Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы
В работе показана принципиальная возможность выявления в пунктатах новообразований щитовидной железы детерминант цитокератина N17 и использования его для дифференциальной цитологической диагностики аденом и папиллярных карцином. Для этого фолликулярный эпителий пунктатов исследовали при помощи монок...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Онкологія |
|---|---|
| Datum: | 2000 |
| Hauptverfasser: | , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
2000
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/32783 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы / А.В. Зелинская, Ю.М. Божок // Онкологія. — 2000. — Т. 2, № 1. — С. 56-59. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-32783 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Зелинская, А.В. Божок, Ю.М. 2012-05-25T13:16:34Z 2012-05-25T13:16:34Z 2000 Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы / А.В. Зелинская, Ю.М. Божок // Онкологія. — 2000. — Т. 2, № 1. — С. 56-59. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. 1562-1774,0204-3564 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/32783 В работе показана принципиальная возможность выявления в пунктатах новообразований щитовидной железы детерминант цитокератина N17 и использования его для дифференциальной цитологической диагностики аденом и папиллярных карцином. Для этого фолликулярный эпителий пунктатов исследовали при помощи моноклональных антител Е3 и подсчитывали процентное содержание клеток, реагирующих с ними. Для повышения точности подсчетов и исключения из них неэпителиальных клеток иммуноцитохимические реакции производили после морфологического исследования пунктатов. Различие между аденомами и карциномами в процентном содержании клеток, экспрессирующих цитокератин N17, оказалось статистически достоверным. Показано, что только в пунктатах папиллярных карцином содержание клеток-, связывающих антитела Е3, превышает 1%. Определение цитокератина N17 может быть использовано для дифференциальной диагностики опухолевых процессов, возникающих из фолликулярного эпителия. The possibility of detecting cytokeratin N17 determinants in punctates of the thyroid neoplasms with the aim of differential diagnostics between adenomas and papillary carcinomas has been shown. The follicular epithelium of the punctates has been investigated with the help of E3 monoclonal antybody. The percentage of E3-positive cells has been determined. Cytokeratin N17 was assayed immunocytochemically after the morphological study of the punctates allowing us to ignore nonepitelial cells. The difference in the percentage of E3-positive cells in benign and malignant neoplasms was statistically significant. The percentage of E3-positive cells exceeded 1% only in fine needle aspiration biopsy smears of papillary carcinomas. This criterion can be used in the cases of neoplasms from follicular epithelium without signs of the cyst and thyreoidite. ru Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького Онкологія Оригинальные исследования Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы Immunocytochemical detection of cytokeratin N17 in preoperative cytological diagnostics of human thyroid cancer Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы |
| spellingShingle |
Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы Зелинская, А.В. Божок, Ю.М. Оригинальные исследования |
| title_short |
Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы |
| title_full |
Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы |
| title_fullStr |
Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы |
| title_full_unstemmed |
Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы |
| title_sort |
использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина n17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы |
| author |
Зелинская, А.В. Божок, Ю.М. |
| author_facet |
Зелинская, А.В. Божок, Ю.М. |
| topic |
Оригинальные исследования |
| topic_facet |
Оригинальные исследования |
| publishDate |
2000 |
| language |
Russian |
| container_title |
Онкологія |
| publisher |
Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького |
| format |
Article |
| title_alt |
Immunocytochemical detection of cytokeratin N17 in preoperative cytological diagnostics of human thyroid cancer |
| description |
В работе показана принципиальная возможность выявления в пунктатах новообразований щитовидной железы детерминант цитокератина N17 и использования его для дифференциальной цитологической диагностики аденом и папиллярных карцином. Для этого фолликулярный эпителий пунктатов исследовали при помощи моноклональных антител Е3 и подсчитывали процентное содержание клеток, реагирующих с ними. Для повышения точности подсчетов и исключения из них неэпителиальных клеток иммуноцитохимические реакции производили после морфологического исследования пунктатов. Различие между аденомами и карциномами в процентном содержании клеток, экспрессирующих цитокератин N17, оказалось статистически достоверным. Показано, что только в пунктатах папиллярных карцином содержание клеток-, связывающих антитела Е3, превышает 1%. Определение цитокератина N17 может быть использовано для дифференциальной диагностики опухолевых процессов, возникающих из фолликулярного эпителия.
The possibility of detecting cytokeratin N17 determinants in punctates of the thyroid neoplasms with the aim of differential diagnostics between adenomas and papillary carcinomas has been shown. The follicular epithelium of the punctates has been investigated with the help of E3 monoclonal antybody. The percentage of E3-positive cells has been determined. Cytokeratin N17 was assayed immunocytochemically after the morphological study of the punctates allowing us to ignore nonepitelial cells. The difference in the percentage of E3-positive cells in benign and malignant neoplasms was statistically significant. The percentage of E3-positive cells exceeded 1% only in fine needle aspiration biopsy smears of papillary carcinomas. This criterion can be used in the cases of neoplasms from follicular epithelium without signs of the cyst and thyreoidite.
