Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом
Модифицирован тетразолиевый метод (МТТ-тест) оценки метаболической активности клеток фукусовых водорослей. Определены оптимальные условия подготовки проб и протекания реакции: концентрация МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия бромид), температура, длительность взаимодействия с реаге...
Saved in:
| Published in: | Альгология |
|---|---|
| Date: | 2013 |
| Main Author: | |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України
2013
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/67718 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом / И.В. Рыжик // Альгология. — 2013. — Т. 23, № 1. — С. 10-18. — Бібліогр.: 23 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859585915698020352 |
|---|---|
| author | Рыжик, И.В. |
| author_facet | Рыжик, И.В. |
| citation_txt | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом / И.В. Рыжик // Альгология. — 2013. — Т. 23, № 1. — С. 10-18. — Бібліогр.: 23 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Альгология |
| description | Модифицирован тетразолиевый метод (МТТ-тест) оценки метаболической активности клеток фукусовых водорослей. Определены оптимальные условия подготовки проб и протекания реакции: концентрация МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия бромид), температура, длительность взаимодействия с реагентом. Показана возможность использования МТТ-теста для оценки воздействия на водоросли факторов внешней среды, в т. ч. нефтяного загрязнения
Модифіковано тетразолієвий метод (МТТ-тест) оцінки метаболічної активності клітин фукусових водоростей. Визначено оптимальні умови підготовки проб і перебігу реакції: концентрація МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2-іл]-2,5-дифенілтетразолія бромид), температура, термін взаємодії з реагентом. Показана можливість використання МТТ-теста для оцінки впливу на водорості факторів зовнішнього середовища, в т.ч. нафтового забруднення.
The tetrasol method (МТТ-test) for assessment of metabolic activity of cells of fucoid algae was modificated. Estimation of optimum conditions both sample preparation and reaction passing: concentration of MTT solution, temperature, time of interaction with reagent was carried out. A possibility of the MTT-test usage for an estimation of influence of environmental factors (including oil pollution) on a seaweeds is shown.
|
| first_indexed | 2025-11-27T10:06:27Z |
| format | Article |
| fulltext |
И.В. Рыжик
10 ISSN 0868-8540. Algologia. 2013. V. 23. N 1
УДК 576.311.342. + 581.1 + 582.561
И.В. РЫЖИК
Мурманский морской биологический ин-т КНЦ РАН,
ул. Владимирская, 17, 183010 Мурманск, Россия
alaria@yandex.ru
ОЦЕНКА МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК
ФУКУСОВЫХ ВОДОРОСЛЕЙ ТЕТРАЗОЛИЕВЫМ МЕТОДОМ
Модифицирован тетразолиевый метод (МТТ-тест) оценки метаболической активно-
сти клеток фукусовых водорослей. Определены оптимальные условия подготовки
проб и протекания реакции: концентрация МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-
дифенилтетразолия бромид), температура, длительность взаимодействия с реагентом.
Показана возможность использования МТТ-теста для оценки воздействия на водо-
росли факторов внешней среды, в т. ч. нефтяного загрязнения.
К л ю ч е в ы е с л о в а : фукусовые водоросли, тетразолиевый метод, МТТ (3-[4,5-
диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия бромид), метаболическая активность
клеток, соленость, нефтяное загрязнение.
Введение
Метаболическую активность клеток (МАК) можно оценивать по интен-
сивности отдельных физиологических процессов. Один из возможных
способов определения МАК — оценка активности ферментов дегидроге-
наз с помощью тетразолиевых красителей — солей МТТ (3-[4,5-диме-
тилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия бромид) или ТТХ (2,3,5-
трифенилтетразолия хлорид). Низкий окислительно-восстановительный
потенциал данных соединений обеспечивает перехват ими ионов Н+,
переносимых НАД (никотинамидадениндинуклеотид) в процессе кле-
точного дыхания. При этом происходит восстановление тетразолиевых
солей и их переход в водонерастворимую форму — формазан. Реакция
идет в цитоплазме за счет деятельности цитоплазматических дегидроге-
наз и в митохондриальной электронтранспортной цепи (Roche …, 2004).
