Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo
Впервые создана растворимая лекарственная форма ингибитора функции коры надпочечных желез о,п’-ДДД (хлодитана) для внутривенного введения. Культивирование фрагментов адренокортикальной ткани человека в присутствии раствора о,п’-ДДД в концентрации 0,005-5,0 мг/ мл на протяжении 24 час приводило к доз...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Таврический медико-биологический вестник |
|---|---|
| Дата: | 2012 |
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2012
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44419 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo / Я.Г. Бальон, О.В. Сімуров, І.П. Пастер, Л.І. Полякова, О.Г. Резніков, М.Д. Тронько // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 3, ч. 1 (59). — С. 26-30. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-44419 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Бальон, Я.Г. Сімуров, О.В. Пастер, І.П. Полякова, Л.І. Резніков, О.Г. Тронько, М.Д. 2013-06-01T09:45:38Z 2013-06-01T09:45:38Z 2012 Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo / Я.Г. Бальон, О.В. Сімуров, І.П. Пастер, Л.І. Полякова, О.Г. Резніков, М.Д. Тронько // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 3, ч. 1 (59). — С. 26-30. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 2070-8092 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44419 612.45:615.45 Впервые создана растворимая лекарственная форма ингибитора функции коры надпочечных желез о,п’-ДДД (хлодитана) для внутривенного введения. Культивирование фрагментов адренокортикальной ткани человека в присутствии раствора о,п’-ДДД в концентрации 0,005-5,0 мг/ мл на протяжении 24 час приводило к дозозависимому снижению концентрации 11-гидроксикортикостероидов в среде на 11,0-69,8%. При ежедневном внутривенном введении 10 мл данного раствора на протяжении трёх суток уровень 11-гидроксикортикостероидов в плазме крови собак снижался в среднем почти в 3,5 раза, а реакция на стимуляцию синтетическим 1-24- кортикотропином – почти в 3 раза. Сниженный уровень 11-гидроксикортикостероидов в плазме крови наблюдался и через 2 недели после отмены препарата. Гистологический анализ культивированной ткани показал повреждения адренокортикоцитов в зависимости от концентрации о,п’-ДДД. Таким образом, предложенный раствор о,п’-ДДД обладает адренокортиколитической активностью и может быть рекомендован для клинических исследований. A new o,p’-DDD (chloditan) drug formulation as solution for intravessel injection inhibiting adrenal cortex function has been developed. After 24 h cultivation in the presence of 0,005-5,0 mg/ml o,p’-DDD solution, dose-dependent decrease of 11-hydroxycorticosteroid contents in culture medium by 11,0-69,8% was observed. In dogs, 3.5-fold decrease in blood plasma 11-hydroxycorticosteroid level and almost 3-fold decrease in 11-hydroxycorticosteroid response to synthetic 1-24-corticotropin stimulation were found after intravenous injection of 5% o,p’-DDD solution at a volume of 10 ml per day during 3 days. As well a low level of 11-hydroxycorticosteroid was observed in 2 weeks after o,p’-DDD withdrawal. Histological examination shows the loss of adrenal cortex cells in applying o,p’-DDD to tissue culture, the intensity of which was dependent on the applied dose. Proposed o,p’-DDD solution demonstrates adrenal cortex inhibiting effect, and thus might be recommended for clinical trial. uk Кримський науковий центр НАН України і МОН України Таврический медико-биологический вестник Оригинальные статьи Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo Влияние раствора о,п’-ДДД (хлодитана) на морфофункциональное состояние коры надпочечных желез в опытах in vitro и in vivo Influence of o,p’-DDD (chloditan) on morphofunctional status of adrenal cortex in vitro and in vivo Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo |
| spellingShingle |
Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo Бальон, Я.Г. Сімуров, О.В. Пастер, І.П. Полякова, Л.І. Резніков, О.Г. Тронько, М.Д. Оригинальные статьи |
| title_short |
Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo |
| title_full |
Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo |
| title_fullStr |
Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo |
| title_full_unstemmed |
Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo |
| title_sort |
вплив розчину о,п’-ддд (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo |
| author |
Бальон, Я.Г. Сімуров, О.В. Пастер, І.П. Полякова, Л.І. Резніков, О.Г. Тронько, М.Д. |
| author_facet |
Бальон, Я.Г. Сімуров, О.В. Пастер, І.П. Полякова, Л.І. Резніков, О.Г. Тронько, М.Д. |
| topic |
Оригинальные статьи |
| topic_facet |
Оригинальные статьи |
| publishDate |
2012 |
| language |
Ukrainian |
| container_title |
Таврический медико-биологический вестник |
| publisher |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Влияние раствора о,п’-ДДД (хлодитана) на морфофункциональное состояние коры надпочечных желез в опытах in vitro и in vivo Influence of o,p’-DDD (chloditan) on morphofunctional status of adrenal cortex in vitro and in vivo |
| description |
Впервые создана растворимая лекарственная форма ингибитора функции коры надпочечных желез о,п’-ДДД (хлодитана) для внутривенного введения. Культивирование фрагментов адренокортикальной ткани человека в присутствии раствора о,п’-ДДД в концентрации 0,005-5,0 мг/ мл на протяжении 24 час приводило к дозозависимому снижению концентрации 11-гидроксикортикостероидов в среде на 11,0-69,8%. При ежедневном внутривенном введении 10 мл данного раствора на протяжении трёх суток уровень 11-гидроксикортикостероидов в плазме крови собак снижался в среднем почти в 3,5 раза, а реакция на стимуляцию синтетическим 1-24- кортикотропином – почти в 3 раза. Сниженный уровень 11-гидроксикортикостероидов в плазме крови наблюдался и через 2 недели после отмены препарата. Гистологический анализ культивированной ткани показал повреждения адренокортикоцитов в зависимости от концентрации о,п’-ДДД. Таким образом, предложенный раствор о,п’-ДДД обладает адренокортиколитической активностью и может быть рекомендован для клинических исследований.
A new o,p’-DDD (chloditan) drug formulation as solution for intravessel injection inhibiting adrenal cortex function has been developed. After 24 h cultivation in the presence of 0,005-5,0 mg/ml o,p’-DDD solution, dose-dependent decrease of 11-hydroxycorticosteroid contents in culture medium by 11,0-69,8% was observed. In dogs, 3.5-fold decrease in blood plasma 11-hydroxycorticosteroid level and almost 3-fold decrease in 11-hydroxycorticosteroid response to synthetic 1-24-corticotropin stimulation were found after intravenous injection of 5% o,p’-DDD solution at a volume of 10 ml per day during 3 days. As well a low level of 11-hydroxycorticosteroid was observed in 2 weeks after o,p’-DDD withdrawal. Histological examination shows the loss of adrenal cortex cells in applying o,p’-DDD to tissue culture, the intensity of which was dependent on the applied dose. Proposed o,p’-DDD solution demonstrates adrenal cortex inhibiting effect, and thus might be recommended for clinical trial.
