Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина
Вперше за допомогою імунопреципітації з подальшим електрофорезом та Вестерн-блот аналізу було встановлено включення нітротирозину (NO2-Tyr) у α-тубулін клітин суспензійної культури Nicotiana tabacum линії Bright Yellow-2 (BY-2). Крім того, досліджено ефекти донора оксиду азоту нітропрусиду натрію на...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Доповіді НАН України |
|---|---|
| Дата: | 2011 |
| Автори: | , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2011
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/38150 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина / Я.Б. Блюм, Д.И. Литвин, Ю.А. Красиленко, Я.А. Шеремет, А.И. Емец // Доп. НАН України. — 2011. — № 7. — С. 161-166. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859635550327144448 |
|---|---|
| author | Блюм, Я.Б. Литвин, Д.И. Красиленко, Ю.А. Шеремет, Я.А. Емец, А.И. |
| author_facet | Блюм, Я.Б. Литвин, Д.И. Красиленко, Ю.А. Шеремет, Я.А. Емец, А.И. |
| citation_txt | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина / Я.Б. Блюм, Д.И. Литвин, Ю.А. Красиленко, Я.А. Шеремет, А.И. Емец // Доп. НАН України. — 2011. — № 7. — С. 161-166. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Доповіді НАН України |
| description | Вперше за допомогою імунопреципітації з подальшим електрофорезом та Вестерн-блот аналізу було встановлено включення нітротирозину (NO2-Tyr) у α-тубулін клітин суспензійної культури Nicotiana tabacum линії Bright Yellow-2 (BY-2). Крім того, досліджено ефекти донора оксиду азоту нітропрусиду натрію на частоту зустрічальності мітотичних фігур та організацію різних типів побудов мікротрубочок в інтерфазових та мітотичних клітинах ВY-2. Висловлено припущення, що присутність нітротирозильованого α-тубуліну в клітинах рослин вказує на зворотний характер даної посттрансляційної модифікації, яка має регуляторне значення для рослинних клітин.
Nitrotyrosine (NO2-Tyr) incorporation into α-tubulin of Nicotiana tabacum Bright Yellow-2 (BY-2) suspension culture cells is first shown, by using the immunoprecipitation technique with a further electrophoresis and the Western-blot analysis. In addition, the effects of nitric oxide donor sodium nitroprusside on the frequency of mitotic fugures occurrence and the organization of various microtubular arrays in interphase and mitotic BY-2 cells are studied. It is assumed that the presence of nitrotyrosinated α-tubulin in plant cells may indicate the reversibility and a possible regulatory role of this modification in plant cells.
|
| first_indexed | 2025-12-07T13:15:26Z |
| format | Article |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
7 • 2011
БIОХIМIЯ
УДК 576.311.348.7+543.272
© 2011
Академик НАН Украины Я.Б. Блюм, Д.И. Литвин,
Ю.А. Красиленко, Я.А. Шеремет, А.И. Емец
Нитротирозилирование как посттрансляционная
модификация растительного α-тубулина
Вперше за допомогою iмунопреципiтацiї з подальшим електрофорезом та Вестерн-блот
аналiзу було встановлено включення нiтротирозину (NO2-Tyr) у α-тубулiн клiтин сус-
пензiйної культури Nicotiana tabacum линiї Bright Yellow-2 (BY-2). Крiм того, дослiд-
жено ефекти донора оксиду азоту нiтропрусиду натрiю на частоту зустрiчальностi
мiтотичних фiгур та органiзацiю рiзних типiв побудов мiкротрубочок в iнтерфазових
та мiтотичних клiтинах ВY-2. Висловлено припущення, що присутнiсть нiтротиро-
зильованого α-тубулiну в клiтинах рослин вказує на зворотний характер даної пост-
трансляцiйної модифiкацiї, яка має регуляторне значення для рослинних клiтин.
