Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему
Проведено комплексное морфологическое и иммуногистохимиче- ское исследование придатков матки у 20 женщин с генетической предрас- положенностью к развитию рака яичников (РЯ) и 55 больных РЯ. У 60,0% женщин с высоким риском РЯ выявлена экспрессия онкобелка Е6 вируса па- пилломы человека (ВПЧ)16 и1...
Saved in:
| Published in: | Онкологія |
|---|---|
| Date: | 2011 |
| Main Authors: | , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
2011
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/58974 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему / Е.А. Билык, Л.Г. Бучинская, Л.З. Полищук, Л.А. Проскурня, Т. Пеёвич // Онкологія. — 2011. — Т. 13, № 3. — С. 197-2002. — Бібліогр.: 24 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-58974 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Билык, Е.А. Бучинская, Л.Г. Полищук, Л.З. Проскурня, Л.А. Пеёвич, Т. 2014-04-03T13:59:29Z 2014-04-03T13:59:29Z 2011 Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему / Е.А. Билык, Л.Г. Бучинская, Л.З. Полищук, Л.А. Проскурня, Т. Пеёвич // Онкологія. — 2011. — Т. 13, № 3. — С. 197-2002. — Бібліогр.: 24 назв. — рос. https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/58974 Проведено комплексное морфологическое и иммуногистохимиче- ское исследование придатков матки у 20 женщин с генетической предрас- положенностью к развитию рака яичников (РЯ) и 55 больных РЯ. У 60,0% женщин с высоким риском РЯ выявлена экспрессия онкобелка Е6 вируса па- пилломы человека (ВПЧ)16 и18 типов в эпителии маточных труб, поверх- ностном эпителии яичников, гранулезных клетках фолликулов, эпителии фолликулярных кист и эндотелии сосудов. У 16,3% больных РЯ установлено наличие вирусного онкобелка в опухолевых клетках. Экспрессия опухолево- го супрессора р53 отсутствовала в ткани инфицированных ВПЧ яичников женщин с высоким риском РЯ и была достоверно ниже в ВПЧ-позитивном РЯ по сравнению с ВПЧ-негативными опухолями. Предполагается, что па- пилломавирусная инфекция может являться дополнительным экзогенным фактором злокачественной трансформации эпителия яичников. Ключевые слова: рак яичника, онкобелок Е6, вирус папилломы человека, р53, генетическая предрасположенность к раку. Complex morphological and immunohisto chemical study of adnexa uteri in 20 women with genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55 OC patients was carried out. The presence of HPV 16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial cells was revealed in 60% of women at high risk of developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein. Expression of tumor suppressor protein p53 was absent in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk of developing ovarian cancer and was significantly lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative tumors. It is assumed that papillomavirus infection can be an addition exogenous inductor of malignant transformation of ovarian epithelium. Complex morphological and immunohisto chemical study of adnexa uteri in 20 women with genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55 OC patients was carried out. The presence of HPV 16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial cells was revealed in 60% of women at high risk of developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein. Expression of tumor suppressor protein p53 was absent in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk of developing ovarian cancer and was significantly lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative tumors. It is assumed that papillomavirus infection can be an addition exogenous inductor of malignant transformation of ovarian epithelium.Complex morphological and immunohisto chemical study of adnexa uteri in 20 women with genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55 OC patients was carried out. The presence of HPV 16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial cells was revealed in 60% of women at high risk of developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein. Expression of tumor suppressor protein p53 was absent in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk of developing ovarian cancer and was significantly lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative tumors. It is assumed that papillomavirus infection can be an addition exogenous inductor of malignant transformation of ovarian epithelium.Complex morphological and immunohisto chemical study of adnexa uteri in 20 women with genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55 OC patients was carried out. The presence of HPV 16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial cells was revealed in 60% of women at high risk of developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein. Expression of tumor suppressor protein p53 was absent in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk of developing ovarian cancer and was significantly lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative tumors. It is assumed that papillomavirus infection can be an addition exogenous inductor of malignant transformation of ovarian epithelium. Key Words: ovarian cancer, oncoprotein Е6, human papillomavirus, р53, genetic susceptibility to cancer. ru Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького Онкологія Оригинальные исследования Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему Human Papillomavirus Oncoprotein E6 Expression In Epithelium Of The Uterine Appendages With Ovarian Cancer And Genetic Predisposition To It Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему |
| spellingShingle |
Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему Билык, Е.А. Бучинская, Л.Г. Полищук, Л.З. Проскурня, Л.А. Пеёвич, Т. Оригинальные исследования |
| title_short |
Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему |
| title_full |
Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему |
| title_fullStr |
Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему |
| title_full_unstemmed |
Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему |
| title_sort |
экспрессия онкобелка е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему |
| author |
Билык, Е.А. Бучинская, Л.Г. Полищук, Л.З. Проскурня, Л.А. Пеёвич, Т. |
| author_facet |
Билык, Е.А. Бучинская, Л.Г. Полищук, Л.З. Проскурня, Л.А. Пеёвич, Т. |
| topic |
Оригинальные исследования |
| topic_facet |
Оригинальные исследования |
| publishDate |
2011 |
| language |
Russian |
| container_title |
Онкологія |
| publisher |
Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького |
| format |
Article |
| title_alt |
Human Papillomavirus Oncoprotein E6 Expression In Epithelium Of The Uterine Appendages With Ovarian Cancer And Genetic Predisposition To It |
| description |
Проведено комплексное морфологическое и иммуногистохимиче-
ское исследование придатков матки у 20 женщин с генетической предрас-
положенностью к развитию рака яичников (РЯ) и 55 больных РЯ. У 60,0%
женщин с высоким риском РЯ выявлена экспрессия онкобелка Е6 вируса па-
пилломы человека (ВПЧ)16 и18 типов в эпителии маточных труб, поверх-
ностном эпителии яичников, гранулезных клетках фолликулов, эпителии
фолликулярных кист и эндотелии сосудов. У 16,3% больных РЯ установлено
наличие вирусного онкобелка в опухолевых клетках. Экспрессия опухолево-
го супрессора р53 отсутствовала в ткани инфицированных ВПЧ яичников
женщин с высоким риском РЯ и была достоверно ниже в ВПЧ-позитивном
РЯ по сравнению с ВПЧ-негативными опухолями. Предполагается, что па-
пилломавирусная инфекция может являться дополнительным экзогенным
фактором злокачественной трансформации эпителия яичников. Ключевые слова: рак яичника,
онкобелок Е6, вирус папилломы
человека, р53, генетическая
предрасположенность к раку.
