Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Date: | 2012 |
| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68559 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro / А.Н. Сукач, О.В. Оченашко, А.С. Лебединский, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 269. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859621780735393792 |
|---|---|
| author | Сукач, А.Н. Оченашко, О.В. Лебединский, А.С. Петренко, А.Ю. |
| author_facet | Сукач, А.Н. Оченашко, О.В. Лебединский, А.С. Петренко, А.Ю. |
| citation_txt | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro / А.Н. Сукач, О.В. Оченашко, А.С. Лебединский, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 269. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии |
| first_indexed | 2025-11-29T06:31:35Z |
| format | Article |
| fulltext |
269
Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток
плодов крыс в условиях культивирования in vitro
А.Н. СУКАЧ, О.В. ОЧЕНАШКО, А.С. ЛЕБЕДИНСКИЙ, А.Ю. ПЕТРЕНКО
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Cryopreservation Effect on Behaviour of Neuronal Cells
of Rat Fetuses During In Vitro Culturing
A.N. SUKACH, O.V. OCHENASHKO, A.S. LEBEDINSKY, A.YU. PETRENKO
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Исследование влияния низких температур на жизне-
способность изолированных нервных клеток (НК) имеет
как фундаментальное, так и прикладное значение.
Цель работы – изучение влияния криоконсервиро-
вания на поведение изолированных НК плодов крыс
в культуре in vitro.
Нервные клетки получали из тканей мозга плодов
крыс 15–16 суток гестации. Замораживание проводили
в концентрациях 20–50 млн клеток/мл под защитой 10%
ДМСО в присутствии 10% сыворотки крыс со скоростью
1 град/мин до –80°С, после чего контейнеры помещали в
жидкий азот. Размороженные клетки отмывали от ДМСО
центрифугированием.
В процессе культивирования деконсервированных НК
важным показателем явилось формирование многокле-
точных агрегатов, которое зависело как от концентрации
посеянных клеток, так и от их жизнеспособности, опре-
деленной по трипановому синему. Так, при культиви-
ровании деконсервированных НК с жизнеспособностью
менее 30% в концентрациях ниже 1 млн/мл формиро-
вания агрегатов не происходило, клетки с нейрональной
морфологией отсутствовали, монослой не формиро-
вался, хотя единичные клетки прикреплялись и расплас-
тывались. Увеличение посевной концентрации этих
клеток до 2–4 млн/мл характеризовалось образованием
мелких агрегатов, клетки которых после прикрепления
мигрировали и распластывались. Большинство клеток
характеризовалось глиальной морфологией, однако при-
сутствовали и клетки с морфологией нейронов.
При культивировании деконсервированных НК с жиз-
неспособностью 40–60% в концентрации 1 млн/мл фор-
мировалось значительное количество средних и мелких
агрегатов, которые прикреплялись к подложке, после чего
их клетки мигрировали и распластывались. При этом
значительное количество мигрировавших клеток характе-
ризовалось морфологией нейронов.
При культивировании деконсервированных НК с жиз-
неспособностью выше 70% агрегаты формировались
при посевной концентрации 0,5 млн/мл. При этом в агре-
гаты объединялись около 70% клеток. После прикреп-
ления от агрегатов мигрировало большое количество
клеток с нейрональной морфологией. Также происхо-
дило быстрое образование монослоя клеток глии.
Полученные результаты свидетельствуют о сохране-
нии жизнеспособности дифференцированных НК пло-
дов крыс после их криоконсервирования. При этом клет-
ки глии являются более криоустойчивыми по сравнению
с нейронами. Для восстановления повреждений и эф-
фективного функционирования нейронов необходимо
восстановление клеточного микроокружения, подоб-
ного интактной ткани, что достигается при образовании
многоклеточных агрегатов.
Investigation of low temperature effect on viability of
isolated neuronal cells (NCs) has both fundamental and
practical value.
The research aim was to study the cryopreservation
effect on behaviour of isolated NCs of rat fetuses in culture
in vitro.
Neuronal cells were obtained from the brain tissues of
rat fetuses of 15–16 gestation days. Freezing was performed
in a concentration of 20–50 mln cells/ml under protection of
10% DMSO in the presence of 10% rat blood serum with
the rate of 1 deg/min down to –80°C, then the containers
were placed into liquid nitrogen. Thawed cells were washed
out by centrifugation with DMSO.
