Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Datum: | 2012 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2012
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68621 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс / А.В. Пахомов, Т.М. Гурина, Г.А. Божок, А.Л. Кирилюк // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 331. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859714689984888832 |
|---|---|
| author | Пахомов, А.В. Гурина, Т.М. Божок, Г.А. Кирилюк, А.Л. |
| author_facet | Пахомов, А.В. Гурина, Т.М. Божок, Г.А. Кирилюк, А.Л. |
| citation_txt | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс / А.В. Пахомов, Т.М. Гурина, Г.А. Божок, А.Л. Кирилюк // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 331. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии |
| first_indexed | 2025-12-01T07:58:43Z |
| format | Article |
| fulltext |
Cooling and heating rates are essential factors in cryo-
preservation, affecting the cell suspension viability and
preservation of functional capability in steroidogenic cells.
Cryobiological researches are aimed to find the optimal
combination of cooling and heating rates for designing the
freeze-thawing regimens, enabling the maximum preservation
of hormone-producing component of testes, Leydig cells.
The aim of this research was to investigate the appli-
cation efficiency of cryopreservation protocols with the
controlled cooling-heating rates within temperature inter-
vals, associated with phase transitions for interstitial cells
of adult rats.
Using the thermoplastic deformation method we deter-
mined the temperature intervals of phase transitions for
cryoprotective solution (10% DMSO in medium 199 with
20 mM Hepes), used for cryopreservation of testicular inter-
stitial cells of adult rats, such as: the crystallization (melting)
of the bulk ice mass, crystallization (melting) of mixture of
eutectic concentration of cryoprotective solution, the crys-
tallization (melting) of solvent eutectics, based on culture
medium, as well as the recrystallization before following
processes of melting at heating stage. The samples’ freeze-
thawing was carried-out with the programmable freezer
Cryoson, by combining high (20 deg/min) and low (1 deg/min)
cooling-heating rates within the mentioned temperature
intervals. As the control we used the samples’ freeze-thawing
in 40°C water bath. When analyzing the results obtained
we calculated the preservation of cell number after cryopre-
servation, as well as the number of cells with intact cell
membrane, depending on variation of cooling-heating rates
within temperature intervals of phase transitions.
For the first time there was designed the universal freeze-
thawing protocol, providing the certain combination of high
and low controlled cooling-heating rates within the men-
tioned temperature intervals. This protocol enabled the
obtaining of high indices of viability and functional activity
for both cells of total suspension (56.7%) and the survival
of certain population, i. e. Leydig cells (78.7%).
The obtained results are of good reproducibility due to
excluding a subjective factor during cell suspension freeze-
thawing in a water bath. The proposed technique is universal
and may be used independently on bioobject type and
cryoprotective medium composition for cryopreservation
the variety of cells.
Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми
скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс
А.В. ПАХОМОВ, Т.М. ГУРИНА, Г.А. БОЖОК, А.Л. КИРИЛЮК
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Use of Cryopreservation Protocols with Controlled
Cooling-Heating Rates for Adult Rat Interstitial Cells
A.V. PAKHOMOV, T.M. GURINA, G.A. BOZHOK, A.L. KIRILYUK
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
331
Скорости охлаждения и нагрева являются одним из
решающих факторов криоконсервирования, оказываю-
щих влияние на жизнеспособность клеточной суспензии
и сохранность функциональной способности стероидо-
генных клеток. Криобиологические исследования на-
правлены на поиск оптимального сочетания скоростей
охлаждения-нагрева для разработки режимов заморажи-
вания-оттаивания, позволяющих максимально сохранить
гормонопродуцирующую составляющую тестисов –
клеток Лейдига.
Цель данной работы – исследовать эффективность
применения протоколов криоконсервирования с конт-
ролируемыми скоростями охлаждения-нагрева в тем-
пературных интервалах, связанных с фазовыми превра-
щениями, для клеток интерстиция взрослых крыс.
