Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини
Мета дослідження - вивчення деяких функціональних властивостей клітинних культур мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини та хондроцитів пульпозного ядра міжхребцевого диску ex vivo....
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Date: | 2012 |
| Main Author: | |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68492 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини / Д.О. Зубов // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 2. — С. 148-152. — Бібліогр.: 5 назв. — укр., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859789929056305152 |
|---|---|
| author | Зубов, Д.О. |
| author_facet | Зубов, Д.О. |
| citation_txt | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини / Д.О. Зубов // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 2. — С. 148-152. — Бібліогр.: 5 назв. — укр., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии |
| description | Мета дослідження - вивчення деяких функціональних властивостей клітинних культур мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини та хондроцитів пульпозного ядра міжхребцевого диску ex vivo.
|
| first_indexed | 2025-12-02T11:20:25Z |
| format | Article |
| fulltext |
148
Насьогодні в лікуванні дегенеративних захворю-
вань міжхребцевих дисків (МД) перспективним вияв-
ляється підхід із застосуванням клітинної терапії за
допомогою культивованих хондроцитів та мульти-
потентних мезенхімальних стромальних клітин
(ММСК) у складі клітинних носіїв для заповнення
післяопераційного тканинного дефекту МД [2, 4]. Не
зважаючи на те, що ці типи клітин легко піддаються
моношаровому культивуванню, ранове мікроото-
чення не сприяє продукуванню компонентів матриксу
пересадженими клітинами in situ. Однак існують дані,
що адипозні ММСК з жирової тканини (аММСК)
володіють потужним потенціалом щодо лікування хво-
рих на грижі МД [2, 3]. Так, ці клітини в умовах три-
вимірної культури та інкубації з TGFβ продукують
позаклітинний матрикс, багатий на протеоглікани та
колаген ІІ типу.
Отже, метою дослідження є вивчення деяких функ-
ціональних властивостей клітинних культур ММСК з
жирової тканини та хондроцитів пульпозного ядра
(ХЦПЯ) міжхребцевого диску ex vivo.
Донорський матеріал людини одержано з ДУ
«Інститут нейрохірургії ім. акад. А.П. Ромоданова
НАМН України» під час секвестректомії. Дослідження
схвалені Комісією з питань біоетики ДУ «Інститут
генетичної та регенеративної медицини НАМН Украї-
ни». Робота виконана в межах запланованої по НАМН
України НДР (шифр 3.20/2010.06.11).
Ізолювання і субкультивування адипозних ММСК
(з фрагментів епідурального жиру, Мm 1,3 г) та ХЦПЯ
(з фрагментів видаленого пульпозного ядра МД, Мm
3,3 г) проводили за загально прийнятими методиками
з використанням 0,2% розчину колагенази ІА та
ростового середовища DMEM/F12 з додаванням 10%
At present the treatment of degenerative diseases of
the herniated intervertebral discs (ID) is a promising
approach of cell therapy with human cultured nucleus
pulposus chondrocytes (hNPCs) and adipose-derived
stem cells (hADSCs, or multipotent mesenchymal stro-
mal cells of adipose tissue) required for postoperative
ID tissue defect filling [2,4]. Despite a fact that these
cell types are easily cultured as the monolayer cultures,
the wound microenvironment is not permissive to the
production of matrix components by transferred cells
in situ. There is evidence that hADSCs possess strong
potential for the treatment of patients suffered a herniated
ID [2, 3]. It is known, these cells under three-dimensional
(3D) culture conditions and when incubated with TGFβ,
produce the extracellular matrix rich in proteoglycans
and collagen type II.
The aim of the study is to explore some functional
properties of hADSCs and the intervertebral disc hNPCs
ex vivo.
Human donor material has been obtained from State
Institute of Neurosurgery named after Acad. A.P. Romo-
danov (National Academy of Medical Sciences of
Ukraine) during sequestrectomy surgery. Studies have
been approved by the Bioethics Commission of State
Institute of Genetic and Regenerative Medicine. The
project was performed within the research planned by
NAMS (ref. number 3.20/2010.06.11).
