Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий
Эффективное криоконсервирование клеточных суспензий является важной задачей криобиологии. На основании предыдущих исследований была разработана методика системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий. В качестве клеточной модели использовали кератиноциты человека. Исследова...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Datum: | 2011 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2011
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68458 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий / Н. Хофманн, И. Бернеманн, Д. Погожих, Б. Гласмахер // Проблемы криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 4. — С. 353-363. — Бібліогр.: 35 назв. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68458 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Хофманн, Н. Бернеманн, И. Погожих, Д. Гласмахер, Б. 2014-09-24T11:31:22Z 2014-09-24T11:31:22Z 2011 Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий / Н. Хофманн, И. Бернеманн, Д. Погожих, Б. Гласмахер // Проблемы криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 4. — С. 353-363. — Бібліогр.: 35 назв. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68458 57.043:547.42:612.79.014 Эффективное криоконсервирование клеточных суспензий является важной задачей криобиологии. На основании предыдущих исследований была разработана методика системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий. В качестве клеточной модели использовали кератиноциты человека. Исследование включало 48 протоколов с различными скоростями охлаждения (B) в двухступенчатых режимах (B1 в диапазоне от 4 до –30°С и В2 от –30 до –80°С). Все протоколы изучали при четырех различных концентрациях наиболее часто применяемого криопротектора диметилсуфоксида (ДМСО). Растровый анализ около 600 образцов позволил изучить полный набор возможных переменных. В дальнейших исследованиях данная методика была использована для улучшения протоколов криоконсервирования HPMEC-ST1.6R (легочные микрососудистые эндотелиальные клетки человека). Результаты исследования показали, что только определенное оптимальное сочетание скоростей охлаждения обеспечивает высокий уровень выживаемости клеток после оттаивания. Для кератиноцитов человека оптимальными протоколами замораживания были: охлаждение со скоростью 5 К/мин для B1 и 7,5 К/мин для В2, либо 5 К/мин для B1 и 10 K/мин для В2 при концентрации ДМСО 2,5%. Наиболее высокие показатели выживаемости культуры клеток HPMEC-ST1.6R были достигнуты при использовании следующих протоколов: 5 K/мин (B1) в сочетании с 5 K/мин (B2) (7,5% ДМСО); 3 К/мин в сочетании с 3 К/мин (5 или 7,5% ДМСО); 10 K/мин (B1) в сочетании с 3 К/мин (B2) (10% ДМСО). Ефективне кріоконсервування клітинних суспензій є важливим завданням кріобіології. На підставі попередніх досліджень була розроблена методика системної оптимізації протоколів кріоконсервування клітинних суспензій. У якості клітинної моделі використовували кератиноцити людини. Дослідження включало 48 протоколів з різними швидкостями охолодження (B) в двоступінчастих режимах (B1 в діапазоні від 4 до –30°С і В2 від –30 до –80°С). Усі протоколи вивчали при чотирьох різних концентраціях кріопротектора диметилсульфоксиду (ДМСО), який вживається найбільш часто. Растровий аналіз близько 600 зразків дозволив вивчити повний набір можливих змінних. У подальших дослідженнях дана методика була використана для поліпшення протоколів кріоконсервування HPMEC-ST1.6R (легеневі мікросудинні ендотеліальні клітини людини). Результати дослідження показали, що тільки певне оптимальне поєднання швидкостей охолодження забезпечує високий рівень виживання клітин після відтавання. Для кератиноцитів людини оптимальними протоколами заморожування були: охолодження зі швидкістю 5 К/хв для B1 і 7,5 К/хв для В2 або 5 К/хв для B1 і 10 K/хв для В2 при концентрації ДМСО 2,5%. Найбільш високі показники виживаності культури клітин HPMEC-ST1.6R були досягнуті при застосуванні наступних протоколів: 5 K/хв (B1) у поєднанні з 5 K/хв (B2) (7,5% ДМСО); 3 К/хв у поєднанні з 3 К/хв (5 або 7,5% ДМСО); 10 K/хв (B1) у поєднанні з 3 К/хв (B2) (10% ДМСО). Effective cryopreservation of cellular suspensions is an important task of cryobiology. A systematic parameter optimization setup for cryopreservation of cellular suspensions was established on the basis of our previous studies. Keratinocytes were used as a cellular model. The investigation included 48 protocols with different cooling rates (B) in a two-step freezing protocols (B1 in the range of 4°C to –30°C and B2 from –30°C to –80°C). All protocols have been studied with four different concentrations of the most frequently applied cryoprotective agent dimethyl sulfoxide (DMSO). Raster analysis of approximately 600 samples allowed the detection of the most comprehensive array of possible variables. In further investigations this setup was used to improve the cryopreservation protocols for HPMEC-ST1.6R (human pulmonary microvascular endothelial cells). Results revealed that only an optimal combination of cooling rates ensured the highest survival rates of cells after thawing. In