|
| issn |
2070-8092 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44419 |
| citation_txt |
Вплив розчину о,п’-ДДД (хлодитану) на морфофункціональний стан кори надниркових залоз в дослідах in vitro та in vivo / Я.Г. Бальон, О.В. Сімуров, І.П. Пастер, Л.І. Полякова, О.Г. Резніков, М.Д. Тронько // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 3, ч. 1 (59). — С. 26-30. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT balʹonâg vplivrozčinuopdddhloditanunamorfofunkcíonalʹniistankorinadnirkovihzalozvdoslídahinvitrotainvivo AT símurovov vplivrozčinuopdddhloditanunamorfofunkcíonalʹniistankorinadnirkovihzalozvdoslídahinvitrotainvivo AT pasteríp vplivrozčinuopdddhloditanunamorfofunkcíonalʹniistankorinadnirkovihzalozvdoslídahinvitrotainvivo AT polâkovalí vplivrozčinuopdddhloditanunamorfofunkcíonalʹniistankorinadnirkovihzalozvdoslídahinvitrotainvivo AT rezníkovog vplivrozčinuopdddhloditanunamorfofunkcíonalʹniistankorinadnirkovihzalozvdoslídahinvitrotainvivo AT tronʹkomd vplivrozčinuopdddhloditanunamorfofunkcíonalʹniistankorinadnirkovihzalozvdoslídahinvitrotainvivo AT balʹonâg vliânierastvoraopdddhloditananamorfofunkcionalʹnoesostoâniekorynadpočečnyhželezvopytahinvitroiinvivo AT símurovov vliânierastvoraopdddhloditananamorfofunkcionalʹnoesostoâniekorynadpočečnyhželezvopytahinvitroiinvivo AT pasteríp vliânierastvoraopdddhloditananamorfofunkcionalʹnoesostoâniekorynadpočečnyhželezvopytahinvitroiinvivo AT polâkovalí vliânierastvoraopdddhloditananamorfofunkcionalʹnoesostoâniekorynadpočečnyhželezvopytahinvitroiinvivo AT rezníkovog vliânierastvoraopdddhloditananamorfofunkcionalʹnoesostoâniekorynadpočečnyhželezvopytahinvitroiinvivo AT tronʹkomd vliânierastvoraopdddhloditananamorfofunkcionalʹnoesostoâniekorynadpočečnyhželezvopytahinvitroiinvivo AT balʹonâg influenceofopdddchloditanonmorphofunctionalstatusofadrenalcortexinvitroandinvivo AT símurovov influenceofopdddchloditanonmorphofunctionalstatusofadrenalcortexinvitroandinvivo AT pasteríp influenceofopdddchloditanonmorphofunctionalstatusofadrenalcortexinvitroandinvivo AT polâkovalí influenceofopdddchloditanonmorphofunctionalstatusofadrenalcortexinvitroandinvivo AT rezníkovog influenceofopdddchloditanonmorphofunctionalstatusofadrenalcortexinvitroandinvivo AT tronʹkomd influenceofopdddchloditanonmorphofunctionalstatusofadrenalcortexinvitroandinvivo |
| first_indexed |
2025-11-25T13:47:57Z |
| last_indexed |
2025-11-25T13:47:57Z |
| _version_ |
1850516048374136832 |
| fulltext |
26
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2012, том 15, № 3, ч. 1 (59)
УДК 612.45:615.45
© Колектив авторів, 2012.
ВПЛИВ РОЗЧИНУ О,П’-ДДД (ХЛОДИТАНУ) НА
МОРФОФУНКЦІОНАЛЬНИЙ СТАН КОРИ НАДНИРКОВИХ ЗАЛОЗ
В ДОСЛІДАХ IN VITRO ТА IN VIVO
Я.Г. Бальон, О.В. Сімуров, І.П. Пастер, Л.І. Полякова, О.Г. Резніков, М.Д. Тронько
ДУ “Інститут ендокринології та обміну речовин імені В.П. Комісаренка НАМН України”, м. Київ.
INFLUENCE OF O,P’-DDD (CHLODITAN) ON MORPHOFUNCTIONAL STATUS OFADRENAL CORTEX IN VITRO
AND IN VIVO
Ya.G. Balyon, A.V. Simurov, I.P. Pasteur, L.I. Polyakova, A.G. Reznikov, M.D. Tronko
SUMMARY
A new o,p’-DDD (chloditan) drug formulation as solution for intravessel injection inhibiting adrenal cortex
function has been developed. After 24 h cultivation in the presence of 0,005-5,0 mg/ml o,p’-DDD solution,
dose-dependent decrease of 11-hydroxycorticosteroid contents in culture medium by 11,0-69,8% was
observed. In dogs, 3.5-fold decrease in blood plasma 11-hydroxycorticosteroid level and almost 3-fold decrease
in 11-hydroxycorticosteroid response to synthetic 1-24-corticotropin stimulation were found after intravenous
injection of 5% o,p’-DDD solution at a volume of 10 ml per day during 3 days. As well a low level of 11-
hydroxycorticosteroid was observed in 2 weeks after o,p’-DDD withdrawal. Histological examination shows
the loss of adrenal cortex cells in applying o,p’-DDD to tissue culture, the intensity of which was dependent on
the applied dose. Proposed o,p’-DDD solution demonstrates adrenal cortex inhibiting effect, and thus might be
recommended for clinical trial.
