Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L.

Для определения критического уровня радиационного повреждения апикальной меристемы главного корня построены дозовые зависимости ростовых и цитогенетических параметров в диапазоне доз от 2 до 20 Гр и проанализированы причинные связи между частотой хромосомных аберраций и гибелью ткани, органа и орган...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :	Цитология и генетика
Дата:	2011
Автори:	Кравец, Е.А., Михеев, А.Н., Овсянникова, Л.Г., Гродзинский, Д.М.
Формат:	Стаття
Мова:	Російська
Опубліковано:	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2011
Теми:	Оригинальные работы
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66820
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L. / Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова, Д.М. Гродзинский // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 24-34. — Бібліогр.: 27 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1859630871251779584
author	Кравец, Е.А. Михеев, А.Н. Овсянникова, Л.Г. Гродзинский, Д.М.
author_facet	Кравец, Е.А. Михеев, А.Н. Овсянникова, Л.Г. Гродзинский, Д.М.
citation_txt	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L. / Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова, Д.М. Гродзинский // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 24-34. — Бібліогр.: 27 назв. — рос.
collection	DSpace DC
container_title	Цитология и генетика
description	Для определения критического уровня радиационного повреждения апикальной меристемы главного корня построены дозовые зависимости ростовых и цитогенетических параметров в диапазоне доз от 2 до 20 Гр и проанализированы причинные связи между частотой хромосомных аберраций и гибелью ткани, органа и организма. Сопоставление частот аберрантных анафаз и поклеточного распределения аберраций, с одной стороны, прироста массы проростков и выживаемости меристемы, с другой, позволило оценить 44–48%-ный уровень частоты аберрантных анафаз в корневой меристеме как критический. Превышение этого уровня приводит к запусканию в меристеме суицидной программы через индукцию мультиаберрантных повреждений и интерфазной гибели клеток. Предполагается, что в механизмах восстановления важную роль играет клеточная конкуренция между клонами нормальных, аберрантных с единичными перестройками и мультиаберрантными клетками. При превышении 50%-ного уровня возможно полное или частичное восстановление апикальной меристемы корня за счет регенерации. Критическим показателем повреждения апикальной меристемы корня, при котором еще возможна его регенерация, является около 70 % хромосомных аберраций. Однако этих локальных процессов регенерации недостаточно для восстановления морфогенеза и выживания проростков. Для визначення критичного рівня ушкодження апікальної меристеми кореня, індукованого гострим опроміненням в діапазоні доз від 2 до 20 Гр, побудовано різні дозові залежності ростових та цитогенетичних параметрів. Співставлення частоти аберантних анафаз і поклітинного розподілу аберацій, з одного боку, і приросту фітомаси, виживаності меристеми і регенерації кореня, з іншого, дозволило оцінити 44–48%-вий рівень частоти аберантних анафаз як критичний. Перевищення цього рівня пошкодження призводить до запускання в меристемі суїцидної програми через індукцію мультиаберантних пошкоджень та інтерфазної загибелі клітин. Припускається, що в механізмах відновлення при допороговому рівні пошкодження головну роль виконує клітинна конкуренція між клонами нормальних клітин, аберантних клітин, які мають 1 або 2 ушкодження, і мультиаберантними клітинами. Регенерація забезпечує повне або часткове відновлення апікальної меристеми головного кореня, однак цих локальних процесів недостатньо для відновлення морфогенезу і виживання проростків при значному перевищенні порога пошкодження. The dose dependencies of growth and cytogenetical values have been built to determine the critical level of root apical meristem damage induced by cute irradiation in the range from 2 to 20 Gr. We have analyzed the frequencies of aberrant anaphases and the aberration distribution per cell, on the one hand, and the growth of biomass, the survival and regeneration of the root meristem, on the other hand. The critical level of damage to the stem apical meristem and root of seedlings was defined as 44–48 % of aberrant anaphase. Exceeding of this level leads to the launch of suicidal program through induction of multiaberrant damages and interphase cell death. It appears that competition of clones of non-aberrant cells, the cells bearing 1 and 2 damages and multiaberrant cells plays the primary role in the mechanisms of recovery. The regeneration provides full or partial restoration of the main root apical meristem. However these local processes are insufficient to restore morphogenesis and survival of seedlings in excess of the critical level damage.