Известно, что процессы роста и развития растений координируются рядом внутриклеточ-
ных сигнальных молекул — вторичных посредников, играющих ключевую роль в моле-
кулярных каскадах, например, ионами кальция, циклическим мононуклеотидфосфатом,
пероксидом водорода, углекислым газом и оксидом азота (NO) [1]. Особый интерес пред-
ставляет изучение механизмов сигналинга NO в виду его физико-химических свойств, ко-
торые объясняют повсеместность его распространения и важное физиологическое значе-
ние в клетках различных представителей филогенетически отдаленных видов. У растений
NO вовлечен в регуляцию процессов роста и развития, а также в формирование ответа на
действие абиотических и биотических факторов окружающей среды [2, 3]. К сожалению,
сведения о путях передачи сигнала от NO в растительной клетке и молекулах-эффекто-
рах, принимающих и преобразовывающих этот сигнал, ограничены. Известно, что одним
из механизмов передачи сигнала от NO являются соответствующие посттрансляционные
модификации белков, в частности нитротирозилирование [4].
Поскольку компоненты цитоскелета, в частности микротрубочки, обеспечивают про-
цессы деления, роста и дифференциации клеток растений, актуальной задачей является
исследование тубулина как основного белка микротрубочек в качестве потенциальной ми-
шени нитротирозилирования. Известно, что в животной клетке α-тубулин является одной
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2011, №7 161
из главных мишеней нитрования, а в условиях in vivo весьма распространено нитротиро-
зилирование актина и α-тубулина [5].
Данные относительно зависимости организации микротрубочек от концентрации NO
в клетках растений получены авторами [6, 7]. Было обнаружено, что кортикальные микро-
трубочки в эпидермальных клетках зоны растяжения корней Аrabidopsis thaliana являются
чувствительными к действию нитропруссида натрия, донора NO, поскольку изменяют свою
исходную поперечную/косую ориентацию на хаотическую или продольную [6]. Непосред-
ственный путь передачи сигнала от NO в растительной клетке, так же как и в животной
клетке, может быть реализован через нитротирозилирование α-тубулина [8]. Соответст-
венно микротрубочки растительных клеток способны выступать downstream-эффекторами
в сигнальных каскадах при участии NO [5–7]. Однако наличие нитротирозилирования рас-
тительного α-тубулина и соответственно функциональная роль этой посттрансляционной
модификации остаются не исследованными.
В связи с этим целью нашего исследования было установление посттрансляционного
нитротирозилирования α-тубулина в клетках суспензионной культуры Nicotiana tabacum
линии Bright Yellow-2 (BY-2) и поиск доказательств его роли в регуляции функциональных
свойств микротрубочек.
Материалы и методы исследования. Cуспензионную культуру клеток, экспрессиру-
ющую репортерный ген gfp-mbd, культивировали в модифицированной жидкой питатель-
ной среде Мурашиге–Скуга, согласно методике [9]. Трехдневную культуру BY-2, находя-
щуюся в экспоненциальной фазе роста, обрабатывали донором NO нитропруссидом натрия
(Sigma, США) в концентрациях 0,2–5 ммоль/л. Образцы отбирали через 15–180 мин, а так-
же через 24 ч после обработки нитропруссидом натрия. В качестве контроля использовали
5 ммоль/л нитропруссид натрия, инактивированный 24-часовой экспозицией в условиях
дневного света [10].
Для биохимического анализа нитротирозилирования тубулина проводили иммунопре-
ципитацию α-тубулина из экспериментальных образцов с последующим фракционирова-
нием преципитированых белков с помощью гель-електрофореза. Затем наличие модифика-
ции проверяли, проводя Вестерн-блоттинг гибридизацию с использованием специфических
мышиных антител к α-тубулину (TU-01), любезно предоставленных доктором П. Драбером
(Институт молекулярной генетики Чешской академии наук, Прага) и кроличьих антител
к нитротирозину (anti-NO2-Tyr) (Upstate, США). Клетки BY-2 лизировали с использова-
нием набора CellLyticTM P Cell Lysis Reagent (Sigma, США), содержащего cмесь ингиби-
торов протеаз (Sigma, США) при концентрации 1 : 100 в соотношении 150 мг клеток на
100 мкл буфера для лизиса. Гомогенизированные в жидком азоте клетки BY-2 центрифу-
гировали (13000 g) в течение 20 мин при температуре +4
◦С с последующим определением
концентрации белка по Бредфорду [11]. Белки разделяли при помощи денатурирующего
электрофореза в 10%-м полиакриламидном геле по Лэммли [12] и проводили электропере-
нос на нитроцеллюлозную мембрану Amersham HybondTM ECLTM (GE Healthcare, США).