Isolating and subculturing of hADSCs from the
epidural fat biopsy (Mm 1.3 g) and hNPCs from ID
biopsy (Mm 3.3 g) were carried-out using conventional
enzymatic method with 0.2% collagenase IA and DMEM/
F12 medium supplemented with 10% fetal calf serum
and 2 mM L-glutamine (Sigma-Aldrich, USA) [1, 3–5].
hADSCs and hNPCs co-cultivation performed in 6-well
УДК 57.085.23:576.536
Д.О. ЗУБОВ
Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих
дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової
тканини людини#
UDC 57.085.23:576.536
D.O. ZUBOV
Functional Characteristics of Human Cultured Intervertebral Disc
Chondrocytes and Adipose-Derived Stem Cells#
*Адреса для кореспонденції: вул. Вишгородська, 67; Київ,
Україна 04114; електронна пошта: zoubov77@yahoo.com
*Address for correspondence: 67, Vyshgorodska str., Kyiv, Ukraine
04414; e-mail: zoubov77@yahoo.com
1State Institute of Genetic and Regenerative Medicine, National
Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kyiv, Ukraine
1ДУ «Інститут генетичної та регенеративної медицини НАМН
України», м. Київ
#This reseach was presented at minisimposium Stem Cell Day,
held in Kharkov, Ukraine, on the 22th of May, 2012.
#Дослідження було представлене на міні-сімпозіумі «День
стовбурової клітини», що відбувся 22 травня 2012 року в
місті Харкові.
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №2
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №2
149
cell culture plates (Costar, USA) with an initial cell plating
density of 104 per cm2 by groups (n = 3): 1) hADSCs,
passage 4 (P4), 105 per well; 2) hNPCs, P4, 105 per
well; 3) hADSCs + hNPCs, 5×104 per well (total plating
density of 105 per well). Proliferative capacity of the
cell cultures was assessed indirectly by spectropho-
tometric method: cell cultures staining with 1% Toluidine
blue stain (Sigma-Aldrich) and 1% sodium tetraborate
(Makrohim, Ukraine). It is a statistical comparison of
measured optical density of the absorbed by cell mo-
nolayer and washed dye solution. So, the optical density
of the dye solution varies depending on the monolayer
density of studied cell types. Surface receptors of target
cells were determined by flow cytometry with BD
FACSAria I cell sorter and FACSDiva 6.1.1 software
(BD Biosciences, USA) using monoclonal antibodies (BD
Pharmingen, USA; Beckman Coulter, USA).
The CFU-assay (the colony-forming units) for both
cell types was performed by 102 cells plating per 100 mm
Petri dish (Costar) with subsequent incubation for 14
days in standard cell growth medium with final Plating
Efficiency definition (PE, %) [1].
The cell population doubling number (PDN, n) and
population doubling time (tD) were determined with
conventional formulas [1]: n = C×lg(Xk/X0) and tD =
C×lg(Xk/X0), where C – a constant of decimal logarithm
conversion for cultured cells; X0 – a number of plated
cells; Xk – a number of propagated cells, T – duration of
cell culture exponential growth.
Osteogenic and adipogenic differentiation tests for
hADSCs and hNPCs cultures were performed during
21 days with conventional method use, followed by
cytochemical staining with Alizarin Red S and Oil Red
O stains, respectively (Sigma-Aldrich) [5]. Chondrogenic
differentiation test for cell cultures was performed by
micromass culture method: 3×105 cells were centrifuged
to obtain a cell precipitate in 15 ml centrifuge tube (Nunc,
USA) and then incubated by conventional method for
21 days. Microtomed 20 µm chondroid sections were
stained with 1% Toluidine blue stain and 1% sodium
tetraborate [5].
Visualization and photo-documentation of cell cultu-
res were performed using the inverted microscope Axio-
vert 40C, software AxioVision Rel. 4.8 (Carl Zeiss, Ger-
many).
Quantitative characteristics of random variables are
presented as mean values and standard errors of the
average values. The significance of differences was
assessed by Student t-test.