first_indexed	2025-12-07T13:10:44Z
format	Article
fulltext	УДК 57.17.3 Е.А. КРАВЕЦ, А.Н. МИХЕЕВ, Л.Г. ОВСЯННИКОВА, Д.М. ГРОДЗИНСКИЙ Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины, Киев E(mail: elkrav@online.ua КРИТИЧЕСКИЙ УРОВЕНЬ РАДИАЦИОННОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ АПИКАЛЬНОЙ МЕРИСТЕМЫ КОРНЯ И МЕХАНИЗМЫ ЕЕ ВОССТАНОВЛЕНИЯ У PISUM SATIVUM L. Для определения критического уровня радиационного повреждения апикальной меристемы главного корня по� строены дозовые зависимости ростовых и цитогенети� ческих параметров в диапазоне доз от 2 до 20 Гр и про� аназированы причинные связи между частотой хромо� сомных аберраций и гибелью ткани, органа и организма. Сопоставление частот аберрантных анафаз и поклеточ� ного распределения аберраций, с одной стороны, прироста массы проростков и выживаемости меристемы, с другой, позволило оценить 44–48%�ный уровень частоты абер� рантных анафаз в корневой меристеме как критический. Превышение этого уровня приводит к запусканию в ме� ристеме суицидной программы через индукцию мульти� аберрантных повреждений и интерфазной гибели клеток. Предполагается, что в механизмах восстановления важ� ную роль играет клеточная конкуренция между клонами нормальных, аберрантных с единичными перестройками и мультиаберрантными клетками. При превышении 50%�ного уровня возможно полное или частичное восста� новление апикальной меристемы корня за счет регенера� ции. Критическим показателем повреждения апикальной меристемы корня, при котором еще возможна его регене� рация, является около 70 % хромосомных аберраций. Однако этих локальных процессов регенерации недоста� точно для восстановления морфогенеза и выживания про� ростков. Введение. Радиационное повреждение апи� кальных меристем растения может иметь ши� рокий диапазон последствий – от эффектов стимуляции до ингибирования и полной ги� бели меристемы. Пролиферативная (репро� дуктивная) гибель меристематических клеток как одна из составляющих этих процессов в значительной степени определяется повреж� дением их хромосомного аппарата, что обус� ловливает адекватность использования цито� генетических критериев для характеристики воздействия ионизирующей радиации на клет� ку [2, 3]. В основе гибели клеток обычно лежат несбалансированные перестройки – асиммет� ричные обмены и ацентрические фрагменты [1–5]. Показано, что репродуктивная гибель аберрантных клеток происходит в течение не� скольких (обычно 3–5) клеточных поколений после облучения [2, 3]. Молекулярные меха� низмы повреждения ДНК и хромосом доста� точно полно исследованы [2, 6–8], однако не� много известно о реализации первичных пов� реждений ДНК в хромосомные аберрации [6, 9, 10] и о механизмах восстановления на кле� точном и тканевом уровнях. Для количественной характеристики радио� биологического эффекта часто используется такой интегральный показатель, как выживае� мость. Вместе с тем данные по сопоставлению результатов цитогенетического анализа и вы� живаемости целого организма или органа от� сутствуют. Полагают, что при оценке причин� ной связи между частотой хромосомных абер� раций и гибелью организма возникает много дополнительных обстоятельств, усложняю� щих результаты такого сопоставления. В част� ности, это гетерогенность радиочувствитель� ности тканей и клеток, которая обусловлена асинхронностью клеточных популяций и чис� лом клеток, находящихся в G1 и G0, выжива� ние гамма�проростков, в основе которого лежит высокая радиоустойчивость регулятор� ных систем, ответственных за гомеостаз мета� болизма, а также регенерационные процессы, основанные на активации центра покоя и др. [9, 10]. По этой же причине практически от� сутствуют данные о пороговых значениях ци� тогенетического повреждения меристемы, ко� ррелирующих с ее выживанием или гибелью, и выживанием или гибелью структур более высокого уровня организации (орган, организ� м). По данным Гудкова [10], критический ре� ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 124 © Е.А. КРАВЕЦ, А.Н. МИХЕЕВ, Л.Г. ОВСЯННИКОВА, Д.М. ГРОДЗИНСКИЙ, 2011 зерв клеток апикальной меристемы корня го� роха при радиационном повреждении состав� ляет около 30 % общего числа клеток в норме, из которых около 45 % (т.е. 13 %) сохраняют способность к пролиферации. Пролифератив� ная активность покоящегося центра, по мне� нию автора, запускается при дозах от 8 Гр и выше, однако контроль уровня цито� генетического повреждения меристемы в этой работе не приводится. Целью настоящего исследования была оценка порогового уровня радиационного повреждения апикальной меристемы, совмес� тимого с ее выживанием и восстановительны� ми процессами. Задачи работы состояли в ана� лизе и сопоставлении следующих дозовых за� висимостей: прирост массы проростков (вес сухой фитомассы), частота аберрантных и не� аберрантных (нормальных) анафаз, поклеточ� ное распределение аберраций, средняя нагру� женность меристематической клетки аберра� циями, выживаемость меристемы и корня, а также регенерационные процессы. Предпола� галось, что сопоставление указанных дозовых зависимостей позволит выявить связь в про� явлении разных радиобиологических реакций и определить пороговые значения повреждения меристемы, превышение которых приводит к гибели ткани, органа или всего организма. Материал и методы. В качестве объекта ис� следования использовали проростки гороха (Pisum sativum L., сорт Комет) в двух сериях эк� спериментов. Полагают, что наибольшей радио� чувствительностью характеризуются двухдневные проростки гороха, ЛД50 для которых составляет около 8,2 Гр [6]. В наших экспериментах трех� суточные проростки облучались в первой се� рии опытов на гамма�установке РОКУС при мощности облучения 1,42 сГр/с в дозах 8, 10, 13, 16 и 20 Гр, а во второй серии опытов – на рентгеновской установке РУМ�17 (I = 10 A; U = 200 кэВ) в дозах 2, 4, 6 и 8 Гр. Во избежа� ние возможного цитостатического эффекта об� лучения анализ меристемы осуществляли через 