Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама
Анализировали изменчивость генома сои (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) вольфрамустойчивой клеточной линии (WR-линии), характеризующейся перекрестной устойчивостью к оксианионам ванадия и осмотическим веществам. Показано, что WR-линия представляет собой миксоплоидную популяцию клеток, в которой...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Физиология и биохимия культурных растений |
|---|---|
| Дата: | 2010 |
| Автори: | , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України
2010
|
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66271 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама / С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева, Е.Н. Тищенко // Физиология и биохимия культурных растений. — 2010. — Т. 42, № 2. — С. 125-131. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-66271 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е. Тищенко, Е.Н. 2014-07-10T04:35:02Z 2014-07-10T04:35:02Z 2010 Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама / С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева, Е.Н. Тищенко // Физиология и биохимия культурных растений. — 2010. — Т. 42, № 2. — С. 125-131. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. 0522-9310 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66271 57.085.23:575.22:582.736.3 Анализировали изменчивость генома сои (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) вольфрамустойчивой клеточной линии (WR-линии), характеризующейся перекрестной устойчивостью к оксианионам ванадия и осмотическим веществам. Показано, что WR-линия представляет собой миксоплоидную популяцию клеток, в которой, в отличие от исходного каллюса, при разной длительности культивирования наблюдается один четко выраженный модальный класс числа хромосом около 4х (~60 %) и отсутствуют хромосомные аберрации. Наряду с этим у длительно культивируемой WR-линии повышаются частота и уровень плоидности клеток при сохранении кросс-устойчивости. В связи с цитогенетическими особенностями обсуждается вопрос о снижении морфогенетического потенциала WR-линии. Аналізували мінливість геному сої (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) вольфрамстійкої клітинної лінії (WR-лінії), яка характеризується перехресною стійкістю до оксіаніонів ванадію та осмотичних речовин. Показано, що WR-лінія є міксоплоїдною популяцією клітин, в якій, на відміну від вихідного калюсу, за різної тривалості культивування спостерігається один чітко виражений модальний клас числа хромосом близько 4х (~60 %) і відсутні хромосомні аберації. Разом із цим у тривало культивованої WR-лінії підвищуються частота і рівень плоїдності за збереження крос-стійкості. В зв’язку з цитогенетичними особливостями обговорено питання про зниження морфогенетичного потенціалу WR-лінії. The variability of soybean genome (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) in tungsten-resistant cell line (WR-line) which has resistance to both V oxyanions and osmotics is analyzed. It has been shown that WR-line is a mixoploid cells population where, unlike primary callus, one definite modal class near 4x (~60 %) was obserwed as well as no chromosome aberrations. Besides, the frequency and level of polyploid cells in WR-line (43 passage) are increased with maintenance of cross-resistance. Morphogenetic potential of WR-line is discussed. ru Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України Физиология и биохимия культурных растений Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама Цитогенетичний аналiз клiтинної лiнiї сої, стiйкої до оксiанiонiв вольфраму Cytogenetical analysis of soybean tungsten-resistant cell line Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама |
| spellingShingle |
Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е. Тищенко, Е.Н. |
| title_short |
Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама |
| title_full |
Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама |
| title_fullStr |
Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама |
| title_full_unstemmed |
Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама |
| title_sort |
цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама |
| author |
Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е. Тищенко, Е.Н. |
| author_facet |
Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е. Тищенко, Е.Н. |
| publishDate |
2010 |
| language |
Russian |
| container_title |
Физиология и биохимия культурных растений |
| publisher |
Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Цитогенетичний аналiз клiтинної лiнiї сої, стiйкої до оксiанiонiв вольфраму Cytogenetical analysis of soybean tungsten-resistant cell line |
| description |
Анализировали изменчивость генома сои (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) вольфрамустойчивой клеточной линии (WR-линии), характеризующейся перекрестной устойчивостью к оксианионам ванадия и осмотическим веществам. Показано, что WR-линия представляет собой миксоплоидную популяцию клеток, в которой, в отличие от исходного каллюса, при разной длительности культивирования наблюдается один четко выраженный модальный класс числа хромосом около 4х (~60 %) и отсутствуют хромосомные аберрации. Наряду с этим у длительно культивируемой WR-линии повышаются частота и уровень плоидности клеток при сохранении кросс-устойчивости. В связи с цитогенетическими особенностями обсуждается вопрос о снижении морфогенетического потенциала WR-линии.
