohl A. Haemopoietic stem cell
transplantation in the treatment of severe autoimmune
diseases 2000 // Ann. Rheum. Dis.– 2001.– Vol. 60, N7.–
Р. 702–707.
Witebsky E., Rose N.R., Terplan K., Rain J.R. Chronic
thyroiditis and autoimmunization // J.A.M.A.– 1957.– Vol.164,
N13.– P. 1439–1447.
Accepted in 19.05.2009
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-30933 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-30T21:27:41Z |
| publishDate | 2009 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Гладких, Д.П. Гольцев, А.Н. 2012-02-18T12:15:10Z 2012-02-18T12:15:10Z 2009 Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита / Д.П. Гладких, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 3. — С. 349-361. — Бібліогр.: 37 назв. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/30933 361.36.013.014.41:616.441-002-092.4 В экспериментальной модели аутоиммунного тиреоидита продемонстрирована терапевтическая эффективность нативных и криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП). Рассмотрены преимущества и возможные механизмы лечебного действия препаратов фетоплацентарного комплекса и в частности КФП. В експериментальній моделі аутоімунного тиреоїдиту продемонстрована терапевтична ефективність нативних та кріокон- сервованих клітин фетальної печінки (КФП). Розглянуті переваги та можливі механізми лікувальної дії препаратів фетоплацентарного комплексу і зокрема КФП. In experimental model of autoimmune thyroiditis a therapeutic efficiency of native and cryopreserved fetal liver cells (FLCs) was demonstrated. The advantages and possible mechanisms of therapeutic effect of fetoplacental complex preparations and FLCs, in particular, were envisaged. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита Estimation of Therapeutic Potential of Fetal Liver Cryopreserved Cells in Model of Experimental Autoimmune Thyroiditis Article published earlier |
| spellingShingle | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита Гладких, Д.П. Гольцев, А.Н. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| title | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита |
| title_alt | Estimation of Therapeutic Potential of Fetal Liver Cryopreserved Cells in Model of Experimental Autoimmune Thyroiditis |
| title_full | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита |
| title_fullStr | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита |
| title_full_unstemmed | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита |
| title_short | Оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита |
| title_sort | оценка терапевтического потенциала криоконсервированных клеток фетальной печени в модели экспериментального аутоиммунного тиреоидита |
| topic | Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| topic_facet | Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/30933 |
| work_keys_str_mv | AT gladkihdp ocenkaterapevtičeskogopotencialakriokonservirovannyhkletokfetalʹnoipečenivmodeliéksperimentalʹnogoautoimmunnogotireoidita AT golʹcevan ocenkaterapevtičeskogopotencialakriokonservirovannyhkletokfetalʹnoipečenivmodeliéksperimentalʹnogoautoimmunnogotireoidita AT gladkihdp estimationoftherapeuticpotentialoffetallivercryopreservedcellsinmodelofexperimentalautoimmunethyroiditis AT golʹcevan estimationoftherapeuticpotentialoffetallivercryopreservedcellsinmodelofexperimentalautoimmunethyroiditis |