|
| issn |
1562-1774,0204-3564 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/32783 |
| citation_txt |
Использование иммуноцитохимического выявления детерминант цитокератина N17 в дооперационной цитологической диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы / А.В. Зелинская, Ю.М. Божок // Онкологія. — 2000. — Т. 2, № 1. — С. 56-59. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT zelinskaâav ispolʹzovanieimmunocitohimičeskogovyâvleniâdeterminantcitokeratinan17vdooperacionnoicitologičeskoidiagnostikezlokačestvennyhnovoobrazovaniiŝitovidnoiželezy AT božokûm ispolʹzovanieimmunocitohimičeskogovyâvleniâdeterminantcitokeratinan17vdooperacionnoicitologičeskoidiagnostikezlokačestvennyhnovoobrazovaniiŝitovidnoiželezy AT zelinskaâav immunocytochemicaldetectionofcytokeratinn17inpreoperativecytologicaldiagnosticsofhumanthyroidcancer AT božokûm immunocytochemicaldetectionofcytokeratinn17inpreoperativecytologicaldiagnosticsofhumanthyroidcancer |
| first_indexed |
2025-11-24T16:12:58Z |
| last_indexed |
2025-11-24T16:12:58Z |
| _version_ |
1850484468756774912 |
| fulltext |
Î Ð È Ã È Í À Ë Ü Í Û Å È Ñ Ñ Ë Å Ä Î Â À Í È ß
ÎÍÊÎËÎÃÈß � Ò. 2 � ¹ 1�2 � 200056
ÂÂÅÄÅÍÈÅ
Ñâîåâðåìåííàÿ è òî÷íàÿ äèàãíîñòèêà òèðåî-
èäíûõ íîâîîáðàçîâàíèé â íàñòîÿùåå âðåìÿ ïðè-
îáðåëà îñîáóþ àêòóàëüíîñòü â ñâÿçè ñ ðåçêèì óâå-
ëè÷åíèåì çàáîëåâàåìîñòè ðàêîì ùèòîâèäíîé æå-
ëåçû ïîñëå àâàðèè íà ×åðíîáûëüñêîé ÀÝÑ [1]. Íà
ñåãîäíÿøíèé äåíü íàèáîëåå ýôôåêòèâíûì ìåòî-
äîì äîîïåðàöèîííîé äèàãíîñòèêè êàðöèíîì ùè-
òîâèäíîé æåëåçû ÿâëÿåòñÿ òîíêîèãîëüíàÿ àñïè-
ðàöèîííàÿ ïóíêöèîííàÿ áèîïñèÿ (ÒÀÏÁ) ñ ïî-
ñëåäóþùèì öèòîëîãè÷åñêèì èññëåäîâàíèåì
ïîëó÷åííîãî ìàòåðèàëà [2]. Îäíàêî öèòîëîã, â îò-
ëè÷èå îò ãèñòîëîãà, íå èìååò âîçìîæíîñòè íàáëþ-
äàòü òàêèå ïðèçíàêè çëîêà÷åñòâåííîñòè, êàê èí-
âàçèâíûé ðîñò, ïðîðàñòàíèå êàïñóëû èëè êðîâå-
íîñíûõ ñîñóäîâ. Â ïóíêöèîííîì ìàòåðèàëå
ïðèñóòñòâóþò ëèøü ðàçðîçíåííûå êëåòêè èëè
ôðàãìåíòû ýïèòåëèÿ, ïîýòîìó öèòîëîã äîâîëü-
ñòâóåòñÿ êîñâåííûìè ìîðôîëîãè÷åñêèìè ïðèçíà-
êàìè çëîêà÷åñòâåííîñòè, ÷òî ñíèæàåò òî÷íîñòü
äèàãíîçà. Â ñâÿçè ñ ýòèì íåêîòîðûå àâòîðû
ïðåäëîæèëè èñïîëüçîâàòü öèòîõèìè÷åñêèå è èì-
ìóíîöèòîõèìè÷åñêèå ìàðêåðû ìàëèãíèçàöèè
ôîëëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ. Ñðåäè íèõ ÷àùå âñåãî
óïîìèíàþòñÿ éîäïåðîêñèäàçà, äèïåïòèäèëàìèíî-
ïåïòèäàçà, âûÿâëåíèå àíòèãåíà ÑÀ50 [3�5]. Èñ-
ïîëüçîâàíèå éîäïåðîêñèäàçû â êà÷åñòâå ìàðêåðà
ìàëèãíèçàöèè îñíîâûâàåòñÿ íà çíà÷èòåëüíîì
ñíèæåíèè åå ñîäåðæàíèÿ â ïàïèëëÿðíûõ êàðöè-
íîìàõ ùèòîâèäíîé æåëåçû [3]. Ôåðìåíòàòèâíàÿ
àêòèâíîñòü äèïåïòèäèëàìèíîïåïòèäàçû, íàïðî-
òèâ, ðåçêî âîçðàñòàåò â ýòèõ çëîêà÷åñòâåííûõ íî-
âîîáðàçîâàíèÿõ [4]. Îäíàêî îáà ìàðêåðà èìåþò
ñóùåñòâåííûå íåäîñòàòêè. Âî-ïåðâûõ, îïðåäåëå-
íèå çëîêà÷åñòâåííîñòè îñíîâûâàåòñÿ íà ïîäñ÷åòå
ïðîöåíòà êëåòîê, ñîäåðæàùèõ èëè íå ñîäåðæàùèõ
ñîîòâåòñòâóþùèé ìàðêåð. Â òî æå âðåìÿ òåõíîëî-
ãèÿ âûÿâëåíèÿ ýòèõ ìàðêåðîâ èñêëþ÷àåò ïðåäâà-
ðèòåëüíóþ ìîðôîëîãè÷åñêóþ èäåíòèôèêàöèþ
ó÷èòûâàåìûõ êëåòîê, õîòÿ èçâåñòíî, ÷òî â ïóíê-
òàòàõ íîâîîáðàçîâàíèé ùèòîâèäíîé æåëåçû íå-
ýïèòåëèàëüíûå ýëåìåíòû (íàïðèìåð, ìàêðîôàãè)
ìîãóò ñîñòàâëÿòü äî ïîëîâèíû âñåõ êëåòî÷íûõ
ýëåìåíòîâ. Âî-âòîðûõ, îáà ìàðêåðà îáíàðóæèâà-
þòñÿ è â ðÿäå äîáðîêà÷åñòâåííûõ íîâîîáðàçîâà-
íèé (ïðè èñïîëüçîâàíèè éîäïåðîêñèäàçû 22%
ìèêðîôîëëèêóëÿðíûõ è 50% àòèïè÷íûõ àäåíîì
íå îòëè÷àþòñÿ ïî åå ñîäåðæàíèþ îò ìíîãèõ êàð-
öèíîì [3], à âûñîêàÿ àêòèâíîñòü äèïåïòèäèëàìè-
íîïåïòèäàçû âûÿâëÿåòñÿ ïî êðàéíåé ìåðå â 15%
À.Â. Çåëèíñêàÿ
Þ.Ì. Áîæîê
Èíñòèòóò ýíäîêðèíîëîãèè
è îáìåíà âåùåñòâ
èì. Â.Ï. Êîìèññàðåíêî
ÀÌÍ Óêðàèíû, Êèåâ,
Óêðàèíà
Êëþ÷åâûå ñëîâà: ùèòîâèäíàÿ
æåëåçà, ðàê, öèòîëîãè÷åñêàÿ
äèàãíîñòèêà, öèòîêåðàòèí N17.
ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅ
ÈÌÌÓÍÎÖÈÒÎÕÈÌÈ×ÅÑÊÎÃÎ
ÂÛßÂËÅÍÈß ÄÅÒÅÐÌÈÍÀÍÒ
ÖÈÒÎÊÅÐÀÒÈÍÀ N17
 ÄÎÎÏÅÐÀÖÈÎÍÍÎÉ
ÖÈÒÎËÎÃÈ×ÅÑÊÎÉ ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÅ
ÇËÎÊÀ×ÅÑÒÂÅÍÍÛÕ
ÍÎÂÎÎÁÐÀÇÎÂÀÍÈÉ
ÙÈÒÎÂÈÄÍÎÉ ÆÅËÅÇÛ
Ðåçþìå. Â ðàáîòå ïîêàçàíà ïðèíöèïèàëüíàÿ âîçìîæíîñòü âûÿâëåíèÿ â
ïóíêòàòàõ íîâîîáðàçîâàíèé ùèòîâèäíîé æåëåçû äåòåðìèíàíò öèòîêå-
ðàòèíà N17 è èñïîëüçîâàíèÿ åãî äëÿ äèôôåðåíöèàëüíîé öèòîëîãè÷åñêîé
äèàãíîñòèêè àäåíîì è ïàïèëëÿðíûõ êàðöèíîì. Äëÿ ýòîãî ôîëëèêóëÿðíûé
ýïèòåëèé ïóíêòàòîâ èññëåäîâàëè ïðè ïîìîùè ìîíîêëîíàëüíûõ àíòèòåë
Å3 è ïîäñ÷èòûâàëè ïðîöåíòíîå ñîäåðæàíèå êëåòîê, ðåàãèðóþùèõ ñ íèìè.
Äëÿ ïîâûøåíèÿ òî÷íîñòè ïîäñ÷åòîâ è èñêëþ÷åíèÿ èç íèõ íåýïèòåëèàëü-
íûõ êëåòîê èììóíîöèòîõèìè÷åñêèå ðåàêöèè ïðîèçâîäèëè ïîñëå ìîðôîëî-
ãè÷åñêîãî èññëåäîâàíèÿ ïóíêòàòîâ. Ðàçëè÷èå ìåæäó àäåíîìàìè è êàðöè-
íîìàìè â ïðîöåíòíîì ñîäåðæàíèè êëåòîê, ýêñïðåññèðóþùèõ öèòîêåðà-
òèí N17, îêàçàëîñü ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûì. Ïîêàçàíî, ÷òî òîëüêî
â ïóíêòàòàõ ïàïèëëÿðíûõ êàðöèíîì ñîäåðæàíèå êëåòîê, ñâÿçûâàþùèõ
àíòèòåëà Å3, ïðåâûøàåò 1%. Îïðåäåëåíèå öèòîêåðàòèíà N17 ìîæåò
áûòü èñïîëüçîâàíî äëÿ äèôôåðåíöèàëüíîé äèàãíîñòèêè îïóõîëåâûõ ïðî-
öåññîâ, âîçíèêàþùèõ èç ôîëëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ.
ÎÍÊÎËÎÃÈß � Ò. 2 � ¹ 1�2 � 2000 57
Î Ð È Ã È Í À Ë Ü Í Û Å È Ñ Ñ Ë Å Ä Î Â À Í È ß
àäåíîì [6]). Òå æå íåäîñòàòêè ïðèñóùè è ìåòî-
äàì âûÿâëåíèÿ àíòèãåíà ÑÀ-50.
 ïîñëåäíèå ãîäû îñîáîå âíèìàíèå óäåëÿåòñÿ
èçó÷åíèþ ðàñïðåäåëåíèÿ â òêàíÿõ ùèòîâèäíîé æå-
ëåçû áîëüøîé ãðóïïû áåëêîâ ïðîìåæóòî÷íûõ ôè-
ëàìåíòîâ ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê � öèòîêåðàòèíîâ.