Complex morphological and immunohisto
chemical study of adnexa uteri in 20 women with
genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55
OC patients was carried out. The presence of HPV
16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian
tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of
follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial
cells was revealed in 60% of women at high risk of
developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients
were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein.
Expression of tumor suppressor protein p53 was absent
in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk
of developing ovarian cancer and was significantly
lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative
tumors. It is assumed that papillomavirus infection
can be an addition exogenous inductor of malignant
transformation of ovarian epithelium. Complex morphological and immunohisto
chemical study of adnexa uteri in 20 women with
genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55
OC patients was carried out. The presence of HPV
16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian
tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of
follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial
cells was revealed in 60% of women at high risk of
developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients
were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein.
Expression of tumor suppressor protein p53 was absent
in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk
of developing ovarian cancer and was significantly
lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative
tumors. It is assumed that papillomavirus infection
can be an addition exogenous inductor of malignant
transformation of ovarian epithelium.Complex morphological and immunohisto
chemical study of adnexa uteri in 20 women with
genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55
OC patients was carried out. The presence of HPV
16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian
tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of
follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial
cells was revealed in 60% of women at high risk of
developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients
were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein.
Expression of tumor suppressor protein p53 was absent
in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk
of developing ovarian cancer and was significantly
lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative
tumors. It is assumed that papillomavirus infection
can be an addition exogenous inductor of malignant
transformation of ovarian epithelium.Complex morphological and immunohisto
chemical study of adnexa uteri in 20 women with
genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55
OC patients was carried out. The presence of HPV
16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian
tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of
follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial
cells was revealed in 60% of women at high risk of
developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients
were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein.
Expression of tumor suppressor protein p53 was absent
in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk
of developing ovarian cancer and was significantly
lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative
tumors. It is assumed that papillomavirus infection
can be an addition exogenous inductor of malignant
transformation of ovarian epithelium. Key Words: ovarian cancer, oncoprotein Е6,
human papillomavirus, р53, genetic susceptibility
to cancer.
|
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/58974 |
| citation_txt |
Экспрессия онкобелка Е6 вируса папилломы человека в эпителии придатков матки при раке яичника и генетической предрасположенности к нему / Е.А. Билык, Л.Г. Бучинская, Л.З. Полищук, Л.А. Проскурня, Т. Пеёвич // Онкологія. — 2011. — Т. 13, № 3. — С. 197-2002. — Бібліогр.: 24 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT bilykea ékspressiâonkobelkae6virusapapillomyčelovekavépiteliipridatkovmatkiprirakeâičnikaigenetičeskoipredraspoložennostiknemu AT bučinskaâlg ékspressiâonkobelkae6virusapapillomyčelovekavépiteliipridatkovmatkiprirakeâičnikaigenetičeskoipredraspoložennostiknemu AT poliŝuklz ékspressiâonkobelkae6virusapapillomyčelovekavépiteliipridatkovmatkiprirakeâičnikaigenetičeskoipredraspoložennostiknemu AT proskurnâla ékspressiâonkobelkae6virusapapillomyčelovekavépiteliipridatkovmatkiprirakeâičnikaigenetičeskoipredraspoložennostiknemu AT peevičt ékspressiâonkobelkae6virusapapillomyčelovekavépiteliipridatkovmatkiprirakeâičnikaigenetičeskoipredraspoložennostiknemu AT bilykea humanpapillomavirusoncoproteine6expressioninepitheliumoftheuterineappendageswithovariancancerandgeneticpredispositiontoit AT bučinskaâlg humanpapillomavirusoncoproteine6expressioninepitheliumoftheuterineappendageswithovariancancerandgeneticpredispositiontoit AT poliŝuklz humanpapillomavirusoncoproteine6expressioninepitheliumoftheuterineappendageswithovariancancerandgeneticpredispositiontoit AT proskurnâla humanpapillomavirusoncoproteine6expressioninepitheliumoftheuterineappendageswithovariancancerandgeneticpredispositiontoit AT peevičt humanpapillomavirusoncoproteine6expressioninepitheliumoftheuterineappendageswithovariancancerandgeneticpredispositiontoit |
| first_indexed |
2025-11-25T20:20:14Z |
| last_indexed |
2025-11-25T20:20:14Z |
| _version_ |
1850522855145472000 |
| fulltext |
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß
197Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 3 • 2 0 1 1
ВВЕДЕНИЕ
Злокачественные новообразования яичника вслед-
ствие их тяжелого клинического течения и высокой
смертности больных остаются одной из важных про-
блем онкогинекологии практически во всех странах
мира [13]. В последнее десятилетие решение вопро-
сов этиологии, ранней диагностики и профилактики
рака яичника (РЯ) связывают в первую очередь с ме-
дико-генетическими исследованиями, направленны-
ми на изучение генетической предрасположенности
к развитию злокачественного процесса в яичниках
[4]. Согласно современным представлениям, наслед-
ственный фактор риска развития РЯ, 5–10% случа-
ев которого обусловлены мутациями в генах BRCA1 и
BRCA2, является одним из наиболее значимых [1, 17].
