Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использ...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Цитология и генетика |
|---|---|
| Datum: | 2007 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
2007
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66523 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-66523 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. 2014-07-17T16:12:36Z 2014-07-17T16:12:36Z 2007 Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66523 Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использовать белковый сплайсинг в биотехнологических целях. Цель работы – получение в клетках E. coli рекомбинантного фактора роста человека с нативным N-концом. Для этого был создан химерный белок, состоявший из короткого N-концевого пептида, интеина Mxe GyrA и гормона роста человека. В процессе трансляции формилметионином модифицируется N-концевой пептид, впоследствии удаляющийся. Показано, что интеин обеспечивал отщепление экстеинов, однако последующего их лигирования не происходило. Это позволило получить гормон роста человека с нативным N-концом. Исследовано влияние различных факторов на эффективность расщепления. Установлено, что наилучший результат расщепления химерного белка (60–80 %) достигается при добавлении индуктора (100 мМ β-меркаптоэтанол) с инкубацией в течение 4–6 сут. ru Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Цитология и генетика Оригинальные работы Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
| spellingShingle |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. Оригинальные работы |
| title_short |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
| title_full |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
| title_fullStr |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
| title_full_unstemmed |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
| title_sort |
конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
| author |
Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. |
| author_facet |
Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. |
| topic |
Оригинальные работы |
| topic_facet |
Оригинальные работы |
| publishDate |
2007 |
| language |
Russian |
| container_title |
Цитология и генетика |
| publisher |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України |
| format |
Article |
| description |
Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использовать белковый сплайсинг в биотехнологических целях. Цель работы – получение в клетках E. coli рекомбинантного фактора роста человека с нативным N-концом. Для этого был создан химерный белок, состоявший из короткого N-концевого пептида, интеина Mxe GyrA и гормона роста человека. В процессе трансляции формилметионином модифицируется N-концевой пептид, впоследствии удаляющийся. Показано, что интеин обеспечивал отщепление экстеинов, однако последующего их лигирования не происходило. Это позволило получить гормон роста человека с нативным N-концом. Исследовано влияние различных факторов на эффективность расщепления. Установлено, что наилучший результат расщепления химерного белка (60–80 %) достигается при добавлении индуктора (100 мМ β-меркаптоэтанол) с инкубацией в течение 4–6 сут.
|
| issn |
0564-3783 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66523 |
| citation_txt |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT starokadomskiipl konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ AT dubeiiâ konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ AT okunevov konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ AT irodovdm konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkausloviiegorasŝepleniâ |
| first_indexed |
2025-12-07T17:12:35Z |
| last_indexed |
2025-12-07T17:12:35Z |
| _version_ |
1850870391845683200 |