Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек

Цель работы – изучение влияния трансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную способность кроликов с половой абстиненцией и гипофункцией яичек per se, а также в результате применения препарата «Ноофен»....

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:Проблемы криобиологии
Date:2009
Main Authors: Грищенко, В.И., Чадаев, В.Е., Волина, В.В., Бацунова, Л.В.
Format: Article
Language:Russian
Published: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2009
Subjects:
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/42571
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек / В.И. Грищенко, В.Е. Чадаев, В.В. Волина, Л.В. Бацунова // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 4. — С. 500-502. — Бібліогр.: 9 назв. — рос., англ.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
_version_ 1859676771117432832
author Грищенко, В.И.
Чадаев, В.Е.
Волина, В.В.
Бацунова, Л.В.
author_facet Грищенко, В.И.
Чадаев, В.Е.
Волина, В.В.
Бацунова, Л.В.
citation_txt Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек / В.И. Грищенко, В.Е. Чадаев, В.В. Волина, Л.В. Бацунова // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 4. — С. 500-502. — Бібліогр.: 9 назв. — рос., англ.
collection DSpace DC
container_title Проблемы криобиологии
description Цель работы – изучение влияния трансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную способность кроликов с половой абстиненцией и гипофункцией яичек per se, а также в результате применения препарата «Ноофен».
first_indexed 2025-11-30T16:22:47Z
format Article
fulltext 500 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, №4 * Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 373-31-19, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта: cryo@online.kharkov.ua * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 3119, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков УДК 57.084.1:591.463.2 В.И. ГРИЩЕНКО, В.Е. ЧАДАЕВ*, В.В. ВОЛИНА, Л.В. БАЦУНОВА Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек UDC 57.084.1:591.463.2 V.I. GRISCHENKO, V.YE. CHADAEV*, V.V. VOLINA, L.V. BATSUNOVA Study of Effect of Cryopreserved Testicular Tissue Allotransplantation on Reproductive Function of Rabbits with Testes Hypofunction Сперматогенный эпителий чрезвычайно чувствителен к повреждающим факторам (интоксикация, авитаминозы, недостаточность питания и др.), в результате действия которых сперматогенез ослабляется или даже прекра- щается, а сперматогенный эпителий атрофируется [1]. Аналогичные деструктивные процессы развиваются после перевязки или перерезки семявыводящих каналов, а также при длительной половой абстиненции [2, 6]. Цель работы – изучение влияния трансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репро- дуктивную способность кроликов с половой абстинен- цией и гипофункцией яичек per se, а также в результате применения препарата «Ноофен». Эксперименты проводили на 20 кроликах-самцах породы Шиншилла 18-месячного возраста массой 3000– 3500 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария при температуре 15–17°С и относительной влажности 55–65%. Во время эксперимента наблюдали за самочувствием и поведением животных [5]. Кроликов разделили на экспериментальные группы (n = 5 в каждой): І – кролики-самцы, к которым регулярно подсаживали самок (норма); ІІ – кролики с гипофунк- цией яичек, содержавшиеся без самок в течение 2-х месяцев (контроль); ІІІ – кролики, которым после 2-х месяцев содержания без самок проводили аллотранс- плантацию криоконсервированной тестикулярной ткани; ІV – кролики, содержавшиеся без самок в течение 2-х месяцев и получавшие после аллотрансплантации криоконсервированной ткани яичек препарат «Ноофен» (“Олайнфарм”, Латвия). Эксперименты проводили в соответствии с «Общими принципами экспериментов на животных», одобрен- ными ІІ Национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2004) и согласованными с положениями «Европейской Конвенции по защите позвоночных животных, исполь- зуемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1985). Материалом для аллотрансплантации криокон- сервированной ткани яичек служили фрагменты тестикулярной ткани от здоровых кроликов-самцов [7]. Срок переживания трансплантируемой ткани увеличи- вали заключением трансплантата в диффузионную Spermatogenic epithelium is very sensitive to damaging factors (intoxication, vitamin deficiency, hyponutrient etc.) as the result of the effect of those the spermatogenesis is weakened or even stopped and spermatogenic epithelium is atrophied [1]. The same destructive processes develop after ligating