Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения
Представлены экспериментальные данные, полученные при сравнительной оценке влияния гипотермического и
 низкотемпературного хранения на антиоксидантную активность экстрактов плаценты человека (ЭПЧ). Антиоксидантную
 активность определяли по способности восстанавливать трехвалентное же...
Збережено в:
| Дата: | 2011 |
|---|---|
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2011
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44901 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после
 низкотемпературного и гипотермического хранения / С.Л. Розанова, Е.Д. Розанова, О.А. Нардид, В.Г. Карпенко // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 3. — С. 291-300. — Бібліогр.: 15 назв. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860186485338144768 |
|---|---|
| author | Розанова, С.Л. Розанова, Е.Д. Нардид, О.А. Карпенко, В.Г. |
| author_facet | Розанова, С.Л. Розанова, Е.Д. Нардид, О.А. Карпенко, В.Г. |
| citation_txt | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после
 низкотемпературного и гипотермического хранения / С.Л. Розанова, Е.Д. Розанова, О.А. Нардид, В.Г. Карпенко // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 3. — С. 291-300. — Бібліогр.: 15 назв. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| description | Представлены экспериментальные данные, полученные при сравнительной оценке влияния гипотермического и
низкотемпературного хранения на антиоксидантную активность экстрактов плаценты человека (ЭПЧ). Антиоксидантную
активность определяли по способности восстанавливать трехвалентное железо и ABTS+-радикал, хелатировать ионы железа, а
также по содержанию фенольных соединений. Показано, что при хранении ЭПЧ как в жидком азоте (–196°С), так и в морозильной
камере (–20°С) в течение 12 месяцев антиоксидантная активность образцов остается на высоком уровне, а в условиях гипотермии
(4°С) она сохраняется не более 7 дней.
Представлено експериментальні дані, отримані при порівняльній оцінці впливу гіпотермічного та низькотемпературного
зберігання на антиоксидантну активність екстрактів плаценти людини (ЕПЛ). Антиоксидантну активність визначали за здатністю
відновлювати тривалентне залізо та ABTS+-радикал, хелатувати іони заліза та за вмістом фенольних сполук. Показано, що за
умов зберігання ЕПЛ як у рідкому азоті (–196°С), так і у морозильній камері (–20°С) впродовж 12 місяців антиоксидантна
активність зразків залишається на високому рівні, у той час як в умовах гіпотермії (4°С) вона зберігається не більше 7 днів.
The experimental data, obtained under comparative evaluation of hypothermic and low temperature storage influence on human
placenta extract (HPE) antioxidant activity have been presented. Antioxidant activity was assessed by capacity to reduce the ferric
iron and ABTS+ radical, to chelate ferrous ions and by phenolic compound content. Twelve-month low temperature storage both in
liquid nitrogen (–196°С) as well as in freezing chamber (–20°С) has been shown to preserve HPE antioxidant activity at a high level
while during hypothermic storage (4°С) such an activity keeps up to 7 days.
|
| first_indexed | 2025-12-07T18:04:17Z |
| format | Article |
| fulltext |
291
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.: (+38
057) 373-31-41, факс: (+38 057) 373-30-84, электронная почта:
sv.rosanova@gmail.com
* To whom correspondence should be addressed: 23,
Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373
3141, fax: +380 57 373 3084, e-mail: sv.rosanova@gmail.com
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
2Kharkov Medical Academy of Post-Diploma Education, Kharkov,
Ukraine
1Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
2Харьковская медицинская академия последипломного
образования МЗ Украины
Экстракты плаценты человека (ЭПЧ), благо-
даря наличию в них большого количества таких
биологически активных веществ, как белки, пеп-
тиды, РНК, ДНК, аминокислоты, микроэлементы,
обладают терапевтической активностью [12].
Широкий спектр клинического действия плацен-
тарных препаратов объясняется их антиокси-
дантными свойствами. Было показано in vitro, что
ЭПЧ способны ингибировать гидроксильный, су-
пероксидный радикалы, а также окись азота; вос-
станавливать трехвалентное железо и ABTS+-ради-
кал; хелатировать ионы металлов переменной ва-
лентности; предотвращать перекисное окисление
липидов [1, 13]. Такая активность экстрактов может
быть связана с наличием в них веществ, способных
быть донорами электронов: аскорбиновой и мочевой
кислот, фенольных соединений, SH-содержащих
Human placenta extracts (HPE), due to the com-
prising of a large number of such biologically active
substances as proteins, peptides, RNA, DNA, amino
acids, microelements have a therapeutic activity [12].
A wide range of clinical effect of placental prepara-
tions is explained by their antioxidant properties. HPE
were shown in vitro as capable to inhibit hydroxyl, su-
peroxide radicals, as well as nitric oxide, to reduce the
ferric iron and ABTS+-radical; to chelate transition
metal ions and prevent lipid peroxidation [1, 13]. Such
an extract activity may be associated with the pre-
sence of the substances, capable for being electron
donors: ascorbic and uric acids, phenolic compounds,
SH-containing substances. However, the HPE antioxi-
dant activity is greatly stipulated by comprised proteins.
Cryopreservation is widely used to prolong the sto-
rage term for different preparations. However, after
problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
УДК 57.043:577.121.7:611.013.85.085.23
С.Л. РОЗАНОВА1*, Е.Д. РОЗАНОВА1, О.А. НАРДИД1, В.Г. КАРПЕНКО2
Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после
низкотемпературного и гипотермического хранения
UDC 57.043:577.121.7:611.013.85.085.23
S.L. ROZANOVA1*, E.D. ROZANOVA1, O.A. NARDID1, V.G. KARPENKO2
Antioxidant Activity of Placenta Extracts After Low Temperature and
Hypothermic Storage
Представлены экспериментальные данные, полученные при сравнительной оценке влияния гипотермического и
низкотемпературного хранения на антиоксидантную активность экстрактов плаценты человека (ЭПЧ). Антиоксидантную
активность определяли по способности восстанавливать трехвалентное железо и ABTS+-радикал, хелатировать ионы железа, а
также по содержанию фенольных соединений. Показано, что при хранении ЭПЧ как в жидком азоте (–196°С), так и в морозильной
камере (–20°С) в течение 12 месяцев антиоксидантная активность образцов остается на высоком уровне, а в условиях гипотермии
(4°С) она сохраняется не более 7 дней.
Ключевые слова: гипотермическое хранение, низкотемпературное хранение, экстракт плаценты человека, антиоксидантная
активность.
