Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales
Приведено описание нового вида зеленых водорослей Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae), обнаруженного в выжимке тины р. Южный Буг (Украина). На основании анализа нуклеотидной последовательности ядерного гена 18S rDNA установлено место данного вида в системе макроклады Stephanosphaerinia...
Saved in:
| Published in: | Альгология |
|---|---|
| Date: | 2012 |
| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/64224 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales / И.Ю. Костиков, Э.Н. Демченко, В.Р. Бойко, А.А. Гончаров // Альгология. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 227-249. — Бібліогр.: 35 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860056890824720384 |
|---|---|
| author | Костиков, И.Ю. Демченко, Э.Н. Бойко, В.Р. Гончаров А.А. |
| author_facet | Костиков, И.Ю. Демченко, Э.Н. Бойко, В.Р. Гончаров А.А. |
| citation_txt | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales / И.Ю. Костиков, Э.Н. Демченко, В.Р. Бойко, А.А. Гончаров // Альгология. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 227-249. — Бібліогр.: 35 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Альгология |
| description | Приведено описание нового вида зеленых водорослей Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae), обнаруженного в выжимке тины р. Южный Буг (Украина). На основании анализа нуклеотидной последовательности ядерного гена 18S rDNA установлено место данного вида в системе макроклады Stephanosphaerinia, которая, в целом соответствует ранее предложенному порядку Protosiphonales. Показано, что в рамках данного порядка, включающего четыре клады и группу таксонов "Protosiphonales incertae sedis", Ch. hypanicus входит в кладу, соответствующую Protosiphonaceae s.l., представители которой отличаются от прочих членов порядка наличием голых двужгутиковых зооспор. Морфологически вид сходен с Ch. lemnae Cohn, от которого отличается передней стигмой у зооспор, более толстой оболочкой субсенильных клеток, мелкобугорчатой оболочкой акинет, вегетацией в свободноживущем, а не эндофитном состоянии. От прочих видов рода Chlorochytrium Cohn отличается наличием деления по типу десмосхизиса, приводящему к образованию диад, пакетов и плеврококкоидных агрегатов. Обсуждаются объем, диакритические признаки и структура Protosiphonaceae, близость результатов молекулярно-генетического и фенотипического подходов в таксономии данного семейства.
The description of a new species of green algae, Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae), found in a flow of mud from the Southern Bug River (Ukraine) is presented. The analysis of the nucleotide sequence of the nuclear gene of 18S rDNA showed the position of this species in the system of Stephanosphaerinia macroclade, which generally corresponds to the previously proposed order Protosiphonales. It is shown that, in this order, incorporating four clades and "Protosiphonales incertae sedis" group of taxa, Chlorochytrium hypanicus, belongs to the clade corresponding Protosiphonaceae s.l., whose members differ from other representatives of this order by the presence of naked biflagellate zoospores. Morphologically, Ch. hypanicus is similar to Ch. lemnae Cohn, differing from it by anterior stigma in zoospores, thicker envelope of subsenile cells, a finely tuberculate envelope of akinetes, and by mode of life (free-living, not endophytic). From other species of the genus Chlorochytrium Cohn, new species differ by fission of desmoschisis type, leading to the formation of dyads, packages, and pleurococcal clusters. We discuss the volume, diacritical features, and structure of Protosiphonaceae, including the similarity of the results of molecular genetic and phenotypic approaches in the taxonomy of this family.
|
| first_indexed | 2025-12-07T17:01:57Z |
| format | Article |
| fulltext |
Общие вопросы альгологии
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 227
УДК 582.27
И.Ю. КОСТИКОВ1, Э.Н. ДЕМЧЕНКО1, В.Р. БОЙКО1, А.А. ГОНЧАРОВ2
1Киевский национальный ун-т им. Тараса Шевченко,
ул. Владимирская, 64, 01601 Киев, Украина
2Биолого-почвенный ин-т Дальневосточного отделения РАН,
пр. 100 лет Владивостоку, 159, 690022 Владивосток, Россия
CHLOROCHYTRIUM HYPANICUS SP. NOV. (CHLOROPHYCEAE)
И ЕГО МЕСТО В СИСТЕМЕ PROTOSIPHONALES
Приведено описание нового вида зеленых водорослей Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
(Chlorophyceae), обнаруженного в выжимке тины р. Южный Буг (Украина). На осно-
вании анализа нуклеотидной последовательности ядерного гена 18S rDNA установ-
лено место данного вида в системе макроклады Stephanosphaerinia, которая, в целом
соответствует ранее предложенному порядку Protosiphonales. Показано, что в рамках
данного порядка, включающего четыре клады и группу таксонов "Protosiphonales
incertae sedis", Ch. hypanicus входит в кладу, соответствующую Protosiphonaceae s.l.,
представители которой отличаются от прочих членов порядка наличием голых дву-
жгутиковых зооспор. Морфологически вид сходен с Ch. lemnae Cohn, от которого
отличается передней стигмой у зооспор, более толстой оболочкой субсенильных кле-
ток, мелкобугорчатой оболочкой акинет, вегетацией в свободноживущем, а не эндо-
фитном состоянии. От прочих видов рода Chlorochytrium Cohn отличается наличием
деления по типу десмосхизиса, приводящему к образованию диад, пакетов и плевро-
коккоидных агрегатов. Обсуждаются объем, диакритические признаки и структура
Protosiphonaceae, близость результатов молекулярно-генетического и фенотипическо-
го подходов в таксономии данного семейства.
К л ю ч е в ы е с л о в а : зеленые водоросли, таксономия, молекулярная филогения,
Chlorophyceae, Protosiphonales, Protosiphonaceae, Stephanosphaerinia, Chlorochytrium hy-
panicus.
Введение
Род Chlorochytrium Cohn был описан на примере вида Ch. lemnae, кото-
рый инфицировал листья ряски (Lemna trisulca L.) в водотоках г. Брес-
лау (Cohn, 1870—1875). В настоящее время этот род по традиционным
морфологическим системам (Коршиков, 1953; Komárek, Fott, 1983) объ-
единяет коккоидные зеленые водоросли, которые размножаются голыми
двужгутиковыми зооспорами. Виды данного рода либо ведут эндофит-
© И.Ю. Костиков, Э.Н. Демченко, В.Р. Бойко, А.А. Гончаров, 2012
И.Ю. Костиков и др.
228 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
ный образ жизни, развиваясь в межклетниках покрытосеменных водных
растений (Lemna L., Elodea Michx., Ceratophyllum L., Najas L., Potamoge-
ton Walter, Nymphoides Ség. (= Limnanthemum S.G. Gmel.), сфагновых
мхов (Sphagnum L.), либо поселяются в пустых домиках золотистых во-
дорослей рода Dinobryon Ehrenb. Согласно сводке Й. Комарека и
Б. Фотта, род включает 7 видов: Ch. lemnae, Ch. knyanum Cohn et
Szyman, Ch. archerianum Hieron., Ch. biene (Klebs) G.S. West, Ch. limnan-
themum (Gunningh.) G.S. West, Ch. paradoxum (Klebs) G.S. West, Ch. dino-
bryonis Lund (Komárek, Fott, 1983). К нему отнесен также Ch. bristo-
lae (G.M. Sm.) D.M. John et P. Tsarenko (John, Tsarenko, 2002).
Ранее на основе анализа комплекса фенотипических признаков, оп-
ределенных с помощью светового микроскопа, виды рода Chlorochytrium
вместе с родом Kentrosphaera Borzi провизорно были включены нами в
состав расширенного по объему пор. Protosiphonales и интегрированы в
систему сем. Protosiphonaceae sensu Kostikov et al. (Костіков та ін., 2001).
Современная реконструкция филогенетических отношений одно-
клеточных водорослей класса Chlorophyceae, выполненная на основе
анализа большой выборки нуклеотидных последовательностей ядерного
гена, кодирующего малую субъединицу рибосомальной РНК (далее —
18S rDNA), очертила в составе суперклады Caudivolvoxa1 6 монофилети-
ческих клад (Nakada et al., 2008). Одна из них — Stephanosphaerinia — со-
ответствует предложенному нами расширенному пор. Protosiphonales, за
исключением водорослей с монадным типом морфологической структу-
ры тела. Более того, в составе клады Stephanosphaerinia выделилась суб-
клада, которая объединила виды, включенные нами в сем. Protosiphona-
ceae s.l. Однако из-за отсутствия молекулярных данных место Chlorochy-
trium в системе Protosiphonales s.l. / Stephanosphaerinia до сих пор не под-
твержденно.
При изучении водорослей регионального ландшафтного парка Гра-
нитно-степное Побужье (Украина) нами была обнаружена и выделена в
культуру свободноживущая водоросль, которая по ряду признаков в це-
лом соответствовала расширенному описанию Ch. lemnae, выполненно-
му Р. Луином (Lewin, 1981), однако как по экологии, так и по ряду мор-
фологичских признаков не была полностью ему идентична.
Определение таксономического статуса и выяснение места данной
водоросли в системе зеленых водорослей составило цель данной работы.