По интенсивности накопления формазана, который имеет фиолето-
вую окраску, оценивают метаболическую активность клеток. На этой
основе был разработан метод оценки физиологического состояния кле-
ток (МТТ-тест) животных, а также высших растений (Kalina, Palmer,
1968; Vistica et al., 1991; Huang et al., 2001; Schrader, Harries, 2006). От-
дельные исследования были проведены на макроводорослях с тонкопла-
стинчатым строением (Nam et al., 1998; Chang et al., 1999; Lu et al.,
2006). На водорослях с более сложной организацией таллома метод не
применяли.
Цель нашего исследования — модифицировать тетразолиевый метод
для анализа метаболической активности клеток фукусовых водорослей,
имеющих сложное псевдопаренхиматозное строение, а также оценить воз-
© И.В. Рыжик, 2013
Оценка метаболической активности клеток
ISSN 0868-8540. Альгология. 2013. Т. 23. № 1 11
можность использования данного метода для определения ответной ре-
акции растительного организма на внешнее воздействие.
Материалы и методы
Исследования проводили на сезонной биостанции ММБИ КНЦ РАН
(пос. Дальние Зеленцы, восточное побережье Баренцева моря) в 2011 г.
Модификацию метода для фукусовых водорослей проводили на ос-
нове методов, разработанных для животных клеток (Vistica et al., 1991) и
пластинчатых зеленых водорослей (Towill, Mazur, 1975; Chang et al., 1999).
Метаболическую активность клеток Fucus vesiculosus L. анализирова-
ли в апикальной (наиболее функционально активной) части талломов.
На 1 пробу из верхушек свежесобранных растений пробковым сверлом
(d = 5 мм) брали по 1−2 высечки общей массой 15—20 мкг. Для оценки
статистической достоверности получаемых результатов анализировали
15 проб.
Готовили исходный 5 %-ный раствор МТТ (Sigma) в 12 мМ трис-
HCl-буфере (pH 7, 5), который для последующих опытов разбавляли до
меньших концентраций фильтрованной морской водой. Каждую пробу
помещали в 200 мкл раствора МТТ и инкубировали, периодически
встряхивая. После инкубации пробу переносили в изопропанол (V =
1 мл) на 2 ч для экстракции образовавшегося формазана. Экстракт цен-
трифугировали в течение 5 мин при 3 тыс. об./мин и измеряли его оп-
тическую плотность при длине волны 570 нм против изопропаноловой
вытяжки проб, находившихся в морской воде без МТТ. Метаболиче-
скую активность клеток оценивали по оптической плотности растворов,
расчет проводили на единицу массы высечек. Была проведена серия
экспериментов с целью определения оптимальных условий (концентра-
ция раствора МТТ, продолжительность инкубации, температура, усло-
вия освещения).
Возможность практического использования метода определяли в хо-
де эксперимента, в котором оценивали метаболическую активность кле-
ток водорослей в условиях пониженной солености. Для этого свежесоб-
ранные талломы F. vesiculosus помещали на 1 ч в емкости с морской во-
дой соленостью 33 (контроль), 25, 20, 15 и 10 ‰. Затем у растений оп-
ределяли МАК и интенсивность видимого фотосинтеза по изменению
содержания кислорода в воде, в которой находились водоросли, за оп-
ределенный период, йодометрическим методом по Винклеру (Лурье,
1973). Интенсивность фотосинтеза рассчитывали в мкг О2 на 1 г сырой
массы таллома в час.
Также проводили сравнение МАК водорослей, обитающих в раз-
личных по уровню загрязнения нефтепродуктами местах. Предваритель-
но с помощью флюориметра "Флюорат 02—3М" (Люмэкс, Россия) оце-
нивали уровень загрязнения нефтепродуктами в двух точках Кольского
залива: морской порт (более чем в 10 раз превышены санитарно-
гигиенические нормы ПДК) и губа Грязная (в пределах ПДК).
И.В. Рыжик
12 ISSN 0868-8540. Algologia. 2013. V. 23. N 1
Статистическую обработку результатов проводили с использованием
программного пакета Excel. На рисунках показаны средние арифмети-
ческие и доверительный интервал.
Результаты
Подбор оптимальных условий для МТТ-теста
1. Концентрация МТТ
Для определения оптимальной концентрации были использованы
растворы МТТ от 0,2 до 1,2 %. Исследования проводили при температу-
ре 18 оС. Длительность нахождения проб в растворе МТТ составила 3 ч.