or cutting of spermoducts as well as under long sexual abstinence [2, 6]. The research aim is to study the effect of transplan- tation of cryopreserved testicular tissue on reproductive ability of rabbits with sexual abstinence and testes hypo- function per se, as well as in the result of application of “Noophen” preparation. The experiments were carried-out in 20 male Chinchilla rabbits of 18 months’ age of 3,000–3,500 g. The animals were maintained under standard vivarium conditions at 15–17°C and relative humidity of 55–65%. During the experiment there were monitored the animals’ health and behavior [5]. The rabbits were divided into experimental groups (n = 5 in each group): 1 – male rabbits which were regularly contacted females (norm); 2 – rabbits with testes hypo- funciton, maintained without females for 2 months (control); 3 – rabbits, which 2 months later the maintenance without females were allotransplanted with cryopreserved testicular tissue; 4 – rabbits maintained without females for 2 months and treated with “Noophen” (OlainFarm, Latvia) after allotransplantation of cryopreserved testes tissue. The experiments were performed in accordance with “General principles of experiments in animals” (Kiev, 2004) and coordinated with the statements of “European convention on protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes” (Strasbourg, 1985). Material for allotransplantation of cryopreserved tissue of testes served the fragments of testicular tissue from healthy male rabbits [7]. The term of survival of the tissue transplanted was increased by placing the graft into diffusive chamber, the role of which was played by amniotic membrane (semi-permeable membrane), which is non- permeable for immune competent cells (recipient’s lymphocytes). The used method significantly weakens the immunological conflict between donor and recipient. The feeding of the transplant placed into diffusive chamber is КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ SHORT COMMUNICATIONS 501 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 19, 2009, №4 implemented osmotically due to diffusion. Transplan-tation of cryopreserved testicular tissue in amniotic membrane significantly does not affect immunological reactions of a recipient [4, 9]. Amniotic membrane was derived from female rabbits within the period of gestating posterity. Cryopreservation of testical tissue fragments was carried-out according to our method [7] after careful bacteriological control of the preparation. After thawing the transplantation material was placed into sterile Petri dishes with nutritive medium 199 adding antibiotics. Testes tissue fragments were placed into amniotic membrane and formed as “a pouch“ for transplantation [3]. The application of this biological membrane enabled the prolonging of functional activity of testicular tissue as a result of the weakening of the effects of rejection and lysis. The formed from amniotic membrane pouch, comprising 14– 18 fragments of testes tissue was sutured with ligature. After corresponding treatment of operation field under local anesthesia with 0.5–2.0% Novocain solution in the area of exterior hip on the skin there was done 2 cm incision and partially either by acute or blunt way the “pouch” was created to plunge the graft. Herewith the graft was not tightly fixed on skin with catgut thread. The edges of wound were clipped with Michel clips. To normalize hypothalamus-hypophysis-testicular system the rabbits during 4 weeks after transplantation of cryopreserved testes tissue received the nootropics “Noo- phen” in a dose of 30 mg a day per 3,500 g of live weight (“Noophen” is registered for clinical application, approved by the Ministry of Health Care of Ukraine dated of 26.11.06 N778, registration certificate UA 37730101). Females were regularly placed to male rabbits of the control group with sexual abstinence in 2 months and those of the 3rd and 4th groups in a month after transplantation of cryopreserved testes tissue. In the animals of the 1st group the posterity appeared in 30 days after mating with female being in the estral state. The posterity comprised 6–9 young rabbits of 40–60g live mass. The rabbits of the 2nd group isolated from females for 2 months and in those on the results of morphological study [6] there were revealed destructive changes of testicles’ spermatogenic epithelium manifesting in the emptiness of convoluted seminiferous tubules, had no posterity. Herewith in the males there was observed an odd sexual behavior. They responded slightly to females, but there were found the signs of erection and