Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей
Установлено, что в результате применения препарата “Криоцелл-гемокорд” наблюдается длительный профилактический эффект, который обеспечивает невосприимчивость исследуемых животных к вирусу гриппа в течение 6 месяцев с момента его интраназального введения. Выявлено стимулирующее действие препарата н...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Дата: | 2010 |
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2010
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44466 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей / Е.С. Онасенко, Е.В. Бровко, В.В. Волина, В.Л. Пономарева // Пробл. криобиологии. — 2010. — Т. 20, № 1. — С. 99-105. — Бібліогр.: 8 назв. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-44466 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Волина, В.В. Пономарева, В.Л. 2013-06-02T07:21:05Z 2013-06-02T07:21:05Z 2010 Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей / Е.С. Онасенко, Е.В. Бровко, В.В. Волина, В.Л. Пономарева // Пробл. криобиологии. — 2010. — Т. 20, № 1. — С. 99-105. — Бібліогр.: 8 назв. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44466 615.361.018.5.013.8.281:578.832.1 Установлено, что в результате применения препарата “Криоцелл-гемокорд” наблюдается длительный профилактический эффект, который обеспечивает невосприимчивость исследуемых животных к вирусу гриппа в течение 6 месяцев с момента его интраназального введения. Выявлено стимулирующее действие препарата на иммунокомпетентные органы мышей до и после заражения вирусом гриппа. Профилактическое применение препарата замедляет темпы репликации вируса. Интерес представляет дальнейшее изучение механизма противовирусного действия препарата “Криоцелл-гемокорд”. Встановлено, що при застосуванні препарату «Кріоцелл-гемокорд» спостерігається тривалий профілактичний ефект, який забезпечує несприйнятливість дослідних тварин до вірусу грипу протягом 6 місяців з моменту його інтраназального введення. Виявлена стимулююча дія препарату на імунокомпетентні органи мишей до та після зараження вірусом грипу. Профілактичне застосування препарату уповільнює темпи реплікації вірусу. Важливе подальше вивчення механізму противірусної дії препарату «Кріоцелл-гемокорд». It was established that a long prophylactic effect, which provided immunity of the animals investigated to the influenza virus for 6 months after the intranasal administration of the preparation “Cryocell-haemocord”, was observed. A stimulating effect of the preparation on the mouse immunocompetent organs before and after the influenza virus infection was revealed. A prophylactic administration of the preparation delays the rate of virus replication. A further research on mechanisms of the anti-virus effects of the preparation “Cryocell-haemocord” is of great interest. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей Infection of Animals With the Influenza Virus After a Preliminary Administration of the Preparation “Cryocell-Haemocord”. Report I. Investigation of Functional Activity of Murine Immunocompetent Organs Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей |
| spellingShingle |
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Волина, В.В. Пономарева, В.Л. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| title_short |
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей |
| title_full |
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей |
| title_fullStr |
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей |
| title_full_unstemmed |
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей |
| title_sort |
инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “криоцелл-гемокорд”. сообщение i. изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей |
| author |
Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Волина, В.В. Пономарева, В.Л. |
| author_facet |
Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Волина, В.В. Пономарева, В.Л. |
| topic |
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| topic_facet |
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| publishDate |
2010 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Infection of Animals With the Influenza Virus After a Preliminary Administration of the Preparation “Cryocell-Haemocord”. Report I. Investigation of Functional Activity of Murine Immunocompetent Organs |
| description |
Установлено, что в результате применения препарата “Криоцелл-гемокорд” наблюдается длительный профилактический
эффект, который обеспечивает невосприимчивость исследуемых животных к вирусу гриппа в течение 6 месяцев с момента его
интраназального введения. Выявлено стимулирующее действие препарата на иммунокомпетентные органы мышей до и после
заражения вирусом гриппа. Профилактическое применение препарата замедляет темпы репликации вируса. Интерес
представляет дальнейшее изучение механизма противовирусного действия препарата “Криоцелл-гемокорд”.
Встановлено, що при застосуванні препарату «Кріоцелл-гемокорд» спостерігається тривалий профілактичний ефект, який
забезпечує несприйнятливість дослідних тварин до вірусу грипу протягом 6 місяців з моменту його інтраназального введення.
Виявлена стимулююча дія препарату на імунокомпетентні органи мишей до та після зараження вірусом грипу. Профілактичне
застосування препарату уповільнює темпи реплікації вірусу. Важливе подальше вивчення механізму противірусної дії препарату
«Кріоцелл-гемокорд».