Кроме того, наличие в родословной пробанда 2 род-
ственниц I степени родства, больных РЯ, также повы-
шает риск возникновения новообразований яични-
ков у членов этой семьи [19]. Следует отметить, что в
США и некоторых странах Европы наличие мутаций
в генах BRCA1/2 и отягощенность семейного анамне-
за по раку молочной железы (РМЖ) и яичника явля-
ются основанием для профилактической сальпинго-
овариоэктомии [12].
В то же время этиопатогенез РЯ изучен еще не-
достаточно: открытым остается вопрос о значении и
соотношении наследственных, а также внешнесре-
довых факторов в развитии этого новообразования.
Иccледование, проведенное на культурах клеток по-
верхностного эпителия яичника женщин с генетиче-
ской предрасположенностью к РЯ, показало наличие
тканеспецифической генетической нестабильности
этих клеток и высокую их чувствительность к алки-
лирующим агентам, в частности митомицину С [20].
По мнению авторов, эти особенности обусловлива-
ют повышенную восприимчивость поверхностного
эпителия яичника к действию внешнесредовых фак-
торов, в том числе и вирусной природы.
В настоящее время установлена этиологическая
связь ВПЧ с развитием рака шейки матки (РШМ)
и других аногенитальных опухолей. Трансформиру-
ющее влияние онкогенных типов ВПЧ (16, 18, 31,
33, 35, 39, 45 и др.) обеспечивается функциониро-
ванием онкогенов Е6 и Е7 [18]. Продукты этих ге-
нов нарушают функции клеточных белков, являю-
щихся ключевыми регуляторами клеточного цикла.
Так, онкобелок Е6 связывает белок р53, что приво-
дит к деградации последнего путем убиквитин-за-
висимого протеолиза, следствием чего является на-
рушение механизмов, обеспечивающих контроль
пролиферации, апоптоза и репарации ДНК. Кро-
ме того, взаимодействие белка Е6 с теломеразой
также способствует повышению пролиферативной
активности клеток. Механизм действия онкобелка
Е7 связан с функциональной инактивацией опухо-
левого супрессора pRb, в результате чего высвобож-
дается транскрипционный фактор E2F, активиру-
ющий гены, белковые продукты которых стимули-
руют вход клетки в S-фазу клеточного цикла [18].
Данные о наличии вирусных последовательностей
в клетках РЯ не многочисленны, а вопрос о значе-
нии ВПЧ в развитии РЯ остается спорным. Мно-
гие ученые не исключают роли папилломавирусно-
го инфицирования в патогенезе этого новообразо-
вания [2, 3, 10, 24]. Исследования инфицирования
ЭКСПРЕССИЯ ОНКОБЕЛКА
Е6 ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ
ЧЕЛОВЕКА В ЭПИТЕЛИИ
ПРИДАТКОВ МАТКИ ПРИ РАКЕ
ЯИЧНИКА И ГЕНЕТИЧЕСКОЙ
ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К НЕМУ
Резюме. Проведено комплексное морфологическое и иммуногистохимиче-
ское исследование придатков матки у 20 женщин с генетической предрас-
положенностью к развитию рака яичников (РЯ) и 55 больных РЯ. У 60,0%
женщин с высоким риском РЯ выявлена экспрессия онкобелка Е6 вируса па-
пилломы человека (ВПЧ)16 и18 типов в эпителии маточных труб, поверх-
ностном эпителии яичников, гранулезных клетках фолликулов, эпителии
фолликулярных кист и эндотелии сосудов. У 16,3% больных РЯ установлено
наличие вирусного онкобелка в опухолевых клетках. Экспрессия опухолево-
го супрессора р53 отсутствовала в ткани инфицированных ВПЧ яичников
женщин с высоким риском РЯ и была достоверно ниже в ВПЧ-позитивном
РЯ по сравнению с ВПЧ-негативными опухолями. Предполагается, что па-
пилломавирусная инфекция может являться дополнительным экзогенным
фактором злокачественной трансформации эпителия яичников.