Представлено експериментальні дані, отримані при порівняльній оцінці впливу гіпотермічного та низькотемпературного
зберігання на антиоксидантну активність екстрактів плаценти людини (ЕПЛ). Антиоксидантну активність визначали за здатністю
відновлювати тривалентне залізо та ABTS+-радикал, хелатувати іони заліза та за вмістом фенольних сполук. Показано, що за
умов зберігання ЕПЛ як у рідкому азоті (–196°С), так і у морозильній камері (–20°С) впродовж 12 місяців антиоксидантна
активність зразків залишається на високому рівні, у той час як в умовах гіпотермії (4°С) вона зберігається не більше 7 днів.
Ключові слова: гіпотермічне зберігання, низькотемпературне зберігання, екстракт плаценти людини, антиоксидантна
активність.
The experimental data, obtained under comparative evaluation of hypothermic and low temperature storage influence on human
placenta extract (HPE) antioxidant activity have been presented. Antioxidant activity was assessed by capacity to reduce the ferric
iron and ABTS+ radical, to chelate ferrous ions and by phenolic compound content. Twelve-month low temperature storage both in
liquid nitrogen (–196°С) as well as in freezing chamber (–20°С) has been shown to preserve HPE antioxidant activity at a high level
while during hypothermic storage (4°С) such an activity keeps up to 7 days.
Key words: hypothermic storage, low temperature storage, human placenta extract, antioxidant activity.
292 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
соединений. Однако в значительной степени анти-
оксидантная активность ЭПЧ обусловлена белками,
входящими в их состав.
Для продления срока хранения различных пре-
паратов широко применяется криоконсервиро-
вание. Однако после хранения экстрактов в замо-
роженном состоянии их свойства могут изменять-
ся. Процесс замораживания-оттаивания способен
инициировать изменение конформации и агрегацию
биологических макромолекул [2, 7, 11], в том числе
и обладающих антиоксидантными свойствами.
Показано, что быстрое замораживание ЭПЧ повы-
шает антиоксидантную активность: увеличивается
их способность ингибировать свободные радика-
лы и хелатировать ионы железа, медленное замо-
раживание ЭПЧ снижает их антиоксидантную ак-
тивность [1]. Ведущую роль в изменении антиокси-
дантной активности ЭПЧ, по-видимому, играют
конформационные изменения белков. Характер
влияния низкотемпературного хранения на антиок-
сидантные свойства сложных композиций макро-
молекул, а в частности на ЭПЧ, практически не
изучен.
Цель работы – изучить влияние низкотемпера-
турного хранения ЭПЧ на их антиоксидантные
свойства.
Материалы и методы
В работе использовали 8 плацент, полученных
от рожениц с их информированного согласия (срок
беременности 38 недель). Свежую плаценту отмы-
вали от крови изотоническим раствором NaCl.
Удаляли амниотические оболочки и соединитель-
нотканные участки котиледонов. Ткань плаценты
измельчали в гомогенизаторе. К гомогенату све-
жей плаценты добавляли равный объем изотони-
ческого раствора NaCl, перемешивали и оставляли
для экстрагирования на 12 ч. После этого гомоге-
нат центрифугировали 15 мин при 3000 g. Получен-
ный фильтрат являлся водно-солевым экстрактом
плаценты.
Для исследования влияния гипотермического
хранения на антиоксидантную активность ЭПЧ, их
хранили в холодильнике при 4°С 7 суток.
Для изучения влияния низкотемпературного
хранения ЭПЧ помещали в пластиковые пробирки
и замораживали до температур –20 и –196°С в мо-
розильной камере и жидком азоте со скоростями
1–2 и 100 град/мин соответственно. Затем часть об-
разцов отогревали для исследования влияния про-
цесса замораживания-оттаивания, оставшиеся –
хранили в течение одного года. Отогрев осущест-
вляли на водяной бане при 20°С.
Отдельные фракции экстрактов получали ме-
тодом гель-хроматографии на колонке 27×1 см с
сефадексом G-200. На колонку наносили 0,5 мл экс-
storing the extracts in a frozen state their properties
may change. Freeze-thawing process is capable to ini-
tiate a change in conformation and aggregation of bio-
logical macromolecules [2, 7, 11], including those with
antioxidant properties. Rapid freezing of HPE results
in a rise of antioxidant activity: their capability to inhibit
free radicals and chelate ferrous ions increases, and
vice versa slow freezing leads to the reducing of their
antioxidant activity [1]. A key role in changed HPE
antioxidant activity is apparently played by conforma-
tional changes in proteins. The nature of low tempera-
ture storage effect on antioxidant properties of comp-
lex compositions of macromolecules, HPE in particu-
lar, has still remained poorly studied.
The research was aimed to study the effect of low
temperature storage of HPE on their antioxidant prop-
erties.
Materials and methods
The research was performed using 8 placentas,
derived from the parturients with their informed con-
sent (38 weeks of gestation). Fresh placenta was wa-
shed free of blood with NaCl isotonic solution. Amnio-
tic covers and connective-tissue sites of cotyledons
were removed. Placenta tissue was minced in homoge-
nizer. To fresh placenta homogenate we added an equal
volume of NaCl isotonic solution, mixed and left for
extracting for 12 hours. Afterwards the homogenate
was centrifuged within 15 min at 3000 g. The obtained
filtrate was an aqueous-saline placenta extract.
For studying hypothermic storage effect on HPE
antioxidant activity they were stored in refrigerator at
4°C during 7 days.
In order to investigate the low temperature effect
the HPE were placed into plastic vials and cooled down
to –20 and –196°C in freezing chamber and liquid ni-
trogen with 1–2 and 100 deg/min rates, correspond-
ingly. Then some samples were thawed for studying
the influence of freeze-thawing process itself, the rest
were stored within one year. The thawing was done in
a water bath at 20°C.
Individual fractions of extract were derived using
gel chromatography in 27×1 cm column with Sephadex
G-200. We applied 0.5 ml extract onto the column.
The resulted volume of fractions was 1 ml. Protein con-
centration was examined spectrophotometrically [5].
Reducing activity of both extracts and their frac-
tions was assessed by the method of Oyaizu (FRAP
method) [8]. The ability of placenta extracts to reduce
ferric-ferricyanide complex of Prussian blue was de-
termined by recording the absorbance at 700 nm. With
this aim, 0.2 ml of the sample were mixed with phos-
phate buffer (0.5 ml; 0.2 M; pH 6.6) and potassium
ferricyanide [K3Fe(CN)6] (0.5 ml; 1%). The resulted
mixture was incubated at 50°C for 20 min, then 0.5 ml
of trichloracetic acid (30%) were added and the mix-
293 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
тракта. Элюировали фракции по 1 мл. Концентра-
цию белка определяли спектрофотометрически [5].