Аналізували мінливість геному сої (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) вольфрамстійкої клітинної лінії (WR-лінії), яка характеризується перехресною стійкістю до оксіаніонів ванадію та осмотичних речовин. Показано, що WR-лінія є міксоплоїдною популяцією клітин, в якій, на відміну від вихідного калюсу, за різної тривалості культивування спостерігається один чітко виражений модальний клас числа хромосом близько 4х (~60 %) і відсутні хромосомні аберації. Разом із цим у тривало культивованої WR-лінії підвищуються частота і рівень плоїдності за збереження крос-стійкості. В зв’язку з цитогенетичними особливостями обговорено питання про зниження морфогенетичного потенціалу WR-лінії.
The variability of soybean genome (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) in tungsten-resistant cell line (WR-line) which has resistance to both V oxyanions and osmotics is analyzed. It has been shown that WR-line is a mixoploid cells population where, unlike primary callus, one definite modal class near 4x (~60 %) was obserwed as well as no chromosome aberrations. Besides, the frequency and level of polyploid cells in WR-line (43 passage) are increased with maintenance of cross-resistance. Morphogenetic potential of WR-line is discussed.
|
| issn |
0522-9310 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66271 |
| citation_txt |
Цитогенетический анализ клеточной линии сои, устойчивой к оксианионам вольфрама / С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева, Е.Н. Тищенко // Физиология и биохимия культурных растений. — 2010. — Т. 42, № 2. — С. 125-131. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT mihalʹskaâsi citogenetičeskiianalizkletočnoiliniisoiustoičivoikoksianionamvolʹframa AT sergeevale citogenetičeskiianalizkletočnoiliniisoiustoičivoikoksianionamvolʹframa AT tiŝenkoen citogenetičeskiianalizkletočnoiliniisoiustoičivoikoksianionamvolʹframa AT mihalʹskaâsi citogenetičniianalizklitinnoíliniísoístiikoídooksianionivvolʹframu AT sergeevale citogenetičniianalizklitinnoíliniísoístiikoídooksianionivvolʹframu AT tiŝenkoen citogenetičniianalizklitinnoíliniísoístiikoídooksianionivvolʹframu AT mihalʹskaâsi cytogeneticalanalysisofsoybeantungstenresistantcellline AT sergeevale cytogeneticalanalysisofsoybeantungstenresistantcellline AT tiŝenkoen cytogeneticalanalysisofsoybeantungstenresistantcellline |
| first_indexed |
2025-11-26T17:25:47Z |
| last_indexed |
2025-11-26T17:25:47Z |
| _version_ |
1850764522569072640 |
| fulltext |
УДК 57.085.23:575.22:582.736.3
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ СОИ,
УСТОЙЧИВОЙ К ОКСИАНИОНАМ ВОЛЬФРАМА
С.И. МИХАЛЬСКАЯ, Л.Е. СЕРГЕЕВА, Е.Н. ТИЩЕНКО
Институт физиологии растений и генетики Национальной академии наук Украины
03022 Киев, ул. Васильковская, 31/17
Анализировали изменчивость генома сои (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40)
вольфрамустойчивой клеточной линии (WR-линии), характеризующейся пере-
крестной устойчивостью к оксианионам ванадия и осмотическим веществам.
Показано, что WR-линия представляет собой миксоплоидную популяцию
клеток, в которой, в отличие от исходного каллюса, при разной длительности
культивирования наблюдается один четко выраженный модальный класс числа
хромосом около 4х (~60 %) и отсутствуют хромосомные аберрации. Наряду с
этим у длительно культивируемой WR-линии повышаются частота и уровень
плоидности клеток при сохранении кросс-устойчивости. В связи с цитогенети-
ческими особенностями обсуждается вопрос о снижении морфогенетического
потенциала WR-линии.
Ключевые слова: Glycine max L., соя, клеточная селекция, изменчивость генома,
оксианионы вольфрама.
Изучение закономерностей и особенностей структурно-функциональной
изменчивости генома вносит существенный вклад в понимание механиз-
мов устойчивости/толерантности растений к неблагоприятным факто-
рам окружающей среды на разных уровнях их организации: от клетки до
целого растения. Это представляет не только теоретический, но и прак-
тический интерес для разработки биотехнологий, которые раскрывают и
используют потенциальные возможности растительных организмов по
повышению их устойчивости к комплексу стрессоров. Однако цитогене-
тическая и молекулярно-генетическая нестабильность при культивиро-
вании in vitro может приводить и к потере устойчивости к стрессорам, и
к снижению морфогенетического потенциала [1—7, 11].