Материалы и методы
Материалом для данной работы послужил штамм ACKU 222-03 из кол-
лекции культур водорослей Киевского нац. ун-та им. Тараса Шевченко
(Костиков и др., 2009). Данный штамм был изолирован из пробы вы-
1 Названия клад в цитируемой работе были предложены в соответствии с прин-
ципам т.н. ФилоКода — провизорного Международномого кодекса филогенети-
ческой номенклатуры (Cantino, de Queiroz, 2007, цит. по Nakada et al., 2008).
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 229
жимки макроскопических разрастаний водорослей, собранной Э.Н. Дем-
ченко в 2003 г. в р. Южный Буг на территории урочища Гард региона-
льного ландшафтного парка Гранитно-степное Побужье (г. Южноукра-
инск Николаевской обл., Украина). Для проведения сравнительно-
морфологического анализа штамм ACKU 222-03 был также сопоставлен
со штаммом ACKU 686-06, который представляет субкультуру штамма
Ch. lemnae, выделенного Р. Луином из того же вида ряски (Lemna
trisulca), из которого данный вид был впервые описан Р. Коном (Lewin,
1981) и депонирован в коллекции культур Геттингенского ун-та под но-
мером SAG 15.85 (Schlösser, 1994).
Оба штамма (ACKU 222-03 и ACKU 686-06) выращивали на 1,5 %
агаризованной среде Болда с утроенным количеством азота (3N BBM)
(Ettl, Gärtner, 1995) на осветительной установке при освещенности
1800—2500 лк и температуре 14—16 оС с 12-часовым чередованием свето-
вой и темновой фаз. Наблюдения проводили по достижении культурами
возраста 0,5; 1; 3; 14 суток, 1; 3; 6 месяцев, 1 и 2 лет.
Микроскопические исследования выполняли на оптических микро-
скопах серий BMXS, CE и PrimoStar, оснащенных цифровыми фотока-
мерами, соединенными с персональными компьютерами при обязатель-
ном использовании иммерсионных объективов.
Для анализа родственных отношений штамма ACKU 222-03 нами
была поолучена последовательность ядерного гена 18S rDNA. Тоталь-
ную ДНК выделяли в соответствии с протоколом изоляции ДНК из рас-
тений (DNA Microprep Isolation from Plants, http://www.scienceboard.net).
Последовательность, кодирующая 18S rDNA, была амплифицирова-
на при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием
универсальных прямого (1-F) и обратного (1528-R) эвкариотических
праймеров (табл. 1).
Таблица 1
Последовательности праймеров, использованных для амплификации ядерного гена,
кодирующего 18S rDNA
Праймер Последовательность
1-F 5’ AAC CTG GTT GAT CCT GCC AGT A 3’
1528-R 5’ CTT CTG CAG GTT CAC CTA C 3’
Ампликоны, полученные в результате ПЦР, визуализировали мето-
дом горизонтального электрофореза в агарозном геле, очищали при по-
мощи набора Wizard® PCR Preps DNA Purification System (Promega) в
соответствии с инструкцией производителя и секвенировали с обоих
концов при помощи трех пар прямых и обратных праймеров (1F, 536R,
528F, 1055R, 1055F, 1528R). Редактирование и сборку консенсусной по-
следовательности проводили путем визуального сопоставления прямой
и обратной хроматограмм при помощи программ Chromas (version 1.45)
и Cap 2. Полученная консенсусная последовательность была депониро-
И.Ю. Костиков и др.
230 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
вана в GenBank (код доступа HE687020). Эта последовательность была
добавлена к матрице сиквенсов 18S rDNA (Nakada et al., 2008).
Филогенетические деревья строили методом максимального правдо-
подобия (Maximal Likelihood, далее ML), объединения соседей
(Neighborhood-Joining, далее NJ) и максимальной парсимонии (Maxi-
mum Parsimony, далее MP) в филогенетической программе PAUP 4.0b10
(Swofford, 2002). Эволюционные модели для ML и NJ анализов выбира-
ли в программе Modeltest 3.04 (Posada, Crandall, 1998). Дистанции для
NJ анализа рассчитывали через ML оптимизацию. Для ML и MP анали-
зов использовали эвристический поиск оптимальной топологии. Устой-
чивость (статистическую поддержку) филогенетических деревьев в NJ и
MP анализах оценивали методом бутстрепа (Felsenstein, 1985), используя
1000 бутстреп-реплик. В бутстреп-анализе MP-деревьев в каждой реп-
лике проводили 10 эвристических поисков оптимальной топологии со
случайным порядком добавления таксонов.
Результаты
Оптическая микроскопия. Штамм ACKU 222-03 в культурах различного
возраста характеризовался высокой степенью морфологической измен-
чивости. Жизненный цикл представлял собой цикломорфоз, в котором
представлены 10 стадий: ювенильные клетки (Ju), прегенеративные ве-
гетативные клетки (Pre-g), молодые (G1) и зрелые (G2) генеративные
клетки, субсенильные клетки (SS), клетки, трансформирующиеся в спо-
рангии (Pre-sp), зоо- и апланоспорангии (Sp), зооспоры (Zsp) и апла-
носпоры (Asp), акинеты (Ak) (рис. 1).
Ювенильные клетки (Ju) представляют первую стадию, которая об-
разуется из репродуктивных клеток — остановившихся зооспор или из
апланоспор. Эти клетки сферические, с тонкой (толщ. до 0,3 мкм) обо-
лочкой. Хлоропласт париетальный, у самых молодых клеток цельный, у
более взрослых — перфорирован 1—2 щелями, не имеет внутренних тя-
жей. Пиреноид один, с крахмальной оберткой, которая на максималь-
ных увеличениях оптического микроскопа кажется непрерывной. Цен-
тральная часть клетки занята крупной вакуолью, в которой, как прави-
ло, наблюдается одно дрожащее тельце. Минимальный диаметр клеток
соответствует диаметру округлившихся зооспор (3—5 мкм), максималь-
ный — до 12,5 мкм (рис. 2, 2; 4, 2).
Прегенеративные вегетативные клетки (Pre-g) в отличие от юве-
нильных имеют несколько вакуолей с клеточным соком и париетальный
сетчатый хлоропласт. Клетки сохраняют сферическую форму, единст-
венный пиреноид, вокруг которого различается фрагментированная
крахмальная обертка, состоящая из 2—4 скорлупок. Диаметр прегенера-
тивных клеток составляет 11—20 мкм (рис. 2, 3; 4, 3).
Молодые генеративные клетки (G1) характеризуются способностью
вегетативно делиться по типу десмосхизиса, а при подсыхании среды
образовывать акинеты, однако не трансформируются в спорангии и не
образуют сложных "плеврококкоидных" клеточных комплексов. В куль-
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 231
туре это возрастное состояние представлено как одиночными сфериче-
скими и субсферическими клетками, так и диадами либо пакетами.
Клеточная оболочка тонкая (до 0,5 мкм), однослойная, двухконтурная.
Хлоропласт состоит из периферической сети и 1—3 внутренних нераз-
ветвленных или слаборазветвленных тяжей. Пиреноид один, париеталь-
ный, либо в результате его фрагментации образуется пара из двух сцеп-
ленных пиреноидов. Ядро одно, располагается в центре клетки в цито-
плазме между вакуолями с клеточным соком, из-за чего кажется подве-
шенным на цитоплазматических тяжах. Сферические клетки диам. 18,5—
25 мкм, субсферические клетки и клетки в диадах и пакетах 14—25 мкм
дл., (8,6) 10—21 мкм шир. Комплексы из диад 16,0—37 мкм дл., 13,5—
24 мкм шир., из 4-клеточных пакетов — до 42,5 мкм дл., до 28,5 мкм
шир. (рис. 2, 4, 5; 4, 4).
Рис. 1. Схема жизненного цикла Chlorochytrium hypanicus (ACKU 222-03): 1 — направ-
ление онтогенеза в логарифмической и стационарной фазах при обычных сроках
культивирования (возраст культуры до 3—4 месяцев); 2 — в стационарной фазе и фа-
зе отмирания (от неск. месяцев до неск. лет); 3 — в фазе отмирания при дегидрата-
ции культуры (от неск. месяцев до неск. лет); 4 — при пересеве старых культур на
свежую питательную среду Возрастные состояния: ювенильное (Ju), прегенеративное
(Pre-g), молодое генеративное (G1), зрелое генеративное (G2), субсенильное (SS),
акинеты (Ak), многоядерные преспорангии (Pre-sp), спорангии (Sp), зооспоры (zsp),
апланоспоры (asp)
Зрелые генеративные клетки (G2) способны как к трансформации в
спорангии, так и к десмосхизису с образованием диад, пакетов и слож-
ных "плеврококкоидных" клеточных комплексов, напоминающих корот-
кие многорядные неправильно разветвленные нити. В отличие от ста-
И.Ю. Костиков и др.
232 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
дии G1, зрелые генеративные клетки не образуют акинет, а при старе-
нии или подсыхании среды переходят в субсенильное состояние.
