RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия

Исследовали влияние оксианионов ванадия на геном сои (Glycine max L., Merr.) в устойчивой к вольфраму (WR) клеточной линии. WR-линия показывает перекрестную устойчивость к оксианионам V⁵⁺. Установлено наличие одинаковых по размеру RAPD-ампликонов, дифференциально синтезируемых с ДНК исходного каллус...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Published in:	Цитология и генетика
Date:	2009
Main Authors:	Тищенко, Е.Н., Михальская, С.И., Сергеева, Л.Е.
Format:	Article
Language:	Russian
Published:	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2009
Subjects:	Оригинальные работы
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66652
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия / Е.Н. Тищенко, С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева // Цитология и генетика. — 2009. — Т. 43, № 3. — С. 39-44. — Бібліогр.: 18 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1860266456987467776
author	Тищенко, Е.Н. Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е.
author_facet	Тищенко, Е.Н. Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е.
citation_txt	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия / Е.Н. Тищенко, С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева // Цитология и генетика. — 2009. — Т. 43, № 3. — С. 39-44. — Бібліогр.: 18 назв. — рос.
collection	DSpace DC
container_title	Цитология и генетика
description	Исследовали влияние оксианионов ванадия на геном сои (Glycine max L., Merr.) в устойчивой к вольфраму (WR) клеточной линии. WR-линия показывает перекрестную устойчивость к оксианионам V⁵⁺. Установлено наличие одинаковых по размеру RAPD-ампликонов, дифференциально синтезируемых с ДНК исходного каллуса и WR-линии, которая последовательно культивируется в присутствии летальных доз оксианионов W⁶⁺ и V⁵⁺. Предположено, что в геноме сои имеются локусы, повышенная нестабильность которых обусловлена действием разных стрессоров. Вивчали вплив оксианіонів ванадію на геном сої (Glycine max L., Merr.) у стійкої до вольфраму (WR) клітинної лінії. Така лінія показує стійкість до оксианіонів V⁵⁺. Встановлено наявність однакових за розміром RAPD-ампліконів, які диференційно синтезуються з ДНК вихідного калюсу та WR-лінії, що послідовно культивується у присутності летальних доз оксианіонів W⁶⁺ і V⁵⁺. Припущено, що в геномі сої є локуси, підвищена нестабільність яких обумовлена дією різних стресорів. The effect of vanadium oxyanions on genome of soybean (Glycine max L., Merr.) in tungsten-resistant cell line was studied. The line is resistant to V⁵⁺-oxyanions. RAPD-amplicons with identical length are differentially synthesized from DNAs of tungsten-resistant cell line as well as of the initial culture was shown by using the lethal dose of oxyanions W⁶⁺ and then V⁵⁺. The presence of instable loci in soybean genome under different stressors is discussed.