ВЛИЯНИЕ РАСТВОРА О,П’-ДДД (ХЛОДИТАНА) НА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ КОРЫ
НАДПОЧЕЧНЫХ ЖЕЛЕЗ В ОПЫТАХ IN VITRO И IN VIVO
Я.Г. Бальон, А.В. Симуров, И.П. Пастер, Л.И. Полякова, А.Г. Резников, Н.Д. Тронько
РЕЗЮМЕ
Впервые создана растворимая лекарственная форма ингибитора функции коры надпочечных
желез о,п’-ДДД (хлодитана) для внутривенного введения. Культивирование фрагментов
адренокортикальной ткани человека в присутствии раствора о,п’-ДДД в концентрации 0,005-5,0 мг/
мл на протяжении 24 час приводило к дозозависимому снижению концентрации 11-
гидроксикортикостероидов в среде на 11,0-69,8%. При ежедневном внутривенном введении 10 мл
данного раствора на протяжении трёх суток уровень 11-гидроксикортикостероидов в плазме крови
собак снижался в среднем почти в 3,5 раза, а реакция на стимуляцию синтетическим 1-24-
кортикотропином – почти в 3 раза. Сниженный уровень 11-гидроксикортикостероидов в плазме крови
наблюдался и через 2 недели после отмены препарата. Гистологический анализ культивированной
ткани показал повреждения адренокортикоцитов в зависимости от концентрации о,п’-ДДД. Таким
образом, предложенный раствор о,п’-ДДД обладает адренокортиколитической активностью и может
быть рекомендован для клинических исследований.
Ключові слова: хлодитан, кора надниркових залоз, 11-гідроксикортикостероїди, in vitro, in vivo.
Хвороба Іценка-Кушинга та злоякісні пухлини
кори надниркових залоз належать до хвороб, які
безпосередньо загрожують життю хворого. Важкість
стану хворого пов’язана як із загальною
онкологічною симптоматикою, так і з гормональною
гіперфункцією, яка може самостійно бути причиною
смерті. Тому актуальною залишається проблема
лікування зазначених форм патології як із метою
усунення гіперфункції гормонів, так і для позбавлення
хворого від пухлини та її метастазів.
Доведено клінічну ефективність застосування
інгібіторів функції кори надниркових залоз, які
спричиняють на неї цитотоксичний вплив [5, 12].
Найбільш ефективним до цього часу є орто,параґ-
дихлордифенілдихлоретан (о,п’-ДДД, хлодитан,
мітотан), який застосовують перорально у вигляді
таблеток [6]. Розроблено комбінований
медикаментозно-хірургічний метод лікування даних
захворювань із використанням адреналектомії і
хлодитану [4, 7]. Для досягнення стійкого клінічного
ефекту необхідно застосовувати хлодитан перорально
протягом декількох місяців (максимальна добова доза
8-10 г), причому курси лікування необхідно
повторювати. Ефект лікування даним препаратом
залежить від індивідуальної реактивності хворого, а
також від морфологічного і функціонального стану
кори надниркових залоз. У деяких хворих може
розвиватися резистентність до хлодитану, в цих
випадках без операції не обійтись. Але в більш як у
90 % випадків застосування препарату приводить до
нормалізації функції кори надниркових залоз.
