Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации
У порівняльному аспекті вивчена експресія генів gata2 й ido у загальній суспензії й у виділених
 методом магнітного сортування фракціях стовбурових кровотворних і мезенхімальних клітин
 фетальної печінки мишей 14-ої й 18-ої діб гестації після кріоконсервування. Продемонстровано зниже...
Saved in:
| Published in: | Таврический медико-биологический вестник |
|---|---|
| Date: | 2012 |
| Main Authors: | , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/57294 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента
 криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации / А.Н. Гольцев, Т.Г. Дубрава, Е.Д. Луценко, М.В. Останков, Ю.А. Гаевская, Н.Н. Бабенко, А.Ю. Димитров // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 3, ч. 2 (59). — С. 81-83. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860238096169172992 |
|---|---|
| author | Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Луценко, Е.Д. Останков, М.В. Гаевская, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Димитров, А.Ю. |
| author_facet | Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Луценко, Е.Д. Останков, М.В. Гаевская, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Димитров, А.Ю. |
| citation_txt | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента
 криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации / А.Н. Гольцев, Т.Г. Дубрава, Е.Д. Луценко, М.В. Останков, Ю.А. Гаевская, Н.Н. Бабенко, А.Ю. Димитров // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 3, ч. 2 (59). — С. 81-83. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Таврический медико-биологический вестник |
| description | У порівняльному аспекті вивчена експресія генів gata2 й ido у загальній суспензії й у виділених
методом магнітного сортування фракціях стовбурових кровотворних і мезенхімальних клітин
фетальної печінки мишей 14-ої й 18-ої діб гестації після кріоконсервування. Продемонстровано зниження
рівня експресії генів gata2 й ido у клітинах фетальної печінки по мірі пролонгації строків гестації й
підвищення в клітинах фетальної печінки пізніх строків гестациї після кріоконсервування.
The expression rate of gata2 and ido genes was comparatively studied in general suspension and in
isolated by magnet sorting hemopoietic and mesenchymal stem cell fractions of fetal liver of the mice of the14th
and 18th gestation days after cryopreservation. There was demonstrated the expression rate of gata2 and
ido genes in fetal liver cells with the prolongation of gestation terms and rise in fetal liver cells of late gestation
terms after cryopreservation.
|
| first_indexed | 2025-12-07T18:26:39Z |
| format | Article |
| fulltext |
81
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
УДК 575.117.2
© Коллектив авторов, 2012.
УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ GATA-2 И IDO В КЛЕТКАХ
СТВОЛОВОГО КОМПАРТМЕНТА КРИОКОНСЕРВИРОВАННОЙ
ФЕТАЛЬНОЙ ПЕЧЕНИ РАЗНЫХ СРОКОВ ГЕСТАЦИИ
А.Н. Гольцев, Т.Г. Дубрава, Е.Д. Луценко, М.В. Останков, Ю.А. Гаевская, Н.Н. Бабенко,
А.Ю. Димитров
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, отдел криопатофизиологии и иммунологии
(руководитель – академик НАН Украины А.Н. Гольцев), г. Харьков.
EXPRESSION RATE OF GATA2AND IDO GENES IN CELLS OF STEM COMPARTMENT OF CRYOPRESERVED
FETAL LIVER OF DIFFERENT GESTATION TERMS
A.N. Goltsev, T.G. Dubrava, E.D. Lutsenko, M.V. Ostankov, Yu.A. Gaevskaya, N.N. Babenko, A.Yu. Dimitrov
SUMMARY
The expression rate of gata2 and ido genes was comparatively studied in general suspension and in
isolated by magnet sorting hemopoietic and mesenchymal stem cell fractions of fetal liver of the mice of the14 th
and 18th gestation days after cryopreservation. There was demonstrated the expression rate of gata2 and
ido genes in fetal liver cells with the prolongation of gestation terms and rise in fetal liver cells of late gestation
terms after cryopreservation.