first_indexed	2025-12-07T19:01:16Z
format	Article
fulltext	УДК 57.085.23:575.22:582.736.3 Е.Н. ТИЩЕНКО, С.И. МИХАЛЬСКАЯ, Л.Е. СЕРГЕЕВА Институт физиологии растений и генетики НАН Украины, Киев E'mail: plant@ifrg.kiev.ua RAPD�АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ СОИ С ПЕРЕКРЕСТНОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ К ОКСИАНИОНАМ ВОЛЬФРАМА И ВАНАДИЯ Исследовали влияние оксианионов ванадия на геном сои (Glycine max L., Merr.) в устойчивой к вольфраму (WR) клеточной линии. WR�линия показывает перекрест� ную устойчивость к оксианионам V5+. Установлено на� личие одинаковых по размеру RAPD�ампликонов, диффе� ренциально синтезируемых с ДНК исходного каллуса и WR�линии, которая последовательно культивируется в присутствии летальных доз оксианионов W6+ и V5+. Предположено, что в геноме сои имеются локусы, повы� шенная нестабильность которых обусловлена действи� ем разных стрессоров. Введение. Изучение структурно�функцио� нальной изменчивости генома вносит сущест� венный вклад в понимание механизмов комп� лексной толерантности растений к неблагопри� ятным факторам окружающей среды. Засуха и засоление – одни из основных абиотических стрессоров, оказывающих негативное влияние на продуктивность, рост и развитие сельско� хозяйственных культур. Вместе с тем увеличи� вающееся в последнее время антропогенное загрязнение окружающей среды токсичными элементами ставит эту проблему в число при� оритетных. Один из аспектов толерантности культурных растений связан с генетическим разнообразием в популяциях растений, которое является ре� зультатом качественных и/или количественных изменений в полинуклеотидных последова� тельностях ДНК [1]. Источником такого разно� образия может быть сомаклональная изменчи� вость при культивировании in vitro растительных тканей [2–4]. Вместе с тем поиск новых форм с повышенной устойчивостью к комплексу абиотических факторов затруднен при ис� пользовании и биотехнологических, и тради� ционных селекционно�генетических методов. Для отбора ценных мутаций предложено на� правление клеточной селекции, заключающе� еся в создании моделированных систем in vitro с использованием летальных доз таких ионов тяжелых металлов, которые в микроколичест� вах способны оказывать многовекторные стрес� совые воздействия на растительные клетки [5]. Предположено, что устойчивость к иону токсичного элемента будет приводить к повы� шенной кросс�толерантности к другим абио� тическим стрессорам. В качестве селективного агента представляют интерес ионы вольфрама и ванадия, которые оказывают негативное воздействие на процессы дыхания и фосфори� лирования белков в растениях [6], к тому же W6+ является токсичным аналогом иона молиб� дена, который входит в состав кофактора нит� ратредуктазы – ключевого фермента ассими� ляции нитратов, чувствительного к различ� ным абиотическим стрессорам [7]. Нами получены клеточные линии сои (Gly� cine max L., Merr), устойчивые к токсичным концентрациям вольфрамат�оксианионов (WR� линии). Эти линии проявляют также устойчи� вость к осмотическим веществам, в частнос� ти, в отличие от исходного каллуса они спо� ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2009. № 4 39 © Е.Н. ТИЩЕНКО, С.И. МИХАЛЬСКАЯ, Л.Е.