Е.А. Билык
Л.Г. Бучинская
Л.З. Полищук
Л.А. Проскурня
Т. Пеёвич
Институт экспериментальной
патологии, онкологии
и радиобиологии им.
Р.Е. Кавецкого НАН Украины
Национальный институт
рака, Киев, Украина
Медицинский университет
штата Орегон, США
Ключевые слова: рак яичника,
онкобелок Е6, вирус папилломы
человека, р53, генетическая
предрасположенность к раку.
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß
198 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 3 • 2 0 1 1
ВПЧ эпителиальных клеток верхнего отдела гени-
тального тракта у женщин с генетической предрас-
положенностью к РЯ не проводились.
Цель работы состояла в изучении экспрессии он-
кобелка Е6 ВПЧ 16 и 18 типов, а также белка р53 в
образцах маточных труб и яичников женщин с гене-
тической предрасположенностью к развитию РЯ и
больных РЯ.
ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование выполнено на операционном ма-
териале маточных труб и яичников 20 женщин, ко-
торым провели профилактическую сальпинго-ова-
риоэктомию в связи с высоким риском развития
РЯ, и 55 больных серозным РЯ. Образцы операци-
онного материала женщин с высоким риском разви-
тия РЯ были получены из Медицинского универси-
тета штата Орегон (США). Согласно US Preventive
Services Task Force Recommendation, пациенок при-
числили к группе высокого риска на основании од-
ного из следующих критериев [19]: а) наличие мута-
ций в генах BRCA1/2; б) наличие в семье пробанда 1
и более родственниц І степени родства (мать, дочь,
родная сестра) с диагнозом РЯ в возрасте до 50 лет;
в) наличие в семье пробанда 1 родственницы І сте-
пени родства с диагнозом РЯ, а также 1 и более род-
ственниц ІІ степени родства (бабушка, внучка, двою-
родная сестра, тетя, племянница) с диагнозом РМЖ
или РЯ; г) РМЖ у пробанда и наличие в родослов-
ной 1 и более родственниц І и ІІ степени родства с
диагнозом РМЖ или РЯ. Больные РЯ находились на
лечении в отделении онкогинекологии Националь-
ного института рака МЗ Украины (зав. отделением –
д.мед.н., проф. Л.И. Воробьева). Средний возраст па-
циенток высокого риска развития РЯ и больных РЯ
на момент хирургического вмешательства составил
45,0 ± 2,7 (26–74) и 50,7 ± 1,9 (16–79) года соответ-
ственно. Все пациентки дали информированное со-
гласие на включение в исследование.
Операционный материал фиксировали в 10%
растворе забуференного нейтрального формалина.
Верификацию диагноза проводили на гистологиче-
ских препаратах, окрашенных гематоксилином и эо-
зином. Морфологически исследовали оба яичника.
Иммуногистохимическое выявление Е6 ВПЧ 16 и
18 типов, а также белка р53 проводили на парафиновых
срезах с использованием МкАТ к HPV16 E6+HPV18 E6
в разведении 1:100 (clone C1P5, «AbCam») и р53 (clone
DO7, «DaKoCytomation»). При проведении иммуно-
гистохимической реакции пользовались стандартным
одноэтапным протоколом с демаскировкой антигена
высокотемпературной обработкой (мощность — 700 w)
в цитратном буфере (рН 6,0). Визуализацию осущест-
вляли с помощью системы EnVision и красителя диа-
минбензидина («DakoCytomation»). Ядра докрашива-
ли гематоксилином Майера. Результат иммуногисто-
химической реакции оценивали полуколичественным
методом путем подсчета процента положительно окра-
шенных клеток — индекс метки (ИМ, %). Экспрессию
Е6 считали негативной при отсутствии окрашивания;
фокальной — при наличии 10–30% окрашенных кле-
ток, расположенных в отдельных участках эпителия;
диффузной — при наличии более 30% окрашенных
клеток, расположенных по всему эпителию. Экспрес-
сию р53 считали низкой при значении ИМ ниже ме-
дианы, высокой — при значении ИМ выше медианы.
В качестве позитивного контроля (ДНК ВПЧ 16+) ис-
пользовали гистологические срезы цервикальной ин-
траэпителиальной неоплазии ІІІ степени.
Оценку достоверности различий между группами
проводили с помощью непараметрического двусто-
роннего критерия Фишера в программе Statistica 7.0.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Анализ анамнестических и генеалогических дан-
ных 20 пациенток с генетической предрасположен-
ностью к РЯ подтвердил отягощенность их родос-
ловной по РМЖ и/или РЯ. При генетическом те-
стировании у 5 из них было установлено наличие
мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 (рис. 1).
Рис. 1. Родословная пробанда М., 40 лет, из субэтнической
группы евреев Ашкенази. У пробанда и двоюродной сестры
пробанда выявлена мутация в гене BRCA1 (187delAG). Род-
ственницы пробанда І и ІІ степени родства (мать, двоюродная
сестра, бабушка) болели РМЖ и РЯ. Мать пробанда умерла
от первично-множественного РМЖ и РЯ в возрасте 40 лет.
