Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики

Проведено ґенеалогічний аналіз, молекулярно-ґенетичне дослідження та клінічне обстеження 26 пацієнтів із 17 сімей з множинним аденоматозним поліпозом із кількістю поліпів більше 100. Фенотип цих хворих характеризувався широким спектром позакишкових проявів. Найчастіше відмічали ано...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :	Онкологія
Дата:	2011
Автори:	Лозинська, М.Р., Плавскі, А., Лозинський, Ю.С.
Формат:	Стаття
Мова:	Українська
Опубліковано:	Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького 2011
Теми:	Оригинальные исследования
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/59427
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики / М.Р. Лозинська, А. Плавскі, Ю.С. Лозинський // Онкологія. — 2011. — Т. 13, № 4. — С. 282-287. — Бібліогр.: 18 назв. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1860270735957688320
author	Лозинська, М.Р. Плавскі, А. Лозинський, Ю.С.
author_facet	Лозинська, М.Р. Плавскі, А. Лозинський, Ю.С.
citation_txt	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики / М.Р. Лозинська, А. Плавскі, Ю.С. Лозинський // Онкологія. — 2011. — Т. 13, № 4. — С. 282-287. — Бібліогр.: 18 назв. — укр.
collection	DSpace DC
container_title	Онкологія
description	Проведено ґенеалогічний аналіз, молекулярно-ґенетичне дослідження та клінічне обстеження 26 пацієнтів із 17 сімей з множинним аденоматозним поліпозом із кількістю поліпів більше 100. Фенотип цих хворих характеризувався широким спектром позакишкових проявів. Найчастіше відмічали аномалії лицьової частини черепа і пухлини м΄яких тканин, які слугували додатковими маркерами захворювання у пробандів та у групі ризику. За допомогою методу секвенування ґеному встановлено маркерні мутації (ґенів АРС та МYН) у половини пацієнтів із множинним поліпозом; з них 77% − мутації АРС. Найбільшу кількість хворих на рак товстої кишки з ранньою маніфестацією захворювання виявлено у сім’ї із мутацією АРС, заміною в кодоні 674 (TTG>TAG), що викликає передчасну термінацію трансляції та утворення скороченої функціонально дефектної молекули білка. Встановлено, що множинні аденоматозні поліпи є ґенетично гетероґенною групою: їх злоякісний потенціал неоднаковий, внесок спадкової компоненти у виникнення різний. Пацієнти з різними ґенетичними формами поліпозу потребують диференційованого підходу до ґенетичного консультування та лікувальної тактики. Ключові слова: аденоматозний поліпоз, ґенеалогічний аналіз, мутації, рак товстої кишки, родовід. The genealogic analysis, molecular and clinical investigations has been carried out in 26 patients from 17 families with multiply colorectal adenomas. The phenotypical symptoms in these patients were very variable and included different spectrum of extra-colonic symptoms. The disorders of the facial part of sculls and the soft tissue tumors were the most frequent additional markers of the disease in probands and in the group of high risk. The mutations of АРС and МYН genes were identified using automatic DNA sequencer. The marked mutations were detected in the half of patients with multiply polyposis, and 77% of the mutations appeared in APC gene. The majority of the patients with colorectal cancer with early manifestation of this oncological disease were in families with mutation in the codon 674 TTG>TAG, leading to premature termination of translation and developing of the truncated protein with abnormal functions. The multiply colorectal adenomas were genetically heterogeneous group with different malignant potential and with unequal contribution of the hereditary component for their appearance. The patients with various genetical forms of the disease need different approaches during genetic consulting. Key Words: adenomatous polyposis, genealogic analysis, mutations, colorectal cancer, pedigree.
first_indexed	2025-12-07T19:06:09Z
format	Article
fulltext	ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß 282 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 4 • 2 0 1 1 ВСТУП Виникнення новоутворень товстої кишки роз- глядають як багатоетапний процес, в основі якого лежать мутації. Більшість мутацій, що зумовлюють появу пухлин, є соматичними і виникають безпо- середньо в тканинах. Однак поряд із соматичними відомі природжені мутації — зміни нуклеотидного складу ґена, що не перешкоджають утворенню га- мет і передаються з покоління в покоління, ініцію- ючи канцероґенез. Такі природжені мутації призво- дять, зокрема, до виникнення сімейного аденома- тозного поліпозу (САП) — аутосомно-домінантного захворювання, що відмічають в популяціях