РІВЕНЬ ЕКСПРЕСІЇ ГЕНІВ GATA-2 ТА IDO У КЛІТИНАХ СТОВБУРОВОГО КОМПАРТМЕНТУ
КРІОКОНСЕРВОВАНОЇ ФЕТАЛЬНОЇ ПЕЧІНКИ РІЗНИХ ТЕРМІНІВ ГЕСТАЦІЇ
А.М. Гольцев, Т.Г. Дубрава, О.Д. Луценко, М.В. Останков, Ю.О. Гаєвська, Н.М. Бабенко, О.Ю.
Димітров
РЕЗЮМЕ
У порівняльному аспекті вивчена експресія генів gata2 й ido у загальній суспензії й у виділених
методом магнітного сортування фракціях стовбурових кровотворних і мезенхімальних клітин
фетальної печінки мишей 14-ої й 18-ої діб гестації після кріоконсервування. Продемонстровано зниження
рівня експресії генів gata2 й ido у клітинах фетальної печінки по мірі пролонгації строків гестації й
підвищення в клітинах фетальної печінки пізніх строків гестациї після кріоконсервування.
Ключевые слова: экспрессия генов, стволовая кроветворная клетка, стволовая мезенхимальная
клетка, фетальная печень.
В общем спектре препаратов клеточной и
тканевой терапии особое место занимает фетальная
печень [2, 5]. Ее уникальный терапевтический
потенциал продемонстрирован в самых различных
ситуациях. При этом в сравнительном аспекте редко
анализируются результаты эффективности
применения фетальной печени разных сроков
гестации. Важность такого анализа заключается в том,
что в процессе эмбриогенеза существенно меняются
структурные и функциональные характеристики
многих составляющих компонентов фетальной
печени, но, прежде всего стволовых кроветворных и
мезенхимальных клеток. Именно эти ключевые
компоненты фетальной печени рассматриваются как
потенциальные клетки-корректоры гемо- и
иммунопоэза при лечении аутоиммунных патологий
[7, 12].
Значимость зависимости терапевтического
эффекта клеток фетальной печени от срока гестации
удваивается еще и в связи с тем, что обязательным
компонентом технологического процесса
применения фетального материала, включая и
печень, в клинической практике является его
криоконсервирование [3]. Характер влияния
криоконсервирования на биообъект строго зависит
от его исходного состояния. Действительно,
продемонстрирована зависимость сохранности
стволовых кроветворных клеток от фазы клеточного
цикла, уровня дифференцировки, предобработки
цитостатиками и т.д. [1]. Вместе с тем, в последнее
время акцентируется внимание на необходимости
аттестации после криоконсервирования геномного
и постгеномного профиля клеток стволового
компартмента [6, 13]. С точки зрения первостепенной
необходимости коррекции при жестких
аутоиммунных заболеваниях гемопоэтического
плацдарма и иммунной системы, особую
значимости представляет оценка состояния
соответственно гена gata2 в стволовых кроветворных
и ido в мезенхимальных клетках.
Целью данной работы было провести оценку
уровня экспрессии генов gata2 и ido в клетках
стволового компартмента фетальной печени разных
сроков гестации до и после криоконсервирования.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектом исследования были
нефракционированные клетки фетальной печени
мышей линии СВА/Н 14-х и 18-х суток гестации и
выделенные из них на магнитном сортере (BDTM
82
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2012, том 15, № 3, ч. 2 (59)
Imagnet) фракции с признаками стволовых
кроветворных и мезенхимальных клеток. Фракцию
стволовых кроветворных клеток получали методом
негативной селекции с помощью Biotinylated Mouse
Lineage Depletion Cocktail (Lin-) и Streptovidin
Magnetic Particles-DM и последующей позитивной
селекции с использованием CD117 MicroBeads;
фракцию мезенхимальных стволовых клеток -
методом позитивной селекции с использованием
CD105 Multisort Kit (Miltenyi Biotec).
Нефракционированную суспензию клеток
фетальной печени криоконсервировали в пластиковых
ампулах Nunc (Германия) в объеме 1,8 мл с
концентрацией 2х106кл/мл; выделенные на магнитном
сортере фракции клеток-предшественников - в
криосоломинках (minitubes d - 0,25 mm, Германия) в
объеме 30 мкл с той же концентрацией
криоконсервировали под защитой 10%
диметилсульфоксида по двухэтапной программе [2].