Поиск новых форм с повышенной устойчивостью к комплексу абио-
тических факторов затруднен при использовании как биотехнологичес-
ких, так и традиционных селекционно-генетических методов. Создание
модельных клеточных систем ускорит этот процесс. Ранее мы сообщали
о получении клеточных линий сои (WR-линий), устойчивых к вольфра-
мат-оксианионам в концентрациях, летальных для клеточных культур
дикого типа. Эти линии обладают перекрестной устойчивостью к вана-
дат-оксианионам, осмотическим веществам, моделирующим in vitro вод-
ный дефицит и засоление [13], являются адекватной системой для изу-
чения динамики и уровня изменчивости генома.
В литературе имеются единичные публикации, посвященные полу-
чению и изучению клеточных линий, устойчивых к ионам тяжелых ме-
ФИЗИОЛОГИЯ И БИОХИМИЯ КУЛЬТ. РАСТЕНИЙ. 2010. Т. 42. № 2
125
© С.И. МИХАЛЬСКАЯ, Л.Е. СЕРГЕЕВА, Е.Н. ТИЩЕНКО, 2010
таллов, что объясняется методическими сложностями решения этой за-
дачи и низкой частотой появления генетически измененных клеток [9,
10]. Другой аспект этого вопроса связан с сохранением стресс-устойчи-
вости клеток и способностью к реализации морфогенетического потен-
циала при разной длительности культивирования, что является необхо-
димым этапом для получения растений с улучшенными параметрами.
Известно, что при длительном культивировании in vitro может изменять-
ся соотношение клеток с различным числом хромосом. Нередко увели-
чение частоты появления полиплоидных клеток авторы связывают со
снижением их тотипотентности [3], что ограничивает возможности кле-
точной селекции по получению форм, устойчивых к стрессам. Основной
целью данной работы было изучение цитогенетических особенностей
клеточной WR-линии сои, длительно культивируемой при наличии в
среде селективной концентрации оксианионов вольфрама.
Методика
Исходный каллюс (КК27) индуцировали из сегментов листьев стериль-
ных растений сои сорта Киевская 27 (селекции Института физиологии
растений и генетики НАН Украины) на среде В5 Гамборга. WR-линия
была получена методом «плейтинга» на модифицированной среде В5 без
молибдена, азот содержался только в нитратной форме, концентрация
оксианионов вольфрама составляла 1 мМ, что являлось летальной кон-
центрацией для клеток исходного каллюса [13]. Побегообразование ин-
дуцировали на модифицированной нами среде Мурасиге и Скуга (МС).
Цитологические исследования культуры клеток проводили в период
их наивысшей митотической активности — на 7-е сутки пассажа. Мате-
риал фиксировали в смеси этанола и ледяной уксусной кислоты (3:1 по
объему) в течение 1 сут при 4 °С и хранили в 70 %-м этаноле. Для ана-
лиза образцы отмывали в дистиллированной воде и мацерировали в те-
чение 20 мин в 5 н HCl при комнатной температуре. После этого кал-
люс окрашивали 2 %-м раствором ацетоорсеина в течение 2—3 сут [8].
При цитогенетическом анализе анеуплоидными считали клетки, в кото-
рых число хромосом составляло ±3 от основного их числа (х). Статисти-
ческую обработку результатов проводили стандартными методами. До-
стоверность различий определяли при уровне значимости 0,05.
Для изучения влияния ионов тяжелых металлов WO4
2-, VO3
- на
ДНК семена сои проращивали в асептических условиях на среде МС в
течение 7 сут, после чего переносили на ту же среду с добавлением ок-
сианионов вольфрама и ванадия в концентрациях соответственно 1 и
2 мМ. ДНК выделяли модифицированным методом Деллапорта [12].
Электрофорез суммарной ДНК проводили в 2,0 %-м агарозном геле в
1хТБЕ буфере при напряжении 3—4 В/см.
Результаты и обсуждение
Соматические клетки интактных растений сои (Glycine max (L.) Merr) со-
держат 40 хромосом (2n = 4x = 40) [20]. Такой же набор хромосом был
установлен и для апексов корней растений сои сорта Киевская 27, вы-
ращенных в асептических условиях.