Восстанавливающую активность экстрактов, а
также их фракций оценивали по методу Oyaizu
(метод FRAP) [8]. Способность экстрактов пла-
центы восстанавливать железо-феррицианидовый
комплекс Берлинской лазури определяли по погло-
щению на длине волны 700 нм. Для этого 0,2 мл
образца смешивали с фосфатным буфером (0,5 мл;
0,2 M; pH 6,6) и феррицианидом калия [K3Fe(CN)6]
(0,5 мл; 1%). Полученную смесь выдерживали при
50°С в течение 20 мин, затем к смеси добавляли
0,5 мл трихлоруксусной кислоты (30%) и фильтро-
вали. К 0,5 мл полученного фильтрата добавляли
FeCl3 (0,1 мл; 0,1%). Спектры поглощения записы-
вали на длине волны 700 нм на спектрофотометре
Pye Unicam SP8000, Англия. Увеличение поглоще-
ния реакционной смеси свидетельствовало о
повышении способности образцов восстанавливать
трехвалентное железо (Fe3+→Fe2+). Для контроля
использовали аскорбиновую кислоту [8].
Спектрофотометрические исследования анти-
радикальной активности образцов проводили по
методу Re et al. [10]. ABTS+-катионный радикал
получали путем реакции ABTS (2,2'-azinobis-(3-
ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), 7 мМ, Sigma) в
H2O с аммоний персульфатом (2,45 мМ, Sigma),
хранившихся 12 ч в темноте при комнатной тем-
пературе. Раствор ABTS+ (0,1 мл) разводили дис-
тиллированной водой до величины оптической
плотности, равной 0,7 ± 0,02. Исходные и подвер-
женные хранению экстракты (0,1 мл) добавляли к
полученному веществу и регистрировали кинетику
обесцвечивания раствора ABTS+-радикала. Ре-
зультаты представляли в процентах изменения пог-
лощения исходного раствора ABTS+.
Хелатирующую активность исследуемых об-
разцов оценивали по методу Dinis et al. [3]. К 0,2 мл
исследуемого образца добавляли 2 мМ раствора
FeCl2 (0,05 мл). Реакцию инициировали добавле-
нием 5 мМ феррозина (Sigma). Смесь встряхивали
и оставляли при комнатной температуре на 10–
15 мин. Затем спектрофотометрически измеряли
поглощение образцов на длине волны 562 нм.
Хелатирующую активность определяли по способ-
ности исследуемых веществ связывать ионы Fe2+,
в результате чего уменьшалось количество окра-
шенного феррозин-Fe2+ комплекса.
Общее содержание фенолов в образцах измеря-
ли с использованием реагента фолина (Folin-Ciocal-
teu (FC)) по методу Singleton и Rossi [14] с незна-
чительными изменениями. Исследуемый образец
(0,1 мл) смешивали с 1,5 мл FC-реагента, предвари-
тельно разведенного дистиллированной водой 1:9.
Полученную смесь выдерживали 5 мин при тем-
пературе 22°С, затем к ней добавляли раствор
ture was filtrated. The obtained filtrate (0.5 ml) was
mixed with FeCl3 (0.1 ml; 0.1%). The absorbance spec-
tra were recorded at 700 nm using spectrophotometer
Pye Unicam SP8000 (UK). The rise in absorption of
reaction mixture testified to the increased ability of the
samples to reduce ferric iron (Fe3+→Fe2+). Ascorbate
was used as the control [8].
Spectrophotometrical studies of anti-radical activ-
ity in samples were carried-out according to the method
of Re et al. [10]. ABTS+ cation radical was obtained
by means of ABTS reaction (2,2'-azinobis-(3-ethylben-
zothiazoline-6-sulfonic acid), 7 mM, Sigma) in H2O with
potassium persulfate (2.45 mM, Sigma), stored for
12 hrs in the darkness at room temperature. The
ABTS+ solution (0.1 ml) was diluted with distilled wa-
ter up to the value of optical density equal to 0.7 ±
0.02. Initial extracts and those after storage (0.1 ml)
were added to the obtained substance and the kinetics
of ABTS+ radical solution decolorization was recorded.
Results were presented as percentages of absorption
changes in ABTS+ initial solution.
Chelating activity in the experimental samples was
assessed by the method of Dinis et al. [3]. 2 mM FeCl2
solution (0.05 ml) was added to 0.2 ml of the experi-
mental sample. The reaction was initiated by the addi-
tion of 5 mM ferrozine (Sigma). The mixture was sha-
ken and left at room temperature for 10–15 min. Then
the samples' absorbance was measured spectrophoto-
metrically at 526 nm. Chelating activity was determined
by the capability of the studied substances to bind Fe2+
ions, resulting in a decreased number of stained ferro-
zine-Fe2+ complex.
Total phenol content in samples was measured us-
ing the Folin reagent (Folin-Ciocaltea, FC) according
to the method of Singleton and Rossi [14] with slight
modifications. The studied sample (0.1 ml) was mixed
with 1.5 ml of FC-reagent, preliminary diluted 1:9 with
distilled water. The resulted mixture was incubated for
5 min at 22°C, then Na2CO3 (0.06%) solution was
added. After 30 min incubation at 22°C the absorb-
ance at 725 nm was measured.
The findings were statistically processed using the
software Origin 6.1. Data in Figures are presented as
the mean ± standard error. The value of the differ-
ences of the results for fresh and frozen-thawed HPE
were assessed using the paired t-test. P values < 0.05
were considered as statistically significant.
Results and discussion
One of the most common ways for storing biologi-
cal objects in clinical practice is a hypothermic storage
(at 0...6°C). In order to determine the storage terms
of HPE under hypothermia, during which their antioxi-
dant activity remains preserved, as well as to reveal
the nature of changes in this activity, the extracts were
stored in domestic refrigerator at 4°C.
294 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
Na2CO3 (0,06%). После 30-минутной инкубации при
22°C измеряли поглощение на длине волны 725 нм.
При статистической обработке полученных ре-
зультатов использовали программное обеспечение
Origin 6.1. Данные на рисунках приведены как сред-
нее значение ± стандартная ошибка. Значимость
различий результатов в свежевыделенных ЭПЧ и
после замораживания оценивали на основании пар-
ного t-теста. Уровень статистической значимости
Р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Один из самых распространенных способов
хранения биологических препаратов в клинической
практике – гипотермический (при 0...6°С). Для
определения сроков хранения ЭПЧ в условиях
гипотермии, при которых сохраняется их антиокси-
дантная активность, а также выяснения характера
изменения данной активности экстракты хранили
в бытовом холодильнике при 4°С.
Исследования влияния гипотермического хра-
нения на железовосстанавливающую активность
показали, что на 2-е сутки она повышается, однако
на 4-е наблюдается ее снижение (рис.1). Антиок-
сиданты, активность которых может быть оценена
этим методом, – вещества с низкими молекуляр-
ными массами, обладающие высоким окислитель-
но-восстановительным потенциалом (≤0,7 V)
(α-токоферол, аскорбиновая и мочевая кислоты,
фенолы, полифенолы) [9].