48 ч после облучения. Оценивали следующие цитогенетические параметры: ЧАА (частота аберрантных ана�телофаз в процентах от 100 проанализированных), ЧНА (частота нор� мальных ана�телофаз), поклеточное распреде� ление аберраций (соотношения числа клеток с 1, 2, 3 и множественными аберрациями в процентах к общему числу аномальных ана� фаз), нагруженность аберрациями аберрант� ной клетки (отношение суммы всех аберраций в аберрантных клетках к числу аберрантных анафаз, Аб/АК), а также нагруженность абер� рациями меристемы (отношение суммы всех аберраций к общему числу анафаз, Аб/К). Классификацию аберраций в анафазе прово� дили по следующим видам: фрагменты оди� нарные и парные, мосты одинарные (хрома� тидные) и парные (хромосомные), мосты с одинарными и парными фрагментами [2, 4]. Мультиаберрантные перестройки идентифи� цировались при учете более трех аберраций на анафазу. При наличии микроядра в ана� телофазе его учитывали за одно нарушение. Указанные критерии характеризуют разные стороны и степень повреждения меристемы [11]. Объем выборки составлял 9–11 корней. На 8�е сутки определяли выживаемость ме� ристемы (визуально по отрастанию побурев� ших апексов и на основании их гистологичес� кого анализа), фиксировали апексы корней и изготовляли постоянные цитологические препараты для анализа регенерационных про� цессов. На 8�е и 14�е сутки определяли сте� пень развития боковых корней (число и длину) и корреляцию между развитием стебля и кор� ня (соотношение длины стебель/корень). Дав� леные препараты окрашивали ацетоорсеином, постоянные – по Фельгену согласно общепри� нятой цитологической методике [12]. В тече� ние двух недель культивирования определяли динамику прироста массы надземной и под� земной частей проростков (сухая фитомасса). Материал статистически обработан по реко� мендациям Лакина [13], а также с использо� ванием функций программы Microsoft Excel. Результаты исследования и их обсуждение. Дозовые зависимости по приросту фитомассы. В диапазоне использованных доз развитие стебля ингибировалось сильнее, чем корня (рис. 1, а–в и 2, а). При дозах свыше 6 Гр фор� мирование стебля резко угнеталось, тормози� лась прежде всего экспоненциальная фаза прироста фитомассы (рис. 1, г), основу кото� рой у контрольных растений составляет рас� тяжение первого междоузлия побега и заклад� ка следующих узлов. При дозах от 8 Гр и выше ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 1 25 Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы формирование стебля практически полностью блокировалось (рис. 1, а–г и 2, а). Развитие корневой системы также тормозилось при всех использованных дозах, а от 13 Гр прирост кор� ня останавливался (рис. 1, а–в, д и 2, б). Угне� тение развития корневой системы до 8–10 Гр проявлялось в торможении, а также блокиро� вании образования и роста боковых корней, от 10 Гр и выше – замедлении и остановке роста главного корня. Дозовые зависимости по ЧАА и поклеточно� му распределению аберраций. С помощью цито� генетического анализа корневой меристемы выявлена возрастающая частота хромосомных аберраций от 27 % (при 2 Гр) до 80–94 % при 20 Гр (рис. 3, а). Дозовая кривая слагалась из нескольких участков, дважды формируя экс� поненту в области до 4 Гр и после 8 Гр. В диа� пазоне доз от 4 до 8 Гр выделялся особый учас� ток стабилизации повреждения меристемы на уровне 44–48 %, в котором линейный харак� тер дозовой зависимости резко изменялся (рис. 3, а). При дозах свыше 8 Гр ЧАА вновь линейно возрастала, перегружая меристему на� рушениями. Кривые поклеточного распределения абер� раций носили волнообразный, нелинейный характер с тенденцией после 8 Гр к повыше� нию числа мультиаберрантных повреждений и снижению частоты анафаз с единичными перестройками. В диапазоне доз от 4 до 8 Гр характер поклеточного распределения аберра� ций обнаруживал обратную тенденцию – сни� жение частоты мультиаберрантных поврежде� ний и повышение частоты анафаз с единичны� ми перестройками (рис. 3, б). Это дает основа� ние полагать, что в основе снижения числа аберраций при повышении дозы облучения лежат механизмы клеточной конкуренции между клонами нормальных и аберрантных клеток, которая, очевидно, поддерживается репопуляцией за счет клеток, находящихся в момент облучения в G1 и G0. По�видимому, в клеточной конкуренции важна роль не только клонов неаберрантных клеток. Клетки, несу� щие единичные или даже двойные перестройки, также могут сохраняться в клеточных потоках, выигрывая конкуренцию с клетками, более на� груженными перестройками. Известно, что одна или две перестройки на клетку не всегда при� ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 126 Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова и др. Рис. 1. Влияние разных доз острого облучения на разви� тие проростков: а – в диапазоне доз от 2 до 8 Гр 8�суточ� ные проростки, б – в том же диапазоне доз 2�недельные проростки, в – в диапазоне от 8 до 20 Гр 2�недельные проростки, г – графические кривые прироста массы стеб� ля в течение двух недель в диапазоне доз от 8 до 20 Гр, д – кривые прироста массы корня при тех же условиях. По вертикали – сухая масса стебля (г) и корня (д), г; по горизонтали – время выращивания в условных точках: 1 – 14.02.09; 2 – 16.02.09; 3 – 20.02.09; 4 –23.02.09 водят к ее гибели, поскольку аберрантные хро� матиды могут равномерно распределяться между анафазными наборами [2, 3]. Высокий процент клеток, содержащих микроядра во втором после облучения митозе, также ука� зывает на вероятностное выживание клеток с аберрациями. Индукция же мультиаберран� тных повреждений, как правило, сопровожда� ется исключением таких клеток из клеточных потоков и пролиферативной гибелью клетки. Соотношение между этими клонами клеток изменяется с увеличением дозы облучения: частота анафаз с единичными, затем и двой� ными нарушениями линейно снижается, а частота мультиаберрантных анафаз возрастает (рис. 3, б). При превышении 