It was established that a long prophylactic effect, which provided immunity of the animals investigated to the influenza virus for
6 months after the intranasal administration of the preparation “Cryocell-haemocord”, was observed. A stimulating effect of the
preparation on the mouse immunocompetent organs before and after the influenza virus infection was revealed. A prophylactic
administration of the preparation delays the rate of virus replication. A further research on mechanisms of the anti-virus effects of the
preparation “Cryocell-haemocord” is of great interest.
|
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44466 |
| citation_txt |
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного введения препарата “Криоцелл-гемокорд”. Сообщение I. Изучение функциональной активности иммунокомпетентных органов мышей / Е.С. Онасенко, Е.В. Бровко, В.В. Волина, В.Л. Пономарева // Пробл. криобиологии. — 2010. — Т. 20, № 1. — С. 99-105. — Бібліогр.: 8 назв. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT onasenkoes inficirovanieživotnyhvirusomgrippaposlepredvaritelʹnogovvedeniâpreparatakriocellgemokordsoobŝenieiizučeniefunkcionalʹnoiaktivnostiimmunokompetentnyhorganovmyšei AT brovkoev inficirovanieživotnyhvirusomgrippaposlepredvaritelʹnogovvedeniâpreparatakriocellgemokordsoobŝenieiizučeniefunkcionalʹnoiaktivnostiimmunokompetentnyhorganovmyšei AT volinavv inficirovanieživotnyhvirusomgrippaposlepredvaritelʹnogovvedeniâpreparatakriocellgemokordsoobŝenieiizučeniefunkcionalʹnoiaktivnostiimmunokompetentnyhorganovmyšei AT ponomarevavl inficirovanieživotnyhvirusomgrippaposlepredvaritelʹnogovvedeniâpreparatakriocellgemokordsoobŝenieiizučeniefunkcionalʹnoiaktivnostiimmunokompetentnyhorganovmyšei AT onasenkoes infectionofanimalswiththeinfluenzavirusafterapreliminaryadministrationofthepreparationcryocellhaemocordreportiinvestigationoffunctionalactivityofmurineimmunocompetentorgans AT brovkoev infectionofanimalswiththeinfluenzavirusafterapreliminaryadministrationofthepreparationcryocellhaemocordreportiinvestigationoffunctionalactivityofmurineimmunocompetentorgans AT volinavv infectionofanimalswiththeinfluenzavirusafterapreliminaryadministrationofthepreparationcryocellhaemocordreportiinvestigationoffunctionalactivityofmurineimmunocompetentorgans AT ponomarevavl infectionofanimalswiththeinfluenzavirusafterapreliminaryadministrationofthepreparationcryocellhaemocordreportiinvestigationoffunctionalactivityofmurineimmunocompetentorgans |
| first_indexed |
2025-11-26T18:27:18Z |
| last_indexed |
2025-11-26T18:27:18Z |
| _version_ |
1850768229602951168 |
| fulltext |
99
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.: (+38
057) 373-31-26, факс: (+38 057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
* To whom correspondence should be addressed: 23,
Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373
3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
УДК 615.361.018.5.013.8.281:578.832.1
Е.С. ОНАСЕНКО*, Е.В. БРОВКО, В.В. ВОЛИНА, В.Л. ПОНОМАРЕВА
Инфицирование животных вирусом гриппа после предварительного
введения препарата “Криоцелл-гемокорд”.
Сообщение I. Изучение функциональной активности
иммунокомпетентных органов мышей
UDC 615.361.018.5.013.8.281:578.832.1
YE.S. ONASENKO*, YE.V. BROVKO, V.V. VOLINA, V.L. PONOMAREVA
Infection of Animals With the Influenza Virus After a Preliminary
Administration of the Preparation “Cryocell-Haemocord”.
Report I. Investigation of Functional Activity
of Murine Immunocompetent Organs
Установлено, что в результате применения препарата “Криоцелл-гемокорд” наблюдается длительный профилактический
эффект, который обеспечивает невосприимчивость исследуемых животных к вирусу гриппа в течение 6 месяцев с момента его
интраназального введения. Выявлено стимулирующее действие препарата на иммунокомпетентные органы мышей до и после
заражения вирусом гриппа. Профилактическое применение препарата замедляет темпы репликации вируса. Интерес
представляет дальнейшее изучение механизма противовирусного действия препарата “Криоцелл-гемокорд”.
Ключевые слова: иммунокомпетентные органы, кордовая кровь, вируснейтрализующее действие.
Встановлено, що при застосуванні препарату «Кріоцелл-гемокорд» спостерігається тривалий профілактичний ефект, який
забезпечує несприйнятливість дослідних тварин до вірусу грипу протягом 6 місяців з моменту його інтраназального введення.
Виявлена стимулююча дія препарату на імунокомпетентні органи мишей до та після зараження вірусом грипу. Профілактичне
застосування препарату уповільнює темпи реплікації вірусу. Важливе подальше вивчення механізму противірусної дії препарату
«Кріоцелл-гемокорд».
Ключові слова: імунокомпетентні органи, кордова кров, віруснейтралізуюча дія.
It was established that a long prophylactic effect, which provided immunity of the animals investigated to the influenza virus for
6 months after the intranasal administration of the preparation “Cryocell-haemocord”, was observed. A stimulating effect of the
preparation on the mouse immunocompetent organs before and after the influenza virus infection was revealed. A prophylactic
administration of the preparation delays the rate of virus replication. A further research on mechanisms of the anti-virus effects of the
preparation “Cryocell-haemocord” is of great interest.
Key words: immunocompetent organs, cord blood, virus-neutralizing activity.