Цитологический анализ исходного каллюса сои 11-го пассажа пока-
зал варьирование числа хромосом от 10 до 60 с двумя четко выраженны-
126
С.И. МИХАЛЬСКАЯ, Л.Е. СЕРГЕЕВА, Е.Н. ТИЩЕНКО
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
ми модальными классами
около 2х и 4х, которые в
сумме составляли почти
80 % (рис. 1, а). Прибли-
зительно у 14 % клеток от-
мечена редукция числа
хромосом — оно не превы-
шало 10 (1х), тогда как
анеуплоидные и полипло-
идные клетки обнаружива-
лись почти с одинаковой
частотой (~3 %). Вместе с
тем были выявлены струк-
турные перестройки хро-
мосом в виде одиночных
фрагментов, однако такие
нарушения встречались
редко — с частотой около
1 % (рис. 2, а).
При анализе исход-
ного каллюса на среде с
селективной концентра-
цией оксианионов вольф-
рама делящихся клеток не
обнаружено. Наряду с
этим установлено, что
при летальных дозах ок-
сианионов вольфрама и
ванадия осуществляется
фрагментация ДНК с об-
разованием непрерывного
спектра фрагментов широ-
кого диапазона молекуляр-
ных масс, что свидетель-
ствует о гибели клеток
культуры ткани сои путем
некроза [12, 13]. Следует
отметить, что изучение
влияния различных кон-
центраций оксианионов
вольфрама и ванадия на
ДНК листьев, из сегмен-
тов которых индуцировали исходный каллюс, показало, что происходит
фрагментация полинуклеотидных последовательностей. При этом нео-
братимый переход их клеток на путь гибели так же, как и в случае куль-
туры ткани, не сопровождался олигонуклеосомной фрагментацией, явля-
ющейся одним из основных критериев программированной клеточной
гибели. Кроме того, в растениях, выращиваемых в асептических услови-
ях при концентрации оксианионов вольфрама и ванадия 1 и 2 мМ, на-
блюдали аномалии в развитии и ускорение процесса старения листьев.
WR-линия 8-го пассажа также представляет собой гетерогенную
популяцию с варьированием числа хромосом в клетках от 7 до 90 (см.
127
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ СОИ
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
Рис. 1. Частота встречаемости клеток с разным набо-
ром хромосом:
а — первичный каллюс; б — WR-линия 8-го пассажа; в —
WR-линия 43-го пассажа
рис. 1, б). Однако в данном случае преобладали метафазы с числом хро-
мосом около 4х, доля которых составляла ~60 %. Полиплоидные клетки
и клетки с числом хромосом 1х встречались редко (соответственно ~7 и
3 %).
У длительно культивируемой клеточной линии (43-й пассаж) мо-
дальный класс также составляли клетки с числом хромосом около 4х
(~58 %). Метафазы с числом хромосом 1х не обнаружены, в то время как
полиплоидные (6х, 8х, 12х) в сумме составляли около 30 % (см. рис. 1, в).
Помимо этого среди около 300 проанализированных анафаз WR-линии
8- и 43-го пассажей анафазные аберрации не наблюдались. На рис. 2, б—е
представлены примеры клеток с разным числом хромосом на стадии ме-
тафазы.
Полученные данные свидетельствуют о миксоплоидии WR-линии.
Следует подчеркнуть, что практически при неизменности модального
класса в процессе длительного культивирования количество полиплоид-
ных клеток увеличивается почти в 3 раза. Что касается исходного кал-
люса, то клетки с уровнем плоидности свыше 4х встречались довольно
редко.
Известно, что при культивировании в условиях in vitro только неко-
торые культуры способны сохранять стабильность генома, тогда как для
большинства характерным является существенный уровень его нестабиль-
ности. Генетическую стабильность в культуре in vitro можно рассматри-
вать как исключение [7, 14—19]. Поддержание генетической гетероген-
ности клеточных популяций некоторые авторы считают положительным
128
С.И. МИХАЛЬСКАЯ, Л.Е. СЕРГЕЕВА, Е.Н. ТИЩЕНКО
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
Рис. 2. Митотические клетки каллюсных культур сои:
а — одиночный фрагмент; б — анеуплоидная клетка (2n = х – 3 = 7); в — гаплоидная клетка (2n = 2х = 20);
г — диплоидная клетка (2n = 4х = 40); д — анеуплоидная клетка (2n = 4х – 3 = 37); е — полиплоидная
клетка (2n = 12х = 120)
г д е
а б в
феноменом и рассматривают
ее как результат адаптивной
селекции [3]. Относительную
цитологическую стабильность
модального класса хромосом
(около 4х) клеток WR-линии
можно объяснить тем, что
устойчивая клеточная линия
скорее всего произошла от
одной мутантной клетки
(2n = 40), которая в наших
экспериментах встречалась с
частотой 10–6. Генетические
изменения, главным образом
заключающиеся в увеличе-
нии диапазона плоидности
клеток и их количества, мог-
ли быть вызваны условиями
и длительностью культиви-
рования in vitro. Кроме того,
ранее RAPD-методом пока-
зан высокий уровень гомо-
логии полинуклеотидных по-
следовательностей исходного
каллюса и WR-линии [13]. В
целом это свидетельствует об
относительно низком уровне нестабильности генома сои вольфрамус-
тойчивой линии, длительно культивируемой в условиях селективного
фактора.