При пероральному використанні високих доз
хлодитану спостерігаються деякі побічні ускладнення
– нудота, блювання, свербіння шкіри, діарея, атаксія,
лейкопенія, гінекомастія та інші [2, 9]. Крім того, слід
зазначити, що хлодитан завдяки ліпофільності при
пероральному застосуванні має невисоку
біодоступність. З метою підвищення терапевтичної
27
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
ефективності хлодитану, зниженню його дозування
та зменшенню побічної дії нами запропонована
розчинна лікарська форма препарату для
внутрішньосудинного введення, яка не має світових
аналогів [10].
Необхідним етапом вивчення специфічної
фармакологічної активності такої форми о,п’-ДДД
було експериментальне дослідження її впливу на
продукування адренокортикальних гормонів –
кортизолу і кортикостерону, що належать до групи
11-гідроксикортикостероїдів (11-ГОКС),
культивованою тканиною кори надниркових залоз
людини та їх вмісту в плазмі крові собак при
внутрішньосудинному введенні препарату. Слід
зазначити, що за параметрами гострої токсичності
розчин о,п’-ДДД для ін’єкцій є малотоксичним [3].
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ
Об’єктом дослідження був стерильний 5 %
розчин о,п’-ДДД (хлодитану) в суміші розчинників:
пропіленгліколь, етанол та N,N-диметилацетамід у
співвідношенні 7:2:1. Усі розчинники
використовуються в ін’єкційних лікарських формах
[11].
Для дослідів in vitro умовно нормальну тканину
кори надниркових залоз людини отримували у
відділенні хірургії ендокринних залоз Інституту під
час проведення операції адреналектомії з приводу
феохромоцитоми або аденоматозної гіперплазії кори
надниркових залоз, промивали декілька разів
стерильним 0,9% розчином натрію хлориду з
антибіотиками (100 Од бензилпеніциліну натрієвої
солі та 100 мкг стрептоміцину сульфату на 1 мл
розчину), очищали від жирової та сполучної тканин,
після чого розрізали на шматочки розміром до 1 мм3
та знову промивали декілька разів вказаним
розчином.
Отриману тканину культивували по три
шматочки у скляних флакончиках з 1 мл середовища
RPMI-1640 (“Sigma”, США), яке містило 10 %
фетальної сироватки теляти (“Sigma”, США) і
антибіотики, при температурі 37 0С. Середовище
культивування замінювали один раз на дві доби.
Протягом 24 або 48 годин частина проб містила також
о,п’-ДДД в кінцевих концентраціях 0,00005; 0,0005;
0,005; 0,05; 0,5 та 5,0 мг/мл. На 2-у добу культивування
адренокортикальну тканину відбирали для
гістологічного дослідження, а на 3-ю, 4-у, 8-у, 12-у,
16-у, 20-у, 24-у і 28-у добу відбирали та заморожували
при температурі -20 0С аліквоти середовища для
наступного визначення рівня 11-ГОКС. Проведено
2 серії експериментів з вивчення функціональної
активності тканини кори надниркових залоз людини в
динаміці тривалого культивування та впливу о,п’-ДДД
на рівень 11-ГОКС в середовищі культивування (в
кожній серії по 3 досліди з групами у дублікатах або
триплікатах).
Досліди in vivo проводили на собаках, тому що
вони, так само, як люди, є найбільш чутливими до
адренокортиколітичної дії хлодитану в порівнянні з
іншими видами ссавців. До того ж брали до уваги,
що кора надниркових залоз собак, так само, як і людей,
окрім альдостерону синтезує переважно кортизол.