В настоящее время многие аспекты проблемы
профилактики гриппа требуют дальнейшего иссле-
дования вследствие изменчивости генома, анти-
генных и биологических свойств вируса и перио-
дичного возникновения (через 4–8 лет) его новых
родственных видов. Создание неспецифических
средств профилактики гриппа является важнейшей
задачей борьбы с инфекцией гриппа [1].
Установлено, что препарат “Криоцелл-гемо-
корд”, представляющий собой криоконсервирован-
ную суспензию ядросодержащих клеток кордовой
крови человека в аутологичной плазме [8], обла-
дает после предварительного введения способ-
ностью нейтрализовать вирус гриппа А/Виктория
At present time a lot of aspects of the challenge in
influenza prevention need further studying due to the
virus genome mutability, antigen and biological
variability and a periodic emergence (in 4–8 years) of
its new cognitive species. The creation of the influenza
prevention nonspecific agents is among the most vital
tasks of the influenza infection control [1].
It was established that the preparation “Cryocell-
Haemocord”, which is a cryopreserved suspension of
human cord blood nucleated cells in autologous plasma
[8], is able to neutralize the influenza virus A/Victoria
after the preliminary administration and to provide 85–
100% survival of the animals investigated depending
on the term of the influenza virus infection [2, 7].
problems
of cryobiology
Vol. 20, 2010, №1
проблемы
криобиологии
Т. 20, 2010, №1
криомедицина, клиническая
и экспериментальная
трансплантология
cryomedicine, clinical
and experimental
transplantology
100
и обеспечивает выживаемость исследуемых жи-
вотных на 85–100% в зависимости от срока инфи-
цирования вирусом гриппа [2, 7].
Цель работы – изучение противовирусного
действия препарата “Криоцелл-гемокорд” на осно-
ве результатов исследования состояния централь-
ного (тимус) и периферических (лимфатические
узлы, селезенка, кровь) органов иммунологической
защиты, легких у экспериментальных животных,
инфицированных вирусом гриппа в зависимости от
срока предварительного введения препарата.
Материалы и методы
В эксперименте использовали 2-месячных са-
мок мышей линии Вalb/C массой 18–20 г. Иссле-
дования выполняли в соответствии с “Общими прин-
ципами экспериментов на животных”, одобрен-
ными III Национальным конгрессом по биоэтике
(Киев, 2007) и согласованными с положениями
“Европейской Конвенции о защите позвоночных
животных, используемых для экспериментальных
и других научных целей” (Страсбург, 1985). Все
оперативные вмешательства на животных прово-
дили под ингаляционным эфирным наркозом.
В опытную группу О1 входили мыши, которым
был введен препарат “Криоцелл-гемокорд” и кото-
рых через 6 месяцев инфицировали вирусом гриппа
А/Виктория в дозе LD100/10 = 102.Остальных жи-
вотных разделили на контрольные группы (по 10
мышей в каждой): К1 – 8-месячные мыши, инфици-
рованные вирусом гриппа в дозе LD100/10 = 102; К2 –
мыши через 6 месяцев после введения препарата
“Криоцелл-гемокорд”; К3 – 8-месячные интактные
мыши.
Препарат “Криоцелл-гемокорд” и вирус вводи-
ли мышам интраназально в объеме 0,05 мл.
Выживаемость контролировали ежедневно в
течение 10 суток после инфицирования вирусом
гриппа.
Штамм вируса гриппа А/Виктория, предостав-
ленный Ленинградским институтом гриппа РАМН,
прошел 6 пассажей на белых мышах и 2 пассажа
на куриных эмбрионах. Титр гемагглютининов ин-
фицированной аллантоисной жидкости соответст-
вовал 1:512, инфекционный титр – 104 LD50/10.
На 7 и 14-е сутки после инфицирования вирусом
гриппа А/Виктория у мышей опытной группы О1,
на 7-е сутки после инфицирования контрольной
группы К1, а также групп К2 и К3 изымали легкие
и иммунокомпетентные органы для их морфомет-
рического и цитологического анализа (определение
массы органов и концентрации в них клеток). Коли-
чество клеток в 1 мл суспензии, полученной после
их гомогенизации, подсчитывали с использова-
нием камеры Горяева [3].
Наличие специфических антител к вирусу грип-
па А/Виктория в сыворотке крови исследуемых
The aim of the work is investigating the anti-virus
activity of the preparation “Cryocell-Haemocord”
basing on studying the state of the central (thymus)
and peripheral (lymphatic glands, spleen, blood) organs
of immune protection and lungs in the experimental
animals infected with the influenza virus depending on
the term of the preliminary administration of the
preparation.
Materials and methods
2-month mouse females (line Balb/C), in weight of
18–20 g, were used in the experiments. The experi-
ments were carried out according to the “General ethi-
cal principles of experiments in animals”, approved by
the 3rd National Congress on Bioethics (Kiev, 2007)
and coordinated with the statements of “European con-
vention for the protection of vertebrate animals used
for experimental and other scientific purposes” (Stras-
bourg, 1985). All the surgical procedures were perfor-
med in the animals under ether inhalation narcosis.