з часто- тою 1:7000–10 000 новонароджених [1]. При САП виявляють від 100 до 1000 і більше поліпів; захво- рювання характеризується кишковими і деякими позакишковими проявами, призводить до розвитку злоякісних пухлин; майже в 100% випадків на ґрунті САП виникає рак товстої кишки (РТК) [2–4]. Клі- нічну гетероґенність САП зумовлюють функції двох ґенів – АРС і MYH. Ґен АРС — типовий пухлинний супресор, який локалізований на довгому плечі хро- мосоми 5 (5q21) і містить 15 екзонів. Його білок взає- модіє з іншими клітинними білками (Е-кадгерином, аксином), контролює сигнальний шлях β-катенін/ Cdk/pRb і блокує транскрипцію. Крім того, АРС бере участь у забезпеченні переміщення ентероци- тів кишковими криптами. Відомо більше 800 мута- цій ґена АРС. Понад 95% природжених мутацій — це вкорочувальні або нонсенс-мутації, типовими є делеції, заміни і вставки, що призводять до зміни рамки зчитування [2, 5, 6]. При клінічному варіанті САП — синдромі Гарднера — описані численні по- закишкові симптоми [7−10]. На основі локалізації та спектру мутацій можна досліджувати кореляцію ґенотипу/фенотипу пацієнтів із САП, прогнозувати тяжкість перебігу захворювання, виникнення поза- кишкових симптомів та різних новоутворень [2, 11, 12]. Важливо, що за наявності маркерної мутації у пробанда з поліпозом можна виявити групу ризи- ку серед його близько споріднених родичів і вчас- но встановити діагноз. Водночас показано, що більше 40% пацієнтів із множинним поліпозом не мають мутації АРС [5]. У частини таких хворих було виявлено мутації MYH (MutYH).Продукт цього гена бере участь в ексцезій- ній репарації ДНК, видаляючи аденінові нуклеоти- ди, що помилково спарені з ушкодженими гуаніно- вими нуклеотидами. Наслідком порушення функції МYH є накопичення G:C/T:A-трансверсій в різних генах. Цей дефект збільшує вірогідність появи зло- якісно трансформованих клітин, особливо при по- рушенні функції APC, який є ключовим gatekeeper- геном («охоронцем») в епітеліальній тканині. Ви- значення статусу MYH є важливим доповненням до генетичного скринінгу пацієнтів за станом APC. ВНЕСОК МОЛЕКУЛЯРНО- ГЕНЕТИЧНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ У РАННЮ ДІАГНОСТИКУ, ПРОГНОЗУВАННЯ ПЕРЕБІГУ АДЕНОМАТОЗНОГО ПОЛІПОЗУ ТОВСТОЇ КИШКИ ТА ПЛАНУВАННЯ ЛІКУВАЛЬНОЇ ТАКТИКИ Резюме. Проведено ґенеалогічний аналіз, молекулярно-ґенетичне дослідження та клінічне обстеження 26 пацієнтів із 17 сімей з множинним аденоматоз- ним поліпозом із кількістю поліпів більше 100. Фенотип цих хворих характе- ризувався широким спектром позакишкових проявів. Найчастіше відмічали аномалії лицьової частини черепа і пухлини м΄яких тканин, які слугували до- датковими маркерами захворювання у пробандів та у групі ризику. За допо- могою методу секвенування ґеному встановлено маркерні мутації (ґенів АРС та МYН) у половини пацієнтів із множинним поліпозом; з них 77% − мутації АРС. Найбільшу кількість хворих на рак товстої кишки з ранньою маніфес- тацією захворювання виявлено у сім’ї із мутацією АРС, заміною в кодоні 674 (TTG>TAG), що викликає передчасну термінацію трансляції та утворення скороченої функціонально дефектної молекули білка. Встановлено, що мно- жинні аденоматозні поліпи є ґенетично гетероґенною групою: їх злоякісний потенціал неоднаковий, внесок спадкової компоненти у виникнення різний. Пацієнти з різними ґенетичними формами поліпозу потребують диферен- ційованого підходу до ґенетичного консультування та лікувальної тактики. М.Р. Лозинська А. Плавскі Ю.С. Лозинський ДУ «Інститут спадкової патології НАМН України», Львів, Україна Інститут ґенетики людини ПАН, Познань, Польща Львівський національний медичний університет імені Данила Галицького, Львів, Україна Ключові слова: аденоматозний поліпоз, ґенеалогічний аналіз, мутації, рак товстої кишки, родовід. ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß 283Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 4 • 2 0 1 1 У MYH-позитивних пацієнтів множинний поліпоз успадковується аутосомно-рецесивно [13, 14]. Бі- алельні MYH-мутації відмічають у ⅓ всіх пацієнтів, що мають приблизно 15 поліпів, а також у 25% па- цієнтів із САП чи послабленим варіантом аденома- тозного поліпозу (ПСАП) [15]. Найчастіші для єв- ропейської популяції є місенс-мутації MYH − Y165C і G382D. Показано, що у гетерозиготних носіїв G382D ризик виникнення РТК у віці старше 55 ро- ків удвічі вищий [16]. Метою роботи є дослідження спектру мутацій АРС і MYH у хворих на на аденоматозний поліпоз, оцінка його значення для прогнозування перебігу захворювання і виникнення РТК, а також для ви- явлення групи ризику серед близько споріднених родичів