case of keratinocytes, the optimal freezing protocol was composed of the cooling rates of 5 K/min for B1 and 7.5 K/min for B2, or 5 K/min for B1 and 10 K/min for B2 (2.5% DMSO concentration). The highest survival rates of HPMEC-ST1.6R cell culture were achieved with application of the following protocols: 5 K/min (B1) combined with 5 K/min (B2) (7.5% DMSO); 3 K/min, combined with 3 K/min (5% or 7.5% DMSO); and 10 K/min combined with 3 K/min (10% DMSO). Авторы благодарят Дж. Киркпатрика (J. Kirkpatrick) за предоставление клеточной линии HPMECST1.6R, а также Р. Шпиндлера (R. Spindler), К. Штолля (C. Stoll) и Х. Сун (H. Sun) за техническую поддержку. Работа проводилась при финансовой поддержке Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, Немецкого исследовательского фонда) для Кластера передового опыта “REBIRTH” (“From Regenerative Biology to Reconstructive Therapy” – “Oт регенеративной биологии к реконструктивной терапии”) (EXC62/1) и BMBF (80/049). Авторы выражают благодарность рецензенту Кулешовой Л.Г. за плодотворную дискуссию. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Теоретическая и экспериментальная криобиология Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий Development of Systematic Parameter Optimization for Cryopreservation Protocols for Cellular Suspensions Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий |
| spellingShingle |
Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий Хофманн, Н. Бернеманн, И. Погожих, Д. Гласмахер, Б. Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| title_short |
Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий |
| title_full |
Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий |
| title_fullStr |
Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий |
| title_full_unstemmed |
Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий |
| title_sort |
разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий |
| author |
Хофманн, Н. Бернеманн, И. Погожих, Д. Гласмахер, Б. |
| author_facet |
Хофманн, Н. Бернеманн, И. Погожих, Д. Гласмахер, Б. |
| topic |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| topic_facet |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| publishDate |
2011 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Development of Systematic Parameter Optimization for Cryopreservation Protocols for Cellular Suspensions |
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68458 |
| citation_txt |
Разработка системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий / Н. Хофманн, И. Бернеманн, Д. Погожих, Б. Гласмахер // Проблемы криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 4. — С. 353-363. — Бібліогр.: 35 назв. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT hofmannn razrabotkasistemnoioptimizaciiprotokolovkriokonservirovaniâkletočnyhsuspenzii AT bernemanni razrabotkasistemnoioptimizaciiprotokolovkriokonservirovaniâkletočnyhsuspenzii AT pogožihd razrabotkasistemnoioptimizaciiprotokolovkriokonservirovaniâkletočnyhsuspenzii AT glasmaherb razrabotkasistemnoioptimizaciiprotokolovkriokonservirovaniâkletočnyhsuspenzii AT hofmannn developmentofsystematicparameteroptimizationforcryopreservationprotocolsforcellularsuspensions AT bernemanni developmentofsystematicparameteroptimizationforcryopreservationprotocolsforcellularsuspensions AT pogožihd developmentofsystematicparameteroptimizationforcryopreservationprotocolsforcellularsuspensions AT glasmaherb developmentofsystematicparameteroptimizationforcryopreservationprotocolsforcellularsuspensions |
| first_indexed |
2025-12-07T17:40:14Z |
| last_indexed |
2025-12-07T17:40:14Z |
| _version_ |
1850872131289612288 |
| description |
Эффективное криоконсервирование клеточных суспензий является важной задачей криобиологии. На основании предыдущих исследований была разработана методика системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий. В качестве клеточной модели использовали кератиноциты человека. Исследование включало 48 протоколов с различными скоростями охлаждения (B) в двухступенчатых режимах (B1 в диапазоне от 4 до –30°С и В2 от –30 до –80°С). Все протоколы изучали при четырех различных концентрациях наиболее часто применяемого криопротектора диметилсуфоксида (ДМСО). Растровый анализ около 600 образцов позволил изучить полный набор возможных переменных. В дальнейших исследованиях данная методика была использована для улучшения протоколов криоконсервирования HPMEC-ST1.6R (легочные микрососудистые эндотелиальные клетки человека). Результаты исследования показали, что только определенное оптимальное сочетание скоростей охлаждения обеспечивает высокий уровень выживаемости клеток после оттаивания. Для кератиноцитов человека оптимальными протоколами замораживания были: охлаждение со скоростью 5 К/мин для B1 и 7,5 К/мин для В2, либо 5 К/мин для B1 и 10 K/мин для В2 при концентрации ДМСО 2,5%. Наиболее высокие показатели выживаемости культуры клеток HPMEC-ST1.6R были достигнуты при использовании следующих протоколов: 5 K/мин (B1) в сочетании с 5 K/мин (B2) (7,5% ДМСО); 3 К/мин в сочетании с 3 К/мин (5 или 7,5% ДМСО); 10 K/мин (B1) в сочетании с 3 К/мин (B2) (10% ДМСО).