The experimental group E1 comprised the mice,
which were introduced with the preparation “Cryocell-
Haemocord” and infected with the influenza virus A/
Victoria 6 months later. The virus dose was LD100/10 =
102. The remaining animals were divided into the control
groups (10 mice in each): C1 – 8-month mice infected
with the influenza virus at the dose LD100/10 = 102; C2 –
mice 6 months after the preparation “Cryocell- Haemo-
cord” introduction; C3 – 8-month intact mice.
The preparation “Cryocell-haemocord” and the
virus were introduced to mice intranasally in the volume
of 0.05 ml.
The survival was monitored daily for 10 days after
the influenza virus infection.
The influenza virus strain A/Victoria granted by
Leningrad Institute of Influenza of Russian Academy
of Medical Sciences was passaged 6 times in white
mice and twice in chicken embryos. The hemagglutinin
titer in the infected allantoic fluid was 1:512, the infec-
tious titer was 104LD50/10.
Lungs and immunocompetent organs for their mor-
phometric and cytological assay (estimating the organ
weights and cell concentrations in them) were extrac-
ted on the 7th and 14th days after the influenza virus
strain A/Victoria infection from the mice of the expe-
rimental group E1 and on the 7th day after infection
from the mice of the control groups C1, C2 and C3.
The quantity of cells in 1 ml of the suspension obtained
after homogenizing the organs was counted in Go-
ryaev’s chamber [3].
Occurrence of specific antibodies against the influ-
enza virus A/Victoria in blood serum of the animals
studied was determined by hemagglutination-inhibition
reaction (HAIR) with the preliminary determination
of the virus hemagglutination titer (1HAE) and the vi-
rus effective dose (4HAE) [6]. No antibodies were found
in the sera of the animals from the group C3. Occu-
problems
of cryobiology
Vol. 20, 2010, №1
проблемы
криобиологии
Т. 20, 2010, №1
101
животных определяли по реакции торможения
гемагглютинации (РТГА) с предварительным ус-
тановлением гемагглютинирующего титра (1 ГАЕ)
вируса и его рабочей дозы (4 ГАЕ) [6]. В сыворотке
животных группы К3 данные антитела не выяв-
лены.Наличие вируса в органах животных и его
титр определяли по реакции гемагглютинации
(РГА) [6].
Статистическую обработку полученных дан-
ных осуществляли по методу Стьюдента с учетом
коэффициента Фишера. Достоверность различий
оценивали с помощью t-критерия с уровнем
значимости 5% [4].
Результаты и обсуждение
Выживаемость животных в опытной группе О1
составляла 85%, тогда как в группе К1 погибли все.
Необходимо отметить, что продолжительность
жизни мышей до их гибели в опытной группе О1
увеличивалась, гибель наступала на 6–8-е сутки с
момента инфицирования, тогда как в контрольной
группе К1 гибель наступала уже на 3–4-е сутки.
Это свидетельствует о том, что препарат “Криоцелл-
гемокорд” активирует механизмы противови-
русного иммунитета на протяжении 6 месяцев пос-
ле его введения.
Установлено, что при заражении вирусом гриппа
и введении препарата “Криоцелл-гемокорд” уве-
личивалась масса селезенки и лимфатических уз-
лов животных, однако масса тимуса (данные не
приведены) не изменялась. При заражении вирусом
гриппа после предварительного введения препа-
рата “Криоцелл-гемокорд” масса селезенки во все
сроки исследования была больше,чем в контроль-
ных группах К2 и К3 и не отличалась от таковой в
группе К1. Масса лимфатических узлов к 7-м сут-
кам развития инфекции в группе О1 была достовер-
но больше, чем у интактных мышей, но не дости-
гала значений в контрольных группах К1 и К2; к
14-м суткам масса лимфатических узлов умень-
шалась до значений интактных животных.
В табл.1 показано, что при заражении живот-
ных вирусом гриппа (группа К1) уменьшалась кле-
точность всех исследуемых органов, кроме селе-
зенки (показатель не изменялся), и лимфатических
узлов (показатель достоверно возрастал).
Введение препарата “Криоцелл-гемокорд” (груп-
па К2) приводило к увеличению клеточности лим-
фатических узлов и костного мозга, уменьшению
количества лейкоцитов и эритроцитов; показатели
клеточности тимуса и селезенки не изменялись
(табл. 1).
Во все сроки исследования количество лейкоци-
тов в группе О1 было достоверно больше, чем в
группах К1 и К2, но не достигало значений интакт-
ных животных.
rrence of the virus in the animals’ organs and its titer
was estimated by hemagglutination reaction (HAR) [6].
The data obtained were statistically processed by
the Student method taking into account Fisher’s
coefficient. Significance of differences was assessed
by the t-test with the significance level 5%.
Results and discussion
The survival of animals in the experimental group
E1 was 85%, while no animals from the group C1 sur-
vived. It is necessary to note that the life span in the
mice from the experimental group E1 before their death
increased, the animals died on the 6th–8th day after
the infection, while the control C1 animals died on the
3rd–4th day. That indicates that the preparation “Cryo-
cell-haemocord” activated mechanisms of antivirus
immunity for 6 months after its introduction.