50%�ного уровня аберраций основной вклад в формирование повреждения меристемы вносят мультиабер� рантные и трехчленные хромосомные пере� стройки. Можно предполагать, что индукция мультиаберрантных повреждений в диапазоне высоких доз затрагивает прежде всего клетки, которые уже несут генетический груз [14], о чем свидетельствует наличие микроядер в мультиаберрантных митотических фигурах. Нагруженность перестройками аберран� тной клетки быстро растет с дозой, достигая 2,2 при 4 Гр, затем снижается до 1,9 при 8 Гр, после чего вновь линейно и необратимо воз� растает (рис. 3, в). Критический уровень на� груженности меристематической клетки абер� рациями (в пересчете на все анафазы) со� ставляет 0,7–0,8 на анафазу (рис. 3, в). Таким образом, критический уровень нагружен�ности меристемы лежит за пределами двух абер� раций на аберрантную клетку и до одной абер� рации в среднем на клетку. Цитостатический эффект высоких доз об� лучения был менее значительным, чем ожи� далось. В спектре хромосомных аберраций в интервале доз до 8 Гр преобладают двойные мосты и двойные фрагменты (рис. 4 а, б). С увеличением дозы облучения возрастает чис� ло мультиаберрантных перестроек, поврежде� ний митотического аппарата с разбросом хро� мосом (рис. 4, г, ж), а также клеток с микро� ядрами и перетяжками между ядрами (рис. 4, в, е, ж, з). Одновременно возрастает число интерфазных клеток с аномальной структурой ядра (рис. 4, г–з). При дозах от 13 Гр меристе� ма практически не содержит интерфазных клеток нормального строения, что, вероятно, свидетельствует о добавлении второй после индукции мультиаберрантных перестроек сос� тавляющей суицидной программы – интер� фазной гибели клеток. Таким образом, крити� ческим значением повреждения корневой ме� ристемы проростков гороха при учете частоты ана�телофаз митоза является 44–48 % абер� рантных клеток со средним показателем на� груженности 2 перестройки на аберрантную анафазу и 0,8 – в среднем на клетку. Превы� шение этого порога приводит к запуску про� граммы самоуничтожения меристемы путем индукции мультиаберрантных повреждений и интерфазной гибели клеток. Сопоставление ЧНК и прироста фитомассы проростков. При сопоставлении ЧНК и при� роста массы проростков обнаружилось, что стабилизация частоты аберраций не оказывала ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 1 27 Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы Рис. 2. Диаграммы прироста массы стебля (а) и кор� ня (б) (данные по двум экспериментам; по горизонта� ли – доза гамма�облучения, Гр; по вертикали – вес, % к контролю; 1–5 – возраст проростков в условных точках видимого эффекта на прирост корня и стебля (рис. 5, а, б). При одинаковой ЧНА формиро� вание корня и побега испытывали разную сте� пень депрессии. Превышение 50%�ного по� рога повреждения меристемы имело летальные последствия для развития побега. Отдельные случаи сохранения способности к морфогене� зу сопровождались нарушением позиционной ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 128 Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова и др. Рис. 3. Графическое изображение дозовых зависимос� тей по частоте аберрантных анафаз (а), по клеточному распределению аберраций (б) и абсолютной нагружен� ности клеток аберрациями (в): а – по горизонтали – до� за облучения, Гр; по вертикали – а – ЧАА и ЧНА, %; б – анафазы с 1, 2, 3 и множественными перестройками, % к общему числу аберрантных анафаз; в – слева – число аберраций на аберрантную клетку, Аб/АК и число аберра� ций к общему числу анафаз, Аб/К; справа – ЧАА, % Рис. 4. Спектр хромосомных аберраций: а, б – хромосомные мосты и двойные фрагменты в мета� и телофазе, свидетельствующие об асимметричных обменах; в – телофаза, дицентрический и двойной фрагмент, два микро� ядра свидетельствуют о делении аберрантной клетки (13 Гр); г – мультиаберрантная анафаза, нарушение форми� рования веретена деления (16 Гр); д – телофаза, два моста и фрагменты (13 Гр); е – телофаза, хромосомный мост и фрагменты (20 Гр); ж – К�митоз (справа), телофаза с перетяжкой (13 Гр); з – телофаза с перетяжкой (16 Гр); стрел� ками указаны интерфазные ядра с аномальной структурой (г, е, з) информации – отсутствием корреляции между развитием стебля и корня. Однако пересечение 50%�ного порога повреждения не останавли� вает прироста корня. Блокирование прироста корня осуществляется при 70%�ном уровне повреждения в точке пересечения с кривой выживаемости (рис. 5, а). По�видимому, при� рост массы корня за пределами 50%�ного по� рога повреждения осуществляется за счет реге� нерации. При превышении 70%�ного уровня повреждения регенерация уже не обеспечива� ет фиксированного прироста массы корня. Регенерация главного корня. Регенерация корня, по нашим наблюдениям, осуществля� лась в диапазоне повреждающих доз от 4–6 Гр и выше, до 20 Гр. Основу регенерации составляет механизм репопуляции (за счет пролиферации клеток центра покоя), позволяющий клеточной популяции восстанавливать не только числен� ность, но и структуру органа. Как отмечает Гудков [10], при радиационном повреждении меристемы на характер дозовых кривых кине� тики ее ростовых процессов (продолжитель� ности фаз клеточного цикла и пролифератив� ной активности) накладываются два процесса противоположной направленности: с одной стороны это подавление ростовой активности, с другой – начало и степень процессов вос� становления. При дозах в 4 и 6 Гр репопуля� ционный механизм обеспечивает быстрое вос� становление апекса, при 8 Гр прирост главного корня незначительно замедляется (рис. 6, а, б). В зависимости от степени повреждения апикальной меристемы регенерация приводит к частичной или полной ее замене. Однако этих локальных процессов недостаточно для восстановления морфогенеза и выживания проростков при значительном превышении порога повреждаемости. Чем выше доза облу� чения, тем сложнее и медленнее происходит восстановление. При дозах 10 и 13 Гр процесс замещения сопровождается торможением и остановкой роста, при 16 и 20 Гр – полным блокированием роста. Регенерация в боль� шинстве случаев осуществляется прямым пу� тем через репопуляционный механизм (рис. 6, в), реже – к репопуляционному механизму добавляется активация пролиферации в пере� ходной к растяжению зоне апекса. В редких случаях регенерация происходит непрямым путем – через дедифференциацию и каллусо� генез (рис. 6, г). При максимальных дозах ре� генерация может наблюдаться в 26–40 % слу� чаях (рис. 7). Частота неаберрантных клеток коррелирует с частотой регенерации, что обусловливает восстановительные процессы в меристеме даже при максимальных дозах об� лучения (рис. 7). Пересечение кривых по ЧНА и выживаемости меристемы указывает сущес� твование 70%�ного порога повреждения кор� невой меристемы, превышение которого не совместимо с выживанием корня. ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 1 29 Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы Рис. 5. Сопоставление дозовых зависимостей по при� росту массы корня, ЧНА и выживаемости меристемы (а), приросту массы стебля и ЧНА (б): а – по гори� зонтали – доза гамма�облучения, Гр; по вертикали сле� ва – вес, мг, справа – выживаемость, % и ЧНА, %, стрелкой указана точка пересечения кривых; б – по горизонтали – доза облучения, Гр; по вертикали слева – % к контролю, справа – ЧНА, %; стрелкой указана точ� ка блокирования прироста фитомассы В апексах проростков, облученных дозами 16 и 20 Гр, наблюдалась дегенерация и дефор� мация тканей эпидермиса, коры, чехлика и меристемы, фрагментация элементов проводя� щей системы (рис. 8). Тем не менее в побурев� ших апексах (признак отмирания поверхност� ных тканей корня) осуществлялись восстано� вительные процессы. В 26–40 % случаев про� исходило репопуляционное восстановление проксимальной меристемы, формирующей но� вый апекс (рис. 8, а, б, г). Число аберраций в воссозданном апексе резко снижалось, но не достигало контрольного уровня (рис. 8, б, в); часть вновь образованных клеток подверга� лась апоптозу. С наибольшей частотой встре� чалась пролиферация клеток перицикла, кото� рые путем периклинальных делений, по�види� мому, частично восстанавливали структуру корня в зоне дифференциации (рис. 8, д, е). Пролиферативная активность клеток зоны пе� рицикла приводила к заложению инициалей боковых корней (рис. 8, ж), что свидетельст� вовало о частичном восстановлении позици� онной информации в поврежденных тканях, в частности, компетенции клеток перицикла к ИУК [14]. Однако дальнейшее развитие боко� вых корней было возможно лишь после вос� становления структуры и дифференцировки тканей корня, которые обеспечивают передачу сигналов и работу соответствующих сигналь� ных систем. Итак, полученные результаты дают осно� вание полагать, что критическим уровнем ра� диационного повреждения апикальной мери� стемы корня проростков гороха является 44– 48 % аберрантных анафаз, учитывая, что при этом уровне аберраций в меристеме корня еще может выживать апикальная меристема стеб� ля. С превышением 50%�ного уровня пов� реждения запускаются механизмы самоунич� тожения меристемы путем индукции мульти� аберрантных повреждений и интерфазной гибели клеток. Вместе с тем, благодаря репопуляционному и регенерационному восстановлению, критичес� ким показателем повреждения апикальной ме� ристемы корня, при котором еще возможно вы� живание корня, можно считать 70 % аберраций, ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 130 Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова и др. Рис. 6. Восстанавление тка� ней и ростовой активности апекса корня при дозе 8 Гр, стрелками указаны зона по� бурения (а) и утолщения (б); в – прямой способ ре� генерации через репопуля� ционный механизм, 20 Гр; г – непрямой способ реге� нерации через каллусоге� нез,13 Гр Рис. 7. Сопоставление дозовых зависимостей ЧНА, выживаемости главного корня и регенерации апикаль� ной меристемы: по горизонтали – доза облучения, Гр; по вертикали – ЧНА, %, выживание меристемы, %, регенерация, %; стрелкой указан 70%�ный порог пов� реждения хотя этих локальных процессов как правило недостаточно для восстановления морфогенеза и выживания проростков. Показатель крити� ческого уровня повреждения меристемы, оче� видно, зависит от генотипа, стадии онтогене� за, природы стрессового фактора и, вероятно, других причин. Так, у лука батуна (Allium fistu� losum L.) частота аберрантных клеток, сопря� женная с прорастанием стареющих семян, была в три�шесть раз выше, чем аналогичный показатель у A. cepa L., и доходила до 70 % у семян, еще не утративших всхожесть [11, 15]. Согласно трактовке результатов Grant et al. [16] по Pisum sativum L. уже 7 % аберраций ска� зываются на способности семян к прорастанию. В то же время облучение сухих семян гороха в высоких дозах слабо влияет на прорастание. По данным Царапкина [17], облучение в дозе 15 крад индуцирует 42%�ную частоту аберраций в корневой меристеме проростков, но незна� чительно сказывается на прорастании семян. В механизмах радиоустойчивости пророст� ков гороха в интервале доз, близких к ЛД50, важную роль играет клеточная конкуренция, которая согласно новейшим представлениям является одним из важнейших механизмов го� меостаза в организме животных. Благодаря клеточной конкуренции определяются разме� ры ткани, в том числе и при регенерации, ста� билизируется дифференциация/дедифферен� циация клеток, элиминируются мутации [18– 21]. Показано, что клеточная конкуренция внутри многоклеточного организма между клеточными популяциями, которые различа� ются по скорости роста, приводит к элимина� ции медленно пролиферирующих клеток [18, 20]. Клеточную конкуренцию у растений можно толковать более широко, например как фактор, который обеспечивает наследование измене� ний, приобретенных организмом в онтогенезе [22]. Действительно, клеточная конкуренция в гетерогенной популяции меристематичес� ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 1 31 Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы Рис. 8. Восстановительные процессы в корне при облучении 20 Гр: а – г – репопуляционное восстановление апикальной меристемы корня; в – абер� рантная телофаза в восстановленной меристеме; д, е – пролиферация кле� ток перицикла; ж – закладка инициали бокового корня (стрелкой указана инициаль) ких клеток может приводить к отбору клеточ� ных клонов, наиболее адаптированных к усло� виям существования организма [23]. В услови� ях давления стрессового фактора клеточная конкуренция интенсифицируется. Получены данные о положительной роли клеточной конкуренции при радиационном поврежде� нии вегетативных и генеративных меристем [24–27]. Показано, что в определенном дозо� вом диапазоне динамика формирования хро� мосомных аберраций в корневой меристеме и спорогенном комплексе растений следует обратной зависимости от дозы облучения. Клеточную конкуренцию в раннем онтогенезе растений можно рассматривать как механизм, с помощью которого ограничивается мутагенез, регулируется состояние и численность клеточ� ных субпопуляций апикальной меристемы, восстанавливается структура поврежденных тканей и морфогенез облученных проростков. Полученные результаты дают основание полагать, что критическим уровнем поврежде� ния апикальной меристемы корня у пророст� ков гороха, совместимым с их выживанием, является примерно 44–48 % аберрантных ана� фаз. При этом же уровне аберраций меристе� матических клеток корня еще может выживать апикальная меристема стебля. Превышение порогового уровня несовместимо с выживани� ем как стеблевой, так и корневой меристемы. Сохранение ростовой активности за пределами пороговой дозы, как правило, сопровождается нарушением морфогенеза. В механизмах вос� становления меристемы решающую роль, по� видимому, играет клеточная конкуренция между клонами нормальных, аберрантных с единичными перестройками и мультиаберран� тными клетками, а также репопуляция, попол� няющая число преимущественно неаберрант� ных клеток. С превышением 50%�ного уровня повреждения запускаются механизмы само� уничтожения меристемы путем индукции мультиаберрантных повреждений и интерфаз� ной гибели клеток. Феноменологически пре� вышение порогового уровня радиационного повреждения проявляется в нарастании нару� шений морфогенеза и остановке роста. Интер� претация результатов, как и ожидалось, услож� нялась накладывающейся на эти процессы ре� генерацией. Процессы регенерации сопро� вождают восстановление во всем диапазоне повреждающих доз, причем, чем выше доза облучения, тем сложнее и медленнее происхо� дит восстановление. Клеточную основу регенерации составляет пролиферативная активность клеток центра по� коя и перицикла, находящихся в момент об� лучения в G0. При гибели апикальной мерис� темы регенерация может приводить к полному замещению некротической ткани на новую, восстанавливая не только численность, но и структуру корневого апекса. Реже наблюдается непрямая регенерация через дедифференциа� цию и каллусогенез. Критическим показателем повреждения апикальной меристемы корня, при котором еще возможно его восстановление, можно считать 70 % хромосомных аберраций. Однако локальных процессов регенерации не� достаточно для восстановления морфогенеза и выживания проростков, по крайней мере, в наблюдаемый период времени (в течение трех недель). Выводы. Критическим, или пороговым, уровнем повреждения апикальной меристемы корня проростков гороха, совместимым с их выживанием, является 44–48 % аберрантных анафаз с учетом того, что при этом уровне аберраций в меристеме корня еще может вы� живать апикальная меристема стебля. Превы� шение 50%�ного уровня повреждения приво� дит к запусканию суицидной программы в меристеме через индукцию мультиаберрант� ных повреждений и интерфазной гибели кле� ток. В механизмах восстановления апикаль� ной меристемы корня важную роль играет клеточная конкуренция между клонами нор� мальных клеток, аберрантных с одной или двумя перестройками и мультиаберрантными клетками, а также репопуляция. Сдвиг соот� ношения в сторону увеличения числа нормаль� ных и аберрантных с 1–2 перестройками ана� фаз свидетельствует о восстановительных про� цессах, преобладание мультиаберрантных ана� фаз указывает на необратимость радиацион� ного повреждения. Регенерация главного корня осуществляется в диапазоне поврежда� ющих доз, обеспечивая полное или частичное восстановление корневого апекса. Критичес� ким показателем повреждения апикальной ме� ристемы корня, еще совместимым с ее регене� ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 132 Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова и др. рацией, является примерно 70 % аберраций. Однако этих локальных процессов регенера� ции недостаточно для восстановления морфо� генеза и выживания проростков. Клеточную конкуренцию в раннем онтогенезе облученных растений можно рассматривать как механизм, с помощью которого ограничивается мутаге� нез, регулируется состояние и численность клеточных субпопуляций апикальной мерис� темы, восстанавливается структура повреж� денных тканей. E.А. Kravets, А.N. Mykheyev, L.G. Ovsyannikova, D.М. Grodzynsky CRITICAL LEVEL OF RADIATION DAMAGE OF ROOT APICAL MERISTEM AND MECHANISMS FOR ITS RECOVERY IN PISUM SATIVUM L. The dose dependencies of growth and cytogenetical values have been built to determine the critical level of root apical meristem damage induced by cute irradiation in the range from 2 to 20 Gr. We have analyzed the frequencies of aberrant anaphases and the aberration distribution per cell, on the one hand, and the growth of biomass, the survival and regeneration of the root meristem, on the other hand. The critical level of damage to the stem apical meristem and root of seedlings was defined as 44–48 % of aberrant anaphase. Exceeding of this level leads to the launch of sui� cidal program through induction of multiaberrant damages and interphase cell death. It appears that competition of clones of non�aberrant cells, the cells bearing 1 and 2 dam� ages and multiaberrant cells plays the primary role in the mechanisms of recovery. The regeneration provides full or partial restoration of the main root apical meristem. However these local processes are insufficient to restore morphogenesis and survival of seedlings in excess of the critical level damage. О.