Уровень экспрессии генов gata2 и ido в цельных
и фракционированных суспензиях фетальной печени
оценивали методом полимеразной цепной реакции
с этапом обратной транскрипции [4] по наличию
ампликонов этих генов. Общую РНК выделяли с
помощью набора Diatom RNA Prep 100 (Isogene Lab,
Ltd, Россия) из 1х105 клеток каждого образца.
Полученную смесь нуклеиновых кислот
обрабатывали ДНКазой I согласно инструкции
производителя (ООО «Синтол», Россия). Реакцию
обратной транскрипции ставили с использованием
random-олигонуклеотидов и ревертазы (М-Мlv)
(НИИЭ МЗ РФ, «Реверта L» (Россия)). Праймеры к
исследуемым генам были сконструированы на
основе базы данных «GenBank» (NCBI BLAST, USA):
gata2 - NM_008090.5 (fragment length 272 n.p.), ido –
NM_008324.1 (fragment length 342 n.p.) и
синтезированы в АОЗТ «Медбиосервис» (Киев).
Детекцию продуктов амплификации проводили
методом капиллярного электрофореза в чип-
анализаторе «Agilent 2100» (США). Результаты были
нормированы по отношению к показателю
экспрессии гена beta actin (housekeeping gene)
(NM_007393.3). Отрицательным контролем была
реакционная смесь без кДНК. Полученные данные
статистически обрабатывали по методу Стьюдента с
применением компьютерной программы МS Exсel.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Выяснение характера влияния
криоконсервирования на генетический профиль
клеток стволового компартмента представляет
интерес с точки зрения перспектив применения и
прогноза терапевтической активности
криоконсервированных клеток фетальной печени
разных сроков гестации.
Выбор генов gata2 и iдо обусловлен тем, что ген
gata2 играет важную роль в раннем гемопоэзе и
контролирует самоподдержание стволовых
кроветворных клеток [8]. Ген iдо контролирует
наработку фермента индоламин 2,3-диоксигеназы,
участвующего в активации супрессорного звена
иммунитета [9].
Как видно (рис.1А), с увеличением срока
гестации (с 14-х по 18-е сутки) содержание
транскриптов гена gata2 в общем пуле нативных
клеток снижалось почти в 2 раза. В выделенной
фракции Lin-CD117+ отмечена такая же тенденция
изменения по срокам гестации экспрессии гена
gata2 , но с еще большими различиями.
Криоконсервирование же в обеих суспензиях
вызывало диаметрально противоположный эффект,
а именно, снижение содержания транскриптов в
клетках 14 суток гестации и увеличение - 18 суток
гестации. Важно заметить, что в выделенной фракции
Lin-CD117+ клеток 18 суток гестации была отмечена
максимальная стимуляция экспрессии гена gata2 в
сравнении со всеми исследуемыми образцами, в том
числе и нативными 14-х суток гестации. То есть, в
отношении гена gata2 в клетках фетальной печени
18 суток гестации, криоконсервирование проявляло
««ревертирующий» эффект. Максимальная степень
экспрессии гена gata2 в выделенной фракции
стволовых кроветворных клеток этого срока гестации
может быть обусловлена его активацией в отсутствии
акцессорно-регуляторных клеток микроокружения.
Общая тенденция изменения уровня экспрессии
гена ido (рис.1Б) в клетках фетальной печени
совпадала с таковой у гена gata2. В нативных
нефракционированных суспензиях и выделенных
CD105+ фракциях содержание транскриптов гена ido
с увеличением срока гестации также существенно
снижалось. Похоже, что такой характер изменения
экспрессии гена ido может быть связан с
обеспечением фетальной печенью иммунного
профиля организма на той или иной стадии
беременности. Факт активации материнских клеток-
эффекторов в терминальные сроки пренатального
периода есть следствием снижения супрессорной
функции Т-регуляторных клеток, что в свою очередь
может быть результатом минимизации продукции
фермента индоламин 2, 3-диоксигеназы фетальной
печенью [10, 11]. В пользу этого свидетельствуют и
экспериментальные данные, что инактивация
фермента 1-метилтриптофаном приводила к
отторжению эмбриона [11].