It was shown that after the influenza virus infection
and the preparation “Cryocell-Haemocord” introduc-
tion spleen and lymph node weights increased, but
thymus weight did not change (the data are not pre-
sented). When the animals were infected with the
influenza virus after the preliminary administration of
the preparation “Cryocell-Haemocord”, spleen weight
was bigger than in the control groups C2 and C3 and
did not differ from that in the group C1 during the whole
period of research. On the 7th day of the infection
progression lymph node weight was significantly bigger
in the group E1 than in the intact mice, but did not
amount to the values in the control groups C1and C2;
lymph node weight decreased to the values typical for
intact mice by the 14th day.
In Table 1 one can see that after the influenza virus
infection (group C1) cellularity reduced in all the organs
studied except spleen (the index did not change) and
lymph nodes (the index enhanced significantly).
The preparation “Cryocell-haemocord” introduction
(group C2) resulted in a rise in lymph node and bone
marrow cellularities, a decline in leukocyte and erythro-
cyte quantities; thymus and spleen cellularities did not
change (Table 1).
The leukocyte quantity in the group E1 was
significantly higher than in the groups C1 and C2, though
did not amount to the values of the intact animals during
the whole period of investigation.
The erythrocyte quantity in mouse blood in the group
E1 was significantly lower than that in the intact animals
on the 7th and 14th days of studying, but on the 7th day
it was higher in comparison with the control groups C1
and C2 , and by the 14th day it was the same as the
group C2 value.
The quantity of bone marrow nucleated cells in the
experimental group E1 did not differ from the index of
the intact animals on the 7th day after infection and by
the 14th day reached the value typical for the control
group C2.
problems
of cryobiology
Vol. 20, 2010, №1
проблемы
криобиологии
Т. 20, 2010, №1
102
Количество эритроци-
тов в крови мышей груп-
пы О1 на 7 и 14-е сутки
исследования было дос-
товерно меньше, чем у
интактных животных, но
на 7-е сутки увеличива-
лось по сравнению с конт-
рольными группами К1 и
К2, а к 14-м суткам не
отличалось от значения
группы К2.
Количество ядросо-
держащих клеток кост-
ного мозга у эксперимен-
тальных животных на 7-е
сутки после инфицирова-
ния в группе О1 не отли-
чалось от показателя ин-
тактных животных, а к
14-м суткам достигало
значения, характерного
для контрольной группы
К2.
Клеточность тимуса
на 7-е сутки в группе О1
не отличалась от показа-
теля животных, заражен-
ных вирусом гриппа, но к
14-м суткам резко воз-
растала и была более
чем в 2,5 раза больше кле-
точности тимуса у живот-
The thymus cellularity in the group E1 was the same
as the value of the animals infected with the influenza
virus on the 7th day, but on the 14th day it increased
drastically and was 2.5 times as much as the thymus
cellularity in the animals from the group C2.
The spleen cellularity in the group E1 was the same
as the value of the group C1 animals on the 7th day, too,
and by the 14th day of investigation it decreased to the
intact animals’ value (Table1).
On the 7th day after infection of the group E1 animals
with the influenza virus the lymph node cellularity
exceeded the values in the mice of the control groups,
except the group C2, and by the 14th day it lowered
and exceeded only the control group C3 value (Table 1).
No virus-neutralizing antibody titers in blood sera
in the group C3 animals were registered (Table 2).
The virus infection progression in the group C1 animals
resulted in emergence of these antibodies in the
maximal titer 1:64, and the virus infection progression
against the background of the preliminary administra-
tion of the preparation “Haemocord” led to a drastic
rise in the virus-neutralizing antibody titer on the 7th
problems
of cryobiology
Vol. 20, 2010, №1
проблемы
криобиологии
Т. 20, 2010, №1
Примечание: 1,2,3 – статистически достоверные различия по сравнению с группами К1, К2,
К3 соответственно (р < 0,05).
Note: 1,2,3 – statistically significant differences as compared to the groups C1, C2, C3 correspondingly
(p < 0.05).
Таблица 1. Средние значения концентрации клеток иммунокомпетентных органов
животных экспериментальных групп
Table 1. Average values of cell concentrations of immunocompetent
organs in the animals
йымеуделссИ
лаиретам
lairetamehT
detagitsevni
иктус,яинаворицифниелсопхынтовижыппурГ
syad,noitcefniretfaslaminafospuorG
К
2
C
2
К
3
C
3
О
1
E
1
К
1
C
1
7 41 7
,ытицокйеЛ × 01 6
лм/лк
,setycokueL × 01 6
lm/sllec
64,1±73,01 3,2,1 23,2±69,9 3,2,1 8,0±87,6 3 12,0±34,5 3 33,0±85,21
,ытицортирЭ
× 01 9 лм/лк
,setycorhtyrE
× 01 9 lm/sllec
56,0±82,8 3,2,1 54,0±62,6 2,1 1,0±6,5 3 4,0±56,6 3 77,0±81,11
,гзомйынтсоК
× 01 7 ьтсок/лк
,worramenoB
× 01 7 enob/sllec
750,0±81,1 2,1 51,0±95,1 3,1 100,0±95,0 3 80,0±83,1 3 51,0±60,1
,сумиТ
× 01 5 гм/лк
,sumyhT
× 01 5 gm/sllec
45,0±5,4 3,2 58,2±47,12 3,2,1 58,0±85,5 3 6,1±56,7 93,0±71,7
,акнезелеС × 01 6
гм/лк
,neelpS
× 01 6 gm/sllec
160,0±94,1 3,2,1 10,0±11,1 2,1 91,0±33,1 11,0±92,1 83,0±61,1
,ылзуофмиЛ
× 01 4 гм/лк
,sedonhpmyL
× 01 4 gm/sllec
23,3±17,11 3,2,1 94,0±23,6 3,2,1 62,0±4,8 3 73,3±88,71 3 7,1±44,2
ных группы К2 (табл. 1).
