Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа)
Изучали особенности репаративной регенерации суставного хряща у крыс под влиянием низкомолекулярной фракции
 (до 5 кДа), выделенной из криогемолизата кордовой крови, и препарата сравнения “Актовегина”. Установлены особенности
 биохимического состава хрящевой ткани в условиях эксперим...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Datum: | 2009 |
| Hauptverfasser: | , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2009
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/30934 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) / А.К. Гулевский, В.И. Грищенко, Е.Г. Иванов // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 3. — С. 362-368. — Бібліогр.: 12 назв. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859990673183211520 |
|---|---|
| author | Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Иванов, Е.Г. |
| author_facet | Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Иванов, Е.Г. |
| citation_txt | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) / А.К. Гулевский, В.И. Грищенко, Е.Г. Иванов // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 3. — С. 362-368. — Бібліогр.: 12 назв. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии |
| description | Изучали особенности репаративной регенерации суставного хряща у крыс под влиянием низкомолекулярной фракции
(до 5 кДа), выделенной из криогемолизата кордовой крови, и препарата сравнения “Актовегина”. Установлены особенности
биохимического состава хрящевой ткани в условиях эксперимента. Рентгенологически выявлено положительное морфоло-
гическое изменение состояния хрящевой ткани. Проведенное исследование показало нормализацию двигательной активности крыс к 28 суткам эксперимента.
Вивчали особливості репаративної регенерації суглобного хряща у щурів під впливом низькомолекулярної фракції (до 5 кДа), виділеної з кріогемолізату кордової крові, та препарату порівняння “Актовегіну”. Встановлені особливості біохімічного складу хрящьової тканини в умовах експерименту. Рентгенологічно виявлена позитивна морфологічна зміна стану хрящьової тканини. Проведене дослідження показало нормалізацію рухової активності щурів на 28 добу експерименту.
There were studied the features of reparative regeneration of articular cartilage in rats under the effect of low molecular fraction
(below 5 kDa), isolated from cord blood cryohemolysate and the reference substance “Actovegin”. The peculiarities of biochemical
composition of cartilage tissue under experimental conditions were established. Positive morphological change in cartilage tissue state
was radiologically shown. The research performed demonstrated the normalisation of locomotor activity in rats to the 28th day of
research.
|
| first_indexed | 2025-12-07T16:31:42Z |
| format | Article |
| fulltext |
362 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-41-35, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
* To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya
str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 4135, fax: +380 57
373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
УДК 616.72-018.3:615.361.018.5.013.8
А.К. ГУЛЕВСКИЙ*, В.И. ГРИЩЕНКО, Е.Г. ИВАНОВ
Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща
под влиянием низкомолекулярной фракции
кордовой крови (до 5 кДа)
UDC 616.72-018.3:615.361.018.5.013.8
A.K. GULEVSKY*, V.I. GRISCHENKO, E.G. IVANOV
Stimulation of Reparative Regeneration of Articular Cartilage
Under the Effect of Cord Blood Low Molecular
Fraction (below 5 kDa)
Изучали особенности репаративной регенерации суставного хряща у крыс под влиянием низкомолекулярной фракции
(до 5 кДа), выделенной из криогемолизата кордовой крови, и препарата сравнения “Актовегина”. Установлены особенности
биохимического состава хрящевой ткани в условиях эксперимента. Рентгенологически выявлено положительное морфоло-
гическое изменение состояния хрящевой ткани. Проведенное исследование показало нормализацию двигательной активности
крыс к 28 суткам эксперимента.
Ключевые слова: репаративная регенерация, хрящ, жидкий азот, кордовая кровь, “Актовегин”, оксипролин, тирозин,
гексозамин, гексуроновые кислоты, гиалуроновая кислота, хондроитинсульфаты, гепарин.
Вивчали особливості репаративної регенерації суглобного хряща у щурів під впливом низькомолекулярної фракції (до 5
кДа), виділеної з кріогемолізату кордової крові, та препарату порівняння “Актовегіну”. Встановлені особливості біохімічного
складу хрящьової тканини в умовах експерименту. Рентгенологічно виявлена позитивна морфологічна зміна стану хрящьової
тканини. Проведене дослідження показало нормалізацію рухової активності щурів на 28 добу експерименту.
Ключові слова: репаративна регенерація, хрящ, рідкий азот, кордова кров, “Актовегін”, оксипролін, тирозин, гексозамін,
гексуронові кислоти, гіалуронова кислота, хондроїтінсульфати, гепарин.
There were studied the features of reparative regeneration of articular cartilage in rats under the effect of low molecular fraction
(below 5 kDa), isolated from cord blood cryohemolysate and the reference substance “Actovegin”. The peculiarities of biochemical
composition of cartilage tissue under experimental conditions were established. Positive morphological change in cartilage tissue state
was radiologically shown. The research performed demonstrated the normalisation of locomotor activity in rats to the 28th day of
research.