А. Кравець, А.Н. Міхеєв, Л.Г. Овсянникова, Д.М. Гродзинський КРИТИЧНИЙ РІВЕНЬ РАДІАЦІЙНОГО ПОШКОДЖЕННЯ АПІКАЛЬНОЇ МЕРИСТЕМИ КОРЕНЯ ТА МЕХАНІЗМИ ЇЇ ВІДНОВЛЕННЯ У PISUM SATIVUM L. Для визначення критичного рівня ушкодження апі� кальної меристеми кореня, індукованого гострим опро� міненням в діапазоні доз від 2 до 20 Гр, побудовано різні дозові залежності ростових та цитогенетичних парамет� рів. Співставлення частоти аберантних анафаз і поклі� тинного розподілу аберацій, з одного боку, і приросту фітомаси, виживаності меристеми і регенерації кореня, з іншого, дозволило оцінити 44–48%�вий рівень частоти аберантних анафаз як критичний. Перевищення цього рівня пошкодження призводить до запускання в меристемі суїцидної програми через індукцію мульти� аберантних пошкоджень та інтерфазної загибелі клітин. Припускається, що в механізмах відновлення при допо� роговому рівні пошкодження головну роль виконує клі� тинна конкуренція між клонами нормальних клітин, аберантних клітин, які мають 1 або 2 ушкодження, і мультиаберантними клітинами. Регенерація забезпечує повне або часткове відновлення апікальної меристеми головного кореня, однак цих локальних процесів недо� статньо для відновлення морфогенезу і виживання про� ростків при значному перевищенні порога пошкодження. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Ганасси Е.Э. Радиационное повреждение и репа� рация хромосом. – М.: Наука, 1976. – 103 с. 2. Ганасси Е.Э., Заичкина С.И., Розанова О.М. Роль различных повреждений ДНК в формировании радиационного повреждения хромосом // Радио� биология. – 1984. – 4, № 5. – С. 616–625. 3. Барсуков В.С., Малиновский О.В. Количественное описание процесса радиационной инактивации кле� ток. Основные посылки. Образование летальных по � вреждений // Цитология. – 1973. – 15, № 9. – С. 1152. 4. Гостимский С.А., Дьякова М.И., Ивановская Е.В., Монахова М.А. Практикум по цитогенетике : Ме� тод. пособие. – М.: Изд�во МГУ, 1974. – 150 с. 5. Carano A.V. Transmission probabilities of X�ray induced chromosome aberrations and their relation to colony survival in Chinese hamster cells // Radiat. Res. – 1972. – 51, № 2. – P. 512–520. 6. Инге�Вечмотов С.Г. Генетика с основами селек� ции. – М.: Высш. шк., 1989. – 591 с. 7. Митрофанов Ю.А. Индуцированная изменчивость хромосом эукариот. – М.: Наука, 1994. – 140 с. 8. Оbe G., Pfeiffer P., Savage J.R.K. et al. Cromosomal aberrations: formation, identification, and distribution // Mutat. Res. – 2002. – 504. – P. 17–36. 9. Гродзинский Д.М. Радиобиология растений. – Ки� ев : Наук. думка, 1986. – 380 с. 10. Гудков И.Н. Клеточные механизмы пострадиаци� онного восстановления растений. – Киев : Наук. думка, 1986. – 222 с. 11. Куцоконь Н.К., Лазаренко Л.М., Безруков В.Ф. та ін. Кількість аберацій на клітину як параметр хро� мосомної нестабільності. 2. Порівняльний аналіз впливу факторів різної природи // Цитология и ге� нетика. – 2004. – 38, № 1. – С. 55–62. 12. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений. – М.: Агропромиздат, 1988. – 271 с. 13. Лакин Г.Ф. Биометрия. – М.: Высш. шк., 1980. – 293 с. 14. Кравец Е.А., Михеев А.Н., Овсянникова Л.Г., Грод� зинский Д.М. Воздействие острого облучения на интерпретацию позиционной информации клетка� ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 1 33 Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы ми апикальной и латеральной меристемы гороха // Физиология и биохимия культур. растений. – 2010. – 42, № 4. – С. 288–297. 15. Куцоконь Н.К. Радіаційна індукція множинних по� шкоджень у рослин : Автореф. дис.... канд. біол. наук. – Київ, 2004. – 24 с. 16. Grant W.F., Owens E.T. Chromosome aberration assays in Pisum for the study of invironmental mutagens // Mutat. Res. – 2001. – 488. – P. 93–118. 17. Царапкин Л.С. Количественные закономерности действия радиации на хромосомы в покоящихся семенах гороха : Автореф. дис.... д�ра биол. наук. – Киев, 1974. – 42 с. 18. Díaz B., Moreno E. The competitive nature of cells // Exp. Cell Res. – 2005. – 306. – P. 317–322. 19. Gallant P. Myc, cell competition and compensatory proliferation // Cancer Res. – 2005. – 65. – P. 6485– 6487. 20. Moreno E., Basler K. dMyc transforms cells into super� competitors // Cell. – 2004. – 117. – P. 117–129. 21. Tyler D.M., Li Wei, Zhuo Ning, Pellock B., Baker N.E. Genes affecting cell competition in Drosophila // Genetics. – 2007. – 175. – P. 643–657. 22. Лекявичюс Э. Элементы общей теории адаптации. – Вильнюс : Мокслас, 1986. – 273 с. 23. Кунах В.А. Біотехнологія лікарських рослин. Гене� тичні та фізіолого�біохімічні основи. – Київ : Ло� гос, 2005. – 723 с. 24. Gaul H. Uber die Chmarenbildung in Gerstenpflanzen nach Rongenbestrahjung von Samen // Flora. – 1959. – 147, № 2. – P. 207–241. 25. Кравец Е.А., Гродзинский Д.М. Роль клеточной кон� куренции в механизмах восстановления при воз� действии ионизирующего и УФ�Б излучения (на примере Hordeum vulgare L.) // Тр. Тимиряз. акаде� мии. – 2008. – № 2. – С. 30–35. 26. Кравец Е.А. Клеточные и тканевые механизмы вос� становительных процессов в вегетативных и генера� тивных меристемах при воздействии облучения // Цитология и генетика. – 2009. – 43, № 1. – C. 11– 22. 27. Кравец Е.А. Клеточный отбор в онтогенезе расте� ний и его значение для формирования адаптации к облучению // Наук. пр. Миколаїв. ун�ту. – 2008. – Вип. 89, № 102. – С. 98–104. Поступила 24.10.09 ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2011. № 134 Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова и др.