СЕРГЕЕВА, 2009 собны расти и пролиферировать на 0,8 М ман� ните, на 1%�ном сульфатном или сульфатно� хлоридном засолении [8]. Такие линии являют� ся удобным объектом для изучения молекуляр� ных механизмов комплексной устойчивости растений на клеточном уровне. Целью настоя� щей работы был анализ изменчивости генома вольфрам�устойчивой клеточной линии (WR� линии) сои в ответ на действие летальных доз иного стрессора – ванадатоксианионов. Материалы и методы. ДНК исходного кал� луса (КК27), индуцированного из листьев сте� рильных растений сои сорта Киевская 27 (се� лекции Института физиологии растений и ге� нетики НАН Украины), и WR�линии 7–8�го пассажа, культивируемой в присутствии леталь� ной дозы оксианионов вольфрама или ванадия (по 1 мМ), выделяли по модифицированному нами методу Деллапорта [9]. Уровень полиморфизма ДНК анализировали методом RAPD�ПЦР [10], используя девять де� камерных праймеров (табл. 1). Амплификацию ДНК осуществляли в программируемом при� боре «Терцик» (Россия) в 25 мкл реакционной смеси, содержащей 25–30 пг ДНК, 2,5 мкл 10� кратного реакционного буфера (Promega, без MgCl2), по 0,2 мМ каждого дАТФ, дГТФ, дТТФ, дСТФ, 0,3 мкМ праймера, 1 ед. Taq�полимера� зы (Promega), 1,5 мМ MgCl2. На реакционную смесь наслаивали по 20–30 мкл минерального масла. Условия амплификации: преденатурация 94 °С, 3 мин; затем 42 цикла – денатурация 94 °С, 1 мин; отжиг – 36 °С, 1 мин; синтез – 72 оС, 2 мин; конечная элонгация – 72 °С, 7 мин. Электрофорез проводили в 2,0%�ном агароз� ном геле, содержащем 0,5 мкг/мл бромистого этидия в 1�ТВЕ при напряженности 3–4 В/см в течение 4–6 ч. Продукты амплификации представляли в виде бинарной матрицы, где на� личие или отсутствие одинаковых по размеру фрагментов соответствовало значениям 1 и 0. Уровень гомологии и дивергенции ДНК, представленной в спектрах сравниваемых ам� пликонов, определяли по коэффициентам Жаккарда [11], учитывая воспроизводимые минорные и мажорные продукты синтеза двух биологических повторностей опыта. Суммарный белок WR�линии экстрагирова� ли в буфере, содержащем 50 мМ имидазола� HCl (pH 6,5), 2 мМ PVP, 2 мМ PMSF, 10 мМ β�меркаптоэтанола, 0,5 мкл тритона Х�100, и центрифугировали 20 мин при 3000 g. Суперна� тант еще дважды центрифугировали при 12 000 g. Высушенный осадок ресуспендирова� ли в 50 мМ трис�HCl буфере (pH 7,5) и по мето� ду Брэдфорда определяли содержание белка при трех биологических повторностях опыта [12]. ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2009. № 440 Е.Н. Тищенко, С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева Таблица 1 Сравнительная характеристика продуктов амплификации ДНК КК27 и WR�линии, культивируемой на питательных средах с 1 мМ оксианионов вольфрама (WRw) или ванадия (WRv) Праймеры Р1 (5'�СTC AGC CCA G�3') Р2 (5'�GCG CAT TAG A�3') Р3 (5'�GGC TAG GGC A�3') Р4 (5'�ATC AAG CTG C�3') Р5 (5'�GGT TCC AGC T�3') Р6 (5'�CTG AGG CAA A�3') Р7 (5'�GAG CCA ACC G�3') Р8 (5'�CAC GGC GGG T�3') Р9 (5'�GCC ATC AAG A�3') Всего 16 14 [1, 1] 14 [0, 1] 8 16 4 18 13 7 110 16 12 [0, 0] 14 [1, 0] 8 16 4 18 13 7 108 16 14 [1, 1] 14 [0, 1] 8 16 4 18 13 7 110 Исходный каллус КК27 WR w WR v Количество ампликонов Линия Примечание. В квадратных скобках представлены вариабельные ампликоны, где 1 и 0 означают присутствие и отсутствие фрагмента соответственно. Для цитогенетического анализа ткани WR� линии 7�го дня пассирования фиксировали в ацеталкоголе, готовили давленые ацетоорсеи� новые препараты по методике [13] и анализи� ровали под микроскопом «Amplival» при уве� личении 100 � 15. Результаты исследований и их обсуждение. Для получения устойчивых клеточных линий принципиальное значение имеет выбор селек� тирующей (токсичной) концентрации стрессо� ра. В нашем случае ею считали такую концен� трацию оксианионов вольфрама (1 мМ), при которой останавливался рост исходного кал� луса, а последующий возврат в нормальные условия не восстанавливал жизнедеятельность клеток. Изучение WR�линии на устойчивость к оксианионам ванадия показало, что она спо� собна выдерживать летальные дозы этого стрес� сора, равные 1 мМ. Для дифференциации неустойчивых и ус� тойчивых клеточных линий, помимо интеграль� ного