Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV
Розроблено високоефективну технологію одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу бичачої лейкемії з підтвердженими методом імуноферментного аналізу (ІФА) антигенними властивостями. У процесі досліджень відібрано найкращий штамм-реципієнт E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL для інтродукції реком...
Saved in:
| Date: | 2008 |
|---|---|
| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України
2008
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/4063 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV / А. М. Коновалова, Ю. А. Кобозєв, Н. І. Грабченко, Л. О. Ганова // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 1. — С. 100-105. — Бібліогр.: 5 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860264462506786816 |
|---|---|
| author | Коновалова, А.М. Кобозєв, Ю.А. Грабченко, Н.І. Ганова, Л.О. |
| author_facet | Коновалова, А.М. Кобозєв, Ю.А. Грабченко, Н.І. Ганова, Л.О. |
| citation_txt | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV / А. М. Коновалова, Ю. А. Кобозєв, Н. І. Грабченко, Л. О. Ганова // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 1. — С. 100-105. — Бібліогр.: 5 назв. — укр. |
| collection | DSpace DC |
| description | Розроблено високоефективну технологію одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу бичачої лейкемії з підтвердженими методом імуноферментного аналізу (ІФА) антигенними властивостями. У процесі досліджень відібрано найкращий штамм-реципієнт E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL для інтродукції рекомбінантної плазміди, оптимізовано склад живильного середовища для культивування продуцента. Розроблено методику проведення металохелатафінного хроматографічного очищення та рефолдингу рекомбінантного білка. Як критерій для оцінки ефективності кожного етапу застосовували ІФА, за допомогою якого контролювали антигенні характеристики рекомбінантного білка. Встановлено, що вид штамму-продуцента та склад живильного середовища впливають на продуктивність і розподіл рекомбінантного білка у клітині між цитоплазматичною та нерозчинною фракціями. Розроблена технологія дає змогу одержувати препарати білка зі ступенем чистоти 98% та поліпшеними антигенними властивостями, що дозволяє використовувати його для підвищення специфічності та чутливості імуноферментних діагностичних тестсистем для виявлення збудника бичачої лейкемії.
Разработана высокоэффективная технология получения рекомбинантного аналога белка р24 вируса бычьей лейкемии с подтвержденными методом иммуноферментного анализа (ИФА) антигенными свойствами. В процессе исследований выбран наилучший штамм-реципиент E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL для интродукции рекомбинантной плазмиды и оптимизирован состав питательной среды. Разработана методика проведения металлохелатаффинной хроматографической очистки и рефолдинга рекомбинантного белка. В качестве критерия эффективности каждого этапа использовали ИФА, с помощью которого контролировали антигенные характеристики рекомбинантного белка. Установлено, что вид штамма-продуцента и состав питательной среды влияют на продуктивность и распределение рекомбинантного белка между цитоплазматической и нерастворимой фракциями в клетке. Разработанная технология дает возможность получать препараты белка со степенью чистоты 98% и улучшенными антигенными свойствами, что позволяет использовать его для увеличения специфичности и чувствительности иммуноферментных диагностических тест-систем для выявления возбудителя бычьей лейкемии.
Highly effective technology for production of recombinant analogue of p24 protein of bovine leukemia virus with proven antigenic properties using immune-oenzyme was developed. During investigation the best strain E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL for introduction of recombinant plasmid was chosen, the composition of growth media was optimized. The procedure of metal-helateaffinity chromatography and refolding of recombinant protein was developed. The results of immunoenzyme were used as criteria of quality of recombinant protein on each stage of the work. The influence of bacterial host strains and growth media composition on the yield and distribution of recombinant protein between soluble form in cytoplasm and insoluble inclusion bodies was shown. Using this technology it is possible to obtain recombinant protein with 98% purity and improved antigenic properties. This protein can be used to increase specificity and sensitivity of BLV-diagnostic test kits based on results of immunoenzyme.