Èõ ñïåêòð ñóùåñòâåííî èçìåíÿåòñÿ â ïðîöåññå äèô-
ôåðåíöèðîâêè è äåäèôôåðåíöèðîâêè [7]. Èìåþò-
ñÿ ñîîáùåíèÿ î âûñîêîì ñîäåðæàíèè öèòîêåðàòè-
íà N19 â áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ (îêîëî 70%) ïðè ïà-
ïèëëÿðíîé êàðöèíîìå, õîòÿ òàêîé æå óðîâåíü
ýêñïðåññèè ýòîãî áåëêà íàáëþäàëñÿ â 9% ñëó÷àåâ ïðè
óçëîâîì çîáå. Ôîëëèêóëÿðíûå àäåíîìû è êàðöèíî-
ìû íåîòëè÷èìû ïî äàííîìó ïîêàçàòåëþ [8].
 ïðåäûäóùåé ðàáîòå ìû èçó÷àëè ðàñïðåäåëå-
íèå öèòîêåðàòèíà N17 íà ãèñòîëîãè÷åñêèõ ñðå-
çàõ ðàçëè÷íûõ äîáðîêà÷åñòâåííûõ è çëîêà÷å-
ñòâåííûõ íîâîîáðàçîâàíèé ùèòîâèäíîé æåëåçû
÷åëîâåêà ñ ïîìîùüþ ìîíîêëîíàëüíûõ àíòèòåë
(ÌÊÀÒ) Å3, ïîëó÷åííûõ C.Ì. Òðîÿíîâñêèì è
ñîàâòîðàìè [9]. Ðàçëè÷èÿ â ïðîöåíòíîì ñîäåðæà-
íèè ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê, ñâÿçûâàþùèõ ÌÊÀÒ
Å3, ìåæäó àäåíîìàìè è êàðöèíîìàìè îêàçàëèñü
ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûìè.  äàííîé ðàáîòå ìû
ïîïûòàëèñü âûÿñíèòü âîçìîæíîñòü âûÿâëåíèÿ
äåòåðìèíàíò öèòîêåðàòèíà N17 íà öèòîëîãè÷åñ-
êèõ ïðåïàðàòàõ ïóíêòàòîâ ùèòîâèäíîé æåëåçû è
ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà â äîîïåðàöèîííîé äèôôåðåí-
öèàëüíîé öèòîëîãè÷åñêîé äèàãíîñòèêå ïàïèëëÿð-
íîé êàðöèíîìû ùèòîâèäíîé æåëåçû.
ÎÁÚÅÊÒ È ÌÅÒÎÄÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
 ðàáîòå èñïîëüçîâàëè ìàòåðèàë, ïîëó÷åííûé
ïðè ïðîâåäåíèè ÒÀÏÁ íîâîîáðàçîâàíèé ùèòîâèä-
íîé æåëåçû ó 61 ïàöèåíòà îáîåãî ïîëà â âîçðàñòå îò
8 äî 72 ëåò. Ïîñëåîïåðàöèîííûé ãèñòîëîãè÷åñêèé
äèàãíîç êàðöèíîìû ùèòîâèäíîé æåëåçû óñòàíîâ-
ëåí ó 41 ïàöèåíòà (ïàïèëëÿðíàÿ êàðöèíîìà � ó 38,
íèçêîäèôôåðåíöèðîâàííûé ðàê � ó 3). Ó îñòàëü-
íûõ 20 ïàöèåíòîâ îáíàðóæåíû äîáðîêà÷åñòâåííûå
íîâîîáðàçîâàíèÿ ùèòîâèäíîé æåëåçû (àäåíîìà �
ó 15, óçëîâîé çîá � ó 5).
Èììóíîöèòîõèìè÷åñêîå âûÿâëåíèå äåòåðìè-
íàíò öèòîêåðàòèíà N17 ïðîâîäèëè íà öèòîëîãè-
÷åñêèõ ïðåïàðàòàõ ïóíêöèîííîãî ìàòåðèàëà, äî
ýòîãî ôèêñèðîâàííûõ ìåòàíîëîì (5 ìèí) è îêðà-
øåííûõ ïî ìåòîäó Ìàé�Ãðþíâàëüä�Ãèìçû
(ÌGG). Òàêîé ïðèåì ïîçâîëÿë ïîëó÷èòü îáúåê-
òèâíîå ïðåäñòàâëåíèå î ñîñòàâå èññëåäóåìîé êëå-
òî÷íîé ïîïóëÿöèè ïåðåä ïðîâåäåíèåì èììóíî-
öèòîõèìè÷åñêèõ ðåàêöèé. Ïîñêîëüêó îêðàñêà ïî
MGG áëîêèðóåò íà ïðåïàðàòå ìíîãèå àíòèãåííûå
äåòåðìèíàíòû, âîññòàíîâëåíèå èõ ðåàêöèîííîé
ñïîñîáíîñòè ïðîâîäèëè ïî îïèñàííîé ðàíåå ìå-
òîäèêå [10]. Äëÿ ýòîãî ïðåïàðàò îáðàáàòûâàëè
0,01% ðàñòâîðîì òðèïñèíà â òå÷åíèå 10 ñ, çàòåì
ïðîìûâàëè â ôîñôàòíî-ñîëåâîì áóôåðå (pH 7,4)
(PBS), ïîñëå ÷åãî ýêñòðàãèðîâàëè êðàñèòåëè 5%
ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû. Àêòèâíîñòü ýíäî-
ãåííîé ïåðîêñèäàçû ïîäàâëÿëè èíêóáàöèåé â 1%
ðàñòâîðå Í2Î2 íà ÐÂS. Öèòîêåðàòèí N17 âûÿâëÿ-
ëè íåïðÿìûì èììóííîïåðîêñèäàçíûì ìåòîäîì ñ
ïîìîùüþ àíòèòåë Anti-Cytokeratin Peptide 17 êëî-
íà Å3 (Sigma, ÑØÀ).  êà÷åñòâå âòîðûõ àíòèòåë
èñïîëüçîâàëè ìå÷åííûå ïåðîêñèäàçîé àíòèòåëà
ïðîòèâ α-ãëîáóëèíîâ ìûøè (Dakopatts, Äàíèÿ) ñ
10% ñûâîðîòêîé êðîâè ÷åëîâåêà ãðóïïû ÀÂ(IV)
äëÿ ïîäàâëåíèÿ íåñïåöèôè÷åñêîãî ñâÿçûâàíèÿ.