Для Вестерн-блота использовали антитела TU-01 концентрацией 2,2 мкг/мл, а к anti-
NO2-Tyr — концентрацией 0,7 мкг/мл. Нитроцеллюлозные мембраны после электроперено-
са отмывали в буфере TBST (10 ммоль/л Tris-Cl, pH 7,5, 150 ммоль/л NaCl, 0,05% Tween-20)
и инкубировали в течение 1 ч в блокирующем буфере (TBST, содержащий 3%-е обезжирен-
ное сухое молоко). Инкубацию с антителами против α-тубулина проводили в течение полу-
суток (ночи) при +4
◦С, согласно методике [13], антитела к нитротирозину использовали,
согласно рекомендации производителя. В качестве вторичных антител брали антимышиные
162 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2011, №7
IgG (Santa Cruz Biotechnology, США) и антикроличьи IgG (Santa Cruz Biotechnology, США),
конъюгированные с пероксидазой хрена, оба в разведении 1 : 3000. Иммунодетекцию прои-
зводили с помощью набора ECL SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate (Thermo
Fisher Scientific Inc., США). Для повторной иммунодетекции проводили отмывание мемб-
ран от первичных и вторичных антител с использованием реагента Restore Western Blot
Stripping Buffer (Thermo Fisher Scientific Inc., США), согласно рекомендациям произво-
дителя.
Иммунопреципитацию α-тубулина из клеток BY-2 проводили, cогласно методике, опи-
санной нами ранее [14] с применением антител TU-16 (IgM), также любезно предоставлен-
ных доктором П. Драбером [15]. Для проведения реакции использовали протеин-L-агарозу
(Thermo Fisher Scientific Inc, США) в расчете 20 мкл на образец, на которой предварительно
иммобилизировали упомянутые антитела. Полученный аффинный носитель инкубировали
в присутствии 1 мг тотального белкового экстракта клеток BY-2 в объеме 1 мл в тече-
ние 3 ч. Для доказательства специфичности реакции использовали следующие контроли:
протеин-L-агароза, инкубированная отдельно с лизатом клеток BY-2; протеин-L-агароза,
инкубированная с лизатом клеток BY-2 и контрольными антителами; протеин-L-агароза,
инкубированная с антителами TU-16 без лизата клеток BY-2.
Изменения прижизненной организации микротрубочек интерфазных и делящихся кле-
ток BY-2 (GFP-MBD), а также подсчет частоты встречаемости митотических фигур на
1000–1500 клеток BY-2 были исследованы с помощью лазерного сканирующего конфокаль-
ного микроскопа LSM 510 META (Carl Zeiss, Германия) по методике, описанной ранее [6].
Ядерную ДНК для подсчета клеток BY-2 визуализировали с помощью DAPI (4,6-диамиди-
но-2-фенилиндола) в концентрации 5 мкг/мл. Все эксперименты проводили с трехкратным
повторением.
Результаты и их обсуждение. В результате Вестерн-блот анализа белков лизата
клеток BY-2 было установлено, что обработка нитропруссидом натрия в концентрациях
200 мкмоль/л, 1 ммоль/л и 5 ммоль/л вызывала лишь незначительные изменения в профи-
ле нитротирозилирования белков, что выражалось в повышении уровня модифицированных
белков с молекулярной массой до 30 кДа (данные не приведены). При этом относительно
высокий уровень нитротирозилирования белков в интактных клетках позволяет говорить
о том, что данная посттрансляционная модификация белков имеет физиологическое зна-
чение.