Клеточность селезенки в группе О1 на 7-е сутки
также не отличалась от показателя животных груп-
пы К1, к 14-м суткам исследования он снижался
до значений интактных животных (табл. 1).
На 7-е сутки после инфицирования вирусом
гриппа животных группы О1 клеточность лимфати-
ческих узлов превышала эти значение у мышей
контрольных групп, кроме группы К2, а к 14-м сут-
кам снижалась и превышала лишь соответст-
вующие значения контрольной группы К3 (табл. 1).
Титры вируснейтрализующих антител в сыво-
ротке крови животных группы К3 установлены не
были (табл. 2). Развитие вирусной инфекции у
животных группы К1 приводило к появлению дан-
ных антител в максимальном титре 1:64, а при зара-
жении вирусом гриппа на фоне предварительного
введения препарата “Криоцелл-гемокорд” (группа
О1) – к резкому увеличению титра вируснейтра-
лизующих антител на 7-е сутки с последующей
тенденцией к росту к 14-е суткам после заражения
(табл. 2).
103
При исследовании органов мышей с целью
определения содержания вируса гриппа и установ-
ления его гемагглютинирующего титра в РГА было
обнаружено, что на 7-е сутки вирус гриппа выяв-
лялся в легких, селезенке, тимусе и лимфоузлах в
группах животных О1 и К1 (табл. 3). В группах К2 и
К3 вирус в органах животных выявлен не был.
day with the following tendency towards enhancement
by the 14th day after the infection (Table 2).
The investigation of mouse organs focused on the
influenza virus content determination and its hemagglu-
tinin titer in HAR revealed the influenza virus in lungs,
spleen, thymus and lymph nodes in the E1 and C1
animals (Table 3) on the 7th
day. No virus was found in
the C2 and C3 animals’ organs. There were more
animals with the low virus titer in their organs and the
animals without virus at all in the group E1 in comparison
with the group C1. On the 14th day of the investigation
the virus was still determined in the E1 animals’ organs,
but its titer was reducing. All the animals in the group
C1 had died by this date (Table 3).
The preparation “Cryocell-haemocord” was disco-
vered to influence the mouse immunocompetent organs
state for 6 months after its introduction and to enhance
activity of these organs under the following influenza
virus infection. The preparation introduction leads to
the considerable rise in bone marrow cellularity, as well
as lymph node and spleen cellularities and weights,
which can be one of the factors providing a high level
of immune protection of the mouse organism under
the following influenza virus infection. The infection
of the animals against the background of the preli-
minary administration of the preparation “Cryocell-
Haemocord” caused a slight depletion of bone marrow,
thymus and lymph nodes, which can be explained by
activation of these organs in response to the virus intru-
sion accompanied by a release of immunocompetent
cells. A further progress of the infection resulted in
bone marrow and thymus activation, which manifested
Таблица 3. Титр вируса гриппа (по РГА) в органах животных
экспериментальных групп
Table 3. The influenza virus titer (by HAR) in the animals’ organs
Примечание: *– вирус не обнаружен; в скобках дано количество животных (%),
имеющих данный титр вируса.
Note: * – no virus was determined; percentage of the animals having the given virus titer
is in brackets.
problems
of cryobiology
Vol. 20, 2010, №1
проблемы
криобиологии
Т. 20, 2010, №1
Таблица 2. Титр противовирусных антител
в сыворотке крови животных
экспериментальных групп
Table 2. Virus-neutralizing antibody titers
in the animals’ blood sera
Животных с низким титром
вируса в органах и животных, у
которых вирус в исследуемых
органах не обнаруживался,
было больше в группе О1 по
сравнению с группой К1. На
14-е сутки исследования вирус
еще обнаруживался в органах
животных группы О1, но его
титр уменьшался. Все живот-
ные контрольной группы К1 в
этот срок погибли (табл. 3).
