Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления

Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использ...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:Цитология и генетика
Datum:2007
Hauptverfasser: Старокадомский, П.Л., Дубей, И.Я., Окунев, О.В., Иродов, Д.М.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2007
Schlagworte:
Online Zugang:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66523
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-66523
record_format dspace
spelling Старокадомский, П.Л.
Дубей, И.Я.
Окунев, О.В.
Иродов, Д.М.
2014-07-17T16:12:36Z
2014-07-17T16:12:36Z
2007
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос.
0564-3783
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66523
Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использовать белковый сплайсинг в биотехнологических целях. Цель работы – получение в клетках E. coli рекомбинантного фактора роста человека с нативным N-концом. Для этого был создан химерный белок, состоявший из короткого N-концевого пептида, интеина Mxe GyrA и гормона роста человека. В процессе трансляции формилметионином модифицируется N-концевой пептид, впоследствии удаляющийся. Показано, что интеин обеспечивал отщепление экстеинов, однако последующего их лигирования не происходило. Это позволило получить гормон роста человека с нативным N-концом. Исследовано влияние различных факторов на эффективность расщепления. Установлено, что наилучший результат расщепления химерного белка (60–80 %) достигается при добавлении индуктора (100 мМ β-меркаптоэтанол) с инкубацией в течение 4–6 сут.
ru
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
Цитология и генетика
Оригинальные работы
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
spellingShingle Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
Старокадомский, П.Л.
Дубей, И.Я.
Окунев, О.В.
Иродов, Д.М.
Оригинальные работы
title_short Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
title_full Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
title_fullStr Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
title_full_unstemmed Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
title_sort конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
author Старокадомский, П.Л.
Дубей, И.Я.
Окунев, О.В.
Иродов, Д.М.
author_facet Старокадомский, П.Л.
Дубей, И.Я.
Окунев, О.В.
Иродов, Д.М.
topic Оригинальные работы
topic_facet Оригинальные работы
publishDate 2007
language Russian
container_title Цитология и генетика
publisher Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
format Article
description Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использовать белковый сплайсинг в биотехнологических целях. Цель работы – получение в клетках E. coli рекомбинантного фактора роста человека с нативным N-концом. Для этого был создан химерный белок, состоявший из короткого N-концевого пептида, интеина Mxe GyrA и гормона роста человека. В процессе трансляции формилметионином модифицируется N-концевой пептид, впоследствии удаляющийся. Показано, что интеин обеспечивал отщепление экстеинов, однако последующего их лигирования не происходило. Это позволило получить гормон роста человека с нативным N-концом. Исследовано влияние различных факторов на эффективность расщепления. Установлено, что наилучший результат расщепления химерного белка (60–80 %) достигается при добавлении индуктора (100 мМ β-меркаптоэтанол) с инкубацией в течение 4–6 сут.
issn 0564-3783
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66523
citation_txt Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT starokadomskiipl konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ
AT dubeiiâ konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ
AT okunevov konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ
AT irodovdm konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ
first_indexed 2025-12-07T17:12:35Z
last_indexed 2025-12-07T17:12:35Z
_version_ 1850870391845683200