Одиночные клетки преимущественно неправильно-эллипсоидные и
неправильно-яйцевидные, часто удлиненные; клетки сферической фор-
мы встречаются редко. Клеточная оболочка слегка утолщается (до 0,6—
0,9 мкм) и выглядит двухконтурной. В клеточных комплексах (диады,
пакеты, "плеврококкоидные" нити) клетки неправильно-округлые, с
тонкой оболочкой (0,5 мкм), иногда — с остатками оболочки материн-
ской клетки или в ее слегка расширенной оболочке. В стадии G2 пери-
ферическая часть хлоропласта из сети трансформируется в почти
сплошную сферу, перфорированную короткими щелями, а в централь-
ной части развивается сеть из грубых и тонких разветвленных тяжей.
Количество пиреноидов увеличивается до 4—8 (10). Они имеют равные
или неравные размеры и располагаются как в периферической части
хлоропласта, так и во внутренних тяжах, причем как одиночно, так и
сцепленными парами. Обертки пиреноидов прерывистые, состоят из
нескольких (4—7) крахмальных пластин. Количество вакуолей с клеточ-
ным соком также увеличивается. Клетки остаются одноядерными, с
центральным ядром, подвешенным на цитоплазматических тяжах. Не-
правильные клетки (21) 27—40 мкм дл., 14,2—33 мкм шир., сферические
клетки диам. 20—34,5 мкм (рис. 2, 6—8; 4, 5).
Субсенильные клетки (SS) образуются в старых (от 5 месяцев до 3
лет) культурах на невысохшей агаризованной среде и представляют ос-
новную из трех возможных покоящихся стадий. Размеры их существен-
но увеличены, имеют слоистые неравномерно утолщенные оболочки и в
основном не объединены в клеточные агрегаты. Эти клетки образуются
из зрелых генеративных и при пересеве на свежую питательную среду
либо преобразуются в спорангии, либо путем десмосхизиса прорастают
клеточными, преимущественно "плеврококкоидными" агрегатами в ста-
дию G2 (рис. 3, 5; 4, 8). При высыхании агара протопласт субсенильных
клеток однократно делится и далее каждый из дочерних протопластов
трансформируется в акинету.
Субсенильные клетки удлиненные, изредка — сферические и суб-
сферические, преимущественно одиночные, зеленые. Клеточная обо-
лочка толстая, многослойная, на одном из полюсов односторонне утол-
щенная. В оболочке выделяется внутренняя "гиалиновая" (толщ. 1,3—
2,2 мкм) и поверхностная слоистая (толщ. 2—5 мкм) части, а также неред-
ко — апикальный бесцветный фибриллярный колпачок (толщ. до 8 мкм).
Гиалиновая часть двухконтурная, приблизительно одинаковой толщины
на всем протяжении, прилегает к протопласту. Слоистая часть представ-
ляет систему из 3—7 слоев вторичных оболочек. Каждый из этих слоев,
начиная с наружного, на одном из полюсов может разрываться, отслаи-
ваться от нижележащего и разделяться на систему плохо заметных фиб-
рилл. Эта система фибрилл частично ослизняется, и на том полюсе, где
произошел разрыв, образует фибриллярный бесцветный колпачок. Ци-
топлазма субсенильных клеток сильно вакуолизирована, содержит
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 233
большое количество крупных бесцветных капель масла и гранул крах-
мала, которые полностью маскируют структуру хлоропласта. Удлинен-
ные клетки (28) 44—94 мкм дл., 25,5—42 мкм шир., сферические клетки
диам. 36—50 мкм (рис. 3, 1; 4, 6, 7).
Рис. 2. Chlorochytrium hypanicus (штамм ACKU 222-03): 1 — зооспоры; 2 — ювениль-
ные клетки; 3 — прегенеративная клетка; 4, 5 — молодые генеративные клетки (4 —
одиночные; 5 — диады); 6—8 — зрелые генеративные клетки (6 — одиночные, 7 —
диады; 8 — "плеврококкоидные" нити). Шкала 10 мкм
Преспорангиальные клетки (Pre-sp). При подготовке к спорогенезу
зрелые генеративные и субсенильные клетки в течение нескольких ча-
сов проходят стадию трансформации в спорангии. На этой стадии про-
исходит реорганизация хлоропласта в мелкоячеистую сеть, занимающую
всю клетку. Пиреноиды быстро фрагментируются, их количество увели-
чивается и составляет от десяти и более пиреноидов на клетку. Каждый
пиреноид располагается в одном из узлов сети хлоропласта. У преспо-
И.Ю. Костиков и др.
234 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
рангиальных клеток, образовавшихся из взрослых генеративных, кле-
точная оболочка остается достаточно тонкой (до 1,2 мкм). У клеток, об-
разовавшихся из субсенильных, поверхностная слоистая часть оболочки
разрывается, слущивается и протопласт остается окруженным только
внутренней тонкой "гиалиновой" оболочкой. На стадии преспоранги-
альных клеток количество ядер возрастает и приблизительно соответст-
вует количеству узлов сети хлоропласта. Таким образом, на стадии пре-
спорангиальных клеток происходит подготовка к элеутеросхизису. Диа-
метр сферических преспорангиальных клеток 36—52 мкм. Размер удли-
ненных клеток, образовавшихся из зрелых генеративных, составляет 33—
52 мкм дл., 19—30 мкм шир., а из субсенильных — 37—70 (90) мкм дл.,
29—38 мкм шир. (рис. 3, 6).
Спорангии (Sp) образуются только из преспорангиальных клеток в
результате элеутеросхизиса и повторяют их по размеру и форме. Зрелые
спорангии и спорангии в состоянии элеутеросхизиса отличаются от ве-
гетативных клеток желто-зеленой окраской. В каждом спорангии обра-
зуется большое количество (от нескольких десятков до двух-трех сотен)
голых протопластов репродуктивных клеток — зооспор либо апланос-
пор. Тип репродуктивных клеток и характер их освобождения из спо-
рангия зависит от состояния культуры (рис. 3, 7).
В большинстве случаев в культурах как на жидкой, так и на и ага-
ризованной среде в спорангиях образуются зооспоры (zsp). При их вы-
ходе оболочка спорангия вскрывается небольшим отверстием и в зоне
разрыва спорангия наблюдается структура, похожая на колпачок. Далее
отверстие расширяется и зооспоры освобождаются в быстро раство-
ряющемся слизистом пузыре. Зооспоры голые, слабометаболичные, с
двумя равными жгутиками длиной 6—8 мкм, с одним пристенным чаше-
видным хлоропластом, содержащим малозаметный базальный пиреноид
и крупную палочковидную стигму, расположенную в передней части
клетки, с двумя апикальными пульсирующими вакуолями. При актив-
ном движении зооспоры веретеновидные, их длина составляет 6,2—
7,5 мкм, ширина — 1,6—2,2 мкм; при замедлении движения форма зоо-
спор приближается к субсферической. При остановке зооспоры округ-
ляются, их диаметр составляет 3,5—4,5 мкм (рис. 2, 1; 4, 1).
В культурах на подсыхающем агаре протопласты репродуктивных
клеток иногда округляются без образования жгутиков еще в спорангии,
одеваются в тонкую собственную оболочку и трансформируются в
апланоспоры (asp). Освобождение апланоспор происходит в результате
одностороннего частичного ослизнения и разрыва оболочки спорангия
без образования слизистого пузыря. Апланоспоры морфологически пол-
ностью идентичны ювенильным клеткам с нерассеченным хлоропла-
стом. Диаметр апланоспор составляет 4—6 мкм. Апланоспоры способны
без дальнейшего роста сохраняться в старых культурах длительное время
и, таким образом, представлять один из типов покоящихся клеток. При
пересеве на свежую питательную среду апланоспоры прорастают в юве-
нильные и далее — в прегенеративные и генеративные клетки.
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 235
Рис. 3. Chlorochytrium hypanicus (штамм ACKU 222-03): 1 — субсенильные клетки;
2, 3 — акинеты; 4 — прорастание акинеты; 5 — прорастание субсенильной клетки;
6 — преспорангиальная клетка; 7 — выход зооспор из спорангия. Шкала 10 мкм
Акинеты (Ak) образуются в культурах возрастом от 3 месяцев и бо-
лее при подсыхании агаризованной среды из клеток двух возрастных
состояний — G1 и SS. При образовании акинет протопласт сжимается,
округляется, отстает от оболочки вегетативной клетки, вырабатывает
собственную тонкую двуслойную оболочку, у которой внутренний слой
бесцветный и гладкий (гиалиновый), толщ. около 0,5 мкм, внешний
слой мелко- или среднебугристый, как правило, с красноватым оттен-
ком, толщ. 0,3—0,8 мкм. В вакуолях и цитоплазме накапливаются жел-
тые и оранжевые пигменты и акинета приобретает оранжевый цвет. Во-
круг нее сохраняется оболочка исходной вегетативной клетки. У моло-
дых генеративных клеток в акинеты трансформируются одиночные
клетки или диады, при этом из одной вегетативной клетки образуется
только одна акинета. В субсенильных клетках при образовании акинет
И.Ю. Костиков и др.