Метод определения антиоксидантной актив-
ности, основанный на способности восстанав-
ливать ABTS+-радикал, позволяет оценить более
широкий спектр антиоксидантов, включая и анти-
оксиданты с низким окислительно-восстанови-
тельным потенциалом. Кинетика ингибирования
ABTS+-катион-радикала имеет быструю и мед-
ленную фазы, что позволило определить актив-
ность быстро и медленно восстанавливающих ан-
тиоксидантов. Активность быстро восстанавли-
вающих антиоксидантов (к ним относятся аскор-
биновая и мочевая кислоты, фенольные соедине-
ния, α-токоферол, аминокислоты, содержащие SH-
группы, восстановленный глутатион, убихиноны)
можно определить по уровню ингибирования окрас-
ки в течение первых 10 с, активность медленно
восстанавливающих антиоксидантов (преиму-
щественно белков и аминокислот) по снижению
интенсивности окраски, которая наблюдалась сле-
дующие 390 с [6, 9].
Способность ЭПЧ восстанавливать ABTS+-ра-
дикал в процессе гипотермического хранения как
и антиоксидантная активность, определенная по
методу FRAP, как для быстро, так и для медленно
восстанавливающих центров повышается в первые
сутки хранения. При дальнейшем хранении она
снижается (рис. 2).
0
0,5
1
1,5
2
2,5
0 1 2 3 4 5
Рис. 1. Влияние гипотермического хранения на железо-
восстанавливающую активность ЭПЧ; * – достоверность
отличий по сравнению с ЭПЧ на первые сутки, P < 0,05.
Fig. 1. Effect of hypothermic storage on HPE ferric-reducing
activity; * – statistical significance of differences as compa-
red to the data of the first day, P < 0.05.
Studies of hypothermic storage effect on ferric-
reducing activity demonstrated its increasing to the 2nd
day, but to the 4th day we observed its decrease (Fig. 1).
The antioxidants, which activity may be assessed with
this method are the substances of low molecular
masses, possessing a high redox potential (≤0.7 V) (α-
tocopherol, ascorbic and uric acids, phenol, polyphe-
nols) [9].
The method of antioxidant activity assessment, based
on the ability to reduce ABTS+ radical, enables to in-
vestigate a wider range of antioxidants, including those
with low redox potential. The kinetics of ABTS+ cation-
radical inhibition has rapid and slow phases, which
enable to determine the activity of rapidly and slowly
reducing antioxidants. The activity of rapidly reducing
antioxidants (among these are ascorbic and uric acids,
phenol compounds, α-tocopherol, amino acids with SH-
groups, reduced glutathione, ubiquinones) may be de-
termined according to the level of decolorization within
first 10 sec, the activity of slowly reducing antioxi-
dants (mostly proteins and amino acids) may be asses-
sed by a decrease in color intensity, observed within
following 390 sec [6, 9].
The HPE ability to reduce ABTS+-radical during
hypothermic storage, as well as an antioxidant activity,
determined by the FRAP method, both for rapidly and
slowly reducing centers increase within first storage
day. During following storage these indices reduce
(Fig. 2).
One of the main mechanisms for antioxidant pro-
tection of biological macromolecules in extracellular
environment is the action of chelating substances, bind-
Срок хранения, сутки
Storage term, days
Во
сс
та
на
вл
ив
аю
щ
ая
а
кт
ив
но
ст
ь,
эк
в.
м
М
а
ск
ор
ба
та
R
ed
uc
in
g
ac
tiv
ity
, e
q
m
M
a
sc
or
ba
te * *
*
295 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
0 1 2 3 4 5
Рис. 3. Влияние гипотермического хранения на хелати-
рующую активность ЭПЧ; * – достоверность отличий
по сравнению с ЭПЧ на первые сутки, P < 0,05.
Fig. 3. Effect of hypothermic storage on HPE chelating ac-
tivity; * – statistical significance of differences as compared
to data of the first day, P < 0.05.
и
Одним из основных механизмов антиокси-
дантной защиты биологических макромолекул во
внеклеточной среде являются хелатные соедине-
ния, связывающие ионы металлов переменной ва-
лентности и препятствующие их вовлечению в
реакции разложения перекисей с образованием гид-
роксильного радикала. Было показано, что данная
активность полностью исчезает на 4-е сутки гипо-
термического хранения (рис. 3).
Повышение антиоксидантной активности быст-
ро восстанавливающих центров, железовосстанав-
ливающей и хелатирующей способностей на 2-е
сутки гипотермического хранения, возможно, свя-
зано с накоплением мочевой кислоты, образующей-
ся в результате распада АТФ и подобных структур
[15]. Это предположение подтверждается значи-
тельным снижением оптической плотности при
260 нм в процессе хранения во фракциях с молеку-
лярной массой ниже 5 кДа (рис. 4).
Наблюдаемое в тот же период повышение ан-
тиоксидантной активности медленно восстанавли-
вающих центров, по-видимому, связано с диссоциа-
цией белковых молекул или их разрушением под
действием протеолитических ферментов и с увели-
чением доступности антиоксидантных групп бел-
ков. Это предположение основывается на результа-
тах гель-хроматографии: в процессе хранения уве-
личивается относительное содержание белка в низ-
комолекулярных фракциях (рис. 5).
ing transition metal ions and preventing thereby their
involvement into the reactions of peroxide decomposi-
tion with the formation of hydroxyl radical. This activi-
ty was shown as completely disappearing to the 4th
day of hypothermic storage (Fig. 3).
An increased antioxidant activity of rapidly reduc-
ing centers, ferric-reducing and chelating capabilities
to the 2nd day of hypothermic storage is probably asso-
ciated with the accumulation of uric acid, resulted from
decomposition of ATP and similar structures [15]. This
assumption is confirmed by a significant decrease of
optical density at 260 nm during storage of fractions
with molecular mass lower than 5 kDa (Fig. 4).
The observed within the same period an increased
antioxidant activity of slowly reducing centers is ap-
parently related with the dissociation of protein mo-
lecules or their decomposition under the effect of pro-
teolytic enzymes as well as the augmentation of pro-
tein antioxidant group availability. This assumption is
based on the results of gel chromatography: during sto-
rage there is an increase in a relative protein content in
low molecular fractions (Fig. 5).
Phenolic compounds are the most effective free ra-
dical scavengers. Hypothermic storage was noted as
resulting in a decrease of total phenol content in HPE
(Fig. 6).
Thus, the results obtained testify to the fact, that
during HPE hypothermic storage a significant reduc-
tion of antioxidant activity within one week is observed.
This is apparently stipulated by structural changes in
antioxidants or their utilization for inhibiting the oxidants,
formed during storage.