ßäðà êëåòîê äîêðàøèâàëè ãåìàòîêñèëèíîì. Íà
îòäåëüíûõ ó÷àñòêàõ òåõ æå ïðåïàðàòîâ îäíîâðå-
ìåííî ñòàâèëè ñîîòâåòñòâóþùèå ïîëîæèòåëüíûå
è îòðèöàòåëüíûå êîíòðîëè, à òàêæå âûÿâëÿëè öè-
òîêåðàòèíû àíòèòåëàìè Anti-Pan Cytokeratin
(Sigma, ÑØÀ) äëÿ èñêëþ÷åíèÿ òåõíîëîãè÷åñêèõ
îøèáîê ïðè îòðèöàòåëüíîé ðåàêöèè ñ ÌÊÀÒ Å3.
 ïîëó÷åííûõ ïðåïàðàòàõ îïðåäåëÿëè ïðîöåíòíîå
ñîäåðæàíèå êëåòîê, ñâÿçûâàþùèõ ÌÊÀÒ Å3, â
ôîëëèêóëÿðíîì ýïèòåëèè îïóõîëè, ïîäñ÷èòûâàÿ
íå ìåíåå 1000 ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê â ìàçêå. Ñòà-
òèñòè÷åñêóþ îáðàáîòêó äàííûõ ïðîèçâîäèëè ïî
íåïàðàìåòðè÷åñêîìó ìåòîäó Êîëìîãîðîâà �
Ñìèðíîâà.
ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ È ÈÕ ÎÁÑÓÆÄÅÍÈÅ
Ïðîâåäåííûå èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî íà
ïðåïàðàòàõ, îáðàáîòàííûõ îïèñàííûì âûøå ìå-
òîäîì, äåòåðìèíàíòû öèòîêåðàòèíà N17 âûÿâëÿ-
ëè â çíà÷èòåëüíîé ÷àñòè ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê
ïóíêòàòîâ áîëüøèíñòâà ïàïèëëÿðíûõ êàðöèíîì
(ðèñ. 1). Ïðè ýòîì ÌÊÀÒ Å3 ãîìîãåííî îêðàøè-
âàëè öèòîïëàçìó ëèáî âûÿâëÿëè â íåé õàðàêòåð-
íûå äëÿ öèòîêåðàòèíîâ âîëîêíèñòûå ñòðóêòóðû.
 ÿäðàõ êëåòîê ðåàêöèÿ íå íàáëþäàëàñü.
Êëåòêè, ðåàãèðóþùèå ñ ÌÊÀÒ Å3, ðàñïîëàãà-
ëèñü íà ïðåïàðàòàõ ïóíêòàòîâ êàðöèíîìû èçîëè-
ðîâàííî èëè áûëè âêëþ÷åíû â ñîñòàâ ýïèòåëè-
àëüíûõ ïëàñòîâ è êîìïëåêñîâ, ÷àùå âñåãî ãðóï-
ïàìè (ðèñ. 2). Â ïðåäåëàõ îäíîãî ïëàñòà èëè
êîìïëåêñà êëåòêè, ðåàãèðóþùèå è íå ðåàãèðóþ-
ùèå ñ ÌÊÀÒ Å3, íå îòëè÷àëèñü ïî ìîðôîëîãè-
÷åñêèì ïðèçíàêàì. Òî æå îòìå÷àëîñü íàìè ðàíåå
íà ãèñòîëîãè÷åñêèõ ñðåçàõ îïóõîëåé [10]. Îäíàêî
Ðèñ. 1. Ïóíêòàò ïàïèëëÿðíîé êàðöèíîìû ùèòîâèä-
íîé æåëåçû. Íåïðÿìàÿ èììóíîïåðîêñèäàçíàÿ ðåàêöèÿ
ñ ÌÊÀÒ Å3. ßäðà êëåòîê äîêðàøåíû ãåìàòîêñèëèíîì.
Îá. 10, îê. 5
Î Ð È Ã È Í À Ë Ü Í Û Å È Ñ Ñ Ë Å Ä Î Â À Í È ß
ÎÍÊÎËÎÃÈß � Ò. 2 � ¹ 1�2 � 200058
â ïóíêòàòàõ êàðöèíîìû ñ âûñîêèì óðîâíåì ýêñ-
ïðåññèè öèòîêåðàòèíà N17 â îáùåé ïîïóëÿöèè
êëåòîê ôîëëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ ìîæíî áûëî
çàìåòèòü íàëè÷èå äâóõ êëåòî÷íûõ òèïîâ (ðèñ. 3).