Методом термопластической деформации опреде-
лены температурные интервалы фазовых преобразо-
ваний для криозащитного раствора (10%-й раствор
ДМСО на среде 199 с 20 мМ Hepes), используемого при
криоконсервировании клеток интерстиция тестисов
взрослых крыс, а именно: кристаллизация (плавления)
основной массы льда, кристаллизация (плавления) смеси
эвтектической концентрации раствора криопротектора,
кристаллизация (плавления) эвтектики растворителя на
основе культуральной среды, а также рекристаллизация
перед соответствующими процессами плавления на
этапе нагрева. Замораживание и оттаивание образцов
осуществляли в программном замораживателе «Cryo-
son», комбинируя высокие (20 град/мин) и низкие
(1 град мин) скорости охлаждения-нагрева в указанных
температурных интервалах. В качестве контроля исполь-
зовали оттаивание образцов на водяной бане 40°С. При
анализе результатов подсчитывали сохранность количест-
ва клеток после криоконсервирования, а также коли-
чество клеток с неповрежденной клеточной мембраной
в зависимости от вариаций скоростей охлаждения-на-
грева в температурных интервалах фазовых преобразова-
ний.
Впервые разработан единый протокол заморажи-
вания-оттаивания, предусматривающий определенное
сочетание высоких и низких контролируемых скоростей
охлаждения-нагрева в указанных температурных интер-
валах. Этот протокол позволил получить высокие показа-
тели сохранности и функциональной активности как
клеток общей суспензии (56,7%), так и сохранности от-
дельной популяции – клеток Лейдига (78,7%).
Вследствие исключения субъективного фактора при
оттаивании клеточной суспензии на водяной бане, полу-
ченные результаты имеют хорошую повторяемость.
Предложенная методика имеет универсальный характер
и может быть использована вне зависимости от вида био-
объекта и состава криозащитной среды для криоконсер-
вирования различных видов клеток.
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №3
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №3
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68621 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-01T07:58:43Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Пахомов, А.В. Гурина, Т.М. Божок, Г.А. Кирилюк, А.Л. 2014-09-26T17:49:35Z 2014-09-26T17:49:35Z 2012 Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс / А.В. Пахомов, Т.М. Гурина, Г.А. Божок, А.Л. Кирилюк // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 331. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68621 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Стендовые доклады Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс Use of Cryopreservation Protocols with Controlled Cooling-Heating Rates for Adult Rat Interstitial Cells Article published earlier |
| spellingShingle | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс Пахомов, А.В. Гурина, Т.М. Божок, Г.А. Кирилюк, А.Л. Стендовые доклады |
| title | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс |
| title_alt | Use of Cryopreservation Protocols with Controlled Cooling-Heating Rates for Adult Rat Interstitial Cells |
| title_full | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс |
| title_fullStr | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс |
| title_full_unstemmed | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс |
| title_short | Использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс |
| title_sort | использование протоколов криоконсервирования с контролируемыми скоростями охлаждения-нагрева для клеток интерстиция взрослых крыс |
| topic | Стендовые доклады |
| topic_facet | Стендовые доклады |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68621 |
| work_keys_str_mv | AT pahomovav ispolʹzovanieprotokolovkriokonservirovaniâskontroliruemymiskorostâmiohlaždeniânagrevadlâkletokintersticiâvzroslyhkrys AT gurinatm ispolʹzovanieprotokolovkriokonservirovaniâskontroliruemymiskorostâmiohlaždeniânagrevadlâkletokintersticiâvzroslyhkrys AT božokga ispolʹzovanieprotokolovkriokonservirovaniâskontroliruemymiskorostâmiohlaždeniânagrevadlâkletokintersticiâvzroslyhkrys AT kirilûkal ispolʹzovanieprotokolovkriokonservirovaniâskontroliruemymiskorostâmiohlaždeniânagrevadlâkletokintersticiâvzroslyhkrys AT pahomovav useofcryopreservationprotocolswithcontrolledcoolingheatingratesforadultratinterstitialcells AT gurinatm useofcryopreservationprotocolswithcontrolledcoolingheatingratesforadultratinterstitialcells AT božokga useofcryopreservationprotocolswithcontrolledcoolingheatingratesforadultratinterstitialcells AT kirilûkal useofcryopreservationprotocolswithcontrolledcoolingheatingratesforadultratinterstitialcells |