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
0 2 4 6 8
Рис. 2. Влияние гипотермического хранения на способ-
ность ЭПЧ восстанавливать ABTS+-радикал: 1 – быстрое
восстановление; 2 – медленное восстановление; 3 – об-
щее восстановление; * – достоверность отличий по
сравнению с ЭПЧ на первые сутки, P < 0,05.
Fig. 2. Effect of hypothermic storage on HPE capability to
reduce ABTS+-radical: 1 – rapid reduction; 2 – slow one;
3 – total reduction, * – statistical significance of differences
as compared to the data of the first day, P < 0.05.
Срок хранения, сутки
Storage term, days
И
нг
иб
ир
ов
ан
ие
п
ог
ло
щ
ен
ия
,
%
Ab
so
rb
tio
n
in
hi
bi
tio
n,
%
Срок хранения, сутки
Storage term, days
С
вя
за
нн
ое
ж
ел
ез
о,
%
C
he
la
te
d
iro
n,
%
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
3
2
1
*
*
*
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0,4
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28
296 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
Фенольные соединения являются наиболее эф-
фективными “перехватчиками” свободных ради-
калов. Отмечено, что гипотермическое хранение
приводит к снижению общего содержания фенолов
в ЭПЧ (рис. 6).
Таким образом, полученные результаты свиде-
тельствуют о том, что в процессе гипотермичес-
кого хранения ЭПЧ наблюдается значительное
снижение антиоксидантной активности в течение
одной недели. Это, по-видимому, обусловлено струк-
турными изменениями антиоксидантов или их рас-
ходованием на ингибирование образующихся в
процессе хранения окислителей.
Хранение ЭПЧ при отрицательных температу-
рах 12 месяцев позволяет значительно сохранить
антиоксидантную активность экстрактов.
Железовосстанавливающая активность ЭПЧ
после быстрого замораживания до –196°С с после-
дующим отогревом и после хранения в течение
года при той же температуре не изменяется, а хра-
нение при –20°С приводит к дополнительному сни-
жению железовосстанавливающей активности по
сравнению с замораживанием-оттаиванием (рис. 7).
Уменьшение железовосстанавливающей актив-
ности в процессе хранения может быть связано со
снижением содержания в ЭПЧ низкомолекулярных
антиоксидантов, в частности мочевой кислоты [4].
Анализ кинетики восстановления ABTS+-ра-
дикала показал, что данная активность полностью
сохраняется после низкотемпературного хранения.
Хранение экстрактов при –196°С не вносило допол-
нительных изменений в активность быстро и мед-
Рис. 5. Гель-хроматограммы ЭПЧ после хранения при
4°С: – исходный ЭПЧ; – ЭПЧ, хранившийся 3 суток
при –20°C.
Fig. 5. HPE gel chromatography after storage at 4°C: –
initial HPE; – HPE, stored for 3 days at –20°C.
0
1
2
3
4
5
6
7
0 1 2 3 4 5
Рис. 6. Содержание фенолов в ЭПЧ после хранения при
4°С; * – достоверность отличий по сравнению с ЭПЧ на
первые сутки, P < 0,05.
Fig. 6. Phenol content in HPE after storage at 4°C; * – sta-
tistical significance of differences as compared to data of
the first day, P < 0.05.
HPE storage under negative temperatures within
12 months enables a high retaining of antioxidant ac-
tivity of the extracts.
The HPE ferric-reducing activity after a rapid freez-
ing down to –196°C with following thawing and after
one-year-storage at the same temperature remains
Рис. 4. Изменение оптической плотности при 260 нм в
различных фракциях, полученных методом гель-хрома-
тографии в процессе хранения при 4°С: – исходный
ЭПЧ; – ЭПЧ, хранившийся 3 суток при –20°C.
Fig. 4. Changes in optical density at 260 n in different frac-
tions, isolated with gel chromatography method after sto-
rage at 4°C: – initial HPE; – HPE, stored for 3 days at
–20°C.
Номер фракции
Fraction number
О
пт
ич
ес
ка
я
пл
от
но
ст
ь
пр
и
26
0
нм
O
pt
ic
al
d
en
si
ty
a
t 2
60
n
m
126
кДа/kDa
750
кДа/kDa
5
кДа/kDa
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28
126
кДа/kDa
750
кДа/kDa
5
кДа/kDa
69
кДа/kDa
Номер фракции
Fraction number
С
од
ер
жа
ни
е
бе
лк
а,
%
Pr
ot
ei
n
co
nt
en
t,
%
Срок хранения, сутки
Storage term, days
О
бщ
ее
с
од
ер
жа
ни
е
ф
ен
ол
ов
,
эк
в.
м
М
г
ал
ли
ев
ой
к
ис
ло
ты
To
ta
l c
on
te
nt
o
f p
he
no
ls
, e
q.
m
M
g
al
liu
m
a
ci
d
*
*
*
297 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
ленно восстанавливающих центров аналогично по-
казателям экстрактов собственно после замора-
живания-оттаивания (рис. 8). Активность быстро
восстанавливающих антиоксидантов в ЭПЧ после
хранения при –20°С была выше по сравнению со
значениями, полученными после замораживания-
оттаивания, активность медленно восстанавли-
вающих ABTS+ снижалась (рис. 8).
Хелатирующая активность ЭПЧ после хране-
ния при –20°С значительно повышалась по сравне-
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1 2 3 4 5
Рис. 7. Железовосстанавливающая способность ЭПЧ: 1 –
свежевыделенных; 2 – замороженных до –20°С; 3 –
хранившихся при –20°С; 4 – замороженных до –196°С;
5 – хранившихся при –196°С; * – достоверность отличий
по сравнению со свежевыделенными ЭПЧ, P < 0,05; # –
достоверность отличий по сравнению c ЭПЧ после
замораживания-оттаивания; P < 0,05.
Fig. 7. HPE ferric-reducing capability: 1 – fresh extract; 2 –
frozen down to –20°C; 3 – stored at –20°C; 4 – frozen down
to –196°C; 5 – stored at –196°C; * – statistical significance
of differences as compared to fresh HPE, P < 0.05; # – statis-
tical significance of differences as compared to HPE after
freeze-thawing per se, P < 0.05.
0
10
20
30
40
50
60
70
1 2 3 4 5
Рис. 8. Влияние различных сроков и температур хранения
на активность быстро и медленно восстанавливающих
ABTS+-радикал центров ЭПЧ: 1 – свежевыделенных; 2 –
замороженных до –20°С; 3 – хранившихся при –20°С; 4 –
замороженных до –196°С; 5 – хранившихся при –196°С;
– быстрое восстановление; – медленное восстанов-
ление, – общее восстановление; * – достоверность
отличий по сравнению со свежевыделенными ЭПЧ
P < 0,05; # – достоверность отличий по сравнению c ЭПЧ
после замораживания-оттаивания, P < 0,05.