Êëåòêè 1-ãî òèïà ôîðìèðîâàëè òèïè÷íûå ýïè-
òåëèàëüíûå ïëàñòû, áûëè íåìíîãî óâåëè÷åíû â
ðàçìåðàõ. Óìåðåííî-áàçîôèëüíàÿ öèòîïëàçìà òà-
êèõ êëåòîê íà öèòîëîãè÷åñêèõ ïðåïàðàòàõ ÷àñòî
íå èìåëà ÷åòêèõ ãðàíèö.  êëåòêàõ 1-ãî òèïà öèòî-
êåðàòèí N17 âûÿâëÿëñÿ ðåäêî. Êëåòêè 2-ãî òèïà
áûëè ãîðàçäî êðóïíåå êëåòîê íîðìàëüíîãî ôîë-
ëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ è ðåçêî îòëè÷àëèñü îò íåãî
ìîðôîëîãè÷åñêè.  ìàçêàõ ïóíêöèîííîãî ìàòå-
ðèàëà ýòè êëåòêè ðàñïîëàãàëèñü èçîëèðîâàííî èëè
â âèäå íåïðàâèëüíûõ êîìïëåêñîâ, ÷àñòî èìåëè
îêðóãëóþ ôîðìó è ÷åòêèå êëåòî÷íûå ãðàíèöû.
Öèòîïëàçìà òàêèõ êëåòîê îáëàäàëà âûðàæåííîé
áàçîôèëèåé, êðóïíûå îâàëüíûå ÿäðà ðàñïîëàãà-
ëèñü ýêñöåíòðè÷íî. Çíà÷èòåëüíàÿ ÷àñòü êëåòîê
2-ãî òèïà ýêñïðåññèðîâàëà öèòîêåðàòèí N17.
 ñëó÷àÿõ äèôôóçíî-ñêëåðîçèðóþùåãî ðàêà
êëåòêè, ñîäåðæàùèå äåòåðìèíàíòû öèòîêåðàòè-
íà N17, èìåëè âàêóîëèçèðîâàííóþ öèòîïëàçìó è
ñîñòàâëÿëè áîëüøóþ ÷àñòü õàðàêòåðíûõ äëÿ ïóíê-
òàòîâ ýòîé êàðöèíîìû êëåòî÷íûõ êîìïëåêñîâ,
îêðóæàþùèõ ìåëêèå ñôåðè÷åñêèå êàëüöèôèêàòû,
ëèáî íåáîëüøèå ïñàììîìíûå òåëüöà.
 ïóíêòàòàõ êàðöèíîì, â ýïèòåëèè êîòîðûõ
öèòîêåðàòèí N17 íå áûë îáíàðóæåí, âñå ýïèòåëè-
àëüíûå êëåòêè áûëè ñõîäíû ñ êëåòêàìè 1-ãî òèïà.
Ïðè ïîäñ÷åòàõ ÷èñëà êëåòîê, ýêñïðåññèðóþùèõ
öèòîêåðàòèí N17, âûÿâèëèñü ñóùåñòâåííûå ðàç-
ëè÷èÿ ìåæäó äîáðîêà÷åñòâåííûìè è çëîêà÷åñòâåí-
íûìè íîâîîáðàçîâàíèÿìè (ðèñ. 4). Â ïóíêòàòàõ
àäåíîìàòîçíûõ óçëîâ ùèòîâèäíîé æåëåçû êëåòêè,
ñâÿçûâàþùèå ÌÊÀÒ Å3, îòñóòñòâîâàëè â 17 èç
20 ñëó÷àåâ.  3 ñëó÷àÿõ èõ ñîäåðæàíèå íå ïðåâû-
øàëî 0,25% êëåòîê ôîëëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ. Â
òî æå âðåìÿ â ïóíêòàòàõ çëîêà÷åñòâåííûõ íîâî-
îáðàçîâàíèé êëåòêè, ñîäåðæàùèå äåòåðìèíàíòû
öèòîêåðàòèíà N17, îòñóòñòâîâàëè ëèøü â 4 ñëó÷à-
ÿõ èç 41 íàáëþäåíèÿ.  31 ñëó÷àå èõ ñîäåðæàíèå
ïðåâûøàëî 0,25%, à â 26 � ñîñòàâëÿëî îò 1,5 äî
55% âñåõ ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê. Çíà÷èòåëüíûé
ðàçáðîñ çíà÷åíèé ýòîãî ïîêàçàòåëÿ äëÿ ðàçíûõ ïà-
ïèëëÿðíûõ êàðöèíîì, ïî êðàéíåé ìåðå îò÷àñòè,
îáóñëîâëåí íåðàâíîìåðíûì ðàñïðåäåëåíèåì êëå-
òîê, ðåàãèðóþùèõ ñ ÌÊÀÒ Å3, â ïðåäåëàõ îïóõî-
ëåâîãî óçëà. Òàêîå íåðàâíîìåðíîå ðàñïðåäåëåíèå
áûëî îòìå÷åíî íàìè ïðè èññëåäîâàíèè ãèñòîëî-
ãè÷åñêèõ ñðåçîâ îïóõîëåé ùèòîâèäíîé æåëåçû [10].
 ðåçóëüòàòå ïðîöåíò êëåòîê, ñîäåðæàùèõ äåòåð-
ìèíàíòû öèòîêåðàòèíà N17, â ïóíêòàòàõ ðàçíûõ
ó÷àñòêîâ îïóõîëè ìîæåò êîëåáàòüñÿ â øèðîêèõ
ïðåäåëàõ. Íåñìîòðÿ íà ýòî, íàáëþäàëîñü ñòàòèñ-
òè÷åñêè äîñòîâåðíîå ðàçëè÷èå (p < 0,001) ìåæäó
ïóíêòàòàìè äîáðîêà÷åñòâåííûõ óçëîâ è êàðöèíîì
ùèòîâèäíîé æåëåçû â ïðîöåíòíîì ñîäåðæàíèè
êëåòîê, ðåàãèðóþùèõ ñ àíòèòåëàìè Å3.