Примечание: пробанд отмечена стрелкой. Арабскими циф-
рами указан возраст возникновения заболевания, римски-
ми — поколения, ? — возраст неизвестен
При анализе морфологических особенностей
профилактически удаленных яичников у женщин
с высоким риском РЯ выявили наличие множе-
ственных фолликулярных, серозных, инклюзион-
ных кист, кист желтого тела, железистых структур с
эпителием серозного типа, гиперплазии тека-ткани,
поверхностного папиллоза и фиброматоза. Харак-
терным для фолликулярных и инклюзионных кист
яичников у женщин с мутацией в генах BRCA1/2
было наличие на их стенках сосочковых разрас-
таний, эпителиальный покров которых отличался
признаками гиперплазии. Поликистоз яичников
диагностировали у 5 пациенток. При гистологиче-
ском исследовании маточных труб у женщин высо-
кого риска выявлено склероз ворсинок с очагами ги-
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß
199Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 3 • 2 0 1 1
перплазии эпителия отдельных ворсинок, также от-
мечались паратубарные кисты.
Результаты морфологического исследования опера-
ционного материала больных РЯ показали, что все но-
вообразования были серозными карциномами разной
степени дифференцировки: 4 – высоко- (G1), 26 – уме-
ренно- (G2) и 25 – низкодифференцированными (G3).
У женщин с генетической предрасположенностью
к РЯ белок Е6 ВПЧ 16/18 обнаружен в 12 (60%) слу-
чаях, в том числе у 4 женщин с РМЖ в анамнезе и у 2
женщин-евреек Ашкенази с наличием мутации в гене
BRCA1. При этом отмечали как ядерную, так и ци-
топлазматическую локализацию белка. У 4 женщин
экспрессию Е6 выявили только в эпителии маточных
труб, у 8 — в эпителии маточных труб и яичников.
При исследовании характера экспрессии Е6 диффуз-
ное окрашивание обнаружили в эпителии маточных
труб (рис. 2), фокальное — в гиперплазированном и
неизмененном поверхностном эпителии яичников,
гранулезных клетках фолликулов (рис. 3), эпителии
фолликулярных кист (рис. 4) и железистых структу-
рах яичников с эпителием серозного типа (рис. 5).
Рис. 2. Фрагмент маточной трубы. Диффузная экспрессия
онкобелка Е6 ВПЧ 16/18 в ворсинках маточной трубы и эн-
дотелии капилляров. Стрелками указаны «светлые» клетки,
являющиеся, по данным литературы, показателями ВПЧ-
ассоциированных изменений эпителиальных клеток. Ув. х 400
Рис. 3. Экспрессия онкобелка Е6 ВПЧ 16/18 в гранулез-
ных клетках первичного фолликула яичника. Ув. х 100
Рис. 4. Экспрессия онкобелка Е6 ВПЧ16/18 в эпителии
фолликулярной кисты. Ув. х 400
Рис. 5. Экспрессия онкобелка Е6 ВПЧ 16/18 в желези-
стых структурах яичника с эпителием серозного типа. Ув.
х 400
Следует обратить внимание на то, что в эпителии
маточных труб, экспрессирующем белок Е6, выявля-
ли светлые клетки с пикнотичными ядрами, подоб-
ные койлоцитам, которые отмечают в эпителии шей-
ки матки при инфицировании ВПЧ. Эти клетки ло-
кализовались как в базальном слое эпителия, так и в
толще эпителиального пласта (см. рис. 2). Согласно
литературным данным, действие ВПЧ на клетку про-
является цитопатическим эффектом, вследствие чего
обнаруживаются койлоциты (с увеличенными ядра-
ми, неровной складчатой мембраной и гиперхрома-
тозом), наличие которых служит показателем ранних
ВПЧ-ассоциированных морфологических изменений
эпителиальных клеток [14]. На основании последнего
и выявленной нами экспрессии белка Е6 в эпителии
маточных труб можно заключить, что наличие койло-
цитоподобных клеток — объективный показатель ин-
фицирования ВПЧ.
Позитивная экспрессия Е6 была отмечена так-
же в эндотелиальных клетках сосудов маточных труб
(см. рис. 2) и яичников женщин группы высокого
риска РЯ, что очевидно свидетельствует о тропно-
сти ВПЧ к эндотелию сосудов и возможном гема-
тогенном пути диссеминации вируса.
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß
200 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 3 • 2 0 1 1
Результаты иммуногистохимического исследо-
вания опухолевого супрессора р53 у женщин высо-
кого риска развития РЯ установили отсутствие экс-
прессии этого белка в ткани маточных труб и яич-
ников, в клетках которых обнаружен онкобелок Е6
ВПЧ. В то же время в 2 ВПЧ Е6-негативных наблю-
дениях у пациенток с мутациями в генах BRCA1 и
BRCA2 экспрессия белка р53 отмечалась в эпите-
лии кистозных образований яичников (ИМ р53 —
30,2 и 62,1%) и в эпителии ворсинок маточных труб
(ИМ р53 — 4,8 и 9,8%).
В группе больных серозным РЯ белок Е6 был
экспрессирован в 9 из 55 (16,3%) случаев, что до-
стоверно ниже, чем в случаях высокого риска РЯ
(р=0,01). Выявленная нами частота инфицирования
ВПЧ 16/18, определенная по экспрессии вирусного
онкобелка Е6, согласуется с данными некоторых ев-
ропейских авторов, обнаруживших наличие этих ти-
пов ВПЧ в опухолевых клетках в 4,2–37,5% случаев
РЯ [2, 3, 10]. В 7 случаях серозного РЯ окрашивание
было диффузным, в 2 — фокальным. Во всех слу-
чаях также отмечали как ядерную, так и цитоплаз-
матическую локализацию белка. Следует обратить
внимание на то, что Е6 экспрессировался только в
умеренно- (66,7%) и низкодифференцированных
(33,3%) серозных карциномах яичника.