Собаки-самці вагою (10,0+0,3) кг знаходилися в
контрольованих умовах віварію при 20-25 0С,
вологості 50-55%, на стандартному харчовому
раціоні. Десять собак були розділені на 2 групи. П’ять
собак першої групи служили контролем, їм
внутрішньовенно вводили 10 мл розчинника о,п’-
ДДД. П’яти піддослідним тваринам вводили 5%-й
розчин о,п’-ДДД. Перед першими
внутрішньовенними ін’єкціями забирали з вени 5 мл
крові для визначення 11-ГОКС і проводили тест на
функціональні резерви кори надниркових залоз
шляхом стимуляції синтетичним 1-24-
кортикотропіном (синактен-депо, «Новартіс»,
Німеччина) внутрішньовенно у дозі, еквівалентній
25 МО гіпофізарного АКТГ. Через 1,5 год забирали
5 мл крові для повторного визначення вмісту 11-ГОКС
і вводили розчин о,п’-ДДД або розчинник. Введення
препарату або розчинника повторювали у наступні
дві доби (усього 3 ін’єкції на курс), одразу після чого
виконували повторний тест з синактеном. Через
2 тижні після закінчення експерименту знов визначали
базальний рівень 11-ГОКС у плазмі крові.
Кількісне визначення рівня 11-ГОКС, тобто
сумарного вмісту кортизолу і кортикостерону, в
аліквотах середовища культивування кори
надниркових залоз людини і в плазмі крові собак
проводили флюориметричним мікрометодом [1] на
спектрофлуориметрі “Hitachi MPF-4” (Японія) з
використанням в якості стандарту кристалічного
кортизолу (“Reanal”, Угорщина). Отримані дані
опрацьовували методом Стьюдента за критерієм t.
До початку дослідження було отримано
позитивне рішення Комісії з біоетики Інституту, а
також інформована згода від кожного пацієнта. Усі
маніпуляції з тваринами проводилися відповідно до
положень “Європейської конвенції про захист
хребетних тварин, які використовуються для
експериментальних та інших наукових цілей”
(Страсбург, 1986 рік) і національних норм з біоетики
(I Національний конгрес з біоетики, Київ, 2001 рік).
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ
Гістологічний аналіз показав, що культивовані
фрагменти надниркової залози людини містили
клітини пучкової та клубочкової зон, а також
фрагменти капсули. При застосуванні розчину
хлодитану в концентрації 0,05 мкг/мл частина клітин
гинула, а в збережених спостерігали значну
відмінність будови від контролю (рис.1). Об’єм
цитоплазми зменшувався, вона забарвлювалась
менш оксифільно, часто знаходили великі вакуолі.
28
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2012, том 15, № 3, ч. 1 (59)
Змінювалась будова ядер – в одних клітинах вони були
набухлі, гіперхромні, в інших було чітко видно
пристінкове розташування хроматину, частина ядер
були пікнотичні. Нерідко спостерігали каріолізис. При
застосуванні хлодитану в концентраціях 0,5, 5,0 і 50
мкг/мл зміни прогресивно наростали, а при
концентрації 0,5 мг/мл у культивованих фрагментах
залишався лише сполучнотканинний каркас та
поодинокі клітини в стані некробіозу.
А Б
В Г
Д Е
Рис. 1. Вплив розчину орто,параґ-дихлордифенілдихлоретану (хлодитану) на стан культури
тканини кори надниркових залоз людини. А– контроль, клубочкова зона; Б – контроль, пучкова зона,
В – 0,05 мкг/мл, пошкодження клубочкової зони; Г– 0,05 мкг/мл, пошкодження пучкової зони; Д – 50
мкг/мл, часткова деструкція кори, Е – 0,5 мг/мл, виражена деструкція кори. Забарвлення
гематоксилін-еозином, Ч400.
29
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
За результатами проведених досліджень,
встановлено наявність гормональної активності
тканини кори надниркових залоз людини в динаміці
тривалого культивування: базальний рівень 11-ГОКС
в культуральному середовищі зазнавав певних
коливань і становив на 4-у, 8-у, 12-у, 16-у, 20-у, 24-у і
28-у добу відповідно (44,5±3,5) мкг/мл, (48,0±7,0) мкг/
мл, (44,5±7,5) мкг/мл, (34,5±6,5) мкг/мл, (42,8±9,2) мкг/
мл, (31,8±3,2) мкг/мл і (48,2±1,2) мкг/мл.