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ïîçâîëÿþò ñ îïðåäå-
ëåííîé äîëåé âåðîÿòíîñòè ðàññìàòðèâàòü ýêñïðåñ-
ñèþ äåòåðìèíàíò öèòîêåðàòèíà N17 êàê ìàðêåð
ìàëèãíèçàöèè ôîëëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ, êîòîðûé
ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí â äîîïåðàöèîííîé äèô-
ôåðåíöèàëüíîé äèàãíîñòèêå ïàïèëëÿðíîé êàðöè-
íîìû è äîáðîêà÷åñòâåííûõ óçëîâ ùèòîâèäíîé
æåëåçû. Ïîñêîëüêó â ïóíêòàòàõ àäåíîìàòîçíûõ óç-
Ðèñ. 2. Êëåòêè, ðåàãèðóþùèå ñ ÌÊÀÒ Å3, â êîìïëåê-
ñàõ ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê ïàïèëëÿðíîé êàðöèíîìû
ùèòîâèäíîé æåëåçû. Íåïðÿìàÿ èììóíîïåðîêñèäàçíàÿ
ðåàêöèÿ. ßäðà äîêðàøåíû ãåìàòîêñèëèíîì. Îá. 20, îê. 5
Ðèñ. 3. Êëåòêè 1-ãî (I) è 2-ãî òèïà (II) â ïóíêòàòå êàð-
öèíîìû ñ âûñîêèì óðîâíåì ýêñïðåññèè öèòîêåðàòèíà
N17. Îêðàñêà ïî MGG. Îá. 40, îê. 5
Ðèñ. 4. Ðàñïðåäåëåíèå íîâîîáðàçîâàíèé ïî ïðîöåíòíîìó
ñîäåðæàíèþ êëåòîê, ñâÿçûâàþùèõ ÌÊÀÒ Å3, â ïîïóëÿ-
öèè ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê ïóíêòàòîâ äîáðîêà÷åñòâåííûõ
è çëîêà÷åñòâåííûõ îïóõîëåé ùèòîâèäíîé æåëåçû
Êàðöèíîìû Äîáðîêà÷åñòâåííûå
íîâîîáðàçîâàíèÿ
ÎÍÊÎËÎÃÈß � Ò. 2 � ¹ 1�2 � 2000 59
Î Ð È Ã È Í À Ë Ü Í Û Å È Ñ Ñ Ë Å Ä Î Â À Í È ß
ëîâ êîëè÷åñòâî êëåòîê, ðåàãèðóþùèõ ñ ÌÊÀÒ Å3,
ñîñòàâëÿëî íå áîëåå 0,25%, ìîæíî óêàçàòü ïðåäåë
ïðîöåíòíîãî ñîäåðæàíèÿ òàêèõ êëåòîê, ïðåâûøå-
íèå êîòîðîãî áóäåò ñâèäåòåëüñòâîâàòü î çëîêà÷åñò-
âåííîñòè ïóíêòèðóåìîãî îáðàçîâàíèÿ. Òàêîé ïðå-
äåëüíûé ïðîöåíò æåëàòåëüíî îïðåäåëèòü ñ íåêî-
òîðûì «çàïàñîì», íàïðèìåð ÷åòûðåõêðàòíûì (1%),
âî èçáåæàíèå îøèáîê, ñâÿçàííûõ ñ îòìå÷àâøèìñÿ
âûøå íåðàâíîìåðíûì ðàñïðåäåëåíèåì ðàçëè÷íûõ
êëåòîê â ïðåäåëàõ îïóõîëåâîãî óçëà.
Èñïîëüçîâàíèå ýêñïðåññèè öèòîêåðàòèíà N17
â êà÷åñòâå öèòîëîãè÷åñêîãî êðèòåðèÿ çëîêà÷åñò-
âåííîñòè íåâîçìîæíî äëÿ óçëîâ ñ âûðàæåííîé
êèñòîçíîé äåãåíåðàöèåé, à òàêæå ìàññèâíûìè
èíôèëüòðàòàìè ïðè àóòîèììóííîì òèðåîèäèòå.
 îáîèõ ñëó÷àÿõ ïðè èììóíîãèñòîëîãè÷åñêèõ èñ-
ñëåäîâàíèÿõ ñðåçîâ òàêèõ îáðàçîâàíèé íåðåäêî
íàáëþäàëîñü çíà÷èòåëüíîå ÷èñëî êëåòîê, ðåàãè-
ðóþùèõ ñ ÌÊÀÒ Å3. Ñëåäóåò òàêæå íàïîìíèòü,
÷òî ðàññìàòðèâàåìûé ìàðêåð ìàëèãíèçàöèè êà-
ñàåòñÿ ëèøü íîâîîáðàçîâàíèé èç À-êëåòîê (ôîë-
ëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ) ùèòîâèäíîé æåëåçû.
Íåñìîòðÿ íà óêàçàííûå îãðàíè÷åíèÿ ðåàêöèÿ ñ
ÌÊÀÒ Å3 ìîæåò áûòü ïîëåçíà â ñëó÷àÿõ ïàïèë-
ëÿðíîãî ðàêà, êîòîðûå íå ïîääàþòñÿ öèòîëîãè÷åñ-
êîé äèàãíîñòèêå ïî ìîðôîëîãè÷åñêèì ïðèçíàêàì.