236 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
сжатие протопласта происходит одновременно с его однократным деле-
нием, в результате чего под оболочкой одной субсенильной клетки
формируется пара акинет. Их диаметр соответствует размеру молодых
генеративных клеток и составляет 14,5—26,0 мкм при среднем значении
18,5 мкм (рис. 3, 2, 3; 4, 9).
Рис. 4. Chlorochytrium hypanicus (штамм ACKU 222-03): 1 — зооспора; 2 — ювенильная
клетка; 3 — прегенеративные клетки; 4, 5 — молодые и зрелые генеративные клетки
соответственно; 6, 7 — субсенильные клетки; 8 — прорастание субсенильной клетки;
9 — акинеты, образовавшиеся из субсенильной клетки. Шкала 10 мкм
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 237
Акинеты при пересеве на свежую среду приобретают зеленую окра-
ску, их протопласт увеличивается и оболочки, окружающие акинету,
разрываются. Протопласт делится путем десмосхизиса и далее прораста-
ет в клетки состояния G2, образуя комплексы в виде "плеврококкоид-
ных" нитей или неправильных пакетов (рис. 3, 4).
Молекулярно-филогенетический анализ
Нуклеотидная последовательность 18S, полученная для штамма ACKU
222-03, составляла 2371 пн дл., что существенно больше типичной для
большинства зеленых водорослей длины малой рибосомной субъедини-
цы рДНК. Эти отличия были обусловлены наличием интрона длиной
600 пн.
Как и предполагалось на основе анализа фенотипических призна-
ков, поиск сходных последовательностей в базе данных Генбанк
(http://www.ncbi.nlm.nih.gov) с использованием megablast алгоритма пока-
зал, что 18S рДНК ACKU 222-03 близок к членам клады Stephanosphaerinia
(Nakada et al., 2008). Поэтому в дальнейшем были использованы только
последовательности из этой клады (45), а также из клад Arenicolina (4) и
Chlorogonia (7), взятых в качестве внешнего корня. Выравнивание 18S по-
следовательности ACKU 222-03 проводилось на основе матрицы Nakada et
al. (2008; http://www2.tba.t-com.ne.jp/nakada/takashi/data/index.html). Всего
набор данных, использованных для филогенетических анализов, включал
57 последовательностей и составлял 1688 пн дл. GTR+I+Г модель эволю-
ции нуклеотидных последовательностей выбрана программой Modeltest
3.04 как наиболее адекватно описывающая наш набор данных. Филогене-
тическое древо, построенное ML методом, показано на рис. 5.
Штамм ACKU 222-03 был помещен в кладу, объединяющую пред-
ставителей родов Chlorosarcinopsis Herndon, Protosiphon Klebs, Chlo-
rosphaeropsis Visch., Spongiochloris R.C.Starr, Gongrosira Kьtz., Pachycladella
P.C. Silva, в качестве сестринского таксона для Chlamydomonadaceae sp.
Pic8/18P-3d. Принадлежность нового вида к этой кладе была поддержа-
на умеренным значением бутстрепа (85 % ML), но его близость с
Chlamydomonadaceae sp. Pic8/18P-3d менее убедительна.
Обсуждение
Статус таксона, представленного штаммом ACKU 222-03. По комплексу
признаков, включающих: а) голые двужгутиковые зооспоры; б) сетчатые
хлоропласты с несколькими пиреноидами; в) одноядерные вегетативные
клетки; г) десмосхизис с образованием диад, пакетов и более сложных
клеточных агрегатов; д) зооспорогенез по типу элеутеросхизиса, штамм
ACKU 222-03 демонстрировал признаки сходства с двумя видами —
Chlorochytrium lemnae (Сohn, 1870—1875) и Chlorosphaeropsis lemnae (Moe-
wus, 1950).
Наиболее подробное описание Chlorochytrium lemnae представил
Р. Луин (Lewin, 1981) на основе изучения 6 штаммов данного вида, из
И.Ю. Костиков и др.
238 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
Рис. 5. Место Chlorochytrium hypanicus в системе Protosiphonales по результатам анали-
за последовательности 18S рДНК (филогенетическое древо, построенное ML мето-
дом; на ветвях — значения бутстрепа для ML/NJ/MP)
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 239
которых пять были выделены из Lemna minor L. и L. gibba L., растущих
в водоемах в окрестностях Оксфорда (Великобритания), а шестой — из
ряски, растущей в водоемах штата Небраска (США). В данной работе
Р. Луин убедительно показал соответствие изученных им штаммов ав-
торскому диагнозу данного вида и значительно дополнил сведения о
фенотипических признаках Chlorochytrium lemnae.
Chlorosphaeropsis lemnae был описан Л. Мевус (Moewus, 1950) на ос-
нове культуры, выделенной из отмерших листьев L. minor в бот. саду
Гейдельберга, Германия. Хотя в его диагнозе был отмечен один из при-
знаков, отличающий ее штамм от Chlorochytrium lemnae — сравнительно
небольшие максимальные размеры вегетативных клеток — диам. около
20 мкм, Р. Луин не счел этот признак существенным и предложил счи-
тать Chlorosphaeropsis lemnae синонимом Chlorochytrium lemnae.
Позже Р. Луин из Lemna trisulca, растущей в пруду в окр. г. Утрехт,
выделил в культуру и депонировал в коллекции культур Геттингенского
ун-та (SAG 15.85) штамм, идентифицированный им как Chlorochytrium
lemnae (Schlösser, 1994). Субкультура этого штамма в дальнейшем была
депонирована в коллекции культур водорослей Киевского нац. ун-та
им. Тараса Шевченко (ACKU 686-06).
Между собой штаммы ACKU 222-06 и ACKU 686-06 отличались.
Морфология ACKU 222-06 в основном соответствовала описанию
Chlorochytrium lemnae, выполненному Р. Луином (Lewin, 1981). Второй
штамм — ACKU 686-06, который в коллекциях депонирован как Chloro-
chytrium lemnae, в полной мере соответствовал авторскому диагнозу
Chlorosphaeropsis lemnae (табл. 2).
В наибольшей степени сходство ACKU 222-06 с описанием и иллю-
страциями Chlorochytrium lemnae проявилось в наличии крупных удли-
ненных субсенильных клеток, длина которых может достигать 80 мкм и
более, и акинет с тонкой двуслойной оболочкой. Отличия ACKU 222-03
от Ch. lemnae состояли в переднем, а не среднем положении стигмы у
зооспор, в наличии более толстой оболочки у субсенильных клеток (4—
15 вместо 2-3 мкм), в формировании у части акинет мелкобугорчатой, а
не гладкой оболочки, а также в экологии — вегетацией в свободножи-
вущем, а не эндофитном состоянии.
Штамм ACKU 686-06, по нашему мнению, может быть идентифи-
цирован как Chlorosphaeropsis lemnae. Он отличается как от ACKU 222-
03, так и от описания Chlorochytrium lemnae, выполненного Р. Луином,
меньшими максимальными размерами вегетативных клеток (диам. до
36 мкм), отсутствием крупных удлиненных субсенильных клеток (изред-
ка присутствуют субсферические клетки до 36,5 мкм дл. и до 28 мкм
шир.), а также наличием у акинет толстой многослойной, а не тонкой
двуслойной оболочки. Кроме того, субсенильные клетки ACKU 686-06
при пересеве на свежую среду трансформируются только непосредст-
венно в спорангии, а не прорастают в клеточные агрегаты, т.е. десмос-
хизис при прорастании субсенильных клеток не наблюдается.
И.Ю. Костиков и др.
240 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
Таблица 2
Сравнительная характеристика штаммов ACKU 222-03 и ACKU 686-06, описаний
Chlorosphaeropsis lemnae и Chlorochytrium lemnae
Признак
ACKU 222-
03
ACKU
686-06
Chlorochy-
trium lemnae
(Lewin, 1981)
Chlоrosphaerop-
sis lemnae
(Moewus,
1950)
Положение стигмы у
зооспор
Переднее Переднее
или средне-
переднее
Среднее
?
Длина зооспор, мкм 6,2—7,5 5—7 5—7 5
Ширина зооспор, мкм 1,6—2,2 2—3 ок. 2 2,5
Диаметр округливших-
ся зооспор, мкм
3,0—4,5 3,8—4,6 ок. 3* ?
Макс. диаметр клеток
стадии Pre-g, мкм
20 9,8 10 ?
Мин. диаметр клеток
стадии G1, мкм
18,5 10.5 20 ?
Макс. размер сфериче-
ских клеток стадии SS,
мкм
52 36 25 20
Макс. длина удлинен-
ных клеток стадии SS,
мкм
94
Не выявле-
ны
До 80* Не выявлены
Макс. ширина удли-
ненных клеток стадии
SS, мкм
42 Не выявле-
ны
? Не выявлены
Макс. толщина обо-
лочки стадии SS, мкм
4—15 4,9 (7,2) 2—3 ?
Диаметр акинет, мкм 14,5—26 17,7—25 (28) 11,5—17** ?