Для идентификации нитротирозилирования непосредственно растительного α-тубулина
была проведена его иммунопреципитация с использованием специфических антител TU-16
lgM. Для получения доказательств наличия данной модификации в молекуле α-тубулина
Вестерн-блоттинг анализ нитротирозина и α-тубулина в преципитированных образцах про-
водили последовательно с использованием одной и той же нитроцеллюлозной мембраны.
Для этого после детекции нитротирозина с помощью соответствующих антител удаляли
связавшиеся с антигеном первичные и вторичные антитела путем промывания в буфере,
описанного выше, и для повторной гибридизации использовали антитела TU-01 против
α-тубулина. В результате было показано полное совпадение их позиций на электрофоре-
грамме (соответствующих α-тубулину и нитротирозилированному белку) (рис. 1). Таким
образом, можно говорить о присутствии данной посттрансляционной модификации в моле-
куле α-тубулина, изолированного из клеток табака BY-2.
Кроме того, в комплексе с α-тубулином были преципитированы четыре белка с отно-
сительной молекулярной массой, кДа: 22, 28, 36 и 54, также содержащих нитротирозин
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2011, №7 163
Рис. 1. Результаты иммунопреципитации α-тубулина с помощью антител ТU-16, (lg M), связанных с про-
теин-L-агарозой, и Вестерн-блот анализа гибридизации с использованием антител против остатков anti-
NO2-Tyr (Б) и TU-01 lg M (B): A — маркеры молекулярных масс (нитроцеллюлозная мембрана, окрашен-
ная Ponceau S).
Протеин-L-агароза: 1 — инкубированная с лизатом клеток BY-2; 2 — инкубированная с лизатом клеток
BY-2 и негативными антителами; 3 — инкубированная с антителами TU-16; 4, 5 — иммунопреципитация
α-тубулина из лизата клеток BY-2
Рис. 2. Частота встречаемости митотических фигур в клетках ВУ-2 (GFP-MBD) после обработки нитро-
пруссидом натрия в течение 3 ч. Расчеты приведены на 1000 клеток ВУ-2.
Ось ординат: количество клеток, вступивших в митоз; ось абсцисс: концентрации нитропруссида натрия.
иНН — инактивированный нитропруссид натрия в концентрации 5 ммоль/л
в своем составе (см. полосы 4, 5 на рис. 1, Б). Возможно, эти белки являются ассоцииро-
ваными с микротрубочками.
Нами также было обнаружено, что вследствие обработки нитропруссидом натрия в клет-
ках BY-2 уменьшалось общее количество митотических микротрубочек. Результаты наблю-
дений свидетельствуют о дозозависимом уменьшении количества препрофазных лент, ми-
тотических веретен и фрагмопластов по сравнению с контролем (рис. 2). В то же время сле-
дует отметить, что обработка клеток BY-2 инактивированным нитропруссидом натрия не
оказывала существенного влияния на частоту встречаемости митотических фигур по срав-
нению с контролем (см. рис. 2). Уменьшение количества митотических построений под влия-
нием нитропруссида натрия, скорее всего, связано с замедлением вхождения клеток в митоз,
что в свою очередь может быть следствием уменьшения динамичности микротрубочек.
Наряду с описанными изменениями частот встречаемости митотических фигур обработ-
ка нитропруссидом натрия не приводила к существенным нарушениям организации микро-
трубочек в интерфазных и делящихся клетках BY-2. Следовательно, происходило форми-
рование кортикальных сетей, препрофазных лент, митотических веретен и фрагмопластов
(см. д–з на рис. 3), которые практически не отличались от контроля (см. а–г).
164 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2011, №7
Рис. 3. Организация разных типов построений микротрубочек в клетках ВУ-2: а. . . г — контроль; д . . . з —
обработка нитропруссидом натрия в концентрации 5 ммоль/л в течение 3 ч.