критерия устойчивости – относительно� го прироста биомассы каллуса, использовали один из основных показателей необратимого перехода клеток на путь гибели – фрагмента� цию ДНК [8]. Установлено, что при выбранной селективной концентрации оксианионов воль� фрама и ванадия суммарная ДНК исходного каллуса сои в отличие от устойчивой линии подвергается интенсивной деградации с образо� ванием непрерывного спектра фрагментов ши� рокого диапазона молекулярных масс (рис. 1). Отсутствие в спектре фрагментации ДНК муль� тимеров, размер которых составляет ~180 п.н., свидетельствует в пользу того, что токсичные концентрации оксианионов ванадия, как и вольфрама, вызывают гибель клеток сои пу� тем некроза. При культивировании WR�линии на пита� тельных средах с 1 мМ оксианионов вольфра� ма (WRw) или ванадия (WRv) в течение одного пассажа наблюдаются отличия в динамике на� копления суммарного белка (табл. 2). Харак� терной чертой WRv является постепенное по� вышение содержания белков, в то время как WRw имеет четко выраженный максимум на стадии стационарного роста, причем если в пе� риод экспоненциального роста WRw этот пара� метр был в 2,6 раза больше, то в конце пасса� жа – приблизительно в 2 раза меньше, чем в WRv. Полученные данные свидетельствуют о дифференциальном влиянии обсуждаемых стрессоров на процесс биосинтеза и/или ста� бильность белков, что, возможно, является от� ражением различий в механизмах адаптации и/или устойчивости клеток к оксианионам вольфрама и ванадия. ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2009. № 4 41 RAPD�анализ клеточной линии сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам Рис. 1. Электрофореграмма суммарной ДНК: а – ис� ходный штамм КК27, культивируемый в присутствии токсичных концентраций оксианионов ванадия (1) и вольфрама (2); б – вольфрам�устойчивая клеточная линия сои WR w (3) и WR v (4); М – маркер молекуляр� ных масс pUC19 DNA/MspI Marker, 23 («Fermentas», Литва). Слева указан размер фрагментов в п.н. Таблица 2 Динамика накопления суммарного белка WR�линии при культивировании на средах с летальными дозами оксианионов вольфрама и ванадия Вольфрам� устойчивая линия WR w WR v 6,50 ± 0,12 2,50 ± 0,14 8,87 ± 0,11 7,40 ± 0,14 5,10 ± 0,21 10,30 ± 0,23 Общее количество белка, мг/г сырой ткани при продолжительности культивирования 14 дней7 дней 30 дней Изучение клеточных линий, устойчивых к абиотическим факторам, способствует понима� нию вопросов о скорости дивергенции различ� ных типов полинуклеотидных последователь� ностей и в целом о пределах изменчивости ДНК, свойственных этой молекуле в ответ на летальные дозы чередующихся стрессоров. Для изучения уровня изменчивости ДНК КК27 и WR�линии, культивируемой на питательных средах с 1мМ оксианионов вольфрама или ва� надия, использовали RAPD�метод, который позволяет оценить вариабельность значитель� ного числа локусов, распределенных на про� тяжении всего генома. Все используемые на� ми девять произвольных декамерных прайме� ров с разной эффективностью обеспечивали синтез определенного набора фрагментов раз� мером ~200 ÷ 3500 п.н., количество которых составляло от 4 до 18 (табл. 1 и рис. 2). Сравнение спектров амплификации ДНК исходного каллуса и полученной от нее WR� линии показало, что среди 111 синтезирован� ных фрагментов наблюдается разница для че� тырех ампликонов. В частности, с использо� ванием праймера 5'�GCG CAT TAG A�3' уста� новлено исчезновение фрагментов размером ~1550 и 1350 п.н. у WRw�линии, тогда как при применении праймера 5'�GGC TAG GGC A�3' у этой линии появлялся новый ампликон раз� мером ~1700 п.н. и отсутствовал фрагмент размером ~500 п.