During culturing frozen-thawed NCs an important index
was the formation of multicellular aggregates, which
depended both on concentration of plated cells and their
viability determined by trypan blue. So during culturing of
frozen-thawed NCs with viability less than 30% in concen-
trations less than 1 mln/ml the formation of aggregates did
not occur, the cells with neuronal morphology were absent,
monolayer was not formed, although single cells were
attached and flattened. The increase of plating concentra-
tion of these cells up to 2–4 mln/ml was characterized by
the formation of small aggregates, the cells of which migra-
ted and flattened after attachment. Most cells were charac-
terized with glial morphology, but the cells with the morpho-
logy of neurons were present.
During culturing of frozen-thawed NCs with viability of
40–60% in 1 mln/ml concentration a significant number of
medium and small aggregates attached to the substrate was
formed, afterwards their cells migrated and flattened. Most
cells were characterized with the morphology of neurons.
When culturing frozen-thawed NCs with more than 70%
viability the aggregates were formed at plating concen-
tration of 0.5 mln/ml. Moreover about 70% of cells were joi-
ned into aggregates. After attaching the aggregates a great
number of cells with neuronal morphology migrated. Also a
rapid formation of glial cells monolayer occurred.
The results attest the preservation of viability of diffe-
rentiated rat fetal NCs after their cryopreservation. Further-
more glial cells are more cryoresistant than neurons. To
restore the damages and the effective functioning of neu-
rons the recovery of the similar to intact tissue cell micro-
environment is necessary, that is achieved by the formation
of multi-cellular aggregates.
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №3
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №3
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68559 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-29T06:31:35Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Сукач, А.Н. Оченашко, О.В. Лебединский, А.С. Петренко, А.Ю. 2014-09-26T15:49:13Z 2014-09-26T15:49:13Z 2012 Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro / А.Н. Сукач, О.В. Оченашко, А.С. Лебединский, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 269. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68559 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Низкотемпературное и гипотермическое хранение клеток, тканей и органов Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro Cryopreservation Effect on Behaviour of Neuronal Cells in Rat Fetuses During Culturing in vitro Article published earlier |
| spellingShingle | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro Сукач, А.Н. Оченашко, О.В. Лебединский, А.С. Петренко, А.Ю. Низкотемпературное и гипотермическое хранение клеток, тканей и органов |
| title | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro |
| title_alt | Cryopreservation Effect on Behaviour of Neuronal Cells in Rat Fetuses During Culturing in vitro |
| title_full | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro |
| title_fullStr | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro |
| title_full_unstemmed | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro |
| title_short | Влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro |
| title_sort | влияние криоконсервирования на поведение нервных клеток плодов крыс в условиях культивирования in vitro |
| topic | Низкотемпературное и гипотермическое хранение клеток, тканей и органов |
| topic_facet | Низкотемпературное и гипотермическое хранение клеток, тканей и органов |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68559 |
| work_keys_str_mv | AT sukačan vliâniekriokonservirovaniânapovedenienervnyhkletokplodovkrysvusloviâhkulʹtivirovaniâinvitro AT očenaškoov vliâniekriokonservirovaniânapovedenienervnyhkletokplodovkrysvusloviâhkulʹtivirovaniâinvitro AT lebedinskiias vliâniekriokonservirovaniânapovedenienervnyhkletokplodovkrysvusloviâhkulʹtivirovaniâinvitro AT petrenkoaû vliâniekriokonservirovaniânapovedenienervnyhkletokplodovkrysvusloviâhkulʹtivirovaniâinvitro AT sukačan cryopreservationeffectonbehaviourofneuronalcellsinratfetusesduringculturinginvitro AT očenaškoov cryopreservationeffectonbehaviourofneuronalcellsinratfetusesduringculturinginvitro AT lebedinskiias cryopreservationeffectonbehaviourofneuronalcellsinratfetusesduringculturinginvitro AT petrenkoaû cryopreservationeffectonbehaviourofneuronalcellsinratfetusesduringculturinginvitro |