Следует подчеркнуть, что независимо от продолжительности куль-
тивирования WR-линия сохраняла перекрестную устойчивость к моде-
лированным абиотическим факторам при высоком митотическом индек-
се. Несмотря на это, регенерация из устойчивой клеточной линии
осуществлялась в единичных случаях, тогда как у первичного каллюса
она происходила с частотой около 25 % (рис. 3). Вообще проблема по-
лучения растений из устойчивых клеточных линий — одна из наиболее
важных и сложных в клеточной селекции в связи с тем, что частота ре-
генерации обычно низкая. Одним из возможных объяснений этого фак-
та может быть снижение тотипотентности клеток с увеличением их пло-
идности, что, в частности, характерно и в данном случае. Наряду с этим
не исключено, что такой эффект является отражением изменений в экс-
прессии регуляторных и структурных генов, контролирующих процессы
морфогенеза in vitro.
Таким образом, WR-линия представляет собой миксоплоидную по-
пуляцию клеток, в которой в отличие от исходного каллюса при разной
длительности культивирования и селективной концентрации ионов
вольфрама наблюдается один четко выраженный модальный класс чис-
ла хромосом около 4х и отсутствуют хромосомные аберрации. Вместе с
тем в длительно культивируемой WR-линии увеличиваются количество
и диапазон плоидности клеток. При этом она сохраняет кросс-устойчи-
вость к оксианионам ванадия и осмотическим веществам, однако значи-
тельно снижается ее морфогенетический потенциал.
129
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ СОИ
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
Рис. 3. Индукция регенерации из культуры ткани
сои
1. Бавол А.В., Дубровна О.В., Лялько I.I. Добір та цитологічний аналіз стійких до культу-
рального фільтрату Gaeumannomyces graminis var. tritici клітинних ліній пшениці та реге-
нерантів із них // Вісн. Укр. т-ва генетиків та селекціонерів. — 2008. — 6, № 2. —
С. 191—200.
2. Бублик Е.Н., Адонин В.И., Кунах В.А. Цитогенетическая изменчивость клеточных линий
Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава // Цито-
логия и генетика. — 2008. — 42, № 1. — С. 29—36.
3. Ву Дик Куанг, Шамина З.Б. Цитогенетический анализ клонов, полученных из индиви-
дуальных клеток и протопластов // Там же. — 1985. — 19, № 1. — С. 26—32.
4. Дубровная О.В., Тищенко Е.Н. Геномная изменчивость морфогенного и неморфогенно-
го каллуса кормовой свеклы // Там же. — 2003. — 37, № 6. — С. 23—30.
5. Дубровна О.В. Цитогенетичний ефект дії NaCl тa Na2SO4 на калюсні культури кормо-
вих буряків // Физиология и биохимия культ. растений. — 2005. — 37, № 1. — С. 30—
36.
6. Кунах В.А. Біотехнологія лікарських рослин. Генетичні та фізіолого-біохімічні основи. —
К.: Логос, 2005. — 730 с.
7. Кунах В.А. Геномная изменчивость соматических клеток растений. Изменчивость в
процессе дедифференцировки и каллусообразования in vitro // Биополимеры и клет-
ка. — 1998. — 14, № 4. — С. 298—319.
8. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений. — М.: 1988. — 280 с.
9. Сергеева Л.Е. Изменения культуры клеток под действием стресса. — Киев: Логос,
2001. — 100 с.
10. Сергеева Л.Е. Новая среда с ионами бария — альтернативная система для отбора соле-
устойчивых клеточных линий // Биотехнология. — 2002. — 2. — С. 47—52.
11. Сидоров В.А. Биотехнология растений. Клеточная селекция. — Киев: Наук. думка,
1990. — 280 с.