Key-words: reparative regeneration, cartilage, liquid nitrogen, Actovegin, oxyproline, tyrosine, hexosamine, hexuronic acids, hyaluronic
acid, chondroitin sulfates, heparin.
Одной из актуальных задач современной трав-
матологии является эффективное лечение повреж-
дений суставного хряща различной этиологии.
Среди лекарственных препаратов, способствую-
щих репаративной регенерации хряща, наиболее
эффективны те, в состав которых включены гиа-
луроновая кислота, хондроитинсульфат и глюкоза-
мин (“Артрон”, “Хондроксид”, “Терафлекс”). Их
действие связано с активацией ферментных систем
хондроцитов, ответственных за синтез элементов
матрикса хряща по типу обратной связи [4–6]. Кро-
ме того, существуют препараты, активирующие
энергетический обмен в хондроцитах за счет низ-
комолекулярной фракции (до 5 кДа) из крови телят
(“Солкосерил” и “Актовегин”). В результате наших
исследований [2] сделано предположение, что
препарат на основе низкомолекулярной фракции (до
One of the actual tasks in current traumatology is
an efficient treatment of articular cartilage damages
of different etiology. Among the drugs, contributing to
the cartilage reparation, the most efficient are those,
comprising hyaluronic acid, chondroitin sulfate and
glucosamine (“Arthron”, “Chondroxide”, “Theraflex”).
Their effect is associated to the activation of chondro-
cyte enzyme systems, responsible for the feedback
synthesis of cartilage matrix elements [4–6]. In
addition, there are the preparations, activating an ener-
getic metabolism in chondrocytes due to a low mole-
cular fraction (below 5 kDa) from calf blood (“Solco-
seryl” and “Actovegin”). As a result of our research
[2], the preparation, based on a low molecular fraction
(below 5 kDa) of bovine blood, isolated from cattle
cord blood cryohemolysate, was suggested as capable
to stimulate the cartilage tissue regeneration.
363 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
5 кДа) крови коров, выделенной из криогемолизата
кордовой крови крупного рогатого скота, может
стимулировать регенерацию хрящевой ткани.
Цель работы – изучение особенностей регене-
рации суставного хряща крыс после механической
травмы, применения низкомолекулярной фракции
из кордовой крови коров и “Актовегина”.
Материалы и методы
Низкомолекулярную фракцию кордовой крови
(ФКК) коров выделили по методу [2]. Исследова-
ние выполняли на 40 крысах-самцах линии Wistar
массой 290–310 г.
Животных распределили на 4 группы по 10 осо-
бей в каждой: 1 – здоровые животные (норма); 2 –
животные с травмой хряща, не получавшие лечения
(контроль); 3 – экспериментальные животные с
травмой хряща, которым в течение всего срока
исследования внутримышечно вводили ФКК в дозе
1,17 мг на 100 г массы тела (группа ФКК); 4 – экс-
периментальные животные с травмой хряща, кото-
рым в течение всего срока исследования внутри-
мышечно вводили “Актовегин” (Nycomed, Авст-
рия) в дозе 1,17 мг на 100 г массы тела (группа
“Актовегин”).
Механический дефект хряща был осуществлен
[3, 7] электрической бормашиной с наконечником
в форме усеченного конуса (длина рабочей поверх-
ности наконечника составляет 4 мм, диаметр вни-
зу – 0,7 мм, вверху – 0,5 мм) высверливанием
отверстия в хряще (дистальный отдел бедренной
кости от межмыщелковой зоны вглубь метадиа-
физа) длиной 4 мм и диаметром до 0,7 мм.
На 7, 14, 21 и 28-е сутки с момента моделиро-
вания механического повреждения хряща колен-
ного сустава оценивали состояние двигательной
активности крыс по методу [1], а также определяли
содержание биохимических компонентов матрикса
в регенерате хряща: тирозина [6], гексозамина [8],
оксипролина [12], гексуроновых кислот [9], гиалу-
роновых кислот, гепарина и хондроитинсульфатов
(гликозаминогликаны) [6]. Сразу после моделиро-
вания механической травмы хряща и на 28-е сутки
наблюдения с помощью аппарата РУМ-4 (Россия)
проведено рентгенологическое исследование пов-
режденного участка.
Эксперименты проведены в соответствии с
“Общими принципами экспериментов на живот-
ных”, одобренными II Национальным конгрессом
по биоэтике (20.09.04, Киев, Украина) и согласован-
ными с положениями “Европейской конвенции о
защите позвоночных животных, используемых для
экспериментальных и других научных целей”
(Страсбург, 1985).
The research aim is to study the regeneration
peculiarities of articular cartilage in rats after mecha-
nical trauma, application of low molecular fraction from
bovine cord blood and “Actovegin”.