пробанда. ОБ’ЄКТ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ Протягом 2007–2011 рр. було проведено аналіз медичних карт, клінічні та ґенетичні обстеження 26 пацієнтів (віком від 14 до 54 років) із множинним аденоматозним поліпозом, що мали ≥100 поліпів у товстій кишці. Більшість пацієнтів були мешканця- ми Львівської області. Для встановлення діагнозу використовували загально-клінічний, ендоскопіч- ний та лабораторний методи дослідження. З метою виявлення типу успадкування новоутворень засто- совано ґенеалогічний аналіз сімей (3–4 покоління) 21 пробанда. Також проведено молекулярно-ґене- тичне дослідження 26 обстежених (17 пробандів та 9 родичів), з них 12 чоловіків та 14 жінок. Від кож- ного залученого у обстеження було отримано інфор- мовану згоду щодо проведення досліджень і вико- ристання їх результатів у наукових цілях. Для визначення мутацій АРС і MYH викорис- товували полімеразну ланцюгову реакцію (ПЛР), скринінгові методи пошуку невідомих точкових му- тацій: гетеродуплексний аналіз (HD) та визначен- ня конформаційного поліморфізму однониткової ДНК (SSCP). Для отримання характеристики мута- цій проводили секвенування продуктів ПЛР. Ґеномну ДНК виділяли з клітин периферичної крові, використовуючи класичний фенольний метод очищення. Застовували праймери, що включали ін- дивідуальні екзонсплайсингові сайти [17]. Ампліфі- ковані фрагменти АРС перевіряли на наявність му- тацій із використанням HD-аналізу та SSCP. Фраг- менти ДНК, що формували гетеродуплекс під час проведення НD або відмінні варіанти SSCP, підля- гали прямому секвенуванню продукту ПЛР із засто- суванням секвенатора ABI 3700, згідно з інструкцією виробника (Applied Biosystems, Inc., США). Mутації MYH виявляли шляхом аналізу по- ліморфізму довжини рестрикційних фрагмен- тів (ПДРФ). Фрагменти ДНК екзонів 7 і 13 амп- ліфікували шляхом ПЛР, використовуючи прай- мери 7F5'-GGGACTGACGGGTGATCTCT-3', 7R5 '-TTGGAGTGCAAGACTCAAGATT-3 ' ; 13F 5'-AGGGCAGTGGCATGAGTAAC-3', 13R 5'-GGCTATTCCGCTGCTCACTT-3' відповідно. Ампліфікований продукт екзону 7 (186 п.н.) об- робляли ендонуклеазою MwoI. Заміна c.494A>G (Tyr165Cys) зумовлює виникнення сайту рестрикції для MwoI, і продукт гідролізується на 2 фрагменти (72 і 114 п.н). Продукт ПЛР екзона 13 (242 п.н.) об- робляли рестриктазою BlgIII з утворенням 2 фраг- ментів (82 і 160 п.н). Продукти ферментативної ре- стрикції розділяли в 3% агарозному гелі і візуалізу- вали за допомогою бромистого етидію. РЕЗУЛЬТАТИ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ При клінічному обстеженні були виявлені по- ліпи позакишкової локалізації (у шлунку, тонкій кишці, жовчному міхурі та матці) у 21 пробанда із аденоматозним поліпозом (табл. 1). Діагностували також позакишкові ознаки хвороби із проявом або при народженні (вроджені вади розвитку — ВВР), або у різні періоди життя хворих (пухлини м’яких тканин). ВВР були виявлені більше ніж у половини (12; 57,1%) пацієнтів із поліпозом, пухлини м’яких тканин розвинулись у 5 пробандів (23,8%). Серед ВВР найчастішими були аномалії лицьової части- ни черепа — у 9 (42,9%) хворих, у 8 з них відмічали поєднання різних аномалій розвитку (табл. 2). Се- ред пухлин м’яких тканин переважали фіброми та десмоїдні пухлини – у 4 (19,0%), часто (в 3 випад- ках) – у поєднанні. Таблиця 1 Локалізація позакишкових поліпів при аденоматозному поліпозі товстої кишки Категорія обстежених Кількість хворих Локалізація поліпів, n % Шлунок Тонка кишка Жовчний міхур Тіло матки Пробанди 21 4 (19,0) 1(4,8) 1 (4,8) 1 (4,8) На основі аналізу родоводів 21 пробанда пози- тивний сімейний анамнез було встановлено у 10 (47,6%) з них, тобто підтверджено САП. У цих про- бандів виявлено 28 хворих родичів з таким же син- дромом, причому в межах сім’ї їх кількість станови- ла від 1 до 8. Медіана віку маніфестації САП 35 (14– 44) років, РТК — 40 (29–45) років. Кількість хворих на РТК серед 38 пацієнтів із САП — 26 (68,4%) осіб. На наступному етапі дослідження проведено мо- лекулярно-ґенетичний аналіз зразків крові 26 па- цієнтів із аденоматозним поліпозом (17 пробан- дів, 9 родичів). Спектр мутацій у цій групі наведе- но в табл. 3. Так, група пацієнтів із аденоматозним поліпозом виявилася клінічно й ґенетично гетеро- ґенною. Мутації ґена АРС було виявлено у 4 сім’ях, мутації MYH — у 2. За допомогою ґенеалогічного аналізу у всіх 4 сім’ях із мутацією ґена АРС була під- тверджена сімейна форма захворювання. РТК діа- гностовано у 4 сім’ях, у стількох же — ВВР. Водно- час, під час дослідження у половини хворих не було ідентифіковано найбільш розповсюджених мутацій. Найбільшу кількість хворих на РТК серед носі- їв мутації АРС було