Типы построений микротрубочек : а, д — кортикальная сеть; б, е — препрофазная лента; в, ж — митоти-
ческое веретено; г, з — фрагмопласт. М-б 10 мкм
Таким образом, нами впервые установлено, что растительный α-тубулин подвергается
нитротирозилированию, функциональная роль которого связана, скорее всего, с регуляцией
динамичности микротрубочек в клетке.
1. Wilson I.D., Neil S. J., Hancock D.T. Nitric oxide synthesis and signalling in plants // Plant Cell Environ. –
2008. – 31, No 5. – P. 622–631.
2. Besson-Bard A., Pugin A., Wendehenne D. New insights into nitric oxide signalling in plants // Ann. Rev.
Plant. Biol. – 2008. – 59. – P. 21–39.
3. Красиленко Ю.А., Емец А.И., Блюм Я.Б. Функциональная роль оксида азота у растений // Физиол.
растений. – 2010. – 57, № 4. – С. 483–494.
4. Bian K., Ke Y., Kamisaki Y. et al. Proteomic modifications by nitric oxide // J. Pharma. Sci. – 2006. –
101, No 4. – P. 271–279.
5. Блюм Я.Б., Красиленко Ю.А., Ємець А. I. Нiтротирозилювання як регуляторна посттрансляцiйна
модифiкацiя протеїнiв // Укр. бiохiм. журн. – 2009. – № 5. – С. 3–11.
6. Емец А.И., Kрасиленко Ю. A., Шеремет Я. A., Блюм Я.Б. Pеорганизация микротрубочек как ответ
на реализацию сигнальных каскадов NO в растительной клетке // Цитология и генетика. – 2009. –
43, № 2. – С. 73–77.
7. Shi F.-M., Yao L.-L., Pei B.-L. et al. Cortical microtubule as a sensor and target of nitric oxide signal
during the defence responses to Verticillium dahliae toxins in Arabidopsis // Plant Cell Environ. – 2009. –
32, No 4. – P. 428–438.
8. Blume Y.B., Nyporko A., Demchuk O. Nitrotyrosination of plant α-tubulins: potential mechanisms of
influence to cellular processes // BMC Plant Biol. – 2005. – 5. – P. 1186–1189.
9. Hasezawa S., Nagata T. Dynamic organization of plant microtubules at the three distinct transition points
during the cell cycle progression of synchronized tobacco BY – 2 cells // Bot. Acta. – 1991. – 104. –
P. 206–211.
10. Ötvös K., Pasternak T. P., Dudits D. et al. Nitric oxide, a signaling molecule in plant cell reactivation //
BMC Plant Biol. – 2005. – 5, suppl. 1. – P. 527–531.
11. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein
utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Biochem. – 1976. – 72. – P. 248–254.
12. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 //
Nature. – 1970. – 227, No 5259. – P. 680–685.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2011, №7 165
13. Viklický V., Dráber P., Hasek J. et al. Production and characterization of a monoclonal antitubulin anti-
body // Cell Biol. Int. Rep. – 1982. – 6, No 8. – P. 725–731.
14. Blume Y.B., Yemets A., Sulimenko V. et al. Tyrosine phosphorylation of tubulin in plant cells // Planta. –
2008. – 229, No 1. – P. 143–150.
15. Dráberová E., Dráber P. Novel monoclonal antibodies TU-08 and TU-16 specific for tubulin subunits //
Folia biol. (Praha). – 1998. – 44, No 1. – P. 3–6.
Поступило в редакцию 26.01.2011ГУ “Институт пищевой биотехнологии
и геномики НАН Украины”, Киев
Academician of the NAS of Ukraine Ya. B. Blume, D. I. Lytvin, Yu. A. Krasylenko,
Ya. A. Sheremet, A. I. Yemets
Nitrotyrosination as a posttranslational modification of plant α-tubulin
Nitrotyrosine (NO2-Tyr) incorporation into α-tubulin of Nicotiana tabacum Bright Yellow-2 (BY-2)
suspension culture cells is first shown, by using the immunoprecipitation technique with a further
electrophoresis and the Western-blot analysis. In addition, the effects of nitric oxide donor sodium
nitroprusside on the frequency of mitotic fugures occurrence and the organization of various mic-
rotubular arrays in interphase and mitotic BY-2 cells are studied. It is assumed that the presence
of nitrotyrosinated α-tubulin in plant cells may indicate the reversibility and a possible regulatory
role of this modification in plant cells.