Materials and methods
The low molecular bovine cord blood fraction
(CBF) was isolated according to the method [2]. The
research was done in 40 Wistar male rats of 290–310 g.
Animals were divided into 4 groups by 10 indivi-
duals in each: 1 – healthy animals (the norm); 2 – the
animals with cartilage trauma, non-treated (the cont-
rol); 3 – experimental animals with cartilage trauma
with CBF intramuscular injection in the dose of 1.17 mg
per 100 g of body weight within the whole research
period (CBF group); 4 – those with cartilage trauma
with intramuscular injection of “Actovegin” (Nycomed,
Austria) in the dose of 1.17 mg per 100 g of body
weight within the whole research period (“Actovegin”
group).
Mechanical cartilage defect was done [3, 7] using
an electric drill with a handpiece in the form of flatte-
ned cone (4 mm length of handpiece operative surface,
0.7 and 0.5 mm of upper and lower diameters, corres-
pondingly) by drilling the hole in the cartilage (femur
distal part from an intercondylar area into the depth of
methadiaphys) of 4 mm length and up to 0.7 mm dia-
meter.
To the 7th, 14th, 21st and 28th days from the moment
of modelling of knee joint cartilage mechanical damage
there was assessed the state of locomotor activation
in rats by the method [1], as well as the content of
biochemical component of matrix in cartilage regene-
rate: tyrosine [6], hexosamine [8], oxyproline [12],
hexuronic acids [9], hyaluronic acids, heparin and
chondroitin sulfate (glycosaminglycans) [6] was deter-
mined. Right after modelling the cartilage mechanical
damage and to the 28th observation day using the
RUM-4 device (Russia) there was performed an X-ray
study of a damaged site.
Experiments were done according to the “General
ethical principles of experiments in animals”, approved
by the 2nd National Congress on Bioethics (Kiev, 2004)
and agreed with the statements of the “European
Convention for the Protection of Vertebrate Animals
Used for Experimental and Other Scientific Purposes”
(Strasbourg, 1985).
The data were statistically processed with the
Microsoft Excel 2003 software using the Mann-
Whitney U-test.
Results and discussion
Cord blood and the one of animals of early onto-
genesis has quite a high biological potential, stipulated
0
2
4
6
8
10
12
14
Контроль ФКК "Актовегин"
*
*
364 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Данные статистически обрабатывали с по-
мощью программы Microsoft Excel 2003 с использо-
ванием U-критерия Манна-Уитни.
Результаты и обсуждение
Кордовая кровь и кровь животных раннего
онтогенеза обладает чрезвычайно высоким биоло-
гическим потенциалом, который обусловлен сба-
лансированностью специфичных компонентов,
поддерживающих и активирующих клеточный
метаболизм. Особый интерес в этом отношении
представляет низкомолекулярная фракция (до
5 кДа) кордовой крови крупного рогатого скота,
которая способна стимулировать клеточный мета-
болизм, что в частности было установлено для
“Солкосерила” и “Актовегина”, полученных из
онтогенетически близкого источника – крови мо-
лочных телят[2].
Установлено, что ФКК стимулирует образова-
ние хрящевой ткани после механической травмы,
однако рентгенологический анализ показал, что
даже на 28-е сутки дефект хряща сохраняется. В
группе животных с введением ФКК площадь
повреждения на 28-е сутки составляла 7 мм2, что
достоверно меньше, чем в контроле и больше , чем
в группе с введением “Актовегина” (рис. 1).
Интенсивность образования хрящевой ткани
определяется биосинтезом в хондроцитах матрик-
са гексозамина, гексуроновых кислот, тирозина,
оксипролина, гиалуроновой кислоты, гепарина,
хондроитинсульфатов и активностью фиброблас-
тов, синтезирующих соединительнотканные эле-
менты регенерата хряща [6, 10, 11].
Данные о содержании гликозаминогликановых
и протеогликановых компонентов в ткани хряща
на 21-е сутки после нанесения травмы представ-
лены в таблице.
Под влиянием ФКК и “Актовегина” в регене-
рате хряща достоверно увеличивается содержание
всех исследуемых биохимических компонентов
матрикса хрящевой ткани, особенно гиалуроновой
кислоты. После введения “Актовегина” уровень
последней в регенерате хряща выше в 6,3 раза,
чем в группе животных, не получавших лечения.
Под влиянием ФКК содержание гиалуроновой
кислоты увеличивается всего в 3,3 раза по сравне-
нию с группой животных, не получавших лечения.
Однако к 21-м суткам наблюдения после примене-
ния ФКК и “Актовегина” содержание гиалуроновой
кислоты значительно ниже, чем в группе здоровых
животных.