As a result, 6,7×106 nucleated cells of stromal-vascu-
lar fraction were isolated from 1.3 g of epidural fat;
1,8×106 chondrocytes were isolated from 3.3 g of ID
nucleus pulposus. These cultures were subcultured wi-
thin 9 and 7 passages, respectively. Split ratios ranged
from 1:6 to 1:30 (Fig. 1). The effect of hADSCs, P4,and
hNPCs, P4, co-culturing was assessed. When exploring
ембріональної телячої сироватки та 2 мМ L-глютаміну
(«Sigma-Aldrich», США) [1, 3–5]. Спільне культиву-
вання аММСК та ХЦПЯ проводили в 6-ямкових
плашках («Costar», США) по групах (n = 3) з
початковою посівною концентрацією 104 клітин/см2:
1) аММСК, 4-й пасаж, 105/ямку; 2) ХЦПЯ, 4-й пасаж,
105/ямку; 3) аММСК + ХЦПЯ, по 5×104/ямку (су-
марна щільність посіву 105/ямку). Проліферативні
властивості клітинних культур оцінювали непрямим
спектрофотометричним методом (фарбування культур
1%-м розчином толуїдинового блакитного («Sigma-
Aldrich») з 1% тетраборнокислого натрію («Макро-
хім», Україна), що полягає в статистичному порівнянні
виміряної оптичної щільності розчину вимитого фарб-
ника, який зв’язався з клітинним моношаром. Оп-
тична щільність розчину відрізняється в залежності
від щільності моношару досліджуваних клітинних
типів.
Поверхневі рецептори досліджуваних клітин виз-
начали методом проточної цитофлуорометрії з вико-
ристанням клітинного сортеру «BD FACSAria I» та
програмного забезпечення «FACSDiva 6.1.1» («BD
Biosciences», США) за допомогою моноклональних
антитіл виробництва «BD Pharmingen» (США), та
«Beckman Coulter» (США) (оператор В. Кирик).
Процес колонієутворення обома клітинними типа-
ми вивчали шляхом посіву 102 клітин на чашку Петрі
(діаметр 100 мм, «Costar») та інкубації протягом 14 діб
в стандартному ростовому середовищі з визна-
ченням ефективності посіву (РE, %) [1].
Число клітинних подвоєнь в популяції (n) та час
подвоєння клітинної популяції (tD) визначали за за-
гальноприйнятими формулами [1]: n = C×lg(Xk/X0) та
tD = C×lg(Xk/X0), де С – константа переведення
логарифму в десятковий логарифм для клітин, що
культивуються; X0 – число посіяних клітин; Xk – число
нарощених клітин; Т – тривалість логарифмічної фази
росту культури клітин.
Остеогенне та адипогенне диференціювання куль-
тур аММСК і ХЦПЯ проводили за загальноприйня-
тими методиками протягом 21-ї доби з подальшим
цитохімічним фарбуванням алізариновим червоним
S та жировим червоним О відповідно («Sigma-Ald-
rich») [5]. Хондрогенне диференціювання культур
здійснювали методом мікромас-культури: 3×105 клітин
центрифугували задля отримання осаду в 15 мл
пробірках («Nunc», США) та далі інкубували в загаль-
ноприйнятому хондроіндуктивному середовищі про-
тягом 21-ї доби. Утворені хондроїди нарізали на мікро-
томі 20 мкм завтовшки та зрізи фарбували 1%-м роз-
чином толуїдинового блакитного з 1% тетраборнокис-
лого натрію [5].
Візуалізацію і фотодокументування культур клітин
проводили за допомогою інвертованого мікроскопа
«Axiovert 40C», програмного забезпечення «Axio-
Vision Rel. 4.8» («Carl Zeiss», Німеччина).
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №2
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №2
150
темпів проліферації цих клітинних типів непрямим
спектрофотометричним методом не вдалось одержати
метахроматичного забарвлення культур толуїдиновим
блакитним, що, таким чином, не відображає продук-
цію кислих мукополісахаридів (МПС) клітинами, а
лише проліферативну активність досліджуваних клі-
тинних груп за кількістю зв’язаної клітинним моно-
шаром фарби. Тобто виявлена відсутність костиму-
люючого синергетичного анаболічного ефекту in vitro
в спільній культурі аММСК та ХЦПЯ щодо продукції
МПС.
За показниками оптичної щільності найшвидше
проліферували аММСК: 0,33 ± 0,004 од. (100%); най-
повільніше – ХЦПЯ МД: 0,12 ± 0,001 од. (36%), що
втричі повільніше, ніж аММСК; та спільні культури
обох клітинних типів проліферували в середньому
темпі: 0,24 ± 0,001 од. (73%).