Анализ полученных результатов показал, что оптимальной концентра-
цией является 0,8 %-ный раствор МТТ. Меньшего количества красителя
недостаточно для взаимодействия со всем НАД клетки, при больших
концентрациях наблюдается избыток реагента (рис. 1).
Рис. 1. Зависимость накопления формазана в клетках Fucus vesiculosus от концентра-
ции МТТ. Здесь и на рис. 2, 3, 4, 6 ось ординат — оптическая плотность вытяжки
при 570 нм, рассчитанная на 1 г сырой массы пробы
2. Экспозиция
Для определения оптимального периода инкубации высечки поме-
щали в раствор МТТ (0,8 %) на период от 1 до 24 ч при 18 оС и отсутст-
вии освещения. Анализ полученных результатов показал, что оптималь-
ный период нахождения высечек в растворе МТТ составляет 4 ч
(рис. 2). В дальнейшем содержание формазана не увеличивается.
3. Температура
Исследование влияния температуры на скорость протекания реак-
ции проводили в диапазоне 5—25 оС. Содержание формазана увеличива-
лось при повышении температуры до 18 оС. При более высоких темпе-
ратурах количество формазана не изменялось.
0
0,02
0,04
0,06
0,2 0,4 0,5 0,6 0,8 1 1,2
М
Т
Т
Концентрация МТТ
Оценка метаболической активности клеток
ISSN 0868-8540. Альгология. 2013. Т. 23. № 1 13
Рис. 2. Зависимость накопления формазана в клетках Fucus vesiculosus от времени
инкубации
4. Освещение
В темноте и на свету различной интенсивности (6 и 100 Вт/м2) на-
копление формазана было сходным, однако статистическая обработка
результатов показала меньшее стандартное отклонение от средних зна-
чений у растений, содержавшихся в темноте.
Рис. 3. Метаболическая активность клеток Fucus vesiculosus в течение суток. Штри-
ховкой выделено темное время суток в сентябре
Результаты исследований свидетельствуют о том, что оптимальными
условиями для проведения МТТ-теста являются: инкубация высечек
при температуре 18 оС, темнота, время 4 ч, 0,8 %-ный раствор МТТ в
морской воде.
Суточное изменение метаболической активности клеток
Наши исследования показали, что в течение суток метаболическая ак-
тивность клеток фукусовых водорослей меняется. В летний период
(июль) наблюдается повышение активности в вечернее время и сниже-
ние в начале ночи, четко выраженные пики отсутствуют. В осенний пе-
0
0,3
0,6
0,9
1,2
1,5
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 1 2 3 4 5 6 7 8
М
Т
Т
Июль Сентябрь
Время, ч
0
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23
Экспозиция, ч
М
Т
Т
И.В. Рыжик
14 ISSN 0868-8540. Algologia. 2013. V. 23. N 1
риод (сентябрь) выделяются 2 пика — во второй половине дня и в ноч-
ной период (рис. 3).
Подобное изменение МАК в течение суток, скорее всего, связано с
процессами роста и деления клеток, поскольку сходная картина наблю-
далась при исследовании циркадных ритмов ламинариевых водорослей:
интенсивность деления клеток максимальна в середине ночного перио-
да, а скорость роста таллома — в утренние часы (Lüning, 1994; Makarov
et al., 1995).
Метаболическая активность клеток при различной солености
Соленость 25 ‰ не вызывала изменения МАК (все различия с контро-
лем находятся в пределах ошибки). Дальнейшее понижение солености
приводило к снижению МАК (рис. 4).
Рис. 4. Метаболическая активность клеток Fucus vesiculosus при различной солености
Рис. 5. Интенсивность видимого фотосинтеза Fucus vesiculosus при различной солено-
сти. Ось ординат — выделение кислорода, мкг О2 на 1 г сырой массы таллома в час
0
0,04
0,08
0,12
0,16
33 25 20 15 10
М
Т
Т
,
Соленость, ‰
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
33 25 20 15 10
И
Ф
Cоленость , ‰
Оценка метаболической активности клеток
ISSN 0868-8540. Альгология. 2013. Т. 23. № 1 15
Воздействие солености ниже 15 ‰ на морские водоросли можно
отнести к стрессовым. В этих условиях у организма отмечается сниже-
ние интенсивности ряда физиологических показателей: интенсивности
фотосинтеза (ИФ) (рис. 5), скорости роста, содержания фотосинтетиче-
ских пигментов (Дробышев, 1970, 1971; Малавенда, 2007).