Установлено, что под влиянием ФКК содержа-
ние хондроитинсульфатов увеличивается в 4,2 раза
по сравнению с группой животных, не получавших
лечения, а под влиянием препарата сравнения “Ак-
товегина” – в 2,4 раза. Вместе с тем к 21-м суткам
Рис. 1. Площадь повреждения хряща на 28-е сутки,
вычисленная по рентгенограммам: * – p < 0,05 по срав-
нению с группой животных, не получавших лечения.
Fig. 1. Injury cartilage area to 28th day, calculated with X-
ray patterns: *− p < 0.05 if compared with the group of non-
treated animal
П
ло
щ
ад
ь
по
вр
еж
де
ни
я,
м
м
2
In
ju
ry
a
re
a,
m
m
2
CBF “Actovegin”Control
with the balance of specific components, supporting
and activating their cell metabolism. Of special interest
in this respect is low molecular fraction (below 5 kDa)
of cattle cord blood, enabling to sharply increase the
cell energetic potential, in particular this was established
for “Solcoseryl” and “Actovegin” originated from the
ontogenetically close source, vealer blood [2].
It has been established that CBF stimulates the
formation of cartilage tissue after mechanical trauma
but X-ray analysis has shown the preservation of
cartilage defect even to the 28th day. In the group of
CBF-injected animals the area of damage to the 28th
day made 7 mm2, that was statistically lower than in
the control and higher if compared with the group with
“Actovegin” (Fig. 1).
Intensity of cartilage formation is determined by
biosynthesis in chondrocytes of matrix of hexosamine,
gexuronic acids, tyrosine, oxyproline, hyaluronic acid,
heparin and chondroitin-sulfates and activity of
fibroblasts, synthesizing connective tissue elements of
cartilage regenerate [6, 10, 11].
The data on the content of glucosamine glycans
and proteoglycan components in cartilage tissue after
trauma initiation are presented in the table.
Under CBF effect and “Actovegin” in the cartilage
regenerate the content of all the studied biochemical
components of cartilage tissue matrix increases, es-
pecially of hyaluronic acid. After “Actovegin” introduc-
tion the level of the latter in cartilage regenerate is 6.3
times higher than in the group of non-treated animals.
Under CBF effect the content of hyaluronic acid in-
creases only in 3.3 times if compared with the group
of non-treated animals. However to the 21st observation
day after application of CBF and “Actovegin” the content
365 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Содержание основных элементов матрикса в регенерате хряща после его механической травмы на 21-е сутки
Content of matrix basic elements in cartilage regenerate after its mechanic trauma to the 21st day
Примечание: * – p < 0,05 по сравнению с группой животных, не получавших лечения.
Note: * − p < 0.05 if compared with the group of non-treated animals.
наблюдения содержание хондроитинсульфатов в
хрящевой ткани опытных животных существенно
ниже, чем в группе здоровых.
Аналогичную картину наблюдали при исследо-
вании гексозамина, уровень которого при использо-
вании ФКК и “Актовегина” повышался соответст-
венно в 1,7 и 1,8 раза по сравнению с контрольной
группой животных. Важно отметить, что при вве-
дении ФКК и препарата сравнения уровень гексо-
замина достоверно не отличался от такового в
группе здоровых животных, что свидетельствует
о стимуляции метаболизма.
В опытных группах и группе животных, не полу-
чавших лечения, отмечено различное содержание
гепарина. В частности, под влиянием ФКК его со-
держание в регенерате хряща увеличивается в
2,1 раза. Содержание гепарина в регенерате хряща
при введении ФКК и “Актовегина” незначительно
отличается от такового в группе здоровых живот-
ных.
Аналогичные изменения выявлены при исследо-
вании содержания в регенерате хряща гексуроно-
вых кислот: под влиянием ФКК и препарата срав-
нения оно увеличивается в 1,6 и 1,7 раза соответ-
ственно по сравнению с группой животных, не полу-
чавших лечения. После применения ФКК и
“Актовегина” уровень гексуроновых кислот в реге-
нерате хряща был ниже в 1,3 и 1,4 раза соответст-
венно, чем в группе здоровых животных.
Для изучения механизма действия ФКК и
“Актовегина” на регенерацию хряща оценивали
содержание основных компонентов матрикса не
только в самом регенерате хряща опытных живот-
ных, но и в хрящевой ткани здоровой конечности
of hyaluronic acid is significantly lower than in the group
of healthy animals.
It has been established that under the effect of CBF
the content of chontroitin-sulfates increases in 4.2 times
versus the group of non-treated animals, and under
the effect of “Actovegin” it was in 2.4 times higher. In
addition to the 21st observation day the content of
chondroitin sulfates in cartilage tissue of experimental
animals was significantly lower than in the group of
healthy ones.
The same picture was observed when investigating
hexosamine, the level of which when using CBF and
“Actovegin” increased, correspondingly, in 1.7 and 1.8
times if compared with the control group of animals. It
is important to note that during introduction of CBF
and the preparation to compare the level of hexosamine
did not statistically differ from that in the group of
healthy animals, that testified to a high stimulation of
metabolism.