|
| first_indexed | 2025-12-07T18:59:01Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-4063 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-07T18:59:01Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Коновалова, А.М. Кобозєв, Ю.А. Грабченко, Н.І. Ганова, Л.О. 2009-07-15T11:09:43Z 2009-07-15T11:09:43Z 2008 Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV / А. М. Коновалова, Ю. А. Кобозєв, Н. І. Грабченко, Л. О. Ганова // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 1. — С. 100-105. — Бібліогр.: 5 назв. — укр. https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/4063 616.36:578.891 Розроблено високоефективну технологію одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу бичачої лейкемії з підтвердженими методом імуноферментного аналізу (ІФА) антигенними властивостями. У процесі досліджень відібрано найкращий штамм-реципієнт E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL для інтродукції рекомбінантної плазміди, оптимізовано склад живильного середовища для культивування продуцента. Розроблено методику проведення металохелатафінного хроматографічного очищення та рефолдингу рекомбінантного білка. Як критерій для оцінки ефективності кожного етапу застосовували ІФА, за допомогою якого контролювали антигенні характеристики рекомбінантного білка. Встановлено, що вид штамму-продуцента та склад живильного середовища впливають на продуктивність і розподіл рекомбінантного білка у клітині між цитоплазматичною та нерозчинною фракціями. Розроблена технологія дає змогу одержувати препарати білка зі ступенем чистоти 98% та поліпшеними антигенними властивостями, що дозволяє використовувати його для підвищення специфічності та чутливості імуноферментних діагностичних тестсистем для виявлення збудника бичачої лейкемії. Разработана высокоэффективная технология получения рекомбинантного аналога белка р24 вируса бычьей лейкемии с подтвержденными методом иммуноферментного анализа (ИФА) антигенными свойствами. В процессе исследований выбран наилучший штамм-реципиент E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL для интродукции рекомбинантной плазмиды и оптимизирован состав питательной среды. Разработана методика проведения металлохелатаффинной хроматографической очистки и рефолдинга рекомбинантного белка. В качестве критерия эффективности каждого этапа использовали ИФА, с помощью которого контролировали антигенные характеристики рекомбинантного белка. Установлено, что вид штамма-продуцента и состав питательной среды влияют на продуктивность и распределение рекомбинантного белка между цитоплазматической и нерастворимой фракциями в клетке. Разработанная технология дает возможность получать препараты белка со степенью чистоты 98% и улучшенными антигенными свойствами, что позволяет использовать его для увеличения специфичности и чувствительности иммуноферментных диагностических тест-систем для выявления возбудителя бычьей лейкемии. Highly effective technology for production of recombinant analogue of p24 protein of bovine leukemia virus with proven antigenic properties using immune-oenzyme was developed. During investigation the best strain E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL for introduction of recombinant plasmid was chosen, the composition of growth media was optimized. The procedure of metal-helateaffinity chromatography and refolding of recombinant protein was developed. The results of immunoenzyme were used as criteria of quality of recombinant protein on each stage of the work. The influence of bacterial host strains and growth media composition on the yield and distribution of recombinant protein between soluble form in cytoplasm and insoluble inclusion bodies was shown. Using this technology it is possible to obtain recombinant protein with 98% purity and improved antigenic properties. This protein can be used to increase specificity and sensitivity of BLV-diagnostic test kits based on results of immunoenzyme. uk Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України Експериментальні статті Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV Получение рекомбинантного аналога белка р24 вируса BLV Synthesis of recombinant analogue of p24 protein of BLV virus Article published earlier |
| spellingShingle | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV Коновалова, А.М. Кобозєв, Ю.А. Грабченко, Н.І. Ганова, Л.О. Експериментальні статті |
| title | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV |
| title_alt | Получение рекомбинантного аналога белка р24 вируса BLV Synthesis of recombinant analogue of p24 protein of BLV virus |
| title_full | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV |
| title_fullStr | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV |
| title_full_unstemmed | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV |
| title_short | Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV |
| title_sort | одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу blv |
| topic | Експериментальні статті |
| topic_facet | Експериментальні статті |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/4063 |
| work_keys_str_mv | AT konovalovaam oderžannârekombínantnogoanalogabílkar24vírusublv AT kobozêvûa oderžannârekombínantnogoanalogabílkar24vírusublv AT grabčenkoní oderžannârekombínantnogoanalogabílkar24vírusublv AT ganovalo oderžannârekombínantnogoanalogabílkar24vírusublv AT konovalovaam polučenierekombinantnogoanalogabelkar24virusablv AT kobozêvûa polučenierekombinantnogoanalogabelkar24virusablv AT grabčenkoní polučenierekombinantnogoanalogabelkar24virusablv AT ganovalo polučenierekombinantnogoanalogabelkar24virusablv AT konovalovaam synthesisofrecombinantanalogueofp24proteinofblvvirus AT kobozêvûa synthesisofrecombinantanalogueofp24proteinofblvvirus AT grabčenkoní synthesisofrecombinantanalogueofp24proteinofblvvirus AT ganovalo synthesisofrecombinantanalogueofp24proteinofblvvirus |