ejaculation, however there was no fertilization in females. Reproductive ability of male rabbits of the 3rd and 4th group, those after 2 months’ isolation from females were grafted with cryopreserved testes tissue, completely reco- vered, that proved the possible correction of testes hypo- function. Previous morphological studies [8] confirmed the recovery of spermatogenic epithelium and recovery of spermatogenesis in convoluted seminiferous tubules of the testes of animals of these groups. There was obtained the posterity (4–8 young rabbits of average mass of 40–60g) from the animals of the mentioned groups. Herewith the posterity from the animals of the 4th group which during 4 weeks after transplantation of testes tissue received noorptropics “Noophen” was bigger by 1–2 individuals than in those of the 3rd group (Table). Thus, the method of allotransplantation of cryopreser- ved testicular tissue enables to correct the reduction of камеру, роль которой выполняла амниотическая обо- лочка, являющаяся полупроницаемой мембраной, кото- рая непроницаема для иммунокомпетентных клеток (лимфоцитов реципиента). Этот метод значительно ос- лабляет иммунологический конфликт между донором и реципиентом. Питание трансплантата, помещенного в диффузионную камеру, осуществляется осмотически за счет диффузии. Трансплантация криоконсервированной тестикулярной ткани в амниотической оболочке сущест- венно не влияет на иммунологические реакции реци- пиента [4, 9]. Амниотическую оболочку забирали у самок кроли- ков в период вынашивания потомства. Криоконсерви- рование фрагментов тестикулярной ткани проводили по разработанному нами методу [7] после тщательного бактериологического контроля препаратов. После деконсервирования трансплантационный материал помещали в стерильные чашки Петри с питательной средой 199 с добавлением антибиотиков. Фрагменты ткани яичек помещали в амниотическую оболочку и формировали «мешочек» для транспланта- ции [3]. Применение данной биологической оболочки (мембраны) позволяло пролонгировать функциональ- ную активность тестикулярной ткани, вследствие ослабления эффектов отторжения и лизиса. Сформи- рованный «мешочек» из амниотической оболочки, содержащий 14–18 фрагментов ткани яичек, завязывали кетгутовой лигатурой. После соответствующей обработ- ки операционного поля под местной анестезией 0,5–2,0% раствором новокаина в области наружной стороны бедра производили разрез кожи длиной 2 см и частично острым, частично тупым путем создавали «карман» для погружения трансплантата. При этом трансплантат не- плотно фиксировали кетгутовой нитью к коже. На края кожной раны накладывали скобки Мишеля. Для нормализации гипоталамо-гипофизарно-тести- кулярной системы кролики в течение 4-х недель после трансплантации криоконсервированной ткани яичек получали ноотропный препарат «Ноофен» в дозе 30 мг в сутки на 3500 г живого веса («Ноофен» разрешен к клиническому применению, утвержден МОЗ Украины от 26.11.06 №778, регистрационное свидетельство № UA37730101). К кроликам-самцам контрольной группы с половой абстиненцией через 2 месяца, а к кроликам ІІІ и ІV групп через месяц после произведенной трансплантации криоконсервированной ткани яичек регулярно подсажи- вали самок. У животных І группы потомство появилось через 30 дней после случки с самкой, находящейся в состоянии половой охоты. Потомство состояло из 6–9 крольчат живой массой 40–60 г. Кролики ІІ группы, изолированные от самок в течение 2-х месяцев и у которых по результатам морфо- логического исследования [6] выявлены деструктивные изменения сперматогенного эпителия яичек, выражаю- щиеся в запустевании извитых семенных канальцев, потомства не имели. При этом у самцов наблюдалось не совсем характерное половое поведение. Они вяло реаги- ровали на самок, хотя эрекция и эякуляция наблюдались, однако у самок оплодотворение не произошло. Репродуктивная способность кроликов-самцов ІІІ и ІV групп, которым после 2-месячной изоляции от самок производилась трансплантация криоконсервированной тестикулярной ткани, полностью восстанавливалась, что 502 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 19, 2009, №4 testes functions in rabbits and recovers their reproduc-tive function. The nootropics “Noophen” strengthens the effect received under transplantation. Количество крольчат в пометах кроликов экспериментальных групп (n = 5) Number of young rabbits in broods of experimental groups (n = 5) вокилоркыппурГ - воцмас elamfospuorG stibbar вокилоркикмаС stibbarelameF 1 2 3 4 5 I амроН mroN 6 9 8 7 9 II ьлортноK lortnoC - - - - - III яицатналпснарТ noitatnalpsnarT 5 4 7 5 6 VI +яицатналпснарТ "нефооН" +noitatnalpsnarT nehpooN 6 5 7 7 8 Литература Ендовицкая И.П., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К. Динамика сперматогенеза у кролика Oryctolagus cuniculus // Цито- логия.– 2005.– Т. 47, №1.– С. 44–48. Сперматогенез и его регуляция / Под ред. Л.В. Дани- лова.– М.: Наука, 1983.– 232 с. Чадаев В.Е., Демина Л.Г., Чуб Н.Н. Методика аллотранс- плантации криоконсервированной овариальной ткани // Актуальные вопросы физиологии и патологии репродук- тивной функции женщины: Сб. статей.– Харьков, 1986.– С. 61–63. Чадаев В.Е. Аллотрансплантация криоконсервированной овариальной ткани в амниотической оболочке как метод коррекции при эндокринном бесплодии: Автореф. дис. … канд. мед. наук.– Харьков, 1988.– 23 с. Чадаев В.Е., Добрунова И.В. Изучение влияния срока половой абстиненции на поведенческие реакции у кроли- ков. Первое сообщение // Клінічна та експериментальна патологія.– 2006.– Т. 5, №4.– С. 93–95. Чадаев В.Е., Волина В.В. Изучение влияния срока половой абстиненции на морфофункциональное состоя- ние семенников кроликов. Второе сообщение // Клінічна та експериментальна патологія.– 2007.– Т. 6, №2.– С. 76– 79. Чадаев В.Е., Добрунова И.В., Гольцев К.А. Модельный объект для определения возможности трансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани в терапии человека // Вісник проблем біології і медицини.– 2007.– Вип. 3.– С. 24–27. Чадаев В.Е., Волина В.В. Изучение влияния аллотранс- плантации криоконсервированной тестикулярной ткани на морфофункциональное состояние яичек кроликов // Вісник проблем біології і медицини.– 2008.– Вип. 2.– С. 125–130. Grischenko V.I., Chadaev V.Y., Dyomina L.G., Lobyntse- va G.S. Immune status of recipient organism following allo- transplantation of cryopreserved ovarian tissue in infertility // Am. J. Reprod. Immunol. Microbiol.– 1988.– Vol. 16, N2.– P. 63–64. Поступила 27.10.2009 Рецензент Ф.И. Осташко 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. References Endovitskaya I.P., Zinovyeva N.A., Ernst L.K. Dynamics of spermatogenesis in rabbit Oryctolagus cuniculus // Tsitolo- giya.– 2005.– Vol. 47, N1.– P. 44–48. Spermatogenesis and its regulation / Ed. by L.V. Danilova. – Moscow: Nauka, 1983.– 232 p. Chadaev V.Ye., Demina L.G., Chub N.N. Methods of allo- transplantation of cryopreserved ovarian tissue // Actual tasks of physiology and pathology of female reproductive functions: Collection of papers.– Kharkov, 1986.– P. 61–63. Chadaev V.Ye. Allotransplantation of cryopreserved ovarian tissue in amniotic membrane as the correction method at endocrine infertility: Author’s abstract ot thesis of candidate of med. sciences.– Kharkov, 1988.– 23 p. Chadaev V.Ye., Dobrunova I.V. Study of effect of sexual abstinence term on behavioural reactions in rabbits. First report // Klinichna i Eksperymentalna Patologiya.– 2006.– Vol. 5, N4.– P. 93–95. Chadaev V.Ye., Volina V.V. Study of effect of sexual abstinence term on morphofunctional state of rabbit’s testes. Second report// Klinichna i Eksperymentalna Patologiya. – 2007.– Vol. 6, N2.– P. 76–79. Chadaev V.Ye., Dobrunova I.V., Goltsev K.A. Model object for determination of possible transplantation of cryopreserved testicular tissue in human therapy// Visnyk Problem Biologii i Meditsyny.– 2007.– Issue 3.– P. 24–27. Chadaev V.Ye., Volina V.V. Study of effect of allotransplan- taiton of cryopreserved testicular tissue on morphofuncitonal state of rabbits testes// Visnyk Problem Biologii i Meditsyny.– 2008.– Issue 2.– P. 125–130. Grischenko V.I., Chadaev V.Y., Dyomina L.G., Lobyntse- va G.S. Immune status of recipient organism following allo- transplantation of cryopreserved ovarian tissue in infertility // Am. J. Reprod. Immunol. Microbiol.– 1988.– Vol. 16, N2.– P. 63–64. Accepted in 27.10.2009 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. доказывает возможность коррекции гипофункции яичек. Предыдущими морфологическими исследованиями [8] подтверждались восстановление сперматогенного эпи- телия и возобновление сперматогенеза в извитых семен- ных канальцах яичек животных этих групп. От животных указанных групп после случки с половозрелыми сам- ками было получено потомство (4–8 крольчат со сред- ней массой 40–60 г). При этом потомство от животных ІV группы, которые в течение 4-х недель после трансплантации ткани яичек получали ноотропный препарат «Ноофен», было на 1– 2 особи больше, чем у кроликов ІІІ группы (таблица). Таким образом, метод аллотрансплантации криокон- сервированной тестикулярной ткани позволяет корректи- ровать снижение функции яичек у кроликов и восстанав- ливает их репродуктивную функцию. Ноотропный препарат «Ноофен» усиливает эффект, полученный при трансплантации.