Важно заметить, что после криоконсервирования
ингибиция экспрессии гена ido как в
нефракционированных так и фракционированных
клетках фетальной печени 14 суток гестации (рис.1Б)
была выражена в значительно большей степени, чем
гена gata2. Вместе с тем кратность увеличения
экспрессии гена ido после криоконсервирования в
клетках фетальной печени 18 суток гестации была
менее выражена, чем у gata2.
83
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
Рис.1 Полуколичественный анализ экспрессии генов gata2 (a) и ido (б) в нефракционированной
суспензии клеток фетальной печени и фракциях стволовых кроветворных и мезенхимальных
клеток до и после криоконсервирования. Примечание: КФП-14 и КФП-18 – клетки фетальной печени
14 и 18 суток гестации.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
КФП-14 КФП-18 КФП-14 КФП-18
С
од
ер
ж
ан
ие
т
ра
нс
кр
ип
то
в
ga
ta
2,
lg
р
аз
ве
де
ни
я
Д
Н
К
натив крио
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
КФП-14 КФП-18 КФП-14 КФП-18
С
од
ер
ж
ан
ие
т
ра
нс
кр
ип
то
в
ga
ta
2,
lg
р
аз
ве
де
ни
я
Д
Н
К
натив крио
а б
Нефракционированная
суспензия
Нефракционированная
суспензия
Lin-CD117+
фракция
CD105+
фракция
Существенно, что общие закономерности
изменения уровня экспрессии исследуемых генов
имели место даже при некоторых различиях условий
криоконсервирования нефракционированной
суспензии и выделенных фракций стволовых клеток.
ВЫВОДЫ
По мере пролонгации сроков гестации уровень
экспрессии генов gata2 и ido в клетках стволового
компартмента фетальной печени снижался. После
криоконсервирования уровень экспрессии
исследуемых генов в фетальной печени 18 суток
гестации существенно повышался, превосходя
таковой даже в нативном материале ранних сроков
гестации. Данный факт подчеркивает способность
криоконсервирования реализовать
«ревертирующий» эффект в отношении клеток
фетальной печени поздних сроков гестации, что
расширяет возможности использования такого
материала в клинической практике.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гольцев А.Н. Влияние факторов
криоконсервирования на иммунологические
свойства кроветворных клеток костного мозга:
Автореф. дис.. док.мед.наук.-Харьков. - 1988. – 35 с.
2. Гольцев А.Н. Криоконсервированный
аллогенный костный мозг – новая мишень
иммуномодулирующей активности клеток
фетальной печени / Гольцев А.Н., Останкова Л.В.,
Мацевитая И.Ю. [и др.] // Пробл. криобиологии.-
2008.- Т.18, № 3.- С. 313-315
3. Гольцев А.Н. Особенности влияния
криоконсервирования на функциональный
потенциал стволовых кроветворных клеток
фетальной печени разных сроков гестации / А.Н.
Гольцев, Т.Г. Дубрава, Л.В. Останкова [и др.] // Пробл.
криобиологии.- 2009.- Т. 9, №2.- C.186-199.
4. Молекулярная клиническая диагностика / Под.
ред.. Херрингтона С., Макги Дж. 1999, Москва: Мир.-
558 c.
5. Сухих Г.Т. Перспективы использования
фетальных стволовых/прогениторных клеток
человека в клеточной терапии / Г.Т. Сухих, В.В.
Малайцев, И.М. Богданова // Клеточные технологии
в биологии и медицине. – 2008. - №8. – С.5-13.
6. Фуллер Б. Охлаждение, криоконсервирование
и экспрессия генов в клетках млекопитающих / Б.
Фуллер, К. Грин, В.И. Грищенко // Пробл.