In experimental groups and the one of non-treated
animals different content of heparin was noted. In
particular, under the CBF effect its content in cartilage
regenerate increases in 2.1 times. Heparin content in
cartilage regenerate when introducing CBF and “Acto-
vegin” slightly differs from that in the group of healthy
animals.
The same changes were found when investigating
the content of hexuronic acids in cartilage regenerate:
under CBF effect and the preparation to compare it
increases in 1.6 and 1.7 times, correspondingly with
the group of non-treated animals. After application of
CBF and “Actovegin” the level of hexuronic acids in
cartilage regenerate was lower in 1.3 and 1.4 times,
correspondingly versus the group of healthy animals.
хынтовижыппурГ
spuorglaminA
%/гм,нимазоскеГ
%/gm,enimasoxeH
еывонорускеГ
%/гм,ытолсик
sdicacinoruxeH
%/gm
яавонорулаиГ
%/гм,атолсик
,dicacinorulayH
%/gm
нитиордноХ -
%/гм,ытафьлус
,setaflusnitiordnohC
%/gm
%/гм,нирапеГ
%/gm,nirapeH
хывородзаппурГ
)1(хынтовиж
laminayhtlaeH
)1(puorg
20,0±36,0 * 960,0±4,1 * 430,0±43,0 * 400,0±32,0 * 900,0±12,0 *
ен,хынтовижаппурГ
яинечелхишвачулоп
)2(
nonfopuorG - detaert
)2(slamina
920,0±43,0 30,0±16,0 20,0±40,0 700,0±40,0 700,0±70,0
)3(KKФ
)3(FBC 230,0±46,0 * 670,0±10,1 * 20,0±41,0 * 210,0±71,0 * 310,0±51,0 *
)4("нигевоткА"
)4("nigevotcA" 540,0±66,0 * 170,0±80,1 * 710,0±62,0 * 900,0±1,0 * 10,0±51,0 *
ьнактяавещярХ
йоннаворимвартен
итсонченок
foeussitegalitraC
non - bmildezitamuart
410,0±6,0 * 280,0±34,1 * 810,0±13,0 * 800,0±22,0 * 300,0±32,0 *
366ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
тех же крыс. Из данных таблицы, можно заклю-
чить, что ФКК и препарат сравнения достоверного
влияния на содержание компонентов матрикса не
оказывают, что, вероятнее всего, свидетельствует
о их направленном биологически активном
действии на пораженную хрящевую ткань.
В дальнейшем изучали влияние ФКК и “Акто-
вегина” на концентрацию в регенерате хряща окси-
пролина и тирозина, по уровню которых можно
определить содержание коллагеновых и неколлаге-
новых белков хряща [6, 10, 11], являющихся крите-
рием активности фибробластов и хондроцитов в
травмированном хряще [4, 12].
Из рис. 2 видно, что содержание тирозина в
регенерате хряща групп животных с введением
ФКК и “Актовегина” вдвое выше по сравнению с
группой животных, не получавших лечения. В
случае применения ФКК и “Актовегина” уровень
тирозина к 21-м суткам после нанесения травмы
ниже в 1,9 раза, чем в группе здоровых животных.
Содержание оксипролина в регенерате хряща
после применения ФКК в 2 раза выше по сравне-
нию с группой животных, не получавших лечения,
в то время как после введения препарата сравнения
значительных изменений по сравнению с контроль-
ными животными не выявлено. Установлено, что
содержание оксипролина в регенерате хряща после
применения ФКК меньше в 1,2 раза, чем в группе
здоровых животных. Очевидно, что ФКК значи-
тельно стимулирует синтез оксипролина в поражен-
ной хрящевой ткани. Как и при исследовании
протеогликановых компонентов, не выявлены дос-
товерные отличия в содержании данных амино-
кислот в хряще здоровой конечности опытных
животных по сравнению с нормой.
Таким образом, исследование биохимических
по-казателей позволило установить, что внутримы-
шечное введение ФКК стимулирует накопление
основных элементов матрикса и соединительно-
тканных элементов хряща на протяжении всего
срока эксперимента. Это объясняет более быст-
рое восстановление структурно-функциональных
свойств травмированного хряща под влиянием
препарата ФКК по сравнению с контролем.
Для более точного установления эффективности
проведенного лечения изучали динамику двига-
тельной активности экспериментальных животных.
Из рис. 3 видно, что введение ФКК и “Актовегина”
стимулирует нормализацию двигательной актив-
ности значительно быстрее (на 7-е сутки – в 1,7 и
1,6 раза, 14-е сутки – в 1,4 и 1,3 раза соответ-
ственно, 21 и 28-е сутки – 1,2 раза) по сравнению с
группой животных, не получавших лечения.