н. Установленные различия могут быть результатом замены пар оснований в одном и/или обоих сайтах связывания прай� меров ДНК, делециями или вставками после� довательностей внутри амплифицируемых ло� кусов ДНК [10, 14]. При чередовании стрессовых факторов, предполагая, что каждый из них может приво� дить к нестабильности генома, теоретически можно ожидать следующие варьирования в паттернах ампликонов ДНК КК27, WRw и WRv: 1–0–0, 1–1–0, 1–0–1, 0–1–1, 0–0–1, 0–1–0. Только полиморфные фрагменты, ко� торые идентифицированы в ДНК КК27 и куль� тивируемой в течение семи пассажей WRw�ли� нии, были вариабельными в ДНК WRV. Так, фрагменты размером ~1550, 1350 и 500 п.н., отсутствовавшие у WRw�линии, появлялись у WRv, а ампликон размером ~1700 п.н. WRw� линии, который не наблюдался в ДНК исход� ного каллуса, исчезал в спектре WRv, т.е. при использовании указанных праймеров проис� ходили следующие типы изменений в ампли� конах: 1–0–1, 0–1–0. Индекс подобия и ди� ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2009. № 442 Е.Н. Тищенко, С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева Рис. 2. Спектры продуктов амплификации ДНК сои: а – праймерами Р1 (1, 2, 3), Р2 (4, 5, 6); б – Р4 (1, 2, 3), Р3 (4, 5, 6) исходного каллуса КК27 (1, 4), а также вольфрам�устойчивой клеточной линии в присутствии токсичных концентраций оксианионов вольфрама WR w (2, 5) и ванадия WR v (3, 6). М – маркер молекулярных масс O’Range Ruler TM , 100–6000 п.н. («Fermentas», Лит� ва). Стрелками указаны вариабельные ампликоны и их размер в п.н. вергенции среди проанализированных фраг� ментов в спектрах ДНК WRw и WRv, а также КК27 и WRw составил 0,964 и 0,036 соответст� венно, тогда как различий между КК27 и WRv не наблюдалось. Тот факт, что для четырех указанных поли� морфных ампликонов в спектре WRv имеет место их появление/исчезновение (0–1, 1–0), свидетельствует об изменчивости полинуклео� тидных последовательностей ДНК сои при че� редовании летальных доз оксианионов вольф� рама и ванадия, а также о влиянии последних на стабильность молекул ДНК. Динамичное варьирование близких по размеру амплико� нов, наблюдаемое в спектрах ДНК КК27 и WR�линии, позволяет сделать предположение о наличии в геноме сои локусов с повышен� ной нестабильностью, что обусловлено влия� нием различных стрессовых факторов. Воз� можно, помимо ионов вольфрама и ванадия, определенный вклад могут вносить и условия культивирования in vitro. Следует отметить, что данные о дифферен� циальной стабильности последовательностей ДНК растений немногочисленны. Так, гене� тическая нестабильность установлена при из� менении уровня плоидности (тетраплоид�ди� плоид�тетраплоид) в культуре in vitro с исполь� зованием колхицина у Eragrostis curvula, где ревертантные ампликоны включают в боль� шинстве случаев некодирующие последователь� ности, хотя среди них встречаются и гомологи генам [15]. Показано, что при культивирова� нии культуры тканей, полученных от разных линий кукурузы, осуществляются изменения в RAPD�ампликонах одного и того же размера [16]. Linacero et al. [17] предполагают сущест� вование в геноме ржи «горячих зон мутагенеза». Преимущественные точки локализации для FB�транспозона позволяют частично объяснить обсуждаемый феномен [18]. Тем не менее ме� ханизмы, связанные с нестабильностью конк� ретных локусов генома растений, не ясны. Учитывая приведенные литературные дан� ные, можно предположить, что динамичное появление/исчезновение ампликонов в ДНК сои является отражением процессов, взаимо� связанных с цитогенетической изменчивос� тью, так как культивируемая вольфрам�устой� чивая линия представляет собой миксоплоид� ную популяцию, где встречаются как гипога� плоидные, анеуплоидные, так и октоплоидные клетки при норме 2n = 40 (рис. 3). Вместе