Сравнение балтийских и атлантических популяций фукусовых пока-
зало, что у балтийских фукоидов при понижении солености увеличива-
ется интенсивность роста, тогда как у атлантических отмечается гибель
особей (Back et al., 1992; Serrao et al., 1996; Malm et al., 2001). На водо-
рослях Шпицбергена было показано, что пониженная соленость вызы-
вает уменьшение интенсивности фотосинтеза, снижение количества
пигментов (Karsten et al., 1991; Karsten, 2007).
У водорослей в течение первых 5 ч нахождения при пониженной
солености развивается состояние стресса, при котором значительно
снижается дыхание поддержания. Затем начинаются процессы адапта-
ции, в ходе которых дыхание увеличивается и на 5—10-е сутки достигает
своего максимума, в дальнейшем сравниваясь с контролем (Тропин и
др., 2003). Такой же период формирования адаптации показан и для
F. vesiculosus (Малавенда, 2007).
Полученные нами результаты согласуются с данными других иссле-
дователей, которые также отмечали снижение МАК зеленой водоросли
Ulva fasciata при понижении солености (Chang et al., 1999).
Метаболическая активность клеток при загрязнении нефтепродуктами
При обитании растений в условиях постоянного загрязнения нефтепро-
дуктами МАК водорослей значительно выше, чем у растений из чистых
районов (рис. 6).
Рис. 6. Метаболическая активность клеток Fucus vesiculosus при различном уровне
загрязнения нефтепродуктами
Нефтяное загрязнение является стрессовым фактором, однако
при длительном воздействии некоторые макроводоросли, в частности
0
0,01
0,02
0,03
0,04
губа Грязная Морской порт
М
Т
Т
И.В. Рыжик
16 ISSN 0868-8540. Algologia. 2013. V. 23. N 1
F. vesiculosus, приобретают устойчивость к нефтепродуктам (Coelho еt al.,
2000; Степаньян, Воскобойников, 2006). Выявленное в данном исследо-
вании значительное увеличение МАК водорослей может свидетельство-
вать об активизации процессов, направленных на минимизацию нега-
тивного воздействия нефтепродуктов. Это могут быть как адаптивные,
так и репарационные процессы, происходящие в клетках водорослей.
Заключение
МТТ-тест можно использовать для оценки метаболической активности
клеток водорослей со сложной организацией таллома, а также для
оценки степени воздействия на растительный организм внешних факто-
ров, в т.ч. антропогенного загрязнения.
Оптимальными условиями для проведения МТТ-теста являются:
инкубация высечек при температуре 18 ºС, темнота, время 4 ч, раствор
МТТ в морской воде при концентрации 0,8 %. Экстракция формазана
проводится в изопропаноле в течение 2 ч. При необходимости эллюат
центрифугируют в течение 5 мин при 3 тыс. об./мин. Оптическую плот-
ность растворов измеряют при длине волны 570 нм против изопропано-
ловой вытяжки проб, находившихся в морской воде без МТТ.
Данная методика была успешно опробована на родственных Fucus
vesiculosus видах водорослей — F. serratus и F. distichus.
Работа выполнена в рамках программы Kolarctic по проекту CETIA
«Прибрежная среда, технологии и инновации в Арктике» (Coastal
Environment, Technology and Innovation in the Arctic), направление 4 «Биоло-
гическая очистка с помощью водорослей».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Дробышев В.П. Солеустойчивость некоторых видов бурых водорослей Белого моря //
Цитология. — 1970. — 12, № 7. — С. 97—102.
Дробышев В.П. Акклимация морских водорослей при содержании в средах различной
солености // Экология. — 1971. — 1. — С. 96—98.
Лурье Ю.Ю. Унифицированные методы анализа вод. 2-е изд. — М.: Химия, 1973. —
376 с.
Малавенда С.В. Влияние солености на фукусовые водоросли Баренцева моря: Авто-
реф. дис. … канд. биол. наук. — Мурманск, 2007. — 24 с.
Степаньян О.В., Воскобойников Г.М. Влияние нефти и нефтепродуктов на морфо-
функциональные особенности морских макроводорослей // Биол. моря. — 2006. —
32, № 4. — С. 241—248.