Досліджено колонієутворюючий потенціал аММСК
і хондроцитів на 4-му пасажі: на 102 аММСК в се-
редньому за 14 діб утворювалося 52,2 ± 3,9 колоній
(РE = 52%), n = 5; на 102 хондроцитів пульпозного
ядра в середньому за 14 діб утворювалося 38,4 ± 1,8
колоній (РE = 38%), n = 5.
Найважливішими параметрами оцінки ефектив-
ності нарощування клітин in vitro є такі параметри кі-
нетики росту, як число клітинних подвоєнь в популяції
та час подвоєння клітинної популяції за умов, що ос-
тання знаходиться в фазі логарифмічного росту в ме-
жах стандартної кривої росту клітинної популяції (таб-
лиця). Під терміном «ріст клітин» мається на увазі
збільшення числа клітин [1]. Початкова щільність посі-
ву клітин обох типів за стандартних умов культиву-
вання складала 3×103 клітин/см2.
Здійснено стандартні тести для аММСК і хондро-
цитів на остеогенне, адипогенне та хондрогенне ди-
ференціювання з подальшим фарбуванням (позитивна
the proliferation rate of these cell types, the indirect
spectrophotometric method was implemented. It failed
to get exact metachromatic Toluidine blue staining of
cultures; therefore, it does not reflect the production of
sulfated glycosaminoglycans (sGAG), but only the indi-
rect proliferative activity of the investigated cell groups
via the quantity of absorbed by cell monolayer dye. It
revealed any co-stimulation synergistic anabolic effect
for hADSCs and hNPCs co-cultures on sGAG produc-
tion in vitro.
By optical density values, hADSCs had the highest
proliferation rate, 0.33 ± 0.004 optical units, o.u.,
(100%); hNPCs had the lowest proliferation rate 0.12 ±
0.001 o.u., or 36%, about three times slower than
hADSCs, and co-cultures of both cell types had the inter-
mediate proliferation rate, 0.24 ± 0.001 o.u., or 73%.
CFU potential of hADSCs and hNPCs was assessed
(P4, n = 5): on day 14 hADSCs formed 52.2 ± 3.9 CFUs
per 102 cells (PE = 52%) and hNPCs formed 38.4 ± 1.8
CFUs per 102 cells (PE = 38%).
The most important parameters for in vitro cell ex-
pansion evaluation are growth kinetics, such as cell
Рис. 1. Конфлуентна культура адипозних ММСК людини, 9-й пасаж
(А); субконфлуентна культура ХЦПЯ міжхребцевого диску людини, 4-
й пасаж (В); ×100; фарбування кристалічним фіолетовим.
Fig. 1. hADSCs confluent culture, P9 (A); intervertebral disk hNPCs sub-
confluent culture, P4 (B); ×100; Crystal violet stain.
Кількісні характеристики випадко-
вих величин представлені як середні
значення та стандартні помилки серед-
ніх значень. Значимість розбіжностей
показників оцінювалася за t-критерієм
Стьюдента.
Проведені дослідження дозволили
одержати наступні результати. У серед-
ньому з 1,3 г жирової тканини виділяли
6,7×106 ядровмісних клітин стромаль-
но-судинної фракції, а з 3,3 г пульпоз-
ного ядра – 1,8×106 хондроцитів. Отри-
мані культури субкультивували до
дев’ятого пасажу (аММСК), і до сьо-
мого пасажу (хондроцити). Коефіцієнт
пасирування становив від 1:6 до 1:30
(рис. 1). Досліджено ефект спільного
культивування аММСК (4-й пасаж) та
ХЦПЯ (4-й пасаж). При дослідженні
Параметри кінетики росту клітинних популяцій
протягом 4-х пасажів
Cell growth kinetics within four passages
A B
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №2
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №2
арутьлуK
erutluC X0,× 01
5 X
k
,× 01 5 ,T srh/.дог n
t
D
,
ЌЌ
srh/.догЌ
КСММа
sCSDAh 2 32 5,11±411 5,3 3,23
ЯПЦХ
sCPNh 29,0 6,8 1,51±471 2,3 0,45
151
реакція) алізариновим червоним S з метою виявлення
відкладення солей кальцію, в контрольній групі за-
барвлення не спостерігали (рис. 2, A, B), жировим
червоним О – на ліпідні вакуолі, в контрольній групі
забарвлення не спостерігали (рис. 2, C, D) та толуїди-
новим синім/тетраборнокислим натрієм на кислі МПС
(в контрольній групі не спостерігали формування
хондроїду) після 21-денної індукції (рис. 2, E, F).
