Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Дата: | 2012 |
| Автори: | , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Українська |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2012
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68632 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини / Н.Н. Чуб, М.П. Петрушко, І.В. Добрунова, В.В. Кірошка, О.Б. Ревенко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 342. — укр., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860259559815249920 |
|---|---|
| author | Чуб, Н.Н. Петрушко, М.П. Добрунова, І.В. Кірошка, В.В. Ревенко, О.Б. |
| author_facet | Чуб, Н.Н. Петрушко, М.П. Добрунова, І.В. Кірошка, В.В. Ревенко, О.Б. |
| citation_txt | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини / Н.Н. Чуб, М.П. Петрушко, І.В. Добрунова, В.В. Кірошка, О.Б. Ревенко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 342. — укр., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии |
| first_indexed | 2025-12-07T18:53:32Z |
| format | Article |
| fulltext |
Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні
властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини
Н.Н. ЧУБ, М.П. ПЕТРУШКО, І.В. ДОБРУНОВА, В.В. КІРОШКА, O.Б. РЕВЕНКО
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків
Study of Cryopreservation Influence on Morphological Properties of
Human Ovarian Granulosa and Cumulus Cells
N.N. CHUB, M.P. PETRUSHKO, I.V. DOBRUNOVA, V.V. KIROSHKA, O.B. REVENKO
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Останнім часом при комплексному лікуванні деяких
форм безпліддя, особливо для збереження фертильності
пацієнток, які проходять аблаційну хіміо- та радіотерапію,
використовують кріоконсервовані репродуктивні тка-
нини, клітини, гамети або ембріони.
Мета роботи – оцінка морфофункціональних власти-
востей клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини
до та після кріоконсервування.
У роботі використовували кріоконсервовані за повіль-
ною програмою охолодження під захистом 5% ДМСО +
5% ПЕО-400, фрагменти клітин гранульози та кумулюсу
(КГК) яєчника людини, які вилучали з преовуляторних
фолікулів під час проведення програми запліднення in
vitro. Клітини за різними методами культивували
в середовищі «Upgraded B2» (Франція) або ДМЕМ («Ser-
va») до та після кріоконсервування. Стероїдогенну актив-
ність та життєздатність КГК оцінювали за допомогою
флуоресцентних барвників: нільського червоного та про-
підіуму йодиту.
Гістологічні дослідження не виявили суттєвих відмін-
ностей у структурі КГК до та після кріоконсервування,
однак у деяких препаратах спостерігали зміну тінкто-
ріальних властивостей в бік еозинофілії після дії низьких
температур. При культивуванні нативних препаратів
адгезію й міграцію КГК відмічали на 2-у добу культи-
вування, після кріоконсервування – на 3–4-у добу.
Імовірно, даний факт пов’язаний з репарацією нелеталь-
них ушкоджень, що виникають у клітинах в результаті
кріоконсервування. На 7-у добу відзначали множинну
міграцію клітинних елементів в моношарі. Клітини мали
округлу форму з дрібнозернистою цитоплазмою. На 10-у
добу спостерігали багатошарові фрагменти КГК із тонко-
гранульованою цитоплазмою. Флуоресцентний барвник
нільський червоний виявив збереження стероїдогенної
активності КГК у культурі на 10-у добу після дії кріозахис-
ного середовища та кріоконсервування, що було підтвер-
джено при ксенотрансплантації КГК оваріоектомованим
самкам щурів. Життєздатність клітин після кріоконсерву-
вання була знижена на 29%. До 14-ї доби більшість клітин
і фрагментів відкріплювалися від дна чашки, що свідчило
про настання фази старіння культури.
Таким чином, низькотемпературне зберігання під
захистом двухкомпонентного кріозахисного середовища
незначно впливає на стероїдогенну активність, морфо-
логічну цілісність КГК, міграцію і проліферацію клітин у
культурі.
342
Recently in a complex treatment of some types of
infertility, especially for preserving the fertility in the patients
undergoing ablational chemotherapy and radiotherapy, the
cryopreserved reproductive tissues, cells, gametes or emb-
ryos have been used.
The research aim was to assess morphological and func-
tional properties of human ovarian granulosa and cumulus
cells before and after cryopreservation.