Установлено, что препарат
“Криоцелл-гемокорд” оказы-
вает влияние на состояние
иммунокомпетентных органов
мышей на протяжении 6 ме-
сяцев после введения и повы-
шает активность этих органов
при последующем заражении
вирусом гриппа. Введение
препарата приводит к сущест-
венному увеличению клеточ-
ности костного мозга, а также
клеточности и массы лимфати-
летитнартиТ
sretitydobitnA
уртитопхынтовижппургеинеледерпсаР
яинаворицифниелсоп)%(асурив
retitsurivehtybspuorglaminaehtfonoitubirtsiD
noitcefniehtretfa)%(
О
1
E
1
К
1
C
1
7- иктусе
7 ht yad
41 - иктусе
41 ht yad
7- иктусе
7 ht yad
23:1 - 4,41 7,82
46:1 3,41 - 3,17
821:1 3,41 - -
652:1 8,24 5,82 -
215:1 3,41 5,82 -
4201:1 3,41 3,41 -
8402:1 - 3,41 -
иктус,яинаворицифниелсопхынтовижыппурГ
syad,noitcefniehtretfaslaminaehtfospuorG
О
1
E
1
К
1
C
1
7 41 7
еикгеЛ
sgnuL
акнезелеС
neelpS
еикгеЛ
sgnuL
акнезелеС
neelpS
еикгеЛ
sgnuL
акнезелеС
neelpS
)7,12(4:1
)1,62(8:1
)1,62(61:1
)1,62(23:1
)4,74( *
)3,62(2:1
)3,62(4:1
)51(2:1
)03(4:1
)03(8:1
)52(61:1
)5,73( *
)5,73(1:1
)52(2:1
)53,91(2:1
)53,91(4:1
)53,91(8:1
)3,91(61:1
)3,91(23:1
)52,3(46:1
)33,33(2:1
)33,33(4:1
)33,33(8:1
сумиТ
sumyhT
ылзуофмиЛ
sedonhpmyL
сумиТ
sumyhT
ылзуофмиЛ
sedonhpmyL
сумиТ
sumyhT
ылзуофмиЛ
sedonhpmyL
)04(1:1
)06(2:1
)3,33(2:1
)4,44(4:1
)1,11(8:1
)1,11(61:1
)9,94( *
)1,05(1:1
)5,54(1:1
)5,54(2:1
)1,9(4:1
)52,13(2:1
)52,13(4:1
)52(8:1
)5,21(61:1
)33,33(2:1
)33,33(4:1
)22,22(8:1
)11,11(61:1
104
ческих узлов, селезенки животных, что, возможно,
является одним из факторов, обеспечивающих
высокий уровень иммунологической защиты орга-
низма мышей при последующем инфицировании
вирусом гриппа. Заражение животных на фоне
предварительного введения “Криоцелл-гемокорда”
приводило к незначительному истощению костного
мозга, тимуса и лимфатических узлов, что можно
объяснить активизацией этих органов в ответ на
внедрение вирусной инфекции, сопровождающейся
выбросом иммунокомпетентных клеток. Дальней-
шее развитие инфекции приводило к активизации
костного мозга и тимуса, что выражалось в зна-
чительном увеличении клеточности костного моз-
га, клеточности и массы тимуса.
На основании полученных результатов можно
предположить, что причиной гибели животных
группы К1 является высокая репродукция вируса,
тогда как в группе О1 при введении препарата
“Криоцелл-гемокорд” наблюдаются снижение реп-
родукции вируса гриппа и ослабление его инфек-
ционной активности. Наиболее вероятным меха-
низмом снижения репродукции вируса является
более высокая способность к синтезу специфи-
ческих антител, обусловленная активизацией пре-
паратом “Криоцелл-гемокорд” иммунной систе-
мы. Вируснейтрализующие антитела, выявленные
в сыворотке крови исследуемых животных, дейст-
вуют на наружные корпускулярные антигены
вириона и избирательно подавляют способность
вирусов к репродукции, вследствие блокирования
начальных этапов взаимодействия вируса с чувст-
вительными клетками (адсорбция и проникнове-
ние). Кроме того, вируснейтрализующие антитела
стимулируют фагоцитоз зараженных вирусом кле-
ток макрофагами, в результате чего в цитоплаз-
ме макрофага изолируется и обезвреживается
скопление инфекционных вирионов и продуктов
клеточного распада [5]. Визуальное исследование
выделенного патологического материала подт-
верждает данное предположение. Легкие живот-
ных в группе К1 на 50–90% поражены геморраги-
ческой пневмонией с характерной картиной “опече-
нения” легких и каемкой воздушной ткани по
периферии. Легкие животных опытной группы О1
поражены незначительно, выявлены единичные
точечные кровоизлияния. Полученные данные
свидетельствуют о выраженном профилакти-
ческом действии препарата “Криоцелл-гемокорд”.
Выводы
1. Интраназальное введение препарата “Крио-
целл-гемокорд” обеспечивает невосприимчивость
исследуемых животных к вирусу гриппа А/Викто-
рия в течение 6 месяцев.
itself in the considerable increase in bone marrow and
thymus cellularities and thymus weight.
