Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
Метод биолистической трансформации был использован для генетического усовершенствования трех коммерческих сортов ячменя отечественной селекции (Оксамытовый, Водограй и Гетьман). Для трансформации использовали конструкцию pHLFTuBA, содержащую ген интереса, ген человеческого лактоферрина (hLF) под кон...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Цитология и генетика |
|---|---|
| Дата: | 2011 |
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
2011
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66817 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена / И.В. Танасиенко, А.И. Емец, Я.В. Пирко, В.И. Корховой, Н. Абумхади, Я.Б. Блюм // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 3-10. — Бібліогр.: 30 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862589018506526720 |
|---|---|
| author | Танасиенко, И.В. Емец, А.И. Пирко, Я.В. Корховой, В.И. Абумхади, Н. Блюм, Я.Б. |
| author_facet | Танасиенко, И.В. Емец, А.И. Пирко, Я.В. Корховой, В.И. Абумхади, Н. Блюм, Я.Б. |
| citation_txt | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена / И.В. Танасиенко, А.И. Емец, Я.В. Пирко, В.И. Корховой, Н. Абумхади, Я.Б. Блюм // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 3-10. — Бібліогр.: 30 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Цитология и генетика |
| description | Метод биолистической трансформации был использован для генетического усовершенствования трех коммерческих сортов ячменя отечественной селекции (Оксамытовый, Водограй и Гетьман). Для трансформации использовали конструкцию pHLFTuBA, содержащую ген интереса, ген человеческого лактоферрина (hLF) под контролем глютелинового В-1 (GluB-1) промотора риса. В качестве селективного маркерного гена использовали ген мутантного a-тубулина, обеспечивающего устойчивость к трифлюралину (гербицид динитроанилинового ряда). Для установления селективной концентрации трифлюралина был проведен скрининг его разных концентраций в диапазоне от 0,1 до 30 мкМ. После 2–3 месяцев селекции на 10 мкМ трифлюралина были получены две трансгенные линии растений ячменя сорта Оксамытовый и каллусная линия сорта Гетьман. Для подтверждения стабильной интеграции гена hLF был проведен ПЦР-анализ листьев растений-регенерантов после их адаптации в грунте. В обеих линиях ячменя был амплифицирован фрагмент гена hLF размером 734 п.н.
Метод біолістичної трансформації використовували для генетичного вдосконалення трьох комерційних сортів ячменю вітчизняної селекції (Оксамитовий, Водограй і Гетьман). Для трансформації використовували конструкцію pHLFTuBA, що містила ген інтересу, ген людського лактоферину (hLF) під контролем глютелінового В 1 (GluB 1) промотору рису. Як селективний маркерний ген використовували ген мутантного α-тубуліну, що забезпечував стійкість до трифлюраліну (гербіцид динітроанілінового ряду). Для встановлення селективної концентрації агенту було проведено скринінг різних концентрацій трифлюраліну в діапазоні від 0,1 до 30 мкМ. Після 2–3 місяців селекції на 10 мкМ трифлюраліну було отримано дві трансгенні лінії рослин ячменю сорту Оксамитовий та калусну лінію сорту Гетьман. Для підтвердження стабільної інтеграції гена hLF було проведено ПЦР аналіз листків рослин-регенерантів після їх адаптації в грунті. В обох лініях було ампліфіковано фрагмент гена розміром 734 п.н.
Method of biolistic transformation was used for genetic improvement of commercial barley cultivars (Oksamitoviy, Vodogray and Getman). The plasmid pHLFTuBA was used for particle bombardment that consists of the hLF gene under the control of the barley glutelin B-1 promoter and a selectable marker gene, α-tubulin conferring resistance to trifluralin (dinitroanilinr herbicide). Preliminary screening of different trifluralin concentration range from 0,1 to 30 μM was tested for determination of effective selective agent concentration. Two transgenic barley line of genotype Oksamitiviy and transgenic callus line of cultivar Getman were obtained after selection on 10 μM of trifluralin. To confirm the transgenic nature of regenerated plants, the PCR analysis was carried out. The 734bp length fragment of hLF gene was amplified from both regenerated plants.