Fig. 8. Effect of different terms and storage temperatures on
the activity of rapidly and slowly reducing ABTS+ radical
HPE centers: 1 – fresh extract; 2 – frozen down to –20°C;
3 – stored at –20°C; 4 – frozen down to –196°C; 5 – stored
at –196°C; – rapid reduction, – slow reduction, –
total reduction; * – statistical significance of differences as
compared to fresh HPE, P < 0.05; # – statistical significance
of differences as compared to HPE after freeze-thawing
per se, P < 0.05.
unchanged, but the storage at –20°C results in an ad-
ditional reduction of ferric-reducing activity if compared
to freeze-thawing per se (Fig. 7). Decrease in ferric-
reducing activity during storage may be associated to
the reduction in HPE of low molecular antioxidant con-
tent, uric acid, in particular [14].
The analysis of ABTS+ radical kinetics reduction
demonstrated this activity as completely preserved af-
ter low temperature storage. The extract storage at
–196°C did not contribute in any additional changes in
the activity of rapidly and slowly reducing centers simi-
larly to the extract indices after freeze-thawing (Fig. 8).
The activity of rapidly reducing antioxidants in HPE
after storage at –20°C was higher, than the values,
obtained after freeze-thawing, the activity of slowly
reducing ABTS+ decreased (Fig. 8).
The HPE chelating activity after storage at –20°C
significantly increased as compared to their activity,
measured right after freeze-thawing. The HPE sto-
rage at –196°C made no additional changes in the value
of their chelating activity (Fig. 9).
The investigation of phenolic compound content in
HPE revealed no statistically significant changes in their
content after low temperature storage both at –20 and
–196°C if compared to the HPE after freeze-thawing
per se (Fig. 10).
The results obtained have shown that low tempera-
ture storage of HPE at –196°C caused no additional
changes of antioxidant activity as compared to freeze-
thawing per se.
During storage of HPE at –20°C we observed a
change in their capability to reduce ABTS+ radical and
to chelate ferric ions. These changes likely occur as a
result of proteolytic enzymes functioning at this tem-
perature, that is confirmed by gel chromatography data
about the rise in a relative content of low molecular
protein substances after long-term storage or macro-
molecule dissociation (Fig. 11).
Во
сс
та
на
вл
ив
аю
щ
ая
а
кт
ив
но
ст
ь,
эк
в.
м
М
а
ск
ор
ба
та
R
ed
uc
in
g
ac
tiv
ity
, e
q
m
M
a
sc
or
ba
te
И
нг
иб
ир
ов
ан
ие
п
ог
ло
щ
ен
ия
,
%
Ab
so
rb
tio
n
in
hi
bi
tio
n,
%
*
* #
*
*
*
*
*
#
*#
*
*
*
*
*
*
298 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
нию с их активностью, измеренной непосред-
ственно после замораживания-оттаивания. Хране-
ние ЭПЧ при –196°С дополнительно не вносило из-
менений в значение их хелатирующей активности
(рис. 9).
Исследование содержания в ЭПЧ фенольных
соединений показало, что низкотемпературное хра-
нение как при –20°С, так и при –196°С не приводит
к достоверному изменению их содержания по срав-
нению с ЭПЧ, которые были подвергнуты замора-
живанию-оттаиванию (рис. 10).
Полученные результаты показали, что низко-
температурное хранение ЭПЧ при –196°С не при-
водит к дополнительному изменению антиокси-
дантной активности по сравнению с процессом за-
мораживания-оттаивания.
В процессе хранения ЭПЧ при –20°С наблю-
дается изменение их способности восстанавливать
ABTS+-радикал и хелатировать ионы железа. Наи-
более вероятно, эти изменения происходят в ре-
зультате функционирования протеолитических
ферментов при этой температуре, что подтверж-
дается данными гель-хроматографии об увеличе-
нии относительного содержания низкомолекуляр-
ных белков после длительного хранения или диссо-
циации макромолекул (рис. 11).
Не наблюдалось изменения оптической плот-
ности при 260 нм в низкомолекулярных фракциях,
Рис. 9. Хелатирующая активность ЭПЧ: 1 – свежевы-
деленных; 2 – замороженных до –20°С; 3 – хранившихся
при –20°С; 4 – замороженных до –196°С; 5 – хранившихся
при –196°С; * – достоверность отличий по сравнению
со свежевыделенными ЭПЧ, P < 0,05; # – достоверность
отличий по сравнению c ЭПЧ после замораживания-
оттаивания, P < 0,05.
Fig. 9. HPE chelating activity: 1 – fresh extract; 2 – frozen
down to –20°C; 3 – stored at –20°C; 4 – frozen down to
–196°C; 5 – stored at –196°C; * – statistical significance of
differences as compared to fresh HPE, P < 0.05; # – statisti-
cal significance of differences as compared to HPE after
freeze-thawing per se, P < 0.05.
0
20
40
60
80
100
120
1 2 3 4
Рис. 10. Содержание фенолов в ЭПЧ: 1 – замороженных
до –20°С; 2 – хранившихся при –20°С; 3 – замороженных
до –196°С; 4 – хранившихся при –196°С; контроль –
свежевыделенный ЭПЧ; * – достоверность отличий по
сравнению со свежевыделенными ЭПЧ, P < 0,05.
Fig. 10. Phenol content in HPE: 1 – frozen down to –20°C;
2 – stored at –20°C; 3 – frozen down to –196°C; 4 – stored
at –196°C; control is fresh HPE; * – statistical significance
of differences as compared to fresh HPE, P < 0.05.
No changes were observed in optical density at
260 nm in low molecular fractions, isolated by gel chro-
matography method in HPE, stored at –20°C, enabling
to suggest that no decay process of low molecular
nucleotides occurred at –20°C.
0
5
10
15
20
25
1 2 3 4 5
С
вя
за
нн
ое
ж
ел
ез
о,
%
C
he
la
te
d
iro
n,
%
С
од
ер
жа
ни
е
ф
ен
ол
ов
, %
о
т
ко
нт
ро
ля
Ph
en
ol
c
on
te
nt
, %
o
f c
on
tro
l
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26
Рис. 11. Гель-хроматограмма ЭПЧ, хранившегося 12
месяцев при –20°С: – исходный ЭПЧ; – ЭПЧ, хра-
нившийся 3 суток при –20°C.
Fig. 11. Gel chromatography of HPE, stored for 12 months
at –20°C: – initial HPE; – HPE, stored for 3 days at –20°C.