криобиологии. – 2004. - №3. – С.58-71.
7. Goltsev A.N.Peculiarities of functional state
modulation of genetic apparatus of fetal liver cells with
stemness characteristics after cryopreservation / A.N.
Goltsev, E.D. Lutsenko, A.Yu. Dimitrov [et al] //
Cryoletters.- 2011.- Vol.32, N6.- P.543-544.
8. Gudmundsson K.O., Thorsteinsson L.,
Sigurjonsson O.E. Gene expression analysis of
hematopoietic progenitor cells identifies Dlg7 as a
potential stem cell gene // Stem Cells.- 2007.- Vol.25, №6.-
P.1498-1506.
9. Mellor A.L. Indoleamine 2,3-dioxygenase,
immunosupression and pregnancy / A.L. Mellor, P.
Chandler, L.G. Kook [et al.] // J. Rep. Immunology.- 2002.-
, №57.- P.143-150.
10. Mellor L.A., Munn H.D. Tryptophan catabolism
and T-cell tolerance: immunosupression by starvation?
// Immunology Today.- 1999.- Vol.20, № 10.- P.469-473.
11. Munn D.H. Prevential of allogeneic fetal rejection by
tryptophan catabolism / D.H. Munn, M. Zhou, J.T. Attwood
[et al.] // Scince.-1998.- Vol.281, № 5390.- P.1191-1193.
12. Le Blanc K. Mesenchymal stem cells for treatment
of steroid-resistant, severe, acute graft-versus-host
disease: a phase II study / K. Le Blanc, F. Frassoni, L. Ball
[et al.] // Lancet.- 2008.- 371.- P.1579-1586.
13. Storey K.B. Strategies for exploration of freeze
responsive gene expression: advances in vertebrate
freeze tolerance // Cryobiology.- 2004.- 48.- P.134-145.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-57294 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 2070-8092 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T18:26:39Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Луценко, Е.Д. Останков, М.В. Гаевская, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Димитров, А.Ю. 2014-03-07T15:51:40Z 2014-03-07T15:51:40Z 2012 Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента
 криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации / А.Н. Гольцев, Т.Г. Дубрава, Е.Д. Луценко, М.В. Останков, Ю.А. Гаевская, Н.Н. Бабенко, А.Ю. Димитров // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 3, ч. 2 (59). — С. 81-83. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. 2070-8092 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/57294 575.117.2 У порівняльному аспекті вивчена експресія генів gata2 й ido у загальній суспензії й у виділених
 методом магнітного сортування фракціях стовбурових кровотворних і мезенхімальних клітин
 фетальної печінки мишей 14-ої й 18-ої діб гестації після кріоконсервування. Продемонстровано зниження
 рівня експресії генів gata2 й ido у клітинах фетальної печінки по мірі пролонгації строків гестації й
 підвищення в клітинах фетальної печінки пізніх строків гестациї після кріоконсервування. The expression rate of gata2 and ido genes was comparatively studied in general suspension and in
 isolated by magnet sorting hemopoietic and mesenchymal stem cell fractions of fetal liver of the mice of the14th
 and 18th gestation days after cryopreservation. There was demonstrated the expression rate of gata2 and
 ido genes in fetal liver cells with the prolongation of gestation terms and rise in fetal liver cells of late gestation
 terms after cryopreservation. ru Кримський науковий центр НАН України і МОН України Таврический медико-биологический вестник Оригинальные статьи Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации Рівень експресії генів GATA-2 та IDO у клітинах стовбурового компартменту кріоконсервованої фетальної печінки різних термінів гестації Expression rate of GATA-2 and IDO genes in cells of stem compartment of cryopreserved fetal liver of different gestation terms Article published earlier |
| spellingShingle | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Луценко, Е.Д. Останков, М.В. Гаевская, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Димитров, А.Ю. Оригинальные статьи |