12. Тищенко Е.Н., Даскалюк Т.М., Михальская С.И., Марьюшкин В.Ф. Денатурация ДНК
при старении створок бобов сои // Біополімери і клітина. — 2004. — 20, № 5. — С. 410—
415.
13. Тищенко Е.Н., Сергеева Л.Е., Михальская С.И., Данильченко О.А. RAPD-анализ воль-
фрамустойчивой клеточной линии сои с комплексной толерантностью к осмотическим
веществам // Физиология и биохимия культ. растений. — 2008. — 40, № 4. — С. 329—
337.
14. Чугункова Т.В., Дубровная О.В. Цитогенетический анализ каллусных культур и расте-
ний-регенерантов, полученных из эксплантатов сахарной свеклы различной плоидно-
сти // Цитология и генетика. — 1998. — 32, № 4. — С. 9—15.
15. Breiman A., Felsenburg T., Galun E. Is Nor region variability in wheat invariably caused by tis-
sue culture? // Theor. Appl. Genet. — 1989. — 77. — P. 809—814.
16. Larkin P.J., Scowcroft W.R. Somaclonal variation — a novel source of variability from cell cul-
tures for plant improvement // Ibid. — 1981. — 60. — P. 167—214.
17. Maliga P. Isolation and characterization of mutants in plant cell cultures // Ann. Rev. Plant
Physiol. — 1984. — 35. — P. 519—542.
18. Mecchia M.A., Ochogavia A., Selva J.P. et al. Genome polymorphisms and gene differential
expression in ‘back-and-forth’ ploidy-altered series of weeping lovegrass (Eragrostis curvula) //
J. Plant Physiol. — 2007. — 164, N 8. — P. 1051—1061.
19. Phillips R.L., Kaeppler S.M., Olhoft P. Genetic instability of plant tissue cultures: breakdown
of normal control // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. — 1994. — 91. — P. 5222—5226.
20. Roth E.J., Frazier B.L., Apuya N.R., Lark K.G. Genetic variation in an inbred plant: Variation
in tissue cultures of soybean (Glycine max (L.) Merrill) // Genetic. —1989. — 121. — P. 359—
368.
Получено 22.05.2009
ЦИТОГЕНЕТИЧНИЙ АНАЛIЗ КЛIТИННОЇ ЛIНIЇ СОЇ, СТIЙКОЇ ДО ОКСIАНIОНIВ
ВОЛЬФРАМУ
С.I. Михальська, Л.Є. Сергєєва, О.М. Тищенко
Iнститут фізіології рослин і генетики Національної академії наук України, Київ
Аналізували мінливість геному сої (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) вольфрамстійкої
клітинної лінії (WR-лінії), яка характеризується перехресною стійкістю до оксіаніонів ва-
надію та осмотичних речовин. Показано, що WR-лінія є міксоплоїдною популяцією
130
С.И. МИХАЛЬСКАЯ, Л.Е. СЕРГЕЕВА, Е.Н. ТИЩЕНКО
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
клітин, в якій, на відміну від вихідного калюсу, за різної тривалості культивування спос-
терігається один чітко виражений модальний клас числа хромосом близько 4х (~60 %) і
відсутні хромосомні аберації. Разом із цим у тривало культивованої WR-лінії підвищують-
ся частота і рівень плоїдності за збереження крос-стійкості. В зв’язку з цитогенетичними
особливостями обговорено питання про зниження морфогенетичного потенціалу WR-лінії.
CYTOGENETICAL ANALYSIS OF SOYBEAN TUNGSTEN-RESISTANT CELL LINE
S.I. Mykhalska, L.E. Sergeeva, E.N. Tishchenko
Institute of Plant Physiology and Genetics, National Academy of Sciences of Ukraine
31/17 Vasylkivska St., Kyiv, 03022, Ukraine
The variability of soybean genome (Glycine max (L.), Merr; 2n = 4x = 40) in tungsten-resistant
cell line (WR-line) which has resistance to both V oxyanions and osmotics is analyzed. It has been
shown that WR-line is a mixoploid cells population where, unlike primary callus, one definite
modal class near 4x (~60 %) was obserwed as well as no chromosome aberrations. Besides, the
frequency and level of polyploid cells in WR-line (43 passage) are increased with maintenance of
cross-resistance. Morphogenetic potential of WR-line is discussed.
Key words: Glycine max L., soybean, cell selection, genome instability, tungsten.
131
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ СОИ
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
|