Тропин И.В., Радзинская Н.В., Воскобойников Г.М. Влияние изменения солености на
темновое дыхание и структуру клеток талломов бурых водорослей литорали Ба-
ренцева моря // Изв. РАН. Сер. Биол. — 2003. — 1. — С. 48—56.
Back S., C. Collins, G. Russell. Effects of Salinity on Growth of Baltic and Atlantic Fucus
vesiculosus // Brit. Phycol. J. — 1992. — 27. — P. 39—47.
Оценка метаболической активности клеток
ISSN 0868-8540. Альгология. 2013. Т. 23. № 1 17
Chang Wan-Chun, Ming-Hwa Chen, Tse-Min Lee. 2.3.5-Triphenyltetrasolium reduction in
the viability assay of Ulva fasciata (Chlorophyta) in response to salinity stress // Bot.
Bull. Acad. Sin. — 1999. — 40. — P. 207—212.
Coelho S.M., Jan W., Rijstenbil, Murray T., Brown. Impacts of anthropogenic stresses on the
early development stages of seaweeds // J. Aquat. Ecosyst. Stress Rec. — 2000. — 7. —
Р. 317—333.
Huang Y., Wang J., Li G., Zheng Z., Su W. Antitumor and antifungal activities in endo-
phytic fungi isolated from pharmaceutical plants Taxus mairei, Cephalataxus fortunei
and Torreya grandis // FEMS Immunol. Med. Microbiol. — 2001. — 31. — P. 163—167.
Kalina M., Palmer J.M. The reduction of tetrazolium salts by plant mitochondria // Histo-
chemie. — 1968. — 14. — P. 366—374.
Karsten U. Salinity tolerance of Arctic kelps from Spitsbergen // Phycol. Res. — 2007. — 55.
— P. 257—262.
Karsten U., Wiencke C., Kirst G. The effect of salinity changes upon physiology of eulittoral
green macroalgae from Antarctica and Southern Chile. I. Cell viability, growth, photo-
synthesis and dark respiration // J. Plant Physiol. — 1991. — 138. — P. 667—73.
Lu I-Fan, Ming-Shiuan Sung, Tse-Min Lee. Salinity stress and hydrogen peroxide regulation
of antioxidant defense system in Ulva fasciata // Mar. Biol. — 2006. — 150, N 1. —
P. 1—15.
Lüning K. Circadian growth rhythm in juvenile sporophytes of Laminariales (Phaeophyta) //
J. Phycol. — 1994. — 30. — P. 193—199.
Makarov V.N., Schoschina E.V., Lüning K. Diurnal and circadian periodicity of mitosis and
growth in marine algae. I. Juvenile sporophytes of Laminariales (Phaeophyta) // Eur. J.
Phycol. — 1995. — 30. — P. 261—266.
Malm T., Kautsky L., Enkvist R. Reproduction, recruitment and geographical distribution of
Fucus serratus L. in the Baltic Sea // Bot. Mar. — 2001. — 44. — P. 101—108.
Nam Bo-Hye, Jin Hyung-Joo, Kim Se-Kwon, Hong Yong-Ki. Quantitative viability of seaweed
tissues assessed with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride // J. Appl. Phycol. — 1998. —
10. — P. 31—36.
Roche Applied Science. Apoptosis, Cell Death and Cell Proliferation: Manual. − Mannheim,
2004. — P. 1—7.
Schrader K.K., Harries M.D. A rapid bioassay for bactericides against the catfish pathogens
Edwardsiella ictaluri and Flavobacterium columnare // Aquacult. Res. — 2006. — 37. —
P. 928—937.
Serrao E.A., Kautsky L., Brawley S.H. Distributional success of the marine seaweed Fucus
vesiculosus L. in the brackish Baltic Sea correlates with osmotic capabilities of Baltic
gametes // Oecologia. — 1996. — 107. — P. 1—12.
Towill L.E., Mazur P. Studies on the reduction of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride as a
viability assay for plant tissue culture // Can. J. Bot. — 1975. — 53. — P. 1097—1102.
Vistica D., Skehan Ph., Scudiero D., Monks A., Pittman A., Boyd M. Tetrazolium-based as-
says for cellular viability: a critical examination of selected parametrs affecting forma-
zan production // Canc. Res. — 1991. — 51. — P. 2515-2520.