с тем идентифицированные изменения в после� довательностях нуклеотидов могут быть ре� зультатом активности мобильных генетичес� ких элементов, замен нуклеотидов, делеций, вставок в отдельных клетках WR�линии. Таким образом, WR�линия обладает устой� чивостью к дозе оксианионов ванадия, вызыва� ющей гибель клеток исходного каллуса путем некроза. При ее культивировании на средах с токсичными концентрациями вольфрамат� или ванадатоксианионов в течение одного пассажа наблюдаются различия в динамике накопления суммарного белка. Показан высо� кий уровень гомологии проанализированных 111 RAPD�ампликонов. Идентифицировано четыре фрагмента, дифференциально синтези� руемых с ДНК исходного каллуса, а также WR� линии, культивированной последовательно на средах, которые содержат оксианионы W6+ и V5+. Наличие фрагментов одинакового раз� мера, вариабельно амплифицируемых с ДНК КК27, WRw и WRv, позволяет предположить существование в ДНК сои локусов, повышен� ная нестабильность которых обусловлена дей� ствием разных стрессовых факторов. ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2009. № 4 43 RAPD�анализ клеточной линии сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам Рис. 3. Метафазы с разным числом хромосом в воль� фрам�устойчивой клеточной линии сои (Glycine max L., Merr, 2n = 4х = 40), культивируемой в присутствии селективной концентрации оксианионов вольфрама: а – 30 хромосом; б – 40 хромосом; в – около 60 хромо� сом; г – около 70 хромосом E.N. Tishchenko, S.I. Mykhalska, L.E. Sergeeva RAPD�ANALYSIS OF SOYBEAN CELL LINE WITH CROSS�RESISTANCE TO TUNGSTEM AND VANADIUM OXYANIONS The effect of vanadium oxyanions on genome of soy� bean (Glycine max L., Merr.) in tungsten�resistant cell line was studied. The line is resistant to V 5+ �oxyanions. RAPD� amplicons with identical length are differentially synthe� sized from DNAs of tungsten�resistant cell line as well as of the initial culture was shown by using the lethal dose of oxyanions W 6+ and then V 5+ . The presence of instable loci in soybean genome under different stressors is discussed. О.М. Тищенко, С.І. Михальська, Л.Є. Сергєєва RAPD�АНАЛІЗ КЛІТИННОЇ ЛІНІЇ СОЇ З ПЕРЕХРЕСНОЮ СТІЙКІСТЮ ДО ОКСИАНІОНІВ ВОЛЬФРАМУ ТА ВАНАДІЮ Вивчали вплив оксианіонів ванадію на геном сої (Glycine max L., Merr.) у стійкої до вольфраму (WR) клі� тинної лінії. Така лінія показує стійкість до оксианіонів V 5+ . Встановлено наявність однакових за розміром RAPD�ампліконів, які диференційно синтезуються з ДНК вихідного калюсу та WR�лінії, що послідовно культивується у присутності летальних доз оксианіонів W 6+ і V 5+ . Припущено, що в геномі сої є локуси, підвище� на нестабільність яких обумовлена дією різних стресорів. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Cullis C.A. The environment as an active generator of adaptive genomic variation // Plant Adaptations to Stress Environments / Ed. H.R. Lerner. – New York, 1997. – Р. 149–160. 2. Кунах В.А. Геномная изменчивость соматических клеток растений. Изменчивость в процессе дедиф� ференцировки и каллусообразования in vitro // Био� полимеры и клетка. – 1998. – 14, № 4. – C. 298. 3. Larkin P.J., Scowcroft W.R. Somaclonal variation – a novel source of variability from cell cultures for plant improvement // Theor. Appl. Genet. – 1981. – 60. – P. 167–214. 4. Phillips R.L., Kaeppler S.M., Olhoft P. Genetic insta� bility of plant tissue cultures: breakdown of normal controls // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. – 1994. – 91. – P. 5222–5226. 5. Сергеева Л.Е. Изучение комплексной устойчивос� ти ванадий� и вольфрамустойчивых клеточных ли� ний табака // Физиология и биохимия культур. растений. – 2000. – 32, № 6. – С. 490–493. 