Достоверные отличия влияния ФКК и “Актове-
гина” по сравнению с группой животных, не полу-
чавших лечения, отмечены уже на 7-е сутки наб-
Рис. 2. Содержание аминокислот в регенерате хряща на
21-е сутки: – тирозин; – оксипролин; Здор. кон. –
здоровая конечность животных опытных групп; * –
р < 0,05 по сравнению с контролем.
Fig. 2. Content of aminoacids in cartilage regenerate to the
21st day: – tyrosine; – oxyproline; Non-inj. – non-injuired
limb of animal experimental groups; * – p < 0.05 if compared
with the control.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
Контроль Норма Здор. кон. ФКК "Актовегин"
*
**
*
*
*
*
Control
С
од
ер
жа
ни
е,
м
г/%
C
on
te
nt
,
m
g/
%
Norm Non-inj. CBF “Aktovegin“
To study the effect mechanisms of CBF and
“Actovegin” on cartilage regeneration the content of
main matrix components not only in the cartilage
regenerate itself and in cartilage tissue of rat’s healthy
extremity was studied. The table data show that CBF
and the preparation to compare render no statistically
significant effect on the content of the matrix compo-
nents, likely testifying to their directed active effect
on the impaired cartilage tissue.
Later there was studied the effect of CBF and
“Actovegin” on concentration of oxyproline and tyrosi-
ne in cartilage regenerate, according to the level of
those the content of collagen and non-collagen cartilage
proteins [6, 10, 11], being the criteria of the activity of
fibroblasts and chondrocytes in the traumatized
cartilage may be examined [4, 12].
Fig. 2 demonstrates that the content of tyrosine in
cartilage regenerate of the animals from the groups
injected with CBF and “Actovegin” was twice higher
if compared with those non-treated. In case of applying
the CBF and “Actovegin” tyrosine level to the 21st
day of trauma initiation was lower in 1.9 times, than in
the group of healthy animals. Oxyproline content in
cartilage regenerate after application of CBF is two
times higher if compared with the group of non-treated
animals, meanwhile after injection of the preparation
to compare no significant changes versus non-treated
animals were found. It has been established that oxy-
proline content in cartilage regenerate after application
of CBF is 1.2 times less than in the group of healthy
animals. It is evident that CBF strongly stimulates the
synthesis of oxyproline in a damaged cartilage tissue.
As well as during studying the proteoglycan compo-
367 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
людения. Достоверных отличий влияния ФКК и
“Актовегина” на двигательную активность крыс
не выявлено. У животных, не получавших лечения,
двигательная активность не восстанавливалась
даже к 28-м суткам.
Выводы
Установлено, что ФКК и “Актовегин” в эквива-
лентных дозах стимулируют накопление основных
компонентов матрикса в регенерате хряща (гексо-
замина, гексуроновых кислот, гиалуроновой
кислоты, гепарина и хондроитинсульфатов), а также
важнейших аминокислот (оксипролина и тирозина),
отражающих содержание коллагеновых и неколла-
геновых элементов хряща. Это позволяет сделать
заключение о положительном влиянии обоих препа-
ратов на репаративную регенерацию хряща. Полу-
ченные экспериментальные данные подтверждены
рентгенологическим исследованием хряща и ре-
зультатами функциональной диагностики конечнос-
ти подопытного животного. При сопоставлении
ФКК и “Актовегина” выявлено, что эффективность
ФКК практически аналогична действию “Актове-
гина” в эквивалентных дозах.
Литература
Гацура В.В. Методы первичного фармакологического
исследования биологической активности.– М.: Медицина,
1974.– 143 с.
Гулевский О.К., Грищенко В.І., Моісєєва Н.М. Властивості
і перспективи викорастання кордової крові в клінічній
практиці // Укр. журн. гематології та трансфузіології.– 2005,
№4.– С. 5–14.
1.
2.
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
7 14 21 28
* *
*
*
*
*
* * *
Рис. 3. Динамика двигательной активности крыс: –
норма; – контроль; – “Актовегин”; – ФКК; * –
p < 0,05 по сравнению с контролем.
Fig. 3. Dynamics of rats’ motion activity: – norm; –
control; – “Actovegin”; – CBF; * – p < 0.05 if compared
with the control.
Продолжительность наблюдения, суток
Observation term, days
П
ро
до
лж
ит
ел
ьн
ос
ть
д
ви
га
те
ль
но
й
ак
ти
вн
ос
ти
,
м
ин
M
ot
io
n
ac
tiv
ity
d
ur
at
io
n,
m
in
nents no statistically significant differences were found
in the content of these amino acids in the cartilage of
healthy extremity of experimental animals if compared
with the norm.
Thus the investigation of biochemical indices
demonstrates that intramuscular injection of CBF
significantly stimulates the accumulation of the main
elements of the matrix and connective tissue elements
in cartilage within the whole experimental term. This
explain more rapid recovery rates of the traumatized
cartilage if compared with control.