|
| first_indexed | 2025-11-27T02:53:37Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-66817 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0564-3783 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-27T02:53:37Z |
| publishDate | 2011 |
| publisher | Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Танасиенко, И.В. Емец, А.И. Пирко, Я.В. Корховой, В.И. Абумхади, Н. Блюм, Я.Б. 2014-07-22T18:23:32Z 2014-07-22T18:23:32Z 2011 Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена / И.В. Танасиенко, А.И. Емец, Я.В. Пирко, В.И. Корховой, Н. Абумхади, Я.Б. Блюм // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 3-10. — Бібліогр.: 30 назв. — рос. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66817 Метод биолистической трансформации был использован для генетического усовершенствования трех коммерческих сортов ячменя отечественной селекции (Оксамытовый, Водограй и Гетьман). Для трансформации использовали конструкцию pHLFTuBA, содержащую ген интереса, ген человеческого лактоферрина (hLF) под контролем глютелинового В-1 (GluB-1) промотора риса. В качестве селективного маркерного гена использовали ген мутантного a-тубулина, обеспечивающего устойчивость к трифлюралину (гербицид динитроанилинового ряда). Для установления селективной концентрации трифлюралина был проведен скрининг его разных концентраций в диапазоне от 0,1 до 30 мкМ. После 2–3 месяцев селекции на 10 мкМ трифлюралина были получены две трансгенные линии растений ячменя сорта Оксамытовый и каллусная линия сорта Гетьман. Для подтверждения стабильной интеграции гена hLF был проведен ПЦР-анализ листьев растений-регенерантов после их адаптации в грунте. В обеих линиях ячменя был амплифицирован фрагмент гена hLF размером 734 п.н. Метод біолістичної трансформації використовували для генетичного вдосконалення трьох комерційних сортів ячменю вітчизняної селекції (Оксамитовий, Водограй і Гетьман). Для трансформації використовували конструкцію pHLFTuBA, що містила ген інтересу, ген людського лактоферину (hLF) під контролем глютелінового В 1 (GluB 1) промотору рису. Як селективний маркерний ген використовували ген мутантного α-тубуліну, що забезпечував стійкість до трифлюраліну (гербіцид динітроанілінового ряду). Для встановлення селективної концентрації агенту було проведено скринінг різних концентрацій трифлюраліну в діапазоні від 0,1 до 30 мкМ. Після 2–3 місяців селекції на 10 мкМ трифлюраліну було отримано дві трансгенні лінії рослин ячменю сорту Оксамитовий та калусну лінію сорту Гетьман. Для підтвердження стабільної інтеграції гена hLF було проведено ПЦР аналіз листків рослин-регенерантів після їх адаптації в грунті. В обох лініях було ампліфіковано фрагмент гена розміром 734 п.н. Method of biolistic transformation was used for genetic improvement of commercial barley cultivars (Oksamitoviy, Vodogray and Getman). The plasmid pHLFTuBA was used for particle bombardment that consists of the hLF gene under the control of the barley glutelin B-1 promoter and a selectable marker gene, α-tubulin conferring resistance to trifluralin (dinitroanilinr herbicide). Preliminary screening of different trifluralin concentration range from 0,1 to 30 μM was tested for determination of effective selective agent concentration. Two transgenic barley line of genotype Oksamitiviy and transgenic callus line of cultivar Getman were obtained after selection on 10 μM of trifluralin. To confirm the transgenic nature of regenerated plants, the PCR analysis was carried out. The 734bp length fragment of hLF gene was amplified from both regenerated plants. ru Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Цитология и генетика Оригинальные работы Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена Отримання трансгенних ліній ячменю, що продукують лактоферрин людини, із використанням мутантного гена альфа тубуліну як селективного маркерного гена Production of transgenic barley lines producing human lactoferrin using mutant alfa-tubulin gene as selective marker gene Article published earlier |
| spellingShingle | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена Танасиенко, И.В. Емец, А.И. Пирко, Я.В. Корховой, В.И. Абумхади, Н. Блюм, Я.Б. Оригинальные работы |
| title | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена |
| title_alt | Отримання трансгенних ліній ячменю, що продукують лактоферрин людини, із використанням мутантного гена альфа тубуліну як селективного маркерного гена Production of transgenic barley lines producing human lactoferrin using mutant alfa-tubulin gene as selective marker gene |
| title_full | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена |
| title_fullStr | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена |
| title_full_unstemmed | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена |
| title_short | Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена |
| title_sort | получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена |
| topic | Оригинальные работы |
| topic_facet | Оригинальные работы |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66817 |
| work_keys_str_mv | AT tanasienkoiv polučenietransgennyhliniiâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena AT emecai polučenietransgennyhliniiâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena AT pirkoâv polučenietransgennyhliniiâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena AT korhovoivi polučenietransgennyhliniiâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena AT abumhadin polučenietransgennyhliniiâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena AT blûmâb polučenietransgennyhliniiâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena AT tanasienkoiv otrimannâtransgennihlíníiâčmenûŝoprodukuûtʹlaktoferrinlûdiniízvikoristannâmmutantnogogenaalʹfatubulínuâkselektivnogomarkernogogena AT emecai otrimannâtransgennihlíníiâčmenûŝoprodukuûtʹlaktoferrinlûdiniízvikoristannâmmutantnogogenaalʹfatubulínuâkselektivnogomarkernogogena AT pirkoâv otrimannâtransgennihlíníiâčmenûŝoprodukuûtʹlaktoferrinlûdiniízvikoristannâmmutantnogogenaalʹfatubulínuâkselektivnogomarkernogogena AT korhovoivi otrimannâtransgennihlíníiâčmenûŝoprodukuûtʹlaktoferrinlûdiniízvikoristannâmmutantnogogenaalʹfatubulínuâkselektivnogomarkernogogena AT abumhadin otrimannâtransgennihlíníiâčmenûŝoprodukuûtʹlaktoferrinlûdiniízvikoristannâmmutantnogogenaalʹfatubulínuâkselektivnogomarkernogogena AT blûmâb otrimannâtransgennihlíníiâčmenûŝoprodukuûtʹlaktoferrinlûdiniízvikoristannâmmutantnogogenaalʹfatubulínuâkselektivnogomarkernogogena AT tanasienkoiv productionoftransgenicbarleylinesproducinghumanlactoferrinusingmutantalfatubulingeneasselectivemarkergene AT emecai productionoftransgenicbarleylinesproducinghumanlactoferrinusingmutantalfatubulingeneasselectivemarkergene AT pirkoâv productionoftransgenicbarleylinesproducinghumanlactoferrinusingmutantalfatubulingeneasselectivemarkergene AT korhovoivi productionoftransgenicbarleylinesproducinghumanlactoferrinusingmutantalfatubulingeneasselectivemarkergene AT abumhadin productionoftransgenicbarleylinesproducinghumanlactoferrinusingmutantalfatubulingeneasselectivemarkergene AT blûmâb productionoftransgenicbarleylinesproducinghumanlactoferrinusingmutantalfatubulingeneasselectivemarkergene |