При иммуногистохимическом исследовании
экспрессии р53 был получен положительный ре-
зультат в 86,8% случаев РЯ. Необходимо отме-
тить, что в новообразованиях яичника выявили
значительную вариабельность количества клеток,
экспрессирующих р53 (4,0–73,0%), медиана экс-
прессии р53 составила 30,0%. Низкая экспрес-
сия (ИМ ≤ 30,0%) р53 установлена в 37,7%, а вы-
сокая (ИМ > 30,0%) — в 49,1% случаев серозного
РЯ (рис. 6), при этом средний уровень экспрессии
у больных РЯ — 31,2 ± 2,9%.
Рис. 6. Распределение больных РЯ (%) по экспрессии бел-
ка р53
Обращает внимание зависимость экспрессии
опухолевого супрессора р53 от наличия и особен-
ностей экспрессии онкобелка Е6 в клетках сероз-
ного РЯ. Так, в серозных карциномах, в клетках ко-
торых обнаружен онкобелок Е6 ВПЧ, уровень экс-
прессии р53 (ИМ 19,6 ± 4,08%) достоверно ниже,
чем в опухолях с отсутствием вирусного онкобелка
(ИМ — 33,4 ± 3,2%) (р=0,04) (таблица).
Таблица
Экспрессия опухолевого супрессора р53 в зависимости от осо-
бенностей экспрессии онкобелка Е6 ВПЧ в клетках серозного РЯ
Экспрессия онкобелка Е6 ВПЧ
16/18
Экспрессия белка р53, ИМ, %
(колебания)
позитивная :
фокальная (n=2)
диффузная (n=7)
19,6 ± 4,1 (0,0–53,0)
39,0; 53,0
12,1 ± 1,2 (0,0–26,0)
негативная (n=46) 33,4 ± 3,2 (4,0–73,0)
Более того, в новообразованиях с фокальной ло-
кализацией онкобелка Е6 ВПЧ экспрессия белка р53
была высокой и составила 53,0 и 39,0%. В отличие
от этого в опухолях яичников с диффузной локали-
зацией онкобелка Е6 (рис. 7) отмечалась негативная
и низкая экспрессия р53 (ИМ 0,0–26,0%) (рис. 8).
Рис. 7. Диффузная экспрессия онкобелка Е6 ВПЧ 16/18
в клетках серозного РЯ. Ув. х 400
Рис. 8. Низкая экспрессия р53 в серозном РЯ с диффузной
локализацией онкобелка Е6 ВПЧ 16/18. Ув. х 400
Таким образом, анализ экспрессии онкобелка Е6
позволил установить высокую частоту инфицирова-
ния ВПЧ 16/18 в неизмененном эпителии придат-
ков матки у пациенток с генетической предрасполо-
женностью к РЯ и достоверно более низкий уровень
инфицирования клеток опухоли у больных сероз-
ным РЯ. Высокая инфицированность ВПЧ эпите-
лия яичников в случаях высокого риска, вероятнее
всего, обусловлена нестабильностью генома этих
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß
201Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 3 • 2 0 1 1
клеток, определяющей их чувствительность к дей-
ствию внешнесредовых факторов. Подтверждени-
ем последнего являются особенности некоторых на-
следственных синдромов хромосомной нестабиль-
ности, в частности анемии Фанкони, при которой
в более чем 80% случаев развитие карцином аноге-
нитального тракта ассоциировано с инфицирова-
нием онкогенными типами ВПЧ [16]. Это дает ос-
нования предположить, что инфицирование ВПЧ
поверхностного эпителия яичников женщин с гене-
тически обусловленным риском РЯ может быть до-
полнительным экзогенным индуктором трансфор-
мации эпителиальных клеток яичников. Не исклю-
чено, что выявление белка Е6 в гранулезных клетках
фолликулов отражает их возможное участие в под-
держании продуктивного жизненного цикла ВПЧ,
поскольку, согласно данным [21], в культуре эпи-
телия яичников человека клетки продуцируют ряд
белковых продуктов (AP-1, Sp-1, Oct-1, NF-1), ха-
рактерных для эпителиоспецифической транскрип-
ции ранних генов ВПЧ. Кроме того, гранулезные
клетки фолликулов могут являться резервуаром ви-
русных частиц, которые при разрыве стенки ову-
лирующего фолликула достигают поверхностного
эпителия яичников и таким образом вызывают ло-
кальную инфекцию. Не исключено, что локальные
воспалительные процессы в поверхностном эпите-
лии яичников, инициируемые овуляцией, наряду
с инфицированием ВПЧ способны провоцировать
возникновение кистозных образований и повышать
риск малигнизации эпителия [9].
В настоящее время установлено, что такой экзо-
генный фактор как ВПЧ является промотором зло-
качественной трансформации пролиферирующего
эпителия, поскольку белковые продукты его онко-
генов Е6 и Е7 нарушают функции ключевых регуля-
торов клеточного цикла р53 и pRb [18]. Кроме того,
в результате многочисленных экспериментальных
исследований ВПЧ-ассоциированных новообразо-
ваний была установлена резистентность мутантной
формы белка р53 к деградирующему действию он-
кобелка Е6 ВПЧ путем убиквитин-зависимого про-
теолиза [22, 23].