For elucidation of the efficiency of the performed
treatment the dynamics of motor activity of experi-
mental animals was studied. Fig. 3 shows that injection
of CBF and “Actovegin” stimulates the normalization
of motor activity much more rapid (to the 7th day in
1.7 times and 1.6 times, to the 14th in 1.4 and 1.3 times,
correspondingly, to the 21st and 28th days in 1.2 times)
if compared with the group of non-treated animals.
Significant differences of the effect of CBF and “Acto-
vegin” if compared with the group of non-treated ani-
mals were found even to the 7th observation day.
Statistically significant differences of CBF and “Acto-
vegin” effect on motor activity in rats were not revea-
led. In non-treated animals the motor activity did not
recover even to the 28th day.
Conclusions
It has been established that CBF and “Actovegin”
under equivalent doses stimulate the accumulation of
main components of the matrix in cartilage regenerate
(hexosamine, hexuronic acids, hyaluronic acid, heparin
and chondroitin sulfates), as well as the most important
amino acids (oxyproline and tyrosine), reflecting the
content of collagen and non-collagen cartilage ele-
ments. This enables to conclude about positive effect
of both preparations on cartilage reparative regene-
ration. The experimental findings are confirmed with
X-ray examination of the cartilage and the results of
functional diagnostics of the limbs of experimental
animal. When comparing CBF and “Actovegin” there
was found that the efficiency of CBF is quite similar
to the one of “Actovegin” under equivalent doses.
References
Gatsura V.V. Methods of initial pharmacological study of
biological activity.– Moscow: Meditsina, 1974.– 143 p.
Gulevsky O.K., Grischenko V.I., Moiseeva N.M. Peculiarities
and perspectives of cord blood use in clinical practice//
Ukrainskiy Zhurnal Gematologii ta Transfuziologii.– 2005.–
N4.– P. 5–14.
Malyshkina S.V. Structure-metabolic changes of articular
cartilage after local cryoeffect: Authors’ abstract of thesis
of candidate of biol. sciences.– Kharkov, 1985.– 22 p.
Pavlova V.N., Kop’eva T.N., Slutskiy L.I., Pavlov G.G. Carti-
lage.– Moscow: Meditsina, 1988.– 320 p.
1.
2.
3.
4.
368 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 19, 2009, ¹3
ÏÐÎÁËÅÌÛ
ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ
Ò. 19, 2009, ¹3
Малышкина С.В. Структурно-метаболические изменения
суставного хряща после локального криовоздействия:
Автореф. дис. ... канд. биол. наук.– Харьков, 1985.– 22 с.
Павлова В. Н., Копьева Т. Н., Слуцкий Л. И., Павлов Г. Г.
Хрящ.– М.: Медицина, 1988.– 320 с.
Риггз Б.Л., Мелтон III Л.Дж. Остеопороз.– М.-СПб.:
Издательство БИНОМ, “Невский диалект”, 2000.– 560 с.
Слуцкий Л.И. Биохимия нормальной и патологически
измененной соединительной ткани. – Л.: Медицина, 1969.–
376 с.
Тарасенко В.И. Криовоздействие при артропластике
тазобедренного сустава: Автореф. дис. ... канд. мед.
наук.– Харьков, 1989.– 18 с.
Boas N.P. Method for the determination of hexosamines in
tissues // J. Biol. Chem.– 1953. – Vol. 204, N2.– P. 553–562.
Dische Z. A new specific color reaction of hexuronic acid //
J. Biol. Chem.– 1947.– Vol. 167, N1.– P. 189–198.
Jordan J.M., Helmick C.G., Renner J.B. et al. Prevalence of
knee symptoms and radiographic and symptomatic knee
osteoarthritis in African Americans and Caucasians: The
Johnston County Osteoarthritis Project // J. Rheumatol.–
2007.– Vol. 34, N1.– P. 172–180.
Kongtawelert P., Francis D.L., Brooks P.M., Ghosh P.
Application of an enzyme-linked immunosorbent-inhibition
assay to quantitate the release of KS peptides into fluids of
the rat sub-cutaneous air pouch model and the effects of
chondroprotective drugs on the release process // Rheumatol.
Int.– 1989.– Vol. 9, N2.– P. 77–83.
Stegemann H., Stalder P. Determination of hydroxiproline //
Clin. Chim. Acta.– 1967.– Vol. 18, N2.– P. 267–273.
Поступила 16.08.2009
Рецензент Н.А. Волкова
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
Riggz B.L., Melton L.J. Osteoporosis.– Saint Petersburg:
BINOM, Nevsky dialect, 2000.– 560 p.
Slutsky L.I. Biochemistry of normal and pathologically changed
connective tissue.– Leningrad: Meditsina, 1969.– 376 p.