Культивування тканини кори надниркових залоз
людини з о,п’-ДДД призводило до дозозалежного
зниження рівня 11-ГОКС в середовищі: при
концентрації препарату 0,005 мг/мл – на 11,0%, при
0,05 мг/мл – на 39,5%, при 0,5 мг/мл – на 54,3%
(р<0,05) і при 5 мг/мл – на 69,8% (p<0,02).
Раніше було показано, що етанольний розчин
о,п’-ДДД в умовах in vitro гальмує секрецію
кортикостероїдів з кори надниркових залоз собак [13],
щурів і птахів [8] або абортованого плоду людини [15].
Результати даної роботи свідчать про те, що о,п’-
ДДД у складі запропонованого розчину спричинює
у співставимих концентраціях аналогічний ефект в
тканинних культурах кори надниркових залоз
дорослих людей. Таким чином, присутність
використаних органічних розчинників не впливає на
здатність о,п’-ДДД до гальмування секреції
кортикостероїдів in vitro.
Згідно отриманих результатів, триденне
внутрішньовенне введення по 10 мл суміші
розчинників о,п’-ДДД на день не впливає на вміст
11-ГОКС в плазмі крові собак (табл.1). Так само під
впливом розчинників не виявлено достовірних змін
реакції кори надниркових залоз на стимулювання
синактеном. При внутрішньовенному введенні 5%
розчину о,п’-ДДД базальний рівень 11-ГОКС через
три доби знизився майже в 3,5 рази. На тлі введення
синактену відбулося майже трикратне послаблення
реакції кори надниркових залоз, яку оцінювали як за
приростом концентрації 11-ГОКС в плазмі крові
(приріст у контролі – 141,8 нмоль/л, у досліді –
50,2 нмоль/л), так і за їх рівнем, досягнутим після
гормональної стимуляції.
Умови досліду, показник Розчинник о,п'-ДДД
До введення розчинника або о,п΄-ДДД
Базальний рівень 481,8+65,6 414,2+17,3
Через 1,5 год. після введення синактену 654,4+93,1** 556,0+38,6**
Після 3-денного введення розчинника або о,п΄-ДДД
Базальний рівень 465,0+56,3 115,8+7,8#
Через 1,5 год. після введення синактену 712,0+85,5* 166,0+18,5*,#
Через 2 тижні - 269+15,59***
Таблиця 1
Вплив 5 %-го розчину о,п’-ДДД на концентрацію 11-ГОКС у плазмі крові самців собак (нмоль/л, n=5)
Примітка: *** - p<0,001, ** - p<0,01 і * - p<0,02 відносно відповідного базального рівня; # - p<0,001 відносно
відповідного контролю.
Отримані результати цілком узгоджуються з
раніш опублікованими нами даними, що стосуються
впливу 7-30-денного перорального введення
порошку о,п’-ДДД собакам у дозах 50-100 мг/кг маси
тіла [14]. Доза кортикотропіну 25 МО, згідно нашому
багаторічному досвіду, викликає максимальну
стимуляцію біосинтезу і секреції кортикостероїдів у
собак. Отже під впливом розчину о,п’-ДДД
відбувалось не тільки глибоке пригнічення їх базальної
продукції, але й суттєве зменшення функціональних
резервів кори надниркових залоз. Натомість необхідно
підкреслити, що за умови внутрішньовенного
введення хлодитану ефект досягається використанням
у 10-15 разів меншої кількості інгібітору на курс, що
має суттєво послабити загальнотоксичні ефекти о,п’-
ДДД. До того ж вдається уникнути подразнюючого
впливу на слизову оболонку шлунку і кишківника.
Цілком ймовірно, що запропонований розчин буде
ще більш ефективним при його застосуванні у людей
шляхом регіонарної перфузії надниркових залоз, що
дасть змогу ще більш зменшити дозу о,п’-ДДД.