Оболочка акинет
Гладкая и
мелко-
бугорчатая
Средне-
бугорчатая,
изредка
почти глад-
кая, толстая
(45 слойная)
Гладкая **
?
Экология Свободно-
живущая
Эндофит
Lemna
Эндофит
Lemna
Эндофит
Lemna
*Согласно авторскому диагнозу Р. Кона, диаметр округлившихся зооспор составляет
4-5 мкм, максимальная длина удлиненных клеток — до 100 мкм (Cohn, 1870−1875);
** согласно рисунку 6.6 (Lewin, 1981).
Недавно для рода Chlorochytrium была предложена концепция, со-
гласно которой в данный род была включена большая группа видов, у
которых вегетативные клетки одноядерные, имеют париетальные лопа-
стные хлоропласты со многими пиреноидами, многочисленные пульси-
рующие вакуоли и способны к десмосхизису перед образованием зоо-
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 241
спор, причем сами зооспоры не метаболичны, находятся в клеточных
оболочках и имеют дорзовентарльное строение (Wujek, Thompson, 2005).
При обсуждении несоответствия этой родовой концепции результатам
электронно-микроскопического исследования зооспор Chlorochytrium
lemnae, показавшим несомненное наличие у данного вида именно голых
зооспор (Watanabe, Floyd, 1994), Д. Вужек и Р. Томпсон (Wujek, Thomp-
son, 2005) предположили, что авторы, проводившие электронно-микро-
скопическое исследование, имели дело с контаминированными или не-
правильно идентифицированными культурами. Однако наши данные
подтверждают наличие именно голых зооспор у штаммов, соответст-
вующих классической концепции рода Chlorochytrium, и позволяют ут-
верждать, что исследования С. Ватанабе и Г.Л. Флойда (Watanabe,
Floyd, 1994) были выполены на чистом и правильно идентифицирован-
ном материале, а методическую ошибку, по-видимому, связанную с не-
правильной идентификацией или контаминацией материала, допустили
Д. Вужек и Р. Томпсон.
Таким образом, по морфологическим признакам ACKU 222-03 мо-
жет быть определен как новый вид рода Chlorochytrium, близкий к
Chlorochytrium lemnae, а ACKU 686-06 переопределен как Chlorosphaerop-
sis lemnae и, в отличие от мнения Р. Луина (Lewin, 1981), исключен из
числа синонимов Chlorochytrium lemnae. Для вида, представленного
штаммом ACKU 222-03, предлагается название Chlorochytrium hypanicus,
отражающее древнегреческое название р. Южный Буг — Гипанис.
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
Cellulae solitariae, in diadis, in paketis et in filis brevibus irrectis, sphaeri-
cae et elongatae, cum membrana, quae crassitudo ad 15 μm. Chloroplastum
reticulatum, cum uno sive multis pirenoidis cum involucro interrupto amyla-
ceo. Nucleus unus. Reproductio it per divisionem vegetativam (desmoschisis)
ac per zoosporas et aplanosporas (eleuteroschisis). Zoosporae nudae, cum
duobus aequalibus flagellis, cum stigmate anteriore sunt, post moram rotun-
dantur. Actinetae rubrae, cum membrana levi (crassitudo 0.8—1.3 μm) aut
bistratali microtuberoso sunt. Metra: zoosporae in motu 6.2—7.1×1.6—2.2 μm,
post moram 3.0—4.5 μm in diametro, longitudo cellularum vegetativarum ad
94 μm, latitudo 44 μm, actinetarum 14.5—26.5 μm in diametro.
Iconotypus: figura nostra 2, 3.
Materia fixa in cathedra bothanicae conservata est (certum sample ACKU
222-3F)
Stamm autenticus (epitypus): ACKU 222-03
Habitatio typica: inter macrophyta aquosa in Pivdennyj Buh fluvio, in
agro Hard viridarii regionalis localis Hranitno-stepove Pobuzhzhya (urbs
Juzhnoukrajinsk, Mykolajivska oblast, Ukrajina). Collectus est anno 2003
E. Demchenko.
И.Ю. Костиков и др.
242 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
Клетки одиночные, в диадах, пакетах и коротких неправильных ни-
тях, сферические и удлиненные, с оболочкой толщ. до 15 мкм. Хлоро-
пласт сетчатый, с одним или многими пиреноидами с прерывистой
крахмальной оберткой. Ядро одно. Размножение вегетативным делением
(десмосхизис) и зоо- и апланоспорами (элеутеросхизис). Зооспоры го-
лые, с двумя равными жгутиками, передней стигмой, после остановки
округляются. Акинеты красные, с гладкой или мелкобугорчатой дву-
слойной оболочкой толщ. 0,8—1,3 мкм. Размеры: зооспоры в движении
6,2—7,1×1,6—2,2 мкм, после остановки 3,0—4,5 мкм в диаметре, вегета-
тивные клетки до 94 мкм дл., до 44 мкм шир., акинеты диам. 14,5—
26,0 мкм.
Иконотип: рис. 2, 3.
Фиксированный материал сохраняется на кафедре ботаники (экс.
ACKU 222-3F).
Автентичный штамм (эпитип): ACKU 222-03
Типовое местонаходждение: среди водных макрофитов р. Южный
Буг в урочище Гард регионального ландшафтного парка Гранитно-
степное Побужье (г. Южноукраинск Николаевской обл., Украина). Соб-
ран в 2003 г. Э.Н. Демченко.
Наиболее сходен с Chlorochytrium lemnae, от которого отличается пе-
редним положением стигмы у зооспор, толстой (до 15 мкм) клеточной
оболочкой у субсенильных клеток, формированием акинет с мелкоборо-
давчатой оболочкой, экологией. От всех прочих видов рода Chlorochy-
trium отличается наличием деления по типу десмосхизиса, приводящему
к образованию диад, пакетов и плеврококкоидных агрегатов.
Место Chlorochytrium hypanicus в системе зеленых водорослей. В на-
стоящее время положение рода Chlorochytrium в системе зеленых водорослей
не известно. На сайте AlgaTerra (http://www.algaterra.net/ATDB/Molecular/
MolecularMain. cfm) имеется ссылка о том, что у штамма, депонированно-
го как Chlorochytrium lemnae SAG 15.85 (его субкультуру представляет
ACKU 686-06), Д. Хепперли и Т. Фридл секвенировали 18S rDNA. Од-
нако этот сиквенс в международных банках генетической информации
не депонирован, а материалы о результатах молекулярно-филогенети-
ческого анализа данного штамма не публиковались. Кроме того, этот
штамм, по нашим данным, основанным на морфологическом исследо-
вании ACKU 686-06, представляет не Chlorochytrium lemnae, а Chloro-
sphaeropsis lemnae.
Согласно полученным нами данным, Chlorochytrium hypanicus являе-
тся членом молекулярной макроклады Stephanosphaerinia (рис. 5), выде-
ленной среди большой группы зеленых водорослей без учета каких-либо
фенотипических данных исключительно на основании результатов фи-
логенетического анализа 18S rDNA в соответствии с принципами Фи-
лоКода. Эта макроклада объединила несколько клад монадных, кокко-
идных, сарциноидных и нитчатых водорослей. Ранее коккоидные, сар-
циноидные и нитчатые водоросли, входящие в Stephanosphaerinia, на ос-
нове анализа комплекса морфологических, ультраструктурных и биохи-
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 243
мических признаков было предложено включить в расширенный по
объему пор. Protosiphonales (Костіков та ін., 2001), имеющий общего
предка с одноклеточными монадными водорослями, — Chloromonas per-
forata Gerloff et Ettl. Современные молекулярно-филогенетические дан-
ные подтверждают целесообразность выделения пор. Protosiphonales, оп-
ределяя его как монофилитическую группу. При этом границы порядка
еще больше расширяются — до макроклады Stephanospherinia в целом, за
счет включения в него, с одной стороны, клады хламидомонадоидных
протосифональных водорослей (в которую входит Chloromonas perforata и
родственные ему Chlamydomonas-подобные таксоны), с другой — клады,
содержащей Haematococcus zimbabwiensis Pockock и Stephanosphaera sp.
Таким образом, Chlorochytrium hypanicus, который является первым
видом рода Chlorochytrium, чье место в системе определено на основе
молекулярно-филогенетических реконструкций, относится к классу
Chlorophyceae и входит в пор. Protosiphonales s.l., соответствующий моле-
кулярной макрокладе Stephanospherinia.
Chlorochytrium hypanicus в системе Protosiphonales. Protosiphonales Ettl
et Komárek (1982) в расширенной трактовке (включая монадных пред-
ставителей; см. Костіков та ін., 2001) объединяет как одноклеточные
(монадные и коккоидные), так и многоклеточные водоросли. У послед-
них многоклеточные таломы образуются в результате десмосхизиса и
представлены сарциноидными агрегатами и их комплексами. Для про-
тосифональных характерно бесполое размножение двужгутиковыми зоо-
спорами, которые могут быть либо голыми, либо одетыми в клеточные
оболочки. Монадные стадии двужгутиковые, с базальными телами, сме-
щенными по часовой стрелке (1—7, или CW-ориентация), система мик-
ротубулярных жгутиковых корней крестообразная и соответствует фор-
муле 4-2-4-2. Митоз хламидомонадового или цилиндрокапсового типа.