Як культивовані аММСК, так і ХЦПЯ МД мають
фенотип, властивий клітинам мезенхімального ряду:
CD90+CD73+CD105+CD44+CD34–CD45–.
Таким чином, можна підсумувати, що найшвидше
з досліджених проліферують культури аММСК, втричі
повільніше – культури ХЦПЯ, а спільні культури обох
клітинних типів проліферують в середньому темпі.
Відсутній костимулюючий синергетичний анаболічний
ефект in vitro в спільній культурі аММСК та ХЦПЯ
щодо продукції кислих МПС за результатами фарбу-
population doubling number (PDN, n) and population
doubling time (tD),which are calculated in Table 1. Cell
population is in the exponential growth phase within the
standard cell growth curve. The term ‘cell growth’ refers
to cell number increasing [1]. Initial plating density of
both cell types under standard culture conditions was
3×103 per cm2.
Standard tests for hADSCs and hNPCs for osteo-
genic, adipogenic and chondrogenic differentiation were
done followed by staining (positive reaction; staining
didn’t observed in control groups) with Alizarin Red S
stain for the calcium salt depositions (Fig. 2A, B); Oil
Red O stain for lipid vacuoles (Fig. 2C, D) and Toluidine
blue stain/sodium tetraborate for sGAG (no chondroid
formation in control group) after 21-days induction (Fig.
2E, F).
Both cultured hADSCsand hNPCs share the pheno-
type characteristics of mesenchymal cells: CD90+CD73+
CD105+CD44+CD34–CD45–.
Рис. 2. Остеогенне диференціювання клітин, 5×104/ямку, 21 доба, фарбування алізариновим червоним S: A – аММСК,
5-й пасаж, ×200; B – ХЦПЯ, 8-й пасаж, ×200. Адипогенне диференціювання клітин, 5×104/ямку, 21 доба, фарбування
жировим червоним О, контрастування азур-еозином: C – аММСК, 5-й пасаж, ×320; D – ХЦПЯ, 8-й пасаж, ×320.
Хондрогенне диференціювання клітин, 3×105/15 мл пробірку, мікромас-культура, 21 доба; кріозрізи товщиною 20 мкм;
фарбування толуїдиновим синім/тетраборнокислим натрієм; E – аММСК, 2-й пасаж, ×200; F – ХЦПЯ, 5-й пасаж,
фарбування толуїдиновим синім/тетраборнокислим натрієм, ×200.
Fig. 2. Osteogenic differentiation test, 5×104 cells per well, day 21, Alizarin Red S stain: A – hADSCs, P5, ×200; B – hNPCs,
P8, ×200. Adipogenic differentiation test, 5×104 per well, day 21, Oil Red O stain, Eosin Azure counterstain: C – hADSCs,
P5, ×320; D – hNPCs, P8, ×320. Chondrogenic differentiation test, 3×105 per 15 ml tube, micromass culture, day 21; 20 µm
section; Toluidine Blue stain/sodium tetraborate; E – hADSCs, P2, ×200; F – hNPCs, P5, ×200.
A B C
D E F
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №2
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №2
152
Література
1. Фрешни Р. Я. Культура животных клеток: практическое
руководство. – М.: Бином. Лаборатория знаний, 2010. –
691 с.
2. Dimar J.R., Glassman S.D., Carreon L.Y. Juvenile degenerati-
ve disc disease: a report of 76 cases identified by magnetic
resonance imaging // Spine. – 2007. – Vol. 7, №3. – P. 332–
337.
3. Gimble J., Guilak F. Adipose-derived adult stem cells: isolation,
characterization, and differentiation potential // Cytotherapy. –
2003. – Vol. 5, №5. – P. 362–369.