Поступила 5 марта 2012 г.
Подписала в печать А.В. Лищук-Курейшевич
И.В. Рыжик
18 ISSN 0868-8540. Algologia. 2013. V. 23. N 1
I.V. Ryzhik
Murmansk Marine Biological Institute Kola Scientific Center RAS,
17, Vladimirskaya St., 183010 Murmansk, Russia
ASSESSMENT OF METABOLIC ACTIVITY OF CELLS OF FUCOID ALGAE
BY TETRASOL METHOD
The tetrasol method (МТТ-test) for assessment of metabolic activity of cells of fucoid algae was
modificated. Estimation of optimum conditions both sample preparation and reaction passing:
concentration of MTT solution, temperature, time of interaction with reagent was carried out. A
possibility of the MTT-test usage for an estimation of influence of environmental factors (includ-
ing oil pollution) on a seaweeds is shown.
K e y w o r d s : Fucus vesiculosus, МТТ (3-[4,5-dimetiltiasol-2-il-2,5-dipheniltetrasolia bro-
mide), metabolic activity of cells (MAC), salinity, oil pollution.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-67718 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0868-8540 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-27T10:06:27Z |
| publishDate | 2013 |
| publisher | Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Рыжик, И.В. 2014-09-10T06:13:24Z 2014-09-10T06:13:24Z 2013 Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом / И.В. Рыжик // Альгология. — 2013. — Т. 23, № 1. — С. 10-18. — Бібліогр.: 23 назв. — рос. 0868-8540 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/67718 576.311.342. + 581.1 + 582.561 Модифицирован тетразолиевый метод (МТТ-тест) оценки метаболической активности клеток фукусовых водорослей. Определены оптимальные условия подготовки проб и протекания реакции: концентрация МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия бромид), температура, длительность взаимодействия с реагентом. Показана возможность использования МТТ-теста для оценки воздействия на водоросли факторов внешней среды, в т. ч. нефтяного загрязнения Модифіковано тетразолієвий метод (МТТ-тест) оцінки метаболічної активності клітин фукусових водоростей. Визначено оптимальні умови підготовки проб і перебігу реакції: концентрація МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2-іл]-2,5-дифенілтетразолія бромид), температура, термін взаємодії з реагентом. Показана можливість використання МТТ-теста для оцінки впливу на водорості факторів зовнішнього середовища, в т.ч. нафтового забруднення. The tetrasol method (МТТ-test) for assessment of metabolic activity of cells of fucoid algae was modificated. Estimation of optimum conditions both sample preparation and reaction passing: concentration of MTT solution, temperature, time of interaction with reagent was carried out. A possibility of the MTT-test usage for an estimation of influence of environmental factors (including oil pollution) on a seaweeds is shown. Работа выполнена в рамках программы Kolarctic по проекту CETIA «Прибрежная среда, технологии и инновации в Арктике» (Coastal Environment, Technology and Innovation in the Arctic), направление 4 «Биологическая очистка с помощью водорослей». ru Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України Альгология Физиология, биохимия, биофизика Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом Оцінка метаболічної активності клітин фукусових водоростей тетразолієвим методом Assessment of metabolic activity of cells of fucoid algae by tetrasol method Article published earlier |
| spellingShingle | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом Рыжик, И.В. Физиология, биохимия, биофизика |
| title | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом |
| title_alt | Оцінка метаболічної активності клітин фукусових водоростей тетразолієвим методом Assessment of metabolic activity of cells of fucoid algae by tetrasol method |
| title_full | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом |
| title_fullStr | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом |
| title_full_unstemmed | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом |
| title_short | Оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом |
| title_sort | оценка метаболической активности клеток фукусовых водорослей тетразолиевым методом |
| topic | Физиология, биохимия, биофизика |
| topic_facet | Физиология, биохимия, биофизика |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/67718 |
| work_keys_str_mv | AT ryžikiv ocenkametaboličeskoiaktivnostikletokfukusovyhvodorosleitetrazolievymmetodom AT ryžikiv ocínkametabolíčnoíaktivnostíklítinfukusovihvodorosteitetrazolíêvimmetodom AT ryžikiv assessmentofmetabolicactivityofcellsoffucoidalgaebytetrasolmethod |