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-66820
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn	0564-3783
language	Russian
last_indexed	2025-12-07T13:10:44Z
publishDate	2011
publisher	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
record_format	dspace
spelling	Кравец, Е.А. Михеев, А.Н. Овсянникова, Л.Г. Гродзинский, Д.М. 2014-07-22T18:30:59Z 2014-07-22T18:30:59Z 2011 Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L. / Е.А. Кравец, А.Н. Михеев, Л.Г. Овсянникова, Д.М. Гродзинский // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 24-34. — Бібліогр.: 27 назв. — рос. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66820 57.17.3 Для определения критического уровня радиационного повреждения апикальной меристемы главного корня построены дозовые зависимости ростовых и цитогенетических параметров в диапазоне доз от 2 до 20 Гр и проанализированы причинные связи между частотой хромосомных аберраций и гибелью ткани, органа и организма. Сопоставление частот аберрантных анафаз и поклеточного распределения аберраций, с одной стороны, прироста массы проростков и выживаемости меристемы, с другой, позволило оценить 44–48%-ный уровень частоты аберрантных анафаз в корневой меристеме как критический. Превышение этого уровня приводит к запусканию в меристеме суицидной программы через индукцию мультиаберрантных повреждений и интерфазной гибели клеток. Предполагается, что в механизмах восстановления важную роль играет клеточная конкуренция между клонами нормальных, аберрантных с единичными перестройками и мультиаберрантными клетками. При превышении 50%-ного уровня возможно полное или частичное восстановление апикальной меристемы корня за счет регенерации. Критическим показателем повреждения апикальной меристемы корня, при котором еще возможна его регенерация, является около 70 % хромосомных аберраций. Однако этих локальных процессов регенерации недостаточно для восстановления морфогенеза и выживания проростков. Для визначення критичного рівня ушкодження апікальної меристеми кореня, індукованого гострим опроміненням в діапазоні доз від 2 до 20 Гр, побудовано різні дозові залежності ростових та цитогенетичних параметрів. Співставлення частоти аберантних анафаз і поклітинного розподілу аберацій, з одного боку, і приросту фітомаси, виживаності меристеми і регенерації кореня, з іншого, дозволило оцінити 44–48%-вий рівень частоти аберантних анафаз як критичний. Перевищення цього рівня пошкодження призводить до запускання в меристемі суїцидної програми через індукцію мультиаберантних пошкоджень та інтерфазної загибелі клітин. Припускається, що в механізмах відновлення при допороговому рівні пошкодження головну роль виконує клітинна конкуренція між клонами нормальних клітин, аберантних клітин, які мають 1 або 2 ушкодження, і мультиаберантними клітинами. Регенерація забезпечує повне або часткове відновлення апікальної меристеми головного кореня, однак цих локальних процесів недостатньо для відновлення морфогенезу і виживання проростків при значному перевищенні порога пошкодження. The dose dependencies of growth and cytogenetical values have been built to determine the critical level of root apical meristem damage induced by cute irradiation in the range from 2 to 20 Gr. We have analyzed the frequencies of aberrant anaphases and the aberration distribution per cell, on the one hand, and the growth of biomass, the survival and regeneration of the root meristem, on the other hand. The critical level of damage to the stem apical meristem and root of seedlings was defined as 44–48 % of aberrant anaphase. Exceeding of this level leads to the launch of suicidal program through induction of multiaberrant damages and interphase cell death. It appears that competition of clones of non-aberrant cells, the cells bearing 1 and 2 damages and multiaberrant cells plays the primary role in the mechanisms of recovery. The regeneration provides full or partial restoration of the main root apical meristem. However these local processes are insufficient to restore morphogenesis and survival of seedlings in excess of the critical level damage. ru Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Цитология и генетика Оригинальные работы Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L. Критичний рівень радіаційного пошкодження апікальної меристеми кореня та механізми її відновлення Pisum sativum L. Critical level of radiation damage of root apical meristem and mechanisms for its recovery in Pisum sativum L. Article published earlier
spellingShingle	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L. Кравец, Е.А. Михеев, А.Н. Овсянникова, Л.Г. Гродзинский, Д.М. Оригинальные работы
title	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L.
title_alt	Критичний рівень радіаційного пошкодження апікальної меристеми кореня та механізми її відновлення Pisum sativum L. Critical level of radiation damage of root apical meristem and mechanisms for its recovery in Pisum sativum L.
title_full	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L.
title_fullStr	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L.
title_full_unstemmed	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L.
title_short	Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L.
title_sort	критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у pisum sativum l.
topic	Оригинальные работы
topic_facet	Оригинальные работы
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/66820
work_keys_str_mv	AT kravecea kritičeskiiurovenʹradiacionnogopovreždeniâapikalʹnoimeristemykornâimehanizmyeevosstanovleniâupisumsativuml AT miheevan kritičeskiiurovenʹradiacionnogopovreždeniâapikalʹnoimeristemykornâimehanizmyeevosstanovleniâupisumsativuml AT ovsânnikovalg kritičeskiiurovenʹradiacionnogopovreždeniâapikalʹnoimeristemykornâimehanizmyeevosstanovleniâupisumsativuml AT grodzinskiidm kritičeskiiurovenʹradiacionnogopovreždeniâapikalʹnoimeristemykornâimehanizmyeevosstanovleniâupisumsativuml AT kravecea kritičniirívenʹradíacíinogopoškodžennâapíkalʹnoímeristemikorenâtamehanízmiíívídnovlennâpisumsativuml AT miheevan kritičniirívenʹradíacíinogopoškodžennâapíkalʹnoímeristemikorenâtamehanízmiíívídnovlennâpisumsativuml AT ovsânnikovalg kritičniirívenʹradíacíinogopoškodžennâapíkalʹnoímeristemikorenâtamehanízmiíívídnovlennâpisumsativuml AT grodzinskiidm kritičniirívenʹradíacíinogopoškodžennâapíkalʹnoímeristemikorenâtamehanízmiíívídnovlennâpisumsativuml AT kravecea criticallevelofradiationdamageofrootapicalmeristemandmechanismsforitsrecoveryinpisumsativuml AT miheevan criticallevelofradiationdamageofrootapicalmeristemandmechanismsforitsrecoveryinpisumsativuml AT ovsânnikovalg criticallevelofradiationdamageofrootapicalmeristemandmechanismsforitsrecoveryinpisumsativuml AT grodzinskiidm criticallevelofradiationdamageofrootapicalmeristemandmechanismsforitsrecoveryinpisumsativuml

Критический уровень радиационного повреждения апикальной меристемы корня и механизмы ее восстановления у Pisum sativum L.

Репозитарії

Схожі ресурси