Выявленное в нашем исследовании отсутствие
экспрессии белка р53 в клетках серозного РЯ, экс-
прессирующих онкобелок Е6 ВПЧ, по-видимому
свидетельствует об его ингибирующем действии на
белок-супрессор. Эти результаты согласуются с не-
многочисленными данными других исследователей,
показавших инактивацию белка р53 вследствие его
взаимодействия с онкобелком Е6 ВПЧ 16 типа в но-
вообразованиях яичника и молочной железы [15,
11]. Следует отметить, что использованное в нашей
работе МкАТ (clone DO7) визуализирует белковый
продукт как «дикого», так и мутантного гена ТР53.
Поэтому отсутствие белка р53 в клетках серозного
РЯ с диффузной локализацией онкобелка Е6 ВПЧ,
вероятнее всего, связано с взаимодействием Е6 с
«дикой» формой р53. В то же время низкий или вы-
сокий уровень экспрессии онкосупрессора р53 в не-
оплазиях с диффузным и фокальным характером ло-
кализации онкобелка Е6 указывает на присутствие
популяции клеток с мутированной формой р53, яв-
ляющейся, как было указано выше, резистентной к
действию вирусных онкопротеинов. Установленная
в нашем исследовании вариабельность фенотипи-
ческих характеристик серозных карцином яични-
ка как по экспрессии опухолевого супрессора р53,
так и по частоте обнаружения онкобелка Е6 ВПЧ,
особенностей его локализации в опухолевой ткани
позволяет предположить, что серозный РЯ — эти-
ологически гетерогенное новообразование с точ-
ки зрения участия генетических и внешнесредовых
факторов в его развитии.
Подытоживая вышеизложенное, необходимо
еще раз подчеркнуть актуальность исследований,
направленных на изучение роли ВПЧ в развитии
РЯ, в частности значения вирусных онкобелков в
регуляции пролиферации эпителия яичников, от-
ражающей биологические свойства опухоли. Кро-
ме того, особенности функционирования вирус-
ных онкогенов в опухолевых клетках яичников мо-
гут отличаться тканеспецифичностью, что также
требует проведения дальнейших, более углублен-
ных исследований.
В заключение следует отметить, что установле-
ние причинно-следственной связи вирусного ин-
фицирования и развития РЯ поспособствует как
определению этиопатогенетического значения вы-
сокоонкогенных типов ВПЧ, так и разработке ме-
роприятий по профилактике этих новообразований.
ВЫВОДЫ
1. Результаты представленного исследования
свидетельствуют о высокой восприимчивости эпи-
телиальных клеток верхних отделов генитального
тракта к инфицированию ВПЧ у женщин с генети-
чески обусловленным риском развития РЯ.
2. Установлена гетерогенность серозного РЯ по
количеству клеток, экспрессирующих р53, в зави-
симости от наличия экспрессии онкобелка Е6 ВПЧ
и его распространенности в ткани опухоли.
3. Выявленная экспрессия онкобелка Е6 ВПЧ
16/18 в неизмененном эпителии пациенток с вы-
соким риском РЯ и опухолевых клетках больных
РЯ, по-видимому, отражает значение высокоон-
когенных типов ВПЧ в патогенезе этого новооб-
разования.
Работа выполнена при поддержке целевой ком-
плексной междисциплинарной программы научных
исследований НАН Украины «Фундаментальные ос-
новы молекулярных и клеточных биотехнологий», в
рамках которой выполняется научно-исследователь-
ская работа «Исследование генетических предпосы-
лок и влияния внешне средовых факторов на реализа-
цию наследственной предрасположенности к разви-
тию злокачественных опухолей» (государственный
регистрационный номер 0110U005761).
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß
202 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 3 • 2 0 1 1
ЛИТЕРАТУРА
1. Имянитов ЕН. Скрининг для лиц с наследственной
предрасположенностью к раку. Практ Онкол 2010; 11 (2):
102–9.
2. Махтарулина СВ, Ашрафян ЛА, Киселев ВИ и др. Вирус-
ная и бактериальная инфекции при злокачественных эпите-
лиальных опухолях яичников. Рос Онкол Ж 2006; (3): 11–5.
3. Atalay F, Taskiran C, Taner MZ, et al. Detection of human
papillomavirus DNA and genotyping in patients with epithelial
ovarian carcinoma. J Obst Gynaecol Res 2007; 33 (6): 823–8.
4. Berliner JL, Fay AM. Risk assessment and genetic counseling
for hereditary breast and ovarian cancer: recommendation of the
National Society of Genetic counselors. J Genet Counts 2007;
16: 241–60.
5. Caeson A, Khan SA. Characterization of transcription
factor to human papillomavirus type 16 DNA during cellular
differentiation. J Virol 2006; 80 (9): 4356–62.
6. Chong TD, Apt B, Gloss M, Bernard U. The enhancer of
human papillomavirus type 16: binding sites for the ubiquitous
transcription factors Oct-1, NFA, TEF-2, NF1 and AP1 participate
in epithelial cell-specific transcription. J Virol 1991; 65: 5933–43.