Клеточная оболочка, по меньшей мере у коккоидных и многоклеточных
представителей, содержит внутренний слой из упорядочено располо-
женных целлюлозных фибрилл. Водоросли, входящие в данный поря-
док, способны к гиперсинтезу вторичных каротиноидов.
Порядок включает, как минимум, четыре клады, ранг каждой из
них может соответствовать семейству, и одну группу с неопределенным
статусом — Protosiphonales incertae sedis. Три клады, приведенные как
"хламидомонадоидные протосифональные", Stephanosphaeraceae и Neo-
spongiococcaceae (см. рис. 5), объединяют виды, для которых характерно
размножение при помощи неметаболичных зооспор, одетых в клеточ-
ные оболочки. Для "хламидомонадоидных протосифональных" и Stepha-
nosphaeraceae характерен монадный тип морфологической структуры те-
ла и хламидомонадный тип митоза. Клада Neospongiococcaceae включает
коккоидные и нитчатые протосифональные с париетальными или губча-
тыми хлоропластами и митозом цилиндрокапсового типа. Эта клада со-
ответствует двум ранее предложенным семействам — Neospongiococcaceae
Kostikov (Костіков та ін., 2001) и Deasoniaceae Kostikov (Костіков та ін.,
2001). Этой кладе также соответствует предложенная Т. Фридлом ин-
И.Ю. Костиков и др.
244 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
терпретация пор. Chlorococcales (Friedl, 1997a, b). Однако номенклатур-
ный тип рода Chlorococcum (Ch. infusionum (Schrank) Menegh.) в данную
кладу не попадает (Nakada et al., 2008).
Protosiphonales incertae sedis представляет группу, для которой ком-
плекс диакритических признаков не определен. Большинство видов,
достоверно входящих в эту группу (Chlorococcum diplobionticum Herndon,
Ascochloris multinucleata Bold et MacEntee, Ettlia minuta (Arce et Bold)
Komárek, Nautococcus solutus P.A. Archibald), размножаются двужгутико-
выми в той или иной степени метаболичными зооспорами в тонкой
оболочке (Андреева, 1998; Komárek, Fott, 1983; Ettl, Gärtner, 1995; и
др.). У одного из видов (Chlorosarcinopsis minor Herndon) зооспоры голые
(Melkonian, 1978). Для E. minuta и видов рода Nautococcus Korschikov
описан хламидомонадный тип митоза (Kouwets, 1994). Возможно, для
данной группы характерен пиреноид, облицованный несколькими
крахмальными пластинами и пронизанный многочисленными одиноч-
ными тилакоидами, как это показано на примере Ch. minor, E. minuta и
N. solutus (Melkonian, 1978; Kouwets, 1994).
Chlorochytrium hypanicus относится к последней, четвертой кладе. Эта
клада характеризуется наличием исключительно голых зооспор и в це-
лом соответствует сем. Protosiphonaceae в ранее предложенном расши-
ренном объеме (Костіков та ін., 2001). На уровне фенотипа монофилию
данного семейства поддерживают следующие признаки: а) наличие го-
лых двужгутиковых зооспор, у которых базальные тела смещены по ча-
совой стрелке, а система микротрубочковых корней соответствует фор-
муле 4-2-4-2; б) цилиндрокапсовый тип митоза; в) наличие в клеточной
оболочке внутреннего слоя из кристаллически упорядоченных целлю-
лозных фибрилл; г) наличие пиреноидов, в строме которых размещается
незначительное число парных тилакоидов; эти пиреноиды способны
фрагментироваться; д) образование при неблагоприятных условиях аки-
нет, накапливающих значительные количества масла и вторичных каро-
тиноидов. Кроме того, в данном семействе прослеживаются, по-мень-
шей мере, три тенденции: а) у клеток, достигающих размера более 15—
20 мкм, хлоропласт из париетального трансформируется в сетчатый;
б) акинеты (а у ряда таксонов и вегетативные клетки) способны делить-
ся по типу десмосхизиса; в) у крупных клеток элеутеросхизису предше-
ствует более или менее длительное многоядерное состояние.
Chlorochytrium hypanicus как представитель Protosiphonaceae. Семейст-
во Protosiphonaceae, установленное в начале ХХ ст. (Blackman, Tansley,
1902), почти более полувека считалось монотипным и включало только
один вид — Protosiphon botryoides Klebs. В 70-х гг. ХХ ст. в это семейство
на основании наличия удлиненных многоядерных клеток, напоминаю-
щих вегетативные клетки Protosiphon, было предложено включить род
Urnella Playfair (Bourrelly, 1966). Позже при исследовании ультраструкту-
ры зооспор Urnella terrestris Playfair и Ascochloris multinucleata было уста-
новлено, что цитоскелет обоих изученных видов имеет черты сходства с
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 245
Protosiphon, однако зооспоры отличаются от последнего наличием тонкой
клеточной оболочки (Watanabe, Floyd, 1989a, b).
Л.А. Левис (Lewis, 1997) по результатам анализа последовательности
18S rDNA показала, что близкими родственниками Protosiphon botryoides
являются Spongiochloris spongiosa R.C. Starr и A. multinucleata, однако так-
сономических решений в отношении объема и возможных признаков
Protosiphonaceae этот автор не предложил.
В 2001 г. на основе морфологических критериев, с учетом данных
Л.А. Левис, а также ряда ультраструктурных данных (Watanabe, Floyd,
1989a, b; Kouwets, Van der Schaaf, 1992; Kouwets, 1994), было предложе-
но расширить объем Protosiphonaceae Blackman et Tansley и помимо рода
Protosiphon включить в него рода Ascochloris Bold et McEntee,
Spongiochloris, Kentrosphaera (включая часть видов Chlorochytrium) и
Chlorosphaeropsis (Костіков та ін., 2001). Данные об ультраструктуре зоо-
спор и митозе у Protosiphon, Spongiochloris и Ascochloris (Watanabe, Floyd,
1989b; Kouwets, Van der Schaaf, 1992, 1993; Kouwets, 1994) позволили
отнести представителей Protosiphonaceae s.l. к группе хлорофициевых во-
дорослей с ориентацией базальных тел по часовой стрелке (CW-
ориентация), имеющей крестовидный цитоскелет, описываемый форму-
лой 4-2-4-2, и цилиндрокапсовый тип митоза.
В 2003 г. на основе анализа последовательности 18S rDNA было по-
казано возможное близкое родство Protosiphon botryoides и Gongrosira
papuasica (Borzi) Tupa (Lopez-Bautista, Chapman, 2003). Эти результаты
согласовывались с данными о соответствии ультраструктуры жгутиково-
го аппарата гамет Gongrosira papuasica протосифоновому типу (Watana-
beet al., 1992). Далее анализ 18S rDNA подтвердил родственные отноше-
ния Protosiphon botryoides и Chlorosphaeropsis alveolata Herndon (Watanabe
et al., 2006).
Реконструкция филогенетических отношений большой выборки
монадных, гемимонадных, коккоидных и сарциноидных водорослей,
выполненная на основе сравнения 18S rDNA, показала, что в кладу,
включающую P. botryoides, помимо Ch. alveolata, S. spongiosa, G. papuasica
следует включить Pachycladella umbrina (G.M. Smith) Silva, а также три
неидентифицированные одноклеточные зеленые водоросли, приведенные
как "Chlamydomonad sp.", и некоторые виды р. Chlorosarcinopsis
(Ch. dissociata Herndon, Ch. bastropiensis Groover et Bold, Ch. aggregata Arce
et Bold) (Nakada et al., 2008).
По результатам нашего анализа, Chlorochytrium hypanicus подлежит
включению в кладу, соответствующую Protosiphonaceae. Кроме того, три
вида р. Chlorosarcinopsis — Ch. dissociata, Ch. bastropiensis, Ch. aggregata —
также достоверно являются членами этой клады (Nakada et al., 2008).
Поскольку номенклатурный тип р. Chlorosarcinopsis — Ch. minor в эту
группу не входит, упомянутые выше виды Сhlorosarcinopsis, по-
видимому, могут быть выделены в отдельный самостоятельный род. К
Protosiphonaceae следует отнести и Pachycladella umbrina — коккоидную
зеленую водоросль, имеющую шипы на поверхности клеточной оболоч-
И.Ю. Костиков и др.
246 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
ки. У этого вида, относимого по классической системе к представите-
лям Treubariaceae с неизвестным типом размножения (Komárek, Fott,
1983), при специальном исследовании были выявлены зооспоры с ори-
ентацией базальных тел по типу 1—7, причем на опубликованной элек-
тронограмме зооспоры выглядят голыми (Reymond, Hegewald, 1990).
Из Protosiphonaceae подлежит исключению Ascochloris multinucleata.