С
од
ер
жа
ни
е
бе
лк
а,
%
Pr
ot
ei
n
co
nt
en
t,
%
Номер фракции
Fraction number
*
*
*#
*
* *
65
кДа/kDa
750
кДа/kDa
12
кДа/kDa
299 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
полученных методом гель-хроматографии в ЭПЧ,
хранившихся при –20°С, что позволяет высказать
предположение: при –20°С процесс распада низко-
молекулярных нуклеотидов не происходит.
Выводы
Таким образом, изменения антиоксидантной ак-
тивности ЭПЧ после хранения при –196°С обуслов-
лены только процессами, происходящими при
замораживании-оттаивании образцов. В процессе
хранения при –20°С наблюдаются дополнительные
изменения антиоксидантной активности по срав-
нению с результатами после замораживания-от-
таивания, связанные с протеканием окислительных
реакций, приводящих к потере низкомолекулярных
антиоксидантов, определяемых методом FRAP.
Кроме того, наблюдаются изменения, предполо-
жительно являющиеся результатом протекания
протеолитических реакций. Тем не менее хранение
ЭПЧ как при –196°С, так и при –20°С позволяет
сохранить высокую антиоксидантную активность
образцов в течение 12 месяцев, в то время как
при гипотермическом хранении ее значительное
снижение наблюдается после первой недели хра-
нения.
Conclusions
Thus, the changes in HPE antioxidant activity after
storage at –196°C are stipulated only by the processes,
occurring under samples’ freeze-thawing. During sto-
rage at –20°C there are observed the additional chan-
ges in antioxidant activity as compared to the results
after freeze-thawing per se, associated with proceed-
ing of oxidative reactions, resulting in a loss of low
molecular antioxidants, determined by the FRAP
method. In addition, there are noted the changes, pre-
sumably resulting from proteolytic reactions proceed-
ing. However, the HPE storage both at –196 and
–20°C enabled to preserve a high antioxidant activity
in samples after 12 months, meanwhile under hypo-
thermic storage its significant decrease was observed
during the 1st week of storage.
Литература
Розанова С.Л., Науменко Е.И., Розанова Е.Д., Нар-
дид О.А. Изменение антиоксидантных свойств экстрак-
тов плаценты человека после замораживания // Пробле-
мы криобиологии.– 2010.– Т. 20, №3.– С. 288–296.
Cao E., Chen Y., Cui Z., Forster P.R. Effect of freezing and
thawing rates on denaturation of proteins in aqueous solu-
tions // Biotechnol. Bioenerg.– 2003.– Vol. 82, N6.– P. 684–690.
Dinis T.C.P., Madeira V.M.C., Almeida L.M. Action of phenolic
derivates (acetoaminophen, salycilate, and 5-aminosalycilate)
asinhibitors of membrane lipid peroxidation and as peroxyl
radical scavengers // Arch. Biochem. Biophys.– 1994.–
Vol. 315, N1.– P. 161–169.
Gislefoss R.E., Grimsrud T.K., Morkrid L. Long-term stability
of serum components in the Janus Serum Bank // Scand. J.
Clin. Lab. Invest.– 2008.– Vol. 68, N3.– P. 402–409.
Harris D.A. Spectrophotometric assays // Spectrophotometry
& spectrofluorimetry.– Washington: IRL Press, 1987.– P. 49–
90.
Henriquez C., Aliaga C., Lissi E. Kinetics profiles in the
reaction of ABTS derived radicals with simple phenols and
polyphenols // J. Chil. Chem. Soc.– 2004.– Vol. 49, N1.– P. 74–
76.
Jordan G.M., Yoshikava S., Terao T. The aggregation of bo-
vine serum albumin in solution and in the solid state // J. Pharm.
Pharmacol.– 1994.– Vol. 46, N3.– P. 182–185.
Oyaizu M. Studies on product of browning reaction prepared
from glucose amine // Jpn. J. Nutr.– 1986.– Vol. 44.– P. 307–
315.
Phipps S.M., Sharaf M.H.M., Butterweck V. Assessing anti-
oxidant activity in botanicals and other dietary supplements //
Pharmacopeial Forum.– 2007.– Vol. 33, N4.– P. 810–814.
Re R., Pellegrini N., Proteggente A. et al. Antioxidant activity
applying an improved ABTS radical cation depolarization
assay // Free Radical Biology and Medicine.– 1999.– Vol. 26,
N9/10.– P. 1231–1237.
References
Rozanova S.L., Naumenko E.I., Rozanova E.D., Nardid O.A.
Change in antioxidant properties of human placenta extracts
after freezing // Problems of Cryobiology.– 2010.– Vol. 20,
N3.– P. 289–296.
Cao E., Chen Y., Cui Z., Forster P.R. Effect of freezing and
thawing rates on denaturation of proteins in aqueous solu-
tions // Biotechnol. Bioenerg.– 2003.– Vol. 82, N6.– P. 684–690.
Dinis T.C.P., Madeira V.M.C., Almeida L.M. Action of phenolic
derivates (acetoaminophen, salycilate, and 5-aminosalycilate)
asinhibitors of membrane lipid peroxidation and as peroxyl
radical scavengers // Arch. Biochem. Biophys.– 1994.–
Vol. 315, N1.– P. 161–169.
Gislefoss R.E., Grimsrud T.K., Morkrid L. Long-term stability
of serum components in the Janus Serum Bank // Scand. J.
Clin. Lab. Invest.– 2008.– Vol. 68, N3.– P. 402–409.
Harris D.A. Spectrophotometric assays // Spectrophotometry
& spectrofluorimetry.– Washington: IRL Press, 1987.– P. 49–
90.
Henriquez C., Aliaga C., Lissi E. Kinetics profiles in the
reaction of ABTS derived radicals with simple phenols and
polyphenols // J. Chil. Chem. Soc.– 2004.– Vol. 49, N1.– P. 74–
76.
Jordan G.M., Yoshikava S., Terao T. The aggregation of bo-
vine serum albumin in solution and in the solid state // J. Pharm.
Pharmacol.– 1994.– Vol. 46, N3.– P. 182–185.
Oyaizu M. Studies on product of browning reaction prepared
from glucose amine // Jpn. J. Nutr.– 1986.– Vol. 44.– P. 307–
315.
Phipps S.M., Sharaf M.H.M., Butterweck V. Assessing anti-
oxidant activity in botanicals and other dietary supplements //
Pharmacopeial Forum.– 2007.– Vol. 33, N4.– P. 810–814.
Re R., Pellegrini N., Proteggente A. et al. Antioxidant activity
applying an improved ABTS radical cation depolarization
assay // Free Radical Biology and Medicine.– 1999.– Vol. 26,
N9/10.– P. 1231–1237.
Sarciaux J.M., Mansour S., Hageman M.J., Nail S.L. Effect
of buffer composition and processing conditions on aggre-
gation of bovine IgG during freeze-drying // J. Pharm. Sci.--
1999.– Vol. 88, N12.– P. 1354–1361.