Ðå÷ü èäåò î êàðöèíîìàõ, â êëåòêàõ êîòîðûõ îòñóò-
ñòâóþò âíóòðèÿäåðíûå öèòîïëàçìàòè÷åñêèå âêëþ-
÷åíèÿ � íàèáîëåå ÷åòêèé ìîðôîëîãè÷åñêèé ìàð-
êåð ìàëèãíèçàöèè ôîëëèêóëÿðíîãî ýïèòåëèÿ.
Íàøè èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî â ïóíêòàòàõ òà-
êèõ êàðöèíîì ïðîöåíòíîå ñîäåðæàíèå êëåòîê, ýêñ-
ïðåññèðóþùèõ öèòîêåðàòèí N17, ÷àñòî áûëî î÷åíü
âûñîêèì (îò 7,5 äî 55%), õîòÿ ïðÿìîé çàâèñèìîñ-
òè ìåæäó ñîäåðæàíèåì òàêèõ êëåòîê è êîëè÷åñòâîì
âíóòðèÿäåðíûõ âêëþ÷åíèé íå îáíàðóæåíî. Ñëåäó-
åò îòìåòèòü, ÷òî âûÿâëåíèå öèòîêåðàòèíà N17 ïî
îïèñàííîé âûøå ìåòîäèêå ïðîâîäèòñÿ íà ìàòåðè-
àëå, ïðåäâàðèòåëüíî èññëåäîâàííîì ìîðôîëîãè-
÷åñêè, ÷òî ïîçâîëÿåò èñêëþ÷èòü èç ïîäñ÷åòîâ íå-
ýïèòåëèàëüíûå êëåòêè.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Îë³éíèê ÂÀ, Åïøòåéí ÎÂ, Ðèáàêîâ Ѳ òà ³í. Îñîá-
ëèâîñò³ ä³àãíîñòèêè òà ë³êóâàííÿ ðàêó ùèòîâèäíî¿ çàëîçè
ï³ñëÿ àâà𳿠íà ×îðíîáèëüñüê³é ÀÅÑ. Ìåòîä ðåêîìåíäàö³¿.
Êè¿â,1994. 12 ñ.
2. Rodriguez JM, Parrilla P, Sola J, et al. Comparison
between preoperative cytology and intraoperative frozen-section
biopsy in the diagnosis of thyroid nodules. Br J Surgery 1994;
81: 1151�4.
3. Henry J-F, Denizot A. Thyroperoxidase immunodetection
for the diagnosis of malignancy on fine-needle aspiration of
thyroid nodules. World J Surg 1994; 18: 529�34.
4. Aratake Y, Kotani T, Tamura K, et al. Dipeptidyl
aminopeptidase IV staining of cytologic preparations to dis-
tinguish benign from malignant thyroid diseases. Anat Pathol
1991; 96: 306�10.
5. Vierbuchen M, Schroder S, Uhlenbruck G. CA 50 and
CA 19-9 antigen expression in normal, hyperplastic, and
neoplastic thyroid tissue. Labor Invest 1989; 60: 726�32.
6. Iwabuchi H, Toriya K, Mimura T, et al. Staining for
dipeptidyl aminopeptidase IV activity in nodular thyroid disease.
Acta Cytol 1996; 40: 158�63.
7. De Micco C. Immunohistochemie des carcinomes
thyroidiens. Ann Pathol 1989; 9: 233�48.
8. Raphael SJ, McKeown-Eyssen G, Asa SL. High-
molecular-weight cytokeratin and cytokeratin-19 in the dia-
gnosis of thyroid tumors. Modern Pathol 1994; 7: 296�300.
9. Áîæîê ÞÌ, Çåëèíñêàÿ ÀÂ, Âàñüêî ÂÂ. Êëåòêè, ýê-
ñïðåññèðóþùèå äåòåðìèíàíòû öèòîêåðàòèíà 17, â çëîêà-
÷åñòâåííûõ è äîáðîêà÷åñòâåííûõ íîâîîáðàçîâàíèÿõ ùè-
òîâèäíîé æåëåçû ÷åëîâåêà. Ýêñïåðèì îíêîëîãèÿ 1994; 16:
154�8.
10. Bozok J, Tavokina L, Abramenko I, Belous N.
Immunocytochemical method for the detection of cell�s antigens
after May-Grunvald-Giemsa (MGG) staining. Acta Cytol 1995;
39: 278.
IMMUNOCYTOCHEMICAL DETECTION
OF CYTOKERATIN N17 IN PREOPERATIVE
CYTOLOGICAL DIAGNOSTICS OF HUMAN
THYROID CANCER
A.V. Zelinskaya, Y.M. Bozhok
Summary. The possibility of detecting cytokeratin
N17 determinants in punctates of the thyroid neo-
plasms with the aim of differential diagnostics be-
tween adenomas and papillary carcinomas has been
shown. The follicular epithelium of the punctates has
been investigated with the help of E3 monoclonal
antybody. The percentage of E3-positive cells has
been determined. Cytokeratin N17 was assayed im-
munocytochemically after the morphological study of
the punctates allowing us to ignore nonepitelial cells.
The difference in the percentage of E3-positive cells
in benign and malignant neoplasms was statistically
significant. The percentage of E3-positive cells ex-
ceeded 1% only in fine needle aspiration biopsy
smears of papillary carcinomas. This criterion can
be used in the cases of neoplasms from follicular epi-
thelium without signs of the cyst and thyreoidite.
Key Words: thyroid gland, cancer, cytological
diagnostic, cytokeratin N17.
|