виявлено у двох сім’ях — 1 і 4. У сім’ї 1 успадкування синдрому Ґарднера відміча- ли у 7 осіб із 4 поколінь (див. табл. 3). У пробанда ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß 284 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 4 • 2 0 1 1 та його рідного брата мали місце позакишкові озна- ки хвороби: поліпи шлунка, ВВР піднебіння, щелеп та аномалії розвитку зубів, природжена гіпертрофія пігментного епітелію сітківки (ПГПЕС). У цих хво- рих було також діагностовано пухлинні захворюван- ня кісток (остеоми) та м’яких пухлин (фіброми, дес- моїдні пухлини). У пробанда віком 35 років вияв- лено первинно-множинний РТК із локалізацією у сигмоподібній, поперечно-ободовій та сліпій кишці. Рідний брат пробанда звернувся на консультацію у віці 44 років з явищами часткової кишкової непро- хідності у зв’язку з аденокарциномою сигмоподіб- ної кишки, яка виникла на фоні синдрому Ґардне- ра, та інтрамедулярним раком печінки. Пацієнт по- мер. Його двоє дітей віком 19 та 20 років звернулися в Ґенетичний центр м. Львова у зв’язку із синдромом Ґарднера у сім’ї. У сина було виявлено (як і у батька, й у дядька) аномалії щелеп, зубів, піднебіння (арко- подібної форми) та множинні пухлинні утворення на обличчі та на коліні – пухлини м’яких тканин. У дочки пробанда ВВР не було. Серед позакишкових симптомів у неї домінували пухлини м’яких тка- нин різної локалізації, які з’явилися у віці 14 років. У дів чини протягом тривалого часу констатовано підвищений рівень білірубіну (33,81–42,25 мкМ/л). У пацієнтів — членів цієї сім’ї було ідентифіковано маркерну мутацію АРС, зумовлену делецією одно- го нуклеотида, що призвела до зміни рамки зчиту- вання (див. табл. 3). У сім’ї 4, що налічувала 5 хворих із аденоматоз- ним поліпозом, у 3 осіб виявлено маркерну мутацію АРС, зумовлену заміною в кодоні 674 TTG>TAG, що викликає передчасну термінацію трансляції й утво- рення вкороченої функціонально дефектної моле- кули білка. Згідно з літературними даними мутації в інтервалах 437–1249 призводять до класичного перебігу захворювання [11]. Родовід сім’ї 4 наведе- но на рис. 1. Діагноз пробанда: рак сигмоподібної кишки (Т4NxM1G1) з метастазами в мезоколон, було встановлено у віці 32 років. Син пробанда по- мер у віці 29 років від раку нижньоампулярного від- ділу прямої кишки з метастазами у головний мозок (pT4N1M1G1), а брат — у віці 33 років. Другий син пробанда не пройшов ґенетичного тестування. У сім’ї 2 із синдромом Гарднера (див. табл. 3), яка налічувала 3 уражених особи, пробандом була дівчинка 15 років, у якої поряд із поліпозом товстої кишки було виявлено аномалії зубів, арахнодакти- лію і гіперрухливість суглобів. У неї встановлено мутацію АРС, зумовлену делецією 5 нуклеотидів, що призводить до зміни рамки зчитування і синте- зу беззмістовного вкороченого білка, який швидко деградує під впливом внутрішньоклітинних протеаз. У батька пробанда, який трагічно помер, попередньо діагностували поліпоз шлунка, товстої кишки, а та- кож аномалії зубів. Рідній сестрі пробанда (13 років) із аналогічними ВВР було запропоновано провести молекулярно-ґенетичне дослідження. Отримані ре- зультати підтвердили носійство маркерної мутації. На рис. 2 наведено родовід цієї сім’ї, а на рис. 3 — фотографію аномалії зубів сестри пробанда — носія маркерної мутації. У сім’ї 3 (див. табл. 3) у жінки-пробанда з анома- лією росту (нанізм) у віці 18 років у зв’язку із САП було проведено тотальну колектомію з накладанням ілеоректального анастомозу з ілеостомою. Встанов- Таблиця 2 Зв’язок аденоматозного поліпозу з ВВР Вади розвитку Спектр ВВР Кількість пробандів Лицьової частини черепа Вади росту і розвитку зубів Вади росту і розвитку зубів з вадами піднебіння Вади росту і розвитку зубів з аномаліями черепа 2 3 1 Очей Природжена гіпертрофія пігментного епітелію сітківки (у поєднанні з вадами росту і розвитку зубів, піднебіння) 2 Опорно-рухового апарату Арахнодактилія, гіперрухливість суглобів (у поєднанні з вадами росту і розвитку зубів) 1 Росту Нанізм 1 Сечовидільної системи Подвоєння сечовода і нирки (у поєднанні з гідронефрозом) 1 Розміщення органів Правостороннє серце (синдром картагенера) 1 У поєднанні 12 Таблиця 3 Спектр мутацій АРС і MYH у родинах із САП товстої кишки Сім’ї пацієнтів з поліпозом Статус пацієнта Спектр мутацій / (кількість осіб з мутаціею) Кількість хворих в сім’ї Кількість хворих на РТК в межах сім’ї 1 Пробанд * 3 особи, ГР* Мутація ґена АРС: с.3343delA p.R1114fs (зміна рамки зчитування)/(4 ) 7 5 2 Пробанд * 1 особа, ГР* Мутація ґена АРС: с.3927_3931delAAAGA p.Q1309fs (зміна рамки зчитування)/(2) 3 0 3 Пробанд * Мутація ґена АРС: с.3931_3946delATTGGAACTAGGTCAG (передчасна термінація трансляції)/(1) 2 0 4 Пробанд 2 особи, ГР Мутація ґена АРС: с.2021Т>TAG в кодоні 674 TTG>TAG (передчасна термінація трансляції)/ (3) 5 5 5 Пробанд * 1 особа, ГР Місенс-мутація ґена MYH Y165C у гетерозиготному стані/(2) 3 1 6 Пробанд Місенс-мутації ґена MYH G382D і R231H у гетерозиготному стані/(1) 2 1 Разом Пробандів (6) ГР (7) (13) 22 12 Примітки: ГР — група ризику; *ВВР. ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß 285Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 4 • 2 0 1 1 лено мутацію АРС, зумовлену делецією 16 нуклеоти- дів. Відомо, що мати пробанда також хвора на САП. I II III IV ÑÀÏ ÐÒÊ Рис. 1. Родовід сім’ї з клінічним варіантом САП — синд- ромом Ґардена, РТК із маркерною мутацією ґена АРС с.2021Т>TAG в кодоні 674 TTG>TAG ÑÀÏ ÏÂÐ Рис. 2. Родовід сім’ї з клінічним варіантом САП — синд- ромом Ґардена і маркерною мутацією ґена АРС: с.3927_3931 delAAAGA p.Q1309fs Рис. 3. Аномалії зубів у пацієнтки з аденоматозним полі- позом і сімейною маркерною мутацією ґена АРС У сім’ї 5 (див. табл. 3) у пробанда з множинним поліпозом товстої кишки, пухлинами м’яких тканин і аномаліями зубів було виявлено мутацію Y165C MYH у гетерозиготному стані. Його рідний брат по- мер від метастазів у печінку, що виникли на ґрунті РТК. Було проведено молекулярно-ґенетичне дослі- дження у дочки пробанда з множинними фібромами молочної залози без кишкових симптомів захворю- вання і встановлено аналогічну мутацію. Біалельні мутації MYH G382D і R231H було ви- явлено у 2 сибсів чоловічої статі без ознак хвороби у батьків, що вказує на аутосомно-рецесивний тип успадкування. У пробанда з цієї сім’ї 6 (див. табл. 3) у віці 40 років розвинувся РТК, а у рідного брата ви- явлено множинні аденоматозні поліпи. У сім’ї жінки-пробанда з поліпозом без типових для цього захворювання маркерних мутацій АРС і MYH виявлено найбільшу кількість уражених осіб- родичів — 8, із них хворих на РТК — 6. У пробан- да не було діагностовано ВВР. Ультразвукове до- слідження черевної порожнини показало наявність множинних кіст яєчників. У віці 14 років за допо- могою фіб рогастродуоденоскопії у неї було встанов- лено виразкову хворобу шлунка та дванадцятипалої кишки; було виявлено коксартроз колінного сугло- ба. У дочки пробанда у віці 15 років з’явилася атеро- ма, а у віці 19 років — кишкова маніфестація САП. Одним з пояснень виникнення поліпозу у цій сім’ї є, вірогідно, наявність у хворих іншого типу мутацій АРС, що призводять до спадкової алелеспецифіч- ної втрати експресії РНК. Такі мутації відбувають- ся в межах інтронів, тому їх не виявляють традицій- ними методами [18]. Родовід цієї сім’ї з поліпозом, негативним за класичними мутаціями АРС і MYH, наведено на рис. 4. I II III IV V ÑÀÏ ÐÒÊ Рис. 4. Родовід сім’ї із САП і РТК (АРС і MYH-негативна) Таким чином, на основі проведеного молеку- лярно-ґенетичного дослідження мутації АРС (САП) були виявлені у 38,5% пацієнтів, 11,5% хворих були носіями мутації ґена MYH (МАП). Загалом маркерні мутації були виявлені у половини пацієнтів. Адено- матозний поліпоз у осіб, негативних за мутаціями, але з позитивним сімейним анамнезом (класичний аденоматозний поліпоз (КАП) відмічено у 11,5% хворих. Причини виникнення поліпозу у реш ти па- цієнтів невідомі (поліпоз невідомого походження — ПНП). Ґенетичну гетероґенність аденоматозного поліпозу відображено на рис. 5. Àäåíîìàòîçíèé ïîë³ïîç ó 26 ïàö³ºíò³â ÀÐÑ-àñîö³éîâàíèé (ÑÀÏ) ó 10 (38,5%) ïàö³ºíò³â ÀÐÑ ³ MYH- íåãàòèâíèé; ñ³ìåéíèé (ÏÍÏ) ó 10 (38,5%) ïàö³ºíò³â MYH-àñîö³éîâàíèé (ÌÀÏ) ó 3 (11,5%) ïàö³ºíò³â ÀÐÑ ³ MYH- íåãàòèâíèé; ñ³ìåéíèé àíàìíåç (+); (ÊÀÏ) ó 3 (11,5%) ïàö³ºíò³â Рис. 5. Ґенетична гетероґенність аденоматозного поліпо- зу (молекулярна класифікація) Таким чином, МАП виявився фенотипово і ґено- типово гетероґенною групою. У зв’язку з цим його перебіг, а також ризик виникнення позакишкових симптомів та онкологічних захворювань є неодна- ковим. Обов’язковим є проведення ґенеалогічно- ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß 286 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 4 • 2 0 1 1 го аналізу в комплексі з молекулярно-ґенетичними дослідженнями. Це дозволяє встановити спорадич- ну і спадкову форму захворювання, визначити тип успадкування та відповідні підходи до прогнозуван- ня перебігу захворювання і виникнення аналогічної патології у близько споріднених родичів пробандів при різному характері мутацій. Етапи проведен- ня ґенетичного консультування наведено на рис. 6. Ìíîæèííèé àäåíîìàòîçíèé ïîë³ïîç Ñïîðàäè÷í³ íîâîóòâîðåííÿ Ñïàäêîâ³ íîâîóòâîðåííÿ Ìîëåêóëÿðíî-ãåíåòè÷í³ äîñë³äæåííÿ (âèçíà÷åííÿ ñïåêòðó ãåííèõ ìóòàö³é) Ãåíåòè÷íà ôîðìà ïîë³ïîçó (ä³àãíîç) Ãåíåàëîã³÷íèé àíàë³ç Ãåíåòè÷íå êîíñóëüòóâàííÿ Рис. 6. Етапи ґенетичного обстеження хворих із множин- ним аденоматозним поліпозом У пацієнтів з ідентифікованими мутаціями ґена АРС тактика консультування повинна базуватися на основі характеру та локалізації мутації. Вік маніфес- тації РТК у АРС-позитивних пацієнтів із САП стано- вить 38 (28–43) років. Тому при виявленні мутацій в інтервалах кодонів, характерних для тяжкої і класич- ної форм поліпозу, необхідно дотримуватися актив- ної хірургічної тактики і виконувати видалення тов- стої кишки до 30 років. Характер операції − тоталь- на колпроктектомія (з резервуарним ілеоанальним анастомозом). На думку російських вчених, при виявленні му- тацій, характерних для послабленої форми поліпозу, необхідне ретельне динамічне спостереження хворих, а хірургічне втручання слід виконувати в більш піз- ньому віці, оскільки РТК у таких пацієнтів розвива- ється після 50 років [12]. У осіб групи ризику із ви- значеними мутаціями ґена MYH ризик виникнення РТК буде залежати від того, чи є вони носіями однієї або подвійної мутації. Колоректальний фенотип при МАП дуже варіабельний. У хворих із МАП кількість поліпів в середньому становить 15, рідше наближа- ється до 100–200. Ризик виникнення РТК є підвище- ним лише в осіб з біалельними мутаціями ґена [15]. Групою ризику виникнення поліпозу і РТК у випадку носійства мутацій будуть сибси пробанда. У пацієн- тів із подвійними мутаціями ґена MYH поліпи часто виявляють і у дванадцятипалій кишці [15, 16]. Тому пацієнтам рекомендують проводити колоно скопію та фіброгастродуоденоскопію не менше одного разу на рік, починаючи з підліткового віку. Слід зазначи- ти, що у гетерозиготних носіїв мутації не виявлено достовірного підтвердження підвищеної частоти ви- никнення РТК [16]. Особливо проблемною групою для ґенетично- го консультування є пацієнти з аденоматозним по- ліпозом, у яких не виявлено маркерних мутацій. За наявності КАП ендоскопічні дослідження необхід- но проводити в першу чергу тим родичам пробан- дів І ступеня спорідненості, у яких виявлено ВВР чи інші позакишкові симптоми. Вік маніфестації РТК у 7 пацієнтів із КАП становив 40,7 (32–44) років, у 4 пацієнтів із ПНП — 44 (38–54) роки. Тому, на нашу думку, хворим із КАП рекомендується проведення операцій у віці старше 30 років, а хворим із ПНП − старше 35 років. ВИСНОВКИ 1. Фенотип групи пацієнтів із множинним аде- номатозним поліпозом характеризувався широким спектром позакишкових симптомів, які були додат- ковими маркерами захворювання у половини про- бандів та у групі ризику. Найчастішими позакиш- ковими ознаками хвороби виявилися ВВР (аномалії лицьової частини черепа) і пухлини м’яких тканин. 2. На основі молекулярно-ґенетичного аналі- зу встановлено, що пацієнти з множинним аде- номатозним поліпозом є ґенетично гетероґенною групою (АРС-позитивні, MYH-позитивні, нега- тивні за даними мутаціями). Встановлено 3 осно- вні ґенетичні форми поліпозу: САП — cімейний APC-асоційований, МАП — MYH-асоційований, та КАП — класичний варіант з позитивним сімейним анамнезом, але без характерних мутацій ґенів. Мар- керні мутації АРС і MYH були виявлені у половини хворих із множинним аденоматозним поліпозом. 3. У групі пацієнтів із САП переважали мутації АРС, представлені делеціями нуклеотидів, що при- зводять до зміни рамки зчитування або передчас- ної термінації трансляції. Найбільшу кількість хво- рих на РТК у молодому віці було виявлено у сім’ї з мутацією АРС, зумовленою заміною в кодоні 674 TTG>TAG, що викликає передчасну термінацію трансляції й утворення вкороченої функціонально дефектної молекули білка. 4. Пацієнти з різними ґенетичними формами по- ліпозу потребують диференційованого підходу під час ґенетичного консультування та подальшого спо- стереження і лікування. Зокрема, пацієнтам із тяж- кою і класичною формою САП, які є носіями мутації АРС, рекомендують проведення операції з моменту встановлення діагнозу, бажано до 30 років. Харак- тер операції — тотальна колпроктектомія (з резер- вуарним ілеоанальним анастомозом). ЛІТЕРАТУРА 1. Chapell A. Genetic predisposition to colorectal cancer. Cancer 2004; 4: 769–80. 2. Delaini GG, Skřička T, Colucci G. Intestinal polyps and polyposis. From genetics to treatment and follow up. Italia: Springer-Verlag, 2009. 243. 3. Chung DC. The genetic basis of colorectal cancer: insights into critical pathways of tumorogenesis. Gastroenterol 2000; 119: 854–65. ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß 287Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 3 • ¹ 4 • 2 0 1 1 4. Лозинська МР, Лозинський ЮС, Головчанський СО та ін. Клінічні і генетичні особливості та позакишковий фено- тип хворих на сімейний дифузний поліпоз. Ж АМН Украї- ни 2008; 14 (4): 741–51. 5. Музаффарова ТА, Поспехова НИ, Сачков ИЮ и др. Об- наружение и характеристика новых мутаций в гене АРС при семейном аденоматозном полипозе. Мед Генет 2005; 4 (5): 233. 6.Квиткова ЕМ, Мухаммедов РС, Абдуллаходжаева МС. Герминальные мутации в гене АРС у больных аденоматозным полипозом толстого кишечника в Узбекистане. В: Матер ІІІ съезда колопроктологов Украины, ІІ съезда колопроктоло- гов стран СНГ. Одесса, 2011: 127–8. 7. Hermann SM, Adler YD, Schmidt-Petersen K, et al. The concomitant occurence of multiply epidermal cysts, osteomas and thyroid gland nodules is not diagnostic for Gardner syndrome in the absence of intestinal polyposis: a clinical and genetic report. Br J Dermatol 2003; 149 (4): 877–83. 8. Fotiadis DK, Tsekouras P, Antonakis J, et al. Gardner’s syn- drome: A case report and review of the literature. World J Gastro- enterol 2005; 11 (34): 5408–11. 9. Chimenos-Küstner E, Pascual M, Blanco I, Finestres F. He- reditary familial polyposis and Gardner’s syndrome: Contribution of the odontostomatology examination in its diagnosis and a case description. Med Oral Patol Cir Bucal 2005; 10: 402–9. 10. Aggarwal VR, Sloan P, Horner K, et al. Dento-osseous changes as diagnostic markers in familial adenomatous polyposis families. Oral Dis 2003; 9:29–33. 11. Pławski A, Krokowicz P, Drews M, et al. Mutacje genu APC u polskich chorzych z FAP. Proktologia 2008; 3 (9): 291. 12. Кузьминов АМ, Карпухин АИ, Сачков ИЮ, Чубаров ЮЮ, Савельева ТА. Локализация мутаций в АРС- гене и клинический полиморфизм семейного аденоматоза. В: Матер ІІІ съезда колопроктологов Украины, ІІ съезда колопроктологов стран СНГ. Одесса, 2011: 140–1 . 13. Al-Tassan N, Chmiel NH, Maynard J, et al. Inherited variants of MYH associated with somatic G:C→T:A mutations in colorectal tumors. Nat Genet 2002; 30: 227–32. 14. Cheadle JP, Sampson JR. MUTYH-associated polyposis − from defect of base exicion repair to clinical genetic testing. DNA Repair (Amst) 2007; 6: 274–9. 15. Sieber OM, Lipton L, Crabtree M, et al. Multiple colorec- tal adenomas, classic adenomatous polyposis, and germ-line mu- tations in MYH. N Engl J Med 2003; 348 (9): 791–9. 16. Sampson JR, Jones S, Dolwani S, Cheadle JP. MutYH(MYH) and colorectal cancer. Biochem Soc Transact 2005; 33 (4): 679–83. 17. Miyoshi Y, Ando H, Nagase H, et al. Germ-line mutations of the APC gene in 53 familial adenomatous polyposis patients. Proc Natl Acad Sci 1992; USA 89: 4452–6. 18. Renkonen ET, Nieminen P, Abdel-Rahman WM, et al. Ad- enomatous polyposis families that screen APC mutation-negative by conventional methods are genetically heterogeneous. J Clin On- col 2005; 23: 5651–9. THE IMPORTANCE OF THE GENETIC METHODS FOR THE EARLY DIAGNOSTICS AND THE PROGNOSIS OF THE COURSE OF LARGE BOWEL ADENOMATOUS POLYPOSIS M. Lozynska, A. Plawski, Y. Lozynskyy Summary. The genealogic analysis, molecular and clin- ical investigations has been carried out in 26 patients from 17 families with multiply colorectal adenomas. The phenotypical symptoms in these patients were very vari- able and included different spectrum of extra-colonic symptoms. The disorders of the facial part of sculls and the soft tissue tumors were the most frequent addition- al markers of the disease in probands and in the group of high risk. The mutations of АРС and МYН genes were identified using automatic DNA sequencer. The marked mutations were detected in the half of patients with multiply polyposis, and 77% of the mutations ap- peared in APC gene. The majority of the patients with colorectal cancer with early manifestation of this onco- logical disease were in families with mutation in the co- don 674 TTG>TAG, leading to premature termination of translation and developing of the truncated protein with abnormal functions. The multiply colorectal ad- enomas were genetically heterogeneous group with dif- ferent malignant potential and with unequal contribu- tion of the hereditary component for their appearance. The patients with various genetical forms of the disease need different approaches during genetic consulting. Key Words: adenomatous polyposis, genealogic analysis, mutations, colorectal cancer, pedigree. Адреса для листування: Лозинська М.Р. 79000, Львів, вул. М. Лисенка, 31А ДУ «Інститут спадкової патології НАМН України» E-mail: maria_lozynska@ukr.net
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-59427
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