Он, с одной стороны, достоверно не является членом клады, соответст-
вующей данному семейству (входит в группу "Protosiphonales insertae
sedis", см. рис. 5), с другой — фенотипически отличается от таксонов
клады Protosiphonaceae наличием у зооспор клеточной оболочки (Wata-
nabe, Floyd, 1989b).
В настоящее время недостаточный объем выборки таксонов, одно-
значно входящих в Protosiphonaceae, и недостаточная информативность
18S rDNA не позволяют достоверно установить систему родственных
связей внутри данного семейства и, соответственно, более точно уста-
новить степень родства Chlorochytrium hypanicus с другими видами дан-
ной группы. Анализ фенотипических признаков также не является дос-
таточно надежным. Например, по наличию способности к делению пу-
тем десмосхизиса, ведущего к образованию многоклеточных агрегатов,
Ch. hypanicus кажется более родственным Chlorosphaeropsis alveolata, Gon-
grosira papuasica и входящим в Protosiphonaceae видам рода Chlorosarcinop-
sis. Однако деление путем десмосхизиса описано как один из способов
прорастания акинет у Spongiochloris typica Trainor et McLean (McLean,
1969) и S. irregularis Kostikov (Костиков, 1991), а также, по нашим на-
блюдениям, при образовании и прорастании акинетоподобных клеток у
Protosiphon botryoides.
По наличию сетчатого хлоропласта у вегетативных клеток Ch. hy-
panicus кажется более сходным с видами рода Protosiphon, Ch. alveolata и
видами Spongiochloris, чем с видами рода Chlorosarcinopsis и G. papuasica.
Однако все эти водоросли на прегенеративных стадиях характеризуются
наличием париетального хлоропласта, причем формирование сетчатого
хлоропласта зависит от способности клеток достигать крупных размеров
и от степени вакуолизации цитоплазмы.
Характер вскрывания оболочки спорангия при выходе зооспор по
наличию структуры, напоминающей колпачок, имеет черты сходства с
Pachycladella umbrina (Reymond, Hegewald, 1990).
В генеративном состоянии клетки Ch. hypanicus остаются одноядер-
ными и по этому признаку более сходны с P. umbrina, видами Chlorosar-
cinopsis и G. papuasica. Однако на стадии преспорангиев клетки Ch. hy-
panicus многоядерные, с мелким сетчатым хлоропластом и более напо-
минают виды родов Spongiochloris и Chlorosphaeropsis alveolata.
Таким образом, Ch. hypanicus вместе с видами родов Protosiphon,
Spongiochloris, Chlorosphaeropsis, а также некоторыми видами Chlorosarci-
nopsis (Ch. dissociata, Ch. bastropiensis, Ch. aggregata), P. umbrina и G. pa-
puasica входит в сем. Protosiphonaceae s.l. Провизорно к этому же семей-
ству на основе морфологических признаков могут быть отнесены и дру-
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 247
гие виды р. Chlorochytrium (в частности, Ch. lemnae, который в наиболь-
шей степени сходен с Ch. hypanicus), а также Chlorosphaeropsis lemnae и,
возможно, виды Kentrosphaera.
Выводы
1. На основании комплекса фенотипических признаков и результа-
тов молекулярно-филогенетических реконструкций описан новый вид
Chlorochytrium hypanicus (Chlorophyceae), входящий в молекулярную мак-
рокладу Stephanospherinia, которая, в целом, соответствует ранее предло-
женному пор. Protosiphonales.
2. В рамках данного порядка Ch. hypanicus вместе с видами родов
Protosiphon, Spongiochloris, Chlorosphaeropsis, а также некоторыми видами
Chlorosarcinopsis (Ch. dissociata, Ch. bastropiensis, Ch. aggregata), Pachy-
cladella umbrina и Gongrosira papuasica, входит в молекулярную кладу,
принимаемую как сем. Protosiphonaceae s.l.
3. Морфологические особенности (в первую очередь наличие голых
двужгутиковых зооспор, а также проявление на разных стадиях онтоге-
неза признаков, присущих другим таксонам данной молекулярной кла-
ды) на фенотипическом уровне подтверждают обоснованность включе-
ния Ch. hypanicus в сем. Protosiphonaceae s.l., несмотря на то, что система
родственных отношений внутри этого семейства требует дальнейших
уточнений.
Андреева В.М. Почвенные и аэрофильные зеленые водоросли (Chlorophyta: Tetraspo-
rales, Chlorococcales, Chlorosarcinales). — СПб.: Наука, 1998. — 352 с.
Коршиков О.А. Підклас Протококові (Protococcineae) // Визначник прісноводних во-
доростей Укр. РСР. Вип. 5. — К.: Вид-во АН УРСР, 1953. — 440 с.
Костиков I.Ю. Новий вид роду Spongiochloris Starr (Chlorophyta, Chlorococcaceae) //
Укр. бот. журн. — 1991. — 48, № 4. — С. 80—86.
Костиков И.Ю., Демченко Э.Н., Новохацкая М.А. Коллекция культур водорослей Ки-
ев. нац. ун-та им. Тараса Шевченко. Каталог штаммов (2008 г.) // Черномор.
бот. журн. — 2009. — 5, № 1. — С. 37—79.
Костіков І.Ю., Романенко П.О., Демченко Е.М. та ін. Водорості грунтів України (Іс-
торія та методи дослідження, система, конспект флори). — К.: Фітосоціоцентр,
2001. — 300 с.
Blackman F. F., Tansley A.G. A revision of the classification of the green algae (Continued)
// New Phytol. — 1902. — 1, N 10. — P. 238—244.
Bourrelly P. Les Algues d'Eau Douce. I. Les Algues vertes. — Paris: N. Boubée et Cie, 1966.
— 511 p.
Cohn R. Ueber parasitische Algen // Beitr. Biol. Pflanz. — 1870—1875. — 1. — P. 87—108.
Ettl H., Gärtner G. Syllabus der Boden-, Luft- und Flechtenalgen. — Stuttgart, etc.: G. Fi-
scher Verlag, 1995. — 721 S.
Ettl H., Komárek J. Was versteht man unter dem Begriff “coccale Grünalgen”? — Algol.
Stud. — 1982. — 29. — S. 345—347.
Felsenstein J. Confidence limits on phylogenies: An approach using the bootstrap // Evolu-
tion. — 1985. — 39. — Р. 783—791.
И.Ю. Костиков и др.
248 ISSN 0868-8540 Algologia. 2012. V. 22. N 3
Friedl T. The evolution of the Green Algae // Plaht. Syst. Evol. [Suppl.]. — 1997a. — 11. —
P. 87—101.
Friedl T. The evolution of the Green Algae // Origin of Algae and their Plastids. — Wien:
Springer-Verlag., 1997b. — P. 87—102.
John D.M., Tsarenko P.M. Chlorococcales // The freshwater Algal Flora of the British Isles.
— Cambridge: Univ. Press, 2002. — P. 327—409.
Komárek J., Fott B. Chlorophyceae (Grünalgen). Ordnung: Chlorococcales. 7. Teil. 1. Hälfte
// Das Phytoplankton des Süβwassers. — Stuttgart: E. Schweizer. Verlag, 1983. — 1043 S.
Kouwets F.A.C. The Cell Cycle in Multinucleate Coccoid Green Algae: Ultrastructure &
Systematics. — Leiden, Rijksherbarium: Hort. Bot., 1994. — 161 p.
Kouwets F.A.C., Van der Schaaf P.J. Two types of cytoplasmic cleavage in the coenocytic
soil alga Protosiphon botryoides (Chlorophyceae) // J. Phycol. — 1992. — 28. — P. 526—537.
Kouwets F.A.C. Van der Schaaf P.J. Ultrastructural study of mitosis in the coenocytic soil
alga Protosiphon botryoides (Chlorophyceae) with special reference to absolute con-
figuration and behaviour of the basal apparatus // Cryptogam. Bot. — 1993. — 3. —
P. 221—234.
Lewin R. Culture and Taxonomic Status of Chlorochytrium lemnae, a Green Algal Endo-
phyte // Brit. Phycol. J. — 1981. — 19. — P. 107—116.
Lewis L.A. Diversity and phylogenetic placement of Bracteacoccus Tereg (Chlorophyceae,
Chlorophyta) based on 18S ribosomal RNA gene sequence data // J. Phycol. — 1997. —
33, N 2. — P. 279—285.
Lopez-Bautista J.M., Chapman R.L. Phylogenetic affinities of the Trentepohliales inferred
from small-subunit rDNA // Intern. J. Syst. Evol. Microbiol. — 2003. — 53. — P. 2099—
2106.
McLean R.J. Rejuvenation of senescent cells of Spongiochloris typica // J. Phycol. — 1969. —
5, N 1. — P. 32—37.
Melkonian M. Structure and significance of cruciate flagellar root systems in green algae:
comparative investigations in species of Chlorosarcinopsis (Chlorosarcinales) // Plant
Syst. Evol. — 1978. — 130. — P. 265—292.
Moewus L. Entwicklungsgeschichtliche Studien ueber einige microscopisch kleine Aufwuch-
salgen // Schweitz. Hydrobiol. — 1950. — 12. — S. 47—66.