Shibasaki T., Odagiri E., Shizume K., Ling N. Corticotropinre-
leasing factor like activity in human placental extracts // J.
Clin. Endocrinol. Metab.– 1982, Vol. 55, N2.– P. 384–386.
Shinde V., Dhalwal K., Paradkar A.R. et al. Evaluation of in-
vitro antioxidant activity of human placental extract // Pharma-
cology online.– 2006.– Vol. 3.– P. 172–179.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
300 problems
of cryobiology
Vol. 21, 2011, №3
проблемы
криобиологии
Т. 21, 2011, №3
Sarciaux J.M., Mansour S., Hageman M.J., Nail S.L. Effect
of buffer composition and processing conditions on aggre-
gation of bovine IgG during freeze-drying // J. Pharm. Sci.--
1999.– Vol. 88, N12.– P. 1354–1361.
Shibasaki T., Odagiri E., Shizume K., Ling N. Corticotropinre-
leasing factor like activity in human placental extracts // J.
Clin. Endocrinol. Metab.– 1982, Vol. 55, N2.– P. 384–386.
Shinde V., Dhalwal K., Paradkar A.R. et al. Evaluation of in-
vitro antioxidant activity of human placental extract // Pharma-
cology online.– 2006.– Vol. 3.– P. 172–179.
Singleton V.L., Orthofer R., Lamuela-Raventos R.M. Analysis
of total phenols and oxidation substrates andantioxidants by
means of Folin-Ciocalteau reagent // Methods Enzymol.–
1999.– Vol. 299.– P. 152–177.
Tuckey N.P.L., Forster M.E., Gieseg S.P. Effects of rested
harvesting on muscle metabolite concentrations and K-values
in Chinook salmon (Oncorhynchus tshawytscha) fillets during
storage at 15°C // Journal of Food Science.– 2010.– Vol. 75,
N5.– P. C459–C464.
Поступила 05.07.2011
Рецензент Н.Г. Землянских
Singleton V.L., Orthofer R., Lamuela-Raventos R.M. Analysis
of total phenols and oxidation substrates andantioxidants by
means of Folin-Ciocalteau reagent // Methods Enzymol.–
1999.– Vol. 299.– P. 152–177.
Tuckey N.P.L., Forster M.E., Gieseg S.P. Effects of rested
harvesting on muscle metabolite concentrations and K-values
in Chinook salmon (Oncorhynchus tshawytscha) fillets during
storage at 15°C // Journal of Food Science.– 2010.– Vol. 75,
N5.– P. C459–C464.
Accepted 05.07.2011
11.
12.
13.
14.
15.
14.
15.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-44901 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T18:04:17Z |
| publishDate | 2011 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Розанова, С.Л. Розанова, Е.Д. Нардид, О.А. Карпенко, В.Г. 2013-06-06T17:43:30Z 2013-06-06T17:43:30Z 2011 Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после
 низкотемпературного и гипотермического хранения / С.Л. Розанова, Е.Д. Розанова, О.А. Нардид, В.Г. Карпенко // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 3. — С. 291-300. — Бібліогр.: 15 назв. — рос., англ. https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44901 57.043:577.121.7:611.013.85.085.23 Представлены экспериментальные данные, полученные при сравнительной оценке влияния гипотермического и
 низкотемпературного хранения на антиоксидантную активность экстрактов плаценты человека (ЭПЧ). Антиоксидантную
 активность определяли по способности восстанавливать трехвалентное железо и ABTS+-радикал, хелатировать ионы железа, а
 также по содержанию фенольных соединений. Показано, что при хранении ЭПЧ как в жидком азоте (–196°С), так и в морозильной
 камере (–20°С) в течение 12 месяцев антиоксидантная активность образцов остается на высоком уровне, а в условиях гипотермии
 (4°С) она сохраняется не более 7 дней. Представлено експериментальні дані, отримані при порівняльній оцінці впливу гіпотермічного та низькотемпературного
 зберігання на антиоксидантну активність екстрактів плаценти людини (ЕПЛ). Антиоксидантну активність визначали за здатністю
 відновлювати тривалентне залізо та ABTS+-радикал, хелатувати іони заліза та за вмістом фенольних сполук. Показано, що за
 умов зберігання ЕПЛ як у рідкому азоті (–196°С), так і у морозильній камері (–20°С) впродовж 12 місяців антиоксидантна
 активність зразків залишається на високому рівні, у той час як в умовах гіпотермії (4°С) вона зберігається не більше 7 днів. The experimental data, obtained under comparative evaluation of hypothermic and low temperature storage influence on human
 placenta extract (HPE) antioxidant activity have been presented. Antioxidant activity was assessed by capacity to reduce the ferric
 iron and ABTS+ radical, to chelate ferrous ions and by phenolic compound content. Twelve-month low temperature storage both in
 liquid nitrogen (–196°С) as well as in freezing chamber (–20°С) has been shown to preserve HPE antioxidant activity at a high level
 while during hypothermic storage (4°С) such an activity keeps up to 7 days. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Теоретическая и экспериментальная криобиология Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения Antioxidant Activity of Placenta Extracts After Low Temperature and Hypothermic Storage Article published earlier |
| spellingShingle | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения Розанова, С.Л. Розанова, Е.Д. Нардид, О.А. Карпенко, В.Г. Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| title | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения |
| title_alt | Antioxidant Activity of Placenta Extracts After Low Temperature and Hypothermic Storage |
| title_full | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения |
| title_fullStr | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения |
| title_full_unstemmed | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения |
| title_short | Антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения |
| title_sort | антиоксидантная активность экстрактов плаценты после низкотемпературного и гипотермического хранения |
| topic | Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| topic_facet | Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/44901 |
| work_keys_str_mv | AT rozanovasl antioksidantnaâaktivnostʹékstraktovplacentyposlenizkotemperaturnogoigipotermičeskogohraneniâ AT rozanovaed antioksidantnaâaktivnostʹékstraktovplacentyposlenizkotemperaturnogoigipotermičeskogohraneniâ AT nardidoa antioksidantnaâaktivnostʹékstraktovplacentyposlenizkotemperaturnogoigipotermičeskogohraneniâ AT karpenkovg antioksidantnaâaktivnostʹékstraktovplacentyposlenizkotemperaturnogoigipotermičeskogohraneniâ AT rozanovasl antioxidantactivityofplacentaextractsafterlowtemperatureandhypothermicstorage AT rozanovaed antioxidantactivityofplacentaextractsafterlowtemperatureandhypothermicstorage AT nardidoa antioxidantactivityofplacentaextractsafterlowtemperatureandhypothermicstorage AT karpenkovg antioxidantactivityofplacentaextractsafterlowtemperatureandhypothermicstorage |