In the work there were used cryopreserved under protec-
tion of 5% DMSO + 5% polyethyleneoxide-400 fragments
of human ovarian granulosa and cumulus cells (GCC),
isolated from pre-ovulatory follicles during in vitro ferti-
lization procedure. The cells were cultured using different
methods in Upgraded B2 (France) or DMEM (Serva) media
before and after cryopreservation by slow cooling program.
Steroidogenic activity and viability of GCC was assessed
using fluorescent dyes: Nile Red and propidium iodide.
Histological studies have found no significant diffe-
rences in the structure of GCC before and after cryopre-
servation, however, in some samples there was observed a
change in tinctorial properties towards eosinophilia after
low temperature exposure. When cultured native prepara-
tions the adhesion and migration of GCC were noted to the
second day of culturing after cryopreservation it was found
to the 3–4th day. This fact is presumably associated with
reparation of non-lethal damages appearing in the cells as a
result of cryopreservation. To the seventh day there was
found a multiple migration of cell elements in monolayer.
The cells were of a round shape with fine-grained cyto-
plasm. To the 10th day there were observed the multilayer
areas of GCC with fine-grained cytoplasm. Fluorescent dye
Nile red revealed the preserved steroidogenic GCC activity
in the culture to the 10th day after exposure to cryoprotective
media and cryopreservation, which was confirmed by xeno-
transplantation of GCC to ovarioectomized female rats. Post-
thaw cell viability was reduced by 29%. By the 14th day the
majority of cells and fragments detached from the dish
bottom, indicating the onset of culture aging phase.
Thus, low-temperature storage under the protection of
two-component cryoprotective medium does not significant-
ly affect steroidogenic activity, morphological integrity of
GCC, migration and proliferation of cells in culture.
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №3
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №3
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68632 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-07T18:53:32Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Чуб, Н.Н. Петрушко, М.П. Добрунова, І.В. Кірошка, В.В. Ревенко, О.Б. 2014-09-26T18:04:59Z 2014-09-26T18:04:59Z 2012 Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини / Н.Н. Чуб, М.П. Петрушко, І.В. Добрунова, В.В. Кірошка, О.Б. Ревенко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 342. — укр., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68632 uk Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Стендовые доклады Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини Study of Cryopreservation Influence on Morphological Properties of Human Ovarian Granulosa and Cumulus Cells Article published earlier |
| spellingShingle | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини Чуб, Н.Н. Петрушко, М.П. Добрунова, І.В. Кірошка, В.В. Ревенко, О.Б. Стендовые доклады |
| title | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини |
| title_alt | Study of Cryopreservation Influence on Morphological Properties of Human Ovarian Granulosa and Cumulus Cells |
| title_full | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини |
| title_fullStr | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини |
| title_full_unstemmed | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини |
| title_short | Дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини |
| title_sort | дослідження впливу кріоконсервування на морфофункціональні властивості клітин гранульози та кумулюсу яєчника людини |
| topic | Стендовые доклады |
| topic_facet | Стендовые доклады |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68632 |
| work_keys_str_mv | AT čubnn doslídžennâvplivukríokonservuvannânamorfofunkcíonalʹnívlastivostíklítingranulʹozitakumulûsuâêčnikalûdini AT petruškomp doslídžennâvplivukríokonservuvannânamorfofunkcíonalʹnívlastivostíklítingranulʹozitakumulûsuâêčnikalûdini AT dobrunovaív doslídžennâvplivukríokonservuvannânamorfofunkcíonalʹnívlastivostíklítingranulʹozitakumulûsuâêčnikalûdini AT kíroškavv doslídžennâvplivukríokonservuvannânamorfofunkcíonalʹnívlastivostíklítingranulʹozitakumulûsuâêčnikalûdini AT revenkoob doslídžennâvplivukríokonservuvannânamorfofunkcíonalʹnívlastivostíklítingranulʹozitakumulûsuâêčnikalûdini AT čubnn studyofcryopreservationinfluenceonmorphologicalpropertiesofhumanovariangranulosaandcumuluscells AT petruškomp studyofcryopreservationinfluenceonmorphologicalpropertiesofhumanovariangranulosaandcumuluscells AT dobrunovaív studyofcryopreservationinfluenceonmorphologicalpropertiesofhumanovariangranulosaandcumuluscells AT kíroškavv studyofcryopreservationinfluenceonmorphologicalpropertiesofhumanovariangranulosaandcumuluscells AT revenkoob studyofcryopreservationinfluenceonmorphologicalpropertiesofhumanovariangranulosaandcumuluscells |