166 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2011, №7
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-38150 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 1025-6415 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T13:15:26Z |
| publishDate | 2011 |
| publisher | Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Блюм, Я.Б. Литвин, Д.И. Красиленко, Ю.А. Шеремет, Я.А. Емец, А.И. 2012-10-31T13:51:29Z 2012-10-31T13:51:29Z 2011 Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина / Я.Б. Блюм, Д.И. Литвин, Ю.А. Красиленко, Я.А. Шеремет, А.И. Емец // Доп. НАН України. — 2011. — № 7. — С. 161-166. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/38150 576.311.348.7+543.272 Вперше за допомогою імунопреципітації з подальшим електрофорезом та Вестерн-блот аналізу було встановлено включення нітротирозину (NO2-Tyr) у α-тубулін клітин суспензійної культури Nicotiana tabacum линії Bright Yellow-2 (BY-2). Крім того, досліджено ефекти донора оксиду азоту нітропрусиду натрію на частоту зустрічальності мітотичних фігур та організацію різних типів побудов мікротрубочок в інтерфазових та мітотичних клітинах ВY-2. Висловлено припущення, що присутність нітротирозильованого α-тубуліну в клітинах рослин вказує на зворотний характер даної посттрансляційної модифікації, яка має регуляторне значення для рослинних клітин. Nitrotyrosine (NO2-Tyr) incorporation into α-tubulin of Nicotiana tabacum Bright Yellow-2 (BY-2) suspension culture cells is first shown, by using the immunoprecipitation technique with a further electrophoresis and the Western-blot analysis. In addition, the effects of nitric oxide donor sodium nitroprusside on the frequency of mitotic fugures occurrence and the organization of various microtubular arrays in interphase and mitotic BY-2 cells are studied. It is assumed that the presence of nitrotyrosinated α-tubulin in plant cells may indicate the reversibility and a possible regulatory role of this modification in plant cells. ru Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Доповіді НАН України Біохімія Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина Nitrotyrosination as a posttranslational modification of plant α-tubulin Article published earlier |
| spellingShingle | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина Блюм, Я.Б. Литвин, Д.И. Красиленко, Ю.А. Шеремет, Я.А. Емец, А.И. Біохімія |
| title | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина |
| title_alt | Nitrotyrosination as a posttranslational modification of plant α-tubulin |
| title_full | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина |
| title_fullStr | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина |
| title_full_unstemmed | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина |
| title_short | Нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина |
| title_sort | нитротирозилирование как посттрансляционная модификация растительного α-тубулина |
| topic | Біохімія |
| topic_facet | Біохімія |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/38150 |
| work_keys_str_mv | AT blûmâb nitrotirozilirovaniekakposttranslâcionnaâmodifikaciârastitelʹnogoαtubulina AT litvindi nitrotirozilirovaniekakposttranslâcionnaâmodifikaciârastitelʹnogoαtubulina AT krasilenkoûa nitrotirozilirovaniekakposttranslâcionnaâmodifikaciârastitelʹnogoαtubulina AT šeremetâa nitrotirozilirovaniekakposttranslâcionnaâmodifikaciârastitelʹnogoαtubulina AT emecai nitrotirozilirovaniekakposttranslâcionnaâmodifikaciârastitelʹnogoαtubulina AT blûmâb nitrotyrosinationasaposttranslationalmodificationofplantαtubulin AT litvindi nitrotyrosinationasaposttranslationalmodificationofplantαtubulin AT krasilenkoûa nitrotyrosinationasaposttranslationalmodificationofplantαtubulin AT šeremetâa nitrotyrosinationasaposttranslationalmodificationofplantαtubulin AT emecai nitrotyrosinationasaposttranslationalmodificationofplantαtubulin |