Nakada T., Misawa K., Nozaki H. Molecular systematics of Volvocales (Chlorophyceae,
Chlorophyta) based on exhaustive 18S rRNA phylogenetic analyses // Mol. Phylog.
Evol. — 2008. — 48. — P. 281—291.
Posada D., Crandall K.A. Modeltest: testing the model of DNA substitution // Bioinfor-
matics. — 1998. — 14, N 9. — P. 817—818.
Reymond O.L., Hegewald E. Morphology, life cycle and taxonomy in Pachycladella umbrina
(Chlorophyceae, Chlorococcales) // Algol. Stud. — 1990. — 58. — P. 15—28.
Schlösser U.G. SAG-Sammlung von Algenkulturen at the University of Göttingen:
Catalogue of Strains, 1994 // Bot. Acta. — 1994. — 107. — P. 113—186.
Swofford D.L. PAUP* Phylogenetic analysis using parsimony (and other methods). Beta
version 10. — Sunderland: Sin. Ass., 2002.
Watanabe S., Floyd G.L. Variation in the ultrastructure of the biflagellate motile ceils of six
unicellular genera of the Chlamydomonadales and Chlorocoecales (Chlorophyceae), with
emphasis on the flagellar apparatus // Amer. J. Bot. — 1989a. — 76. — P. 307—317.
Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
ISSN 0868-8540 Альгология. 2012. Т. 22. № 3 249
Watanabe S., Floyd G.L. Ultrastructure of the Zoospores of the Coenocytic Algae Ascochi-
oris and Urnella (Chlorophyceae), with Emphasis on the Flagellar Apparatus // Brit.
Phycol. J. — 1989b. — 24. — P. 143—152.
Watanabe S., Floyd G.L. Ultrastructure of the flagellar apparatus of the zoospores of the
irregularlyshaped coccoid green algae Chlorochytrium lemnae and Kentrosphaera gibbe-
rosa (Chlorophyta) // Nova Hedw. − 1994. − 59. − P. 1—11.
Watanabe S., Chappell D.F., Floyd G.L. Ultrastructure of the flagellar apparatus of the gam-
etes of Gongrosira papuasica (Chlorophyta) // Ibid. — 1992. — 27. — P. 21—28.
Watanabe S., Mitsui K., Nakayama T., Inouye I. Phylogenetic relationships and taxonomy
of sarcinoid green algae: Chlorosarcinopsis, Desmotetra, Sarcinochlamys gen. nov., Neo-
chlorosarcina, and Chlorosphaeropsis (Chlorophyceae, Chlorophyta) // J. Phycol. —
2006. — 42, N 3. — P. 679—695.
Wujek D.E., Thompson R.H. Endophytic unicellular chlorophytes: a review of Chlorochy-
trium and Scotinosphaera // Phycologia. — 2005. — 44, N 3. — P. 254-260.
Получена 16.09.11
Рекомендовала в печать Г.К. Хурсевич
I.Yu. Kostikov1, E.N. Demchenko1, V.R. Boiko1, A.A. Goncharov2
1Taras Shevchenko Kiev National Univ., Dept. of Botany,
64, Vladymyrskaya St., 01001 Kiev, Ukraine
2Biological-Soil Sci. Institute of the Far East Branch of the RAS,
159, 100 Let Vladivostoku Prosp., 690022 Vladivostok, Russia
CHLOROCHYTRIUM HYPANICUS SP. NOV. (CHLOROPHYCEAE) AND ITS
POSITION IN THE SYSTEM OF PROTOSIPHONALES
The description of a new species of green algae, Chlorochytrium hypanicus sp. nov.
(Chlorophyceae), found in a flow of mud from the Southern Bug River (Ukraine) is
presented. The analysis of the nucleotide sequence of the nuclear gene of 18S rDNA
showed the position of this species in the system of Stephanosphaerinia macroclade, which
generally corresponds to the previously proposed order Protosiphonales. It is shown that, in
this order, incorporating four clades and "Protosiphonales incertae sedis" group of taxa,
Chlorochytrium hypanicus, belongs to the clade corresponding Protosiphonaceae s.l., whose
members differ from other representatives of this order by the presence of naked biflagellate
zoospores. Morphologically, Ch. hypanicus is similar to Ch. lemnae Cohn, differing from it
by anterior stigma in zoospores, thicker envelope of subsenile cells, a finely tuberculate
envelope of akinetes, and by mode of life (free-living, not endophytic). From other species
of the genus Chlorochytrium Cohn, new species differ by fission of desmoschisis type,
leading to the formation of dyads, packages, and pleurococcal clusters. We discuss the
volume, diacritical features, and structure of Protosiphonaceae, including the similarity of
the results of molecular genetic and phenotypic approaches in the taxonomy of this family.
K e y w o r d s : green algae, taxonomy, molecular phylogeny, Chlorophyceae, Protosiphonales,
Protosiphonaceae, Stephanosphaerinia, Chlorochytrium hypanicus.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-64224 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0868-8540 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T17:01:57Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Костиков, И.Ю. Демченко, Э.Н. Бойко, В.Р. Гончаров А.А. 2014-06-13T13:23:44Z 2014-06-13T13:23:44Z 2012 Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales / И.Ю. Костиков, Э.Н. Демченко, В.Р. Бойко, А.А. Гончаров // Альгология. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 227-249. — Бібліогр.: 35 назв. — рос. 0868-8540 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/64224 582.27 Приведено описание нового вида зеленых водорослей Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae), обнаруженного в выжимке тины р. Южный Буг (Украина). На основании анализа нуклеотидной последовательности ядерного гена 18S rDNA установлено место данного вида в системе макроклады Stephanosphaerinia, которая, в целом соответствует ранее предложенному порядку Protosiphonales. Показано, что в рамках данного порядка, включающего четыре клады и группу таксонов "Protosiphonales incertae sedis", Ch. hypanicus входит в кладу, соответствующую Protosiphonaceae s.l., представители которой отличаются от прочих членов порядка наличием голых двужгутиковых зооспор. Морфологически вид сходен с Ch. lemnae Cohn, от которого отличается передней стигмой у зооспор, более толстой оболочкой субсенильных клеток, мелкобугорчатой оболочкой акинет, вегетацией в свободноживущем, а не эндофитном состоянии. От прочих видов рода Chlorochytrium Cohn отличается наличием деления по типу десмосхизиса, приводящему к образованию диад, пакетов и плеврококкоидных агрегатов. Обсуждаются объем, диакритические признаки и структура Protosiphonaceae, близость результатов молекулярно-генетического и фенотипического подходов в таксономии данного семейства. The description of a new species of green algae, Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae), found in a flow of mud from the Southern Bug River (Ukraine) is presented. The analysis of the nucleotide sequence of the nuclear gene of 18S rDNA showed the position of this species in the system of Stephanosphaerinia macroclade, which generally corresponds to the previously proposed order Protosiphonales. It is shown that, in this order, incorporating four clades and "Protosiphonales incertae sedis" group of taxa, Chlorochytrium hypanicus, belongs to the clade corresponding Protosiphonaceae s.l., whose members differ from other representatives of this order by the presence of naked biflagellate zoospores. Morphologically, Ch. hypanicus is similar to Ch. lemnae Cohn, differing from it by anterior stigma in zoospores, thicker envelope of subsenile cells, a finely tuberculate envelope of akinetes, and by mode of life (free-living, not endophytic). From other species of the genus Chlorochytrium Cohn, new species differ by fission of desmoschisis type, leading to the formation of dyads, packages, and pleurococcal clusters. We discuss the volume, diacritical features, and structure of Protosiphonaceae, including the similarity of the results of molecular genetic and phenotypic approaches in the taxonomy of this family. ru Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України Альгология Общие проблемы альгологии Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) and its position in the system of Protosiphonales Article published earlier |
| spellingShingle | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales Костиков, И.Ю. Демченко, Э.Н. Бойко, В.Р. Гончаров А.А. Общие проблемы альгологии |
| title | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales |
| title_alt | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) and its position in the system of Protosiphonales |
| title_full | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales |
| title_fullStr | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales |
| title_full_unstemmed | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales |
| title_short | Chlorochytrium hypanicus sp. nov. (Chlorophyceae) и его место в системе Protosiphonales |
| title_sort | chlorochytrium hypanicus sp. nov. (chlorophyceae) и его место в системе protosiphonales |
| topic | Общие проблемы альгологии |
| topic_facet | Общие проблемы альгологии |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/64224 |
| work_keys_str_mv | AT kostikoviû chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeiegomestovsistemeprotosiphonales AT demčenkoén chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeiegomestovsistemeprotosiphonales AT boikovr chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeiegomestovsistemeprotosiphonales AT gončarovaa chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeiegomestovsistemeprotosiphonales AT kostikoviû chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeanditspositioninthesystemofprotosiphonales AT demčenkoén chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeanditspositioninthesystemofprotosiphonales AT boikovr chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeanditspositioninthesystemofprotosiphonales AT gončarovaa chlorochytriumhypanicusspnovchlorophyceaeanditspositioninthesystemofprotosiphonales |