Ефективне кріоконсервування клітинних суспензій є важливим завданням кріобіології. На підставі попередніх досліджень була розроблена методика системної оптимізації протоколів кріоконсервування клітинних суспензій. У якості клітинної моделі використовували кератиноцити людини. Дослідження включало 48 протоколів з різними швидкостями охолодження (B) в двоступінчастих режимах (B1 в діапазоні від 4 до –30°С і В2 від –30 до –80°С). Усі протоколи вивчали при чотирьох різних концентраціях кріопротектора диметилсульфоксиду (ДМСО), який вживається найбільш часто. Растровий аналіз близько 600 зразків дозволив вивчити повний набір можливих змінних. У подальших дослідженнях дана методика була використана для поліпшення протоколів кріоконсервування HPMEC-ST1.6R (легеневі мікросудинні ендотеліальні клітини людини). Результати дослідження показали, що тільки певне оптимальне поєднання швидкостей охолодження забезпечує високий рівень виживання клітин після відтавання. Для кератиноцитів людини оптимальними протоколами заморожування були: охолодження зі швидкістю 5 К/хв для B1 і 7,5 К/хв для В2 або 5 К/хв для B1 і 10 K/хв для В2 при концентрації ДМСО 2,5%. Найбільш високі показники виживаності культури клітин HPMEC-ST1.6R були досягнуті при застосуванні наступних протоколів: 5 K/хв (B1) у поєднанні з 5 K/хв (B2) (7,5% ДМСО); 3 К/хв у поєднанні з 3 К/хв (5 або 7,5% ДМСО); 10 K/хв (B1) у поєднанні з 3 К/хв (B2) (10% ДМСО).
Effective cryopreservation of cellular suspensions is an important task of cryobiology. A systematic parameter optimization setup for cryopreservation of cellular suspensions was established on the basis of our previous studies. Keratinocytes were used as a cellular model. The investigation included 48 protocols with different cooling rates (B) in a two-step freezing protocols (B1 in the range of 4°C to –30°C and B2 from –30°C to –80°C). All protocols have been studied with four different concentrations of the most frequently applied cryoprotective agent dimethyl sulfoxide (DMSO). Raster analysis of approximately 600 samples allowed the detection of the most comprehensive array of possible variables. In further investigations this setup was used to improve the cryopreservation protocols for HPMEC-ST1.6R (human pulmonary microvascular endothelial cells). Results revealed that only an optimal combination of cooling rates ensured the highest survival rates of cells after thawing. In case of keratinocytes, the optimal freezing protocol was composed of the cooling rates of 5 K/min for B1 and 7.5 K/min for B2, or 5 K/min for B1 and 10 K/min for B2 (2.5% DMSO concentration). The highest survival rates of HPMEC-ST1.6R cell culture were achieved with application of the following protocols: 5 K/min (B1) combined with 5 K/min (B2) (7.5% DMSO); 3 K/min, combined with 3 K/min (5% or 7.5% DMSO); and 10 K/min combined with 3 K/min (10% DMSO).
|