Tarasenko V.I. Cryoeffect at hip joint arthroplasty: Authors’
abstract of thesis of candidate of med. sciences.– Kharkov,
1989.– 18 p.
Boas N.P. Method for the determination of hexosamines in
tissues // J. Biol. Chem.– 1953. – Vol. 204, N2.– P. 553–562.
Dische Z. A new specific color reaction of hexuronic acid //
J. Biol. Chem.– 1947.– Vol. 167, N1.– P. 189–198.
Jordan J.M., Helmick C.G., Renner J.B. et al. Prevalence of
knee symptoms and radiographic and symptomatic knee
osteoarthritis in African Americans and Caucasians: The
Johnston County Osteoarthritis Project // J. Rheumatol.–
2007.– Vol. 34, N1.– P. 172–180.
Kongtawelert P., Francis D.L., Brooks P.M., Ghosh P.
Application of an enzyme-linked immunosorbent-inhibition
assay to quantitate the release of KS peptides into fluids of
the rat sub-cutaneous air pouch model and the effects of
chondroprotective drugs on the release process // Rheumatol.
Int.– 1989.– Vol. 9, N2.– P. 77–83.
Stegemann H., Stalder P. Determination of hydroxiproline //
Clin. Chim. Acta.– 1967.– Vol. 18, N2.– P. 267–273.
Accepted in16.08.2009
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-30934 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T16:31:42Z |
| publishDate | 2009 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Иванов, Е.Г. 2012-02-18T12:16:49Z 2012-02-18T12:16:49Z 2009 Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) / А.К. Гулевский, В.И. Грищенко, Е.Г. Иванов // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 3. — С. 362-368. — Бібліогр.: 12 назв. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/30934 616.72-018.3:615.361.018.5.013.8 Изучали особенности репаративной регенерации суставного хряща у крыс под влиянием низкомолекулярной фракции
 (до 5 кДа), выделенной из криогемолизата кордовой крови, и препарата сравнения “Актовегина”. Установлены особенности
 биохимического состава хрящевой ткани в условиях эксперимента. Рентгенологически выявлено положительное морфоло-
 гическое изменение состояния хрящевой ткани. Проведенное исследование показало нормализацию двигательной активности крыс к 28 суткам эксперимента. Вивчали особливості репаративної регенерації суглобного хряща у щурів під впливом низькомолекулярної фракції (до 5 кДа), виділеної з кріогемолізату кордової крові, та препарату порівняння “Актовегіну”. Встановлені особливості біохімічного складу хрящьової тканини в умовах експерименту. Рентгенологічно виявлена позитивна морфологічна зміна стану хрящьової тканини. Проведене дослідження показало нормалізацію рухової активності щурів на 28 добу експерименту. There were studied the features of reparative regeneration of articular cartilage in rats under the effect of low molecular fraction
 (below 5 kDa), isolated from cord blood cryohemolysate and the reference substance “Actovegin”. The peculiarities of biochemical
 composition of cartilage tissue under experimental conditions were established. Positive morphological change in cartilage tissue state
 was radiologically shown. The research performed demonstrated the normalisation of locomotor activity in rats to the 28th day of
 research. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) Stimulation of Reparative Regeneration of Articular Cartilage Under the Effect of Cord Blood Low Molecular Fraction (below 5 kDa) Article published earlier |
| spellingShingle | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Иванов, Е.Г. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| title | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) |
| title_alt | Stimulation of Reparative Regeneration of Articular Cartilage Under the Effect of Cord Blood Low Molecular Fraction (below 5 kDa) |
| title_full | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) |
| title_fullStr | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) |
| title_full_unstemmed | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) |
| title_short | Стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кДа) |
| title_sort | стимуляция репаративной регенерации суставного хряща под влиянием низкомолекулярной фракции кордовой крови (до 5 кда) |
| topic | Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| topic_facet | Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/30934 |
| work_keys_str_mv | AT gulevskiiak stimulâciâreparativnoiregeneraciisustavnogohrâŝapodvliâniemnizkomolekulârnoifrakciikordovoikrovido5kda AT griŝenkovi stimulâciâreparativnoiregeneraciisustavnogohrâŝapodvliâniemnizkomolekulârnoifrakciikordovoikrovido5kda AT ivanoveg stimulâciâreparativnoiregeneraciisustavnogohrâŝapodvliâniemnizkomolekulârnoifrakciikordovoikrovido5kda AT gulevskiiak stimulationofreparativeregenerationofarticularcartilageundertheeffectofcordbloodlowmolecularfractionbelow5kda AT griŝenkovi stimulationofreparativeregenerationofarticularcartilageundertheeffectofcordbloodlowmolecularfractionbelow5kda AT ivanoveg stimulationofreparativeregenerationofarticularcartilageundertheeffectofcordbloodlowmolecularfractionbelow5kda |