6. Ridge I., Omer J., Osborne D.J. Different effects of vana� date on net proton secreretion in the fern Regnellidium diphyllum and the dicotyledon Nymphoides peltata: relevance to cell growth // J. Plant Physiol. – 1998. –153, № 3/4. – P. 430–436. 7. Deng M., Moureaux T., Caboche M. Tungstate, a molyb� date analog inactivating nitrate reductase, deregulates the expression of the nitrate reductase structural gene // Plant Physiol. – 1989. – 91. – P. 304–309. 8. Тищенко Е.Н., Сергеева Л.Е., Михальская С.И., Да� нильченко О.А. RAPD�анализ вольфрамустойчивой клеточной линии сои с комплексной толерантнос� тью к осмотическим веществам // Физиология и биохимия культур. растений. – 2008. – 40, № 4. – С. 329–337. 9. Тищенко Е.Н., Даскалюк Т.М., Михальская С.И., Ма� рьюшкин В.Ф. Денатурация ДНК при старении ство� рок бобов сои // Біополімери і клітина. – 2004. – 20, № 5. – С. 410–415. 10. Williams J.G.K., Kubelic A.R., Livak K.J., Rafalski J.F., Tingey S.V. DNA polymorphism amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers // Nucl. Acids Res. – 1990. – 18. – P. 6531–6535. 11. Weising K., Nybom H., Wolff K., Meyer W. DNA FIN� GERPRINTING in PLANTS AND FUNGI. – 1995 by CRC Press, Inc. Р.323. 12. Noquet C., Avice J.C., Ourry A., Volerec J.J., Cunnin� gham S.M., Boucaud J. Effects of environmental factors and endogenous signals of N uptake/N partitioning and taproot vegetative storage protein accumulation in Medicago sativa // Austr. J. Plant Physiol. – 2001. – 28. – P. 279–287. 13. Дубровна О.В. Спектр аберацій хромосом в клітин� них популяціях калюсних культур кормових буря� ків при відборі на стійкість до токсину збудника бактеріозу // Физиология и биохимия культур. растений. – 2003. – 34, № 3. – С. 241–247. 14. Гостимский С.А., Кокаева З.Г., Боброва В.К. Исполь� зование молекулярных маркеров для анализа ге� нома растений // Генетика. – 1999. – 35, № 11. – С. 1538–1549. 15. Mecchia M.A., Ochogavia A., Selva J.P., Laspina N., Fe� litti S., Martelotto L.G., Spangenberg G., Echenique V., Pessino S.C. Genome polymorphisms and gene differ� ential expression in ‘back�and�forth’ ploidy�altered series of weeping lovegrass (Eragrostis curvula) // J. Plant Physiol. – 2007. – 164, № 8. – С. 1051–1061. 16. Майданюк Д.М., Андрєєв І.О., Спірідонова К.В., Ку� нах В.А. Геномна мінливість в культурі in vitro ку� курудзи лінії Р346 і отриманих від неї сомакло� нальних ліній // Біополімери і клітина. – 2007. – 23, № 5. – С. 416–424. 17. Linacero R., Freitas A.E., Vazquez A.M. Hot sport of DNA instability revealed through the study of somaclonal variation in rye // Theor. Appl. Genet. – 2000. – 100. – P. 506–511. 18. Alves E., Ballesteros I., Linacero R., Vazques A.M. RYS1, a foldback transposon, is activated by tissues culture and shows preferential insertion points into the rye genome // Theor. Appl. Genet. – 2005. – 111. – P. 431– 436. Поступила 14.07.08 ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2009. № 444 Е.Н. Тищенко, С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-66652
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn	0564-3783
language	Russian
last_indexed	2025-12-07T19:01:16Z
publishDate	2009
publisher	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
record_format	dspace