7. Fehrmann F, Laimins LA. Human papillomaviruses: targeting
differentiating epithelial cells for malignant transformation.
Oncogen 2003; 22: 5201–7.
8. Fülle T, Mathe M, Suba Z, et al. The presence of human
papillomavirus 16 in neural structures and vascular endothelial
cells. Virology 2006; 348 (2): 289–96.
9. Gaytan M, Morales C, Bellido C, et al. Macrophages in
human fallopian tube and ovarian epithelial inclusion cysts. J of
Reprod Immunol 2007; 73: 66–73.
10. Giordano G, D’Adda T, Gnetti L, et al. Role of human
papillomavirus in the development of epithelial ovarian neoplasms
in Italian women. J Obst Gynaecol Res 2008; 34 (2): 210–7.
11. Henning EM, Kvinnsland S, Holm R, et al. Significant
difference in p53 and p21 protein immunoreactivity in HPV 16
positive and HPV negative breast carcinomas. Acta Oncologica
1999; 38 (7): 931–8.
12. Kauff ND, Satagopan JM, Robson ME, et al. Risk-reducing
salpingo-oophorectomy in women with a BRCA1 or BRCA2
mutation. N Engl J Med 2002; 346: 1609–15.
13. Khaskheli M, Baloch S, Baloch AS. Gynecological
malignancies: a continuing threat in the developing world. J of
Gyn Surg 2010; 26 (2): 121–5.
14. Krawczyk E, Suprynowicz FA, Liu X, et al. Koilocytosis: a
cooperative interaction between the human papillomavirus E5 and
E6 oncoproteins. Am J Pathol 2008; 173: 682–8.
15. Kusku E, Ordemir BH, Erkanlis S, et al. HPV and p53
expression in epithelial ovarian carcinoma. Eur J Gynaecol Cancer
2005; 26 (6): 642–5.
16. Lowy DR, Gillison ML. A new link between Fanconi
anemia and human papillomavirus-associated malignancies. J Natl
Cancer Inst 2003; (95): 1648–50.
17. Lynch HT, Casey MJ, Snydera CL, et al. Hereditary ovarian
carcinoma: heterogeneity, molecular genetics, pathology, and
management. Mol Oncol 2009; 3 (2): 97–137.
18. Munger K, Baldwin A, Edwards K, et al. Mechanisms of
human papillomavirus-induced oncogenesis. J of Virol 2004; 78
(21): 11451–60.
19. Nelson HD, Huffman LH, Fu R, Harris EL. Genetic risk
assessment and BRCA mutation testing for breast and ovarian
cancer susceptibility: Systematic evidence review for the U.S.
preventive services task force. Ann Int Med 2005; 143 (5): 362–79.
20. Pejovic T, Yates JE, Liu HY, et al. Cytogenetic instability
in ovarian epithelial cells from women at risk of ovarian cancer.
Cancer Res 2006; 66 (18): 9017–25.
21. Pisarska MD, Kuo FT, Tang D, et al. Expression of forkhead
transcription factors in human granulose cells. Fertil Steril 2009;
91 (4): 1392–4.
22. Tomassino M, Accardi R, Caldeira S, et al. The role of TP53
in cervical carcinogenesis. Hum Mut 2003; 21: 307–12.
23. Scheffner M, Takahashi T, Huibregtse JM, et al. Interaction
of the human papillomavirus type 16 E6 oncoprotein with wild-
type and mutant human p53 protein. J Virol 1992; 66 (8): 5100–5.
24. Wu J, Guo M, Lu ZM, et al. Detection of human
papillomavirus-16 in ovarian malignancy. Br J Cancer 2003; 89:
672–5.
HUMAN PAPILLOMAVIRUS ONCOPROTEIN
E6 EXPRESSION IN EPITHELIUM
OF THE UTERINE APPENDAGES WITH
OVARIAN CANCER AND GENETIC
PREDISPOSITION TO IT
E.А. Bilyk, L.G.Buchynska, L.Z. Polychshuk,
L.A. Proskurnya, Т. Pejovic
Summary. Complex morphological and immuno-
histo chemical study of adnexa uteri in 20 women with
genetic predisposition to ovarian cancer (OC) and 55
OC patients was carried out. The presence of HPV
16/18 E6 oncoprotein in epithelial lining of fallopian
tubes, ovarian surface epithelium, granulose cells of
follicules, epithelium of follicular cysts and endothelial
cells was revealed in 60% of women at high risk of
developing OC. Tumor cells of 16,3% of OC patients
were also positive for HPV 16/18 E6 oncoprotein.
Expression of tumor suppressor protein p53 was absent
in HPV-positive ovarian tissues in women at high risk
of developing ovarian cancer and was significantly
lower in HPV-positive OC compared to HPV-negative
tumors. It is assumed that papillomavirus infection
can be an addition exogenous inductor of malignant
transformation of ovarian epithelium.
Key Words: ovarian cancer, oncoprotein Е6,
human papillomavirus, р53, genetic susceptibility
to cancer.
Адрес для переписки:
Билык Е.А.
03022, Киев, ул. Васильковская, 45
Институт экспериментальной патологии,
онкологии и радиобиологии
им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины
E-mail: lenabilyk@gmail.com
|