language	Ukrainian
last_indexed	2025-12-07T19:06:09Z
publishDate	2011
publisher	Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
record_format	dspace
spelling	Лозинська, М.Р. Плавскі, А. Лозинський, Ю.С. 2014-04-08T12:58:47Z 2014-04-08T12:58:47Z 2011 Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики / М.Р. Лозинська, А. Плавскі, Ю.С. Лозинський // Онкологія. — 2011. — Т. 13, № 4. — С. 282-287. — Бібліогр.: 18 назв. — укр. https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/59427 Проведено ґенеалогічний аналіз, молекулярно-ґенетичне дослідження та клінічне обстеження 26 пацієнтів із 17 сімей з множинним аденоматозним поліпозом із кількістю поліпів більше 100. Фенотип цих хворих характеризувався широким спектром позакишкових проявів. Найчастіше відмічали аномалії лицьової частини черепа і пухлини м΄яких тканин, які слугували додатковими маркерами захворювання у пробандів та у групі ризику. За допомогою методу секвенування ґеному встановлено маркерні мутації (ґенів АРС та МYН) у половини пацієнтів із множинним поліпозом; з них 77% − мутації АРС. Найбільшу кількість хворих на рак товстої кишки з ранньою маніфестацією захворювання виявлено у сім’ї із мутацією АРС, заміною в кодоні 674 (TTG>TAG), що викликає передчасну термінацію трансляції та утворення скороченої функціонально дефектної молекули білка. Встановлено, що множинні аденоматозні поліпи є ґенетично гетероґенною групою: їх злоякісний потенціал неоднаковий, внесок спадкової компоненти у виникнення різний. Пацієнти з різними ґенетичними формами поліпозу потребують диференційованого підходу до ґенетичного консультування та лікувальної тактики. Ключові слова: аденоматозний поліпоз, ґенеалогічний аналіз, мутації, рак товстої кишки, родовід. The genealogic analysis, molecular and clinical investigations has been carried out in 26 patients from 17 families with multiply colorectal adenomas. The phenotypical symptoms in these patients were very variable and included different spectrum of extra-colonic symptoms. The disorders of the facial part of sculls and the soft tissue tumors were the most frequent additional markers of the disease in probands and in the group of high risk. The mutations of АРС and МYН genes were identified using automatic DNA sequencer. The marked mutations were detected in the half of patients with multiply polyposis, and 77% of the mutations appeared in APC gene. The majority of the patients with colorectal cancer with early manifestation of this oncological disease were in families with mutation in the codon 674 TTG>TAG, leading to premature termination of translation and developing of the truncated protein with abnormal functions. The multiply colorectal adenomas were genetically heterogeneous group with different malignant potential and with unequal contribution of the hereditary component for their appearance. The patients with various genetical forms of the disease need different approaches during genetic consulting. Key Words: adenomatous polyposis, genealogic analysis, mutations, colorectal cancer, pedigree. uk Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького Онкологія Оригинальные исследования Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики Article published earlier
spellingShingle	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики Лозинська, М.Р. Плавскі, А. Лозинський, Ю.С. Оригинальные исследования
title	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики
title_full	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики
title_fullStr	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики
title_full_unstemmed	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики
title_short	Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики
title_sort	внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики
topic	Оригинальные исследования
topic_facet	Оригинальные исследования
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/59427
work_keys_str_mv	AT lozinsʹkamr vnesokmolekulârnogenetičnihdoslídženʹurannûdíagnostikuprognozuvannâperebíguadenomatoznogopolípozutovstoíkiškitaplanuvannâlíkuvalʹnoítaktiki AT plavskía vnesokmolekulârnogenetičnihdoslídženʹurannûdíagnostikuprognozuvannâperebíguadenomatoznogopolípozutovstoíkiškitaplanuvannâlíkuvalʹnoítaktiki AT lozinsʹkiiûs vnesokmolekulârnogenetičnihdoslídženʹurannûdíagnostikuprognozuvannâperebíguadenomatoznogopolípozutovstoíkiškitaplanuvannâlíkuvalʹnoítaktiki

Внесок молекулярно-генетичних досліджень у ранню діагностику, прогнозування перебігу аденоматозного поліпозу товстої кишки та планування лікувальної тактики

Репозитарії

Схожі ресурси