ВИСНОВОК
Таким чином, о,п’-ДДД (хлодитан) у формі
розчину спричинює цитотоксичний ефект на
культивовану кору надниркових залоз людини і
гальмує адренокортикальну функцію як в органній
культурі людини, так і у собак при
внутрішньосудинному введенні, що є визначальним
для подальших клінічних досліджень даної форми
препарату.
ЛІТЕРАТУРА
1. Балашов Ю.Г. Флюориметрический метод
определения кортикостероидов: сравнение с другими
методами // Физиол. журн. СССР. – 1990. – Т. 76, № 2.
– С. 280-283.
2. Бальон Я.Г., Корпачев В.В. Деякі досягнення
у створення лікарських засобів для лікування
ендокринної патології // Ендокринологія. – 1996. – Т. 1,
№ 1. – С. 25-31.
3. Бальон Я.Г., Ховака В.В., Сімуров О.В.
Дослідження гострої токсичності парентеральної
форми о,п’-ДДД (хлодитану) // Фармакол. лік.
30
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2012, том 15, № 3, ч. 1 (59)
токсикол. – 2010. – № 3 (16). – С. 12-16.
4. Кваченюк А.М. Хлодитанотерапія
адренокортикального раку // Лікарська справа. – 2004.
– № 8. – С 64-67.
5. Комиссаренко В.П., Резников А.Г.
Ингибиторы функции коры надпочечных желез. –
Київ: Здоров’я, 1972. – 374 с.
6. Комиссаренко В.П., Резников А.Г.,
Комиссаренко И.В., Бальон Я.Г. Хлодитан // Хим.-
фарм. журн. – 1977. – Т. 11, № 9. – С. 146-149.
7. Комиссаренко И.В., Рыбаков С.И.
Фармакотерапия опухолей коркового вещества
надпочечных желез // Фармакол. вісник. – 2000. – № 1.
– С. 50-53.
8. Кравченко В.И. Влияние о,п’-ДДД на
образование кортикостероидов надпочечниковой
тканью in vitro // Пробл. эндокринол.– 1973. – Т. 19,
№ 5. – С. 76-79.
9. Машковский М.Д. Лекарственные средства
(хлодитан). – Москва: ООО “Новая волна”, 2005. –
1015 с.
10. Патент України № 54523. Бальон Я.Г.,
Резніков О.Г., Тронько М.Д. та ін. // Спосіб одержання
ін’єкційного розчину 1-(орто-хлорфеніл)-1-(пара-
хлорфеніл)-2,2-дихлоретану (хлодитану), який є
інгібітором функції кори надниркових залоз //
10.11.2010, Бюл. № 21.
11. Тронько М.Д., Комісаренко І.В., Бальон Я.Г.
та ін. Інгібітори гормоноутворення в надниркових
залозах та їх застосування у клінічній практиці // Журн.
АМН України. – 2010. – Т. 16, № 2. – С. 271-287.
12. Технология и стандартизация лекарств // Под
ред. Георгиевского В.П. – Харьков: РИРЕГ, 2005. –
779 с.
13. Hart M.M., Straw J.A. Effect of 1-(o-
chlorophenyl)-1-(p-chlorophenyl)-2,2-dichloroethane
on adrenocorticotropic hormone-induced
steroidogenesis in various preparations in vitro of dog
adrenal cortex // Biochem. Pharmacol. – 1971. – Vol. 20,
N 7. – P. 1679-1688.
14. Komissarenko V.P., Reznikov A.G.,
Gordienko V.M., Zak K.P. Effect of o,pґ-DDD on the
morfology and function of adrenal cortex in dogs //
Endocrinol. Exp. – 1968. – Vol. 2, N 1. – P. 21-28.
15. Komissarenko V.P., Reznikov A.G., Turchin I.S.
Cytologic and functional changes in the adrenal cell
culture from a human fetus under the action of о,p’-
DDD. II. Study of corticosteroid production //
Endocrinol. Exp. – 1971. – Vol. 5, N 4. – P. 217-222.
|