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-42571
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn 0233-7673
language Russian
last_indexed 2025-11-30T16:22:47Z
publishDate 2009
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
record_format dspace
spelling Грищенко, В.И.
Чадаев, В.Е.
Волина, В.В.
Бацунова, Л.В.
2013-03-29T09:47:49Z
2013-03-29T09:47:49Z
2009
Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек / В.И. Грищенко, В.Е. Чадаев, В.В. Волина, Л.В. Бацунова // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 4. — С. 500-502. — Бібліогр.: 9 назв. — рос., англ.
0233-7673
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/42571
57.084.1:591.463.2
Цель работы – изучение влияния трансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную способность кроликов с половой абстиненцией и гипофункцией яичек per se, а также в результате применения препарата «Ноофен».
ru
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
Проблемы криобиологии
Краткие сообщения
Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
Study of Effect of Cryopreserved Testicular Tissue Allotransplantation on Reproductive Function of Rabbits with Testes Hypofunction
Article
published earlier
spellingShingle Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
Грищенко, В.И.
Чадаев, В.Е.
Волина, В.В.
Бацунова, Л.В.
Краткие сообщения
title Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
title_alt Study of Effect of Cryopreserved Testicular Tissue Allotransplantation on Reproductive Function of Rabbits with Testes Hypofunction
title_full Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
title_fullStr Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
title_full_unstemmed Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
title_short Изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
title_sort изучение влияния аллотрансплантации криоконсервированной тестикулярной ткани на репродуктивную функцию кроликов с гипофункцией яичек
topic Краткие сообщения
topic_facet Краткие сообщения
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/42571
work_keys_str_mv AT griŝenkovi izučenievliâniâallotransplantaciikriokonservirovannoitestikulârnoitkaninareproduktivnuûfunkciûkrolikovsgipofunkcieiâiček
AT čadaevve izučenievliâniâallotransplantaciikriokonservirovannoitestikulârnoitkaninareproduktivnuûfunkciûkrolikovsgipofunkcieiâiček
AT volinavv izučenievliâniâallotransplantaciikriokonservirovannoitestikulârnoitkaninareproduktivnuûfunkciûkrolikovsgipofunkcieiâiček
AT bacunovalv izučenievliâniâallotransplantaciikriokonservirovannoitestikulârnoitkaninareproduktivnuûfunkciûkrolikovsgipofunkcieiâiček
AT griŝenkovi studyofeffectofcryopreservedtesticulartissueallotransplantationonreproductivefunctionofrabbitswithtesteshypofunction
AT čadaevve studyofeffectofcryopreservedtesticulartissueallotransplantationonreproductivefunctionofrabbitswithtesteshypofunction
AT volinavv studyofeffectofcryopreservedtesticulartissueallotransplantationonreproductivefunctionofrabbitswithtesteshypofunction
AT bacunovalv studyofeffectofcryopreservedtesticulartissueallotransplantationonreproductivefunctionofrabbitswithtesteshypofunction