4. Gruber H.E., Hanley E.N. Jr. Human disc cells in monolayer
vs 3D culture: cell shape, division and matrix formation // BMC
Musculoskeletal Disorders. – 2000. – Vol. 1: 1.
5. Prockop D.J., Phinney D.G., Bunnell B.A. Mesenchymal stem
cells: methods and protocols. – Totowa, NJ: Humana Press,
2008. – 192 p.
Надійшла 01.06.2012
вання толуїдиновим синім. Ефективність посіву за
результатами КУО-аналізу складала РE = 52% для
аММСК, та РE = 38% для ХЦПЯ. Культури обох
клітинних типів диференціювалися за трьома орто-
доксальними напрямками мезенхімальних клітин:
адипогенним, остеогенним та хондрогенним.
In fine, we can conclude that hADSCs had the highest
proliferation rate, hNPCs had the lowest proliferation
rate, about three times slower than hADSCs, and co-
cultures of both cell types had the intermediate proli-
feration rate. There is any co-stimulation synergistic ana-
bolic effect in hADSCs and hNPCs co-cultures on
sGAG production in vitro according to the Toluidine
blue staining. The cell Plating Efficiency, as a result of
CFU-assay, were PE = 52% forh hADSCs, and PE =
38% for hNPCs. Both cell types’ cultures differentiated
via three orthodox lineages for mesenchymal cells:
adipogenic, osteogenic and chondrogenic.
References
1. Freshney R.I. Culture of animal cells: Methods. – Moscow:
BINOM, 2010. – 691 p.
2. Dimar J.R., Glassman S.D., Carreon L.Y. Juvenile degenerati-
ve disc disease: a report of 76 cases identified by magnetic
resonance imaging // Spine. – 2007. – Vol. 7, №3. – P. 332–
337.
3. Gimble J., Guilak F. Adipose-derived adult stem cells: isolation,
cha-racterization, and differentiation potential // Cytotherapy. –
2003. – Vol. 5, N5. – P. 362–369.
4. Gruber H.E., Hanley E.N. Jr. Human disc cells in monolayer
vs 3D culture: cell shape, division and matrix formation // BMC
Musculoskeletal Disorders. – 2000. – Vol. 1: 1.
5. Prockop D.J., Phinney D.G., Bunnell B.A. Mesenchymal stem
cells: methods and protocols. – Totowa, NJ: Humana Press,
2008. – 192 p.
Accepted 01.06.2012
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №2
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №2
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68492 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-02T11:20:25Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Зубов, Д.О. 2014-09-25T07:21:48Z 2014-09-25T07:21:48Z 2012 Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини / Д.О. Зубов // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 2. — С. 148-152. — Бібліогр.: 5 назв. — укр., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68492 57.085.23:576.536 Мета дослідження - вивчення деяких функціональних властивостей клітинних культур мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини та хондроцитів пульпозного ядра міжхребцевого диску ex vivo. Дослідження було представлене на міні-сімпозіумі «День стовбурової клітини», що відбувся 22 травня 2012 року в місті Харкові. uk Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Краткие сообщения Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини Functional Characteristics of Human Cultured Intervertebral Disc Chondrocytes and Adipose-Derived Stem Cells Article published earlier |
| spellingShingle | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини Зубов, Д.О. Краткие сообщения |
| title | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини |
| title_alt | Functional Characteristics of Human Cultured Intervertebral Disc Chondrocytes and Adipose-Derived Stem Cells |
| title_full | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини |
| title_fullStr | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини |
| title_full_unstemmed | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини |
| title_short | Функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини |
| title_sort | функціональні характеристики культивованих хондроцитів міжхребцевих дисків та мультипотентних мезенхімальних стромальних клітин з жирової тканини людини |
| topic | Краткие сообщения |
| topic_facet | Краткие сообщения |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68492 |
| work_keys_str_mv | AT zubovdo funkcíonalʹníharakteristikikulʹtivovanihhondrocitívmížhrebcevihdiskívtamulʹtipotentnihmezenhímalʹnihstromalʹnihklítinzžirovoítkaninilûdini AT zubovdo functionalcharacteristicsofhumanculturedintervertebraldiscchondrocytesandadiposederivedstemcells |