| title | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации |
| title_alt | Рівень експресії генів GATA-2 та IDO у клітинах стовбурового компартменту кріоконсервованої фетальної печінки різних термінів гестації Expression rate of GATA-2 and IDO genes in cells of stem compartment of cryopreserved fetal liver of different gestation terms |
| title_full | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации |
| title_fullStr | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации |
| title_full_unstemmed | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации |
| title_short | Уровень экспрессии генов GATA-2 и IDO в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации |
| title_sort | уровень экспрессии генов gata-2 и ido в клетках стволового компартмента криоконсервированной фетальной печени разных сроков гестации |
| topic | Оригинальные статьи |
| topic_facet | Оригинальные статьи |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/57294 |
| work_keys_str_mv | AT golʹcevan urovenʹékspressiigenovgata2iidovkletkahstvolovogokompartmentakriokonservirovannoifetalʹnoipečeniraznyhsrokovgestacii AT dubravatg urovenʹékspressiigenovgata2iidovkletkahstvolovogokompartmentakriokonservirovannoifetalʹnoipečeniraznyhsrokovgestacii AT lucenkoed urovenʹékspressiigenovgata2iidovkletkahstvolovogokompartmentakriokonservirovannoifetalʹnoipečeniraznyhsrokovgestacii AT ostankovmv urovenʹékspressiigenovgata2iidovkletkahstvolovogokompartmentakriokonservirovannoifetalʹnoipečeniraznyhsrokovgestacii AT gaevskaâûa urovenʹékspressiigenovgata2iidovkletkahstvolovogokompartmentakriokonservirovannoifetalʹnoipečeniraznyhsrokovgestacii AT babenkonn urovenʹékspressiigenovgata2iidovkletkahstvolovogokompartmentakriokonservirovannoifetalʹnoipečeniraznyhsrokovgestacii AT dimitrovaû urovenʹékspressiigenovgata2iidovkletkahstvolovogokompartmentakriokonservirovannoifetalʹnoipečeniraznyhsrokovgestacii AT golʹcevan rívenʹekspresíígenívgata2taidouklítinahstovburovogokompartmentukríokonservovanoífetalʹnoípečínkiríznihtermínívgestacíí AT dubravatg rívenʹekspresíígenívgata2taidouklítinahstovburovogokompartmentukríokonservovanoífetalʹnoípečínkiríznihtermínívgestacíí AT lucenkoed rívenʹekspresíígenívgata2taidouklítinahstovburovogokompartmentukríokonservovanoífetalʹnoípečínkiríznihtermínívgestacíí AT ostankovmv rívenʹekspresíígenívgata2taidouklítinahstovburovogokompartmentukríokonservovanoífetalʹnoípečínkiríznihtermínívgestacíí AT gaevskaâûa rívenʹekspresíígenívgata2taidouklítinahstovburovogokompartmentukríokonservovanoífetalʹnoípečínkiríznihtermínívgestacíí AT babenkonn rívenʹekspresíígenívgata2taidouklítinahstovburovogokompartmentukríokonservovanoífetalʹnoípečínkiríznihtermínívgestacíí AT dimitrovaû rívenʹekspresíígenívgata2taidouklítinahstovburovogokompartmentukríokonservovanoífetalʹnoípečínkiríznihtermínívgestacíí AT golʹcevan expressionrateofgata2andidogenesincellsofstemcompartmentofcryopreservedfetalliverofdifferentgestationterms AT dubravatg expressionrateofgata2andidogenesincellsofstemcompartmentofcryopreservedfetalliverofdifferentgestationterms AT lucenkoed expressionrateofgata2andidogenesincellsofstemcompartmentofcryopreservedfetalliverofdifferentgestationterms AT ostankovmv expressionrateofgata2andidogenesincellsofstemcompartmentofcryopreservedfetalliverofdifferentgestationterms AT gaevskaâûa expressionrateofgata2andidogenesincellsofstemcompartmentofcryopreservedfetalliverofdifferentgestationterms AT babenkonn expressionrateofgata2andidogenesincellsofstemcompartmentofcryopreservedfetalliverofdifferentgestationterms AT dimitrovaû expressionrateofgata2andidogenesincellsofstemcompartmentofcryopreservedfetalliverofdifferentgestationterms |