Basing of the results obtained one can assume that
the cause of the animals’ mortality in the group C1 is a
high rate of the virus propagation, while in the group
E1 after the introduction of the preparation “Cryocell-
Haemocord” a decline in the rate of the influenza virus
propagation and abatement of its infectious activity
were observed. The most plausible mechanism of the
decline in the virus propagation is a higher capability
for specific antibody synthesis conditioned by the
preparation “Cryocell-Haemocord” activation of immu-
ne system. The virus-neutralizing antibodies determined
in the blood sera of the animals investigated affect
external corpuscular antigens of a virion and suppress
selectively the virus capacity for reproduction because
of arrest of initial stages (absorption and penetration)
of the virus-sensitive cells interactions. Besides the
virus-neutralizing antibodies stimulate phagocytosis of
the virus-infected cells by macrophages, as a result of
which agglomerations of infectious virions and cell
degradation products are isolated and neutralized in
the macrophage cytoplasm [5]. The visual assay of
the extracted pathological material confirms this as-
sumption. Lungs of the C1 animals are affected by
hemorrhagic pneumonia by 50–90% with a distinctive
pattern of “hepatization” of lungs and air tissue limbus
at the periphery. Lungs of the E1 animals are affected
slightly, there are solitary point hemorrhages. The data
obtained attest to the conspicuous prophylactic effect
of the preparation “Cryocell-Haemocord”.
Conclusions
1. The intranasal introduction of the preparation
“Cryocell-Haemocord” provides 6-month immunity of
the animals investigated against the influenza virus A/
Victoria disease.
2. The preparation “Cryocell-Haemocord” activates
the animals’ immunocompetent organs during the virus
infection progression.
3. The preparation “Cryocell-Haemocord” introduc-
tion stimulates specific anti-virus immunity, which is
confirmed by the high titers of the virus-neutralizing
antibodies in blood serum.
4. The cumulative effect of the preparation “Cryo-
cell-Haemocord” activity towards the influenza virus
lies in the considerable reduction in the virus propa-
gation, which is likely to provide the high survival of
the animals.
References
Voziyanova Zh.I. Infectious and parasitical diseases.– Kiev:
Zdorovya, 2000.– Vol. 1.– P. 63–96.
1.
problems
of cryobiology
Vol. 20, 2010, №1
проблемы
криобиологии
Т. 20, 2010, №1
105
Zheltyakova I.A., Brovko Ye.V. A novel approach to the influen-
za prophylaxis // Medicine of the Third Millenium: Proceedings
of Conference of Young Scientists.– Kharkov, 2006.– P. 93–94.
Laboratory methods of investigation in clinic / Ed. by V.V. Men-
shikov.– Moscow: Meditsina, 1987.– 368 p.
Lakin G.F. Biometry.– Moscow: Vysshaya shkola, 1980.–
293 p.
Petrov R.V. Immunology.– Moscow: Meditsina, 1982.– 368 p.
Manual on microbiological and virological methods of inves-
tigation / Ed. by M.O. Birger.– Moscow: Meditsina, 1982.–
461 p.
Tsutsayeva A.O., Glushko T.O., Lobasenko N.P. et al. Hemo-
cord – a preparation for complex therapy // Transplantolo-
giya.– 2003.– Vol. 4, N1.– P. 46–48.
Patent of Ukraine N31847A, IPC A01N1/02. A method for
cryopreservation of cord blood hemopoietic cells / A.O. Tsut-
sayeva, V.I. Grischenko, O.V. Kudokotseva et al.– Filed in
11.05.98. Published in 12.15.2000. Bul. N7.
Accepted in 07.07.2009Литература
Возиянова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болез-
ни.– Киев: Здоров’я, 2000.– Т. 1.– С. 63–96.
Желтякова И.А., Бровко Е.В. Новый подход к профилак-
тике гриппа // Медицина третього тисячоліття: Зб. тез.
міжвузівської конференції молодих вчених.– Харків,
2006.– С. 93–94.
Лабораторные методы исследования в клинике / Под
ред. В.В. Меньшикова.– М.: Медицина, 1987.– 368 с.
Лакин Г.Ф. Биометрия.– М.: Высш. школа, 1980.– 293 с.
Петров Р.В. Иммунология. – М.: Медицина, 1982.– 368 с.
Справочник по микробиологическим и вирусологическим
методам исследования / Под ред. М.О. Биргера. – М.:
Медицина, 1982.– 461 с.
Цуцаєва А.О., Глушко Т.О., Лобасенко Н.П. та ін. Гемо-
корд – препарат комплексної терапії // Трансплантологія.–
2003.– Т. 4, №1.– С. 46–48.
Пат. України №31847А, МПК А01N1/02. Спосіб кріоконсер-
вування кровотворних клітин кордової крові / А.О. Цуцає-
ва, В.І. Грищенко, О.В. Кудокоцева та інш.– Заявлено
05.11.98. Опубл. 15.12.2000. Бюл. №7.
Поступила 07.07.2009
Рецензент И.П. Высеканцев
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
problems
of cryobiology
Vol. 20, 2010, №1
проблемы
криобиологии
Т. 20, 2010, №1
2. Препарат “Криоцелл-гемокорд” активизи-
рует состояние иммунокомпетентных органов жи-
вотных при развитии вирусной инфекции.
3. Введение препарата “Криоцелл-гемокорд”
стимулирует специфический противовирусный
иммунитет, о чем свидетельствует наличие в сы-
воротке крови вируснейтрализующих антител в
высоких титрах.
4. Суммарным эффектом действия препарата
“Криоцелл-гемокорд” в отношении вируса гриппа
является значительное снижение репродукции ви-
руса, что, возможно, обеспечивает высокую выжи-
ваемость исследуемых животных.
|