spelling	Тищенко, Е.Н. Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е. 2014-07-20T07:03:09Z 2014-07-20T07:03:09Z 2009 RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия / Е.Н. Тищенко, С.И. Михальская, Л.Е. Сергеева // Цитология и генетика. — 2009. — Т. 43, № 3. — С. 39-44. — Бібліогр.: 18 назв. — рос. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66652 57.085.23:575.22:582.736.3 Исследовали влияние оксианионов ванадия на геном сои (Glycine max L., Merr.) в устойчивой к вольфраму (WR) клеточной линии. WR-линия показывает перекрестную устойчивость к оксианионам V⁵⁺. Установлено наличие одинаковых по размеру RAPD-ампликонов, дифференциально синтезируемых с ДНК исходного каллуса и WR-линии, которая последовательно культивируется в присутствии летальных доз оксианионов W⁶⁺ и V⁵⁺. Предположено, что в геноме сои имеются локусы, повышенная нестабильность которых обусловлена действием разных стрессоров. Вивчали вплив оксианіонів ванадію на геном сої (Glycine max L., Merr.) у стійкої до вольфраму (WR) клітинної лінії. Така лінія показує стійкість до оксианіонів V⁵⁺. Встановлено наявність однакових за розміром RAPD-ампліконів, які диференційно синтезуються з ДНК вихідного калюсу та WR-лінії, що послідовно культивується у присутності летальних доз оксианіонів W⁶⁺ і V⁵⁺. Припущено, що в геномі сої є локуси, підвищена нестабільність яких обумовлена дією різних стресорів. The effect of vanadium oxyanions on genome of soybean (Glycine max L., Merr.) in tungsten-resistant cell line was studied. The line is resistant to V⁵⁺-oxyanions. RAPD-amplicons with identical length are differentially synthesized from DNAs of tungsten-resistant cell line as well as of the initial culture was shown by using the lethal dose of oxyanions W⁶⁺ and then V⁵⁺. The presence of instable loci in soybean genome under different stressors is discussed. ru Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Цитология и генетика Оригинальные работы RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия RAPD-аналіз клітинної лінії сої з перехресною стійкістю до оксианіонів вольфраму та ванадію RAPD-analysis of soybean cell line with cross-resistance to tungstem and vanadium oxyanions Article published earlier
spellingShingle	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия Тищенко, Е.Н. Михальская, С.И. Сергеева, Л.Е. Оригинальные работы
title	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия
title_alt	RAPD-аналіз клітинної лінії сої з перехресною стійкістю до оксианіонів вольфраму та ванадію RAPD-analysis of soybean cell line with cross-resistance to tungstem and vanadium oxyanions
title_full	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия
title_fullStr	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия
title_full_unstemmed	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия
title_short	RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия
title_sort	rapd-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия
topic	Оригинальные работы
topic_facet	Оригинальные работы
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66652
work_keys_str_mv	AT tiŝenkoen rapdanalizkletočnyhliniisoisperekrestnoiustoičivostʹûkoksianionamvolʹframaivanadiâ AT mihalʹskaâsi rapdanalizkletočnyhliniisoisperekrestnoiustoičivostʹûkoksianionamvolʹframaivanadiâ AT sergeevale rapdanalizkletočnyhliniisoisperekrestnoiustoičivostʹûkoksianionamvolʹframaivanadiâ AT tiŝenkoen rapdanalízklítinnoílíníísoízperehresnoûstíikístûdooksianíonívvolʹframutavanadíû AT mihalʹskaâsi rapdanalízklítinnoílíníísoízperehresnoûstíikístûdooksianíonívvolʹframutavanadíû AT sergeevale rapdanalízklítinnoílíníísoízperehresnoûstíikístûdooksianíonívvolʹframutavanadíû AT tiŝenkoen rapdanalysisofsoybeancelllinewithcrossresistancetotungstemandvanadiumoxyanions AT mihalʹskaâsi rapdanalysisofsoybeancelllinewithcrossresistancetotungstemandvanadiumoxyanions AT sergeevale rapdanalysisofsoybeancelllinewithcrossresistancetotungstemandvanadiumoxyanions

RAPD-анализ клеточных линий сои с перекрестной устойчивостью к оксианионам вольфрама и ванадия

Institution

Similar Items